CN106074506A - 盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸***综合征冠状病毒的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了以阿比多尔为主要成分的药物及其在药学上可接受的盐在抗中东呼吸***综合征冠状病毒感染方面的应用。本发明首次发现盐酸阿比多尔对中东呼吸道病毒有抗病毒作用，可阻断中东呼吸***综合征冠状病毒感染宿主细胞，可用作治疗抗中东呼吸***综合征冠状病毒感染方面的疾病治疗。

Description

盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸***综合征冠状 病毒的药物中的应用
技术领域
本发明是关于盐酸阿比多尔在抗中东呼吸***综合征冠状病毒感染方面的应用，属于医药技术领域。
背景技术
中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome，MERS)，又称新沙士，2012年首次在伦敦发现，并命名为1号新型冠状病毒[Lodon1 novel CoV 2012]，其结构和SARS的病毒相似，源于中东。2013年5月23日，世界卫生组织将新型冠状病毒感染命名为“中东呼吸综合征”。冠状病毒在***分类上属冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)。冠状病毒属的病毒是具外套膜(envelope)的正链单股RNA病毒，直径约80～120nm，其遗传物质是所有RNA病毒中最大的，只感染人、鼠、猪、猫、犬、禽类脊椎动物。冠状病毒的一个变种是引起非典型肺炎的病原体，属于RNA病毒。冠状病毒最先是1937年从鸡身上分离出来，病毒颗粒的直径60-200nm，平均直径为100nm，呈球形或椭圆形，具有多形性。病毒有包膜，包膜上存在棘突，整个病毒像日冕，不同的冠状病毒的棘突有明显的差异。在冠状病毒感染细胞内有时可以见到管状的包涵体[Nederlands Tijdschrift VoorGeneeskunde,2014,158(158):A8119-A8119]。
中东呼吸***综合征冠状病毒(MERS-CoV)与其它冠状病毒类似，其形态结构为圆形或卵圆形，病毒颗粒直径大约60～220nm，核心为单股正链RNA，病毒的衣壳外面包含有糖蛋白组成的刺突样的结构，因其覆盖表面而使得整个病毒粒子在电镜下如皇冠样的形状，因而得名冠状病毒。中东呼吸***综合征冠状病毒的宿主源于中东单峰骆驼，其全基因组大小约为301Kb，至少包含有10个开放阅读框(open reading frame,ORF)，分别编码一个大的复制酶多聚蛋白、表面刺突糖蛋白、小包膜蛋白、外膜蛋白、核衣壳蛋白、及5个非结构蛋白等。其中由ORF1a/ORF1b编码的复制酶多聚蛋白包含两个多聚蛋白pp1a和pp1ab，然后由蛋白酶剪切为15或16个非结构蛋白产物NSP1-NSP16，而NSP12即为RNA依赖的RNA聚合酶[New England Journal of Medicine,2013,369(5):407-416]。
自2012年下半年开始，沙特***最先开始零星出现患有急性呼吸***综合征并伴随肾功能衰竭的病人，病原体检测显示这些患者均染有一种新病毒。它与人们熟知的非典病毒同属冠状病毒，但类型不同，其传染性弱于非典病毒，但病死率比非典高，达40％。此后，约旦、卡塔尔、阿联酋、突尼斯乃至法国、德国、英国、美国先后发现该病确诊病例。世界卫生组织将这一新型冠状病毒命名为“中东呼吸***综合征冠状病毒”。值得特别关注的是，这个疾病到现在没有可用的疫苗和药物治疗方法。在针对东呼吸***综合征冠状病毒(MERS-CoV)病毒药物研发方面，我们试探的去研究盐酸阿比多尔抗MERS-CoV病毒作用。
盐酸阿比多尔，已经被证实对多种病毒具有抗病毒广谱作用[Arbidol:a broad-spectrum antiviral compound that blocks viral fusion.Curr Med Chem.2008,15(10):997-1005]。其广谱性的作用机制源于它存在膜融合抑制作用[Membranefusion.Nature Structural&Molecular Biology.2008,15(7):658-64]。基于他的作用机制，我们假设他对中东呼吸***综合征冠状病毒依然有抗病毒作用机制。所以我们开展盐酸阿比多尔在中东呼吸***综合征冠状病毒抗病毒药效的应用性研究。
发明内容
本发明的目的在于提供盐酸阿比多尔在制备预防或治疗抗中东呼吸***综合征冠状病毒的药物中的应用。
具体而言，为解决的本发明的技术问题，采用如下技术方案：
本发明提供了如结构式(I)所示的盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸***综合征冠状病毒的药物中的应用。
所述的药物是以结构式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成分的药物。
上述的应用中，所述的药物是以结构式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成分的单体化合物
所述药物为结构式(I)所示的盐酸阿比多尔和药学上可接受的载体或赋形剂。
所述药物的剂型为丸剂、片剂、胶囊或口服液。
本发明的化合物的体外半数细胞毒性评价模型为MTT法半数细胞毒性的检测评价模型。
本发明所述的MTT法半数细胞毒性评价模型是指使用MTT染色剂能与活细胞线粒体结合，可定量检测出细胞的半数细胞毒性浓度(TC50)。
本发明化合物外抗病毒给药模型分别为预防给药模型，和治疗给药模型及预防与治疗混合模式。
本发明所述的预防与治疗混合模型是用200μL的倍比稀释的药物长满单层的24孔板细胞板作用24小时。后去除药物，加200μL病毒滴度为100TCID50/0.1mL的病毒液吸附两小时，去病毒液，换200μL的倍比稀释的药物的维持培养基，48小时后，观察细胞病变，收集病毒液，测试各组的TCID50病毒滴度，评价药物抑制率。
本发明通过运用体外三种抗病毒药效评价模型，评价盐酸阿比多尔化合物对中东呼吸***综合征冠状病毒抑制作用，首次发现盐酸阿比多尔对中东呼吸道病毒有抗病毒作用，可阻断中东呼吸***综合征冠状病毒感染宿主细胞，可用作治疗抗中东呼吸***综合征冠状病毒感染方面的疾病治疗。
附图说明
图1是盐酸阿比多尔抗中东呼吸***综合征冠状病毒感染模型。长满单层VERO细胞的24孔细胞板模型，黑色孔代表含孵育病毒及药物药效组，无色孔代表无药药物作用的病毒对照组，阴影线孔代表含无病毒孵育的药物毒性组。
具体实施方式
实施例1.药物评价原理
病毒扩增
将非洲绿猴肾细胞(VERO)按3X105个/孔，接种至96孔板中，置37℃，5％CO2培养，待长满单层。将中东呼吸***综合征冠状病毒临床分离株100倍稀释接种到长满单层细胞的96孔板中,置37℃，5％CO2培养两天(含正常对照组)。
两天后，病变程度高达75％以上，置-80℃超低温冰箱，反复冻融一次，收集细胞扩增的病毒液，3000r/min离心30分钟，去沉淀物，分装小管置-80℃超低温冰箱长期保存。
中东呼吸***综合征冠状病毒半数致死滴度(TCID50)测定
将非洲绿猴肾细胞(VERO)按3X105个/孔，接种至96孔板中，置37℃，5％CO2培养，待长满单层。加入十倍倍比稀释的MERS-CoV病毒液，100μL/孔，37℃孵育2小时或3000转离心1小时；弃去上清，加入新鲜培养液，100μL/孔，2日后观察结果，记录CPE。并用Reed-Muench计算病毒半数致死滴度(TCID50)[Reed LJ,Muench H.A simple method of estimatingfifty percent endpoints.Am J Hyg,1938,27(3):493-497]。
盐酸阿比多尔抗中东呼吸***综合征冠状病毒药效评价
96孔板单层细胞以PBS洗涤1次，加入含约100TCID50的病毒稀释液100μL/孔，37℃、5％CO2培养箱中孵育2小时，弃去病毒液，加入2倍梯度稀释的药物，每个浓度设置4个复孔，以最大无毒浓度为药物起始浓度，在34℃、5％CO2培养箱中孵育2天。记录细胞病变(Cytopathogenic Effect，CPE)。细胞出现CPE按6级标准记录(表1)。记录CPE后，用MTT染色，进行OD值测定。用Reed-Muench法计算药物半数有效浓度(IC50)，计算治疗指数(Selective Index，SI)：SI＝TC50/IC50)。[参照《药理实验方法学，徐叔云主编》，治疗指数(SI)>1表示有效]。
盐酸阿比多尔药物毒性评价
盐酸阿比多尔粉末用DMSO溶解后，加入培养液稀释至20mg/mL，DMSO终浓度为1％，经0.22μm滤膜过滤后置4℃保存；过滤后置4℃保存。按每孔约2.5×104细胞接种到96孔板，24～48h后待细胞长成单层后，弃去培养液，加入不同稀释度的药物100μL/孔，正常细胞对照孔加入100μL/孔MEM，37℃5％CO2继续培养2～5天，每孔加MTT溶液(5mg/mL)20μL，置37℃，5％CO2温箱中继续孵育4小时。吸弃培养上清液，每孔加100μL二甲基亚砜(DMSO)，低速振荡10分钟，使结晶物充分融解。选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值。按照下列公式计算抑制率，并用Reed-Muench法[2]计算50％毒性浓度为药物半数有毒浓度(TC50)。计算抑制率＝(正常组－给药组)/正常组×100％
盐酸阿比多尔药效评价
用200μL的倍比稀释的药物长满单层的24孔板细胞板作用24小时。后去除药物，加200μL病毒滴度为100TCID50/0.1mL的病毒液吸附两小时，去病毒液，换200μL的倍比稀释的药物的维持培养基，48小时后，观察细胞病变，收集病毒液，测试各组的TCID50病毒滴度，评价药物抑制率。
实施例2.盐酸阿比多尔抗病毒模型的实验结果
盐酸阿比多尔药物毒性评价
盐酸阿比多尔以DMSO溶解后，完全溶解，无色澄清，加入培养液过滤后，有少许白色析出，震荡均匀溶液澄清。盐酸阿比多尔在非洲绿猴肾细胞(VERO)的半数有毒浓度(TC50)为(61.3±0.02)μM，最大无毒浓度为48.25μM。
中东呼吸***综合征冠状病毒半数致死滴度(TCID50)测定
通过Reed-Muench方法学，检测出扩增的中东呼吸***综合征冠状病毒为105.25TCID50/0.1mL。
盐酸阿比多尔抗中东呼吸***综合征冠状病毒药效评价
通过MDCK细胞病变抑制法及MTT法对盐酸阿比多尔进行药效评价，对中东呼吸***综合征冠状病毒(MERS-CoV)的半数有效浓度IC50分别为12.82±1.12μM、16.27±1.08μM，治疗指数分别是4.78、3.77，有效(见表1)
表1.MDCK细胞病变抑制法及MTT法对阿比多尔进行药效评价
盐酸阿比多尔抗中东呼吸***综合征冠状病毒活性评价
预防与治疗混合模型，LOGTCID50/30μL结果显示，45.12μM浓度的盐酸阿比多尔的上清液的MERS-CoV病毒为0，完全抑制，22.56μM、11.28μM浓度的盐酸阿比多尔的上清液清液的MERS-CoV病毒分别为1.38±0.01、3.6±0.02，说明盐酸阿比多尔阻断中东呼吸***综合征冠状病毒感染活性，具体见表2。
表2盐酸阿比多尔阻断中东呼吸***综合征冠状病毒感染活性

Claims (6)

1.如结构式(1)所示的盐酸阿比多尔在制备预防和治疗抗中东呼吸***综合征冠状病毒的药物中的应用,
其中：其中HO-代表羟基，Br-代表溴。
2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的药物是以结构式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成分的药物,
3.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述药物为盐酸阿比多尔及其药学可可接受的盐及其在药学上可接受的载体或赋形剂。
4.一种用于预防和治疗抗中东呼吸综合症冠状病毒的的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有如式(I)所示的盐酸阿比多尔，
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物以式(I)所示的盐酸阿比多尔作为有效成份，
6.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有以式(I)所示的盐酸阿比多尔及其药学可可接受的盐及其在药学上可接受的载体或赋形剂。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111387223A (zh) * 2020-04-03 2020-07-10 四川知本生物工程有限公司 一种阿比朵尔消毒液体或凝胶及其制备方法与应用
CN113456817A (zh) * 2020-03-30 2021-10-01 华东理工大学 抗rna病毒药物的dhodh抑制剂及其应用
CN113769121A (zh) * 2020-09-18 2021-12-10 中国原子能科学研究院 针对冠状病毒或流感病毒引发疾病的放射性治疗药物及其制备方法
CN113456817B (zh) * 2020-03-30 2024-05-10 华东理工大学 抗rna病毒药物的dhodh抑制剂及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1457777A (zh) * 2003-05-12 2003-11-26 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 吲哚类衍生物作为抗传染性非典型肺炎药物的新用途
CN1552321A (zh) * 2003-06-05 2004-12-08 中奇制药技术（石家庄）有限公司 阿比朵尔在制备预防和治疗sars病毒药物中的用途
RU2256451C1 (ru) * 2004-04-21 2005-07-20 Закрытое акционерное общество "Мастерлек" Лекарственное средство для лечения атипичной пневмонии

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1457777A (zh) * 2003-05-12 2003-11-26 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 吲哚类衍生物作为抗传染性非典型肺炎药物的新用途
CN1552321A (zh) * 2003-06-05 2004-12-08 中奇制药技术（石家庄）有限公司 阿比朵尔在制备预防和治疗sars病毒药物中的用途
RU2256451C1 (ru) * 2004-04-21 2005-07-20 Закрытое акционерное общество "Мастерлек" Лекарственное средство для лечения атипичной пневмонии

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JULIE BLAISING ET AL.: "Arbidol as a broad-spectrum antiviral: An update", 《ANTIVIRAL RESEARCH》 *
LU LU ET AL.: "Structure-based discovery of Middle East respiratory syndrome coronavirus fusion inhibitor", 《NATURE COMMUNICATIONS》 *
MAHMOUD ARASTOO: "Combination of IMOD(TM) and Arbidol to increase their immunomodulatory effects as a novel medicine to prevent and cure influenza and some other infectious disease", 《JOURNAL OF MEDICINE HYPOTHESES AND IDEAS》 *
Y.S. BORISKIN ET AL.: "Arbidol: A Broad-Spectrum Antiviral Compound that Blocks Viral Fusion", 《CURRENT MEDICINAL CHEMISTRY》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113456817A (zh) * 2020-03-30 2021-10-01 华东理工大学 抗rna病毒药物的dhodh抑制剂及其应用
CN113456817B (zh) * 2020-03-30 2024-05-10 华东理工大学 抗rna病毒药物的dhodh抑制剂及其应用
CN111387223A (zh) * 2020-04-03 2020-07-10 四川知本生物工程有限公司 一种阿比朵尔消毒液体或凝胶及其制备方法与应用
CN113769121A (zh) * 2020-09-18 2021-12-10 中国原子能科学研究院 针对冠状病毒或流感病毒引发疾病的放射性治疗药物及其制备方法
CN113769121B (zh) * 2020-09-18 2022-10-28 中国原子能科学研究院 针对冠状病毒或流感病毒引发疾病的放射性治疗药物及其制备方法

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