CN106432547A - 一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法 - Google Patents
一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106432547A CN106432547A CN201610824933.1A CN201610824933A CN106432547A CN 106432547 A CN106432547 A CN 106432547A CN 201610824933 A CN201610824933 A CN 201610824933A CN 106432547 A CN106432547 A CN 106432547A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- benzyl ester
- sodium
- heparin benzyl
- sodium hydroxide
- heparin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法,包括以下步骤:取氢氧化钠用纯化水配制成浓度为0.06‑0.2mol/L的溶液,加热至62℃,其中纯化水重量是肝素苄基酯重量的20‑30倍;分两次加入62℃的氢氧化钠溶液与肝素苄基酯在62℃下反应1‑4小时;冷却至室温,加入盐酸调pH到中性,加入氯化钠,经过滤膜过滤、醇析和烘干,即得。本发明根据苄基酯酯化率调整氢氧化钠浓度,通过控制降解过程包括物料加入和升温的顺序、分两次加碱降解以及调控降解时间,确保产品1,6‑环保持在药典EP8.0规定的15‑25%之间,从而保证了药效的稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及医药和制药工程技术领域,具体涉及一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法。
背景技术
依诺肝素钠(Enoxaparin Sodium)是一种用于预防和治疗深静脉血栓或肺栓塞的抗凝血剂,是由猪小肠粘膜提取的肝素的苄基酯衍生物经碱裂解制得,主要作用机制为通过与抗凝血酶AT-III结合,通过抑制IIa、Xa来发挥抗凝血作用,其大多数组分在糖链的非还原端具有4-依诺吡喃糖醛酸结构,且其活性作用位点为独特的糖链还原端1,6-脱水环状结构,使其具有与其他低分子肝素不同的药理学作用。欧洲药典(EP8.0)规定其结构中15-25%组分在还原端有1,6-脱水环状结构。
目前关于依诺肝素钠的制备方法专利报道较多。如US5389618公开了肝素钠经季铵盐化、酯化、再经碱裂解制得依诺肝素钠的制备方法;CN102050888A公开了一种依诺肝素钠制备方法,其步骤包括盐化、干燥、酯化、醇沉、氧化、醇沉、精滤、冻干制得成品,该专利采用疏水液相和亲水液相反应以及固相反应,将大分子肝素钠降解为具有特定结构的低分子肝素钠,并控制产物分子量和分子量分布范围;CN102603925A公开了一种由粗品肝素钠直接生产依诺肝素钠的方法,其以粗品肝素钠为原料,通过有机溶剂分级沉淀除去粗品肝素钠中的大部分杂质,然后通过过氧化氢氧化除去部分残留的杂蛋白及色素等杂质,获得符合依诺肝素钠生产的高纯度的肝素钠,并以其为中间体,经肝素季铵盐制备、肝素苄酯的制备、对肝素苄酯进行碱解聚、以酸中和、醇沉淀,精制、脱色,脱水干燥,得到依诺肝素钠成品。
肝素苄基酯酯化率在9.5-14%,范围广,难以保证1,6-环在15-25%范围内。虽然张利赟的《两种低分子肝素(LMWH)生产工艺及质量标准研究》报道了氢氧化钠浓度增加和降解时间延长均可以升高1,6-环的含量,并作了实验研究,但是并没有更深入的研究如何根据肝素苄基酯的酯化率来调节氢氧化钠浓度和反应时间,以及降解过程的控制,并没有找到根据9.5-14%的酯化率使1,6-环保持在15-25%的方法。在实际操作中仍然经常有1,6-环低于15%和高于25%的情况出现,造成了工艺的不稳定性,难以保障药效的稳定性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足,提供一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法,保证1,6-环的含量在欧洲药典EP8.0中要求的15-25%的范围内,从而保证药效的稳定性。
为解决以上技术问题,本发明采取的一种技术方案是:
一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法,包括以下步骤:
(1)取氢氧化钠用纯化水配制成浓度为0.06-0.2mol/L的溶液,加热至62℃,其中纯化水重量是肝素苄基酯重量的20-30倍;
(2)分两次加入62℃的氢氧化钠溶液与酯化率范围在9.5-14.0%的肝素苄基酯在62℃下反应1-3.5小时;
(3)冷却至室温,加入盐酸调pH到中性,加入氯化钠,经过滤膜过滤、醇析和烘干,即得。
优选地,步骤(2)具体操作为:取62℃的氢氧化钠溶液的80%量,加入肝素苄基酯溶解,并在62℃下反应0.5-2小时,然后加入剩余的保温于62℃的氢氧化钠溶液,继续在62℃下反应0.5-1.5小时。
优选地,根据肝素苄基酯酯化率9.5~14%范围,相对应氢氧化钠在水溶液中的浓度为0.06~0.2mol/L,氢氧化钠溶液用99%药用氢氧化钠加入到肝素苄基酯重量的20-30倍的纯化水中,搅拌溶解配制而成。
由于以上技术方案的采用,本发明与现有技术相比具有如下优点:
本发明由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法根据所得酯化物酯化率的高低调节氢氧化钠浓度,并对降解过程进行调控,保证1,6-环的含量在欧洲药典EP8.0中要求的15-25%的范围内,从而保证药效的稳定性。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。应理解,这些实施例是用于说明本发明的基本原理、主要特征和优点,而本发明不受以下实施例的范围限制。实施例中采用的实施条件可以根据具体要求做进一步调整,未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。
实施例一
参考专利US5389618制备肝素苄基酯
称取20g肝素钠加入到200ml水中搅拌溶解,称取50g苄索氯铵加入250ml水中并搅拌溶解,剧烈搅拌下将苄索氯铵溶液加入肝素钠溶液中,在室温反应,经过过滤、水洗和干燥,得到47g固体,将固体加入235ml二氯甲烷中搅拌溶解,加入47ml氯化苄,室温至35℃反应25小时,加入285ml 10%醋酸钠甲醇溶液,过滤、甲醇洗涤、干燥,得到20.3肝素苄基酯,测酯化率为10.5%。
由肝素苄基酯制备依诺肝素钠
在450ml纯化水中加入2.7g 99%氢氧化钠搅拌溶解,配制氢氧化钠溶液,水浴升温至62℃保温备用,取360ml热氢氧化钠溶液,加入上面制备好的肝素苄基酯入18g,搅拌溶解并保温62℃反应1.5小时,再加入剩余90ml热氢氧化钠溶液,继续于62℃反应0.5小时。
后处理过程参考专利US5389618方法进行:冷却至室温,用盐酸调PH至7,加入氯化钠50g搅拌溶解,0.2μm滤膜过滤,加入1600ml甲醇,析出固体,过滤、烘干,得到12.7g白色固体即为依诺肝素钠。测平均分子量为4317D,1,6-环含量为22.4%。
实施例二
参考专利US5389618制备肝素苄基酯
称取20g肝素钠加入到200ml水中搅拌溶解,称取50g苄索氯铵加入250ml水中并搅拌溶解,剧烈搅拌下将苄索氯铵溶液加入肝素钠溶液中,在室温反应,经过过滤、水洗和干燥,得到44g固体,将固体加入220ml二氯甲烷中搅拌溶解,加入44ml氯化苄,室温至35℃反应25小时,加入265ml 10%醋酸钠甲醇溶液,过滤、甲醇洗涤、干燥,得到18.4肝素苄基酯,测酯化率为13.3%。
由肝素苄基酯制备依诺肝素钠
在375ml纯化水中加入1.4g 99%氢氧化钠搅拌溶解,配制氢氧化钠溶液,水浴升温至62℃保温备用,取300ml热氢氧化钠溶液,加入上面制备好的肝素苄基酯15g,搅拌溶解并保温62℃反应1小时,再加入剩余100ml热氢氧化钠溶液,继续于62℃反应0.5小时。
后处理过程参考专利US5389618方法进行:冷却至室温,用盐酸调PH至7,加入氯化钠41g搅拌溶解,0.2μm滤膜过滤,加入1200ml甲醇,析出固体,过滤、烘干,得到10.4g白色固体即为依诺肝素钠。测平均分子量为4192D,1,6-环含量为17.5%。
实施例三
参考专利US5389618制备肝素苄基酯
称取20g肝素钠加入到200ml水中搅拌溶解,称取50g苄索氯铵加入250ml水中并搅拌溶解,剧烈搅拌下将苄索氯铵溶液加入肝素钠溶液中,在室温反应,经过过滤、水洗和干燥,得到51g固体,将固体加入255ml二氯甲烷中搅拌溶解,加入51ml氯化苄,室温至35℃反应25小时,加入310ml 10%醋酸钠甲醇溶液,过滤、甲醇洗涤、干燥,得到19.5肝素苄基酯,测酯化率为11.9%。
由肝素苄基酯制备依诺肝素钠
在450ml纯化水中加入2.2g99%氢氧化钠搅拌溶解,配制氢氧化钠溶液,水浴升温至62℃保温备用,取360ml热氢氧化钠溶液,加入上面制备好的肝素苄基酯18g,搅拌溶解并保温62℃反应1.5小时,再加入剩余90ml热氢氧化钠溶液,继续于62℃反应0.5小时。
后处理过程参考专利US5389618方法进行:冷却至室温,用盐酸调PH至7,加入氯化钠60g搅拌溶解,0.2μm滤膜过滤,加入1600ml甲醇,析出固体,过滤、烘干,得到14.7g白色固体即为依诺肝素钠。测平均分子量为4254D,1,6-环含量为19.8%。
以上对本发明做了详尽的描述,实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想,其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)取氢氧化钠用纯化水配制成浓度为0.06-0.2mol/L的溶液,加热至62℃,其中纯化水重量是肝素苄基酯重量的20-30倍;
(2)分两次加入62℃的氢氧化钠溶液与酯化率范围在9.5-14.0%的肝素苄基酯在62℃下反应1-3.5小时;
(3)冷却至室温,加入盐酸调pH到中性,加入氯化钠,经过滤膜过滤、醇析和烘干,即得。
2.根据权利要求1所述的由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法,其特征在于:所述步骤(2)具体操作为:取62℃的氢氧化钠溶液的80%量,加入肝素苄基酯溶解,并在62℃下反应0.5-2小时,然后加入剩余的保温于62℃的氢氧化钠溶液,继续在62℃下反应0.5-1.5小时。
3.根据权利要求1所述的由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法,其特征在于:根据肝素苄基酯酯化率9.5~14%范围,相对应氢氧化钠在水溶液中的浓度为0.06~0.2mol/L,氢氧化钠溶液用99%药用氢氧化钠加入到肝素苄基酯重量的20-30倍的纯化水中,搅拌溶解配制而成。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610824933.1A CN106432547A (zh) | 2016-09-14 | 2016-09-14 | 一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610824933.1A CN106432547A (zh) | 2016-09-14 | 2016-09-14 | 一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106432547A true CN106432547A (zh) | 2017-02-22 |
Family
ID=58167886
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610824933.1A Pending CN106432547A (zh) | 2016-09-14 | 2016-09-14 | 一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106432547A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019116217A2 (en) | 2017-12-11 | 2019-06-20 | Biological E Limited | Process for the preparation of low molecular weight heparin |
CN116284499A (zh) * | 2022-07-28 | 2023-06-23 | 河北常山生化药业股份有限公司 | 一种羊源低分子肝素钠的制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102603925A (zh) * | 2012-03-21 | 2012-07-25 | 东营天东生化工业有限公司 | 一种由粗品肝素钠直接生产依诺肝素钠的方法 |
CN103342761A (zh) * | 2013-07-15 | 2013-10-09 | 河北常山生化药业股份有限公司 | 一种膜分离制备依诺肝素钠工艺 |
CN104086674A (zh) * | 2014-07-28 | 2014-10-08 | 常州千红生化制药股份有限公司 | 一种制备依诺肝素钠的工艺 |
CN105440163A (zh) * | 2015-12-07 | 2016-03-30 | 青岛九龙生物医药有限公司 | 一种制备及纯化依诺肝素钠的方法 |
-
2016
- 2016-09-14 CN CN201610824933.1A patent/CN106432547A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102603925A (zh) * | 2012-03-21 | 2012-07-25 | 东营天东生化工业有限公司 | 一种由粗品肝素钠直接生产依诺肝素钠的方法 |
CN103342761A (zh) * | 2013-07-15 | 2013-10-09 | 河北常山生化药业股份有限公司 | 一种膜分离制备依诺肝素钠工艺 |
CN104086674A (zh) * | 2014-07-28 | 2014-10-08 | 常州千红生化制药股份有限公司 | 一种制备依诺肝素钠的工艺 |
CN105440163A (zh) * | 2015-12-07 | 2016-03-30 | 青岛九龙生物医药有限公司 | 一种制备及纯化依诺肝素钠的方法 |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019116217A2 (en) | 2017-12-11 | 2019-06-20 | Biological E Limited | Process for the preparation of low molecular weight heparin |
US11299558B2 (en) | 2017-12-11 | 2022-04-12 | Biological E Limited | Process for the preparation of low molecular weight heparin |
CN116284499A (zh) * | 2022-07-28 | 2023-06-23 | 河北常山生化药业股份有限公司 | 一种羊源低分子肝素钠的制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104327100B (zh) | 高纯度氟氧头孢钠制备工艺 | |
CN102050888B (zh) | 一种依诺肝素钠的制备方法 | |
CN111228854B (zh) | 一种萃取安赛蜜母液的方法 | |
CN106432547A (zh) | 一种由肝素苄基酯制备依诺肝素钠的方法 | |
CN104530084B (zh) | 一种头孢呋辛钠的新晶型及其结晶制备方法 | |
CN102153567A (zh) | 一种制备头孢西丁酸的方法 | |
CN106565616A (zh) | 一种抗菌兽药磺胺间甲氧嘧啶钠的制备方法 | |
CN107141373A (zh) | 一种新的达肝素钠的制备工艺 | |
CN102304135A (zh) | 一种双氢青蒿素的生产方法 | |
CN102898360A (zh) | 3,5-二溴-4-氟吡啶的合成 | |
CN103804523A (zh) | 制备高纯度伊诺肝素方法 | |
CN103408584A (zh) | 一种高耐水解三-(2-氯异丙基)磷酸酯阻燃剂的制备方法 | |
CN104341435B (zh) | 头孢曲松钠的精制方法 | |
CN102391186A (zh) | 一种奥扎格雷中间体(e)-4-(咪唑基甲基)肉桂酸甲酯的制备方法 | |
CN103626843A (zh) | 一种阿斯巴甜生产中的杂质控制方法 | |
CN103159673B (zh) | 一种制备吉美嘧啶的精制方法 | |
CN104926922A (zh) | 匹多莫德的制备方法 | |
CN108084238A (zh) | 一种坎利酮中间体的制备方法 | |
CN104327049B (zh) | 右旋雷贝拉唑钠单水合物晶体的制备方法 | |
CN103030599B (zh) | 吉非替尼中间体及其制备方法 | |
CN106866552B (zh) | 一种高纯度格列吡嗪晶型i结晶的制备方法 | |
CN105837635B (zh) | 一种用于治疗骨质疏松的米诺膦酸的制备方法 | |
CN107129472B (zh) | 一种制备乙酰唑胺中间体的工艺 | |
CN105777626A (zh) | 米力农的制备方法 | |
CN104177512B (zh) | 催化法生产低分子硫酸软骨素的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
TA01 | Transfer of patent application right | ||
TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20180727 Address after: 215151 No. 122, Hu Qing Road, Hu Guan Town, Suzhou, Jiangsu Applicant after: Suzhou Tianma Pharmaceutical Co., Ltd. Address before: 215000 Huayuan East Road, Mu Du Town, Wuzhong District, Suzhou, Jiangsu 199-1 Applicant before: Suzhou Tianma Fine Chemical Product Co., Ltd. |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170222 |