CN107050148B - 一种解酒保肝中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种解酒保肝作用的中药组合物及其制备方法。该组合物按重量份计主要由葛根10‑15份、枳椇子10‑15份、山楂4‑8份、菊花4‑8份和木糖醇19‑30份制成。制备方法包括以下步骤:取原料葛根、枳椇子、山楂和菊花,按料液比1g:5~10ml,加入水或50%~95%乙醇回流提取,提取液制成浸膏粉,粉碎后加入木糖醇,制成食品或适合于口服的药物制剂。本组合物的各组份协同作用发挥显著的解酒保肝作用,提高小鼠肝组织中乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)的活性,降低血清中乙醇和乙醛的浓度,减轻酒精所致的肝损伤。所用原料既是食品又是中药材或食品添加剂,安全易得,价格低廉。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有解酒保肝作用的中药组合物及其制备方法。
背景技术
中国是酒生产消费大国,每年消费酒类饮料达2000余万吨,嗜酒或酒精依赖人群2亿左右,急慢性酒精中毒率日益增高。
酒精中毒主要是由酒中的主要成分乙醇及其代谢絮乱引起的。肝脏是乙醇代谢的主要场所。乙醇进入肝脏后,首先由乙醇脱氢酶(ADH)代谢生成乙醛,继而由乙醛脱氢酶(ALDH)代谢成为乙酸,最后分解为二氧化碳和水。在乙醛的代谢过程中,ALDH起着很重要的作用,但在人体中具有氧化作用的只有ALDH1和ALDH2两种同工酶,其中ALDH2是ALDH中生理活性最强的一种同工酶。据资料显示,50%中国人缺乏ALDH2,饮酒后极易造成乙醛浓度增高及蓄积,使肝细胞膜抗原发生改变、肝细胞代谢紊乱,产生自由基和脂质过氧化物等。体内不能产生正常的乙醛脱氢酶是引起中国人急性酒精中毒和酒精性肝病的主要原因之一。
目前,市场上的解酒药按功效主要可以分为三类。第一类是酒精吸收抑制剂,以乙醇脱氢酶为主要成分,将酒精在胃肠道内代谢掉。这类解酒药的特点是在酒前服用以减少进入血液内的酒精量,酒后服用则不能清除乙醇及其代谢产物乙醛。第二类为保肝类药物,主要是针对肝脏***有保护作用,而对其他***,如心血管***,没有明显的保护作用。第三类是***型,该药进入机体产生类皮质激素应激效应,中和酒精对中枢神经的抑制作用,达到醒酒的目的,但这类解酒药仅治标不治本,长期使用还会对人体中枢神经造成伤害。此外,这三种解酒药都没有治疗酒精过敏的功效。因此,研制一种符合中国人体质特点的、作用全面的、副作用少的快速解酒护肝药具有重要的社会意义和经济价值。
发明内容
为克服以上缺陷,本发明提供了一种具有提高乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性以解酒保肝的组合物及其制备方法。
本组合物按重量份计主要由葛根10-15份、枳椇子10-15份、山楂4-8份、菊花4-8份和木糖醇19-30份制成。
优选配比为,葛根10份、枳椇子10份、山楂6份、菊花5份、木糖醇19份。
所述组合物的制备方法,包括以下步骤:取原料葛根、枳椇子、山楂和菊花,按料液比1g:5~10ml,加入水或50%~95%乙醇回流提取,提取液制成浸膏粉,粉碎后加入木糖醇,制成食品或适合于口服的药物制剂。
食品可制成果冻、茶剂或饮料;药物制剂可制成冲剂、胶囊、颗粒、咀嚼片、片剂或口服液体制剂。
所述组合物也可用于制备提高乙醛脱氢酶活性、抑制酒精引起谷丙转氨酶或谷丙转氨酶异常升高的药物或食品中的应用。
本发明的中药组合物,通过各组份协同发挥显著的解酒保肝作用,提高小鼠肝组织中乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)的活性,降低血清中乙醇和乙醛的浓度,减轻酒精所致的肝损伤。所用原料既是食品又是中药材或食品添加剂,安全易得且价格低廉。可用于制备提高乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性以解酒保肝的药物或保健食品,用于急性酒精性肝损害的预防和治疗。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明。
各实施例中所涉及的固体混合物中之固体,液体中之液体,以及液体中之固体的百分比分别是以wt/wt、vol/vol、wt/vol计算,除非另有说明。
实施例1:本发明组合物解酒保肝作用研究
1、材料
1.1实验动物
SPF级雄性昆明小鼠,体质量18~20g,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(粤)2013-0002。
1.2药物与试剂
本发明组合物的制备,取葛根100g、枳椇子100g、山楂60g、菊花50g、木糖醇190g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,每次1小时,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉,干燥粉碎后再加入木糖醇,混匀。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为650mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人5g生药量/天,生药量是指葛根、枳椇子、山楂、菊花、木糖醇的总量。
葛根提取物:取葛根100g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为130mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人1g生药量/天。
枳椇子提取物:取枳椇子100g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为130mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人1g生药量/天。
山楂提取物:取山楂60g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为78mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人0.60g生药量/天。
菊花提取物:取菊花50g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为65mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人0.5g生药量/天。
木糖醇:实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为247mg/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人1.9g/天。
对比组合物1:取葛根100g、枳椇子100g、山楂60g、菊花50g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,每次1小时,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为403mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人3.1g生药量/天,生药量是指葛根、枳椇子、山楂、菊花的总量。
对比组合物2:取葛根100g、枳椇子100g、山楂60g、菊花50g、L-丙氨酸30g、L-谷氨酰胺40g,加入8倍体积50%乙醇回流提取两次,每次1小时,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉,粉碎后再加入L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,混匀。实验时用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量650mg生药量/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人5g生药量/天,生药量是指葛根、枳椇子、山楂、菊花、L-丙氨酸和L-谷氨酰胺的总量。
阳性对照(Pepp清醒咀嚼片):购自山德士公司。取Pepp清醒咀嚼片,碾碎,用生理盐水配制成相应浓度的溶液供小鼠灌胃使用。小鼠给药剂量为8320mg/kg,按体表面积换算,相当于70kg的成年人64g/天(相当于临床等效剂量的8倍)。
56度红星二锅头(北京红星股份有限公司);无水乙醇(天津市大茂化学试剂厂);40%乙醛(成都科龙化工试剂厂);丁酮(天津市百世化工有限公司);乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)试剂盒(南京建成生物工程有限公司);谷丙转氨酶(ALT)试剂盒和谷草转氨酶(AST)试剂盒(南京建成生物工程有限公司);生理盐水(昆明市宇斯药业有限公司)
1.3主要仪器
气相色谱仪:Varian CP-3800;工作站:CTC Analytic;色谱柱:CP-Wax52CB、Cpsil5CB-2毛细管柱;检测器:FID检测器;北京UV-1普析通用紫外分光光度计。
2、方法
取SPF级健康昆明种小鼠随机分为11组:正常对照组、模型对照组,本发明组合物组、葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组、对比组合物1组、对比组合物2组、阳性对照组,每组12只。各组动物灌胃给药,空白对照组、模型对照组给等体积蒸馏水,1次/d。每次给药后1h,除空白对照组外的其余各组小鼠按0.12ml/10g灌胃给予56度红星二锅头造成急性酒精性肝损伤模,连续给药和造模6d。最后一次造模后1.5h,各组摘眼球取血0.5~1ml,3000rpm离心10min分离血清,采用气相色谱仪测定血清中乙醇和乙醛的浓度,按照试剂盒操作方法测定血清AST和ALT活性。摘眼球取血后,立即颈椎脱臼处死小鼠,取新鲜肝脏0.5g加入预冷的生理盐水溶液制成10%肝组织匀浆,3000rpm离心10min,取上清测定ADH和ALDH活性。
3、结果
3.1本发明组合物对小鼠血清中乙醇和乙醛浓度的影响
由表1可见,与正常对照组比较,模型组的小鼠血清中乙醇和乙醛浓度显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),说明本造模方法能成功引起小鼠血清中乙醇和乙醛浓度显著升高。
与模型对照组比较,本发明组合物组的小鼠血清中乙醇和乙醛浓度显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01),说明本发明组合物能显著抑制乙醇的吸收或促进乙醇的代谢、减少乙醛的蓄积。与模型对照组比较,对比组合物1组、对比组合物2组、阳性对照组的小鼠血清中乙醇和乙醛浓度显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组的小鼠血清中乙醇和乙醛浓度与模型对照组差异不显著,不具有统计学意义(P>0.05),说明对比组合物1、对比组合物2、阳性对照能显著抑制乙醇的吸收或促进乙醇的代谢、减少乙醛的蓄积,而葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇未能显著抑制乙醇的吸收或促进乙醇的代谢,不能减少乙醛的蓄积。
与本发明组合物组比较,葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组、对比组合物1组、对比组合物2组的小鼠血清中乙醇和乙醛浓度显著较高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);阳性对照组的小鼠血清中乙醇和乙醛浓度与本发明组合物组差异不显著(P>0.05),说明本发明组合物在抑制乙醇吸收或促进乙醇代谢、减少乙醛的蓄积方面,要优于葛根提取物、枳椇子提取物、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、对比组合物1、对比组合物2,与阳性对照相当。
3.2本发明组合物对小鼠血清AST和ALT活性的影响
由表2可见,与正常对照组比较,模型组的小鼠血清AST和ALT活性显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),说明本造模方法能成功造成小鼠肝功能损害。
与模型对照组比较,本发明组合物组的小鼠血清AST和ALT活性显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01),说明本发明组合物能显著抑制酒精引起的肝功能损害。与模型对照组比较,对比组合物1组、对比组合物2组、阳性对照组的小鼠血清中AST和ALT活性显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组的小鼠血清中AST和ALT活性与模型对照组差异不显著,不具有统计学意义(P>0.05),说明对比组合物1、对比组合物2、阳性对照能显著抑制酒精引起的肝功能损害,而葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇不能显著抑制酒精引起的肝功能损害。
与本发明组合物组比较,葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组、对比组合物1组、对比组合物2组、阳性对照组的小鼠血清AST和ALT活性明显较高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),说明本发明组合物在抑制酒精引起的肝功能损害方面,要优于葛根提取物、枳椇子提取物、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、对比组合物1、对比组合物2和阳性对照。
3.3本发明组合物对小鼠肝脏中ADH和ALDH活性的影响
由表3可见,与正常对照组比较,模型组的小鼠肝脏中ADH和ALDH活性显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01),说明本造模方法能成功造成小鼠肝脏对乙醇和乙醛的代谢能力下降。
与模型对照组比较,本发明组合物组的小鼠肝脏中ADH和ALDH活性显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),说明本发明组合物能显著提高肝脏中ADH和ALDH活性,显著促进肝脏对乙醇和乙醛的代谢。与模型对照组比较,对比组合物1组、对比组合物2组的小鼠肝脏中ADH和ALDH活性显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组、阳性对照组的小鼠肝脏中ADH和ALDH活性与模型对照组差异不显著,不具有统计学意义(P>0.05),说明对比组合物1、对比组合物2能显著提高肝脏中ADH和ALDH活性,显著促进肝脏对乙醇和乙醛的代谢,而葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、阳性对照不能显著提高肝脏中ADH和ALDH活性,不能显著促进肝脏对乙醇和乙醛的代谢。
与本发明组合物组比较,葛根提取物组、枳椇子提取物组、山楂提取物组、菊花提取物组、木糖醇组、对比组合物1组、对比组合物2组和阳性对照组的小鼠肝脏中ADH和ALDH活性明显较低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),说明本发明组合物在提高肝脏中ADH和ALDH活性、促进肝脏对乙醇和乙醛的代谢方面,要优于葛根提取物、枳椇子提取物、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、对比组合物1、对比组合物2和阳性对照。
表1小鼠血清中乙醇、乙醛含量
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,#p<0.05,##p<0.01;与本发明组合物组相比,△p<0.05,△△p<0.01。
表2小鼠血清AST和ALT活性
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,#p<0.05,##p<0.01;与本发明组合物组相比,△p<0.05,△△p<0.01。
表3小鼠肝组织ADH和ALDH活性
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,#p<0.05,##p<0.01;与本发明组合物组相比,△p<0.05,△△p<0.01。
4、总结
在本实施例的剂量下,本发明组合物能显著抑制乙醇的吸收或促进乙醇的代谢、减少乙醛的蓄积,且本发明组合物在抑制乙醇吸收或促进乙醇代谢、减少乙醛的蓄积方面,要优于葛根提取物、枳椇子提取物、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、对比组合物1、对比组合物2,与阳性对照相当;本发明组合物能显著抑制酒精引起的肝功能损害,且本发明组合物在抑制酒精引起的肝功能损害方面,要优于葛根提取物、枳椇子提取物、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、对比组合物1、对比组合物2和阳性对照;本发明组合物能显著提高肝脏中ADH和ALDH活性,促进肝脏对乙醇和乙醛的代谢,且本发明组合物在提高肝脏中ADH和ALDH活性、促进肝脏对乙醇和乙醛的代谢方面,要优于葛根提取物、枳椇子提取物、山楂提取物、菊花提取物、木糖醇、对比组合物1、对比组合物2和阳性对照。
实施例2不同提取方法药效比较
取四味药材与木糖醇。药材分成5份,每份葛根100g、枳椇子100g、山楂60g、菊花50g,分别采用8倍量的水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇回流提取,均分别提取两次,每次1小时,过滤,合并两次滤液,浓缩,加入糊精制成浸膏粉,干燥粉碎后再加入190克木糖醇,混匀。备用,按照实施例2的实验方法进行实验。设正常对照组、模型对照组、水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇提取样品组。
结果表明采用水提与醇提取,对作用效果没有显著影响。结果如下:
表4小鼠血清中乙醇、乙醛含量
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,##p<0.01。
表5小鼠血清AST和ALT活性
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,##p<0.01。
表6小鼠肝组织ADH和ALDH活性
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,##p<0.01。
实施例3不同原料配比的药效比较
取四味药材与木糖醇。分成三份:①为葛根100g、枳椇子100g、山楂40g、菊花40g、木糖醇300克;②为葛根150g、枳椇子150g、山楂80g、菊花80g、木糖醇250克;③为葛根100g、枳椇子100g、山楂60g、菊花50g、木糖醇190克。分别采用述实施例2与实施例3的方法处理,作为供试样品。按照实施例2的实验方法进行实验。设正常对照组、模型对照组、①、②、③提取样品组。样品的给药量按生药量折算均同前。
结果表明采用水提与醇提取,各样品均有较好保肝解酒效果。但是,从数据上比较,③提取样品组,即当葛根10份,枳椇子10份,山楂6份,菊花5份,木糖醇19份时,效果较优,尤其是在提高肝组织ADH和ALDH活性方面,与③提取样品组比较,①提取样品、②提取样品组ADH和ALDH活性较低,具有统计学差异(P<0.05或P<0.01),说明①、②、③提取样品组中,③提取样品的解酒保肝作用较强。结果如下:
表7小鼠血清中乙醇、乙醛含量
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,##p<0.01。
表8小鼠血清AST和ALT活性
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,##p<0.01。
表9小鼠肝组织ADH和ALDH活性
注:与正常对照组相比,**p<0.01;与模型对照组相比,##p<0.01;与③提取组相比,△p<0.05,△△p<0.01。
Claims (5)
1.一种提高乙醇脱氢酶活性的中药组合物,其特征在于,该组合物按重量份由以下原料制成:葛根10-15份、枳椇子10-15份、山楂4-8份、菊花4-8份、木糖醇19-30份。
2.如权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,所述原料的配比为:葛根10份、枳椇子10份、山楂6份、菊花5份、木糖醇19份。
3.如权利要求1所述的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:在原料葛根、枳椇子、山楂和菊花中按料液比1g:5~10ml,加入水或50%~95%乙醇回流提取,提取液制成浸膏粉,粉碎后加入木糖醇,制成适合于口服的药物制剂。
4.如权利要求1或2所述的中药组合物在制备抑制酒精引起谷丙转氨酶异常升高药物中的应用。
5.如权利要求1或2所述的中药组合物在制备抑制酒精引起谷草转氨酶异常升高的药物中的应用。
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Legal Events
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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