CN106421780A - 使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法 - Google Patents

使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106421780A
CN106421780A CN201610616759.1A CN201610616759A CN106421780A CN 106421780 A CN106421780 A CN 106421780A CN 201610616759 A CN201610616759 A CN 201610616759A CN 106421780 A CN106421780 A CN 106421780A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compositionss
igm
molecule
combination
patient
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610616759.1A
Other languages
English (en)
Inventor
托马斯·巴尼特
大卫·A·罗斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Grifols Worldwide Operations Ltd
Original Assignee
Grifols Worldwide Operations Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Grifols Worldwide Operations Ltd filed Critical Grifols Worldwide Operations Ltd
Publication of CN106421780A publication Critical patent/CN106421780A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A61K38/1722—Plasma globulins, lactoglobulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/40—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum bacterial
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/14—Peptides containing saccharide radicals; Derivatives thereof, e.g. bleomycin, phleomycin, muramylpeptides or vancomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
    • C07K16/1214—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Pseudomonadaceae (F)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
    • C07K16/1228—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
    • C07K16/1228—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
    • C07K16/1232—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia from Escherichia (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1267—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria
    • C07K16/1282—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria from Clostridium (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39516—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum from serum, plasma
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明涉及使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法。具体地，本发明提供一种用于在需要其的患者中治疗由感染产生的免疫并发症的方法，其特征在于所述方法包括施用包含IgM的组合物。在一些实施方案中，免疫并发症的治疗通过免疫调节进行。还提供一种用于免疫调节需要其的患者中的感染的方法，其特征在于所述方法包括施用包含IgM的组合物。本发明还提供一种用于在治疗脓毒症中使用的包含IgM的组合物以及用于在治疗由感染产生的免疫并发症中使用的包含IgM的组合物。在一些实施方案中，以上提及的感染或脓毒症由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。

Description

使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法
描述
技术领域
本发明涉及通过施用包含IgM的组合物治疗或预防免疫症状或免疫状况。
发明背景
微生物物种可变得对被感染的患者极为有害，如果该个体不能清除感染的话。感染也可变成脓毒性的，从被感染的器官扩散到血流中。对于患者，这些脓毒性感染具有不良预后(poor outcome)。
充分表征了，血浆来源的IgM可结合内毒素并防止针对患者的内毒素介导的毒性。这归因于IgM结合聚糖从而防止其效应的固有能力或偏好。通常，内毒素的这些毒性效应响应于由抗生素或患者的免疫***引起的细菌死亡或溶菌。
另外，基于IgM与自身免疫性疾病或动脉粥样硬化的特定标志物(hallmarks)，例如，自身抗体的相互作用已提出使用IgM组合物或IgM富集的组合物用于治疗所述疾病(Hurez,V.等“Pooled Normal Human Polyspecific IgM Contains Neutralizing Anti-Idioitypes to IgG Autoantibodies of Autoimmune Patients and Protects fromExaperimental Autoimmune Disease”,Blood,1997，第90卷，第10期，4004-4013；以及Cesena,HY.“Immune-modulation by polyclonal IgM treatment reducesatherosclerosis in hypercholesterolemic apoE-/-mice”,Atherosclerosis,2012，第220卷,59-65)。
微生物感染的脓毒性状况及其他并发症通常与免疫***的过度刺激相关，并且由于微生物的过度量级的且迅速的进化通常不可能被控制。因此，仍存在对减少、抑制或预防免疫***的过度刺激的有效治疗方案的需要。
发明概述
本发明的实施方案提供了一种组合物，所述组合物包含以下、主要由以下组成或由以下组成：血浆来源的IgM及任选地以药物载体(carrier)形式的一种或更多种赋形剂。
在另外的实施方案中，本发明提供了一种用于在治疗脓毒症中使用的包含IgM的组合物。
在另外的实施方案中，本发明提供了一种用于在治疗由感染产生的免疫并发症中使用的包含IgM的组合物。
在另外的实施方案中，本发明提供了一种用于在需要其的患者中治疗由感染产生的免疫并发症的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
在另外的实施方案中，本发明还提供了一种用于免疫调节需要其的患者中的感染的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
附图简述
为了更好的理解，以下参考通过举例的方式呈现的附图并参考不是对本发明的限制的说明性实例更详细地描述了本发明。
图1示出了评价IgM对大肠杆菌(Escherichia coli)LPS-诱导的携带稳定NF-κB报告物质粒的THP-1细胞中的NF-κB活化的效应获得的结果。在图1A和1B两者中，y轴示出了如通过NF-κB SEAP报告物测量的NF-κB活性的倍数增加，所述增加与NF-κB活性的诱导成正比。此外，在两图(1A和1B)中，多个处理组在x轴上示出。标准误差在各个条上指示。
图2示出了艰难梭菌(Clostridium difficile)的类毒素A或类毒素B在携带稳定NF-κB报告物质粒的THP-1细胞中诱导NF-κB获得的结果。如通过NF-κB SEAP报告物测量的NF-κB活性的倍数增加在y轴上指示，并且与NF-κB活性的诱导成正比。以μg/mL计的类毒素A或类毒素B的浓度在x轴示出。
图3示出了抑制艰难梭菌的类毒素B诱导的携带稳定NF-κB报告物质粒的THP-1细胞中的NF-κB活化获得的结果。如通过NF-κB SEAP报告物测量的NF-κB活性的倍数增加在y轴上指示，并且与NF-κB活性的诱导成正比。多个处理组在x轴上示出。标准误差在各个条上指示。
图4示出了抑制肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)诱导的携带稳定NF-κB报告物质粒的THP-1细胞中的NF-κB活化和IL-8分泌的结果。在图4A中，y轴示出了如通过NF-κB SEAP报告物测量的NF-κB活性的倍数增加，所述倍数增加与NF-κB活性的诱导成正比；且x轴示出了多个处理组。在图4B中，y轴示出了分泌到培养物上清液中的IL-8的浓度；且x轴示出了多个处理组。在图4B中，“UD”指示在未处理的对照组中IL-8是检测不到的。在两图中，标准误差在各个条上指示。
图5示出了对关于IgM介导的对佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate)(PMA)/离子霉素诱导的外周血单核细胞(PBMC)，特别是T细胞的细胞增殖的阻断的实验获得的结果。如通过Cell Titer Glow测量的相对于对照组的相对增殖的倍数增加在y轴上指示，且与细胞增殖的诱导成正比。多个处理组在x轴上示出。标准偏差在各个条上指示。
发明详述
在详尽和大量的实验和研究之后，本发明人已发现，IgM组合物显示出免疫调节活性(例如，通过减少NF-κB活性诱导和/或降低外周血单核细胞的增殖)，这使得所述组合物适合于治疗与免疫***的过度刺激相关的状况，所述免疫***的过度刺激例如，与脓毒性状况相关的免疫***的过度刺激。
本发明的实施方案提供了一种组合物，所述组合物包含以下、主要由以下组成或由以下组成：血浆来源的IgM及任选地以药物载体形式的一种或更多种赋形剂。根据特定的实施方案，一种或更多种赋形剂和/或药物载体是合成的，即，非天然存在的。
如本文使用的，术语“药学上可接受的载体”指与本发明的血浆来源的IgM一起被施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。此类载体可以是无菌液体，诸如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些油，诸如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等，聚乙二醇，甘油(glycerin)，丙二醇或其他合成的溶剂。盐溶液和含水右旋糖和丙三醇(glycerol)溶液也可被用作液体载体，特别是用于可注射溶液的液体载体。根据特定的实施方案，药学上可接受的载体是合成的(即，载体不是天然存在的)。
适合的赋形剂的非限制性实例包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、丙三醇、丙二醇、水、乙醇等。赋形剂还可包括润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂诸如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐；抗细菌剂诸如苄醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂诸如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂诸如乙二胺四乙酸；以及用于调节张力(tonicity)的试剂诸如氯化钠或右旋糖。根据特定的实施方案，一种或更多种赋形剂是合成的(即，赋形剂不是天然存在的)。
本发明的实施方案还涉及用于独立于内毒素介导的免疫应答而对针对微生物感染的应答进行免疫调节的方法。
因此，在第一实施方案中，本发明提供了一种用于在治疗脓毒症中使用的包含IgM的组合物。
在第二实施方案中，本发明提供了一种用于在治疗由感染产生的免疫并发症中使用的包含IgM的组合物。
在另外的实施方案中，本发明提供了一种用于在需要其的患者中治疗由感染产生的免疫并发症的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
此外，本发明还提供了一种用于免疫调节需要其的患者中的感染的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
如本文使用的，“高细胞因子血症(hypercytokinemia)”及其复数意指这样的免疫并发症，所述免疫并发症特征为，由于细胞因子和白细胞，包括T细胞和巨噬细胞之间的正反馈回路(positive feedback loop)而产生过量的促炎性细胞因子。
如本文使用的，“高凝血症(hypercoagulopathy)”及其复数意指由某些血细胞组分，如血小板及微生物的外来的和固有的途径的血液凝固因子及其产物的过度活化导致的免疫并发症。
在一个实施方案中，本发明提供了一种用于在治疗脓毒症中使用的包含IgM的组合物。根据特定的实施方案，该组合物包含以下、主要由以下组成或由以下组成：血浆来源的IgM及任选地以药物载体形式的一种或更多种赋形剂。
脓毒症可由一种或更多种细菌(革兰氏阳性或革兰氏阴性)、一种或更多种真菌(例如，黄曲霉(Aspergillus flavus))、一种或更多种病毒或其组合产生。在优选的实施方案中，脓毒症由一种或更多种细菌产生，更优选地脓毒症由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)、艰难梭菌、肉毒梭菌(Clostridium botulinum)或其组合产生。
脓毒症或脓毒性状况的治疗通过治疗免疫并发症，诸如促炎性反应或免疫***的过度活化来进行，脓毒症或脓毒性状况的治疗继而通过免疫调节来进行。所述免疫调节优选地独立于内毒素介导的免疫应答，并且可通过多种方法来施加。在优选的实施方案中，免疫调节通过抑制NF-κB诱导来进行。在另一个实施方案中，免疫调节通过抑制外周血单核细胞，优选地T-细胞的增殖来进行。在最优选的实施方案中，免疫调节通过以上提及的两种方法施加。
优选地，组合物具有至少90％(w/v)的IgM纯度，更优选地至少95％的IgM纯度。在最优选的实施方案中，组合物具有95％(w/v)的IgM纯度。
组合物的待施用的剂量优选地为从75mg IgM/kg患者至1g IgM/kg患者，更优选地从75mg IgM/kg患者至600mg IgM/kg患者，且最优选地，从75mg IgM/kg患者至300mg IgM/kg患者。另外，组合物优选地被至少一周一次或每隔一天或者每周三次或每天提供或施用。
另外，所述IgM可以是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
如果IgM是重组的，它可根据蛋白表达、生产和纯化领域中已知的任何技术来获得。例如，IgM核酸序列可被***到适合于在被选择的宿主细胞中表达的任何载体(vector)中，该被选择的宿主细胞例如细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌(Bacilus subtilis)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、链霉菌属(Streptomyces)及葡萄球菌属(Staphylococcus))、酵母(酵母属(Saccharomyces)、毕赤酵母属(Pichia)或克鲁维酵母属(Kluyveromyces))、昆虫细胞(家蚕(Bombyx mori)、甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)、草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)或黑腹果蝇(Drosophila melanogaster))或哺乳动物细胞(HeLa细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、猴肾细胞(COS-1)、人肝细胞癌细胞(例如，Hep G2)、人腺病毒转化的293细胞、小鼠L-929细胞、HaK仓鼠细胞系、来源于瑞士(Swiss)小鼠、Balb-c或NIH小鼠的鼠(murine)3T3细胞、CV-1细胞系、来源于原代组织或原代外植块(explant)的体外培养物的细胞株)。
细胞培养物来源的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序，例如，杂交瘤方法来产生。
转基因和化学合成的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序来产生。
在优选的实施方案中，IgM是血浆来源的IgM，分离自合适的血浆级分例如，如美国专利6,307,028中描述的收集IgG之后的两个ANX柱程序的洗涤物或者通过负选择亲和色谱(negative selection affinity chromatography)或尺寸排阻色谱(size exclusionchromatography)进一步纯化所述级分。
关于所述血浆来源的IgM，任选地，它可被分离或纯化以增加针对给定的外毒素、分泌型蛋白、微生物物种或其组合的特异性抗体的相对量。
根据特定的实施方案，设想了单独地施用包含IgM的组合物。
在另一个实施方案中，包含IgM的组合物连同一种或更多种其他组合物或分子一起被施用。所述其他组合物或分子优选地选自抗炎分子、抗生素(例如，小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂和/或具有抗微生物特性的蛋白)、其他免疫调节剂或其组合。在优选的实施方案中，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。包含IgM的组合物连同如以上提及的一种或更多种其他组合物或分子一起的施用包括同时施用待提供的所有组合物或分子或者一种接着另一种地施用这些组合物或分子。
包含IgM的组合物可被用于治疗脓毒症(如以上提及的)以及用于预防所述疾病两者。
在另外的实施方案中，本发明公开了一种用于在治疗由感染产生的免疫并发症中使用的包含IgM的组合物。
感染可由一种或更多种细菌(革兰氏阳性或革兰氏阴性)、一种或更多种真菌(例如，黄曲霉)、一种或更多种病毒或其组合产生。在优选的实施方案中，感染由一种或更多种细菌产生，更优选地，感染由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。
免疫并发症，诸如促炎性反应或免疫***的过度活化的治疗通过免疫调节来进行。所述免疫调节优选地独立于内毒素介导的免疫应答，并且可通过多种方法来施加。在优选的实施方案中，免疫调节通过抑制NF-κB诱导来进行。在另一个实施方案中，免疫调节通过抑制外周血单核细胞，优选地T-细胞的增殖来进行。在最优选的实施方案中，免疫调节通过以上提及的两种方法施加。
组合物优选地具有至少90％(w/v)的IgM纯度，更优选地至少95％(w/v)的IgM纯度。在最优选的实施方案中，所用的组合物包括95％(w/v)的IgM纯度。
组合物的待施用的剂量优选地为从75mg IgM/kg患者至1g IgM/kg患者，更优选地从75mg IgM/kg患者至600mg IgM/kg患者，且最优选地，从75mg IgM/kg患者至300mg IgM/kg患者。另外，组合物优选地被至少一周一次或每隔一天或者每周三次或每天提供或施用。
另外，所述IgM可以是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
如果IgM是重组的，它可根据蛋白表达、生产和纯化领域中已知的任何技术来获得。例如，IgM核酸序列可被***到适合于在被选择的宿主细胞中表达的任何载体中，该被选择的宿主细胞例如细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、假单胞菌属、链霉菌属及葡萄球菌属)、酵母(酵母属、毕赤酵母属或克鲁维酵母属)、昆虫细胞(家蚕、甘蓝夜蛾、草地贪夜蛾、粉纹夜蛾或黑腹果蝇)或哺乳动物细胞(HeLa细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、猴肾细胞(COS-1)、人肝细胞癌细胞(例如，Hep G2)、人腺病毒转化的293细胞、小鼠L-929细胞、HaK仓鼠细胞系、来源于瑞士小鼠、Balb-c或NIH小鼠的鼠3T3细胞、CV-1细胞系、来源于原代组织或原代外植块的体外培养物的细胞株)。
细胞培养物来源的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序，例如，杂交瘤方法来产生。
转基因和化学合成的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序来产生。
在优选的实施方案中，IgM是血浆来源的IgM，分离自合适的血浆级分，例如，如在美国专利6,307,028中描述的收集IgG之后的两个ANX柱程序的洗涤物，或者通过负选择亲和色谱或尺寸排阻色谱进一步纯化所述级分。
在另一个优选的实施方案中，由感染产生的免疫并发症是高细胞因子血症、高凝血症或器官衰竭。
关于所述血浆来源的IgM，任选地，它可被分离或纯化以增加针对给定的外毒素、分泌型蛋白、微生物物种或其组合的特异性抗体的相对量。
根据特定的实施方案，设想了单独地施用包含IgM的组合物。
在另一个实施方案中，包含IgM的组合物连同一种或更多种其他组合物或分子一起被施用。所述其他组合物或分子优选地选自抗炎分子、抗生素(例如，小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂和/或具有抗微生物特性的蛋白)、其他免疫调节剂或其组合。在优选的实施方案中，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。包含IgM的组合物连同如以上提及的一种或更多种其他组合物或分子一起的施用包括同时施用待提供的所有组合物或分子或者一种接着另一种地施用这些组合物或分子。
包含IgM的组合物可被用于治疗由感染产生的免疫并发症(如以上提及的)以及用于预防所述免疫并发症两者。
在另外的实施方案中，本发明涉及一种用于在需要其的患者中治疗由感染产生的免疫并发症的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
感染可由一种或更多种细菌(革兰氏阳性或革兰氏阴性)、一种或更多种真菌(例如，黄曲霉)、一种或更多种病毒或其组合产生。在优选的实施方案中，感染由一种或更多种细菌产生，更优选地感染由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。
免疫并发症，诸如促炎性反应或免疫***的过度活化的治疗通过免疫调节来进行。所述免疫调节优选地独立于内毒素介导的免疫应答，并且可通过多种方法来施加。在优选的实施方案中，免疫调节通过抑制NF-κB诱导来进行。在另一个实施方案中，免疫调节通过抑制外周血单核细胞，优选地T-细胞的增殖来进行。在最优选的实施方案中，免疫调节通过以上提及的两种方法施加。
组合物优选地具有至少90％(w/v)的IgM纯度，更优选地至少95％(w/v)的IgM纯度。在最优选的实施方案中，所用的组合物包括95％(w/v)的IgM纯度。
组合物的待施用的剂量优选地为从75mg IgM/kg患者至1g IgM/kg患者，更优选地从75mg IgM/kg患者至600mg IgM/kg患者，且最优选地，从75mg IgM/kg患者至300mg IgM/kg患者。另外，组合物优选地被至少一周一次或每隔一天或者每周三次或每天提供或施用。
另外，所述IgM可以是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
如果IgM是重组的，它可根据蛋白表达、生产和纯化领域中已知的任何技术来获得。例如，IgM核酸序列可被***到适合于在被选择的宿主细胞中表达的任何载体中，该被选择的宿主细胞例如细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、假单胞菌属、链霉菌属及葡萄球菌属)、酵母(酵母属、毕赤酵母属或克鲁维酵母属)、昆虫细胞(家蚕、甘蓝夜蛾、草地贪夜蛾、粉纹夜蛾或黑腹果蝇)或哺乳动物细胞(HeLa细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、猴肾细胞(COS-1)、人肝细胞癌细胞(例如，Hep G2)、人腺病毒转化的293细胞、小鼠L-929细胞、HaK仓鼠细胞系、来源于瑞士小鼠、Balb-c或NIH小鼠的鼠3T3细胞、CV-1细胞系、来源于原代组织或原代外植块的体外培养物的细胞株)。
细胞培养物来源的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序，例如，杂交瘤方法来产生。
转基因和化学合成的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序来产生。
在优选的实施方案中，IgM是血浆来源的IgM，分离自合适的血浆级分，例如，如在美国专利6,307,028中描述的收集IgG之后的两个ANX柱程序的洗涤物或者通过负选择亲和色谱或尺寸排阻色谱进一步纯化所述级分。
关于所述血浆来源的IgM，任选地，它可被分离或纯化以增加针对给定的外毒素、分泌型蛋白、微生物物种或其组合的特异性抗体的相对量。
根据特定的实施方案，设想了单独地施用包含IgM的组合物。
在另一个实施方案中，包含IgM的组合物连同一种或更多种其他组合物或分子一起被施用。所述其他组合物或分子优选地选自抗炎分子、抗生素(例如，小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂和/或具有抗微生物特性的蛋白)、其他免疫调节剂或其组合。在优选的实施方案中，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。包含IgM的组合物连同如以上提及的一种或更多种其他组合物或分子一起的施用包括同时施用待提供的所有组合物或分子或者一种接着另一种地施用这些组合物或分子。
本发明的方法可被用于治疗由感染产生的免疫并发症(如以上提及的)以及用于预防所述免疫并发症两者。
最后，本发明还公开了一种用于免疫调节需要其的患者中的感染的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
所述免疫调节可被用于治疗或预防感染或感染相关的症状或状况。
感染可由一种或更多种细菌(革兰氏阳性或革兰氏阴性)、一种或更多种真菌(例如，黄曲霉)、一种或更多种病毒或其组合产生。在优选的实施方案中，感染由一种或更多种细菌产生，更优选地感染由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。
所述免疫调节允许治疗免疫并发症，诸如促炎性反应或免疫***的过度活化，并且优选地独立于内毒素介导的免疫应答，且可以通过多种方法来施加。在优选的实施方案中，免疫调节通过抑制NF-κB诱导来进行。在另一个实施方案中，免疫调节通过抑制外周血单核细胞，优选地T-细胞的增殖来进行。在最优选的实施方案中，免疫调节通过以上提及的两种方法施加。
组合物优选地具有至少90％(w/v)的IgM纯度，更优选地至少95％(w/v)的IgM纯度。在最优选的实施方案中，所用的组合物包括95％(w/v)的IgM纯度。
组合物的待施用的剂量优选地为从75mg IgM/kg患者至1g IgM/kg患者，更优选地从75mg IgM/kg患者至600mg IgM/kg患者，且最优选地，从75mg IgM/kg患者至300mg IgM/kg患者。另外，组合物优选地被至少一周一次或每隔一天或者每周三次或每天提供或施用。
另外，所述IgM可以是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
如果IgM是重组的，它可根据蛋白表达、生产和纯化领域中已知的任何技术来获得。例如，IgM核酸序列可被***到适合于在被选择的宿主细胞中表达的任何载体中，该被选择的宿主细胞例如细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、假单胞菌属、链霉菌属及葡萄球菌属)、酵母(酵母属、毕赤酵母属或克鲁维酵母属)、昆虫细胞(家蚕、甘蓝夜蛾、草地贪夜蛾、粉纹夜蛾或黑腹果蝇)或哺乳动物细胞(HeLa细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、猴肾细胞(COS-1)、人肝细胞癌细胞(例如，Hep G2)、人腺病毒转化的293细胞、小鼠L-929细胞、HaK仓鼠细胞系、来源于瑞士小鼠、Balb-c或NIH小鼠的鼠3T3细胞、CV-1细胞系、来源于原代组织或原代外植块的体外培养物的细胞株)。
细胞培养物来源的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序，例如，杂交瘤方法来产生。
转基因和化学合成的IgM可通过本领域的现有技术中已知的任何方法或程序来产生。
在优选的实施方案中，IgM是血浆来源的IgM，分离自合适的血浆级分，例如，如美国专利6,307,028中描述的收集IgG之后的两个ANX柱程序的洗涤物，或者通过负选择亲和色谱或尺寸排阻色谱进一步纯化所述级分。
关于所述血浆来源的IgM，任选地，它可被分离或纯化以增加针对给定的外毒素、分泌型蛋白、微生物物种或其组合的特异性抗体的相对量。
根据特定的实施方案，设想了单独地施用包含IgM的组合物。
在另一个实施方案中，包含IgM的组合物连同一种或更多种其他组合物或分子一起施用。所述其他组合物或分子优选地选自抗炎分子、抗生素(例如，小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂和/或具有抗微生物特性的蛋白)、其他免疫调节剂或其组合。在优选的实施方案中，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。包含IgM的组合物连同如以上提及的一种或更多种其他组合物或分子一起的施用包括同时施用待提供的所有组合物或分子或者一种接着另一种地施用这些组合物或分子。
本文描述的实施方案意图是对本发明示例性的，而不是对本发明的限制。本领域技术人员将理解可对本公开内容的实施方案和实施例作出修改而不偏离本公开内容的范围。
以上使用术语“包括(comprising)”及其变型描述本发明的实施方案。然而，本发明人的意图是，在本文描述的任何实施方案中，术语“包括(comprising)”可被“由......组成(consisting of)”及“主要由......组成(consisting essentially of)”代替，而不偏离本发明的范围。除非另外指明，否则本文提供的所有值包括多达给定的起点和终点并且包括给定的起点和终点。
以下实施例进一步阐明本发明的实施方案，并且应该被理解为是说明性的而不是对本发明的限制。
实施例
实施例1.分析IgM对由大肠杆菌的脂多糖(LPS)内毒素诱导的NF-κB活性的影响。
作为监测NF-κB信号传导途径活化的方法，使用人THP-1单核细胞细胞系进行该实验，所述人THP-1单核细胞细胞系携带具有驱动分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告物的NF-κB依赖型启动子的稳定质粒(Invivogen,San Diego,CA USA)。
根据制造商的推荐在增殖培养基中培养细胞。
该实验用来源于大肠杆菌菌株O111:B4的LPS和来源于大肠杆菌菌株K12的LPS两者来进行。以上提及的THP-1细胞用100ng/mL来源于菌株O111:B4的大肠杆菌LPS(参见图1A)或1ng/mL来源于菌株K12的大肠杆菌LPS(参见图1B)处理24小时。
当使用IgM时，LPS与纯化的IgM(95％(w/v)或更高的纯度)一起预孵育，然后处理细胞。
对于NF-κB活性测定，将1x105个细胞接种在96孔板的每个孔中。测定培养基与增殖培养基相同，例外是测定培养基包含减少的血清以减少胎牛血清(FBS)来源的蛋白的非特异性效应。如以上描述的，使用终浓度2.5mg/mL的IgM(至少95％(w/v)纯的IgM)处理细胞。
NF-κB活性通过评价上清液中分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平来确定，分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平通过Quanti-Blue测定(Invivogen,San Diego,CAUSA)测量并根据制造商的说明书进行。在NF-κB测定时的相对细胞数目通过Cell Titer Glow(PromegaCorp.Madison,WI,USA)来确定并且根据制造商的说明书进行。图1中示出的相对NF-κB活性通过以下来计算：针对通过Cell Titer Glow测定确定的相对细胞数目将NF-κB测定值规范化，然后将实验对照标准化为值1。
令人惊讶地，观察到，在以上测试和提及的任何情况下，纯化的IgM对LPS介导的NF-κB信号传导的活化不具有任何显著效应(参见图1A和图1B)。
实施例2.分析IgM对由艰难梭菌的类毒素B诱导的NF-κB活性的影响。
已知艰难梭菌的毒素在单核细胞中诱导细胞因子分泌，包括IL-8和TNF-α(Linevsky,JK.，等，“IL-8release and neutrophil activation by Clostridiumdifficile toxin-exposed human monocytes,Am J Physiol Gastrointest LiverPhysiol,1997,273,G1333-G1340；以及Sun,X.，等“Essential role of theglucosyltransferase activity in Clostridium difficile toxin-induced secretionof TNF-αby macrophages”,Microbial Pathogenesis,2009,16,298-305)。还已知这些细胞因子中的每个在NF-κB活化后被诱导。
因此，测试了艰难梭菌的类毒素B是否能够在如以上提及的携带稳定地整合的NF-κB报告物质粒(Invivogen,San Diego,CA USA)的人THP-1细胞中诱导NF-κB信号传导。根据制造商的推荐在增殖培养基中培养细胞。
由于毒素本身是细胞毒性的，使用灭活的类毒素以避免复杂的结果解释。对于NF-κB活性测定，在处理之前将2x105个细胞接种在96孔板的每个孔中24小时。然后，用几种浓度的艰难梭菌的类毒素A(List Biological Labs,Inc,Campbell,CA USA)或类毒素B(ListBiological Labs,Inc,Campbell,CA USA)来处理细胞。NF-κB活性通过评价上清液中分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平来确定，分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平通过Quanti-Blue测定(Invivogen,San Diego,CA USA)测量并根据制造商的说明书来进行。在NF-κB测定时的相对细胞数目通过Cell Titer Glow(Promega Corp.Madison,WI,USA)来确定并且根据制造商的说明书来进行。图2中示出的相对NF-κB活性通过以下来计算：针对通过Cell TiterGlow测定确定的相对细胞数目将NF-κB测定值规范化，然后将实验对照标准化为值1。
尽管类毒素A在这些细胞中不诱导NF-κB信号传导，但是类毒素B在这些细胞中显示了NF-κB报告物的诱导(参见图2)。
评价了相比于BSA(牛血清白蛋白)对照IgM(90％-95％纯度的IgM)的溶液抑制NF-κB活性的能力。
细胞用9.25μg/mL的艰难梭菌类毒素B处理24小时。在另外用BSA或IgM组合物处理的情况下，将类毒素B与所述BSA或与IgM(90％-95％(w/v)纯度的IgM)的溶液一起预孵育，然后处理细胞。
测定培养基与增殖培养基相同，例外是测定培养基包含0.025μM维生素D3。对于NF-κB活性测定，在处理之前将2x105个细胞接种在96孔板的每个孔中24小时。然后，如以上描述的，使用终浓度3mg/mL IgM(90％-95％(w/v)纯度的IgM)或BSA处理细胞。NF-κB活性通过评价上清液中分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平来确定，碱性磷酸酶(SEAP)的水平通过Quanti-Blue测定(Invivogen,San Diego,CAUSA)测量并根据制造商的说明书来进行。在NF-κB测定时的相对细胞数目通过Cell Titer Glow(Promega Corp.Madison,WI,USA)来确定并且根据制造商的说明书来进行。图3中示出的相对NF-κB活性通过以下来计算：针对通过Cell Titer Glow测定确定的相对细胞数目将NF-κB测定值规范化，然后将实验对照标准化为值1。
BSA对类毒素B的NF-κB活化没有作用，而以上提及的IgM的溶液使类毒素B效应减弱(参见图3)。
实施例3.分析IgM对肺炎克雷伯杆菌和铜绿假单胞菌引起的NF-κB活性诱导和IL-8分泌的影响。
由于IgM不能使由大肠杆菌细胞壁内毒素LPS介导的NF-κB信号传导减弱(参见实施例1)，因此评价纯化的IgM对未受损伤的完整细菌(具有细胞壁组分如LPS)的效应。
用活的微生物培养物的处理将摧毁(overtaken)并妨碍哺乳动物细胞培养测定***的结果。因此，将完整细菌(肺炎克雷伯杆菌和铜绿假单胞菌)进行甲醛固定以杀死所述细菌，同时保持细胞完整。
将如以上提及的携带稳定NF-κB报告物质粒的THP-1细胞用甲醛杀死的肺炎克雷伯杆菌和铜绿假单胞菌处理24小时。
当使用IgM时，在处理时，以上提及的微生物与纯化的IgM共处理。
对于NF-κB活性测定，将1x105个细胞接种在96孔板的每个孔中。测定培养基与增殖培养基相同，例外是测定培养基包含减少的血清以减少FBS来源的蛋白的非特异性效应。如附图说明中描述的，使用终浓度2.5mg/mL IgM(至少95％纯的IgM)处理细胞。NF-κB活性通过评价上清液中分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平来确定，分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的水平通过Quanti-Blue测定(Invivogen,San Diego,CA USA)测量并根据制造商的说明书来进行。在NF-κB测定时的相对细胞数目通过Cell Titer Glow(Promega Corp.Madison,WI,USA)来确定并且根据制造商的说明书来进行。所示的相对NF-κB活性通过以下来计算：针对通过Cell Titer Glow测定确定的相对细胞数目将NF-κB测定值规范化，然后将实验对照标准化为值1。
两个种类的经甲醛处理的细菌能够在实施例1和实施例2中使用的细胞***或模型(即，携带稳定地整合的NF-κB报告物质粒的人THP-1细胞)中有效地诱导NF-κB途径(参见图4A)。
令人惊讶地，用经甲醛处理的肺炎克雷伯杆菌或铜绿假单胞菌的任一种和纯化的IgM的共处理显示NF-κB信号传导的减少。
NF-κB信号传导的活化诱导促炎性细胞因子的分泌是现有技术中熟知的。IL-8是在人类中被充分表征的NF-κB响应性促炎性细胞因子。因此，评价了以上提及的细胞培养物的培养物上清液中的IL-8分泌，以观察所述IL-8分泌是否也响应于细菌(肺炎克雷伯杆菌或铜绿假单胞菌)和IgM(参见图4B)。分泌进上清液中的IL-8细胞因子使用AlphaLISAIL-8免疫测定试剂盒(Perkin-Elmer,Waltham,MA USA)根据制造商的操作方案通过AlphaLISA来测量。
类似于NF-κB活化，单独的经甲醛固定的细菌诱导IL-8的分泌，而相对于仅单独处理的培养物，用所述细菌和IgM的共处理显示减少的IL-8分泌(参见图4B)。
实施例4.分析IgM对外周血单核细胞增殖的影响。
由于IgM显示明显的对于NF-κB促炎性途径的效应，因此还评价了纯化的IgM是否对免疫功能具有更普遍的效应。由抗原刺激的血液淋巴细胞，特别是T细胞的增殖是最基本的促炎性免疫应答中的一种。
使用佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)和离子霉素(一种非常常见的增殖刺激物)来诱导外周血单核细胞，更确切地讲是血液T-淋巴细胞或T细胞的增殖。
在具有10％热灭活的人血清的RPMI中培养人外周血单核细胞。对于增殖测定，使用培养基将3x105个细胞接种在96孔板的每个孔中。
T细胞用10ng/mL PMA和0.5μM离子霉素处理3天。在使用IgM的情况下，在处理时，视情况而定，用纯化的IgM(以约5mg/mL的终浓度和至少95％的纯度)处理或共处理细胞。
对于不同组的细胞滴度使用Cell Titer Glow(Promega Corp.Madison,WI,USA)测量(根据制造商的说明书进行)，并基于将对细胞增殖的诱导的测量值作为ATP含量的函数。
在PMA/离子霉素刺激3天后，在外周血单核细胞中观察到增殖的显著增加(参见图5)。相对于对照未处理的细胞及相对于PMA/离子霉素处理，在存在或不存在PMA/离子霉素下，用IgM处理细胞降低了外周血单核细胞的增殖。由于PMA/离子霉素是极强的、极为非特异的促细胞***原，该观察结果是高度令人惊讶的。这表明IgM本身具有对免疫应答的调节作用。

Claims (52)

1.一种用于在需要其的患者中治疗由感染产生的免疫并发症的方法，其特征在于所述方法包括施用包含IgM的组合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述感染由大肠杆菌(Escherichiacoli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)、肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、肉毒梭菌(Clostridium botulinum)或其组合产生。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，免疫并发症的治疗通过免疫调节来进行。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，免疫调节通过抑制NF-κB诱导、通过抑制外周血单核细胞的增殖或其组合来进行。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所用的所述组合物具有至少90％(w/v)的IgM纯度。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述组合物具有95％(w/v)的IgM纯度。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物的待施用的剂量为从75mgIgM/kg患者至1g IgM/kg患者。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述组合物被至少一周一次施用。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，IgM是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，IgM是从合适的血浆级分分离的血浆来源的IgM。
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含IgM的组合物被单独地施用。
12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述包含IgM的组合物连同选自以下的一种或更多种其他组合物或分子一起被施用：抗炎分子、小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂、具有抗微生物特性的蛋白、其他免疫调节剂或其组合。
13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。
14.一种用于免疫调节需要其的患者中的感染的方法，其特征在于，所述方法包括施用包含IgM的组合物。
15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，免疫调节被用于治疗或预防感染或感染相关的症状或状况。
16.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述感染由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。
17.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，免疫调节通过抑制NF-κB诱导、通过抑制外周血单核细胞的增殖或其组合来进行。
18.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所用的所述组合物具有至少90％(w/v)的IgM纯度。
19.根据权利要求18所述的方法，其特征在于，所述组合物具有95％(w/v)的IgM纯度。
20.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述组合物的待施用的剂量为从75mgIgM/kg患者至1g IgM/kg患者。
21.根据权利要求20所述的方法，其特征在于，所述组合物被至少一周一次施用。
22.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，IgM是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
23.根据权利要求22所述的方法，其特征在于，IgM是从合适的血浆级分分离的血浆来源的IgM。
24.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述包含IgM的组合物被单独地施用。
25.根据权利要求14所述的方法，其特征在于，所述包含IgM的组合物连同选自以下的一种或更多种其他组合物或分子一起被施用：抗炎分子、小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂、具有抗微生物特性的蛋白、其他免疫调节剂或其组合。
26.根据权利要求25所述的方法，其特征在于，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。
27.一种用于在治疗脓毒症中使用的包含IgM的组合物。
28.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，脓毒症由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。
29.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，脓毒症的治疗通过免疫调节来进行。
30.根据权利要求29所述的用于使用的组合物，其特征在于，免疫调节通过抑制NF-κB诱导、通过抑制外周血单核细胞的增殖或其组合来进行。
31.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，所用的所述组合物具有至少90％(w/v)的IgM纯度。
32.根据权利要求31所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述组合物具有95％(w/v)的IgM纯度。
33.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述组合物的待施用的剂量为从75mg IgM/kg患者至1g IgM/kg患者。
34.根据权利要求33所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述组合物被至少一周一次施用。
35.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，IgM是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
36.根据权利要求35所述的用于使用的组合物，其特征在于，IgM是从合适的血浆级分分离的血浆来源的IgM。
37.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述包含IgM的组合物被单独地施用。
38.根据权利要求27所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述包含IgM的组合物连同选自以下的一种或更多种其他组合物或分子一起被施用：抗炎分子、小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂、具有抗微生物特性的蛋白、其他免疫调节剂或其组合。
39.根据权利要求38所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。
40.用于在治疗由感染产生的免疫并发症中使用的包含IgM的组合物。
41.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述感染由大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、艰难梭菌、肉毒梭菌或其组合产生。
42.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，免疫并发症的治疗通过免疫调节来进行。
43.根据权利要求42所述的用于使用的组合物，其特征在于，免疫调节通过抑制NF-κB诱导、通过抑制外周血单核细胞的增殖或其组合来进行。
44.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，所用的所述组合物具有至少90％(w/v)的IgM纯度。
45.根据权利要求44所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述组合物具有95％(w/v)的IgM纯度。
46.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述组合物的待施用的剂量为从75mg IgM/kg患者至1g IgM/kg患者。
47.根据权利要求46所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述组合物被至少一周一次施用。
48.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，IgM是重组的、血浆来源的、细胞培养物来源的、转基因的或化学合成的。
49.根据权利要求48所述的用于使用的组合物，其特征在于，IgM是从合适的血浆级分分离的血浆来源的IgM。
50.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述包含IgM的组合物被单独地施用。
51.根据权利要求40所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述包含IgM的组合物连同选自以下的一种或更多种其他组合物或分子一起被施用：抗炎分子、小分子抗生素、本质上是抗微生物剂的分子、天然或合成的肽抗微生物剂、具有抗微生物特性的蛋白、其他免疫调节剂或其组合。
52.根据权利要求51所述的用于使用的组合物，其特征在于，所述其他组合物或分子是万古霉素、美洛培南、乳铁蛋白或其组合。
CN201610616759.1A 2015-08-06 2016-07-29 使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法 Pending CN106421780A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562201917P 2015-08-06 2015-08-06
US62/201,917 2015-08-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106421780A true CN106421780A (zh) 2017-02-22

Family

ID=56464076

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610616759.1A Pending CN106421780A (zh) 2015-08-06 2016-07-29 使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法

Country Status (16)

Country Link
US (5) US9913903B2 (zh)
EP (2) EP3150629A3 (zh)
JP (1) JP6901245B2 (zh)
KR (1) KR20170017832A (zh)
CN (1) CN106421780A (zh)
AR (1) AR105596A1 (zh)
AU (1) AU2016208291B2 (zh)
BR (1) BR102016017840A2 (zh)
CA (1) CA2936745A1 (zh)
CL (1) CL2016001977A1 (zh)
IL (1) IL246918B (zh)
MX (1) MX2016009888A (zh)
RU (1) RU2733377C2 (zh)
SG (2) SG10202001028QA (zh)
TW (1) TWI722003B (zh)
UY (1) UY36801A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113490509A (zh) * 2018-11-30 2021-10-08 瑞士杰特贝林生物制品有限公司 使用多克隆免疫球蛋白预防或治疗急性加重的方法和组合物
CN114747535A (zh) * 2022-03-29 2022-07-15 华南理工大学 一种急性脓毒症非人灵长类动物模型及其构建方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10570194B2 (en) * 2015-08-06 2020-02-25 Grifols Worldwide Operations Limited Method for treating infectious diseases using a composition comprising plasma-derived immunoglobulin M (IgM)
US9913903B2 (en) 2015-08-06 2018-03-13 Grifols Worldwide Operations Limited Method for the treatment or prevention of infection-related immune conditions using a composition comprising IgM

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6307028B1 (en) * 1997-06-20 2001-10-23 Bayer Corporation Incorporated Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
US20080145370A1 (en) * 2006-12-13 2008-06-19 Simon Michael R SYNTHESIS OF HUMAN SECRETORY IgM AND THE TREATMENT OF COLSTRIDIUM DIFFICILE ASSOCIATED DISEASES HEREWITH

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4714681A (en) * 1981-07-01 1987-12-22 The Board Of Reagents, The University Of Texas System Cancer Center Quadroma cells and trioma cells and methods for the production of same
US4652533A (en) * 1983-04-28 1987-03-24 Pandex Laboratories, Inc. Method of solid phase immunoassay incorporating a luminescent label
GB8426464D0 (en) 1984-10-19 1984-11-28 Technology Licence Co Ltd Monoclonal antibodies
US4918163A (en) 1985-09-27 1990-04-17 Pfizer Inc. Monoclonal antibodies specific for lipid-A determinants of gram negative bacteria
DE3927111C3 (de) 1989-08-17 1994-09-01 Biotest Pharma Gmbh Verfahren zur Herstellung nicht modifizierter intravenös verabreichbarer IgM- und/oderIgA-haltiger Immunglobulinpräparate
US7473423B2 (en) 1994-04-29 2009-01-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Human IgM antibodies, and diagnostic and therapeutic uses thereof particularly in the central nervous system
RU2191031C2 (ru) * 2001-01-10 2002-10-20 Московский НИИ педиатрии и детской хирургии Способ лечения пневмоний у глубоконедоношенных детей, находящихся на искусственной вентиляции легких
ATE476199T1 (de) * 2003-01-16 2010-08-15 Pedersen Medical As Antimikrobielle zusammensetzung zur lokalen anwendung auf der schleimhaut und der haut
EP1779849A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-02 Nikem Research S.R.L. V-ATPase inhibitors for the treatment of septic shock
GB0717864D0 (en) * 2007-09-13 2007-10-24 Peptcell Ltd Peptide sequences and compositions
CA2707309A1 (en) * 2007-12-18 2009-06-25 Acumen Pharmaceuticals, Inc. Novel addl receptor polypeptides, polynucleotides and host cells for recombinant production
EP2291196A4 (en) 2008-05-12 2012-05-30 Strox Biopharmaceuticals Llc FOR STAPHYLOCOCCUS AUREUS SPECIFIC ANTIBODY PREPARATIONS
US9913903B2 (en) 2015-08-06 2018-03-13 Grifols Worldwide Operations Limited Method for the treatment or prevention of infection-related immune conditions using a composition comprising IgM

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6307028B1 (en) * 1997-06-20 2001-10-23 Bayer Corporation Incorporated Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
US20080145370A1 (en) * 2006-12-13 2008-06-19 Simon Michael R SYNTHESIS OF HUMAN SECRETORY IgM AND THE TREATMENT OF COLSTRIDIUM DIFFICILE ASSOCIATED DISEASES HEREWITH

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A.NORRBY-TEGLUND等: "Intravenous polyclonal IgM-enriched immunoglobulin therapy in sepsis: a review of clinical efficacy in relation to microbiological aetiology and severity of sepsis", 《JOURNAL OF INTERNAL MEDICINE》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113490509A (zh) * 2018-11-30 2021-10-08 瑞士杰特贝林生物制品有限公司 使用多克隆免疫球蛋白预防或治疗急性加重的方法和组合物
CN114747535A (zh) * 2022-03-29 2022-07-15 华南理工大学 一种急性脓毒症非人灵长类动物模型及其构建方法
CN114747535B (zh) * 2022-03-29 2024-03-22 华南理工大学 一种急性脓毒症非人灵长类动物模型及其构建方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20200237912A1 (en) 2020-07-30
RU2016131197A (ru) 2018-02-01
SG10201606200RA (en) 2017-03-30
AU2016208291B2 (en) 2022-04-28
KR20170017832A (ko) 2017-02-15
SG10202001028QA (en) 2020-04-29
US20190358325A1 (en) 2019-11-28
JP2017036263A (ja) 2017-02-16
EP3150629A2 (en) 2017-04-05
US10660956B2 (en) 2020-05-26
EP3150629A3 (en) 2017-04-19
CL2016001977A1 (es) 2017-03-17
EP4036110A1 (en) 2022-08-03
JP6901245B2 (ja) 2021-07-14
RU2733377C2 (ru) 2020-10-01
AR105596A1 (es) 2017-10-18
RU2016131197A3 (zh) 2019-12-17
MX2016009888A (es) 2017-02-06
BR102016017840A2 (pt) 2017-02-07
IL246918A0 (en) 2016-12-29
IL246918B (en) 2021-02-28
TW201705984A (zh) 2017-02-16
UY36801A (es) 2016-09-30
CA2936745A1 (en) 2017-02-06
US20170035882A1 (en) 2017-02-09
US20230077855A1 (en) 2023-03-16
US20180153991A1 (en) 2018-06-07
AU2016208291A1 (en) 2017-02-23
TWI722003B (zh) 2021-03-21
US9913903B2 (en) 2018-03-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106421780A (zh) 使用包含IgM的组合物治疗或预防感染相关免疫状况的方法
Brillard et al. Two distinct hemolytic activities in Xenorhabdus nematophila are active against immunocompetent insect cells
Vey et al. Effects of the peptide mycotoxin destruxin E on insect haemocytes and on dynamics and efficiency of the multicellular immune reaction
Woloski et al. Identification and partial characterization of hepatocyte-stimulating factor from leukemia cell lines: comparison with interleukin 1.
CN104144940B (zh) 来自野野村菌的环肽、其制备方法以及含有该环肽的用于预防或治疗分支杆菌相关疾病的药物组合物
Jiehui et al. Immunomodulating effects of casein-derived peptides QEPVL and QEPV on lymphocytes in vitro and in vivo
US20100111870A1 (en) Evaluation method and screening method for substance having action of activating/suppressing innate immunity, agent and food product for activating/suppressing innate immune mechanism and method for producing the same
Fiorentini et al. Interaction of Clostridium difficile toxin A with cultured cells: cytoskeletal changes and nuclear polarization
Stączek et al. Studies on localization and protein ligands of Galleria mellonella apolipophorin III during immune response against different pathogens
Hink et al. Bactericidal factors in haemolymph from normal and immune wax moth larvae, Galleria mellonella
Umeyama et al. In vitro antitrypanosomal activity of the cyclodepsipeptides, cardinalisamides A–C, from the insect pathogenic fungus Cordyceps cardinalis NBRC 103832
Antonello et al. Entomopathogenic bacteria Photorhabdus luminescens as drug source against Leishmania amazonensis
Ramírez-Bello et al. Macrophage alteration induced by inflammatory toxins isolated from Tityus discrepans scorpion venom. The role of Na+/Ca2+ exchangers
AT397803B (de) Humaner monoklonaler antikörper und hybridom zur herstellung desselben
Zhang et al. Microbiome: role in inflammatory skin diseases
CN106421779A (zh) 用含血浆来源免疫球蛋白M(IgM)的组合物治疗传染病的方法
CN102596904A (zh) 蛋白酶抑制剂、组合物及使用方法
Nôga et al. Anticonvulsant effects of fractions isolated from Dinoponera quadriceps (Kempt) ant venom (Formicidae: Ponerinae)
Krifi et al. New procedures and parameters for better evaluation of Androctonus australis garzonii (Aag) and Buthus occitanus tunetanus (Bot) scorpion envenomations and specific serotherapy treatment
CN104062433A (zh) 一种具备钙通道抑制功能的动物活性肽的鉴定方法
CN110464729B (zh) 天然酸性糖脂分子在中和产气荚膜梭菌Epsilon毒素中的应用
Andrejko et al. Diverse susceptibility of Galleria mellonella humoral immune response factors to the exoproteinase activity of entomopathogenic and clinical strains of Pseudomonas aeruginosa
Lipps Isolation of subunits, α, β and γ of the complex taipoxin from the venom of Australian taipan snake (Oxyuranus s. scutellatus): Characterization of β taipoxin as a potent mitogen
Kim et al. A moonlighting protein secreted by a nasal microbiome fortifies the innate host defense against bacterial and viral infections
Shanmugaraju et al. Partial purification and characterization of Anti-MRSA peptide from marine Pseudomonas aeruginosa

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination