CN105331643B - 一种利用槐米药渣发酵制备l-乳酸的方法 - Google Patents
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Abstract
一种利用槐米药渣发酵制备L‑乳酸的方法，包括以下步骤：(1)将药渣干燥至含水量为2‑5wt％；(2)将药渣与麸皮50份，玉米粉0.4‑0.6份，氯化铵5‑7份，磷酸二氢钾3‑5份，于25‑40份的无菌水中混合均匀，自然pH，高压灭菌得药渣培养基；(3)在药渣培养基中接入米根霉菌种的一级种子，25‑30℃发酵24‑96h，平均每过12h将培养基摇混均匀；(4)用蒸馏水淋洗发酵后得到的药渣培养基，得滤液；加石灰乳调节pH9.5‑10，澄清得上清液；(5)将上清液减压浓缩，浓缩液体经结晶析出乳酸钙；(6)滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2‑2.5h，成粉末状；(7)加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，抽滤得粗乳酸。该方法工艺简单，耗时短，降低物耗，利于工业中试放大，且收率较高。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，属于生物化工技术领域。
背景技术
随着科技的发展和进步，中草药由过去的简单加工变为目前的深加工，由过去几种简单的剂型如：粉剂、汤剂、膏剂等发展为口服剂、注射剂、胶囊剂等多种剂型。我国中药渣年排放数量巨大，目前对中药渣处理方式以堆积、焚烧、填埋为主，不仅污染环境，而且造成资源的浪费。在倡导节能减排，低碳环保的现代社会，为综合开发中药资源，充分利用中药药渣提供思路，深入研究中药药渣用途，能使药渣得到更深层次的利用。
乳酸(Lactic Acid)，学名为α-羟基丙酸(α-Hydroxy-Propanoic-Acid)，分子式为C3H6O3，结构式为CH3CHOHCOOH，相对分子质量90.08，是一种常见的天然有机酸。乳酸分子内含有一个不对称碳原子，具有光学异构现象，有D型和L型两种构型，其中L-乳酸为右旋，D-乳酸为左旋。
在我国，随着乳酸及其衍生物应用领域的不断扩大和消费量的增加，乳酸的需求量也不断增加，仅啤酒行业每年需乳酸3000吨以上，食品、医药工业对乳酸的需求量也越来越大。L-乳酸最主要的用途是聚合生成聚乳酸，它具有良好的相容性和可生物降解性，已广泛应用于包装业、医药行业和纺织业。微生物发酵法生产乳酸，可通过菌种和培养条件的选择而得到具有专一性的L-乳酸。发酵法生产乳酸除能以葡萄糖、乳糖等单糖为原料外，还能以淀粉、纤维素为原料发酵生产乳酸，因此，微生物发酵法生产乳酸因其原料来源广泛，产品光学纯度高、安全性高等优点。按照发酵微生物的种类可分为细菌发酵和根霉发酵。寻求更为廉价的原料是降低成本的一条重要途径，同时节省粮食，缓解人畜争粮问题。乳酸作为绿色平台化合物，其生产原料应该绿色无毒。可再生的生物质资源是理想的乳酸生产原料，因此研究废弃中药渣作为乳酸的原料，不仅开拓乳酸生物质原料的新领域，而且为中药企业产业升级和结构调整提供了一个新的思路。
槐米为常用中药，是豆科植物槐的干燥花蕾，《神农本草经》将其列为上品，味苦，微寒，具有凉血止血，清肝泻火等功效。近年来国内外医药工作者对其作用进行研究，发现其有效成分有抗癌防癌、抗血小板聚集、镇痛、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗炎、抗过敏、抗自由基及抗氧化等多种活性，对改善心肌循环、清热解毒、降血脂、软化血管、消炎补肾等有良好的防治作用，对人体无毒、无害、无致死、致癌、致畸、致突变作用。其中含量最高的有效成分是芦丁(又名芸香甙)，是衡量槐米质量的主要指标。芦丁在酶或酸的作用下被水解成檞皮素。
专利文献CN102586348A公开了一种木质纤维素为原料低成本高效生产乳酸的方法。具体地说是从木质纤维素分离并保存的乳酸片球菌，液体培养乳酸片球菌获得作为种子的细胞菌体，接种于高木质纤维素含量的反应器中，加入纤维素酶，进行同步糖化和高温发酵生成乳酸；或首先进行木质纤维素的纤维素酶糖化获得含糖的水解液，然后用水解液进行高温乳酸发酵获得乳酸；或者乳酸片球菌和木质纤维素原料混匀，首先进行固态培养，然后再把包含有乳酸片球菌的木质纤维素原料加入发酵罐，加入纤维素酶，实现同步糖化和高温发酵产乳酸。本发明采用独特的发酵工艺和微生物，产品浓度高、过程简单、成本低廉，特别以木质纤维素为原料，具有广阔的生产空间和发展前景。
专利文献CN1843152公开了餐厨垃圾开放式发酵生产乳酸和饲料的方法，其特征是通过以下步骤进行餐厨垃圾开放式发酵生产乳酸：(一)将餐厨垃圾滤干、粉碎；(二)向被粉碎的固体餐厨垃圾中加入固体餐厨垃圾质量1～3倍的水；(三)向固液混合餐厨垃圾中加入纤维素酶和淀粉酶，按每100g固液混合餐厨垃圾中加入纤维素酶10～20kU和淀粉酶5～10kU的比例添加；(四)加入纤维素酶和淀粉酶的固液混合餐厨垃圾在35～50℃的条件下间断性搅拌开放式发酵20～30h，并加入碳酸钙保持固液混合餐厨垃圾pH值为5～6；(五)固液分离，再提纯已过滤发酵液中的乳酸，即得到乳酸。
专利文献CN103892045A公开了一种利用槐米固体药渣生产畜禽饲料及其制备方法；解决技术问题所采用的技术方案为：加入葡萄糖、(NH4)2SO4、KH2PO4和MgSO4·7H2O，将上述配料按照一定比例混合并加水溶解后，拌入槐米药渣中，加水并充分拌匀，放入培养盘中，接入黑曲霉，压实并遮光，保温密封培养3-5天，在40-50℃的环境下干燥，即得发酵曲种，收集并储存；将槐米药渣通过生物发酵的方法使其变为畜牧饲料即解决了药渣排放污染环境的难题，槐米药渣畜牧饲料具有广阔的应用前景。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，采用好氧固态发酵技术，为乳酸生产开拓了新原料来源。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，该方法包括以下步骤：
(1)槐米药渣的预处理：将药渣干燥至含水量为2-5wt％；
(2)药渣培养基的制备：将药渣与麸皮50份(重量份)，其中药渣∶麸皮＝1∶6-7∶1；玉米粉0.4-0.6份，氯化铵5-7份，磷酸二氢钾3-5份，于25-40份的无菌水中混合均匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基；
(3)药渣发酵：在每100g药渣培养基中接入5-30mL的米根霉菌种的一级种子，25-30℃发酵24-96h，平均每过12h将培养基摇晃均匀；
(4)产品处理：用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液；向滤液中加入石灰乳调节pH9.5-10，澄清得上清液；
(5)将上清液减压浓缩，温度为45-50℃，得到浓缩液体放到3-5℃冰箱里，结晶析出乳酸钙；
(6)滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2-2.5h，成粉末状；
(7)加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸。
其中，所述步骤(4)中澄清获得上清液的过程中，体系的温度控制在52-57℃。
所述米根霉菌种的一级种子菌种浓度(孢子浓度)为(0.10-1.00)×107个/mL。
所述米根霉菌种的一级种子的培养方法为：将米根霉菌种在PDA固体培养基，28℃，培养5-7天，得到米根霉菌种的一级种子。
所述PDA固体培养基的成分为马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15-20g、自来水1000mL，自然pH。
本发明的优点在于：
本发明采用米根霉菌种对槐米药渣进行好氧发酵，为乳酸生产开拓了新原料来源，减少红薯、玉米等传统粮食原料的消耗；且本发明的发酵工艺简单，成本低，工艺稳定。本发明不仅可以为中药厂带来可观的经济效益，而且降低垃圾填埋强度，有利于改善空气、水质和土壤生活环境，以废弃药渣为廉价的原料是降低成本的一条重要途径，同时节省粮食，缓解人畜争粮问题。
具体实施方式
以下通过具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例中所使用的试剂均为试剂级；槐米药渣是工业提取芦丁的剩余产物。在工业提取芦丁的工艺中，槐米经过水煮，过滤后的固体即为槐米药渣，液体冷却结晶得到芦丁。米根霉菌种来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，米根霉菌的保藏号为3.819。
实施例中所采用的PDA固体培养基的制备过程为：先将马铃薯洗净去皮，称取300g马铃薯切成小块，加水煮烂，用四层纱布过滤，加葡萄糖30g和琼脂30g，继续加热搅拌混匀，稍冷却后再补足水分至1000mL，分装、加塞、包扎，115℃灭菌30min后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用。
实施例1
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目。称取槐米药渣10g、麸皮10g、玉米粉0.18g、氯化铵2.0g、磷酸二氢钾2.0g，溶于16g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入25mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，28℃发酵48h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.450mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸5.85mg。
实施例2
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣14g；麸皮7g，玉米粉0.18g，氯化铵2.1g，磷酸二氢钾2.1g，溶于15.8g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入20mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，26℃发酵96h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.144mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸5.49mg。
实施例3
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣15g；麸皮5g，玉米粉0.18g，氯化铵2.0g，磷酸二氢钾2.0g，溶于16.0g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入10mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，30℃发酵48h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为2.066mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸8.68mg。
实施例4
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣16g；麸皮4g，玉米粉0.18g，氯化铵2.4g，磷酸二氢钾2.4g，溶于15.2g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入5mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，27℃发酵96h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.320mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸6.07mg。
实施例5
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣20g；麸皮4g，玉米粉0.18g，氯化铵2.4g，磷酸二氢钾2.4g，溶于15.2g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入30mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，25℃发酵30h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.630mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸7.83mg。
实施例6
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣18g；麸皮3g，玉米粉0.18g，氯化铵2.1g，磷酸二氢钾2.1g，溶于15.8g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入20mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，29℃发酵72h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.168mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸5.61mg。
实施例7
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣21g；麸皮3g，玉米粉0.18g，氯化铵2.4g，磷酸二氢钾2.4g，溶于15.2g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入15mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，26℃发酵30h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.624mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸7.80mg。
实施例8
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣7g；麸皮14g，玉米粉0.18g，氯化铵2.1g，磷酸二氢钾2.1g，溶于15.8g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入5mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，30℃发酵72h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.545mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸7.41mg。
实施例9
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣5g；麸皮15g，玉米粉0.18g，氯化铵2.0g，磷酸二氢钾2.0g，溶于16.0g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入30mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，28℃发酵24h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为2.504mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸12.02mg。
实施例10
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣4g；麸皮16g，玉米粉0.18g，氯化铵2.1g，磷酸二氢钾2.1g，溶于15.8g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入25mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，25℃发酵54h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.606mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸7.71mg。
实施例11
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣4g；麸皮20g，玉米粉0.18g，氯化铵2.1g，磷酸二氢钾2.1g，溶于15.8g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入15mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，29℃发酵24h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为1.391mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸6.68mg。
实施例12
将槐米药渣干燥至含水量为3％，粉碎，粉末粒度为10目，称取槐米药渣3g；麸皮18g，玉米粉0.18g，氯化铵2.1g，磷酸二氢钾2.1g，溶于15.8g的无菌水中，将制得的混合液倒入锥形瓶中搅拌混匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到药渣培养基。在每100g药渣培养基中接入10mL的米根霉菌种的一级种子，稀释孢子浓度为9.3×106个/mL，27℃发酵54h，平均每过12h将培养基摇晃均匀。用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液乳酸含量为2.002mg/g；加石灰乳(调节pH9.5-10)，离心，得上清液。澄清过程中需保温55℃；将上清液减压浓缩，温度为50℃，得到浓缩液体放到4℃冰箱里，结晶析出乳酸钙。滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2h，成粉末状。加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸9.61mg。
Claims (4)
1.一种利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)槐米药渣的预处理：将药渣干燥至含水量为2-5wt％；
(2)药渣培养基的制备：将药渣与麸皮50份，其中药渣:麸皮＝1:6-7:1；玉米粉0.4-0.6份，氯化铵5-7份，磷酸二氢钾3-5份，于25-40份的无菌水中混合均匀，自然pH，于121℃高压灭菌20min，得到槐米药渣培养基；
(3)药渣发酵：在每100g药渣培养基中接入5-30mL的米根霉菌种的一级种子，所述米根霉菌种的一级种子菌种浓度为(0.10-1.00)×107个/mL；25-30℃发酵24-96h，平均每过12h将培养基摇晃均匀；
(4)产品处理：用蒸馏水淋洗发酵后得到的固体药渣培养基，得滤液；向滤液中加入石灰乳调节pH 9.5-10，澄清得上清液；
(5)将上清液减压浓缩，温度为45-50℃，得到浓缩液体放到3-5℃冰箱里，结晶析出乳酸钙；
(6)滤掉母液，置于100℃烘箱中烘干2-2.5h，成粉末状；
(7)加热搅拌使乳酸钙晶体溶解，并加入浓硫酸酸化，硫酸的加入量与晶体中所含钙摩尔分数相同，抽滤得粗乳酸。
2.根据权利要求1所述的利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述步骤(4)中澄清获得上清液的过程中，体系的温度控制在52-57℃。
3.根据权利要求1所述的利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述米根霉菌种的一级种子的培养方法为：将米根霉菌种在PDA固体培养基，28℃，培养5-7天，得到米根霉菌种的一级种子。
4.根据权利要求3所述的利用槐米药渣发酵制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述PDA固体培养基的成分为马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15-20g、水1000mL，自然pH。
Priority Applications (1)
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