CN106497823A - 一株高产棕色素的葡糖醋杆菌及其棕色素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株产棕色素的醋酸菌及其在制备棕色素中的应用。本发明提供的葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter sp.)菌株FBFS 97‑2,于2016年9月14日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC M2016481。本发明提供的葡糖醋杆菌FBFS 97‑2在30 °C,160 r/min条件下液态发酵17 d,培养液中的棕色素在440nm下的吸光度可达20.08。相关研究未见报道。
Description
技术领域
本发明属于食品生物技术领域,并涉及一株高产棕色素的葡糖醋杆菌(Gluconacetobactersp.)FBFS 97-2及其棕色素的制备方法。
背景技术
色素又名着色剂,是指能使被染物着色的物质,可用于改善物品色泽,被广泛应用于食品、制药、化妆品、纺织等工业领域。
色素按其生产方式通常被分为合成色素和天然色素,合成色素因其具有色泽鲜艳、着色力强、性质稳定和价格低廉等众多优点而被广泛应用。但随着社会的发展和生活水平的提高,人们对食品、药品和日用品安全性的要求也越来越高,众多合成色素也因其安全性而被禁用或限量使用,因而安全性高的天然色素的开发一直是研究热点。微生物色素作为一种天然色素,具有不受资源限制,容易工厂化生产等优点,是寻找天然色素的重要方向之一。
以食品着色剂为例,目前已广泛应用于食品工业的棕色素主要包括焦糖色素、金樱子棕、菊花黄浸膏和可可壳色等4种。其中应用最为广泛的是焦糖色素,常用于酱油、食醋、料酒、烘制食品、糖果、饮料等食品的增色,但焦糖色素是一种合成色素,在生产过程中可能会产生4-甲基咪唑和丙烯酰胺等有害物质;而另外3种棕色素都是植物提取物,存在成本较高、理化性质不稳定等缺点。
本发明从土壤中分离筛选得到一株高产棕色素的醋酸菌——葡糖醋杆菌FBFS97-2,并提供了其棕色素的制备方法。相关研究未见报道。
发明内容
本发明提供一株葡糖醋杆菌(Gluconacetobactersp.)菌株FBFS 97-2,其保藏编号为:CCTCC M 2016481。
上述菌株由本实验室从土壤中分离得到。
本发明的第二个目的是提供一种通过葡糖醋杆菌FBFS 97-2发酵制备棕色素的方法。
本发明提供的方法,包括如下步骤:采用上述葡糖醋杆菌FBFS 97-2进行液态发酵,获得富含棕色素的发酵液,再通过离心和干燥得到棕色素。
上述方法中,所述发酵的条件为30 °C,160 r/min培养17 d。
上述方法中,液态培养基配方如下:葡萄糖100 mg/mL,酵母浸膏10 mg/mL,以双蒸水配制。
上述方法中,将2%(v/v)的葡糖醋杆菌FBFS 97-2种子液接入培养基中。
上述方法中,葡糖醋杆菌FBFS 97-2种子液是取一环葡糖醋杆菌FBFS 97-2斜面菌体接入种子液培养基中,在30 °C,160 r/min培养24 h。
上述方法中,葡糖醋杆菌FBFS 97-2的种子液培养基如下:葡萄糖100 mg/mL,酵母浸膏10 mg/mL,以双蒸水配制。葡糖醋杆菌FBFS 97-2的斜面培养基如下:葡萄糖100 mg/mL,酵母浸膏10 mg/mL,琼脂15 mg/mL,碳酸钙30 mg/mL以双蒸水配制。
上述方法中,发酵液中棕色素的制备包括如下步骤:先通过高速离心(10000 r/min, 10min)去除发酵液中的菌体,再通过真空干燥获得棕色素。
上述菌株葡糖醋杆菌FBFS 97-2已于2016年9月14日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称为CCTCC,地址为:湖北省武汉市洪山区八一路),保藏编号为:CCTCC M 2016481,分类命名为葡糖醋杆菌(Gluconacetobactersp.)。
本发明的实验证明,葡糖醋杆菌FBFS 97-2能产棕色素,30 °C,160 r/min液态发酵17 d,培养液中的棕色素在其最大吸收波长440nm下的吸光度可达20.08。
附图说明
图1葡糖醋杆菌FBFS 97-2的菌落形态(菌落直径1.8mm)。
图2 葡萄醋杆菌FBFS 97-2发酵液在440nm下吸光度随发酵时间的变化。
图3 葡萄醋杆菌FBFS 97-2发酵液颜色随发酵时间的变化。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均来自常规生化试剂商店。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。下面结合附图进一步详细说明本发明。
实施例1 发酵时间对发酵液中棕色素含量的影响:按说明书所述方法,通过分光光度计(440nm)检测葡萄醋杆菌FBFS 97-2发酵液在不同发酵时间下棕色素的含量,发现发酵液的颜色深度随发酵时间的进行先上升后下降,第17d的颜色最深,在440nm下的吸光度为20.08(图2-图3)。
上述实例中检测发酵液中棕色素含量的方法包括如下步骤:发酵液先通过高速离心(10000 r/min, 10min)去除菌体,再经适当稀释后用分光光度计于440nm处进行检测。
Claims (8)
1.葡糖醋杆菌(Gluconacetobactersp.)菌株FBFS 97-2,其保藏编号为:CCTCC M2016481。
2.权利要求1所述的葡糖醋杆菌FBFS 97-2液态发酵制备棕色素的方法。
3.一种制备棕色素的方法,发酵权利要求1所述葡糖醋杆菌FBFS 97-2作为发酵菌株,发酵液经离心收集上清液,并经浓缩、干燥得到棕色素。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于:葡糖醋杆菌FBFS 97-2为发酵菌株,于30 °C,160 r/min下液态培养17 d;所述培养基组分为:葡萄糖100 mg/mL,酵母浸膏10 mg/mL,以双蒸水配制。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述发酵为将权利要求1所述葡糖醋杆菌FBFS 97-2的种子液接种至权利要求4所述发酵培养基中培养,接种量为2%(v/v)。
6.权利要求5所述种子液为将权利要求1所述葡糖醋杆菌FBFS 97-2的斜面培养物取一环菌体接入装有50 mL种子培养基的500 mL三角瓶中,30 °C,160 r/min培养24h;所述种子液培养基为:葡萄糖100 mg/mL,酵母浸膏10 mg/mL,以双蒸水配制;斜面培养基为:葡萄糖100 mg/mL,酵母浸膏10 mg/mL,琼脂15 mg/mL,碳酸钙30 mg/mL以双蒸水配制。
7.由权利要求4-6中所述方法制备的发酵液通过高速离心(10000 r/min, 10min)和真空浓缩干燥来得到的棕色素产物。
8.由权利要求3-7中任一所述方法制备得到的棕色素。
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