CN105993633A - 新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法 - Google Patents

新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法 Download PDF

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CN105993633A CN201610579304.7A CN201610579304A CN105993633A CN 105993633 A CN105993633 A CN 105993633A CN 201610579304 A CN201610579304 A CN 201610579304A CN 105993633 A CN105993633 A CN 105993633A
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王立
黄宏健
谭沛涛
胡杨
陈小玲
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
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    • A01G2/00—Vegetative propagation
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    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
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    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/005—Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques

Abstract

本发明涉及新会大红柑育苗繁殖技术领域，具体涉及一种新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法。所述微嫁接方法主要包括如下步骤：取目标植株的1‑2mm茎尖，采用改良MT培养基预培养，投入液氮脱毒，恢复接种到继代培养基中培养；砧木种子消毒，灭菌，萌发；将新会大红柑腋芽发育好的丛生芽嫁接到砧木上，再进行试管内液体培育苗。本培养法采用改良MT培养基预培养，改良之后继代增值系数大于4，基本没有出现玻璃化现象，变异也大大减少；本培养法使得植物根系更加发达，抗恶劣环境性强，更容易适应南方潮湿多雨的气候环境，成活率也大大提高。

Description

新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法
技术领域
本发明涉及柑橘育苗繁殖技术领域，具体涉及一种新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法。
背景技术
新会陈皮是新会大红柑的干果皮，因其品质独特，早在明清以前就已蛮声遐迩，并被列为“贡品”，行销国内外。
柑皮以贮藏的时间越久越好，故称“陈皮”。陈皮以广东所产为佳。历史贸易中特称“广陈皮”，以别于其他省所产。
新会大红柑的果皮就是新会的著名特产—陈皮。由于它具有很高的药用价值，又是传统的香料和调味佳品，所以向来享有盛誉。早在宋代就已成为南北贸易的“广货”之一，行销全国和南洋、美洲等地区。而“广陈皮”又以新会陈皮为上品，故清代大医师叶天士所开的中药“二陈汤”，特别写明“新会皮”。因不是新会所产的其药效远逊，且乏香味而痹口(即苦辣味)，所以新会陈皮价格较高，皮比肉贵。
柑橘遗传转化是建立在受体***发展的基础上，具有良好的组织培养再生***往往是获得成功的关键，受体***的品种特异性及再生效率低使新会大红柑遗传转化受到极大的限制。传统的柑橘嫁接多是用热处理脱毒，然后在田间茎尖嫁接，切开暴露在空气中，细菌或者病毒容易通过切开感染或者潜伏，成活率较低，在南方潮湿多雨的气候环境中更容易出现上述问题。新会大红柑的根系不发达，怕干旱，又怕洪涝，如何使得新会大红柑的果皮发育更好，且提高其色泽和品质，具有重要的研究意义。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种抗恶劣环境性强、成活率高、利于提高果皮发育和品质的新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法。
为实现上述技术目的，本发明采用以下的技术方案：
新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，主要包括如下步骤：
步骤一、脱毒新会大红柑丛生芽的获得：
将消毒、灭菌处理的新会大红柑母枝在超净工作台上切取茎尖1-2mm，转移到改良MT培养基中预培养，在4℃黑暗条件下进行预培养3-5天后，将茎尖组织转移到保护培养基中冰冻适应1h，后将其转移到冷冻管并迅速投入液氮中，使茎尖组织快速降温到-196℃并持续1h，然后再快速转移到45℃水中解冻恢复，然后接种到继代培养基中，25℃暗培养一周后进行常规光照培养，获得脱毒新会大红柑丛生芽；
步骤二、砧木选择：
将柠檬或香橙种子在超净工作台经酒精、升汞消毒后接种到1/2MS培养基，待种子萌发后挑选出粗壮、生长状态好的幼苗，待幼苗生长到第二片真叶形成后，作为接种砧木待微嫁接；
步骤三、微嫁接：
在超净工作台上放置接种槽，然后在接种槽内放置灭菌的糯米纸并将糯米纸固定在接种槽内，将步骤二的接种砧木在距离根部4-5cm处截断，放置在糯米纸上；再将步骤一继代增殖得到的脱毒新会大红柑丛生芽的形成层对齐砧木并***砧木切口内，压实砧木和脱毒新会大红柑丛生芽后，将糯米纸对折固定，获得微嫁接苗；
步骤四、培养移栽：
向试管内注入1/4体积的液体培养液，并环形放入2cm滤纸作为固定，经灭菌后，将步骤三获得的微嫁接苗，转移到液体培养液中，置于温度25℃、光照强度为2500-3000lux的恒温环境下培养30天，待砧木根部开始生长，丛生芽叶片正常舒展生长后，置于自然光中炼苗30天后，即可洗苗移栽，移栽成活率接近100％。
其中，步骤一中，所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO31700-1800mg/L；KNO3 1800-2000mg/L；CaCl2·2H2O 8300-8500mg/L；MgSO4·7H2O7300-7500mg/L；KH2PO4 3150-3200mg/L；KI 0.80-0.90mg/L；H3BO3 6.0-6.5mg/L；MnSO4·4H2O 22.0-23.0mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.2-0.3mg/L；CuSO4·5H2O0.02-0.03mg/L；CoCl2·6H2O 0.02-0.03mg/L；FeSO4·7H2O 27.0-28.0mg/L；Na2-EDTA 37.0-38.0mg/L；烟酸4-6mg/L；盐酸吡哆醇19-21mg/L；盐酸硫胺素0.3-0.5mg/L；甘氨酸1.5-2.5mg/L。
作为优选，步骤一中，所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO31750mg/L；KNO3 1900mg/L；CaCl2·2H2O 8400mg/L；MgSO4·7H2O 7400mg/L；KH2PO4 3180mg/L；KI 0.83mg/L；H3BO3 6.3mg/L；MnSO4·4H2O 22.6mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L；CuSO4·5H2O 0.025mg/L；CoCl2·6H2O 0.025mg/L；FeSO4·7H2O 27.8mg/L；Na2-EDTA 37.3mg/L；烟酸5mg/L；盐酸吡哆醇20mg/L；盐酸硫胺素0.4mg/L；甘氨酸2mg/L。
作为优选，步骤一中，所述保护培养基的配方为：改良MT培养基+30(wt)％甘油+15(wt)％乙二醇+15(wt)％二甲基亚砜+蔗糖50g/L。
作为优选，步骤一中，所述继代培养基的配方为：改良MT培养基+BA2mg/L+NAA 0.05mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖50g/L。
作为优选，步骤四中，所述液体培养液的配方为：改良MT培养基+IBA 0.5mg/L。
本发明具有至少以下有益效果：
(1)本培养法将新会大红柑母枝通过改良MT培养基预培养，经过液氮脱毒、解冻恢复，利用柠檬/香橙作为砧木，大大提高了抗恶劣环境性，提高了结果时期果皮发育和品质，避免了“传统的新会大红柑嫁接多是用热处理脱毒，然后在田间茎尖嫁接，切开暴露在空气中，细菌或者病毒容易通过切开感染或者潜伏”的问题；
(2)本培养法采用改良MT培养基预培养，改良之后继代增值系数大于4，基本没有出现玻璃化现象，变异也大大减少，而且让新会大红柑的果皮发育更好，色泽和品质更优秀；解决了现有技术中“用一般的MS培养基培养，腋芽叶片容易脱落，玻璃化或者变异；用传统MT培养基培养虽然玻璃化程度都有所降低，但和生长调节剂搭配后容易出现徒长，变异概率减少不明显”的问题。
(3)本操作整个过程都在无菌环境进行，保证苗木嫁接过程不受病原体的入侵，没有了潜在危险。通过水培让植物根系发达，更容易适应南方潮湿多雨的气候环境，成活率大大提高。
具体实施方式
在下面的详细描述中，只通过说明的方式描述了本发明的某些示范性实施例。描述在本质上是说明性的，而不是用于限制权利要求的保护范围。
实施例1
新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，主要包括如下步骤：
步骤一、脱毒新会大红柑丛生芽的获得：
将消毒、灭菌处理的新会大红柑母枝在超净工作台上切取茎尖2mm，转移到改良MT培养基中预培养，在4℃黑暗条件下进行预培养3天后，将茎尖组织转移到保护培养基中冰冻适应1h，后将其转移到冷冻管并迅速投入液氮中，使茎尖组织快速降温到-196℃并持续1h，然后再快速转移到45℃水中解冻恢复，然后接种到继代培养基中，25℃暗培养一周后进行常规光照培养，获得脱毒新会大红柑丛生芽；严格控制上述培养条件，利于提高了后期苗的抗恶劣环境性及结果时期坐果率和品质；
所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO3 1700mg/L；KNO3 1800mg/L；CaCl2·2H2O 8300mg/L；MgSO4·7H2O 7300mg/L；KH2PO4 3150mg/L；KI 0.80mg/L；H3BO3 6.0mg/L；MnSO4·4H2O 22.0mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.2mg/L；CuSO4·5H2O 0.02mg/L；CoCl2·6H2O 0.02mg/L；FeSO4·7H2O 27.0mg/L；Na2-EDTA37.0mg/L；烟酸4mg/L；盐酸吡哆醇19mg/L；盐酸硫胺素0.3mg/L；甘氨酸1.5mg/L；
所述保护培养基的配方为：改良MT培养基+30(wt)％甘油+15(wt)％乙二醇+15(wt)％二甲基亚砜+蔗糖50g/L；
所述继代培养基的配方为：改良MT培养基+BA 2mg/L+NAA 0.05mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖50g/L；
步骤二、砧木选择：
将柠檬或香橙种子在超净工作台经酒精、升汞消毒后接种到1/2MS培养基，待种子萌发后挑选出粗壮、生长状态好的幼苗，待幼苗生长到第二片真叶形成后，作为接种砧木待微嫁接；
步骤三、微嫁接：
在超净工作台上放置接种槽，然后在接种槽内放置灭菌的糯米纸并将糯米纸固定在接种槽内，将步骤二的接种砧木在距离根部4-5cm处截断，放置在糯米纸上；再将步骤一继代增殖得到的脱毒新会大红柑丛生芽的形成层对齐砧木并***砧木切口内，压实砧木和脱毒新会大红柑丛生芽后，将糯米纸对折固定，获得微嫁接苗；
步骤四、培养移栽：
向试管内注入1/4体积的液体培养液，并环形放入2cm滤纸作为固定，经灭菌后，将步骤三获得的微嫁接苗，转移到液体培养液中，置于温度25℃、光照强度为2500-3000lux的恒温环境下培养30天，待砧木根部开始生长，丛生芽叶片正常舒展生长后，置于自然光中炼苗30天后，即可洗苗移栽，移栽成活率99％。
其中，所述液体培养液的配方为：改良MT培养基+IBA 0.5mg/L。
实施例2
新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，主要包括如下步骤：
步骤一、脱毒新会大红柑丛生芽的获得：
将消毒、灭菌处理的新会大红柑母枝在超净工作台上切取茎尖1mm，转移到改良MT培养基中预培养，在4℃黑暗条件下进行预培养5天后，将茎尖组织转移到保护培养基中冰冻适应1h，后将其转移到冷冻管并迅速投入液氮中，使茎尖组织快速降温到-196℃并持续1h，然后再快速转移到45℃水中解冻恢复，然后接种到继代培养基中，25℃暗培养一周后进行常规光照培养，获得脱毒新会大红柑丛生芽；
所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO3 1800mg/L；KNO3 2000mg/L；CaCl2·2H2O 8500mg/L；MgSO4·7H2O 7500mg/L；KH2PO4 3200mg/L；KI 0.90mg/L；H3BO3 6.5mg/L；MnSO4·4H2O 23.0mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.3mg/L；CuSO4·5H2O 0.03mg/L；CoCl2·6H2O 0.03mg/L；FeSO4·7H2O 28.0mg/L；Na2-EDTA38.0mg/L；烟酸6mg/L；盐酸吡哆醇21mg/L；盐酸硫胺素0.5mg/L；甘氨酸2.5mg/L；
所述保护培养基的配方为：改良MT培养基+30(wt)％甘油+15(wt)％乙二醇+15(wt)％二甲基亚砜+蔗糖50g/L；
所述继代培养基的配方为：改良MT培养基+BA 2mg/L+NAA 0.05mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖50g/L；
步骤二、砧木选择：
将柠檬或香橙种子在超净工作台经酒精、升汞消毒后接种到1/2MS培养基，待种子萌发后挑选出粗壮、生长状态好的幼苗，待幼苗生长到第二片真叶形成后，作为接种砧木待微嫁接；
步骤三、微嫁接：
在超净工作台上放置接种槽，然后在接种槽内放置灭菌的糯米纸并将糯米纸固定在接种槽内，将步骤二的接种砧木在距离根部4-5cm处截断，放置在糯米纸上；再将步骤一继代增殖得到的脱毒新会大红柑丛生芽的形成层对齐砧木并***砧木切口内，压实砧木和脱毒新会大红柑丛生芽后，将糯米纸对折固定，获得微嫁接苗；
步骤四、培养移栽：
向试管内注入1/4体积的液体培养液，并环形放入2cm滤纸作为固定，经灭菌后，将步骤三获得的微嫁接苗，转移到液体培养液中，置于温度25℃、光照强度为2500-3000lux的恒温环境下培养30天，待砧木根部开始生长，丛生芽叶片正常舒展生长后，置于自然光中炼苗30天后，即可洗苗移栽，移栽成活率98％。
其中，所述液体培养液的配方为：改良MT培养基+IBA 0.5mg/L。
实施例3
新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，主要包括如下步骤：
步骤一、脱毒新会大红柑丛生芽的获得：
将消毒、灭菌处理的新会大红柑母枝在超净工作台上切取茎尖2mm，转移到改良MT培养基中预培养，在4℃黑暗条件下进行预培养5天后，将茎尖组织转移到保护培养基中冰冻适应1h，后将其转移到冷冻管并迅速投入液氮中，使茎尖组织快速降温到-196℃并持续1h，然后再快速转移到45℃水中解冻恢复，然后接种到继代培养基中，25℃暗培养一周后进行常规光照培养，获得脱毒新会大红柑丛生芽；
所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO3 1750mg/L；KNO3 1900mg/L；CaCl2·2H2O 8400mg/L；MgSO4·7H2O 7400mg/L；KH2PO4 3180mg/L；KI 0.83mg/L；H3BO3 6.3mg/L；MnSO4·4H2O 22.6mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L；CuSO4·5H2O 0.025mg/L；CoCl2·6H2O 0.025mg/L；FeSO4·7H2O 27.8mg/L；Na2-EDTA 37.3mg/L；烟酸5mg/L；盐酸吡哆醇20mg/L；盐酸硫胺素0.4mg/L；甘氨酸2mg/L；
所述保护培养基的配方为：改良MT培养基+30(wt)％甘油+15(wt)％乙二醇+15(wt)％二甲基亚砜+蔗糖50g/L；
所述继代培养基的配方为：改良MT培养基+BA 2mg/L+NAA 0.05mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖50g/L；
步骤二、砧木选择：
将柠檬或香橙种子在超净工作台经酒精、升汞消毒后接种到1/2MS培养基，待种子萌发后挑选出粗壮、生长状态好的幼苗，待幼苗生长到第二片真叶形成后，作为接种砧木待微嫁接；
步骤三、微嫁接：
在超净工作台上放置接种槽，然后在接种槽内放置灭菌的糯米纸并将糯米纸固定在接种槽内，将步骤二的接种砧木在距离根部4-5cm处截断，放置在糯米纸上；再将步骤一继代增殖得到的脱毒新会大红柑丛生芽的形成层对齐砧木并***砧木切口内，压实砧木和脱毒新会大红柑丛生芽后，将糯米纸对折固定，获得微嫁接苗；
步骤四、培养移栽：
向试管内注入1/4体积的液体培养液，并环形放入2cm滤纸作为固定，经灭菌后，将步骤三获得的微嫁接苗，转移到液体培养液中，置于温度25℃、光照强度为2500-3000lux的恒温环境下培养30天，待砧木根部开始生长，丛生芽叶片正常舒展生长后，置于自然光中炼苗30天后，即可洗苗移栽，移栽成活率98％。
其中，所述液体培养液的配方为：改良MT培养基+IBA 0.5mg/L。
实验证明，本培养法采用改良MT培养基预培养，改良之后继代增值系数大于4，基本没有出现玻璃化现象，变异也大大减少；本培养法使得新会大红柑的果皮发育更好，色泽和品质更优秀，更容易适应南方潮湿多雨的气候环境，成活率也大大提高。
以上所述仅为本发明示意性的具体实施方式，并非用以限定本发明的范围。任何本领域的技术人员，在不脱离本发明的构思和原则的前提下所作出的等同变化与修改，均应属于本发明保护的范围。

Claims (6)

1.新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于，主要包括如下步骤：
步骤一、脱毒新会大红柑丛生芽的获得：
将消毒、灭菌处理的新会大红柑母枝在超净工作台上切取茎尖1-2mm，转移到改良MT培养基中预培养，在4℃黑暗条件下进行预培养3-5天后，将茎尖组织转移到保护培养基中冰冻适应1h，后将其转移到冷冻管并迅速投入液氮中，使茎尖组织快速降温到-196℃并持续1h，然后再快速转移到45℃水中解冻恢复，然后接种到继代培养基中，25℃暗培养一周后进行常规光照培养，获得脱毒新会大红柑丛生芽；
步骤二、砧木选择：
将柠檬或香橙种子在超净工作台经酒精、升汞消毒后接种到1/2MS培养基，待种子萌发后挑选出粗壮、生长状态好的幼苗，待幼苗生长到第二片真叶形成后，作为接种砧木待微嫁接；
步骤三、微嫁接：
在超净工作台上放置接种槽，然后在接种槽内放置灭菌的糯米纸并将糯米纸固定在接种槽内，将步骤二的接种砧木在距离根部4-5cm处截断，放置在糯米纸上；再将步骤一继代增殖得到的脱毒新会大红柑丛生芽的形成层对齐砧木并***砧木切口内，压实砧木和脱毒新会大红柑丛生芽后，将糯米纸对折固定，获得微嫁接苗；
步骤四、培养移栽：
向试管内注入1/4体积的液体培养液，并环形放入2cm滤纸作为固定，经灭菌后，将步骤三获得的微嫁接苗，转移到液体培养液中，置于温度25℃、光照强度为2500-3000lux的恒温环境下培养30天，待砧木根部开始生长，丛生芽叶片正常舒展生长后，置于自然光中炼苗30天后，即可洗苗移栽。
2.如权利要求1所述的新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于：
步骤一中，所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO31700-1800mg/L；KNO3 1800-2000mg/L；CaCl2·2H2O 8300-8500mg/L；MgSO4·7H2O7300-7500mg/L；KH2PO4 3150-3200mg/L；KI 0.80-0.90mg/L；H3BO3 6.0-6.5mg/L；MnSO4·4H2O 22.0-23.0mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.2-0.3mg/L；CuSO4·5H2O0.02-0.03mg/L；CoCl2·6H2O 0.02-0.03mg/L；FeSO4·7H2O 27.0-28.0mg/L；Na2-EDTA 37.0-38.0mg/L；烟酸4-6mg/L；盐酸吡哆醇19-21mg/L；盐酸硫胺素0.3-0.5mg/L；甘氨酸1.5-2.5mg/L。
3.如权利要求2所述的新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于，
步骤一中，所述改良MT培养基包括如下含量的组分：NH4NO3 1750mg/L；KNO3 1900mg/L；CaCl2·2H2O 8400mg/L；MgSO4·7H2O 7400mg/L；KH2PO4 3180mg/L；KI 0.83mg/L；H3BO3 6.3mg/L；MnSO4·4H2O 22.6mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L；CuSO4·5H2O 0.025mg/L；CoCl2·6H2O 0.025mg/L；FeSO4·7H2O 27.8mg/L；Na2-EDTA 37.3mg/L；烟酸5mg/L；盐酸吡哆醇20mg/L；盐酸硫胺素0.4mg/L；甘氨酸2mg/L。
4.如权利要求3所述的新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于，
步骤一中，所述保护培养基的配方为：改良MT培养基+30(wt)％甘油+15(wt)％乙二醇+15(wt)％二甲基亚砜+蔗糖50g/L。
5.如权利要求3所述的新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于，
步骤一中，所述继代培养基的配方为：改良MT培养基+BA 2mg/L+NAA0.05mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖50g/L。
6.如权利要求3所述的新会大红柑脱毒试管苗微嫁接方法，其特征在于，
步骤四中，所述液体培养液的配方为：改良MT培养基+IBA 0.5mg/L。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107278629A (zh) * 2017-07-13 2017-10-24 邓国祥 一种新会柑的嫁接种植方法
CN107750695A (zh) * 2017-11-23 2018-03-06 荔浦县万家兴果蔬专业合作社 一种椪柑的嫁接方法
CN108739373A (zh) * 2018-04-23 2018-11-06 湖南科技学院 一种香柚茎尖快繁脱毒的方法
CN108811835A (zh) * 2018-07-27 2018-11-16 中国科学院华南植物园 一种柑橘脱毒及微芽嫁接的快速繁殖方法
CN108848994A (zh) * 2018-04-18 2018-11-23 宁夏林业研究院股份有限公司 一种适合葡萄微嫁接苗液体培养的方法
CN114793902A (zh) * 2022-05-11 2022-07-29 浙江省柑橘研究所 一种柑橘杂交种子嫁接苗培育方法
CN115005103A (zh) * 2022-07-15 2022-09-06 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 一种可诱导柑橘组织腋芽发生的培养基及繁殖柑橘苗的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101418350A (zh) * 2008-10-28 2009-04-29 南京农业大学 利用超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒的方法
EP2288253A1 (en) * 2008-06-13 2011-03-02 Syngenta Participations AG New method for the production of somatic embryos from euphorbia pulcherrima plant tissue
CN103141381A (zh) * 2013-02-24 2013-06-12 周世永 一种东方百合组织培养方法
CN103262793A (zh) * 2013-04-06 2013-08-28 上饶师范学院 一种江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法
CN103314863A (zh) * 2013-07-16 2013-09-25 李锋 一种高效获得郁金香愈伤组织的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2288253A1 (en) * 2008-06-13 2011-03-02 Syngenta Participations AG New method for the production of somatic embryos from euphorbia pulcherrima plant tissue
CN101418350A (zh) * 2008-10-28 2009-04-29 南京农业大学 利用超低温技术脱除草莓轻型黄边病毒的方法
CN103141381A (zh) * 2013-02-24 2013-06-12 周世永 一种东方百合组织培养方法
CN103262793A (zh) * 2013-04-06 2013-08-28 上饶师范学院 一种江西铅山红芽芋玻璃化法超低温保存脱毒的方法
CN103314863A (zh) * 2013-07-16 2013-09-25 李锋 一种高效获得郁金香愈伤组织的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
丁明华等: "成年态南丰蜜橘试管嫁接育苗技术研究", 《热带亚热带植物学报》 *
张胜友: "《工厂化栽培金针菇新技术》", 28 February 2010, 华中科技大学出版社 *
王国平等: "《柑橘黄龙病及其防治》", 31 July 2007, 金盾出版社 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107278629A (zh) * 2017-07-13 2017-10-24 邓国祥 一种新会柑的嫁接种植方法
CN107750695A (zh) * 2017-11-23 2018-03-06 荔浦县万家兴果蔬专业合作社 一种椪柑的嫁接方法
CN108848994A (zh) * 2018-04-18 2018-11-23 宁夏林业研究院股份有限公司 一种适合葡萄微嫁接苗液体培养的方法
CN108739373A (zh) * 2018-04-23 2018-11-06 湖南科技学院 一种香柚茎尖快繁脱毒的方法
CN108739373B (zh) * 2018-04-23 2022-03-04 湖南科技学院 一种香柚茎尖快繁脱毒的方法
CN108811835A (zh) * 2018-07-27 2018-11-16 中国科学院华南植物园 一种柑橘脱毒及微芽嫁接的快速繁殖方法
CN114793902A (zh) * 2022-05-11 2022-07-29 浙江省柑橘研究所 一种柑橘杂交种子嫁接苗培育方法
CN115005103A (zh) * 2022-07-15 2022-09-06 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 一种可诱导柑橘组织腋芽发生的培养基及繁殖柑橘苗的方法

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