CN106834101A - 一种保护和稳定病毒dna的采血管 - Google Patents

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刘淑园
陈华云
丁渭
肖湘文
刘孝礼
邓利琼
陆同山
张天海
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GUANGZHOU HESHI BIOTECHNOLOGY Co Ltd
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    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
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Abstract

本发明公开了一种保护和稳定病毒DNA的采血管，该采血管原理为：对所采血液进行前处理，释放出核酸，沉降杂质，病毒DNA保护剂与病毒DNA快速结合，更快更有效保护其中的病毒DNA。该采血管含有添加剂，所述添加剂是由异硫氰酸胍、chelex‑100、病毒DNA保护剂、IDU、glycine、bestain按照一定的比例溶解在水中形成的，血液与添加剂以10:2的比例混合，采血后立即颠倒采血管，使血液与添加剂混匀，室温保存。使得血液中的病毒DNA能够在常温下稳定保存15天。

Description

一种保护和稳定病毒DNA的采血管
技术领域
本发明属于医疗器械领域，涉及一种保护和稳定病毒DNA的采血管。
背景技术
人和动物感染病毒后，在血液中可以检测到病毒DNA，这些DNA在我们生物技术领域有着非常重要的地位和作用。但是这些病毒DNA波动大，会引起结果难诊断，而且现在市面上还没有能够及时保护和稳定血液中病毒DNA的采血管。
目前采血管的不足：1、很多都只是起到防止血液凝固的作用，为了防止运输和保存过程中DNA的降解需要在低温情况下进行运输，而低温运输成本昂贵；2、往往需要加入特殊保护剂以保证血液中的DNA的稳定性和完整性，试剂成本昂贵。
综上所述，血液和血液DNA的保存，运输中存在诸多问题，基于病毒DNA作为重大疾病诊断、个性化医疗、胎儿遗传学分析等领域的基本手段，因此一种有效可行的保护和稳定病毒DNA的采血管是非常需要的。
发明内容
本发明的目的在于提出一种保护和稳定病毒DNA的采血管，该采血管原理为：对所采血液进行前处理，释放出核酸，沉降杂质，病毒DNA保护剂与病毒DNA快速结合，更快更有效保护其中的病毒DNA。该采血管含有添加剂，所述添加剂是由异硫氰酸胍、chelex-100、病毒DNA保护剂、IDU、glycine、bestain按照一定的比例溶解在水中形成的，血液与添加剂以10:2 的比例混合，采血后立即颠倒采血管，使血液与添加剂混匀，室温保存。使得血液中的病毒DNA能够在常温下稳定保存15天。
本发明的技术方案概述如下：
一种保护和稳定病毒DNA的采血管，其特征在于，在普通的采血管中加入添加剂，对血细胞进行裂解、杂质沉降、病毒DNA结合保护。
所述添加剂，包括：异硫氰酸胍、chelex-100、病毒DNA保护剂、IDU、glycine、bestain。
所述的病毒DNA保护剂，包括：十六烷基三甲基溴化铵、草酸铵溶液。
所述采血管，其特征在于：外管壁上标有刻度并且有凹痕可避免操作时管的滑落，且管的材质为塑料，更加轻便及减少运输或操作时的挤压、摔落造成的破碎。
所述添加剂：异硫氰酸胍、chelex-100、病毒DNA保护剂、IDU、glycine、bestain的浓度分别为30g-100g/L、200-600g/L、0.05-0.3g/L、10-60g/L、0.05-0.4g/L、0.2ml-1ml/L。
作为优选，异硫氰酸胍、chelex-100、病毒DNA保护剂、IDU、glycine、bestain的浓度分别为：60g/L、350g/L、0.1g/L、20g/L、0.3g/L、0.7ml/L。
具体实施方法
以下实施案例用于解释本发明，而不用于限制本发明。
本说明书中公开的所有特征，除非特别叙述，均可被其他等效或者类似的特征所替换。
本说明书中公开的所有组合方法和步骤除非互相排斥或者不在范围内的，均可以以任何形式组合。
实施过程：
1.在采血管中加入添加剂，血液与添加剂的比例为10：2，组装好采血管，抽成真空;
2.室温运输及储存；
3.采血，采血后立即颠倒混匀，管中的添加剂会裂解血细胞，释放出核酸，吸附物质将杂质及细胞碎片吸附并沉到管底，同时其中的病毒DNA保护剂会与病毒DNA结合使病毒DNA不能与外界接触，从而保护和稳定病毒DNA;
4.室温储存运输，最长可稳定长达15天；
5.后续提取，无需再裂解细胞得到核酸，直接离心取上清进行进一步的提取即可。
6.下面是常规采血管和病毒DNA采血管的稳定性实验：样本为HBV，采血后分别放置1、3、5、7、9、11、13、15、16用同一种试剂提取后，用Qubit 3.0 检测核酸浓度。结果如下：
常规采血管稳定性结果
第一天Qubit数据 第三天Qubit数据 第五天Qubit数据 第七天Qubit数据 第八天Qubit数据
1 50ng/ul 49ng/ul 48ng/ul 45ng/ul 30ng/ul
2 105ng/ul 103ng/ul 103ng/ul 100ng/ul 80ng/ul
3 78ng/ul 76ng/ul 77ng/ul 74ng/ul 61ng/ul
4 154ng/ul 153ng/ul 155ng/ul 145ng/ul 100ng/ul
5 62ng/ul 60ng/ul 56ng/ul 53ng/ul 25ng/ul
病毒DNA采血管稳定性结果
7.结论：血液在本文所述病毒DNA采血管比常规采血管稳定保存的时间要长，可稳定长达15天。

Claims (6)

1.一种保护和稳定病毒DNA的采血管，包括密封盖及试管，所述密封盖由管盖和胶塞组成，首先将管盖一体注塑成形，然后再将胶塞注塑填充到管盖中。
2.根据权利要求1所述的试管，其特征是：外管壁上标有刻度并且有凹痕可避免操作时管的滑落，所述试管内含有添加剂，所述添加剂能更好的保护和稳定血液中的病毒DNA。
3. 根据权利要求1所述的试管，其规格为：11 x 3 cm，材质为：塑料。
4.根据权利要求2所述的添加剂，包括：异硫氰酸胍、chelex-100、病毒DNA保护剂。
5.根据权利要求2所述的病毒DNA保护剂，包括：十六烷基三甲基溴化铵、草酸铵溶液。
6.根据权利要求2所述的采血管，其功能特征在于：异硫氰酸胍使得血细胞裂解，chelex-100将细胞碎片及部分杂质吸附沉管底部，于此同时病毒DNA保护剂与病毒DNA结合从而保护病毒DNA不受降解。
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