CN105693609A - 多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物及其制备方法和用途，其中，该化合物为具有式I所示结构式的多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物或其药学上可接受的盐、酯或溶剂合物，其中，R₁、R₂、R₃和n如说明书中定义。本发明的该化合物能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、预防和/或***。

Description

多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及医药领域，具体地，涉及多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物及其制备方法和用途化合物及其制备方法和用途。

背景技术

癌症已经成为严重威胁人类健康的第二大因素。近30年来，虽然人类对癌症的认识有了很大程度提高，然而针对癌症的治疗却未有同幅度的改善。为此，对于癌症治疗的方法和手段进行必要的创新和完善就显得尤为重要。寻找抗癌药物的新靶点目前是癌症治疗的一个热点。比如，生存素Survivin在抗癌药物领域的关注度近年来越来越高。Survivin作为肿瘤治疗的一个新领域，从开始发现到深入研究短短不到20年的历史。围绕Survivin研发的小分子药物YM155和NSC80467尽管抗癌机理还不明确，但是实验证实它们在多种癌细胞中均能有效地抑制Survivin蛋白的表达，并且对多种肿瘤细胞显示出很高的抗癌活性。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制拓扑异构酶、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、或者预防和/或***的手段。

在本发明的一个方面，本发明提供了一种多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物。根据本发明的实施例，该化合物为具有式I所示结构式的多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物或其药学上可接受的盐、酯或溶剂合物，

其中，R₁各自独立地为H、碳原子数为1～5的烷氧基、卤素、碳原子数为1～5的卤代烷基、硝基、胺基或者碳原子数为1～5的直链烷基或支链烷基；

R₂为碳原子数为1～5的烷氧基或者任选取代的胺基；

R₃各自独立地为为H、碳原子数为1～5的烷氧基、碳原子数为1～5的卤代烷基、硝基、胺基或者碳原子数为1～5的直链烷基或支链烷基；

m＝1-4的整数；

n＝1～5的整数；

p＝1-4的整数。

发明人发现，本发明的该化合物能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、或者预防和/或***。

根据本发明的实施例，R₁各自独立地为为H、OCH₃、OCH₂CH₃、OCH₂CH₂CH₃、OCH₂CH₂CH₂CH₃、F、Cl、Br、CF₃、NO₂、NH₂或碳原子数为1-5的直链烷基，

R₂为NH₂、N(CH₃)₂或OCH₃，

R₃各自独立地为为H、-OCH₃、-NH₂、-NO₂、-CF₃、-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、或-CH₂CH₂CH₂CH₃，

m＝1-4的整数；

n＝1-4的整数；

p＝1-4的整数。

根据本发明的实施例，R₁各自独立地为为OCH₃、Cl、NO₂、或CH₃，

R₂为N(CH₃)₂或OCH₃，

R₃各自独立地为为H、-OCH₃、-CF₃、或-CH₂CH₃，

m＝1；

n＝2或3；

p＝1或3。

根据本发明的一些具体示例，根据本发明实施例的化合物为下列之一：

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

5,7-二氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-乙基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺。

在本发明的另一方面，本发明提供了一种制备前面所述化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：(1)使式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物反应，以便获得式Ⅳ所示化合物；(2)使式Ⅳ所示化合物与浓硫酸反应，以便获得式Ⅴ所示化合物；(3)使式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物反应，以便获得式Ⅵ所示化合物；(4)使式Ⅵ所示化合物与多取代苯基烷基胺类化合物反应，以便获得式I所示化合物，

其中，R₁、R₂、R₃、m、n、p如前面所定义。发明人发现，利用本发明的方法能够快速有效地制备获得前面所述的化合物，且该方法操作简单、方便快捷、目标化合物收率较高，适于规模化生产。

根据本发明的实施例，烷基伯胺类化合物具有式1-式3之一所示的结构。多取代苯基烷基胺类化合物具有如下所示的结构：

根据本发明的一些具体示例，多取代苯基烷基胺类化合物具有式4-式9之一所示的结构。由此，能够有效获得前面所述的化合物。

根据本发明的实施例，在步骤(1)中，以铜为催化剂、碳酸钾作为碱，使式II所示化合物与式III所示化合物在无水二甲基甲酰胺中反应，以便获得式Ⅳ所示化合物。根据本发明的具体示例，在步骤(1)中，于100-130℃下，以铜为催化剂、碳酸钾作为碱，使式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物按照摩尔比为1：1.5的比例在无水二甲基甲酰胺中反应1-12小时。

根据本发明的实施例，在步骤(2)中，于50-100℃下，使式Ⅳ所示化合物与浓硫酸反应1-5小时。

根据本发明的实施例，在步骤(3)中，于0-50℃下，以N,N'-羰基二咪唑作为缩合剂，使式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物在无水二甲基甲酰胺中反应10-30小时。由此，有利于反应进行，减少副反应的发生，提高产率，从而快速有效地获得前面所述的化合物。

根据本发明的实施例，在步骤(4)中，于50-100℃下，使式Ⅵ所示化合物与多取代苯基烷基胺类化合物反应10-30小时。由此，能够使得各反应物在最适合的温度、配比等条件下进行反应，有利于减少副反应，提高产率和反应效率。

在本发明的再一方面，本发明提供了一种药物组合物。根据本发明的实施例，该药物组合物含有前面所述的化合物。发明人发现，本发明的药物组合物能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、预防和/或***，进而能够有效用于癌症的治疗。

根据本发明的实施例，拓扑异构酶为拓扑异构酶II。

根据本发明的实施例，真核生物为哺乳动物；肿瘤细胞为癌细胞；进一步地，癌细胞为白血病癌细胞、乳腺癌细胞、肝癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞、脑癌细胞、卵巢癌细胞、子宫癌细胞、睾丸癌细胞、皮肤癌细胞、胃癌细胞、鼻咽癌细胞、结肠癌细胞、膀胱癌细胞或直肠癌细胞，其中，白血病癌细胞优选人慢性髓原白血病细胞，肝癌细胞优选人肝癌细胞。

在本发明的又一方面，本发明提供了前面所述的化合物或药物组合物在制备药物中的用途。根据本发明的实施例，该药物可以用于有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、或者预防和/或***。

附图说明

图1显示了根据本发明的一个实施例，化合物16抑制拓扑异构酶II的凝胶电泳检测结果图。

图2显示了根据本发明的一个实施例，化合物16的蛋白电泳图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

在本文中，“式N所示化合物”在本文中有时也称为“化合物N”，在本文中N为1-17的任意整数，例如“式16所示化合物”在本文中也可以称为“化合物16”。

如本发明所描述的，取代基画一个键连接到中心的环上形成的环体系(如式II所示)代表取代基R₁可以在环上任何可取代的位置进行取代。例如，式II代表苯环上任何可能被取代的位置均可被取代。

另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本文中通篇采用的描述方式“…各自独立地为”，表示在相同的基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响。例如，式II所示化合物中m个R₁之间互不影响。

本发明所使用的“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的有机盐和无机盐。药学上可接受的盐在所属领域是为技术人员所熟知的。

本发明的“溶剂合物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的化合物所形成的缔合物。形成溶剂合物的溶剂包括，但并不限于，水，异丙醇，乙醇，甲醇，二甲亚砜，乙酸乙酯，乙酸和氨基乙醇。

在本发明的一个方面，本发明提供了一种化合物。根据本发明的实施例，该化合物为具有式I所示结构式的化合物或其药学上可接受的盐、酯或溶剂合物，

其中，R₁各自独立地为H、碳原子数为1～5的烷氧基、卤素、碳原子数为1～5的卤代烷基、硝基、胺基或者碳原子数为1～5的直链烷基或支链烷基；

R₂为碳原子数为1～5的烷氧基或者任选取代的胺基；

R₃各自独立地为为H、碳原子数为1～5的烷氧基、碳原子数为1～5的卤代烷基、硝基、胺基或者碳原子数为1～5的直链烷基或支链烷基；

m＝1-4的整数；

n＝1～5的整数；

p＝1-4的整数。

发明人发现，本发明的该化合物能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、或者预防和/或***。

根据本发明的实施例，R₁各自独立地为为H、OCH₃、OCH₂CH₃、OCH₂CH₂CH₃、OCH₂CH₂CH₂CH₃、F、Cl、Br、CF₃、NO₂、NH₂或碳原子数为1-5的直链烷基，

R₂为NH₂、N(CH₃)₂或OCH₃，

R₃各自独立地为H、-OCH₃、-NH₂、-NO₂、-CF₃、-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、或-CH₂CH₂CH₂CH₃，

m＝1-4的整数；

n＝1-4的整数；

p＝1-4的整数。

根据本发明的实施例，R₁各自独立地为为OCH₃、Cl、NO₂、或CH₃，

R₂为N(CH₃)₂或OCH₃，

R₃各自独立地为为H、-OCH₃、-CF₃、或-CH₂CH₃，

m＝1；

n＝2或3；

p＝1或3。

根据本发明的一些具体示例，根据本发明实施例的化合物为下列之一：

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

5,7-二氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-乙基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺。

本发明提供的化合物经过多种肿瘤细胞系测试(包括肝癌细胞，乳腺癌细胞等)以及DNA连接实验，拓扑异构酶活性抑制测试，蛋白电泳实验检测Survivin蛋白表达的下调等，证明本发明的化合物是一种潜在的抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白表达以及对拓扑异构酶II有一定抑制活性的抗肿瘤药物，能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、或者预防和/或***。本发明提供的化合物原料易得，制备方法简单，实验证明其有良好的抗癌效果，在抗肿瘤药物设计研发领域有着良好的应用前景。

在本发明的另一方面，本发明提供了一种制备前面所述化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括以下步骤：

(1)使式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物反应，以便获得式Ⅳ所示化合物。

根据本发明的实施例，式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物进行反应的条件不受特别限制。在本发明的一个实施例中，以铜为催化剂、碳酸钾作为碱，使式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物在无水二甲基甲酰胺中反应，以便获得式Ⅳ所示化合物。在本发明的另一个实施例中，于100-130℃下，以铜为催化剂、碳酸钾作为碱，使式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物按照摩尔比为1：1.5的比例在无水二甲基甲酰胺中反应1-12小时，以便获得式Ⅳ所示化合物。由此，能够在最适合的温度及配比条件下进行反应有利于提高反应效率，减少副反应，提高产率。

(2)使式Ⅳ所示化合物与浓硫酸反应，以便获得式Ⅴ所示化合物。

根据本发明的实施例，于50-100℃下，使式Ⅳ所示化合物与浓硫酸反应1-5小时。由此，能够在最合适的条件下进行反应，有利于提高反应效率，减少副反应，提高产率。

(3)使式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物反应，以便获得式Ⅵ所示化合物。

根据本发明的实施例，式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物进行反应的条件不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际情况灵活选择。在本发明的一个实施例中，使式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物在无水二甲基甲酰胺中反应，以便获得式Ⅵ所示化合物。在本发明的另一个实施例中，于0-50℃下，以N,N'-羰基二咪唑作为缩合剂，使式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物在无水二甲基甲酰胺中反应10-30小时。由此，能够使得各反应物在最适合的温度、配比等条件下进行反应，有利于减少副反应，提高产率和反应效率。

根据本发明的实施例，所述烷基伯胺类化合物的种类不受特别限制，只要能够有效制备前面所述的化合物，本领域技术人员可以根据实际条件灵活选择。根据本发明的实施例，所述烷基伯胺类化合物具有式1-式3所示的结构。

(4)使式Ⅵ所示化合物与多取代苯基烷基胺类化合物(包括但不限于单(双)吡啶甲(乙)胺类化合物)反应，以便获得式I所示化合物。根据本发明的实施例，式Ⅵ所示化合物与多取代苯基烷基胺类化合物进行反应的条件不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际情况灵活选择。在本发明的一个实施例中，于50-100℃下，使式Ⅵ所示化合物与多取代苯基烷基胺类化合物反应10-30小时。由此，能够在最合适的条件下进行反应，有利于提高反应效率，减少副反应，提高产率。

根据本发明的实施例，所述多取代苯基烷基胺类化合物的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，所述多取代苯基烷基胺类化合物具有如下所示的结构：

根据本发明的一些优选实施例，所述多取代苯基烷基胺类化合物具有式4-式9之一所示的结构。由此，能够有效获得前面所述的化合物。

其中，R₁、R₂、R₃和n如前面所定义。

发明人发现，利用本发明的方法能够快速有效地制备获得前面所述的化合物，且该方法操作简单、方便快捷、收率较高，适于规模化生产。

在本发明的再一方面，本发明提供了一种药物组合物。根据本发明的实施例，该药物组合物含有前面所述的化合物。发明人发现，本发明的药物组合物能够有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、预防和/或***的功效。

在本发明的又一方面，本发明提供了前面所述化合物或药物组合物在制备药物中的用途。根据本发明的实施例，所述药物用于有效抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达、抑制DNA拓扑异构酶的活性、抑制真核生物肿瘤细胞增殖、预防和/或***的功效。

需要说明的是，本发明的上述药物可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体，如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；也可被其他物质混合或包裹后导入机体。需要的时候，在上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。另外，本发明的药物可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

根据本发明的实施例，所述拓扑异构酶为拓扑异构酶II。

根据本发明的实施例，所述真核生物为哺乳动物；所述肿瘤细胞为癌细胞；所述癌细胞为白血病癌细胞、乳腺癌细胞、肝癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞、脑癌细胞、卵巢癌细胞、子宫癌细胞、睾丸癌细胞、皮肤癌细胞、胃癌细胞、鼻咽癌细胞、结肠癌细胞、膀胱癌细胞或直肠癌细胞，其中，所述白血病癌细胞优选人慢性髓原白血病细胞，所述肝癌细胞优选人肝癌细胞。

下面详细描述本发明的实施例。

实施例1：1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-甲基苯甲酸

在二甲基甲酰胺(50ml)中加入2，4-二氯苯甲酸(4.05mmol)，2-氨基-3-甲基苯甲酸(5.26mmol)，碳酸钾(8.10mmol)和铜粉(2.03mmol)，然后于130℃下搅拌过夜，接着将所得到的反应混合物冷却后加入到200ml水中，得到的混合物用盐酸调至pH值约为3，抽滤并将得到的沉淀干燥，得到淡黄色固体，即2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-甲基苯甲酸，产率91.5％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.10(s,2H),9.90(s,1H),7.86(d,J＝8.2Hz,1H),7.72(d,J＝7.2Hz,1H),7.56(t,J＝7.5Hz,1H),7.31(t,J＝7.5Hz,1H),6.74(d,J＝7.5Hz,1H),6.08(s,1H),2.12(s,3H).

2、制备1-氯-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸

将步骤1中得到的2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-甲基苯甲酸(1.19mmol)加入到浓硫酸(10ml)中，于80℃回流5小时，接着将所得到的反应液冷却后缓慢加入到冰水(50mL)中，随后用NaOH溶液调至pH值约为5，混合液继续室温搅拌30分钟后，有大量沉淀析出。抽滤并将得到的沉淀干燥，得到固体粉末，即1-氯-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸。产率95.0％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.59(s,1H),8.32(d,J＝8.3Hz,1H),8.05(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(d,J＝6.8Hz,1H),7.32(d,J＝8.3Hz,1H),7.24(dd,J＝7.9,7.3Hz,1H),2.54(s,3H).

3、制备1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将步骤2中获得的1-氯-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(3.48mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(5.22mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10.00ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,2-乙二胺(10.44mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得固体粉末，即1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率65.3％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ12.93(s,1H),8.27(d,J＝8.0Hz,1H),7.72(d,J＝8.3Hz,1H),7.50(d,J＝7.0Hz,1H),7.19(t,J＝7.7Hz,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,1H),3.57(dd,J＝10.9,5.3Hz,2H),2.64-2.59(m,2H),2.58(s,3H),2.33(s,6H).

4、1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤3得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率60.9％，熔点144-146℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.58(s,1H),11.41(s,1H),8.22(d,J＝8.1Hz,1H),7.60(d,J＝8.9Hz,1H),7.46(d,J＝6.9Hz,1H),7.39(d,J＝7.3Hz,2H),7.34(t,J＝7.5Hz,2H),7.28-7.24(m,1H),7.15(t,J＝7.6Hz,1H),6.89(s,1H),6.14(d,J＝8.7Hz,1H),4.55(d,J＝5.5Hz,2H),3.50(dd,J＝10.6,5.2Hz,2H),2.60(s,3H),2.53(t,J＝5.8Hz,2H),2.27(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,DMSO-d₆)δ180.40,169.34,154.61,144.56,138.88,138.45,135.06,134.12,129.11,127.82,127.64,125.14,123.72,121.70,121.48,106.22,101.52,100.32,58.61,46.39,45.66,37.63,16.97；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺429.2291；Found:429.2300.

实施例2：N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例1中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，3-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率27.3％，熔点164-166℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.58(s,1H),11.43(s,1H),8.24(d,J＝8.1Hz,1H),7.63(d,J＝8.9Hz,1H),7.48(d,J＝7.0Hz,1H),7.28-7.24(m,1H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.99(d,J＝7.6Hz,1H),6.93(s,2H),6.81(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),6.17(d,J＝8.9Hz,1H),4.55(d,J＝5.7Hz,2H),3.80(d,J＝13.0Hz,3H),3.53(dd,J＝10.8,5.2Hz,2H),2.62(s,3H),2.57(t,J＝5.8Hz,2H),2.30(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ181.24,169.38,160.07,155.25,144.74,139.79,138.55,133.56,133.43,129.79,124.88,123.85,121.87,121.37,119.36,112.76,112.73,106.81,101.32,99.98,57.69,55.23,46.83,45.05,36.74,17.10；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺459.2396；Found:459.2408.

实施例3：N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例1中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率54.6％，熔点225-227℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.59(s,1H),11.34(s,1H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(d,J＝9.0Hz,1H),7.47(d,J＝7.0Hz,1H),7.31(d,J＝8.5Hz,2H),7.15(t,J＝7.6Hz,1H),6.98(s,1H),6.88(d,J＝8.5Hz,2H),6.18(d,J＝9.0Hz,1H),4.48(d,J＝5.5Hz,2H),3.79(s,3H),3.53(dd,J＝10.7,5.2Hz,2H),2.61(s,3H),2.56(t,J＝5.7Hz,2H),2.29(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ181.20,169.42,158.94,155.13,144.76,138.53,133.53,133.47,130.00,128.40,124.87,123.82,121.86,121.35,114.24,106.73,101.14,99.86,57.81,55.30,46.32,45.08,36.79,17.09；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺459.2396；Found:459.2401.

实施例4：N-(3-(二甲基氨基)丙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将实施案例1中获得的1-氯-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(1.74mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(2.61mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,3-丙二胺(5.22mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得固体粉末，即1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率61.9％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.34(s,1H),9.65(s,1H),8.29(d,J＝8.1Hz,1H),7.65(d,J＝8.3Hz,1H),7.51(d,J＝7.1Hz,1H),7.21-7.15(m,2H),3.64(dd,J＝10.2,5.8Hz,2H),2.67-2.62(m,2H),2.61(s,3H),2.39(s,6H),1.85(dt,J＝11.4,5.8Hz,2H).

2、N-(3-(二甲基氨基)丙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤1中得到的1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率22.4％，熔点185-187℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.82(s,1H),11.32(s,1H),8.68(s,1H),8.22(d,J＝7.8Hz,1H),7.60(d,J＝8.3Hz,1H),7.47(d,J＝6.1Hz,1H),7.33(d,J＝7.7Hz,2H),7.16(d,J＝7.2Hz,1H),6.89(d,J＝7.6Hz,2H),6.20(d,J＝8.8Hz,1H),4.49(s,2H),3.80(s,3H),3.59(br,2H),2.62(br,5H),2.39(s,6H),1.84(br,2H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ181.22,169.51,158.95,154.97,144.86,138.59,133.48,133.37,130.01,128.48,124.92,123.80,121.82,121.26,114.23,106.74,101.37,99.81,59.07,55.31,46.34,45.13,40.05,24.88,17.18；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺473.2552；Found:473.2571.

实施例5：1-苄胺基-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备1-氯-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将实施案例1中获得的1-氯-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(1.74mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(2.61mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10.00ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将二甲氧基乙二胺(5.22mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得固体粉末，即1-氯-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率59.6％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ12.79(s,1H),8.27(d,J＝8.1Hz,1H),7.72(d,J＝8.2Hz,1H),7.51(d,J＝7.0Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝8.2Hz,1H),6.90(s,1H),3.74(dd,J＝9.7,4.8Hz,2H),3.65(t,J＝4.8Hz,2H),3.45(s,3H),2.58(s,3H).

2、1-苄胺基-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤1中得到的1-氯-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率62.1％，熔点191-193℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.50(s,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),7.50(d,J＝7.0Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,2H),7.36(t,J＝7.4Hz,2H),7.30(d,J＝7.2Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),6.49(s,1H),6.18(d,J＝8.8Hz,1H),4.58(s,2H),3.67(br,2H),3.59(t,J＝4.7Hz,2H),3.42(d,J＝8.1Hz,3H),2.62(s,3H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ181.23,169.30,155.24,144.73,138.49,137.92,133.65,133.27,128.80,127.35,127.16,124.89,123.85,121.85,121.49,106.77,101.13,99.97,71.27,58.90,46.88,39.38,17.13；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺416.1974；Found:416.1980.

实施例6：N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例1中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，3,4,5-三甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率33.1％，熔点195-197℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.61(s,1H),11.38(s,1H),8.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.71(d,J＝8.9Hz,1H),7.49(d,J＝6.9Hz,1H),7.23-7.13(m,1H),7.06(s,1H),6.62(s,2H),6.18(d,J＝8.9Hz,1H),4.50(d,J＝5.5Hz,2H),3.84(s,9H),3.56(dd,J＝10.6,5.1Hz,2H),2.62(br,5H),2.35(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ181.26,169.40,155.21,153.61,144.72,138.54,137.25,133.77,133.62,133.59,124.92,123.79,121.84,121.44,106.78,104.11,101.36,100.07,60.84,57.83,56.19,47.24,45.01,36.62,17.11；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺519.2607；Found:519.2623.

实施例7：1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸

在二甲基甲酰胺(50ml)中加入2，4-二氯苯甲酸(4.05mmol)，2-氨基-3-甲氧基苯甲酸(5.26mmol)，碳酸钾(8.10mmol)和铜粉(2.03mmol)，然后于130℃下搅拌过夜，接着将所得到的反应混合物冷却后加入到200ml水中，得到的混合物用盐酸调至pH值约为3，抽滤并将得到的沉淀干燥，得到淡黄色固体，即2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸，产率98.9％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.12(s,2H),10.07(s,1H),7.85(d,J＝5.4Hz,1H),7.48(d,J＝5.2Hz,1H),7.41-7.21(m,2H),6.76(d,J＝5.4Hz,1H),6.28(s,1H),3.79(s,3H).

2、制备1-氯-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸

将步骤1中得到的2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-甲氧基苯甲酸(1.19mmol)加入到浓硫酸(10ml)中，于80℃回流5小时，接着将所得到的反应液冷却后缓慢加入到冰水(50mL)中，随后用NaOH溶液调至pH值约为5，混合液继续室温搅拌30分钟后，有大量沉淀析出。抽滤并将得到的沉淀干燥，得到固体粉末，即1-氯-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸。产率92.7％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.97(s,1H),12.56(s,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),7.70(d,J＝8.1Hz,1H),7.34(d,J＝7.8Hz,1H),7.28(d,J＝8.2Hz,1H),7.22(t,J＝7.9Hz,1H),4.02(s,3H).

3、制备1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将步骤2中获得的1-氯-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(1.65mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(2.48mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(D10.00ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,2-乙二胺(4.95mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得固体粉末，即1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率58.7％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ12.90(s,1H),7.97(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),7.75(d,J＝8.2Hz,1H),7.19(dt,J＝8.1,3.8Hz,2H),7.11(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),4.08(s,3H),3.60(dd,J＝11.2,5.0Hz,2H),2.65-2.56(m,2H),2.32(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,DMSO-d₆)δ176.02,168.82,155.70,147.73,144.89,132.92,130.22,123.41,121.16,117.57,112.37,109.91,105.48,104.58,58.68,56.80,45.76,43.80,37.73.

4、1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤3中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率57.1％，熔点230-231℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.61(s,1H),11.44(s,1H),7.94(d,J＝8.1Hz,1H),7.67(d,J＝8.9Hz,1H),7.42(d,J＝7.2Hz,2H),7.36(t,J＝7.3Hz,2H),7.30(d,J＝7.2Hz,1H),7.18(t,J＝7.9Hz,1H),7.09(d,J＝7.6Hz,1H),6.97(s,1H),6.17(d,J＝8.9Hz,1H),4.57(d,J＝5.4Hz,2H),4.09(s,3H),3.56(d,J＝5.2Hz,2H),2.56(t,J＝5.5Hz,2H),2.29(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ180.86,169.14,155.19,147.95,144.19,138.08,133.58,131.04,128.78,127.29,127.16,122.48,121.10,117.14,111.31,107.24,101.79,99.82,57.85,56.27,46.87,45.11,36.84；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺445.2240；Found:445.2252.

实施例8：N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例7中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率70.8％，熔点245-246℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.57(s,1H),11.36(s,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,1H),7.67(d,J＝8.9Hz,1H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.07(d,J＝7.5Hz,1H),6.96(s,1H),6.89(d,J＝8.5Hz,2H),6.20(d,J＝8.9Hz,1H),4.49(d,J＝5.4Hz,2H),4.08(s,3H),3.80(s,3H),3.61-3.48(m,2H),2.60(t,J＝5.6Hz,2H),2.33(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ180.79,169.14,158.93,155.16,147.92,144.21,1]33.59,131.00,130.01,128.42,122.49,121.04,117.13,114.23,111.25,107.17,101.56,99.82,57.86,56.25,55.30,46.35,45.03,36.64；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺475.2345；Found:475.2336.

实施例9：N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将实施案例7中获得的1-氯-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(1.65mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(2.48mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,3-丙二胺(5.22mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得固体粉末，即1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率60.5％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.27(s,1H),9.51(s,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(d,J＝8.3Hz,1H),7.18(t,J＝8.4Hz,1H),7.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),4.08(s,3H),3.65(dd,J＝10.0,5.7Hz,2H),2.69–2.57(m,2H),2.36(s,6H),1.83(dt,J＝11.3,5.8Hz,2H).

2、N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤1中得到的1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率63.4％，熔点260-261℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.84(s,1H),11.32(s,1H),8.66(s,1H),7.91(d,J＝8.1Hz,1H),7.53(d,J＝8.9Hz,1H),7.33(d,J＝8.5Hz,2H),7.16(t,J＝8.0Hz,1H),7.07(d,J＝7.5Hz,1H),6.89(d,J＝8.5Hz,2H),6.18(d,J＝8.9Hz,1H),4.49(d,J＝5.4Hz,2H),4.07(s,3H),3.80(s,3H),3.60(dd,J＝10.4,5.4Hz,2H),2.59-2.50(m,2H),2.33(s,6H),1.84-1.72(m,2H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ180.84,169.12,158.88,154.90,147.97,144.28,133.26,131.04,130.00,128.49,122.38,120.97,117.01,114.19,111.14,107.17,101.89,99.63,59.65,56.24,55.33,46.35,45.48,40.66,24.95；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺489.2502；Found:489.2493.

实施例10：5,7-二氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3,5-二氯苯甲酸

在二甲基甲酰胺(50ml)中加入2，4-二氯苯甲酸(04.05mmol)，2-氨基-3，5-二氯苯甲酸(5.26mmol)，碳酸钾(8.10mmol)和铜粉(2.03mmol)，然后于130℃下搅拌过夜，接着将所得到的反应混合物冷却后加入到200ml水中，得到的混合物用盐酸调至pH值约为3，抽滤并将得到的沉淀干燥，得到淡黄色固体，即2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3,5-二氯苯甲酸，产率45.6％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.36(s,2H),10.10(s,1H),7.99(d,J＝2.4Hz,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,1H),7.86(d,J＝2.4Hz,1H),6.85(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),6.34(d,J＝1.8Hz,1H).

2、制备1,5,7-三氯-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸

将步骤1中得到的2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3,5-二氯苯甲酸(1.19mmol)加入到浓硫酸(10ml)中，于80℃回流5小时，接着将所得到的反应液冷却后缓慢加入到冰水(50mL)中，随后用NaOH溶液调至pH值约为5，混合液继续室温搅拌30分钟后，有大量沉淀析出。抽滤并将得到的沉淀干燥，得到固体粉末，即1,5,7-三氯-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸。产率90.5％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.60(s,1H),8.30(s,1H),8.13-8.04(m,2H),8.02(s,1H),7.35-7.33(m,1H).

3、制备1,5,7-三氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将步骤2中获得的1,5,7-三氯-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(2.35mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(3.52mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,2-乙二胺(7.04mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得固体粉末，即1,5,7-三氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率49.2％。

化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ13.43(s,1H),8.28(d,J＝2.3Hz,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,1H),7.72(d,J＝2.3Hz,1H),7.39(d,J＝8.3Hz,1H),7.25(s,1H),3.60(dd,J＝10.0,5.2Hz,2H),2.68-2.56(m,2H),2.33(s,6H).

4、5,7-二氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤3中得到的1,5,7-三氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率69.6％，熔点238-240℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ11.11(d,J＝5.1Hz,1H),8.23(d,J＝2.3Hz,1H),7.70-7.67(m,2H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),7.02(s,1H),6.91(dd,J＝6.7,4.8Hz,2H),6.25(d,J＝9.0Hz,1H),4.50(d,J＝5.5Hz,2H),3.81(s,3H),3.56(dd,J＝10.7,5.3Hz,2H),2.62-2.55(m,2H),2.32(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.19,168.93,159.06,154.89,144.56,135.35,134.02,132.49,129.58,128.41,126.67,124.38,123.42,122.49,114.31,106.73,101.45,100.86,57.73,55.32,46.41,45.05,36.72；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺513.1460；Found:513.1467.

实施例11：1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-硝基苯甲酸

在二甲基甲酰胺(50ml)中加入2，4-二氯苯甲酸(4.05mmol)，2-氨基-3-硝基苯甲酸(5.26mmol)，碳酸钾(8.10mmol)和铜粉(2.03mmol)，然后于130℃下搅拌过夜，接着将所得到的反应混合物冷却后加入到200ml水中，得到的混合物用盐酸调至pH值约为3，抽滤并将得到的沉淀干燥，得到淡黄色固体，即2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-硝基苯甲酸，产率59.6％。化合物结构确证数据为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.12(s,2H),10.07(s,1H),7.85(d,J＝5.4Hz,1H),7.48(d,J＝5.2Hz,1H),7.41-7.21(m,2H),6.76(d,J＝5.4Hz,1H),6.28(s,1H),3.79(s,3H).

1、制备1-氯-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸

将步骤1中得到的2-((2-羰基-5-氯苯基)氨基)-3-硝基苯甲酸(1.19mmol)加入到浓硫酸(10.00ml)中，于80℃回流5小时，接着将所得到的反应液冷却后缓慢加入到冰水(50mL)中，随后用NaOH溶液调至pH值约为5，混合液继续室温搅拌30分钟后，有大量沉淀析出。抽滤并将得到的沉淀干燥，得到红色固体粉末，即1-氯-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸，产率73.9％。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,d₆-DMSO)δ14.62(s,1H),8.72(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),8.60(d,J＝7.8Hz,1H),8.35(d,J＝8.3Hz,1H),7.46(t,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.3Hz,1H).

2、制备1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将步骤2中获得的1-氯-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(1.65mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(2.48mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,2-乙二胺(4.95mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得红色固体粉末，即1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率61.5％。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.67(dd,J＝13.7,7.9Hz,2H),7.83(d,J＝8.2Hz,1H),7.32(t,J＝7.9Hz,1H),7.27-7.25(m,1H),3.63-3.61(m,2H),2.61(t,J＝5.5Hz,2H),2.32(s,6H).

4、1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤3中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率33.8％，熔点243-245℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ15.00(s,1H),10.92(s,1H),8.65(d,J＝7.2Hz,1H),8.57(d,J＝7.2Hz,1H),8.46(s,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),4.40-7.37(m,5H),7.29(d,J＝6.5Hz,1H),6.45(d,J＝8.6Hz,1H),4.61(s,2H),2.53(br,2H),2.27(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,d₆-DMSO)δ178.84,168.23,154.26,138.67,135.93,135.24,134.43,131.72,129.15,127.81,127.72,124.24,120.66,106.50,103.23,102.50,58.41,46.41,45.40,37.33；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺460.1985；Found:460.2000.

实施例12：N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例11中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，3-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率19.8％，熔点155-157℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ15.02(s,1H),11.08(s,1H),8.71(d,J＝7.6Hz,1H),8.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.70(d,J＝8.9Hz,1H),7.30-7.26(m,2H),6.98(d,J＝7.4Hz,2H),6.92(s,1H),6.83(d,J＝7.6Hz,1H),6.29(d,J＝8.9Hz,1H),4.54(d,J＝5.3Hz,2H),3.80(s,3H),3.59(d,J＝4.6Hz,2H),2.65-2.56(m,2H),2.31(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.39,168.17,160.09,154.66,144.06,139.31,135.01,134.85,134.52,134.42,131.18,129.95,124.60,119.77,119.33,112.87,112.75,107.06,103.29,102.19,57.75,55.29,46.90,45.11,36.82；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺490.2090；Found:490.2070.

实施例13：N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例11中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率27.7％，熔点228-230℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ15.01(s,1H),10.99(s,1H),8.69(d,J＝6.8Hz,1H),8.65(d,J＝7.5Hz,1H),7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.31(d,J＝7.5Hz,2H),7.12(s,1H),6.90(d,J＝7.3Hz,2H),6.31(d,J＝8.2Hz,1H),4.48(s,2H),3.80(s,3H),3.62(br,2H),2.65(br,2H),2.37(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.27,168.23,159.06,154.56,144.07,134.96,134.79,134.52,134.44,131.08,129.49,128.45,124.58,119.70,114.30,106.93,103.00,102.11,57.94,55.32,46.43,45.00,36.61；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺490.2090；Found:490.2099.

实施例14：N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例11中得到的1-氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，3,4,5-三甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得黄色固体粉末，产率49.4％，熔点243-244℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ15.04(s,1H),11.01(s,1H),8.68(dd,J＝15.5,7.3Hz,2H),7.71(d,J＝8.7Hz,1H),7.30-7.28(m,1H),6.95(s,1H),6.61(s,2H),6.30(d,J＝8.7Hz,1H),4.48(d,J＝4.0Hz,2H),3.85(s,9H),3.59(br,2H),2.57(br,2H),2.31(s,6H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.39,168.12,154.58,153.68,144.01,137.41,135.04,134.81,134.42,134.38,133.24,131.15,124.56,119.77,107.04,104.17,103.44,102.14,60.86,57.74,56.23,47.35,45.10,36.82；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺550.2302；Found:550.2308.

实施例15：1-苄胺基-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

1、制备1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺

将实施案例11中获得的1-氯-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-羧酸(1.65mmol)缓慢滴加入到N,N′-羰基二咪唑(2.48mmol)的二甲基甲酰胺溶液中(10ml)，滴加完毕后于室温搅拌30分钟，然后将N,N-二甲基-1,3-丙二胺(5.22mmol)加入反应体系中，室温搅拌过夜。反应结束后，用二氯甲烷(50mL)萃取，所得有机相用水(40mL)洗三次，干燥有机相，旋干，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得红色固体粉末，即1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺。产率28.6％。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ14.78(s,1H),9.53(s,1H),8.77(d,J＝7.6Hz,1H),8.70(d,J＝7.9Hz,1H),7.72(d,J＝8.1Hz,1H),7.33(dd,J＝14.3,7.9Hz,2H),3.69(br,2H),2.63(br,2H),2.37(s,6H),1.85(br,2H).

2、1-苄胺基-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将步骤1中得到的1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得红色固体粉末，产率73.7％，熔点222-224℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ15.25(s,1H),11.06(s,1H),8.71(d,J＝7.6Hz,2H),8.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.61(d,J＝9.0Hz,1H),7.46-7.33(m,4H),7.33-7.26(m,2H),6.31(d,J＝8.9Hz,1H),4.57(d,J＝5.3Hz,2H),3.64(br,2H),2.58(br,2H),2.35(s,6H),1.82(br,2H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.41,168.14,154.50,144.20,137.58,135.08,134.86,134.40,134.12,131.07,128.86,127.50,127.15,124.59,119.59,107.07,103.57,101.96,59.42,46.94,45.30,40.47,24.94；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺474.2141；Found:474.2126.

实施例16：N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例15中得到的1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-甲氧基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得红色固体粉末，产率63.9％，熔点251-252℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ15.27(s,1H),10.97(s,1H),8.76(s,1H),8.70(d,J＝7.6Hz,1H),8.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.59(d,J＝9.0Hz,1H),7.33(d,J＝8.2Hz,2H),7.27-7,24(m,1H),6.91(d,J＝8.3Hz,2H),6.32(d,J＝8.9Hz,1H),4.49(d,J＝5.1Hz,2H),3.81(s,3H),3.64(br,2H),2.56(br,2H),2.35(s,6H),1.80(br,2H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.36,168.12,159.09,154.38,144.21,135.05,134.85,134.39,134.08,131.07,129.52,128.49,124.58,119.58,114.31,106.99,103.43,101.91,59.61,55.33,46.45,45.41,40.67,24.92；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺504.2247；Found:504.2245.

实施例17：N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-乙基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备

将实施案例15中得到的1-氯-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吡啶-4-酰胺(0.42mmol)，4-乙基苄胺(2.10mmol)和三乙胺(0.50mL)依次溶解于2-乙氧基乙醇溶剂(10mL)中，反应体系于90℃加热条件下搅拌过夜。TLC检测反应结束后，将反应液冷却至室温，有沉淀析出。抽滤得固体粉末状初产物，用水(40mL)洗涤后干燥，得纯品。如果反应液冷却后无沉淀析出，则在反应体系中加入DCM(50mL)和水(50mL)，萃取后所得有机相再用水洗三次(40mL×3)，干燥有机相并旋蒸除去有机溶剂，所得残留物经柱层析(洗脱剂：乙酸乙酯/乙醇(9:1v/v))纯化得红色固体粉末，产率24.0％，熔点266-267℃。化合物结构数据表征为：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ15.27(s,1H),11.03(s,1H),8.79-8.71(m,1H),8.66(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.69(d,J＝9.0Hz,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.28(d,J＝8.1Hz,1H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),6.35(d,J＝9.1Hz,1H),4.53(d,J＝5.5Hz,2H),3.66-3.65(m,2H),2.68-2.66(m,2H),2.65-2.63(m,2H),2.41(s,6H),1.86-1.85(m,2H),1.24(t,J＝7.6Hz,3H)；¹³CNMR(100MHz,CDCl₃)δ179.39,168.28,154.55,144.25,143.60,135.06,134.88,134.71,134.44,134.31,131.06,128.36,127.24,124.63,119.59,107.02,103.29,102.09,59.00,46.77,45.04,39.97,28.53,24.82,15.54；HR-MS(ESI):Calcdfor[M+H]⁺502.2454；Found:502.2467.

实施例18：MTT法细胞增殖抑制活性筛选

通过MTT法，采用处于对数生长期的人肝细胞癌HepG2细胞和人乳腺癌MCF-7细胞，检测实施例1-17制备获得的化合物的体外细胞增殖抑制活性，其中，阳性对照药选用YM155。人肝细胞癌HepG2细胞和人乳腺癌MCF-7细胞为贴壁细胞，用含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养液，于37℃、体积分数为5％的CO₂条件下常规培养；此外，针对化合物16进行了对正常肝细胞QGY-7701的体外毒性测试。其中，正常肝细胞QGY-7701为贴壁细胞，用含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养液，于37℃、体积分数为5％的CO₂条件下常规培养；具体操作如下：

首先，将实施例1-17制备获得的化合物(即样品)分别配制成化合物浓度为5mM/L的DMSO(二甲基亚砜)溶液，然后将获得的溶液经梯度稀释，得到一系列浓度梯度的样品溶液。接着，取对数生长期人肝细胞癌HepG2细胞和人乳腺癌MCF-7细胞，分别以6×10³个/mL的细胞密度接种于96孔板中，99μL/孔，首先要在37℃，5％的CO₂的培养箱中培养12小时，使细胞贴壁后再接着向每孔加入样品溶液1μL，使样品作用终浓度分别为0.1μM、1μM、5μM、10μM、25μM和50μM。每种样品、每个浓度设三个复孔，并且设置一个阳性对照和空白对照，其中，阳性对照组加入阳性对照药物顺铂的与样品溶液同浓度的溶液，空白对照组不加样品溶液。作用48h后加入MTT溶液，10μL/孔，继续培养4小时后，吸去上清后加入二甲基亚砜(DMSO)，100μL/孔，于37℃保温约10分钟，然后用微量振荡器振荡约5分钟，使结晶溶解完全，用酶标仪于490nm处测量OD值，按如下公式计算细胞增殖抑制率(InhibitionRate，IR％)：IR％＝(阳性对照OD－样品OD)/(阳性对照OD-空白对照OD)×100％，部分实验结果见表1。再次，取对数生长期的正常肝细胞QGY-7701，以6×10³个/mL的细胞密度接种于96孔板中，99μL/孔，于37℃，5％的CO₂条件下培养约12小时。接着每孔加入化合物16的DMSO溶液1μL，使此化合物的作用终浓度分别为0.1μM、1μM、5μM、10μM、25μM和50μM。每个浓度设三个复孔，并且设置空白对照，其中空白对照组不加样品溶液。作用48h后加入MTT溶液，10μL/孔，继续培养4小时后，吸去上清后加入二甲基亚砜(DMSO)，100μL/孔，于37℃保温约10分钟，然后用微量振荡器振荡约5分钟，使结晶溶解完全，用酶标仪于490nm处测量OD值，按如下公式计算细胞增殖抑制率(InhibitionRate，IR％)：IR％＝(阳性对照OD－样品OD)/(阳性对照OD-空白对照OD)×100％，实验结果见表2。

表1苄胺取代的吖啶酮类化合物的活性筛选结果

注：IC₅₀表示半数抑制浓度。

表2化合物16对正常肝细胞QGY-7701的毒性测试结果

注：IC₅₀表示半数抑制浓度。

表1显示的是含有苄胺基取代的吖啶酮类化合物的MTT结果。从结果中可以看出，R₃取代基为4-甲氧基时，化合物活性表现较为突出。例如化合物3对HepG2细胞的IC₅₀达到2.11μM，而化合物13对MCF-7细胞的IC₅₀也能达到1.05μM。另外，从表1中数据可知，化合物对HepG2细胞的体外活性IC₅₀值小于4μM的4个化合物(化合物2、3、15和16)其对应的MCF-7细胞的活性也较理想(IC₅₀处于2.92到6.84μM之间)。同时从表中可以看出，化合物13对MCF-7细胞的抗增殖活性最好，而化合物13对应的HepG2细胞的IC₅₀值也能达到4.50μM。这些现象说明了苄胺基吖啶酮类化合物对两种实体瘤细胞的抑制效果基本一致。值得注意的是，化合物13与16在化学结构上的区别仅仅是吖啶酮母体的4-位酰胺侧链的长度(即亚甲基数目n，本专利中n选用2和3)不一样，而此两种化合物对HepG2细胞的IC₅₀值基本一致。由此可见，酰胺侧链的长度对抗肿瘤活性影响不大。

表2是针对化合物16对正常肝细胞QGY-7701的体外毒性测试结果。从表中数据可知，化合物16对正常肝细胞的毒性比HepG2细胞的抑制活性值低了11倍多。此现象表明了化合物16有很好的体外低毒性。

实施例24：DNA拓扑异构酶试验

本发明测试了化合物16的DNA拓扑异构酶II(英文缩写TopoII)活性抑制实验。发现化合物16能选择性抑制TopoII的活性。从图1(其中，Dox10为10μM浓度的多柔比星；Dox1为1μM浓度的多柔比星；8u为50μM浓度的待测化合物16；NC为无处理组；KDNA为动基体DNA空白对照组)中可以看出，化合物16能对TopoII有一定的抑制活性(两次结果的平均抑制率为10.99％)。此实验中阳性对照选用1μM和10μM的多柔比星DMSO溶液。基于以上讨论，化合物16对TopoII的抑制活性有一定的选择性。这表明16可以通过抑制TopoII活性来间接造成DNA的损伤，从而引起癌细胞凋亡。

实施例25：蛋白电泳实验

为了验证化合物16在肿瘤细胞中能否有效地抑制Survivin的表达，本发明进行了蛋白电泳实验。从图2中可以看出，随着化合物浓度从1μM增加到10μM时，人肝细胞癌HepG2细胞中Survivin蛋白的表达是明显下调的。此现象说明化合物16在肿瘤细胞中能有效地抑制Survivin的表达。另外，随着化合物浓度的增加，凋亡抑制蛋白Bcl2的表达有明显下调，而Caspase-7和PARP表达有上调趋势。由此可以推断，化合物16能够诱导HepG2细胞凋亡。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种化合物，其特征在于，所述化合物为具有式I所示结构式的多取代苯基烷氨基吖啶酮-4-酰胺类化合物或其药学上可接受的盐、酯或溶剂合物，

其中，R₁各自独立地为H、碳原子数为1～5的烷氧基、卤素、碳原子数为1～5的卤代烷基、硝基、胺基或者碳原子数为1～5的直链烷基或支链烷基；

R₂为碳原子数为1～5的烷氧基或者任选取代的胺基；

R₃各自独立地为为H、碳原子数为1～5的烷氧基、碳原子数为1～5的卤代烷基、硝基、胺基或者碳原子数为1～5的直链烷基或支链烷基；

m＝1-4的整数；

n＝1～5的整数；

p＝1-4的整数。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R₁各自独立地为为H、OCH₃、OCH₂CH₃、OCH₂CH₂CH₃、OCH₂CH₂CH₂CH₃、F、Cl、Br、CF₃、NO₂、NH₂或碳原子数为1-5的直链烷基，

R₂为NH₂、N(CH₃)₂或OCH₃，

R₃各自独立地为为H、-OCH₃、-NH₂、-NO₂、-CF₃、-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、或-CH₂CH₂CH₂CH₃，

m＝1-4的整数；

n＝1-4的整数；

p＝1-4的整数。

3.根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，R₁各自独立地为为OCH₃、Cl、NO₂、或CH₃，

R₂为N(CH₃)₂或OCH₃，

R₃各自独立地为为H、-OCH₃、-CF₃、或-CH₂CH₃，

m＝1；

n＝2或3；

p＝1或3。

4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，为下列之一：

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺的制备，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-甲氧基乙基)-5-甲基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-甲氧基-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

5,7-二氯-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((3-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基-9-氧代-1-((3，4，5-三甲氧基苄基)氨基)-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

1-苄胺基-N-(3-(二甲基氨基)丙基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺，

N-(3-(二甲基氨基)丙基)-1-((4-乙基苄基)氨基)-5-硝基-9-氧代-9,10-二氢吖啶-4-酰胺。

5.一种制备权利要求1-4中任一项所述化合物的方法，其特征在于，包括：

(1)使式II所示化合物与式Ⅲ所示化合物反应，以便获得式Ⅳ所示化合物；

(2)使所述式Ⅳ所示化合物与浓硫酸反应，以便获得式Ⅴ所示化合物；

(3)使所述式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物反应，以便获得式Ⅵ所示化合物；

(4)使所述式Ⅵ所示化合物与多取代苯基烷基胺类化合物反应，以便获得式I所示化合物，

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述烷基伯胺类化合物具有式1-式3之一所示的结构：

任选地，所述多取代苯基烷基胺类化合物具有如下所示的结构：

优选地，所述多取代苯基烷基胺类化合物具有式4-式9之一所示的结构：

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，以铜为催化剂、碳酸钾作为碱，使所述式II所示化合物与所述式Ⅲ所示化合物在无水二甲基甲酰胺中反应，以便获得所述式Ⅴ所示化合物；

任选地，在步骤(3)中，以N,N'-羰基二咪唑作为缩合剂，使所述式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物在无水二甲基甲酰胺中反应，以便获得所述式Ⅵ所示化合物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，于100-130℃下，以铜为催化剂、碳酸钾作为碱，使所述式II所示化合物与所述式Ⅲ所示化合物按照摩尔比为1：1.5的比例在无水二甲基甲酰胺中反应1-12小时；

任选地，在步骤(2)中，于50-100℃下，使所述Ⅳ所示化合物与浓硫酸反应1-5小时；

任选地，在步骤(3)中，于0-50℃下，以N,N'-羰基二咪唑作为缩合剂，使所述式Ⅴ所示化合物与烷基伯胺类化合物在无水二甲基甲酰胺中反应10-30小时；

任选地，在步骤(4)中，于50-100℃下，使所述式Ⅵ所示化合物与所述多取代苯基烷基胺类化合物反应10-30小时。

9.一种药物组合物，其特征在于，含有权利要求1-4中任一项所述的化合物，

任选地，所述药物组合物用于：

1)抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达；

2)抑制拓扑异构酶，任选地，所述拓扑异构酶为拓扑异构酶II；

3)抑制真核生物肿瘤细胞增殖，

任选地，所述真核生物为哺乳动物，任选地，所述肿瘤细胞为癌细胞，任选地，所述癌细胞为白血病癌细胞、乳腺癌细胞、肝癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞、脑癌细胞、卵巢癌细胞、子宫癌细胞、睾丸癌细胞、皮肤癌细胞、胃癌细胞、鼻咽癌细胞、结肠癌细胞、膀胱癌细胞或直肠癌细胞，所述白血病癌细胞优选人慢性髓原白血病细胞，所述肝癌细胞优选人肝癌细胞；或

4)预防和/或***。

10.权利要求1-4中任一项所述的化合物或权利要求9所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于：

1)抑制肿瘤细胞内Survivin蛋白的表达；

2)抑制拓扑异构酶；

3)抑制真核生物肿瘤细胞增殖；或

4)预防和/或***。