CN105784913A - 妇科断红饮胶囊的质量检测方法 - Google Patents
妇科断红饮胶囊的质量检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105784913A CN105784913A CN201610220326.4A CN201610220326A CN105784913A CN 105784913 A CN105784913 A CN 105784913A CN 201610220326 A CN201610220326 A CN 201610220326A CN 105784913 A CN105784913 A CN 105784913A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- take
- need testing
- reference substance
- evaporated
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
- G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及妇科断红饮胶囊的质量检测方法,包括:对活性成分益母草、赤芍、三七和仙鹤草的鉴别,对水分、装量差异、崩解时限和微生物限度的检查,以及对芍药苷含量的测定;其中,益母草的鉴别方法包括如下步骤:(1)取妇科断红饮胶囊内容物1.4~1.8g,溶于25~35ml无水乙醇,80~100℃回流提取,放冷、过滤后收集滤液,蒸干,所得残渣加7ml~10ml水溶解,以3000~5000转/分钟离心后取上清液,蒸干,上样于活性炭‑氧化铝柱,用无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;(2)对照品溶液的制备;(3)照薄层色谱法鉴别。本发明提供的质量检测,准确度高,稳定性好,尤其适用于高湿度环境,可以有效用于妇科断红饮胶囊的质量检测。
Description
技术领域
本发明涉及中成药的质量检测,具体涉及妇科断红饮胶囊的质量检测方法。
背景技术
妇科断红饮胶囊是株洲千金药业股份有限公司生产的独家产品,由赤芍、益母草、三七、仙鹤草、地榆炭、蒲黄炭等六味药材组成,经提取制成的纯中药复方制剂,具有凉血,化瘀,止血的功效。用于功能失调性子宫出血,表现为月经过多,经期延长,中医诊断为“漏证”,辩证属血热者,症见经血量多,或淋漓不净,色深红或紫红,质粘稠,夹有少量血块,伴有面赤头晕,烦躁易怒,口干喜饮,便秘尿赤。处方中的益母草为君药,有活血、祛淤、调经、利尿消肿、收缩子宫的作用。
专利文献CN101919942A公开了一种治疗妇科功血疾病的中药组合物胶囊剂的质量检测方法,具体公开活性成分益母草的检测方法为:取所述胶囊内容物0.9g~1.5g,加乙醇22mL~38mL,加热回流0.5h~1.5h,放冷,滤过,滤液浓缩至2.5mL~7.5mL,加于内径5mm~15mm、活性炭0.3g~0.7g、100目~120目中性氧化铝1g~3g的活性炭-氧化铝柱上,用15mL~45mL乙醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加0.2mL~0.8mL乙醇溶解,作为供试品溶液;取益母草对照药材1.5g~4.5g,与供试品溶液同法制成对照药材溶液;取盐酸水苏碱对照品,加乙醇制成浓度为2.5mg/mL~7.5mg/mL的溶液,作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10μl,以正丁醇:盐酸:水为3~5:0.5~1.5:0.2~0.8的混合溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以稀碘化铋钾试液显色,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。然而,该方法在实际操作中,存在展板时间长,显色时间长,灵敏度不高,受环境湿度影响大等问题,影响了妇科断红饮胶囊的生产与质量检测。
《中国药典2015版》第一部第290页公开了益母草的鉴别方法;其公开的供试品溶液制备方法为,鲜品干燥后粉碎,溶于无水乙醇,离心,取上清液作为供试品溶液;另取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇制成每lml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法为:吸取上述两种溶液各5~10ml,分别点于同一硅胶G薄层板上,以丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)为展开剂,展开,取出,晾干,在105℃加热15分钟,放冷,喷以稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液(10:1)混合溶液至斑点显色清晰。在实际操作中,以该方法制备妇科断红饮胶囊的供试品溶液并检测,供试品难以实现有效分离,目标斑点模糊,且目标斑点之间的Rf值有差异,难以实现对益母草成分的准确鉴别。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷,提供一种妇科断红饮胶囊的质量检测方法,该方法专属性强、耐用性、灵敏度高,可作为该制剂的重要质量检测标准。
具体而言,本发明提供一种妇科断红饮胶囊的质量检测方法,所述方法包括对活性成分益母草、赤芍、三七以及仙鹤草的鉴别
其中,所述活性成分益母草的鉴别方法包括:(1)供试品溶液的制备;(2)对照品溶液的制备;(3)照薄层色谱法鉴别。
步骤(1)所述供试品溶液的制备包括以下步骤:取妇科断红饮胶囊内容物1.4~1.8g,溶于25~35ml无水乙醇,80~100℃回流提取,放冷、过滤后收集滤液,蒸干,所得残渣加7ml~10ml水溶解,以3000~5000转/分钟离心后取上清液,蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,用无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液。
优选地,所述供试品溶液的制备包括以下步骤:取妇科断红饮胶囊内容物1.5g~1.7g,溶于28ml~32ml无水乙醇,80~100℃回流提取50min~70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml~9ml水溶解,以3800~4200转/分钟离心8min~12min,取上清液,水浴蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,用无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液。
更优选地,所述供试品溶液的制备包括以下步骤:取妇科断红饮胶囊内容物1.6g,溶于30ml无水乙醇,90℃回流提取60min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加8ml水溶解,以4000转/分钟离心10min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径20mm,其填料由活性炭0.5g和200~300目氧化铝2g均匀混合而成;用30ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液。
所述供试品溶液的制备方法中,为了实现优异的样品纯化效果,所述活性炭-氧化铝柱的填料由活性炭和200~300目中性氧化铝以重量比4~6:15~25均匀混合而成。
作为一种优选方案,所述活性炭-氧化铝柱的内径可选用15mm或20mm,优选为内径20mm;所述活性炭-氧化铝柱的填料可由活性炭0.4~0.6g和200~300目氧化铝1.5~2.5g均匀混合而成,所述活性炭和200~300目中性氧化铝均市售可得。
在上述活性炭-氧化铝柱的规格条件下,所述用无水乙醇洗脱的洗脱体积为20ml~40ml,优选为28ml~32ml,进一步优选为30ml。
本发明所述对照品溶液包括阳性对照,即益母草对照溶液。所述益母草对照溶液的制备方法为:取益母草药材2.9g~3.1g,采用与制备供试品溶液相同的方法制备。本发明所述对照品溶液还进一步包括盐酸水苏碱对照品溶液和阴性对照溶液;所述盐酸水苏碱对照品溶液的制备方法为:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为4.8~5.2mg/ml,优选为5mg/ml;所述阴性对照溶液是以不含有益母草成分(其余成分完全相同)的妇科断红饮胶囊为样品,采用与供试品溶液完全相同的方法制备而成。
本发明所述照薄层色谱法鉴别采用的展开剂由丙酮、无水乙醇和盐酸以体积比9~11:5~7:1组成,优选以体积比10:6:1组成。
所述照薄层色谱法鉴别中,采用展开剂展开、晾干后,优选先在100~110℃加热10~20min,放冷后喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在100~110℃烘干2~4min,再喷以显色剂进行显色。
所述照薄层色谱法鉴别采用的显色剂由稀碘化铋钾溶液与1%三氯化铁乙醇溶液以体积比8~12:1混合而成,优选以体积比10:1混合而成。所述稀碘化铋钾溶液的配置方法参见《中国药典》2010版一部附录VIB。
作为本发明的一种优选方案,所述妇科断红饮胶囊中益母草成分的鉴别方法包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.4~1.8g,溶于25~35ml无水乙醇,80~100℃回流提取50min~70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml~10ml水溶解,以3000~5000转/分钟离心8min~12min,取上清液,水浴蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径为15mm或20mm,其填料由活性炭0.4~0.6g和200~300目氧化铝1.5~2.5g均匀混合而成;用20ml~40ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用0.5ml~1.5ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材2.9g~3.1g,采用与制备供试品溶液相同的方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为4.8~5.2mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液和盐酸水苏碱对照品溶液各10~15μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为9~11:5~7:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在100~110℃加热10~20min,放冷,喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在100~110℃烘干2~4min,再喷以体积比为8~12:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视,即可。
进一步优选包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.5g~1.7g,溶于28ml~32ml无水乙醇,80~100℃回流提取50min~70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml~9ml水溶解,以3800~4200转/分钟离心8min~12min,取上清液,水浴蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径为15mm或20mm,其填料由活性炭0.4~0.6g和200~300目氧化铝1.5~2.5g均匀混合而成;用28ml~32ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用0.8ml~1.2ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材2.9g~3.1g,采用与制备供试品溶液相同的方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为4.8~5.2mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液和盐酸水苏碱对照品溶液各10~15μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为9~11:5~7:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在100~110℃加热10~20min,放冷,喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在100~110℃烘干2~4min,再喷以体积比为8~12:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视,即可。
最优选包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.6g,溶于30ml无水乙醇,90℃回流提取60min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加8ml水溶解,以4000转/分钟离心10min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径20mm,其填料由活性炭0.5g和200~300目氧化铝2g均匀混合而成;用30ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材3g,采用步骤(1)所述方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为5mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液和盐酸水苏碱对照品溶液各10μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为10:6:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在105℃加热15min,放冷,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃烘干3min,再喷以体积比为10:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视,即可。
经实际鉴别,所述方法得到的供试品色谱与对照品和对照药材色谱相应位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,方法可行。
本发明所述质量检测方法中,对活性成分赤芍、三七和仙鹤草的鉴别,对水分、装量差异、崩解时限和微生物限度的检查,以及对芍药苷含量的测定,优选采用专利文献CN101919942A公开的方案。具体而言:
所述活性成分赤芍的鉴别可包括以下步骤:
(1)取所述胶囊内容物0.5g~1.5g,加水12ml~38ml,超声处理15min~45min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取1~5次,每次10ml~30ml,合并提取液,加氨试液20ml~60ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加1ml~3ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取赤芍对照药材1g~3g,加甲醇15ml~45ml,超声处理0.5h~1.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加水12ml~38ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;取芍药苷对照品,加甲醇制成浓度为1mg/ml~3mg/ml的溶液,作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各3μl~5μl,以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸为30~50∶2~8∶5~15∶0.1~0.3的混合液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以4~6%香草醛硫酸甲醇溶液,在95℃~115℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
所述活性成分三七的鉴别可包括以下步骤:
(1)取所述胶囊内容物0.5g~1.5g,加水12ml~38ml,超声处理15min~45min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取1~5次,每次10ml~30ml,合并提取液,加氨试液20ml~60ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加1ml~3ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取三七对照药材0.5g~1.5g,加水5滴~15滴,搅匀,加水饱和的正丁醇溶液20ml~60ml,超声处理20min~60min,滤过,滤液加氨试液20ml~60ml洗涤,弃去氨液,加入正丁醇饱和的水溶液20ml~60ml洗涤,弃去正丁醇水溶液,蒸干,残渣加甲醇1ml~3ml溶解,作为对照药材溶液;取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品,加甲醇制成各浓度均为0.5mg/ml~1.5mg/ml的混合溶液作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各1~3μl,以在10℃以下放置过夜的三氯甲烷∶甲醇∶水为10~16∶4~10∶1~3的混合液的下层溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在95℃~115℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置350nm波长的紫外光灯下检视,显相同颜色的荧光斑点。
所述活性成分仙鹤草的鉴别可包括以下步骤:
(1)取所述胶囊内容物0.5g~1.5g,加0.2%~0.8%氢氧化钠溶液15ml~45ml,超声处理10min~30min,滤过,滤液加盐酸调pH值至2~3,滤过,滤液加乙酸乙酯提取1~3次,每次10ml~30ml,合并提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml~3ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取仙鹤草对照药材4g~12g,加水25ml~75ml,煎煮0.5h~1.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加0.2%~0.8%氢氧化钠溶液15ml~45ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;
(3)吸取上述两种溶液各14μl~16μl,以水饱和的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸为4~8∶2~4∶0.5~1.5的混合溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以0.5%~1.5%三氯化铁乙醇溶液显色,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
对水分的检查具体为:取胶囊剂的内容物,照水分测定法测定,不得过9.0%。
对装量差异的检查具体为:每粒装量与标示装量相比较,装量差异限度应在标示装量的±10%以内,超出装量差异限度的不得多于2粒,并不得有1粒超出限度1倍。
对崩解时限的检查具体为:采用崩解时限检查法检查,应符合规定。
对微生物限度的检查具体为:采用细菌、霉菌及酵母菌检查法和控制菌检查法检查,应符合规定。
对芍药苷含量的测定可包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取胶囊内容物0.05~0.15g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,精密加入45~55%甲醇45~55ml,称定重量,冷浸过夜后,在100~300w、30~50KHz条件下超声处理20~40分钟,再称重,用45~55%甲醇补足减失的重量,摇匀,0.45um微孔滤膜滤过,滤液作为供试品溶液;
(2)对照品溶液的制备:精密称取芍药苷对照品,加45~55%甲醇制成每1ml含0.05~0.15mg的溶液,作为对照品溶液;
(3)分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各8~12ul,注入液相色谱仪,测定,计算,即得;其中,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以体积比65~75:25~35的0.04~0.06mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,检测波长为230nm,理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500;每粒含赤芍以芍药苷C23H28O11计,不得少于12.0mg。
本发明提供的妇科断红饮胶囊的质量检测方法专属性强、灵敏度高、重现性好,并可以有效的用于妇科断红饮胶囊的鉴别;其中,对主要成分益母草的鉴别进行针对性改良,所得优化方案使供试品溶液在展板时无拖尾,同一斑点Rf值差异小,分离效果好,显色斑点清晰,在高湿度环境下可实现快速、准确鉴别,稳定性好。该方法的。
附图说明
图1为实施例1所述鉴别结果的示意图;其中,序号1~6依次代表:1、批号20130701的样品,2、批号20130901的样品,3、批号20131101的样品,4、益母草对照,5、盐酸水苏碱对照,6、阴性对照。
图2为对比例3所述鉴别结果的示意图;
图3为实验例1所述鉴别结果的示意图;其中,图3A为自制薄层硅胶G板,图3B为预制薄层硅胶G板,图3C为高效薄层硅胶G板;图3A~3C中,序号1~6依次代表:1、批号20130701的样品,2、批号20130901的样品,3、批号20131101的样品,4、益母草对照,5、盐酸水苏碱对照,6、阴性对照。
图4为实验例2所述鉴别结果的示意图;其中,图4A为5℃下的鉴别结果,图4B为30℃下的鉴别结果;图4A、4B中,序号1~6依次代表:1、批号20130701的样品,2、批号20130901的样品,3、批号20131101的样品,4、益母草对照,5、盐酸水苏碱对照,6、阴性对照。
图5为实验例3所述鉴别结果的示意图;其中,图5A为湿度30%下的鉴别结果,图5B为湿度75%下的鉴别结果;图5A、5B中,序号1~6依次代表:1、批号20130701的样品,2、批号20130901的样品,3、批号20131101的样品,4、益母草对照,5、盐酸水苏碱对照,6、阴性对照。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
以下各实施例中涉及的仪器以及试剂包括:939全自动薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器技术厂);薄层层析硅胶(化学纯,青岛海洋化工有限公司);活性炭(株洲石英化玻有限公司);中性氧化铝(上海纳辉干燥试剂厂);正丁醇(分析纯,天津市恒兴化学试剂制造有限公司);盐酸(分析纯,株洲石英化玻有限公司);丙酮(分析纯,株洲石英化玻有限公司);无水乙醇(分析纯,株洲石英化玻有限公司);水(纯化水,临用前制备)。
实施例1
按照以下方法对妇科断红饮胶囊进行质量检测:
A、活性成分益母草的鉴别:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.6g,溶于30ml无水乙醇,90℃回流提取60min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加8ml水溶解,以4000转/分钟离心10min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径20mm,其填料由活性炭0.5g和200~300目氧化铝2g均匀混合而成;用30ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材3g,采用步骤(1)所述方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为5mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液、盐酸水苏碱对照品溶液以及阴性对照各10μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为10:6:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在105℃加热15min,放冷,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃烘干3min,再喷以体积比为10:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视;
B、活性成分赤芍的鉴别:
(1)取胶囊剂内容物1g,加水25ml,超声处理30分钟,滤过,滤液加水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,加氨试液40ml洗涤,弃去洗液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取赤芍对照药材2g,加甲醇30ml,超声处理1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加水25ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;取芍药苷对照品,加甲醇制成浓度为2mg/ml的溶液,作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各4μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸甲醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰;
C、活性成分三七的鉴别:
(1)取胶囊剂内容物1g,加水25ml,超声处理30分钟,滤过,滤液加水饱和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,加氨试液40ml洗涤,弃去洗液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取三七对照药材1g,加水10滴,搅匀,加水饱和的正丁醇40ml,超声处理40分钟,滤过,滤液加氨试液40ml洗涤,弃去氨液,再加正丁醇饱和的水40ml洗涤,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml溶解,作为对照药材溶液;取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品,加甲醇制成各浓度均为1mg/ml的混合溶液,作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(365nm)下检视;
D、活性成分仙鹤草的鉴别:
(1)取胶囊剂内容物1g,加0.5%氢氧化钠溶液30ml,超声处理20分钟,滤过,滤液加盐酸调节pH值至2.5,滤过,滤液加乙酸乙酯提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇2ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取仙鹤草对照药材8g,加水50ml,煎煮1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加0.5%氢氧化钠溶液30ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;
(3)吸取上述两种溶液各15μ1,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯(用水饱和)-乙酸乙酯-甲酸(6∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液,至显色清晰;
E、对水分的检查:取胶囊剂的内容物,照水分测定法测定,不得过9.0%;
F、对装量差异的检查:每粒装量与标示装量相比较,装量差异限度应在标示装量的±10%以内,超出装量差异限度的不得多于2粒,并不得有1粒超出限度1倍;
G、对崩解时限的检查具体为:采用《中国药典2015版》规定的崩解时限检查法检查,应符合规定;
H、对微生物限度的检查:采用《中国药典2015版》规定的细菌、霉菌及酵母菌检查法和控制菌检查法检查,应符合规定;
I、对芍药苷含量的测定:
(1)供试品溶液的制备:取胶囊内容物0.1g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,精密加入50%甲醇50ml,称定重量,冷浸过夜后,在200w、40KHz条件下超声处理30分钟,再称重,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,0.45um微孔滤膜滤过,滤液作为供试品溶液;
(2)对照品溶液的制备:精密称取芍药苷对照品,加50%甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,作为对照品溶液;
(3)分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各10ul,注入液相色谱仪,测定,计算,即得;其中,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以体积比70:30的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,检测波长为230nm,理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500;每粒含赤芍以芍药苷C23H28O11计,不得少于12.0mg。
本实施例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊。
其中,益母草成分的鉴别结果如图1所示,由图1可知,采用本实施例所述方法进行鉴别,3组供试品与益母草对照在相同位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,展板无拖尾,目标斑点清晰。
依据赤芍、三七以及仙鹤草的鉴别结果可知,各组样品均与相应对照在相同位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,展板无拖尾,目标斑点清晰;依据对水分、装量差异、崩解时限、微生物限度的检查结果可知,各组样品均符合规定;依据对芍药苷含量的测定结果可知,各组样品中芍药苷C23H28O11的含量均不少于12.0mg。
按照本实施例提供的质量检测方法进行检测,生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊均合格。
实施例2
按照以下方法对妇科断红饮胶囊进行质量检测:
A、活性成分益母草的鉴别:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.7g,溶于32ml无水乙醇,100℃回流提取70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加9ml水溶解,以4200转/分钟离心12min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱;所述活性炭-氧化铝柱的内径20mm,其填料由活性炭0.5g和200~300目氧化铝2g均匀混合而成;用30ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材3g,采用步骤(1)所述方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为5mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液、盐酸水苏碱对照品溶液以及阴性对照各10μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为10:6:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在105℃加热15min,放冷,喷以8%硫酸乙醇溶液,在105℃烘干3min,再喷以体积比为10:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视;
B、活性成分赤芍的鉴别:
(1)取所述胶囊内容物0.5g,加水12ml,超声处理15min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取3次,每次10ml,合并提取液,加氨试液20ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加1ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取赤芍对照药材1g,加甲醇15ml,超声处理0.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加水12ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;取芍药苷对照品,加甲醇制成浓度为1mg/ml的溶液,作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各4μl,以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸为30∶2∶5∶0.1的混合液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以4%香草醛硫酸甲醇溶液,在95℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
C、活性成分三七的鉴别:
(1)取所述胶囊内容物0.5g,加水12ml,超声处理15min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取3次,每次10ml,合并提取液,加氨试液20ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加1ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取三七对照药材0.5g,加水5滴,搅匀,加水饱和的正丁醇溶液20ml,超声处理20min,滤过,滤液加氨试液20ml洗涤,弃去氨液,加入正丁醇饱和的水溶液20ml洗涤,弃去正丁醇水溶液,蒸干,残渣加甲醇1ml溶解,作为对照药材溶液;取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品,加甲醇制成各浓度均为0.5mg/ml的混合溶液作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各2μl,以在10℃以下放置过夜的三氯甲烷∶甲醇∶水为10∶4∶1的混合液的下层溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以8%硫酸乙醇溶液,在95℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置350nm波长的紫外光灯下检视,显相同颜色的荧光斑点;
D、活性成分仙鹤草的鉴别:
(1)取所述胶囊内容物0.5g,加0.2%氢氧化钠溶液15ml,超声处理10min,滤过,滤液加盐酸调pH值至2,滤过,滤液加乙酸乙酯提取2次,每次10ml,合并提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取仙鹤草对照药材4g,加水25ml,煎煮0.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加0.2%氢氧化钠溶液15ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;
(3)吸取上述两种溶液各15μl,以水饱和的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸为4∶2∶0.5的混合溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以0.4%三氯化铁乙醇溶液显色,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
E、对水分的检查:取胶囊剂的内容物,照水分测定法测定,不得过9.0%;
F、对装量差异的检查:每粒装量与标示装量相比较,装量差异限度应在标示装量的±10%以内,超出装量差异限度的不得多于2粒,并不得有1粒超出限度1倍;
G、对崩解时限的检查具体为:采用《中国药典2015版》规定的崩解时限检查法检查,应符合规定;
H、对微生物限度的检查:采用《中国药典2015版》规定的细菌、霉菌及酵母菌检查法和控制菌检查法检查,应符合规定;
I、对芍药苷含量的测定:
(1)供试品溶液的制备:取胶囊内容物0.05g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,精密加入45%甲醇45ml,称定重量,冷浸过夜后,在100w、30KHz条件下超声处理20分钟,再称重,用45%甲醇补足减失的重量,摇匀,0.45um微孔滤膜滤过,滤液作为供试品溶液;
(2)对照品溶液的制备:精密称取芍药苷对照品,加45%甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液,作为对照品溶液;
(3)分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各8ul,注入液相色谱仪,测定,计算,即得;其中,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以体积比75:25的0.04mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,检测波长为230nm,理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500;每粒含赤芍以芍药苷C23H28O11计,不得少于12.0mg。
本实施例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,3组供试品与益母草对照在相同位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,展板无拖尾,目标斑点清晰。
依据赤芍、三七以及仙鹤草的鉴别结果可知,各组样品均与相应对照在相同位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,展板无拖尾,目标斑点清晰;依据对水分、装量差异、崩解时限、微生物限度的检查结果可知,各组样品均符合规定;依据对芍药苷含量的测定结果可知,各组样品中芍药苷C23H28O11的含量均不少于12.0mg。
按照本实施例提供的质量检测方法进行检测,生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊均合格。
实施例3
按照以下方法对妇科断红饮胶囊进行质量检测:
A、活性成分益母草的鉴别:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.5g,溶于28ml无水乙醇,80℃回流提取50min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml水溶解,以3800转/分钟离心8min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱;所述活性炭-氧化铝柱的内径20mm,其填料由活性炭0.5g和200~300目氧化铝2g均匀混合而成;用30ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材3g,采用步骤(1)所述方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为5mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液、盐酸水苏碱对照品溶液以及阴性对照各10μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为10:6:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在105℃加热15min,放冷,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃烘干3min,再喷以体积比为10:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视;
B、活性成分赤芍的鉴别:
(1)取所述胶囊内容物1.5g,加水38ml,超声处理45min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取3次,每次30ml,合并提取液,加氨试液60ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加3ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取赤芍对照药材3g,加甲醇45ml,超声处理1.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加水38ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;取芍药苷对照品,加甲醇制成浓度为3mg/ml的溶液,作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各4μl,以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸为50∶8∶15∶0.3的混合液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以6%香草醛硫酸甲醇溶液,在115℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
C、活性成分三七的鉴别:
(1)取所述胶囊内容物1.5g,加水38ml,超声处理45min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取3次,每次30ml,合并提取液,加氨试液60ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加3ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取三七对照药材1.5g,加水15滴,搅匀,加水饱和的正丁醇溶液60ml,超声处理60min,滤过,滤液加氨试液60ml洗涤,弃去氨液,加入正丁醇饱和的水溶液60ml洗涤,弃去正丁醇水溶液,蒸干,残渣加甲醇3ml溶解,作为对照药材溶液;取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品,加甲醇制成各浓度均为1.5mg/ml的混合溶液作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各2μl,以在10℃以下放置过夜的三氯甲烷∶甲醇∶水为16∶10∶3的混合液的下层溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以12%硫酸乙醇溶液,在115℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置350nm波长的紫外光灯下检视,显相同颜色的荧光斑点。
D、活性成分仙鹤草的鉴别:
(1)取所述胶囊内容物1.5g,加0.8%氢氧化钠溶液45ml,超声处理30min,滤过,滤液加盐酸调pH值至3,滤过,滤液加乙酸乙酯提取3次,每次30ml,合并提取液,蒸干,残渣加甲醇3ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取仙鹤草对照药材12g,加水75ml,煎煮1.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加0.8%氢氧化钠溶液45ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;
(3)吸取上述两种溶液各15μl,以水饱和的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸为8∶4∶1.5的混合溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以1.5%三氯化铁乙醇溶液显色,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
E、对水分的检查:取胶囊剂的内容物,照水分测定法测定,不得过9.0%。
F、对装量差异的检查:每粒装量与标示装量相比较,装量差异限度应在标示装量的±10%以内,超出装量差异限度的不得多于2粒,并不得有1粒超出限度1倍;
G、对崩解时限的检查具体为:采用《中国药典2015版》规定的崩解时限检查法检查,应符合规定;
H、对微生物限度的检查:采用《中国药典2015版》规定的细菌、霉菌及酵母菌检查法和控制菌检查法检查,应符合规定;
I、对芍药苷含量的测定:
(1)供试品溶液的制备:取胶囊内容物0.15g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,精密加入55%甲醇55ml,称定重量,冷浸过夜后,在300w、50KHz条件下超声处理40分钟,再称重,用55%甲醇补足减失的重量,摇匀,0.45um微孔滤膜滤过,滤液作为供试品溶液;
(2)对照品溶液的制备:精密称取芍药苷对照品,加55%甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液,作为对照品溶液;
(3)分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各12ul,注入液相色谱仪,测定,计算,即得;其中,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以体积比65:35的0.06mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,检测波长为230nm,理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500;每粒含赤芍以芍药苷C23H28O11计,不得少于12.0mg。
本实施例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,3组供试品与益母草对照在相同位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,展板无拖尾,目标斑点清晰。
依据赤芍、三七以及仙鹤草的鉴别结果可知,各组样品均与相应对照在相同位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰,展板无拖尾,目标斑点清晰;依据对水分、装量差异、崩解时限、微生物限度的检查结果可知,各组样品均符合规定;依据对芍药苷含量的测定结果可知,各组样品中芍药苷C23H28O11的含量均不少于12.0mg。
按照本实施例提供的质量检测方法进行检测,生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊均合格。
实施例4
与实施例1相比,区别仅在于,所述益母草成分鉴别的步骤(1)具体为:取妇科断红饮胶囊内容物1.4g,溶于25ml无水乙醇,80℃回流提取50min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml水溶解,以3000转/分钟离心8min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径20mm,其填料由活性炭0.4g和200~300目氧化铝1.5g均匀混合而成;用20ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;其余步骤与实施例1相同。
本实施例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,3组供试品与益母草对照在相同位置显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰;斑点清晰程度略差于实施例1~3。
实施例5
与实施例1相比,区别仅在于,所述益母草成分鉴别的步骤(1)具体为:取妇科断红饮胶囊内容物1.8g,溶于35ml无水乙醇,100℃回流提取70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加10ml水溶解,以5000转/分钟离心12min,取上清液,水浴蒸干后加5ml无水乙醇溶解,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径15mm,其填料由活性炭0.6g和200~300目氧化铝2.5g均匀混合而成;用40ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用1ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;其余步骤与实施例1相同。
本实施例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,3组供试品与益母草对照在相同位置显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰;斑点清晰程度略差于实施例1~3。
对比例1
与实施例1相比,区别仅在于,所述益母草成分鉴别的步骤(1)中,取妇科断红饮胶囊内容物1.2g,溶于30ml无水乙醇,90℃回流提取60min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml水溶解,以5500转/分钟离心8min,取上清液;其余操作与实施例1相同。
本对比例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,采用本对比例所述方法进行鉴别,目标斑点之间的Rf值有差异,难以准确判断供试品与益母草对照的斑点是否在相同位置,且斑点清晰程度差于实施例1~5。
对比例2
与实施例1相比,区别仅在于,所述益母草成分鉴别的步骤(1)中,采用超声处理方法制备供试样品溶液,具体为:取所述胶囊内容物1.6g,加乙醇30ml,超声提取45min,放冷,过滤,滤液水浴蒸干,残渣加8ml水溶解,以4000转/分钟离心10min,取上清液,水浴蒸至近干,加5ml乙醇溶解,,上样于用无水乙醇润湿的活性炭-氧化铝柱;其余步骤与实施例1相同。
本对比例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,采用本对比例所述方法进行鉴别,目标斑点之间的Rf值有差异,难以准确判断供试品与益母草对照的斑点是否在相同位置,且斑点清晰程度差于实施例1~5。
对比例3
与实施例1相比,区别仅在于,所述益母草成分鉴别的步骤(1)中,采用专利文献CN101919942A公开的供试样品处理方法,制备供试样品溶液,具体为:取所述胶囊内容物1.2g,加乙醇30mL,加热回流1h,放冷,滤过,滤液浓缩至5mL,加于内径10mm、活性炭0.5g、100目-120目中性氧化铝2g的活性炭-氧化铝柱上,用30mL乙醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加0.5mL乙醇溶解,作为供试品溶液;其余步骤同实施例1。
本对比例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊,益母草成分的鉴别结果如图2所示(样品以及对照品对应的位置同实施例1)。由图2可知,采用本对比例所述方法进行鉴别,展板时出现严重拖尾,供试品难以实现有效分离,目标斑点模糊;且目标斑点之间的Rf值有差异,难以准确判断供试品与益母草对照的斑点是否在相同位置。
对比例4
与实施例1相比,区别仅在于,所述益母草成分鉴别的步骤(3)中,采用专利文献CN101919942A公开的薄层色谱法进行鉴别,具体为:以正丁醇-盐酸-水(4:1:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾溶液至斑点显色,日光下检视;其余步骤同实施例1。
本对比例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,采用本对比例所述方法进行鉴别,展开时间需6~8小时(实施例1~5仅需1~1.5小时),需反复喷显色剂,显色时间长达2-3天(实施例1~5可即刻显色),且难以准确判断供试品与益母草对照的斑点是否颜色相同,斑点清晰度差于实施例1~5。
对比例5
采用《中国药典2015版》第一部第290页公开的益母草的鉴别方法对妇科断红饮胶囊进行检测;其中:
供试品溶液制备方法为,取所述胶囊内容物1.2g,加乙醇30mL,加热回流1h,放冷,过滤,取滤液10ml蒸干,残渣加无水乙醇1ml使溶解,离心,取上清液作为供试品溶液;
另取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇制成每lml含1mg的溶液,作为对照品溶液;
照薄层色谱法为:吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)为展开剂,展开,取出,晾干,在105℃加热15分钟,放冷,喷以稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液(10:1)混合溶液至斑点显色清晰。
本对比例采用以上方法,分别鉴别了株洲千金药业股份有限公司生产的生产批号分别为20130701、20130901、20131101的三个不同批次的妇科断红饮胶囊;由益母草成分的鉴别结果可知,采用本对比例所述方法进行鉴别,效果与对比例3类似,展板时出现严重拖尾,供试品难以实现有效分离,目标斑点模糊;且目标斑点之间的Rf值有差异,难以准确判断供试品与益母草对照的斑点是否在相同位置。
实验例1:不同薄层硅胶板耐用性考察
采用实施例1提供的方法,对三个批次的药品中益母草成分进行鉴别。其中,步骤(3)分别用自制薄层硅胶G板、购买自青岛海洋集团的预制薄层硅胶G板及高效薄层硅胶G板试验,点样量10μl;鉴别结果如图3所示。
结果显示:使用不同的硅胶G板,供试品色谱中与对照品和对照药材色谱相应位置显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。说明此鉴别方法对不同硅胶G板具有较好的耐用性。
实验例2:不同温度条件下进行鉴别的效果考察
采用实施例1提供的方法,对三个批次的药品中益母草成分进行鉴别。其中,步骤(3)分别在5℃和30℃的环境温度下进行展开;鉴别结果如图4所示。
结果显示:按照上述不同温条件下进行试验,供试品色谱中与对照品和对照药材色谱相应位置显相同颜色的斑点,且斑点清晰,阴性对照无干扰,说明此鉴别方法在不同的环境温度条件下具有较好的耐用性。
实验例3:不同湿度条件下展开的薄层色谱条件耐用性考察
采用实施例1提供的方法,对三个批次的药品中益母草成分进行鉴别。其中,步骤(3)分别在30%和75%的环境湿度下进行展开;鉴别结果如图5所示。
结果显示:按照上述不同湿度件下进行试验,供试品色谱中与对照品和对照药材色谱相应位置显相同颜色的斑点,且斑点清晰,阴性对照无干扰,说明此鉴别方法在不同的环境湿度条件下具有较好的耐用性。
本实验例分别采用专利文献CN101919942A的实施例6、7和8公开的方案,在75%的环境湿度下进行质量检测。
结果显示,在对比母草进行鉴别时,专利文献CN101919942A提供的方法在75%的环境湿度条件下,长时间内难以实现有效分离和显色;相比较而言,本发明实施例1~5提供的方法,仅需展开1~1.5小时、喷显色剂后3~6h,即可获得清晰且可以用于准确鉴别的斑点。
进一步比较可知,在所述高湿度的环境下,本发明实施例1~5提供的方法在对益母草进行鉴别时可以获得清晰完整的斑点,展开所需时间以及获得可用于准确鉴别的清晰斑点所需的显色时间均明显短于对比例1~5中对益母草的鉴别。
由于本发明提供鉴别方法受环境湿度影响小,尤其是对主要成分益母草进行鉴别时稳定性高,斑点清晰,明显缩短了鉴别时间,可适用于我国南方大部分地区常年潮湿多雨、湿度较大的环境,为妇科断红饮胶囊的快速、稳定鉴别提供了重要有效的手段。
虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.妇科断红饮胶囊的质量检测方法,其特征在于,包括:对活性成分益母草、赤芍、三七和仙鹤草的鉴别,对水分、装量差异、崩解时限和微生物限度的检查,以及对芍药苷含量的测定;
所述活性成分益母草的鉴别方法包括如下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.4~1.8g,溶于25~35ml无水乙醇,80~100℃回流提取,放冷、过滤后收集滤液,蒸干,所得残渣加7ml~10ml水溶解,以3000~5000转/分钟离心后取上清液,蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,用无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)对照品溶液的制备;
(3)照薄层色谱法鉴别。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)供试品溶液的制备包括以下步骤:取妇科断红饮胶囊内容物1.5g~1.7g,溶于28ml~32ml无水乙醇,80~100℃回流提取50min~70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml~9ml水溶解,以3800~4200转/分钟离心8min~12min,取上清液,水浴蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,用无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述活性炭-氧化铝柱的填料由活性炭和200~300目中性氧化铝以重量比4~6:15~25均匀混合而成;
优选由活性炭0.4~0.6g和200~300目氧化铝1.5~2.5g均匀混合而成。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述活性炭-氧化铝柱的内径为15mm或20mm,优选为内径20mm;
所述用无水乙醇洗脱的洗脱体积为20ml~40ml,优选为28ml~32ml。
5.根据权利要求1~4任意一项所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述对照品溶液包括益母草对照溶液和盐酸水苏碱对照品溶液;
所述益母草对照溶液的制备方法为:取益母草药材2.9g~3.1g,采用与制备供试品溶液相同的方法制备;
所述盐酸水苏碱对照品溶液的制备方法为:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为4.8~5.2mg/ml,即可。
6.根据权利要求1~5任意一项所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述照薄层色谱法鉴别采用的展开剂由丙酮、无水乙醇和盐酸以体积比9~11:5~7:1组成,优选以体积比10:6:1组成。
7.根据权利要求1~6任意一项所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述照薄层色谱法鉴别中,采用展开剂展开、晾干后,先在100~110℃加热10~20min,放冷后喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在100~110℃烘干2~4min,再喷以显色剂进行显色。
8.根据权利要求1~7任意一项所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述照薄层色谱法鉴别采用的显色剂由稀碘化铋钾溶液与1%三氯化铁乙醇溶液以体积比8~12:1混合而成,优选以体积比10:1混合而成。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述活性成分益母草的鉴别方法包括如下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.4~1.8g,溶于25~35ml无水乙醇,80~100℃回流提取50min~70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml~10ml水溶解,以3000~5000转/分钟离心8min~12min,取上清液,水浴蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径为15mm或20mm,其填料由活性炭0.4~0.6g和200~300目氧化铝1.5~2.5g均匀混合而成;用20ml~40ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用0.5ml~1.5ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材2.9g~3.1g,采用与制备供试品溶液相同的方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为4.8~5.2mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液和盐酸水苏碱对照品溶液各10~15μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为9~11:5~7:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在100~110℃加热10~20min,放冷,喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在100~110℃烘干2~4min,再喷以体积比为8~12:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视,即可;
优选地,所述活性成分益母草的鉴别方法包括如下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取妇科断红饮胶囊内容物1.5g~1.7g,溶于28ml~32ml无水乙醇,80~100℃回流提取50min~70min,放冷、过滤后收集滤液,水浴蒸干,所得残渣加7ml~9ml水溶解,以3800~4200转/分钟离心8min~12min,取上清液,水浴蒸干,上样于活性炭-氧化铝柱,所述活性炭-氧化铝柱的内径为15mm或20mm,其填料由活性炭0.4~0.6g和200~300目氧化铝1.5~2.5g均匀混合而成;用28ml~32ml无水乙醇洗脱后收集洗脱液,蒸干,所得残渣用0.8ml~1.2ml无水乙醇溶解,取上清液作为供试品溶液;
(2)益母草对照溶液的制备:取益母草药材2.9g~3.1g,采用与制备供试品溶液相同的方法,制备益母草对照溶液;
盐酸水苏碱对照品溶液的制备:取盐酸水苏碱对照品,加无水乙醇溶解至浓度为4.8~5.2mg/ml;
(3)照薄层色谱法鉴别:取所述供试品溶液、益母草对照溶液和盐酸水苏碱对照品溶液各10~15μl,平行点样于同一块硅胶G板上,以体积比为9~11:5~7:1的丙酮-无水乙醇-盐酸为展开剂展开,晾干后,在100~110℃加热10~20min,放冷,喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在100~110℃烘干2~4min,再喷以体积比为8~12:1的稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇混合溶液,日光下检视,即可。
10.根据权利要求1~9任意一项所述的方法,其特征在于,所述活性成分赤芍的鉴别包括以下步骤:
(1)取所述胶囊内容物0.5g~1.5g,加水12ml~38ml,超声处理15min~45min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取1~5次,每次10ml~30ml,合并提取液,加氨试液20ml~60ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加1ml~3ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取赤芍对照药材1g~3g,加甲醇15ml~45ml,超声处理0.5h~1.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加水12ml~38ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;取芍药苷对照品,加甲醇制成浓度为1mg/ml~3mg/ml的溶液,作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各3μl~5μl,以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸为30~50∶2~8∶5~15∶0.1~0.3的混合液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以4~6%香草醛硫酸甲醇溶液,在95℃~115℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
所述活性成分三七的鉴别包括以下步骤:
(1)取所述胶囊内容物0.5g~1.5g,加水12ml~38ml,超声处理15min~45min,滤过,滤液加水饱和的正丁醇溶液提取1~5次,每次10ml~30ml,合并提取液,加氨试液20ml~60ml洗涤,弃去洗液,蒸干,加1ml~3ml甲醇溶解残渣,作为供试品溶液;
(2)取三七对照药材0.5g~1.5g,加水5滴~15滴,搅匀,加水饱和的正丁醇溶液20ml~60ml,超声处理20min~60min,滤过,滤液加氨试液20ml~60ml洗涤,弃去氨液,加入正丁醇饱和的水溶液20ml~60ml洗涤,弃去正丁醇水溶液,蒸干,残渣加甲醇1ml~3ml溶解,作为对照药材溶液;取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品,加甲醇制成各浓度均为0.5mg/ml~1.5mg/ml的混合溶液作为对照品溶液;
(3)吸取上述三种溶液各1~3μl,以在10℃以下放置过夜的三氯甲烷∶甲醇∶水为10~16∶4~10∶1~3的混合液的下层溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以8~12%硫酸乙醇溶液,在95℃~115℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置350nm波长的紫外光灯下检视,显相同颜色的荧光斑点;
所述活性成分仙鹤草的鉴别包括以下步骤:
(1)取所述胶囊内容物0.5g~1.5g,加0.2%~0.8%氢氧化钠溶液15ml~45ml,超声处理10min~30min,滤过,滤液加盐酸调pH值至2~3,滤过,滤液加乙酸乙酯提取1~3次,每次10ml~30ml,合并提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml~3ml溶解,作为供试品溶液;
(2)取仙鹤草对照药材4g~12g,加水25ml~75ml,煎煮0.5h~1.5h,滤过,滤液蒸干,残渣加0.2%~0.8%氢氧化钠溶液15ml~45ml,温热使溶解,滤过,滤液与供试品溶液同法提取制成对照药材溶液;
(3)吸取上述两种溶液各14μl~16μl,以水饱和的甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸为4~8∶2~4∶0.5~1.5的混合溶液为展开剂,进行薄层色谱法试验,喷以0.5%~1.5%三氯化铁乙醇溶液显色,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;
对水分的检查具体为:取胶囊剂的内容物,照水分测定法测定,不得过9.0%;
对装量差异的检查具体为:每粒装量与标示装量相比较,装量差异限度应在标示装量的±10%以内,超出装量差异限度的不得多于2粒,并不得有1粒超出限度1倍;
对崩解时限的检查具体为:采用崩解时限检查法检查,应符合规定;
对微生物限度的检查具体为:采用细菌、霉菌及酵母菌检查法和控制菌检查法检查,应符合规定;
对芍药苷含量的测定包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:取胶囊内容物0.05~0.15g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,精密加入45~55%甲醇45~55ml,称定重量,冷浸过夜后,在100~300w、30~50KHz条件下超声处理20~40分钟,再称重,用45~55%甲醇补足减失的重量,摇匀,0.45um微孔滤膜滤过,滤液作为供试品溶液;
(2)对照品溶液的制备:精密称取芍药苷对照品,加45~55%甲醇制成每1ml含0.05~0.15mg的溶液,作为对照品溶液;
(3)分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各8~12ul,注入液相色谱仪,测定,计算,即得;其中,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以体积比65~75:25~35的0.04~0.06mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,检测波长为230nm,理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500;每粒含赤芍以芍药苷C23H28O11计,不得少于12.0mg。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610220326.4A CN105784913B (zh) | 2016-04-11 | 2016-04-11 | 妇科断红饮胶囊的质量检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610220326.4A CN105784913B (zh) | 2016-04-11 | 2016-04-11 | 妇科断红饮胶囊的质量检测方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105784913A true CN105784913A (zh) | 2016-07-20 |
CN105784913B CN105784913B (zh) | 2018-07-06 |
Family
ID=56396133
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610220326.4A Active CN105784913B (zh) | 2016-04-11 | 2016-04-11 | 妇科断红饮胶囊的质量检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105784913B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111735889A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-10-02 | 广东一方制药有限公司 | 化湿败毒组合物的质量检测方法 |
CN111983106A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-11-24 | 广东一方制药有限公司 | 化湿败毒组合物的质量控制方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1973897B (zh) * | 2006-12-21 | 2010-04-14 | 贵州益佰制药股份有限公司 | 产后逐瘀片的检测方法 |
CN101919942A (zh) * | 2009-06-10 | 2010-12-22 | 株洲千金药业股份有限公司 | 一种治疗妇科功血疾病的中药组合物、其制备方法以及其胶囊剂的质量控制方法 |
CN102539588A (zh) * | 2011-11-11 | 2012-07-04 | 云南良方制药有限公司 | 消结安制剂质量检测中供试品溶液的制备方法 |
CN104161847A (zh) * | 2014-07-25 | 2014-11-26 | 北京汉典制药有限公司 | 一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法 |
CN104483402A (zh) * | 2014-12-02 | 2015-04-01 | 贵州汇正制药有限责任公司 | 一种抗宫炎软胶囊的质量检测方法 |
-
2016
- 2016-04-11 CN CN201610220326.4A patent/CN105784913B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1973897B (zh) * | 2006-12-21 | 2010-04-14 | 贵州益佰制药股份有限公司 | 产后逐瘀片的检测方法 |
CN101919942A (zh) * | 2009-06-10 | 2010-12-22 | 株洲千金药业股份有限公司 | 一种治疗妇科功血疾病的中药组合物、其制备方法以及其胶囊剂的质量控制方法 |
CN102539588A (zh) * | 2011-11-11 | 2012-07-04 | 云南良方制药有限公司 | 消结安制剂质量检测中供试品溶液的制备方法 |
CN104161847A (zh) * | 2014-07-25 | 2014-11-26 | 北京汉典制药有限公司 | 一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法 |
CN104483402A (zh) * | 2014-12-02 | 2015-04-01 | 贵州汇正制药有限责任公司 | 一种抗宫炎软胶囊的质量检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
王美多 等: "高效薄层色谱法测定妇康片中盐酸水苏碱的含量", 《内蒙古石油化工》 * |
陆爱武 等: "益母草中水苏碱TLC鉴别方法研究", 《实用中西医结合临床》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111735889A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-10-02 | 广东一方制药有限公司 | 化湿败毒组合物的质量检测方法 |
CN111983106A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-11-24 | 广东一方制药有限公司 | 化湿败毒组合物的质量控制方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105784913B (zh) | 2018-07-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107843677B (zh) | 赤芍对照提取物及其制备方法和应用 | |
CN106501442B (zh) | 一种芩黄清肺散的质量检测方法 | |
CN102139008B (zh) | 小儿导赤片的检测方法 | |
CN104161847A (zh) | 一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法 | |
CN105241997A (zh) | 一种炭类中药配方颗粒的薄层色谱鉴别方法 | |
CN105784913A (zh) | 妇科断红饮胶囊的质量检测方法 | |
CN101549084A (zh) | 吉祥草药材的质量检测方法 | |
CN113759065B (zh) | 一种同时鉴定黄连和黄柏成分的方法及其应用 | |
CN102608248B (zh) | 热淋清颗粒和头花蓼的薄层色谱指纹图谱的测定方法 | |
CN102091297A (zh) | 一种肝保健药品的质量控制方法 | |
CN114942297B (zh) | 用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法 | |
CN109655572A (zh) | 一种快速鉴别玉屏风颗粒成分的薄层色谱分析方法 | |
CN103399120B (zh) | 一种药材溪黄草的薄层鉴别方法 | |
CN105616946A (zh) | 一种治疗咳嗽的制剂及其制备和质量控制方法 | |
CN105628853A (zh) | 一种芸香草药材的质量检测方法 | |
CN106706766A (zh) | 一种治疗艾滋病的中药唐草片新增检测成分的测定方法 | |
CN105911210B (zh) | 妇科断红饮胶囊中益母草成分的鉴别方法 | |
CN113759016B (zh) | 一种薄层色谱的构建方法和同时鉴定金银花和甘草成分的方法及其应用 | |
CN101168009B (zh) | 一种猴枣牛黄散的定性定量检测方法 | |
CN113125627B (zh) | 一种治疗肾病的中药组合物的有效成分检测方法 | |
CN101181363A (zh) | 一种人参大黄注射液及其制备方法 | |
CN102662027B (zh) | 宽筋藤配方颗粒的薄层色谱鉴别方法 | |
CN1235602C (zh) | 一种抗病毒口服液的质量检测方法 | |
CN113281449B (zh) | 小柴胡制剂的薄层鉴别方法 | |
CN102078386A (zh) | 一种逍遥合剂的检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |