CN106937960A - 桑黄抗癌活性黄酮类化合物pbf‑2及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF‑2及其制备方法与应用。将桑黄子实体处理获得桑黄子实体粉,取桑黄子实体粉加入80%乙醇溶液并进行超声处理,超声处理后的溶液依次进行水浴回流和抽滤处理,然后离心处理后收集上清液浓缩萃取,再浓缩回收得到粗黄酮类化合物液,用80%乙醇溶液进行稀释,离心取上清液后,过滤膜再上AB‑8大孔树脂柱吸附处理,用80%乙醇溶液洗脱后收集洗脱峰的洗脱液,冷冻干燥后得到均一的黄酮类化合物PBF‑2。本发明制备产物纯度均一,对细胞Hela和SGC‑7901的生长均有抑制作用,对正常细胞人胚胎肾细胞HEK293和小鼠巨噬细胞RAW264.7生长均无不良影响,可用于抗癌产品开发。
Description
技术领域
本发明涉及了一种黄酮类化合物及其制备方法,尤其是涉及了一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2及其制备方法与应用。
背景技术
黄酮类化合物广泛存在于动植物体中,可分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、查尔酮等多种类型,不同的动植物种类及部位存在不同的黄酮类化合物类型。天然黄酮类化合物具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、解热、保肝等广泛的药理作用,并且毒副作用小,深受国内外研究者高度关注,被广泛应用于医药、食品等领域中。
桑黄(Phellinus baumii)是一种珍贵的药用真菌子实体,因寄生于桑树而得名,有“森林黄金”的美誉。桑黄具有抗癌、抗炎症、抗氧化、降血糖、免疫调节、护肝等多种药理作用,尤其抗癌效果极其显著,但桑黄的抗癌机理还不清楚,这阻害了桑黄药用水平提高及药用范围扩大。分离纯化制备桑黄抗癌活性成分,对于推进桑黄药用开发具有积极的现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2及其制备方法与应用,是采用回流提取、乙酸乙酯萃取、AB-8大孔树脂柱分离纯化的方法,制备桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2。
为了达到上述目的,本发明采用的技术方案如下:
一、一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2的制备方法:
1)将桑黄子实体处理获得桑黄子实体粉;
2)取桑黄子实体粉加入乙醇溶液并进行超声处理;
3)超声处理后的溶液依次进行水浴回流和抽滤处理,然后离心处理后收集上清液;
4)上清液浓缩后萃取,再浓缩回收得到粗黄酮类化合物液;
5)用乙醇溶液将粗黄酮类化合物液进行稀释,离心取上清液后,过滤膜再上AB-8大孔树脂柱吸附处理;
6)用乙醇溶液洗脱后收集洗脱峰的洗脱液,冷冻干燥后得到均一的黄酮类化合物组分,取名PBF-2。
所述步骤2)、5)和6)中的乙醇溶液均为含有80%质量分数乙醇的水溶液。
本发明方法的工艺条件具体为:
1)桑黄子实体于-50℃下真空干燥36h,于-15℃下超微粉碎5min,过80~100目筛,得到桑黄子实体粉;
2)取桑黄子实体粉,按W:V为1:40加入质量分数为80%的乙醇溶液,混匀后,在30℃下用超声波清洗仪以500W功率53KHz频率的超声波磁场作用30min;
3)于100℃水浴中回流提取3次,每次1.5~2.0h,集中收集三次的提取液,三次提取液经过合并后用抽滤机进行抽滤处理,弃掉滤渣,将滤液用高速离心机于10000rpm下离心5min,弃掉沉淀,收集上清液;
4)上清液用旋转蒸发仪浓缩,用乙酸乙酯萃取3次,收集并合并三次萃取液,用旋转蒸发仪浓缩并回收溶剂,得到粗黄酮类化合物液;
5)用分光光度法测定粗黄酮类化合物液中黄酮类化合物含量,根据测定的含量用质量分数为80%的乙醇溶液进行稀释,使得黄酮类化合物质量浓度调整为1.2~1.4mg/mL溶液,再将溶液在8000rpm下离心10min,取上清液,过0.45μm滤膜,上AB-8大孔树脂柱吸附,用蒸馏水冲洗直到流出液为无色;
6)用质量分数为80%的乙醇溶液于1.5~2.0mL/min流速下洗脱,用自动收集器收集,根据分光光度法测定结果收集具有黄酮类化合物的洗脱峰的洗脱液,-50℃下真空干燥,得到均一的黄酮类化合物组分PBF-2。
所述步骤4)中的乙酸乙酯体积是浓缩后溶液体积的2倍。
二、由上述方法制备而成的桑黄抗癌活性黄酮类化合物在抗癌中的应用。
所述抗癌中的应用是针对人***细胞Hela和人胃癌细胞SGC-7901,具体是抑制癌细胞生长的作用。
本发明具有的有益效果是:
本发明分离纯化制备的桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2,纯度均一,对人***细胞Hela和人胃癌细胞SGC-7901的生长均表现出明显的抑制作用,对正常细胞人胚胎肾细胞HEK293和小鼠巨噬细胞RAW264.7生长均无不良影响,可用于抗癌产品的开发,这对于提升桑黄药用价值,具有积极的社会效益和经济效益。
附图说明
图1是实施例1的PBF-2对人***细胞Hela和人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
实施之前,先将桑黄子实体于-50℃下真空干燥36h,于-15℃下超微粉碎5min,过80~100目筛,得到桑黄子实体粉,用于以下各个实施例。
本发明实施例采用MTT法检测PBF-2对人***细胞Hela和人胃癌细胞SGC-7901的生长情况,来验证本发明制备产物是否具有其技术效果。
实施例1:
取过80目筛的桑黄子实体粉,按1:40料液比加入质量分数为80%的乙醇溶液,混匀后,在30℃下用超声波清洗仪以500W功率53KHz频率的超声波磁场作用30min。
于100℃水浴中回流提取3次,提取液用乙酸乙酯,每次1.5h,集中收集三次的提取液,三次提取液经过合并后用抽滤机进行抽滤处理,弃掉滤渣,将滤液用高速离心机于10000rpm下离心5min,弃掉沉淀,收集上清液。
上清液用旋转蒸发仪浓缩,用乙酸乙酯萃取3次,收集并合并三次萃取液,用旋转蒸发仪浓缩并回收溶剂,得到粗黄酮类化合物液。
用分光光度法测定粗黄酮类化合物液中黄酮类化合物含量为2.85mg/mL,粗黄酮类化合物用质量分数为80%的乙醇溶液调整质量浓度为1.3mg/mL,再将溶液在8000rpm下离心10min,取上清液,过0.45μm滤膜,上AB-8大孔树脂柱吸附,用蒸馏水冲洗直到流出液为无色。
再用质量分数为80%的乙醇溶液于1.8mL/min流速洗脱,自动收集器收集,减压浓缩,用分光光度法测定,收集具有黄酮类化合物的洗脱峰的洗脱液,-50℃下真空干燥,得到黄酮类化合物PBF-2,PBF-2纯度均一。
针对两种癌细胞,本实施例得到的黄酮类化合物PBF-2分别配成0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL和0.3mg/mL不同浓度下对SGC-7901和Hela的生长进行实验,并增加常用抗癌药物氟尿嘧啶5-Fu作为阳性对照。
实验后发现,本实施例得到的黄酮类化合物PBF-2在浓度0.3mg/mL时对Hela和SGC-7901的抑制率分别为92.75%和97.12%(如图1所示,图中柱上字母不同表示两者间差异达显著水平),对正常细胞人胚胎肾细胞HEK293和小鼠巨噬细胞RAW264.7生长无不良影响,相比常用抗癌药物氟尿嘧啶5-Fu能够达到相等的抑制作用。
实施例2:
取过100目筛的桑黄子实体粉,按1:40料液比加入质量分数为80%的乙醇溶液,混匀后,在30℃下用超声波清洗仪以500W功率53KHz频率的超声波磁场作用30min。
于100℃水浴中回流提取3次,提取液用乙酸乙酯,每次1.8h,集中收集三次的提取液,三次提取液经过合并后用抽滤机进行抽滤处理,弃掉滤渣,将滤液用高速离心机于10000rpm下离心5min,弃掉沉淀,收集上清液。
上清液用旋转蒸发仪浓缩,用乙酸乙酯萃取3次,收集并合并三次萃取液,用旋转蒸发仪浓缩并回收溶剂,得到粗黄酮类化合物液。
用分光光度法测定粗黄酮类化合物液中黄酮类化合物含量为2.81mg/mL,粗黄酮类化合物用质量分数为80%的乙醇溶液调整质量浓度为1.2mg/mL,再将溶液在8000rpm下离心10min,取上清液,过0.45μm滤膜,上AB-8大孔树脂柱吸附,用蒸馏水冲洗直到流出液为无色。
再用质量分数为80%的乙醇溶液于1.5mL/min流速洗脱,自动收集器收集,减压浓缩,用分光光度法测定,收集具有黄酮类化合物的洗脱峰的洗脱液,-50℃下真空干燥,得到黄酮类化合物PBF-2。
本实施例的PBF-2纯度均一,在浓度0.3mg/mL时对Hela和SGC-7901的抑制率分别为92.75%和97.12%(与实施例1中的图1相似),对正常细胞人胚胎肾细胞HEK293和小鼠巨噬细胞RAW264.7生长均无不良影响,相比常用抗癌药物氟尿嘧啶5-Fu能够达到相等的抑制作用。
实施例3:
取过90目筛的桑黄子实体粉,按1:40料液比加入质量分数为80%的乙醇溶液,混匀后,在30℃下用超声波清洗仪以500W功率53KHz频率的超声波磁场作用30min。
于100℃水浴中回流提取3次,提取液用乙酸乙酯,每次2.0h,集中收集三次的提取液,三次提取液经过合并后用抽滤机进行抽滤处理,弃掉滤渣,将滤液用高速离心机于10000rpm下离心5min,弃掉沉淀,收集上清液。
上清液用旋转蒸发仪浓缩,用乙酸乙酯萃取3次,收集并合并三次萃取液,用旋转蒸发仪浓缩并回收溶剂,得到粗黄酮类化合物液。
用分光光度法测定粗黄酮类化合物液中黄酮类化合物含量为2.83mg/mL,粗黄酮类化合物用质量分数为80%的乙醇溶液调整质量浓度为1.4mg/mL,再将溶液在8000rpm下离心10min,取上清液,过0.45μm滤膜,上AB-8大孔树脂柱吸附,用蒸馏水冲洗直到流出液为无色。
再用质量分数为80%的乙醇溶液于2.0mL/min流速洗脱,自动收集器收集,减压浓缩,用分光光度法测定,收集具有黄酮类化合物的洗脱峰的洗脱液,-50℃下真空干燥,得到黄酮类化合物PBF-2。
本实施例的PBF-2纯度均一,在浓度0.3mg/mL时对Hela和SGC-7901的抑制率分别为92.75%和97.12%(与实施例1中的图1相似),对正常细胞人胚胎肾细胞HEK293和小鼠巨噬细胞RAW264.7生长均无不良影响,相比常用抗癌药物氟尿嘧啶5-Fu能够达到相等的抑制作用。
Claims (7)
1.一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2的制备方法,其特征在于:
1)将桑黄子实体处理获得桑黄子实体粉;
2)取桑黄子实体粉加入乙醇溶液并进行超声处理;
3)超声处理后的溶液依次进行水浴回流和抽滤处理,然后离心处理后收集上清液;
4)上清液浓缩后萃取,再浓缩回收得到粗黄酮类化合物液;
5)用乙醇溶液将粗黄酮类化合物液进行稀释,离心取上清液后,过滤膜再上AB-8大孔树脂柱吸附处理;
6)用乙醇溶液洗脱后收集洗脱峰的洗脱液,冷冻干燥后得到均一的黄酮类化合物组分PBF-2。
2.根据权利要求1所述的一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2的制备方法,其特征在于:所述步骤2)、5)和6)中的乙醇溶液均为含有80%质量分数乙醇的水溶液。
3.根据权利要求1所述的一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2的制备方法,其特征在于方法的工艺条件具体为:
1)桑黄子实体于-50℃下真空干燥36h,于-15℃下超微粉碎5min,过80~100目筛,得到桑黄子实体粉;
2)取桑黄子实体粉,按W:V为1:40加入质量分数为80%的乙醇溶液,混匀后,在30℃下用超声波清洗仪以500W功率53KHz频率的超声波磁场作用30min;
3)于100℃水浴中回流提取3次,每次1.5~2.0h,集中收集三次的提取液,三次提取液经过合并后用抽滤机进行抽滤处理,弃掉滤渣,将滤液用高速离心机于10000rpm下离心5min,弃掉沉淀,收集上清液;
4)上清液用旋转蒸发仪浓缩,用乙酸乙酯萃取3次,收集并合并三次萃取液,用旋转蒸发仪浓缩并回收溶剂,得到粗黄酮类化合物液;
5)用分光光度法测定粗黄酮类化合物液中黄酮类化合物含量,根据测定的含量用质量分数为80%的乙醇溶液进行稀释,使得黄酮类化合物质量浓度调整为1.2~1.4mg/mL溶液,再将溶液在8000rpm下离心10min,取上清液,过0.45μm滤膜,上AB-8大孔树脂柱吸附,用蒸馏水冲洗直到流出液为无色;
6)用质量分数为80%的乙醇溶液于1.5~2.0mL/min流速下洗脱,用自动收集器收集,根据分光光度法测定结果收集具有黄酮类化合物的洗脱峰的洗脱液,-50℃下真空干燥,得到均一的黄酮类化合物组分PBF-2。
4.根据权利要求3所述的一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2的制备方法,其特征在于:所述步骤4)中的乙酸乙酯体积是浓缩后溶液体积的2倍。
5.一种桑黄抗癌活性黄酮类化合物PBF-2,其特征在于:由权利要求1-4任一所述方法制备而成。
6.根据权利要求5所述的桑黄抗癌活性黄酮类化合物的应用,其特征在于:在抗癌中的应用。
7.根据权利要求6所述的桑黄抗癌活性黄酮类化合物的应用,其特征在于:所述抗癌中的应用是针对人***细胞Hela和人胃癌细胞SGC-7901。
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MING MING LIU,ET AL.: "Antitumor and immunomodulation activities of polysaccharide from Phellinus baumii", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES》 * |
刘凡等: "桑黄液体发酵菌丝体提取物抑菌活性研究", 《广东农业科学》 * |
刘晨: "桑黄黄酮研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
孙锦秀: "大孔吸附树脂纯化桑黄总黄酮工艺", 《实用药物与临床》 * |
王钦博: "桑黄抗氧化活性成分的筛选及其分离纯化", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
袁红艳: "桑黄抗肿瘤活性成分研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
高巧慧: "桑黄发酵液总黄酮逆转SGC7901/ADR细胞多药耐药性研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
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