CN105353122A - 干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒 - Google Patents

干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN105353122A
CN105353122A CN201510742995.3A CN201510742995A CN105353122A CN 105353122 A CN105353122 A CN 105353122A CN 201510742995 A CN201510742995 A CN 201510742995A CN 105353122 A CN105353122 A CN 105353122A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sjogren syndrome
autoantibody
syndrome specific
blotting membrane
sjogren
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510742995.3A
Other languages
English (en)
Inventor
不公告发明人
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
XIAMEN AOYI BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
XIAMEN AOYI BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by XIAMEN AOYI BIOTECHNOLOGY Co Ltd filed Critical XIAMEN AOYI BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201510742995.3A priority Critical patent/CN105353122A/zh
Publication of CN105353122A publication Critical patent/CN105353122A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
    • G01N2800/101—Diffuse connective tissue disease, e.g. Sjögren, Wegener's granulomatosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Rehabilitation Therapy (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明公开一种干燥综合征特异自身抗体检测的免疫印迹试剂盒。包括；置反应槽内的印迹膜条、酶结合物、显色剂A、显色剂B、终止液、稀释液、浓缩洗涤液、标准区带。将膜条放入反应槽与待测血清反应，如待测血清含有相应的自身抗体，将会与相应抗原结合，再加入酶结合物及显色剂，与标准带对照即可判断血清中是否含有干燥综合征特异自身抗体：抗SSA（Ro）、SSB（La）、唾液腺蛋白质1（salivary？gland？protein？1，SP1）、碳酸酐酶6（carbonic？anhydrase？6，CA6）、腮腺分泌蛋白（parotid？secretory？protein，PSP）。干燥综合征特异自身抗体的有无及抗体的种类和数量，对干燥综合征诊断和鉴别诊断有重要的临床意义。

Description

干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒
技术领域
本发明涉及一种干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒。
背景技术
干燥综合征为一种常见的自身免疫性疾病，主要累及唾液腺、泪腺以及其它多个重要器官。自身抗体是干燥综合征诊断中的重要生物标志物，目前主要用于干燥综合征诊断的自身抗体为SSA及SSB。但由于SSA及SSB仍缺乏较高的敏感性，对于很大一部分干燥综合征患者（尤其是早期患者）的诊断仍需要通过又创的唇腺活检，为干燥综合征的诊治带来极大的障碍。
目前，尚无专门针对干燥综合征特异自身抗体检测的免疫印迹试剂盒。大多数免疫印迹膜条涵盖多种自身免疫病如***性红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎/多发性肌炎相关的自身抗体，缺乏疾病特异性，造成临床资源的浪费。抗SP1、CA6、PSP抗体为新的可用于干燥综合征早期诊断的自身抗体，目前尚无检测抗SP1、CA6和PSP自身抗体的免疫印迹膜条。将SP1、CA6、PSP和抗SSA、SSB抗体联合用于干燥综合征的诊断，将极大地提高干燥综合征的早期检出率；针对干燥综合征特异自身抗体所开发的免疫印迹膜条将提高诊断试剂的使用效率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种干燥综合征自身抗体免疫印迹试剂盒，利用免疫印迹技术，在一条印迹膜条上同时检测针对干燥综合征特异的自身抗体（SSA、SSB、SP1、CA6、PSP抗体），为干燥综合征的诊断和鉴别诊断提供可靠的实验室依据。
为了达到上述目的，本发明由以下的技术方法来实现：
一种干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒组成成份包括：置反应槽内的印迹膜条、酶结合物、显色剂A、显色剂B、终止液、浓缩洗涤液、标准区带；将干燥综合征特异的自身抗原SSA（Ro）、SSB（La）、唾液腺蛋白质1（salivaryglandprotein1，SP1）、碳酸酐酶6（carbonicanhydrase6，CA6）、腮腺分泌蛋白（parotidsecretoryprotein，PSP）中的至少两种天然或重组抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），按分子量大小依次分开，再通过印迹技术转移至印迹膜上，其印迹膜条上即含有按分子量大小不同排列的各种干燥综合征特异自身抗原；或将上述自身抗原通过其它物理吸附或共价结合的方式，以一定的排列次序固定在膜条上。将膜条放入反应槽与待测血清反应，如待测血清含有相应的自身抗体，将会与相应抗原结合，再加入酶结合物及显色剂，与标准带对照即可判断血清中是否含有干燥综合征特异自身抗体。干燥综合征特异自身抗体的有无及抗体的种类和数量，对干燥综合征诊断和鉴别诊断有重要的临床意义。
具体实施方式
以下的实施例和制剂实施例可更详细地说明本发明，但不以任何形式限制本发明。
实施例1
本试剂盒组成成份包括：置反应槽内的印迹膜条5板每板8条、酶联试剂0.5ml、显色剂A50ml、显色剂B50ml、终止液50ml、浓缩洗涤液50ml、标准区带。样品要求：静脉血2-5ml，置试管待凝固后离心分离血清，血清标本保存于2-8℃，24小时内不能测试的标本应放-20℃保存，严重溶血，有絮状物或霉变的标本会影响测试。
测定步骤
1）洗涤工作液的配制
在2-8℃储存的20X浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释至1000ml，放入试剂瓶中，标签上注明配制时间，保存于4℃；
2）在含有印迹膜条的反应槽中加入1ml样本稀释液湿润膜条，1分钟后移弃稀释液；
3）加入1ml已稀释的样本（含待测血清10ul），置摇床上室温摇动30分钟或置37℃温箱30分钟；
4）弃去反应槽液体，加入洗涤工作液1ml，摇床轻晃，洗涤5分钟弃去反应槽液体，反复洗涤3次；
5）在反应槽中加入已稀释的酶结合物溶液，置摇床上室温摇动30分钟或置37℃温箱30分钟；
6）弃去反应槽液体，加入洗涤工作液1ml，摇床轻晃，洗涤5分钟弃去反应槽液体，反复洗涤3次；
7）在反应槽中分别加入显色剂A0.5ml，显色剂B0.5ml；
8）在摇床上室温摇动2-10分钟，显色；
9）待质控带和阳性区带显色清晰后加终止液0.5ml，在摇床上摇动2分钟；
10）用自来水冲去槽中液体，取出印迹膜条，置吸水纸上，待干后与标准带对照判断结果；
11）结果判断：将印迹膜条上起始线与标准带起始线对齐，观察阳性显色区带与对应的标准带位置即可判断显色区带是何种自身抗体。

Claims (3)

1.一种干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒。
2.权利1所述的干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒特征在于：所述的试剂盒组成成份包括：置反应槽内的印迹膜条、酶结合物、显色剂A、显色剂B、终止液、稀释液、浓缩洗涤液、标准区带。
3.权利2所述的印迹膜条特征在于：将干燥综合征特异的自身抗原SSA（Ro）、SSB（La）、唾液腺蛋白质1（salivaryglandprotein1，SP1）、碳酸酐酶6（carbonicanhydrase6，CA6）、腮腺分泌蛋白（parotidsecretoryprotein，PSP）中的至少两种天然或重组抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），按分子量大小依次分开，再通过印迹技术转移至印迹膜上，其印迹膜条上即含有按分子量大小不同排列的各种干燥综合征特异自身抗原；或将上述自身抗原通过其它物理吸附或共价结合的方式，以一定的排列次序固定在膜条上；将膜条放入反应槽与待测血清反应，如待测血清含有相应的自身抗体，将会与相应抗原结合，再加入酶结合物及显色剂，与标准带对照即可判断血清中是否含有干燥综合征特异自身抗体；干燥综合征特异自身抗体的有无及抗体的种类和数量，对干燥综合征诊断和鉴别诊断有重要的临床意义。
CN201510742995.3A 2015-11-05 2015-11-05 干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒 Pending CN105353122A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510742995.3A CN105353122A (zh) 2015-11-05 2015-11-05 干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510742995.3A CN105353122A (zh) 2015-11-05 2015-11-05 干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105353122A true CN105353122A (zh) 2016-02-24

Family

ID=55329126

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510742995.3A Pending CN105353122A (zh) 2015-11-05 2015-11-05 干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105353122A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110082540A (zh) * 2019-05-08 2019-08-02 中国医学科学院基础医学研究所 唾液中干燥综合征的蛋白标志物及其用途

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0199261A2 (de) * 1985-04-17 1986-10-29 Heyl Chemisch-pharmazeutische Fabrik GmbH & Co. KG Immunologischer Testkit
EP0363449B1 (de) * 1988-02-18 1993-11-18 Smolen, Josef, Dr. Verfahren zur untersuchung von antikörpern spezifisch für rheumakrankheiten, insbesondere chronische polyarthritis sowie reagens hierfür
CN1453590A (zh) * 2003-06-18 2003-11-05 广州万孚生物技术有限公司 SARS冠状病毒抗体IgG免疫印迹诊断试剂盒
CN101021534A (zh) * 2007-03-05 2007-08-22 深圳市伯劳特生物制品有限公司 幽门螺杆菌免疫印迹试剂盒
CN101021533A (zh) * 2007-03-12 2007-08-22 深圳市伯劳特生物制品有限公司 风湿病自身抗体免疫印迹试剂盒
CN101042399A (zh) * 2007-03-12 2007-09-26 深圳市伯劳特生物制品有限公司 糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒
US20080233659A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-25 National Science And Technology Development Agency (Nstda) Process of screening for alpha-thalassemia carrier using immunochromatographic strip test
CN103105489A (zh) * 2013-01-23 2013-05-15 深圳市亚辉龙生物科技有限公司 检测自身免疫性疾病抗体的免疫印迹试剂盒及其制备方法
CN103969441A (zh) * 2013-01-28 2014-08-06 广州万孚生物技术股份有限公司 基于免疫印迹法的自身抗体检测试剂盒及其测定方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0199261A2 (de) * 1985-04-17 1986-10-29 Heyl Chemisch-pharmazeutische Fabrik GmbH & Co. KG Immunologischer Testkit
EP0363449B1 (de) * 1988-02-18 1993-11-18 Smolen, Josef, Dr. Verfahren zur untersuchung von antikörpern spezifisch für rheumakrankheiten, insbesondere chronische polyarthritis sowie reagens hierfür
CN1453590A (zh) * 2003-06-18 2003-11-05 广州万孚生物技术有限公司 SARS冠状病毒抗体IgG免疫印迹诊断试剂盒
CN101021534A (zh) * 2007-03-05 2007-08-22 深圳市伯劳特生物制品有限公司 幽门螺杆菌免疫印迹试剂盒
CN101021533A (zh) * 2007-03-12 2007-08-22 深圳市伯劳特生物制品有限公司 风湿病自身抗体免疫印迹试剂盒
CN101042399A (zh) * 2007-03-12 2007-09-26 深圳市伯劳特生物制品有限公司 糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒
US20080233659A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-25 National Science And Technology Development Agency (Nstda) Process of screening for alpha-thalassemia carrier using immunochromatographic strip test
CN103105489A (zh) * 2013-01-23 2013-05-15 深圳市亚辉龙生物科技有限公司 检测自身免疫性疾病抗体的免疫印迹试剂盒及其制备方法
CN103969441A (zh) * 2013-01-28 2014-08-06 广州万孚生物技术股份有限公司 基于免疫印迹法的自身抗体检测试剂盒及其测定方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LAKSHMANAN SURESH ET AL: "Investigation of novel autoantibodies in Sjogren’s syndrome utilizing Sera from the Sjogren’s international collaborative clinical alliance cohort", 《BMC OPHTHALMOLOGY》 *
杨晓燕等: "线性免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测抗核抗体的比较分析研究", 《中外医学研究》 *
蒋守富等: "弓形虫抗体免疫印迹试剂盒的研制", 《中国寄生虫与寄生虫病杂志》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110082540A (zh) * 2019-05-08 2019-08-02 中国医学科学院基础医学研究所 唾液中干燥综合征的蛋白标志物及其用途

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK174032B1 (da) Sæt samt fremgangsmåde til immunometrisk dosering, der kan anvendes på hele celler
CN107045062B (zh) 检测人ngal的胶体金免疫层析试纸条、试剂盒及其制备方法
CN102967704B (zh) 一种用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒
CN105717308A (zh) 快速定量检测粪便乳铁蛋白的免疫层析试剂盒
Mizuochi et al. Diagnostic accuracy of serum proteinase 3 antineutrophil cytoplasmic antibodies in children with ulcerative colitis
CN101021533A (zh) 风湿病自身抗体免疫印迹试剂盒
CN117434276A (zh) 一种thsd7a抗体检测试剂盒及其用途
CN101981452A (zh) 肺炎球菌检测方法
CN101042399A (zh) 糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒
CN115184620B (zh) 一种pla2r抗体的量子点荧光检测试纸条、试剂盒及其应用
CN105353122A (zh) 干燥综合征特异自身抗体免疫印迹试剂盒
CN103713121A (zh) 人血管炎诊断试剂盒及其制备方法
CN108508208B (zh) 抗Kaiso蛋白抗体在制备早期强直性脊柱炎诊断试剂盒中的应用
US11204351B2 (en) Compositions and methods for identifying Ehrlichia species
CN103033616A (zh) 一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测方法及试剂盒
EP4010704A1 (en) An improved autoantibody detection assay
CN110687285B (zh) 诊断试剂盒及mak16在制备***性红斑狼疮早期诊断试剂中的应用
RU2339952C1 (ru) Способ дифференциальной диагностики псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза и диагностический набор для его осуществления
CN101216490B (zh) 干化学法torch检测试剂盒及其制造方法
ES2295205T3 (es) Procedimiento para el analisis de muestras de heces para finalidades de diagnostico.
CN105652006A (zh) ***总抗体Dot-ELISA检测方法
CN108414741B (zh) 一种免疫组合物在制备膜性肾病无创检测用试剂中的用途
WO2021048345A1 (en) Lateral flow immunoassay device for detection of candida infection and uses thereof
CN102095860B (zh) 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法
CN201965132U (zh) 梅毒特异性IgM抗体免疫印迹试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160224