CN105802749A - 一种含有微生物菌株的油污清洗剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含有微生物菌株的油污清洗剂及制备方法，清洗剂包括：表面活性剂0.050～0.500重量份、磷酸氢二钾0.030～0.400重量份、硫酸亚铁0.005～0.050重量份、硫酸镁0.005～0.050重量份、乙二胺四乙酸0.001～0.005重量份和发酵液99.0～99.9重量份；发酵液的活性成分中，莫海威芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为60～70％，短小芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为30～40％。制备方法按照菌种的活化、种子液的制备、菌种的发酵、菌种的保存和清洗剂成品的步骤进行。制备形成的清洗剂对市政管网中的油污成分具有乳化作用，能达到长时间的清油效果，防止管网堵塞。
Description
技术领域
本发明涉及油污清洗处理技术领域，具体涉及一种含有微生物菌株的油污清洗剂及其制备方法。
背景技术
随着经济的发展，人们的物质生活越来越丰富，生活节奏越来越快，家庭饮食不仅变得丰富，而且变得更加油腻。食用油的使用和浪费变得更多，同时，由于工作的原因和饮食习惯的变化，人们在外就餐的机会也越来越多。
而在国内由于还没有完善的垃圾分类制度和规定，餐厨垃圾中的油脂成分很大部分是通过下水管网排入市政管网中，容易和市政管网中的其他物质混合，形成油脂类混合物，伴随着温度和季节变化，容易变成固体类物质，堵塞管道，产生臭味等有害气体。国内外市场所售的市政管网的清洗和疏通剂，成分多数由碱性或酸性类化学物质组成，具有危险性，且对管道具有腐蚀性，持久性差，需要连续间断性添加，给使用带来了很大的不便，并对管网***造成了安全隐患，因此其不但达不到高效去除油脂的目的，而且其使用过程存在诸多弊端，不适宜大范围应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含有微生物菌株的油污清洗剂及其制备方法，用于解决现有的油污清洗剂不能有效乳化和降解管网中油脂类成分，且无法长时间、有效地达到清油和疏通管道的效果的问题。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种含有微生物菌株的油污清洗剂，其特征在于，所述含有微生物菌株的油污清洗剂包括以下组分：表面活性剂0.050～0.500重量份、磷酸氢二钾0.030～0.400重量份、硫酸亚铁0.005～0.050重量份、硫酸镁0.005～0.050重量份、乙二胺四乙酸0.001～0.005重量份和发酵液99.0～99.9重量份；
所述发酵液的活性成分可包括莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌，其中，所述莫海威芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为60～70％，所述短小芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为30～40％。
相比于现有技术，本发明所述的含有微生物菌株的油污清洗剂具有以下优势：在含有微生物菌株的油污清洗剂中，活性成分为发酵液中的莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌，这两种菌种均是从油污存在的环境中筛选出来的天然功能微生物菌群，故原料天然环保，无后续的污染。经由后期处理和调配，得到最终的油污清洗剂，其在繁殖和降解过程中能产生天然的生物代谢产物，如糖脂类表面活性剂、蛋白酶、纤维素酶等功能成分，其对市政管网中的油污成分能起到乳化的作用，吸收和降解市政管网中的油污类固体物，有效促进有机类物质的降解，防止管网堵塞；同时，其也能促进有益微生物菌群的形成，抑制有害菌的生长，减少臭味等有害气体的产生。由于天然功能微生物菌群依靠其自身的代谢和降解还可以在市政管网中进行生长和繁殖，所以可长期保持清油和疏通管道的效果，持久性强。
此外，为了使功能微生物菌群能更好地发挥作用，在其形成的发酵液中还可添加有适量的表面活性剂、磷酸氢二钾、硫酸亚铁、硫酸镁和乙二胺四乙酸，表面活性剂具有乳化、增溶、洗涤、防腐等作用，磷酸氢二钾是微生物、菌类的培养基，故能为功能微生物菌群进一步提供营养，硫酸亚铁可用于水的絮凝净化，同时也能防止水体的富营养化而影响菌群的生长，硫酸镁也可提供营养成分，乙二胺四乙酸是一种能与金属离子结合的螯合剂，故其添加入本发明含有微生物菌株的油污清洗剂中能去除重金属离子对酶的抑制作用，促进莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌两种功能微生物菌群产生的生物酶发挥作用。
本发明还提供上述含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
步骤S1：菌种的活化
分别将装有莫海威芽孢杆菌菌种和短小芽孢杆菌菌种的两个斜面试管置于恒温培养箱中进行培养，培养时间均为110～130h，恒温培养箱内的培养温度均为30～35℃，分别得到活化后的莫海威芽孢杆菌菌种和短小芽孢杆菌；
步骤S2：种子液的制备
将按步骤S1制得的活化好的莫海威芽孢杆菌和活化后的短小芽孢杆菌分别接种到两个液体培养基中各自进行摇床培养，至一个液体培养基中莫海威芽孢杆菌的活菌数不低于1.0×108个/ml，则得到莫海威芽孢杆菌种子液；至另一个液体培养基中短小芽孢杆菌的活菌数不低于1.0×108个/ml，则得到短小芽孢杆菌种子液；
步骤S3：菌种的发酵
将经步骤S2制得的短小芽孢杆菌种子液接入装有发酵母液的发酵罐中进行第一次发酵培养，第一次发酵培养的温度为30～32℃，第一次发酵培养的时间为8～10h；其中，加入发酵罐中的短小芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.025～0.05％；
然后将经步骤S2制得的莫海威芽孢杆菌种子液继续接入发酵罐中进行第二次发酵培养，至发酵罐中莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的总活菌数不低于5.0×108个/ml，第二次发酵培养的温度为30～32℃，第二次发酵培养的时间为36～48h，得到菌种初期发酵液；其中，加入发酵罐中的莫海威芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.025～0.05％；
步骤S4：菌种的保存
将按步骤S3制得的菌种初期发酵液进行保存，得制作完成的发酵液；
步骤S5：清洗剂成品
向经步骤S4制作完成的发酵液中添加表面活性剂、磷酸氢二钾、硫酸亚铁、硫酸镁和乙二胺四乙酸，且各组分的重量份数分别为表面活性剂0.050～0.500重量份、磷酸氢二钾0.030～0.400重量份、硫酸亚铁0.005～0.050重量份、硫酸镁0.005～0.050重量份、乙二胺四乙酸0.001～0.005重量份和发酵液99.0～99.9重量份，混合均匀各组分制得清洗剂成品。
相比于现有技术，本发明所述的含有微生物菌株的油污清洗剂及其制备方法具有以下优势：将莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌这两种功能微生物菌群采用发酵的方式进行处理，使其在发酵过程中产生糖脂类表面活性剂和多种生物酶进入发酵液中。从而使得在采用本发明含有微生物菌株的油污清洗剂时，能直接以市政管网中存在的油脂类成分为主要碳源，通过产生的糖脂类表面活性剂和生物酶，乳化和降解市政管网中的油脂类成分，抑制环境中的有害菌的繁殖，避免臭味等问题的产生，同时又能促进环境中内源性有益菌群的生长和繁殖，从而可以达到长时间的、有效的清油和疏通管道的效果。且上述发酵工艺简单、易于控制、整体的原料和制备方法的成本均较低，有较好的经济和社会效益。
附图说明
通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式的目的，而并不认为是对本发明的限制。在附图中：
图1示出了本发明一种含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法的流程图。
具体实施方式
本发明提供了许多可应用的创造性概念，该创造性概念可大量的体现于具体的上下文中。在下述本发明的实施方式中描述的具体的实施例仅作为本发明的具体实施方式的示例性说明，而不构成对本发明范围的限制。
下面结合附图和具体的实施方式对本发明作进一步的描述。
为了检测下述各实施例中含有的微生物菌株的油污清洗剂的清油效果，截取同一段油污排放管段，截取的油污排放管段总长度为150cm，内径为4cm。将该油污排放管段平均分为三段，每段长度为50cm，分别对每段油污排放管段进行编号1、2和3。对处理前的每段油污排放管段分别进行称重，其中，
编号为1的油污排放管段的质量m1为856.45g；
编号为2的油污排放管段的质量m1为834.63g；
编号为3的油污排放管段的质量m1为803.82g。
本发明提供一种含有微生物菌株的油污清洗剂，下述各实施例中含有微生物菌株的油污清洗剂的使用量均为每段油污排放管段总容积的0.05％。通过计算，上述每段油污排放管段的容积均为628cm3，则各实施例中每段油污排放管段使用的含有微生物菌株的油污清洗剂的使用量为0.314ml。
下文通过具体实施例来进一步详细说明含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法及其组成。
实施例一
如图1所示，本实施例依次采用下述步骤制备一号清洗剂。
步骤S1：菌种的活化
将分别装有莫海威芽孢杆菌菌种和短小芽孢杆菌菌种的两个斜面试管置于32℃的恒温培养箱中培养120h，分别得到活化后的莫海威芽孢杆菌和活化后的短小芽孢杆菌。
步骤S2：种子液的制备
液体培养基的制备：取去皮马铃薯200.0g，切成1厘米见方的小块，加水800ml煮沸后，小火保持沸腾30分钟，用三层纱布过滤，可多次制取，使滤液达到1000ml即可，得到的滤液即为马铃薯质量分数为20％的马铃薯汁(不考虑杂质)，取用蔗糖20g溶于马铃薯汁中完成液体培养基的配制。配制后的液体培养基在121℃的环境下采用蒸汽灭菌方式灭菌20分钟，得到制取完成的液体培养基。按照上述方式制取完成两个液体培养基。
莫海威芽孢杆菌种子液的制备：将按步骤S1制得的活化后的莫海威芽孢杆菌接种到一个液体培养基中进行摇床培养，摇床培养的转速为150r/min，培养温度为32℃，培养48小时后，培养后的莫海威芽孢杆菌的活菌数为1.2×108CFU/ml，得到莫海威芽孢杆菌种子液；
短小芽孢杆菌种子液的制备：将按步骤S1制得的活化后的短小芽孢杆菌接种到另一液体培养基中进行摇床培养，摇床培养的转速为150r/min，培养温度为32℃，培养48小时后，培养后短小芽孢杆菌的活菌数为1.4×108CFU/ml，得到短小芽孢杆菌种子液。
其中，摇床培养是指将菌体放置于摇床中进行培养的过程，在摇床培养的过程中，菌体与培养基充分接触，满足菌体生长的需要，同时增加溶氧量，利于菌体的呼吸。
步骤S3：菌种的发酵
发酵母液的制取：量取硝酸铵7.5g、氯化钠3.0g、磷酸氢二钾2.0g、硫酸镁0.2g、七水合硫酸亚铁0.2g、酵母浸膏0.5g、一级大豆油4.0g、蒸馏水1000ml混合均匀制成溶液，并调节pH为8.0，得到配置后的发酵母液，将配置后的发酵母液接入发酵罐中，在121℃的温度下采用蒸汽灭菌方式灭菌60min，得到制取完成的发酵母液。
将按步骤S2制得的短小芽孢杆菌的种子液接入装有发酵母液的发酵罐中进行第一次发酵培养，且短小芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.03％，第一次发酵培养为在恒温31℃的培养条件下培养9h；然后将按步骤S2制得的莫海威芽孢杆菌种子液继续接入经第一次发酵培养后的发酵罐中，继续进行第二次发酵培养，且莫海威芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.03％，第二次发酵培养为在恒温31℃的培养条件下培养40h。上述第一次发酵培养和第二次发酵培养均采用好氧培养的方式。好氧培养是指在有氧的环境下培养微生物，使微生物与空气充分接触并在此环境下得到繁殖和代谢。第二次发酵培养结束，发酵罐中的莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的总活菌数为6.4×108个/ml，得到菌种初期发酵液。
步骤S4：菌种的保存
将按步骤S3制得的菌种初期发酵液在15℃的条件下呈避光密闭静止状态保存6天，得到制作完成的发酵液。
步骤S5：清洗剂成品
取用经步骤S1～S4制作完成的发酵液1000g，向发酵液中添加表面活性剂2.51g、磷酸氢二钾2.01g、硫酸亚铁0.25g、硫酸镁0.25g和乙二胺四乙酸0.03g，混合均匀得到的终产物为一号清洗剂。需要说明的是，实施例中表面活性剂、磷酸氢二钾、硫酸亚铁、硫酸镁和乙二胺四乙酸均为市售产品。
表面活性剂是指加入少量能使其溶液体系的界面状态发生明显变化的物质，其具有固定的亲水亲油基团，在溶液的表面能定向排列。本实施例中的表面活性剂优选为脂肪酸甘油酯。
根据检测，一号清洗剂中，莫海威芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为64％，短小芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为36％。莫海威芽孢杆菌在除臭剂中的浓度为4.67×108个/ml，短小芽胞杆菌在除臭剂中的浓度为2.63×108个/ml。
该一号清洗剂应用在编号为1的油污排放管段中，使用方式为取用0.314ml的一号清洗剂直接在编号为1的油污排放管段的管道口进行喷洒，静置三天后，再次称量该编号为1的油污排放管段，重量m2＝263.54g。另外，将该油污排放管段上的油污祛除干净后，再次称量该编号为1的油污排放管段，净重量m3＝245.20g。
根据公式w＝(m1-m2)/(m1-m3)×100％，得到一号清洗剂的油污去除率w＝97.0％。
实施例二
请继续参照图1，本实施例依次采用下述步骤制备二号清洗剂。
步骤S1：菌种的活化
将分别装有莫海威芽孢杆菌菌种和短小芽孢杆菌菌种的两个斜面试管置于30℃的恒温培养箱中培养130h，分别得到活化后的莫海威芽孢杆菌和活化后的短小芽孢杆菌。
步骤S2：种子液的制备
液体培养基的制备：取去皮马铃薯150.0g，切成1厘米见方的小块，加水850ml煮沸后，小火保持沸腾30分钟，用三层纱布过滤，可多次制取，使滤液达到1000ml即可，得到的滤液即为马铃薯质量分数为15％的马铃薯汁(不考虑杂质)，取用蔗糖25g溶于马铃薯汁中完成液体培养基的配制。配制后的液体培养基在121℃的环境下采用蒸汽灭菌方式灭菌20分钟，得到制取完成的液体培养基。按照上述方式制取完成两个液体培养基。
莫海威芽孢杆菌种子液的制备：将按步骤S1制得的活化后的莫海威芽孢杆菌接种到一个液体培养基中进行摇床培养，摇床培养的转速为130r/min，培养温度为35℃，培养50小时后，培养后的莫海威芽孢杆菌的活菌数为1.3×108CFU/ml，得到莫海威芽孢杆菌种子液；
短小芽孢杆菌种子液的制备：将按步骤S1制得的活化后的短小芽孢杆菌接种到另一液体培养基中进行摇床培养，摇床培养的转速为130r/min，培养温度为35℃，培养50小时后，培养后短小芽孢杆菌的活菌数为1.5×108CFU/ml，得到短小芽孢杆菌种子液。
步骤S3：菌种的发酵
发酵母液的制取：量取硝酸铵4.04g、氯化钠2.02gg、磷酸氢二钾1.01g、硫酸镁0.1g、七水合硫酸亚铁0.1g、酵母浸膏0.3g、一级大豆油2.53g、蒸馏水1000ml混合均匀制成溶液，并调节pH为7.5，得到配置后的发酵母液，将配置后的发酵母液接入发酵罐中，在121℃的温度下采用蒸汽灭菌方式灭菌60min，得到制取完成的发酵母液。
将按步骤S2制得的短小芽孢杆菌的种子液接入装有发酵母液的发酵罐中进行第一次发酵培养，且短小芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.025％，第一次发酵培养为在恒温30℃的培养条件下培养10h；然后将按步骤S2制得的莫海威芽孢杆菌种子液继续接入经第一次发酵培养后的发酵罐中，继续进行第二次发酵培养，且莫海威芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.025％，第二次发酵培养为在恒温30℃的培养条件下培养48h。上述第一次发酵培养和第二次发酵培养均采用好氧培养的方式。第二次发酵培养结束，发酵罐中的莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的总活菌数为7.0×108个/ml，得到菌种初期发酵液。
步骤S4：菌种的保存
将按步骤S3制得的菌种初期发酵液在18℃的条件下呈避光密闭静止状态保存7天，得到制作完成的发酵液。
步骤S5：清洗剂成品
取用经步骤S1～S4制作完成的发酵液1000g，向发酵液中添加脂肪酸甘油酯0.50g、磷酸氢二钾0.30g、硫酸亚铁0.50g、硫酸镁0.50g和乙二胺四乙酸0.01g，混合均匀得到的终产物为二号清洗剂。
根据检测，二号清洗剂中，莫海威芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为69％，短小芽孢杆菌占总活菌数的百分比为31％。莫海威芽孢杆菌在除臭剂中的浓度为4.97×108个/ml，短小芽胞杆菌在除臭剂中的浓度为2.23×108个/ml。
该二号清洗剂应用在编号为2的油污排放管段中，使用方式同一号清洗剂，静置三天后，再次称量该编号为2的油污排放管段，重量m2＝267.42g。另外，将该油污排放管段上的油污祛除干净后，再次称量该编号为2的油污排放管段，净重量m3＝241.32g。
根据公式w＝(m1-m2)/(m1-m3)×100％，得到二号清洗剂的油污去除率w＝95.6％。
实施例三
请继续参照图1，本实施例依次采用下述步骤制备三号清洗剂。
步骤S1：菌种的活化
将分别装有莫海威芽孢杆菌菌种和短小芽孢杆菌菌种的两个斜面试管置于35℃的恒温培养箱中培养130h，分别得到活化后的莫海威芽孢杆菌和活化后的短小芽孢杆菌。
步骤S2：种子液的制备
液体培养基的制备：取去皮马铃薯250.0g，切成1厘米见方的小块，加水750ml煮沸后，小火保持沸腾30分钟，用三层纱布过滤，可多次制取，使滤液达到1000ml即可，得到的滤液即为马铃薯质量分数为25％的马铃薯汁(不考虑杂质)，取用蔗糖15g溶于马铃薯汁中完成液体培养基的配制。配制后的液体培养基在121℃的环境下采用蒸汽灭菌方式灭菌20分钟，得到制取完成的液体培养基。按照上述方式制取完成两个液体培养基。
莫海威芽孢杆菌种子液的制备：将按步骤S1制得的活化后的莫海威芽孢杆菌接种到一个液体培养基中进行摇床培养，摇床培养的转速为180r/min，培养温度为30℃，培养45小时后，培养后的莫海威芽孢杆菌的活菌数为1.0×108CFU/ml，得到莫海威芽孢杆菌种子液；
短小芽孢杆菌种子液的制备：将按步骤S1制得的活化后的短小芽孢杆菌接种到另一液体培养基中进行摇床培养，摇床培养的转速为180r/min，培养温度为30℃，培养45小时后，培养后短小芽孢杆菌的活菌数为1.2×108CFU/ml，得到短小芽孢杆菌种子液。
步骤S3：菌种的发酵
发酵母液的制取：量取硝酸铵5.10g、氯化钠5.10g、磷酸氢二钾5.10g、硫酸镁0.51g、七水合硫酸亚铁0.51g、酵母浸膏0.51g、一级大豆油3.57g、蒸馏水1000ml混合均匀制成溶液，并调节pH为8.5，得到配置后的发酵母液，将配置后的发酵母液接入发酵罐中，在121℃的温度下采用蒸汽灭菌方式灭菌60min，得到制取完成的发酵母液。
将按步骤S2制得的短小芽孢杆菌的种子液接入装有发酵母液的发酵罐中进行第一次发酵培养，且短小芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.05％，第一次发酵培养为在恒温32℃的培养条件下培养8h；然后将按步骤S2制得的莫海威芽孢杆菌种子液继续接入经第一次发酵培养后的发酵罐中，继续进行第二次发酵培养，且莫海威芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.05％，第二次发酵培养为在恒温32℃的培养条件下培养36h。上述第一次发酵培养和第二次发酵培养均采用好氧培养的方式。第二次发酵培养结束，发酵罐中的莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的总活菌数为5.4×108个/ml，得到菌种初期发酵液。
步骤S4：菌种的保存
将按步骤S3制得的菌种初期发酵液在19℃的条件下呈避光密闭静止状态保存5天，得到制作完成的发酵液。
步骤S5：清洗剂成品
取用经步骤S1～S4制作完成的发酵液1000g，向发酵液中添加脂肪酸甘油酯5.05g、磷酸氢二钾4.04g、硫酸亚铁0.05g、硫酸镁0.05g和乙二胺四乙酸0.05g，混合均匀得到的终产物为三号清洗剂。
根据检测，三号清洗剂中，莫海威芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为62％，短小芽孢杆菌占总活菌数的百分比为38％。莫海威芽孢杆菌在除臭剂中的浓度为3.53×108个/ml，短小芽胞杆菌在除臭剂中的浓度为2.17×108个/ml。
该三号清洗剂应用在编号为3的油污排放管段中，使用方式同一号清洗剂，静置三天后，再次称量该编号为3的油污排放管段，重量m2＝258.69g。另外，将该油污排放管段上的油污祛除干净后，再次称量该编号为1的油污排放管段，净重量m3＝243.56g。
根据公式w＝(m1-m2)/(m1-m3)×100％，得到一号清洗剂的油污去除率w＝97.3％。
在本发明的制备方法中，由于将莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌这两种功能微生物菌群采用发酵的方式进行处理，使其在发酵过程中产生糖脂类表面活性剂和多种生物酶进入发酵液中。从而使得在采用本发明含有微生物菌株的油污清洗剂时，能直接以市政管网中存在的油脂类成分为主要碳源，通过产生的糖脂类表面活性剂和生物酶，乳化和降解市政管网中的油脂类成分，抑制环境中的有害菌的繁殖，避免臭味等问题的产生，同时又能促进环境中内源性有益菌群的生长和繁殖，从而可以达到长时间的、有效的清油和疏通管道的效果。
由于本发明的发酵工艺简单、易于控制、整体的原料和制备方法的成本均较低，有较好的经济和社会效益。
应该注意的是，上述实施例对本发明进行说明而不是对本发明进行限制，并且本领域技术人员在不脱离所附权利要求的范围的情况下可设计出替换实施例。在权利要求中，不应将位于括号之间的任何参考符号构造成对权利要求的限制。单词“包含”不排除存在未列在权利要求中的元件或步骤。
Claims (8)
1.一种含有微生物菌株的油污清洗剂，其特征在于，所述含有微生物菌株的油污清洗剂包括以下组分：表面活性剂0.050～0.500重量份、磷酸氢二钾0.030～0.400重量份、硫酸亚铁0.005～0.050重量份、硫酸镁0.005～0.050重量份、乙二胺四乙酸0.001～0.005重量份和发酵液99.0～99.9重量份；
所述发酵液的活性成分包括莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌，其中，所述莫海威芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为60～70％，所述短小芽孢杆菌的活菌数占总活菌数的百分比为30～40％。
2.根据权利要求1所述的含有微生物菌株的油污清洗剂，其特征在于，所述莫海威芽孢杆菌在所述发酵液中的浓度不低于1.0×108个/ml，所述短小芽孢杆菌在所述发酵液中的浓度不低于5.0×107个/ml。
3.含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1：菌种的活化
分别将装有莫海威芽孢杆菌菌种和短小芽孢杆菌菌种的两个斜面试管置于恒温培养箱中进行培养，培养时间均为110～130h，恒温培养箱内的培养温度均为30～35℃，分别得到活化后的莫海威芽孢杆菌和活化后的短小芽孢杆菌；
步骤S2：种子液的制备
将按步骤S1制得的活化好的莫海威芽孢杆菌和活化后的短小芽孢杆菌分别接种到两个液体培养基中各自进行摇床培养，至一个液体培养基中莫海威芽孢杆菌的活菌数不低于1.0×108个/ml，则得到莫海威芽孢杆菌种子液；至另一个液体培养基中短小芽孢杆菌的活菌数不低于1.0×108个/ml，则得到短小芽孢杆菌种子液；
步骤S3：菌种的发酵
将经步骤S2制得的短小芽孢杆菌种子液接入装有发酵母液的发酵罐中进行第一次发酵培养，第一次发酵培养的温度为30～32℃，第一次发酵培养的时间为8～10h；其中，加入发酵罐中的短小芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.025～0.05％；
然后将经步骤S2制得的莫海威芽孢杆菌种子液继续接入发酵罐中进行第二次发酵培养，至发酵罐中莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的总活菌数不低于5.0×108个/ml，第二次发酵培养的温度为30～32℃，第二次发酵培养的时间为36～48h，得到菌种初期发酵液；其中，加入发酵罐中的莫海威芽孢杆菌种子液的体积为发酵母液体积的0.025～0.05％；
步骤S4：菌种的保存
将按步骤S3制得的菌种初期发酵液进行保存，得制作完成的发酵液；
步骤S5：清洗剂成品
向经步骤S4制作完成的发酵液中添加表面活性剂、磷酸氢二钾、硫酸亚铁、硫酸镁和乙二胺四乙酸，且各组分的重量份数分别为表面活性剂0.050～0.500重量份、磷酸氢二钾0.030～0.400重量份、硫酸亚铁0.005～0.050重量份、硫酸镁0.005～0.050重量份、乙二胺四乙酸0.001～0.005重量份和发酵液99.0～99.9重量份，混合均匀各组分制得清洗剂成品。
4.根据权利要求3所述的含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，液体培养基中各组分的重量份数为：马铃薯汁97～99重量份，蔗糖1～3重量份；
其中，所述马铃薯汁包含马铃薯和水，且所述马铃薯汁中马铃薯为15～25重量份，水为75～85重量份。
5.根据权利要求3所述的含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中分别接种有莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的两个液体培养基在摇床培养时，摇床培养的转速均为130～180r/min，温度均为30～35℃，培养时间均为45～50小时。
6.根据权利要求3所述的含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中发酵母液的各组分重量份数为：硝酸铵0.40～1.00重量份、氯化钠0.2～0.5重量份、磷酸氢二钾0.1～0.5重量份、硫酸镁0.01～0.05重量份、七水合硫酸亚铁0.01～0.05重量份、酵母浸膏0.03～0.08重量份、一级大豆油0.20～0.50重量份、蒸馏水98.00～99.00重量份，所述发酵母液的pH值调节为7.5～8.5。
7.根据权利要求3所述的含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中第一次发酵培养和第二次发酵培养均采用好氧培养的方式。
8.根据权利要求3～7中任意一项所述的含有微生物菌株的油污清洗剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中菌种的保存操作为在20℃以下的环境条件下避光密闭静止状态保存5～7天。
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