CN105758912A - 一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备及其应用 - Google Patents
一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种TiO2?MoS2光电Saos?2 cell细胞传感器的制备及应用,属于生物传感检测技术领域。基于TiO2?MoS2复合物作为信标物质,可实现对实体组织目标Saos?2 cell细胞的定性、定量检测,设备简单、成本低、易于微型化。
Description
技术领域
本发明涉及一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备及应用,该传感器用于的生物组织Saos-2
cell细胞的检测,属于生物传感检测技术领域。
背景技术
企业参与科技创新,与科技界联手,实现科技成果的转化,共同为国民经济的发展做贡献,已经成为全社会的共识。验证和完善实验室科研成果,并为我国生命科学的深化研究,积聚巨量数据库和大群体样本库,搭建新的技术平台和支撑***。鉴于此,本专利将利用TiO2-MoS2纳米复合材料的信号放大作用,利用体系中光致电信号的强度变化来对真实生物组织经培养后抽提的Saos-2 cell细胞进行检测,并将所研制的光电生物传感器进一步推广到实际应用中,该方法具有成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速等优点,而且制备过程较为简单,大大克服了目前Saos-2
cell细胞检测方法局限于纯生物领域的弊端,有效拓展了Saos-2 cell细胞检测方法的范围。
发明内容
本发明的目的之一是对Saos-2 cell细胞的生物特异亲和性及纳米光电复合材料TiO2-MoS2,制备了一种具备特异性,超灵敏的光电生物传感器;
本发明的目的之二是将该传感器用于实体组织抽提的Saos-2 cell细胞的检测。
本发明的技术方案如下:
1. 一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备
(1)将1.0
cm×2.5 cm的长方形ITO导电玻璃,依次用丙酮、超纯水、乙醇超声清洗20 min,纯氮吹干,将其作为工作电极,铂片为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,构成三电极电解池;
(2)在ITO电极表面上,滴涂5~20 µL TiO2纳米线;
TiO2纳米线的制备
15~25 mL CTAB溶液加入到20~30 mL TTIP溶液中,搅拌0.5~1.5 h,加入50~60 mL乙二醇和0.6~1.2 g尿素,搅拌1 h,然后转移到100 mL高压反应釜中,140~160 ℃ 下加热15~25 h,收集固体,用蒸馏水洗涤3~8次,放入鼓风干燥箱中75~85℃下加热12~36
h,制得TiO2纳米线;
TTIP溶液是将0.16~0.40 g TTIP加入到12~14 g浓盐酸中,剧烈搅拌,制得;
CTAB溶液是将0.15~0.25 g CTAB加入到25~30 mL蒸馏水中,搅拌20~40 min,制得;
(3)将0.5~1.5
g MoS2量子点涂到TiO2纳米线表面上;
MoS2量子点的制备
20~30 mL钼酸钠溶液和15~25 mL L-半胱氨酸溶液混合,超声10~20 min,放入高压反应釜中200 ℃下加热24~48 h,蒸馏水洗涤3~8次,8000 rpm/min下离心,取沉淀,制得MoS2量子点;
钼酸钠溶液是将0.2~0.3 g钼酸钠加入到20~30
mL蒸馏水中,超声5~15 min,加1mol/L盐酸调节pH至6.5,制得;
L-半胱氨酸溶液是将0.3~0.8 g L-半胱氨酸加入到50 mL蒸馏水中,制得;
(4)继续滴涂10~20
µL、5~50 µg/mL的目标Saos-2
cell细胞的特异性抗体到工作电极表面,4 ℃冰箱中晾干,制得一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器。
2.目标Saos-2 cell细胞的检测步骤
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂片电极为辅助电极,所制备的TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器为工作电极,在10~50
mL、 pH 7~9的PBS,0.1~0.3 mmol/L的抗坏血酸缓冲溶液中进行测试;
(2)用时间-电流法对目标Saos-2 cell细胞标准溶液进行检测,输入电压为0.1 V,取样间隔 20 s,取样时间20 s,运行时间500 s,光源选择430 nm,记录电流变化,绘制工作曲线;
(3)将待测样品代替目标Saos-2
cell细胞标准溶液,按照工作曲线的绘制方法进行测定。
本发明的成果:
(1)该方法不需经过预处理,电极选择性、灵敏度和重现性较好,电极响应快,测得线性范围2
~10000 cell/mL,检测限为2 cell/mL。
(2)本发明使用TiO2-MoS2做为光电信标物质,MoS2量子点对TiO2的掺杂大大缩短了二者之间的距离,促进了TiO2的光电性能,增强本发明所述传感器的光电性能。
(3)本发明所检测Saos-2 cell细胞均从实际生物组织中提取,具有一定的实用价值。
具体实施方式:
为进一步说明,结合一下实施例具体说明:
实施例 1一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备
(1)将1.0
cm×2.5 cm的长方形ITO导电玻璃,依次用丙酮、超纯水、乙醇超声清洗20 min,纯氮吹干,将其作为工作电极,铂片为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,构成三电极电解池;
(2)在ITO电极表面上,滴涂5 µL TiO2纳米线;
(3)将0.5 g
MoS2量子点涂到TiO2纳米线表面上;
(4)继续滴涂10 µL、5 µg/mL的目标Saos-2 cell细胞的特异性抗体到工作电极表面,4 ℃冰箱中晾干,制得一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器。
实施例 2一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备
(1)将1.0
cm×2.5 cm的长方形ITO导电玻璃,依次用丙酮、超纯水、乙醇超声清洗20 min,纯氮吹干,将其作为工作电极,铂片为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,构成三电极电解池;
(2)在ITO电极表面上,滴涂15 µL TiO2纳米线;
(3)将1 g
MoS2量子点涂到TiO2纳米线表面上;
(4)继续滴涂15 µL、25 µg/mL的目标Saos-2 cell细胞的特异性抗体到工作电极表面,4 ℃冰箱中晾干,制得一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器。
实施例 3一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备
(1)将1.0
cm×2.5 cm的长方形ITO导电玻璃,依次用丙酮、超纯水、乙醇超声清洗20 min,纯氮吹干,将其作为工作电极,铂片为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,构成三电极电解池;
(2)在ITO电极表面上,滴涂5~20 µL TiO2纳米线;
(3)将1.5 g
MoS2量子点涂到TiO2纳米线表面上;
(4)继续滴涂20 µL、50 µg/mL的目标Saos-2 cell细胞的特异性抗体到工作电极表面,4 ℃冰箱中晾干,制得一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器。
实施例 4 TiO2纳米线的制备
15 mL CTAB溶液加入到30 mL TTIP溶液中,搅拌1.5 h,加入50 mL乙二醇和1.2 g尿素,搅拌1 h,然后转移到100 mL高压反应釜中,150 ℃ 下加热18 h,收集固体,用蒸馏水洗涤5次,放入鼓风干燥箱中80 ℃下加热24 h,制得TiO2纳米线;
TTIP溶液是将0.24 g TTIP加入到12 g浓盐酸中,剧烈搅拌,制得;
CTAB溶液是将0.15 g CTAB加入到30 mL蒸馏水中,搅拌25 min,制得。
实施例 5 MoS2量子点的制备
20 mL钼酸钠溶液和25 mL L-半胱氨酸溶液混合,超声15
min,放入高压反应釜中200 ℃下加热36 h,蒸馏水洗涤5次,8000 rpm/min下离心,取沉淀,制得MoS2量子点;
钼酸钠溶液是将0.2 g钼酸钠加入到30 mL蒸馏水中,超声10 min,加1mol/L盐酸调节pH至6.5,制得;
L-半胱氨酸溶液是将0.6 g L-半胱氨酸加入到50 mL蒸馏水中,制得。
实施例 6 Saos-2 cell细胞的检测
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂片电极为辅助电极,所制备的TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器为工作电极,在50 mL、 pH 7.4的PBS,0.1 mmol/L的抗坏血酸缓冲溶液中进行测试;
(2)用时间-电流法对目标Saos-2 cell细胞标准溶液进行检测,输入电压为0.1 V,取样间隔 20 s,取样时间20 s,运行时间500 s,光源选择430 nm,记录电流变化,绘制工作曲线;
(3)将待测样品代替目标Saos-2
cell细胞标准溶液,按照工作曲线的绘制方法进行测定;
(4)线性范围2
~10000 cell/mL,检测限为2cell/mL。
Claims (2)
1.一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将1.0 cm×2.5 cm的长方形ITO导电玻璃,依次用丙酮、超纯水、乙醇超声清洗20 min,纯氮吹干,将其作为工作电极,铂片为对电极,饱和甘汞电极为参比电极,构成三电极电解池;
(2)在ITO电极表面上,滴涂5~20 µL TiO2纳米线;
所述TiO2纳米线,制备步骤如下:
15~25 mL CTAB溶液加入到20~30 mL
TTIP溶液中,搅拌0.5~1.5 h,加入50~60 mL乙二醇和0.6~1.2 g尿素,搅拌1 h,然后转移到100 mL高压反应釜中,140~160 ℃ 下加热15~25 h,收集固体,用蒸馏水洗涤3~8次,放入鼓风干燥箱中75~85
℃下加热12~36 h,制得TiO2纳米线;
所述TTIP溶液是将0.16~0.40 g TTIP加入到12~14 g浓盐酸中,剧烈搅拌,制得;
所述CTAB溶液是将0.15~0.25 g CTAB加入到25~30 mL蒸馏水中,搅拌20~40 min,制得;
(3)将0.5~1.5 g MoS2量子点涂到TiO2纳米线表面上;
所述MoS2量子点,制备步骤如下:
20~30 mL钼酸钠溶液和15~25 mL
L-半胱氨酸溶液混合,超声10~20
min,放入高压反应釜中200 ℃下加热24~48 h,蒸馏水洗涤3~8次,8000 rpm/min下离心,取沉淀,制得MoS2量子点;
所述钼酸钠溶液是将0.2~0.3
g钼酸钠加入到20~30 mL蒸馏水中,超声5~15 min,加1mol/L盐酸调节pH至6.5,制得;
所述L-半胱氨酸溶液是将0.3~0.8 g L-半胱氨酸加入到50 mL蒸馏水中,制得;
(4)继续滴涂10~20 µL、5~50 µg/mL的目标Saos-2 cell细胞的特异性抗体到工作电极表面,4 ℃冰箱中晾干,制得一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器。
2.如权利要求1所述的制备方法制备纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器,用于目标Saos-2 cell细胞的检测,检测步骤如下:
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂片电极为辅助电极,所制备的TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器为工作电极,在10~50 mL、 pH 7~9的PBS,0.1~0.3 mmol/L的抗坏血酸缓冲溶液中进行测试;
(2)用时间-电流法对目标Saos-2 cell细胞标准溶液进行检测,输入电压为0.1 V,取样间隔 20 s,取样时间20 s,运行时间500 s,光源选择430 nm,记录电流变化,绘制工作曲线;
(3)将待测样品代替目标Saos-2 cell细胞标准溶液,按照工作曲线的绘制方法进行测定。
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