CN106110389A - 一种皮肤创面用的湿性敷料及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物敷料领域，具体涉及一种皮肤创面用的湿性敷料及其制备方法，所述湿性敷料其包括以下组分：0.05‑0.3wt％的龙血竭、0.0001‑0.001wt％的表皮生长因子、1‑5wt％的凝胶基质、2‑10wt％的保湿剂、0.5‑5wt％的促渗剂、0.01‑2wt％的抑菌剂，余量为注射用水。本发明制备的湿性敷料可改善局部血液循环，改善局部营养状态，促进肉芽组织生长，加速创面愈合，临床效果显著。

Description

一种皮肤创面用的湿性敷料及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于药物敷料领域，具体涉及一种皮肤创面用的湿性敷料及其制备方法。

背景技术

皮肤创面不愈形成溃疡，有几个方面原因：手术切口、创面的感染、脂肪液化以及下肢静脉曲张。创面愈合大致可分为4个渐次发生而又相互重叠的过程，即止血、炎症反应、增殖、重塑。糖尿病溃疡的修复需要有充足的血液供应和良好的创面愈合环境。近年来，不断有研究发现创面局部生长因子缺乏和活性下降等因素是造成创面愈合困难的重要原因，每位糖尿病患者在其生命周期中发生溃疡的比例为15％。糖尿病溃疡一旦发生，治疗非常困难，容易形成慢性溃疡且复发率高。糖尿病足溃疡治疗的重点：一是改善局部血液循环和营养，二是抗感染。

过去传统的伤口治疗原则为干燥愈合，就是让伤口保持干燥结痂，促进伤口愈合，由于伤口渗液的蒸发而形成干痂，敷料易粘连创面，换药时容易损伤新生肉芽组织，导致伤口愈合速度缓慢及患者疼痛。现在随着创面护理的研究发展，提倡湿性愈合理论，认为湿性环境更容易促进伤口的愈合。原因在于湿性愈合时，保留在创面的渗出物含有组织蛋白溶解酶，促进坏死组织和纤维蛋白的溶解，有利于吸收和起到清创的作用。湿性环境通常是在闭合性的敷料下形成，伤口微环境常形成低氧张力，在相对低氧环境下，成纤维细胞生长的速度最快并刺激巨噬细胞释放多种生长因子，加速血管形成，促进肉芽组织的形成同时湿性的环境保持了创面的恒温，利于组织的无结痂愈合，避免了新生肉芽组织再次机械性损伤，减轻疼痛。

血竭又名麒麟竭，龙血竭为纯中药制剂，系百合科龙血树属植物剑叶龙血树的含脂木材提取得到的树脂，具有活血化瘀、消肿止痛、收敛止血、软坚散结和生肌敛疮等显著功效；现代医学研究证实龙血竭中含有的龙血竭皂甙具有明显的抗菌镇痛作用；植物防卫素含***成分，属于天然的抗菌防腐物质，具有去腐生肌作用。已有多项研究证实，龙血竭对糖尿病足溃疡、难愈性皮肤创面、压疮等皮肤损伤有良好愈合疗效。对血竭粉进行超微化处理，使其粒径变小，暴露面积增大，增大皮肤接触面，溶出物增加，提高疗效。

重组人表皮生长因子是一类具有促进细胞增殖分化及伤口的血管化等生物活性的多肽或蛋白质，对创伤修复起重要的调控作用，可明显促进上皮细胞、成纤维细胞等的增殖、分化和迁移，促进新生肉芽组织形成和伤口的再上皮化，加速皮肤组织的创伤愈合。但重组人表皮生长因子无去腐生肌的作用，用于大量坏死组织的创面欠佳，而龙血竭胶囊由天然植物中药龙血树有效成份研制而成，含有血竭皂苷和植物防卫素等多种活性成份，具有抗炎去腐生肌、活血化瘀、散痛止血功效，两者合用充分发挥了去腐生肌、促进组织愈合的作用，可改善局部血液循环，改善局部营养状态，促进肉芽组织生长，加速创面愈合，临床效果明显。

发明内容

本发明主要提供了一种皮肤创面用的湿性敷料及其制备方法，制备的敷料可改善局部血液循环，改善局部营养状态，促进肉芽组织生长，加速创面愈合，临床效果显著。其技术方案如下：

一种皮肤创面用的湿性敷料，其包括以下组分：0.05-0.3wt％的龙血竭、0.0001-0.001wt％的表皮生长因子、1-5wt％的凝胶基质、2-10wt％的保湿剂、0.5-5wt％的促渗剂、0.01-2wt％的抑菌剂，余量为注射用水。

优选的，所述龙血竭为龙血竭超微粉，所述龙血竭超微粉的粒径不大于10μm。

优选的，所述表皮生长因子选自重组人表皮生长因子和成纤维细胞生长因子中的一种或两种，所述表皮生长因子的质量浓度为1000-10000IU/ml。

优选的，所述凝胶基质选自羟甲基纤维素、羟丙甲纤维素、卡波姆和玻璃酸钠中的一种或几种。

优选的，所述保湿剂为甘油和/或丙二醇。

优选的，所述促渗剂选自丙二醇、氮酮和尿素中的一种或几种。

优选的，所述抑菌剂选自尼泊金酯类、苯甲酸/苯甲酸钠、季铵盐-15、乳酸链球菌素和苯扎溴铵中的一种或几种。

优选的，所述湿性敷料的pH为5.5-7.5，采用氢氧化钠、盐酸、硼酸缓冲液或磷酸缓冲液调节。

一种皮肤创面用的湿性敷料的制备方法，包括以下步骤：

(1)先使用气流粉碎机干法粉碎龙血竭，得粗粒，然后使用球磨机干法研磨粗粒，得龙血竭超微粉粒径不大于10μm，干粉收集待用；

(2)量取配方量40-50％的注射用水，加热至70-90℃，将配方量凝胶基质加入其中，搅拌直至成为凝胶基质；

(3)量取40-50％的注射用水，将处方量表皮生长因子、保湿剂、促渗剂、抑菌剂加入其中，搅拌均匀；

(4)将(3)中配制的溶液倒入(2)制备的凝胶基质中，再加入步骤(1)制备的龙血竭超微粉，搅拌并调节pH至5.5-7.5；

(4)补足注射用水，搅拌均匀，灌装，即得湿性敷料。

采用上述治疗皮肤溃疡的湿性敷料及其制备方法，本发明具有以下优点：

在敷料中加入表皮生长因子，能够促进皮肤组织修复，生物相容性好，且龙血竭能弥补生长因子治疗皮肤溃疡的缺陷，微粉化处理后，显著提高药效，起到高效治疗效果；凝胶基质为网状结构，药物溶解其中可通过凝胶层持续释药，延长药物作用时间，保持创口在湿润环境下，有利于伤口愈合，使伤口不会结痂。本发明的湿性敷料可以直接涂抹于创口表面，也可以联合医用透明贴膜和纱布使用，防止药物被洗掉或擦掉。

具体实施方式

实施例1

1.血竭0.17wt％、重组人表皮生长因子0.0004wt％、羟甲基纤维素1.7wt％、甘油2wt％、氮酮0.5wt％、尼泊金乙酯1wt％、5％NaOH调节pH为6.0，余量为注射用水。

2.操作方法：

(1)在温度20℃，相对湿度45％的条件下，使用气流粉碎机，干法粉碎龙血竭1h，粉碎后粒径约10μm，然后在环境温度20℃，相对湿度35％的条件下，使用球磨机，转速为1000rpm/min干法研磨5次，每次研磨5min，使血竭粉粒径小于10μm，干粉收集待用；

(2)量取配方量40％重量的注射用水，加热至80℃，将处方量羟甲基纤维素加入其中，边搅拌边降温，搅拌速率200rpm，待降至常温后即为凝胶基质；

(3)量取处方量50％的注射用水，将处方量生长因子、甘油、氮酮、尼泊金乙酯加入其中，搅拌均匀；

(4)将(3)中溶液倒入(2)中，再加入处方量血竭粉，搅拌20分钟，加5％氢氧化钠或盐酸调节pH为6.0；

(5)补足注射用水，搅拌均匀，灌装，即得湿性敷料。

实施例2

1.血竭0.3wt％、重组人表皮生长因子0.001wt％、羟丙甲纤维素5wt％、甘油5wt％、尿素2wt％、乳酸链球菌素0.01wt％、5％NaOH调节pH为7.0，余量为注射用水。

2.操作方法：

(1)在温度10℃，相对湿度25％的条件下，使用气流粉碎机，干法粉碎龙血竭1h，粉碎后粒径约10μm，然后在环境温度15℃，相对湿度55％的条件下，使用球磨机，转速为1200rpm/min干法研磨4次，每次研磨6min，血竭粉粒径小于10μm，干粉收集待用；

(2)量取处方量60％的注射用水，加热至90℃，将处方量羟丙甲纤维素加入其中，边搅拌边降温，搅拌速率300rpm，待降至常温后即为凝胶基质；

(3)量取处方量40％的注射用水，将处方量生长因子、甘油、氮酮、乳酸链球菌素加入其中，搅拌均匀；

(4)将(3)中溶液倒入(2)中，再加入处方量血竭粉，搅拌20分钟，加5％氢氧化钠或盐酸调节pH为7.0；

(5)搅拌均匀，灌装，即得湿性敷料。

实施例3

1.龙血竭0.05wt％、重组人表皮生长因子0.0001wt％、卡波姆3wt％、甘油4wt％、丙二醇6wt％、苯甲酸钠2wt％、磷酸缓冲液调节pH至5.5，余量为注射用水。

2.操作方法：

(1)在温度10℃，相对湿度65％的条件下，使用气流粉碎机，干法粉碎血竭1h，粉碎后粒径约10μm，然后在环境温度30℃，相对湿度55％的条件下，使用球磨机，转速为700rpm/min干法研磨6次，每次研磨2min，血竭粉粒径小于10μm，干粉收集待用；

(2)量取处方量40％的注射用水，加热至80℃，将处方量卡波姆加入其中，边搅拌边降温，搅拌速率200rpm，待降至常温后即为凝胶基质；

(3)量取处方量40％的注射用水，将处方量生长因子、甘油、丙二醇、苯甲酸钠加入其中，搅拌均匀；

(4)将(3)中溶液倒入(2)中，再加入处方量血竭粉，搅拌15分钟，加磷酸缓冲液调节pH为5.5；

(5)补足注射用水，搅拌均匀，灌装，即得。

实施例4

1.龙血竭0.24，成纤维细胞生长因子0.0008，玻璃酸钠2，丙二醇4，季铵盐-150.07，硼酸缓冲液调节溶液pH为7.5，余量为注射用水。

2.操作步骤：

(1)在温度15℃，相对湿度25％的条件下，使用气流粉碎机，干法粉碎血竭1h，粉碎后粒径约10μm，然后在环境温度15℃，相对湿度25％的条件下，使用球磨机，转速为800rpm/min干法研磨4次，每次研磨4min，血竭粉粒径小于10μm，干粉收集待用；

(2)量取处方量50％的注射用水，将处方量玻璃酸钠加入其中，搅拌速率1500rpm，直至成为凝胶基质；

(3)量取处方量40％的注射用水，将处方量生长因子、甘油、丙二醇、季铵盐-15加入其中，搅拌均匀；

(4)将(3)中溶液倒入(2)中，再加入处方量血竭粉，搅拌18分钟，加5硼酸缓冲液调节pH为7.5；

(5)补足注射用水，搅拌均匀，灌装，即得。

药效学实验

一、考察制剂对大鼠创面损伤修复作用

1.样品：实验组：按照本实施例1制备的敷料样品；阳性对照组：生长因子敷料(除不含血竭，其余处方同实施例1)；阴性对照组：无菌生理盐水。

2.动物：健康成年SD大鼠30只，体重200-250g，雄性。

3.操作：

将30只大鼠随机分为3组，各10只，组内编号，分别为试验组、阳性对照组、阴性对照组。3组大鼠腹部注射麻醉后，于背部两侧制作机械性全层皮肤创面，创面直径2cm，呈圆形，深及皮下肌筋膜，用无菌纱布压迫止血。试验组及阳性对照组用相应湿性敷料覆盖，外层无菌敷料包扎，对照组以0.2mL生理盐水载入纱布覆盖创面，隔日更换。造模时及造模后第3、6、10、16天测定创面愈合率，造模后第3、6天测创面炎症积分，造模时及造模后第3、6、10天取创面组织用于检测I/Ⅲ型胶原比例。①创面愈合率计算：用Image J软件测定创面面积，按下列公式计算创面愈合率：愈合率＝[(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积]×100％。②创面炎症积分：创面渗液性状分为血清样、浆液样、混浊样；渗液量为极少量、少量、中量、大量时分别计为1、2、3、4分，渗液量以浸透纱布的层数来观察(<1层为极少量，≥1层但<4层为少量，≥4层但<8层为中量，≥8层为大量)，创面愈合为0分。③创面I/Ⅲ型胶原比例测定：胶原提取采用乙酸-胃蛋白酶法，胶原检测采用酶联免疫吸附实验。

统计学分析：实验所得数据均以表示，用t检验比较组间差异，P≤0.05为差异有统计学意义。

4.结果：

(1)各组大鼠创面愈合率比较结果见表1。

由结果可见，治疗第3天，三组创面愈合率即有差别，试验组愈合率要高于其他两组，其创面内明显可见新生毛细血管、细胞；治疗第7天，各组愈合率均有明显提高，其中试验组愈合率已到75％，创缘上皮增殖更明显，创面内肉芽组织增多，成纤维细胞及毛细血管数目更多，愈合效果明显；治疗第10天，试验组愈合率已到90％以上，创面新生表皮细胞已基本覆盖伤口，并可见明显角化，阳性对照组创面胶原纤维也明显多于阴性对照组；治疗第16天，试验组基本完全愈合，阳性对照组愈合率也已达到95％，显著高于阴性对照组。

表1不同时间创面愈合率

注：与阴性对照组比较，p<0.01；与阳性对照组比较，p<0.05。

(2)各组大鼠创面炎症积分比较结果果见表2。

治疗第3天，阴性对照组创面积分较高，主要表现为创面有中等量浆液渗液，阳性对照组及试验组渗液明显少于阴性对照组，表现为少量血清液渗液；治疗第7天，各组创面渗液量均显著减少，阴性对照组仍有部分创面渗液为浆液样，其他2组均表现为极少量血清样渗液，其中试验组积分低于阳性对照组；治疗第10天，阴性对照组仍有少量渗液，其他两组创面趋向愈合，炎症不明显，其中试验组优于阳性对照组。

表2各组大鼠创面炎症积分比较

注：与阴性对照组比较，p<0.01；与阳性对照组比较，p<0.05。

(3)创面I/Ⅲ型胶原比例测定

皮肤中I、Ⅲ型胶原含量较高，在创面修复中以Ⅲ型胶原为主，当胶原中新生胶原增加时，I、Ⅲ型胶原比值降低。本实验结果见表3，结果可见，3组比值均呈下降趋势，明显试验组降低更明显。

表3各组创面I/Ⅲ型胶原比例测定表

注：与阴性对照组比较，p<0.01；与阳性对照组比较，p<0.05。

以上结果可见，生长因子联合血竭用于创面修复有显著促进创面愈合功效，抑制炎症等并发症发生，本制剂性能稳定，治疗效果显著。

二、考察制剂用于糖尿病皮肤溃疡治疗作用

1.样品：治疗组：按照本实施例3制备的湿性敷料，EGF凝胶组(不含龙血竭，其他组分同实施例3)，龙血竭组(不含生长因子，其他组分同实施例3)；

2.动物：健康成年SD大鼠30只，体重200-250g，雌雄各半。

3.操作：

造模以pH4.6的0.1mmol/L的枸橼酸缓冲液溶解链脲佐菌素(STZ)，配成1％溶液，选取42只SD大鼠以60mg/kg连续3d腹腔内注射诱导糖尿病，注射3d后尾静脉采血和收集尿液，用传统的氧化酶反应检测血糖水平。诱导后血糖水平>16.7mmol/L时，即可视为糖尿病模型建立成功。选取造模成功的大鼠36只制作糖尿病皮肤溃疡模型，将糖尿病大鼠用3％戊巴比妥钠溶液30mg/kg腹腔注射麻醉，背部剪毛，用75％乙醇擦拭消毒，在脊椎两侧做直径15mm的圆形标记，用外科方法切除标记处全层皮肤，止血后用无菌纱布覆盖，即成糖尿病皮肤溃疡模型。将36只糖尿病皮肤溃疡模型大水随机分为实验组、龙血竭组、EGF组，每组12只。用相应敷料覆盖创口表面，每天换药1次，疗程2周。

评价溃疡愈合面积的观察：各组动物分别于伤后第3、7、10、14天，用透明膜覆盖创面画膜、剪膜，称重量并换算成面积。

统计学方法用spss13.0统计软件进行统计分析，数据以表示，P≤0.05为差异有统计学意义。

4.结果：

(1)溃疡面愈合面积结果见表4所示。

治疗组创面面积减少明显较其他2组快，血竭组比EGF组愈合速率快，与EGF组比较，p<0.05；与血竭组比较，p<0.05差异有统计学意义。

表4各组溃疡创面愈合面积

由结果可知，血竭和生长因子联合使用对糖尿病皮肤溃疡的治疗效果优于单一组分，对临床用药有指导意义。

对本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及形变，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种皮肤创面用的湿性敷料，其包括以下组分：0.05-0.3wt％的龙血竭、0.0001-0.001wt％的表皮生长因子、1-5wt％的凝胶基质、2-10wt％的保湿剂、0.5-5wt％的促渗剂、0.01-2wt％的抑菌剂，余量为注射用水。

2.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述龙血竭为龙血竭超微粉，所述龙血竭超微粉的粒径不大于10μm。

3.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述表皮生长因子选自重组人表皮生长因子和成纤维细胞生长因子中的一种或两种，所述表皮生长因子的质量浓度为1000-10000IU/ml。

4.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述凝胶基质选自羟甲基纤维素、羟丙甲纤维素、卡波姆和玻璃酸钠中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述保湿剂为甘油和/或丙二醇。

6.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述促渗剂选自丙二醇、氮酮和尿素中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述抑菌剂选自尼泊金酯类、苯甲酸/苯甲酸钠、季铵盐-15、乳酸链球菌素和苯扎溴铵中的一种或几种。

8.根据权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料，其特征在于：所述湿性敷料的pH为5.5-7.5，采用氢氧化钠、盐酸、硼酸缓冲液或磷酸缓冲液调节。

9.一种如权利要求1所述的皮肤创面用的湿性敷料的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)先使用气流粉碎机干法粉碎龙血竭，得粗粒，然后使用球磨机干法研磨粗粒，得龙血竭超微粉粒径不大于10μm，干粉收集待用；

(2)量取配方量40-50％的注射用水，加热至70-90℃，将配方量凝胶基质加入其中，搅拌直至成为凝胶基质；

(3)量取40-50％的注射用水，将处方量表皮生长因子、保湿剂、促渗剂、抑菌剂加入其中，搅拌均匀；

(4)将(3)中配制的溶液倒入(2)制备的凝胶基质中，再加入步骤(1)制备的龙血竭超微粉，搅拌并调节pH至5.5-7.5；

(4)补足注射用水，搅拌均匀，灌装，即得湿性敷料。

10.权利要求1-8任一项所述的湿性敷料在制备治疗皮肤溃疡药物中的应用。