CN105648049A - 琼脂糖在pcr扩增中的应用、pcr扩增试剂盒及pcr扩增方法 - Google Patents
琼脂糖在pcr扩增中的应用、pcr扩增试剂盒及pcr扩增方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105648049A CN105648049A CN201410726839.3A CN201410726839A CN105648049A CN 105648049 A CN105648049 A CN 105648049A CN 201410726839 A CN201410726839 A CN 201410726839A CN 105648049 A CN105648049 A CN 105648049A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pcr amplification
- agarose
- experimental group
- str
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了琼脂糖在PCR扩增中的应用，在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖。进一步的，本发明还提供了相应的PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法，PCR扩增试剂盒包括盒体及盒体中单独存放的试剂，所述试剂包括琼脂糖。所述PCR扩增方法，包括在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖的步骤。本发明通过实验证明了在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖，可以提高PCR扩增反应敏感度，使反应更加充分，提高微量DNA的PCR扩增效果，最终获得完整STR分型结果。并且，由于PCR扩增反应敏感度的提高，PCR扩增过程中试剂的使用量可明显降低，从而降低实验成本。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，特别涉及琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法。
背景技术
PCR是聚合酶链式反应的简称，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，其研究对生物学各个领域有着深刻的影响，与医、农业、生物工程等的关系十分密切，例如PCR技术涉及在农业上育种的新途径，涉及在医学上检测、治疗遗传疾病，涉及以基因工程为基础的新兴工业，涉及法医物证鉴定、亲子鉴定等。
然而，对于极其微量DNA样本，由于PCR扩增反应敏感度低，很难捕捉到有效的DNA信息。对于微量的DNA样本，常规的PCR扩增方法的反应敏感度低是导致后续PCR扩增效果差的主要原因。例如，在法医侦检工作中，犯罪现场的法医学物证的鉴定和检出，对于及时有效地指证犯罪分子，打击犯罪起到至关重要的作用。犯罪现场中指纹、烟蒂、指甲等都含有微量的DNA信息，可为找出或指证犯罪嫌疑人提供科学依据。但由于犯罪现场的DNA残留甚微，采集到的痕迹法医物证DNA极其微量，常规PCR扩增方法的反应敏感度低，难以捕捉到有效DNA信息从而扩增效果较差，直接导致后续的DNA检出率低，STR分型失败，不能指认犯罪个体。
因此，如何提高PCR扩增的反应敏感度，从而提高微量DNA的PCR扩增效果，对最终获得完整STR分型结果具有重要意义。
发明内容
有鉴于此，本发明有必要提供一种能提高PCR扩增的反应敏感度，从而提高微量DNA的PCR扩增效果的琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法。
一种琼脂糖在PCR扩增中的应用，在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖。
一种PCR扩增试剂盒，包括盒体及盒体中单独存放的试剂，所述试剂包括琼脂糖。
一种PCR扩增方法，所述方法包括在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖的步骤。
本发明提供的琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法的有益效果是：在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖，由于琼脂糖对DNA具有极强的吸附力，并提高反应体系的沸点使体系缓冲液不易蒸发，同时琼脂糖流体是由许多微小球体组成，可以包裹反应体系，使整个PCR扩增反应在一个微小空间完成，从而提高PCR扩增的反应敏感度，使反应更加充分，提高微量DNA的PCR扩增效果，最终获得完整STR分型结果。
附图说明
图1是实验组一的STR图谱，即采用常规的STR荧光检测试剂盒在10μlPCR扩增反应体系下对志愿者一使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。
图2是实验组二的STR图谱，即采用本发明实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在10μlPCR扩增反应体系下对志愿者一使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。
图3是实验组三的STR图谱，即采用常规的STR荧光检测试剂盒在10μlPCR扩增反应体系下对志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。
图4是实验组四的STR图谱，即采用常规的STR荧光检测试剂盒在5μlPCR扩增反应体系下对志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。
图5是实验组五的STR图谱，即采用本发明实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在5μlPCR扩增反应体系下对志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。
图6是采用本发明实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在3μlPCR扩增反应体系下进行PCR扩增后的STR分型结果示例1。
图7是采用本发明实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在3μlPCR扩增反应体系下进行PCR扩增后的STR分型结果示例2。
具体实施方式
本发明提供了一种琼脂糖在PCR扩增中的应用。琼脂糖在生物学领域主要用于PCR扩增后的产物检测阶段进行琼脂糖凝胶电泳，并未用于PCR扩增阶段。
本发明提供的琼脂糖在PCR扩增中的应用，为在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖。
所述琼脂糖溶解于一溶剂后配置为琼脂糖流体使用。所述溶剂为水或缓冲液。所述琼脂糖流体中，琼脂糖的质量百分比为0.01％～0.5％。
所述琼脂糖在PCR扩增中的应用包括向PCR扩增反应体系中加入琼脂糖后进行变性、退火及延伸。
本发明还提供了一种PCR扩增试剂盒，该试剂盒包括盒体及盒体中单独存放的试剂，所述试剂包括琼脂糖。
所述琼脂糖为质量浓度为0.01％～0.5％的流体。所述试剂还包括PCRmix、Taq酶、引物。
本发明还提供了一种PCR扩增方法，该方法包括在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖的步骤。
所述PCR扩增方法还包括琼脂糖溶解于一溶剂后配置为琼脂糖流体。所述溶剂为水或缓冲液。所述琼脂糖流体中，琼脂糖的质量百分比为0.01％～0.5％。
所述PCR扩增方法包括向PCR扩增反应体系中加入琼脂糖后进行变性、退火及延伸。
下面将结合具体实施例对本发明提供的琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法予以进一步说明。
实施例一
将琼脂糖应用于从志愿者一使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA的PCR扩增。
称取0.03g琼脂糖加入100g水中加热混合均匀使其溶解，得琼脂糖流体待用。
一种PCR扩增试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，所述试剂包括：琼脂糖，PCRmix，HotStartTaq酶，复合引物。
所述琼脂糖为0.03g琼脂糖溶解于100g水中得到的琼脂糖流体。
将上述PCR扩增试剂盒用于从志愿者一使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA的PCR扩增。
向志愿者一提供一支牙刷，由志愿者洗漱一次后提供给研究人员，提取牙刷中口腔脱落细胞DNA以备后续PCR扩增。
设置实验组一、实验组二，对牙刷中提取的相同口腔脱落细胞DNA样本进行PCR扩增，实验组一采用常规STR荧光检测试剂盒进行PCR扩增，实验组二采用本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒进行PCR扩增。
实验组一的PCR扩增体系配制为：按常规STR荧光检测试剂盒中10μl反应体系的配比，量取4μlPCRmix，0.4μlHotStartTaq酶，2μl复合引物，3.6μlsdH2O混合均匀。
实验组二的PCR扩增体系配制为：量取本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒中4μlPCRmix，0.4μlHotStartTaq酶，2μl复合引物，3.6μl琼脂糖流体混合均匀。所述PCRmix、HotStartTaq酶、复合引物与常规STR荧光检测试剂盒的PCRmix、HotStartTaq酶、复合引物相同。
向实验组一、实验组二的PCR扩增体系中分别加入1μlDNA模板进行PCR扩增反应，所述实验组一、实验组二反应条件相同。
所述反应条件为：一步反应，95℃2min；94℃45s，60℃1min，72℃1min，10个循环；二步反应，90℃45s，58℃1min，72℃1min，20个循环。
将实验组一、实验组二扩增所得PCR产物分别进行STR分型检测，实验组一所得STR图谱见附图1，实验组二所得STR图谱见附图2。
实施例二
将琼脂糖应用于从志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA的PCR扩增。
称取0.3g琼脂糖加入100g水中混合均匀加热使其溶解，得琼脂糖流体待用。
一种PCR扩增试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，所述试剂包括：琼脂糖，PCRmix，HotStartTaq酶，复合引物。
所述琼脂糖为0.3g琼脂糖溶解于100g水中得到的琼脂糖流体。
将上述PCR扩增试剂盒用于从志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA的PCR扩增。
向志愿者二提供一支牙刷，由志愿者洗漱一次后提供给研究人员，提取牙刷中口腔脱落细胞DNA以备后续PCR扩增。
设置实验组三、实验组四、实验组五，对牙刷中提取的相同口腔脱落细胞DNA样本进行PCR扩增。实验组三采用常规STR荧光检测试剂盒进行PCR扩增，PCR扩增体系为10μlPCR扩增体系；实验组四采用常规STR荧光检测试剂盒进行PCR扩增，PCR扩增体系为5μlPCR扩增体系；实验组五采用本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒进行PCR扩增，PCR扩增体系为5μlPCR扩增体系。
实验组三的PCR扩增体系配制为：按常规STR荧光检测试剂盒中10μl反应体系的配比，量取4μlPCRmix，0.4μlHotStartTaq酶，2μl复合引物，3.6μlsdH2O混合均匀。
实验组四的PCR扩增体系配制为：将常规STR荧光检测试剂盒中10μl反应体系减至5μl，量取2μlPCRmix，0.2μlHotStartTaq酶，1μl复合引物，1.8μlsdH2O混合均匀。
实验组五的PCR扩增体系配制为：按本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒中5μl反应体系的配比，量取2μlPCRmix，0.2μlHotStartTaq酶，1μl复合引物，1.8μl琼脂糖流体混合均匀。所述PCRmix、HotStartTaq酶、复合引物与STR荧光检测试剂盒的PCRmix、HotStartTaq酶、复合引物相同。
向实验组三的PCR扩增体系中加入1μlDNA模板进行PCR扩增反应，向实验组四、实验组五的PCR扩增体系中加入0.5μlDNA模板进行PCR扩增反应，所述实验组三、实验组四、实验组五反应条件相同。
所述反应条件为：一步反应，95℃2min；94℃45s，60℃1min，72℃1min，10个循环；二步反应，90℃45s，58℃1min，72℃1min，20个循环。
将实验组三、实验组四、实验组五扩增所得PCR产物分别进行STR分型检测，实验组三所得STR图谱见附图3，实验组四所得STR图谱见附图4，实验组五所得STR图谱见附图5。
实施例三
将琼脂糖应用于微量DNA的PCR扩增中，长期使用。
称取0.3g琼脂糖加入100g水中混合均匀加热使其溶解，完全溶解后得琼脂糖流体待用。
一种PCR扩增试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，所述试剂包括：琼脂糖，PCRmix，HotStartTaq酶，复合引物。
所述琼脂糖为0.3g琼脂糖溶解于100g水中得到的琼脂糖流体。
将上述PCR扩增试剂盒用于微量DNA的PCR扩增，采用3μlPCR扩增体系，并在本公司科研中心进行大量实验以验证琼脂糖在3μlPCR扩增体系中作用效果的稳定性及琼脂糖对PCR扩增的提升效果。
所述3μlPCR扩增体系配制如下：1.2μlPCRmix，0.12μlHotStartTaq酶，0.6μl复合引物，1.08μl琼脂糖流体。所述PCRmix、HotStartTaq酶、复合引物与常规STR荧光检测试剂盒的PCRmix、HotStartTaq酶、复合引物相同。
PCR扩增反应条件为：一步反应，95℃2min；94℃45s，60℃1min，72℃1min，10个循环；二步反应，90℃45s，58℃1min，72℃1min，20个循环。
在上述PCR扩增体系及PCR扩增反应条件下扩增所得产物的STR图谱示例1、示例2分别见附图6、附图7。
由实施例一、实施例二、实施例三的实验结果可见，对于从志愿者一使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA在10μlPCR扩增体系下进行PCR扩增的结果，对比附图1、附图2可见，附图1中22个位点并没有完全获得STR分型，而且峰值很低导致该STR图谱可信度低；而附图2中22个位点全部获得分型，且峰值很高故该STR图谱可信度达100％。实验组一实验组二的区别在于实验组二的PCR扩增反应体系中添加了琼脂糖，对比结果可见，实验组二比实验组一具有更高的PCR扩增反应体系敏感度，从而大幅提升PCR扩增反应的成功率，最终获得了完整的STR分型结果，实验效果明显。
对于从志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增的结果，对比附图3、附图4可见，对于采用常规STR荧光检测试剂盒的实验组三、实验组四，当PCR扩增体系降至5μl后，STR图谱峰值明显降低，可见由于常规PCR扩增反应体系的敏感度较低使得5μlPCR扩增体系下扩增的结果不能获得完整的STR分型；对比附图4、附图5可见，当同为5μlPCR扩增体系时，采用本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒的实验组五的STR图谱相比于采用常规STR荧光检测试剂盒的实验组四的STR图谱，峰值有明显增高，STR分型测试结果良好，可见实验组五的添加了琼脂糖的PCR扩增反应体系具备更高的PCR反应敏感度，从而成功完成志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA的PCR的扩增，获得完整的STR分型结果；对比附图3、附图5可见，虽实验组五的5μlPCR扩增体系仅为实验组三的一半，但采用本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒使实验组五的STR图谱具有更好的峰值，比常规10μlPCR扩增体系的实验组四具有更好的扩增效果。
实验组三、实验组四、实验组五的STR图谱对比可见，采用本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒不仅可以明显提高PCR扩增反应的敏感度进而提高PCR扩增反应成功率，并且可以在保证实验成功率的前提下降低PCR扩增体系，从而大程度降低实验成本，实验效果明显。
对于进一步降低PCR扩增反应体系至3μl的结果，如附图6、附图7所示。大量实验证明，采用本实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在3μlPCR扩增体系下，仍然具有较高的PCR扩增反应敏感度并能够获得完整STR分型，且STR图谱峰值较高。由于目前常规的PCR扩增反应只能采用10μl及10μl以上的PCR扩增体系，3μl的反应体系可大大降低实验成本。
综上所述，琼脂糖在PCR扩增反应中具有提高PCR敏感度的效果，从而提高了PCR成功率并能够获得完整的STR分型，同时大幅降低PCR扩增过程中试剂的使用量，降低实验成本，经过大量的实验证明琼脂糖提高PCR扩增反应敏感度的效果明显、稳定。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (11)
1.一种琼脂糖在PCR扩增中的应用，其特征在于：在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖。
2.如权利要求1所述的琼脂糖在PCR扩增中的应用，其特征在于：所述琼脂糖溶解于一溶剂后配置为琼脂糖流体使用。
3.如权利要求2所述的琼脂糖在PCR扩增中的应用，其特征在于：所述溶剂为水或缓冲液。
4.如权利要求2所述的琼脂糖在PCR扩增中的应用，其特征在于：所述琼脂糖流体中，琼脂糖的质量百分比为0.01％～0.5％。
5.一种PCR扩增试剂盒，包括盒体及盒体中单独存放的试剂，其特征在于：所述试剂包括琼脂糖。
6.如权利要求5所述的PCR扩增试剂盒，其特征在于：所述琼脂糖为质量浓度为0.01％～0.5％的流体。
7.如权利要求5所述的PCR扩增试剂盒，其特征在于：所述试剂还包括PCRmix、Taq酶、引物。
8.一种PCR扩增方法，其特征在于：所述方法包括在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖的步骤。
9.如权利要求8所述的PCR扩增方法，其特征在于：所述方法还包括琼脂糖溶解于一溶剂后配置为琼脂糖流体。
10.如权利要求9所述的PCR扩增方法，其特征在于：所述溶剂为水或缓冲液。
11.如权利要求9所述的PCR扩增方法，其特征在于：所述琼脂糖流体中，琼脂糖的质量百分比为0.01％～0.5％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410726839.3A CN105648049A (zh) | 2014-12-03 | 2014-12-03 | 琼脂糖在pcr扩增中的应用、pcr扩增试剂盒及pcr扩增方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410726839.3A CN105648049A (zh) | 2014-12-03 | 2014-12-03 | 琼脂糖在pcr扩增中的应用、pcr扩增试剂盒及pcr扩增方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105648049A true CN105648049A (zh) | 2016-06-08 |
Family
ID=56480907
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410726839.3A Pending CN105648049A (zh) | 2014-12-03 | 2014-12-03 | 琼脂糖在pcr扩增中的应用、pcr扩增试剂盒及pcr扩增方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105648049A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108315216A (zh) * | 2018-05-04 | 2018-07-24 | 邯郸市疾病预防控制中心 | 一种环介导等温扩增技术假阳性污染问题的有效改良方法 |
| CN109439734A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-03-08 | 东南大学 | 一种基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法 |
| CN113736861A (zh) * | 2021-08-16 | 2021-12-03 | 东南大学 | 一种基于空间限位效应的核酸均匀扩增方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101768632A (zh) * | 2008-12-30 | 2010-07-07 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 | 一种聚合酶链式反应检测曲霉菌的方法 |
| CN101845496A (zh) * | 2010-03-30 | 2010-09-29 | 无锡中德美联生物技术有限公司 | 一种免dna提取型荧光标记str复合扩增检测*** |
-
2014
- 2014-12-03 CN CN201410726839.3A patent/CN105648049A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101768632A (zh) * | 2008-12-30 | 2010-07-07 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 | 一种聚合酶链式反应检测曲霉菌的方法 |
| CN101845496A (zh) * | 2010-03-30 | 2010-09-29 | 无锡中德美联生物技术有限公司 | 一种免dna提取型荧光标记str复合扩增检测*** |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| CHAOYONG JAMES YANG ET AL: "AGAROSE DROPLET MICROFLUIDICS FOR HIGHLY PARALLEL AND EFFICIENT EMULSION PCR", 《14TH INTERNATIONAL CONFERENCE ON MINIATURIZED SYSTEMS FOR CHEMISTRY AND LIFE SCIENCES》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108315216A (zh) * | 2018-05-04 | 2018-07-24 | 邯郸市疾病预防控制中心 | 一种环介导等温扩增技术假阳性污染问题的有效改良方法 |
| CN109439734A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-03-08 | 东南大学 | 一种基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法 |
| CN109439734B (zh) * | 2018-10-17 | 2022-01-28 | 东南大学 | 一种基于琼脂糖凝胶介质的全基因组扩增方法 |
| CN113736861A (zh) * | 2021-08-16 | 2021-12-03 | 东南大学 | 一种基于空间限位效应的核酸均匀扩增方法 |
| CN113736861B (zh) * | 2021-08-16 | 2024-05-10 | 东南大学 | 一种基于空间限位效应的核酸均匀扩增方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gellie et al. | Revegetation rewilds the soil bacterial microbiome of an old field | |
| Vartia et al. | A novel method of microsatellite genotyping-by-sequencing using individual combinatorial barcoding | |
| Rincon-Florez et al. | Culture-independent molecular tools for soil and rhizosphere microbiology | |
| T. Weedon et al. | Summer warming accelerates sub‐arctic peatland nitrogen cycling without changing enzyme pools or microbial community structure | |
| Liu et al. | SOAPBarcode: revealing arthropod biodiversity through assembly of Illumina shotgun sequences of PCR amplicons | |
| Schoenfeld et al. | Functional viral metagenomics and the next generation of molecular tools | |
| Kang et al. | The effect of sample size in studies of soil microbial community structure | |
| CN105648049A (zh) | 琼脂糖在pcr扩增中的应用、pcr扩增试剂盒及pcr扩增方法 | |
| Mantri et al. | Metagenomic sequencing of multiple soil horizons and sites in close vicinity revealed novel secondary metabolite diversity | |
| CN101376912B (zh) | 甲3型流感病毒的环介导等温扩增检测试剂盒及检测方法 | |
| CN104561332A (zh) | 一种鉴定山杨性别的ssr分子标记及其应用 | |
| Singh et al. | Molecular markers in mycology | |
| CN102827940B (zh) | 中成药中人参dna的pcr检测方法 | |
| CN102978205B (zh) | 一种应用于标记开发的高通量测序的接头及其运用方法 | |
| Banal et al. | Scalable nucleic acid storage and retrieval using barcoded microcapsules | |
| CN101871016B (zh) | 基于环介导等温扩增技术的鸭肠炎病毒检测试剂盒及方法 | |
| CN102634509B (zh) | 一种直接从感病小麦叶片上高效快速提取小麦条锈菌dna的方法 | |
| CN105039510A (zh) | 一种针对膨胀污泥中Haliscomenobacter hydrossis丝状菌群聚合酶链式反应方法 | |
| Dai et al. | Quantitative and qualitative validations of a sonication-based DNA extraction approach for PCR-based molecular biological analyses | |
| CN102181519B (zh) | 利用环化RNase H检测基因多态性SNP位点的方法 | |
| Zhou et al. | Short-term rather than long-term exclusion of grazing increases soil bacterial diversity in an Inner Mongolian steppe | |
| Srivastava et al. | DNA barcoding of medicinal plants | |
| CN1177062C (zh) | 中药浙贝母聚合酶链反应鉴定引物及鉴定方法 | |
| De Maayer et al. | The current state of metagenomic analysis | |
| CN102418151B (zh) | 一种土壤微生物cDNA文库的构建方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160608 |