CN107047972B - 一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料 - Google Patents

一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，按照重量份数计，包括：麸皮50‑80份，玉米粉35‑55份，水草粉15‑30份，水华蓝藻提取物3‑9份，黄酒糟5‑15份，鱼粉10‑20份，辅助饲料组分20‑25份，维生素2‑5份。本发明在饲料配方中添加了水华蓝藻提取物，以水华蓝藻提取物作为添加剂，能够有效杀灭大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌，且杀菌率在90％以上，水华蓝藻经过酶解后的提取物，含有藻胆蛋白，经过试验验证，将其添加在饲料中，具有良好的细胞抗氧化性和免疫力增强的功能。

Description

一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料
技术领域
本发明涉及饲料领域，具体涉及一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料。
背景技术
水华蓝藻是由微囊藻属、鱼腥藻属、念珠藻属等多种蓝藻聚集而成，其中又以铜绿微囊藻、水华鱼腥藻、浮游念珠藻为主，水华蓝藻能够在淡水环境中迅速大量繁殖，能够破坏水体生态环境，造成巨大经济损失。
现在已经证实水华蓝藻中的铜绿微囊藻、水华鱼腥藻、浮游念珠藻等具有不同程度的抗感染作用，而且混合藻的抑菌率要比单个藻类强。因此，水华蓝藻是筛选和研制新抗生素的新资源，也为防治水华蓝藻污染，改善水生态环境提供了一条新途径。并且，由于水华蓝藻内藻类的种群结构，数量组成的差异，其性质作用各异。
因为水华蓝藻有效的抑菌性能，其被用作杀菌添加剂，在饲料、废料、生物药物等领域有众多应用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的以上问题，提供一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，本发明在饲料中添加了水华蓝藻提取物，饲料具有良好的杀菌作用。
为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：
一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，按照重量份数计，包括：
Figure BDA0001277243660000011
Figure BDA0001277243660000021
其中，所述水草粉为太湖水草粉，从太湖中打捞收集水草，然后清洁、晾晒、烘干脱水、粉碎成粉；
所述水华蓝藻提取物的制备方法包括：
筛取水华蓝藻，然后对除去大颗粒杂质的水华蓝藻进行过滤脱水，得到脱水水华蓝藻，然后将脱水的水华蓝藻烘干，烘干粉碎后获得水华蓝藻粉；
将水华蓝藻粉加入磷酸盐缓冲液中，水华蓝藻粉与磷酸盐缓冲液的质量比为2:25，然后加入复合酶，复合酶由木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶组成，复合酶进行酶解后，进行灭活，获取酶解液；
将酶解液放入高速均质机中，均质3min，将均质后的溶液在2-4℃下静置，静置不低于12h；
4000-6000rpm转速下离心6-8min，得到第一次上清液，将第一次上清液加入硫酸铵或碳酸铵，静置后，保留上清液，继续加入硫酸铵或碳酸铵至饱和，10000-12000rpm转速下离心10min，分离后，获得第二次上清液和沉淀；
将沉淀用足量蒸馏水溶解，采用超滤脱盐，超滤膜透析获得第三次上清液和沉淀；
将第二次上清液和第三次上清液混合离心后，获得保留液，保留液调节pH至中性，然后冷冻干燥，获得水华蓝藻提取物。
在本发明的一个较佳实施例中，进一步包括，将水华蓝藻烘干粉碎获得水华蓝藻粉后，再将水华蓝藻粉放入培养液中培养，培养液中包含：柠檬酸铁、钼酸、葡萄糖、硫酸钾、碳酸钾，培养液的浓度为120mg/L，培养液的pH为7，水华蓝藻粉在培养液中培养5天，完成厚壁孢子诱导；
水华蓝藻粉在厚壁孢子诱导过程中，在灭菌环境下，定时搅拌一次，5天后，将经过厚壁孢子诱导后的水华蓝藻放置在30-40℃的烘箱中烘干，获得经过厚壁孢子诱导的水华蓝藻粉，经过厚壁孢子诱导后的水华蓝藻粉使用在酶解获取水华蓝藻提取物的过程中。
在本发明的一个较佳实施例中，进一步包括，所述复合酶中的木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶三种酶的活力各为100000单位计。
在本发明的一个较佳实施例中，进一步包括，使用所述复合酶酶解时的pH为5-9，酶解时的温度为45-65℃。
在本发明的一个较佳实施例中，进一步包括，所述辅助饲料组分包括：鱼蛋白活性多肽、南瓜籽粉、苦楝、艾叶、鱼腥草。
在本发明的一个较佳实施例中，进一步包括，所述维生素包括：维生素A、维生素B6、维生素B12、维生素B2、维生素D、维生素E。
本发明的有益效果是:
本发明的功能性饲料，在饲料配方中添加了水华蓝藻提取物，以水华蓝藻提取物作为添加剂，能够有效杀灭大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌，且杀菌率在90％以上，水华蓝藻经过酶解后的提取物，含有藻胆蛋白，经过试验验证，将其添加在饲料中，具有良好的细胞抗氧化性和免疫力增强的功能。
本发明的功能性饲料添加了水草粉，水草粉含有14％以上的蛋白质，能够代替豆粉，降低了成本。
上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，本发明的具体实施方式由以下实施例详细给出。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例中公开了一种功能性饲料，饲料配方如表1中所示。
表1实施例1中的配方表
组分 含量(重量份)
麸皮 50
玉米粉 35
水草粉 15
水华蓝藻提取物 3
黄酒糟 5
鱼粉 10
辅助饲料组分 20
维生素 2
实施例2
实施例2中公开了一种功能性饲料，饲料配方如表2中所示。
表2实施例2中的配方表
组分 含量(重量份)
麸皮 65
玉米粉 45
水草粉 20
水华蓝藻提取物 6
黄酒糟 10
鱼粉 15
辅助饲料组分 22
维生素 3
实施例3
实施例3中公开了一种功能性饲料，饲料配方如表3中所示。
表3实施例3中的配方表
组分 含量(重量份)
麸皮 80
玉米粉 55
水草粉 30
水华蓝藻提取物 9
黄酒糟 15
鱼粉 20
辅助饲料组分 25
维生素 5
在实施例1-3中，其中，所述水草粉为太湖水草粉，从太湖中打捞收集水草，然后清洁、晾晒、烘干脱水、粉碎成粉。
所述辅助饲料组分包括：鱼蛋白活性多肽、南瓜籽粉、苦楝、艾叶、鱼腥草。
所述维生素包括：维生素A、维生素B6、维生素B12、维生素B2、维生素D、维生素E。
所述水华蓝藻提取物的制备方法包括：
第一步：筛取水华蓝藻，然后对除去大颗粒杂质的水华蓝藻进行过滤脱水，得到脱水水华蓝藻，然后将脱水的水华蓝藻烘干，烘干粉碎后获得水华蓝藻粉；
第二步：将水华蓝藻粉加入磷酸盐缓冲液中，水华蓝藻粉与磷酸盐缓冲液的质量比为2:25，然后加入复合酶，复合酶由木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶组成，木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶三种酶的活力各为100000单位计，复合酶酶解时的pH为5-9，酶解时的温度为45-65℃，复合酶进行酶解后，进行灭活，获取酶解液；
第三步：将酶解液放入高速均质机中，均质3min，将均质后的溶液在2-4℃下静置，静置不低于12h；
第四步：4000-6000rpm转速下离心6-8min，得到第一次上清液，将第一次上清液加入硫酸铵或碳酸铵，静置后，保留上清液，继续加入硫酸铵或碳酸铵至饱和，10000-12000rpm转速下离心10min，分离后，获得第二次上清液和沉淀；
第五步：将沉淀用足量蒸馏水溶解，采用超滤脱盐，超滤膜透析获得第三次上清液和沉淀；
第六步：将第二次上清液和第三次上清液混合离心后，获得保留液，保留液调节pH至中性，然后冷冻干燥，获得水华蓝藻提取物。
为了防止水华蓝藻霉变，不易储存，可以将水华蓝藻粉进行厚壁孢子诱导，具体方法是：将水华蓝藻烘干粉碎获得水华蓝藻粉后，再将水华蓝藻粉放入培养液中培养，培养液中包含：柠檬酸铁、钼酸、葡萄糖、硫酸钾、碳酸钾，培养液的浓度为120mg/L，培养液的pH为7，水华蓝藻粉在培养液中培养5天，完成厚壁孢子诱导；
水华蓝藻粉在厚壁孢子诱导过程中，在灭菌环境下，定时搅拌一次，5天后，将经过厚壁孢子诱导后的水华蓝藻放置在30-40℃的烘箱中烘干，获得经过厚壁孢子诱导的水华蓝藻粉，经过厚壁孢子诱导后的水华蓝藻粉使用在酶解获取水华蓝藻提取物的过程中。
对比例1
对比例1中的配方与实施例2中的对比，饲料中未添加水华蓝藻提取物。配方如表4中所示。
表4对比例1的配方表
Figure BDA0001277243660000061
Figure BDA0001277243660000071
性能测试
1、杀菌性
1.1配置菌液 分别配置大肠杆菌菌液、绿脓杆菌菌液、金黄色葡萄球菌菌液，菌群为50cfu/L。
1.2将上述菌液分别置于50mL肉汤培养基中，镜检菌数；
1.3滴加上述实施例中得到的水华蓝藻提取物5ml，在37℃下培养18h，镜检菌数，得到结果如表5中所示。
抑菌率＝(起始菌数-起始菌数)/起始菌数
表5抑菌率测试结果表
菌种 起始菌数(镜检) 存活菌数(镜检) 抑菌率(％)
大肠杆菌 3103 270 91.3
绿脓杆菌 5000 190 96.2
金黄色葡萄球菌 2882 320 88.9
由表5中的结果可以看出，上述实施例中得到的水华蓝藻提取物具有较好的杀菌性质，其中大肠杆菌高达91.3％，绿脓杆菌高达96.2％，金黄色葡萄球菌高达88.9％。
2.饲料功能性测定
以四组雄性小白鼠作为实验样本，每组小白鼠12只，编号为1、2、3、4，1组用实施例1中的饲料喂养，2组用实施例2中的饲料喂养，3组用实施例3中的饲料喂养，4组用对比例1中的饲养喂养，四组小鼠其它喂养条件一致，连续喂养60天。
然后用动物甲型流感病毒侵染四组小鼠，其中，1组中有一只小鼠24小时之内出现流感症状，2只小鼠在36小时内出现轻微流感症状，并且7天后小鼠痊愈。
2组中未出现流感症状。
3组中有1只小鼠在36小时内出现流感症状，并且7天后痊愈。
4组中有4只小鼠在24小时内出现流感症状，2只小鼠在36小时内出现流感症状，在24小时内出现流感症状的其中一只小鼠，在3天后出现肺炎症状，7天后死亡3只小鼠。
通过上述实验验证，可以看出添加了水华蓝藻提取物的功能性饲料具有良好的免疫增强功能。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (5)

1.一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，其特征在于，按照重量份数计，包括：
麸皮 50-80份
玉米粉 35-55份
水草粉 15-30份
水华蓝藻提取物 3-9份
黄酒糟 5-15份
鱼粉 10-20份
辅助饲料组分 20-25份
维生素 2-5份
其中，所述水草粉为太湖水草粉，从太湖中打捞收集水草，然后清洁、晾晒、烘干脱水、粉碎成粉；
所述水华蓝藻提取物的制备方法包括：
筛取水华蓝藻，然后对除去大颗粒杂质的水华蓝藻进行过滤脱水，得到脱水水华蓝藻，然后将脱水的水华蓝藻烘干，烘干粉碎后获得水华蓝藻粉；
将水华蓝藻粉加入磷酸盐缓冲液中，水华蓝藻粉与磷酸盐缓冲液的质量比为2:25，然后加入复合酶，复合酶由木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶组成，复合酶进行酶解后，进行灭活，获取酶解液；
将酶解液放入高速均质机中，均质3min，将均质后的溶液在2-4℃下静置，静置不低于12h；
4000-6000rpm转速下离心6-8min，得到第一次上清液，将第一次上清液加入硫酸铵或碳酸铵，静置后，保留上清液，继续加入硫酸铵或碳酸铵至饱和，10000-12000rpm转速下离心10min，分离后，获得第二次上清液和沉淀；
将沉淀用足量蒸馏水溶解，采用超滤脱盐，超滤膜透析获得第三次上清液和沉淀；
将第二次上清液和第三次上清液混合离心后，获得保留液，保留液调节pH至中性，然后冷冻干燥，获得水华蓝藻提取物；
其中，将水华蓝藻烘干粉碎获得水华蓝藻粉后，再将水华蓝藻粉放入培养液中培养，培养液中包含：柠檬酸铁、钼酸、葡萄糖、硫酸钾、碳酸钾，培养液的浓度为120mg/L，培养液的pH为7，水华蓝藻粉在培养液中培养5天，完成厚壁孢子诱导；
水华蓝藻粉在厚壁孢子诱导过程中，在灭菌环境下，定时搅拌一次，5天后，将经过厚壁孢子诱导后的水华蓝藻放置在30-40℃的烘箱中烘干，获得经过厚壁孢子诱导的水华蓝藻粉，经过厚壁孢子诱导后的水华蓝藻粉使用在酶解获取水华蓝藻提取物的过程中。
2.根据权利要求1所述的一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，其特征在于，所述复合酶中的木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶三种酶的活力各为100000单位计。
3.根据权利要求1所述的一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，其特征在于，使用所述复合酶酶解时的pH为5-9，酶解时的温度为45-65℃。
4.根据权利要求1所述的一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，其特征在于，所述辅助饲料组分包括：鱼蛋白活性多肽，南瓜籽粉，苦楝，艾叶，鱼腥草。
5.根据权利要求1所述的一种添加水华蓝藻提取物的功能性饲料，其特征在于，所述维生素包括：维生素A，维生素B6，维生素B12，维生素B2，维生素D，维生素E。
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