CN105106816A - 保护化学性肝损伤的中药保健品制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂及其制备方法，其中制剂，按照重量份计算，它是由葛根380～420份、枳椇子300～340份、大枣280～320份、乌梅280～320份、砂仁130～170份、甘草130～170份和淀粉60～100份制成的。制备方法中优化了处方及制备工艺，制得的制剂工艺稳定、质量可控、安全有效；药理实验证明，本发明的保健品制剂可以有效的阻止乙醇导致肝脏GSH耗竭和TG含量的升高，减轻肝细胞脂肪变性，具有预防肝损伤的功能，对化学性肝损伤具有辅助保护作用。方中各药取自天然资源，成本相对低廉，便于民众采用。

Description

保护化学性肝损伤的中药保健品制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂及其制备方法，属于保健品技术领域。

背景技术

化学性肝损伤是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。作为人体的重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害。大自然和人类工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，称为"亲肝毒物"，这些毒物在人群中普遍易感，潜伏期短，病变的过程与感染的剂量直接相关，可引起肝脏不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝硬化和肝癌。工业生产中的原料、中间产物与最终产物均可能有肝毒性，因此，需十分警惕化学性肝中毒的发生。

酒精性肝病(alcoholicliverdisease，ALD)是由于长期大量饮酒所致的肝脏疾病。ALD的致病因素单一，但其发病机制较为复杂，目前尚不完全清楚，可能与酒精及其代谢产物对肝脏的毒性作用、氧化应激、内毒素、免疫介导和细胞因子、细胞凋亡、遗传多态性、与病毒的叠加作用等多种因素有关。初期通常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化，严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚至发展为急性肝功能衰竭。酒精代谢、降解的主要场所为肝脏。肝脏中含有乙醇脱氢酶可以将人体摄入的酒精变成乙醛，乙醇和乙醛的毒性作用可致酒精性肝病的发生。其中乙醛为高活性化合物，能肝细胞的多方面功能均能被其干扰，影响线粒体对ATP的产生，蛋白质的生物合成和***，反复使肝细胞发生脂肪变性、坏死和再生，最终导致肝硬化。

目前随着人们生活水平的提高，人们对于身体健康的关注也越来越重视，开发保护化学性肝损伤的中药保健品具有十分重要意义，并且也具有巨大的市场前景。

申请号为2004100207060中国发明专利公开了一种调节血脂和保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，采用壳寡糖、五味子、葛根进行配比，但是壳聚寡糖的提取制备工艺要求较高，故成本相对较高，制约其销售。申请号为2009101024750的发明专利公开了一种防治酒精性肝病的中药保健品制剂，采用葛花、枳椇子、葛根、乌梅、大枣、砂仁、甘草进行配比，可以有效的防治酒精性肝病的发生。但是有报道称葛花有毒性风险，目前未列入可用于保健食品的(食药两用)名单中，在实际保健品加工生产中，需要将其去除，为了达到相同疗效或使其疗效更显著，需要对其配方进行调整。

发明内容

本发明的目的在于提供一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂及其制备方法，在现有技术的基础上对其进行了改进，去除了葛花，调整了葛根等组分的处方量，对于保护化学性肝损伤，特别是防治酒精性肝病疗效显著，且所提供的剂型，服用方便。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：

一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，按照重量份计算，它是由葛根380～420份、枳椇子300～340份、大枣280～320份、乌梅280～320份、砂仁130～170份、甘草130～170份、淀粉60～100份制成的。

优选地，一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，按照重量份计算，它是由葛根400份、枳椇子320份、大枣300份、乌梅300份、砂仁150份、甘草150份、淀粉80份制成的。

所述的中药保健品制剂为口服制剂，优选为胶囊剂。

本发明所采用的保护化学性肝损伤的中药保健品制剂的制备方法为：按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加6～10倍量水浸泡0.5～1.5h，煎煮2～3次，每次1～2h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至70℃、真空度-0.07MPa下相对密度为1.25～1.28的稠膏，加入淀粉混合均匀，制成各种不同的剂型，即得。

具体地，其中胶囊剂的制备方法为：按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加6～10倍量水浸泡1～2h，第一次煎煮1～1.5小时，第二次加5～7倍量水煎煮1～1.5h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至70℃、真空度-0.07MPa下相对密度为1.25～1.28的稠膏，继续在70℃、真空度-0.07MPa下减压干燥5～7小时，粉碎，过65目筛，制成干膏粉，然后再在干膏粉中按照比例加入辅料淀粉，混合均匀后，用90～98％乙醇过24目筛，制粒，60～80℃干燥3～5小时，过24目筛，整粒，总混，灌装胶囊，即得胶囊剂。

优选地，胶囊剂的制备方法为：按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加8倍量水浸泡1h，第一次煎煮1小时，第二次加6倍量水煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至70℃、真空度-0.07MPa下相对密度为1.25～1.28的稠膏，继续在70℃、真空度-0.07MPa下减压干燥6小时，粉碎，过65目筛，制成干膏粉，然后再在干膏粉中按照比例加入辅料淀粉，混合均匀后，用95％乙醇过24目筛，制粒，60℃干燥4小时，过24目筛，整粒，总混，灌装胶囊，即得胶囊剂。

前述保护化学性肝损伤的中药保健品制剂的制备方法中，所述滤过采用80目的不锈钢网进行。

本发明中药保健品制剂以葛根、枳椇子、大枣、乌梅、砂仁、甘草附加淀粉精制而成，方中各成分具体功效如下：

葛根：性甘、辛，温，归肝、心、脾经。具有解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。用于外感发热头痛，项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，眩晕头痛，中风偏瘫，胸痹心痛，酒毒伤中。药理研究证明，葛根具有心脑血管、解酒、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抑制酪氨酸酶活性、抗炎、***样、改善记忆、调节内分泌等作用。

枳椇子：性味归经为甘，平。归心、脾、胃经，具有止渴，除烦，解酒毒，利小便。用于酒醉，烦热，口渴，呕吐，小便不利。药理研究证明，枳椇子具有显著的解酒、保肝、抗肝纤维化及抗衰老、抗疲劳等作用。

大枣：性味归经为甘，温。归脾、胃、心经。补中益气，养血安神。用于脾虚食少，乏力便溏，妇人脏躁。药理研究证明，大枣有cAMP和cGMP样物质的药理作用、抗***反应、中枢神经抑制作用、补体抑制活性、抑制脑膜ATP酶活性、抗突变活性、诱导***素的释放、预防龋齿、保护肝脏、增强肌力等多种作用。

乌梅：性味归经为酸、涩，平。归肝、脾、肺、大肠经。具有敛肺，涩肠，生津，安蛔。用于肺虚久咳，久泻久痢，虚热消渴，蛔厥呕吐腹痛。药理研究证明，乌梅有驱虫、抗菌、抗过敏、抗肿瘤、保肝、抑凝血抗纤溶活性、消除疲劳、抗衰老等作用。

砂仁：性味归经为辛，温。归脾、胃、肾经。具有化湿开胃，温脾止泻，理气安胎。用于湿浊中阻，脘痞不饥，脾胃虚寒，呕吐泄泻，妊娠恶阻，胎动不安。药理研究证明，砂仁有显著的镇痛、抗溃疡作用；对抗体细胞形成，胃酸分泌，胃酶消化力均有显著的抑制作用；对胃肠输送机能有促进作用。

甘草：性味归经为甘，平。归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。药理研究证明，甘草具有解毒、抗菌、抗肿瘤、免疫调节、对抗肝炎病毒等作用。

本产品配方遵循我国传统中医药理论，方中用葛根甘凉之性，走脾胃，能生津止渴，针对酒精湿热内蕴致伤津口渴，标本兼顾，以为君药。次用枳椇子甘、平，止渴、除烦，以解热盛伤津致口渴心烦，另有解酒毒之功治本以祛邪；大枣甘温之性，助气血化生以养肝血，又兼顾补脾助运以扶正；乌梅之酸味平性重在生津，治标为主；三药共助君药以为臣药。砂仁之辛温，助脾健运有利化湿，辛行中焦气机，针对胃脘胀满、口中甜腻等，是为佐药。甘草兼顾健脾补气、有调和诸药，以为佐使药。以上诸药共用，体现肝脾同治，气血兼顾，祛邪扶正的配方特点。

为了确保本发明中该中药保健制剂的疗效，申请人对制备工艺和药理功能进行了相应的实验研究，根据方中药味的药物成分，结合药物的理化性质，采用正交实验，优化了处方及制备工艺，使之成为工艺稳定、质量可控、安全有效的纯中药制剂；动物实验研究表明，预防用药，可以有效保护化学性肝损伤。实验研究的主要内容如下：

(一)工艺相关研究

1、提取工艺拟订的依据

依据方中各药的有效成分及性质，设计本品工艺路线。

以金元时代《脾胃论》的葛花解酲汤及明代《普济方》中的“葛花丸”为基础方，结合贵州民间的习用配方，经加减而成。原方以汤剂或大蜜丸为用。为保持原方疗效，根据现行法规要求及方中各药的有效成分及性质经试验我们选用了以水为溶剂提取方中6味药的药效成分。

现代研究表明方中葛根富含异黄酮、皂苷等有效成分；药理研究发现，葛根所含异黄酮类化合物以葛根素为代表，具有解酒保肝等作用，具有很大的开发利用价值。枳椇子的有效成分为皂苷和糖苷、生物碱、脂肪酸等，其水溶性部分具有较好治疗酒精中毒保肝的活性。其它几味药则含黄酮、挥发油等有效成分。本工艺综合考虑方中各味药物的有效成分特性和生产实际，选择了水为提取溶剂。比较起有机溶剂的使用，选用纯化水作提取溶剂更加安全、经济、环保、吸收快、生物利用度高等有优点。在提取工艺参数考察中，我们采用正交设计对提取条件和工艺参数进行了研究。选择了功效成分：总黄酮和葛根素的提取率作为工艺考察指标，以提高产品工艺合理性和质量可控性。

对于水提物易吸湿等缺点，在制粒过程中加入适量的淀粉，一方面可降低该制剂的吸湿性，又可增加颗粒流动性，改善和提高产品吸湿稳定性和装量差异合格率。

2、剂型的选择及依据

历代用于防治酒精性肝病和防治酒毒的大多是液体制剂(汤剂或口服液)，以及大蜜丸等较为初级的固体制剂，在实际运用中有明显的不足之处，如汤剂处方大，服用量大，每次煎煮等过程麻烦，不适合商品化。丸剂大处方、大剂量、原粉入药、起效慢、生物利用率低等缺点。

本品通过现代生物提取纯化和制剂手段，制成胶囊剂，可降低服用量，提高生物利用度，剂型经典、方便服用、携带和储存，便于规模化生产、提高产品质量的可控性和稳定性。故本品选择了硬胶囊剂。

3、工艺路线的选择

3.1药材吸水率的考察

取粉碎成粗粉并混合均匀的药材约100g各三份，精密称定。分别加水500ml，充分振摇后，放置24小时，滤过，再称取每份药材重量，计算吸水率，见表1。

表1药材粗粉吸水率考察

结果表明，药材的吸水量约为药材重量的2倍，故在第一次煎煮时，应多加2倍药材量的水。

3.2提取工艺选择

(1)正交试验

采用3因素3水平正交试验，以溶剂用量(A)、提取时间(B)、提取次数(C)为考查因素设计L₉(3⁴)正交表进行试验，每组平行三份。以总黄酮和葛根素含量为评价指标，筛选最佳工艺。

取粗粉40g，用水煎煮提取，过滤，滤液减压回收，干燥得干膏，测定含量。因素水平安排见表2，结果见表3，方差分析见表4。

表2因素水平表

表3正交试验结果

注：综合评分Z＝(X/Xmax*50+Y/Ymax*50)

表4方差分析表

注：F0.05(2，2)＝19.000；F0.01(2，2)＝99.000

以上极差分析结果可以看出因素影响大小依次为B＞A＞C，且最佳工艺为A₁B₁C₂，即加6倍量水，提取2次，每次1小时；方差分析结果表明，溶剂用量、提取时间、提取次数对提取效果均无显著影响。考虑到各药材的吸水率，故最终工艺为葛根、枳椇子、大枣、乌梅、砂仁、甘草拣选，粉碎成粗粉，加8倍量水浸泡1小时后，加热煎煮1小时，滤过，药渣再加6倍量水，煎煮1小时。

(2)提取工艺验证

验证试验：按上述确定的工艺条件，三批中试验证试验结果见表5。

表5验证试验结果

验证试验结果基本合理，总黄酮转移率可达59.7％，葛根素转移率可达52.7％。由此确定提取工艺为：葛根、枳椇子、大枣、乌梅、砂仁、甘草加8倍量水浸泡1小时后，加热煎煮1小时，滤过，药渣再加6倍量水，煎煮1小时。合并滤液、浓缩，制得稠膏。

4、制剂工艺选择

4.1辅料确定

淀粉是一种常用的药物辅料，其化学性质稳定，与大多数药物不起作用，在空气中吸湿而不潮解，安全、普适性强、经济，易被患者接受。本产品选用可溶性淀粉作为辅料。

4.2制粒润湿剂确定

本产品干膏粉为水提工艺，由于吸湿性较强，流动性较差，故考虑适量辅料制粒方法，预试验分别试用了水和不同浓度的乙醇溶液作为润湿剂，结果选用95％乙醇作为润湿剂，易于制粒，产品分散性好，颗粒均匀，且干燥时间短。

4.3制粒工艺的选择

主要对制粒工艺进行了试验比较，见表6和表7，确定了制粒工艺路线。

表6制剂工艺筛选1(粉末直接填充胶囊)

试验结果，粉尘污染大，不利于劳动保护，流动性差，装量差异大。

表7制剂工艺筛选2(制粒后填充胶囊)

试验结果，无尘污飞扬，有利于劳动保护，流动性好，装量差异偏差较小。

5、颗粒流动性研究

5.1实验材料：采用实验室工艺自制胶囊样品(批号1、2、3)

5.2试验方法：休止角测定采用固定漏斗法，将3只漏斗串联并固定于支架上并水平放置的于坐标纸上方，使漏斗下口距坐标纸的距离为H，小心地将样品沿漏斗壁倒入最上的漏斗中，直至坐标纸上形成的圆锥体尖端接触到最下面的漏斗口为止。由坐标纸测出圆锥底部的直径(2R)，根据公式tanα＝H/R，计算出休止角α。

5.3样品休止角测定

取样品适量，按休止角测定方法操作并计算，重复测定5次，取均值。结果测得干膏粉的休止角为42.28°，成型颗粒的休止角为35.95°，结果见表8、9。

表8干膏粉休止角测定结果

表9成型颗粒的休止角测定结果

5.4验证

(1)胶囊装量差异测定

取3批试生产样品，按《中国药典》一部(2010版)附录胶囊剂项下分别测定其装量差异，3批均符合规定，表明颗粒流动性良好，达到灌装要求。结果见下表10：

表10胶囊装量差异测定结果

(2)水分测定

取3批试生产样品，按GB5009.3-2010(第一法)测定水分，见表11：

表11水分测定结果

6、制剂成型颗粒的吸湿性研究

6.1实验方法：将底部盛有氯化钠过饱和溶液的玻璃干燥器，放入25℃恒温培养箱中24h，干燥箱内的相对湿度为75％。在已恒重的称量瓶底部，放入已干燥至恒重的样品约1g，准确称重后置于上述干燥器内(称量瓶盖打开)，于25℃恒温培养箱内保存，分别于4、6、8、12、24、36、48、60、72、84、96、108、120h后称定质量，按式1计算吸湿百分率，结果见表12。

表12吸湿百分率测定结果

以吸湿百分率为纵坐标，吸湿时间为横坐标，作吸湿曲线，见图1。从图1中可以看出，干膏粉制成颗粒后吸湿性稍有改善，说明加入辅料淀粉可以增加本产品的抗吸湿性。干膏粉和成型颗粒的吸湿量都随放置时间的延长而逐步增加，放置大约8h后，其吸湿量均超过9％，《中国药典》规定胶囊剂的含水量不得超过9％，因此应尽量缩短生产过程，避免颗粒在空气中暴露时间过长而造成水分超标，吸潮后结块，影响产品的外观质量和稳定性。

6.2临界相对湿度的测定

按表13配制不同浓度硫酸溶液及盐的过饱和溶液，分别置于玻璃干燥器中，于25℃恒温箱中放置48小时，使其内部湿度平衡构成不同相对湿度(RH)的环境。取已干燥至恒重的成型颗粒1g，平铺于已恒重的称量瓶底部，厚约2mm，精密称量后分别放入上述不同相对湿度的干燥器内(称量瓶盖打开)，于25℃恒温培养箱内放置7天后称量，计算各相对湿度下的吸湿百分率，结果见表13。

表13不同相对湿度下药粉在25℃的吸湿率

以吸湿百分率为纵坐标，相对湿度(RH)为横坐标作图，得到临界相对湿度(CRH)曲线，分别在CRH曲线两端作切线，两切线交点的横坐标即为临界相对湿度，结果见图2。

临界相对湿度是药物吸湿与否的临界值，可根据它确定生产时的环境湿度。由图2可知，该药粉的临界相对湿度约为80％。故在粉碎、混合、整粒及分装时，车间环境的相对湿度应控制在80％以下，以避免水分对药物性质及稳定性的影响。生产实际中，GMP车间湿度控制在60％以下，适合该制剂的生产。

7、中试工艺验证试验

按拟定的制备工艺进行三批中试生产，对生产工艺各项指标进行检测，考核本制备工艺的合理性，结果见表14：

表14三批中试试验数据及结果

按拟定的制备工艺进行三批中试生产，对生产工艺各项指标进行检测，对产品进行质量评定，考核本制备工艺的合理性。三批试验总成品率在91.2％-95.0％之间。试验结果表明，本制备工艺路线设计基本合理，工艺生产条件符合工厂生产要求，工艺稳定，质量可控。

(二)药理功能相关研究

1、实验动物：SPF级昆明种小白鼠，雄性，6～8周龄，体重：18～22g，由广东省实验动物中心提供，实验动物生产合格证号：SCXK(粤)2008-0002，质量合格证号：0102880。颗粒饲料亦由广东省实验动物中心提供。饲养于SPF级动物实验室,实验动物使用许可证号：SYXK(粤)2008-0011。室温20～25℃，湿度40～70％。

2、剂量选择与受试物给予方式：实验设0.27、0.53、1.60g/kgBW三个剂量组，为人体推荐日服量的5、10、30倍，另设空白对照组、乙醇对照组。灌胃给予样品，各剂量组按每日一次，每次0.20ml/10gBW灌胃给予受试样品，空白对照组和模型对照组按同等容量灌胃给予纯净水。具体剂量如下：

空白对照组0.00g/kgBW

乙醇对照组0.00g/kgBW

低剂量组0.27g/kgBW，相当于推荐日服量的5倍。

中剂量组0.53g/kgBW，相当于推荐日服量的10倍。

高剂量组1.60g/kgBW，相当于推荐日服量的30倍。

3、主要仪器与试剂：日立7600-010全自动生化仪。MDA、GSH检测试剂盒由南京建成提供。TG检测试剂盒由中生北控生物技术股份有限公司提供。

4、试验方法

试验动物在实验室条件下适应三天后，随机分成空白对照组、乙醇对照组及低、中、高三个剂量组，每组12只小鼠。三个剂量组每天分别按不同剂量灌胃给予受试物，空白对照组和乙醇对照组按同等容量灌胃给予纯净水，每周称重动物，以调整给受试样品量，共30天。试验结束时各剂量组和乙醇对照组以0.12ml/10gBW剂量一次灌胃给予50％乙醇，空白对照组灌胃给予同等容量纯净水，各组动物禁食16小时后处死，取肝组织制成肝匀浆，测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)，并取肝脏左叶冰冻切片，苏丹Ⅲ染色，光镜下观察病理变化。

5、试验数据统计：统计资料采用SPSS11.0统计软件包进行统计分析，统计方法采用方差分析和秩和检验。

6、结果判断：

(1)肝脏MDA、还原型GSH和甘油三酯(TG)三项检测指标结果阳性。

(2)肝脏MDA、还原型GSH和甘油三酯(TG)三项检测指标中任两项指标阳性和病理组织学检查结果阳性。

7、试验结果

7.1本发明制成的制剂对受试动物体重的影响

由表15可见，各剂量组动物体重与空白对照组比较，差异无显著性意义(P>0.05)，表明本受试样品对动物体重无影响。

表15芊玖舒牌葛枳胶囊对受试动物体重的影响

7.2本发明制成的制剂对受试动物肝组织MDA、TG含量的影响

由表16可见，乙醇对照组MDA、TG含量与空白对照组比较升高，差异有显著性意义(P<0.05)，表明肝损伤模型成立。各剂量组TG含量与乙醇对照组比较降低，差异有显著性意义(P<0.01)，实验结果阳性。

表16芊玖舒牌葛枳胶囊对肝组织MDA、TG含量的影响

注:1.△△表示乙醇对照组与空白对照组比较P<0.01。(T检验)

2.**表示剂量组与乙醇对照组比较P<0.01。(方差分析)

7.3本发明制成的制剂对受试动物肝组织GSH含量的影响

由表17可见，乙醇对照组GSH含量与空白对照组比较降低，差异有显著性意义(P<0.05)，表明肝损伤模型成立。各剂量组GSH含量与乙醇对照组比较升高，差异有非常显著性意义(P0.01)，实验结果阳性。

表17芊玖舒牌葛枳胶囊对肝组织GSH含量的影响

注:1.△表示乙醇对照组与空白对照组比较P<0.05。(T检验)

2.*，**表示剂量组与乙醇对照组比较P<0.05，P<0.01。(方差分析)

7.4本发明制成的制剂对受试动物肝脏病理变化的影响

由表18可见，乙醇对照组和各剂量组动物的肝脏病理改变以肝细胞脂肪变性为主，病变部位主要在肝小叶周围。乙醇对照组与空白对照组比较，有明显的肝脏损伤(肝细胞脂肪变性)，经统计学检验，差异有显著性意义(P<0.01)，表明乙醇肝损伤模型成立。高剂量组肝细胞脂肪变性与乙醇对照组比较，差异有显著性意义(P<0.05)，肝脏病理组织学检查结果阳性。

表18芊玖舒牌葛枳胶囊对受试动物肝脏病理组织学变化的影响

注：评分标准：0大致正常；Ⅰ病变细胞占整个视野的1/4；Ⅱ病变细胞占整个视野的1/2；Ⅲ病变细胞占整个视野的3/4；Ⅳ病变细胞占整个视野。

1.△△表示乙醇对照组与空白对照组比较P<0.05，P<0.01。(秩和检验)

2.*表示剂量组与乙醇对照组比较P<0.05，P<0.01。(秩和检验)

8、结论

(1)与乙醇对照组比较，受试样品降低各剂量组肝组织TG含量，实验结果阳性。

(2)与乙醇对照组比较，受试样品增加各剂量组肝组织GSH含量，实验结果阳性。

(3)与乙醇对照组比较，受试样品不能降低各剂量组肝组织MDA含量，实验结果阴性。

(4)与乙醇对照组比较，受试样品各剂量组肝细胞脂肪变性与乙醇对照组比较减轻，肝脏病理组织学检查结果阳性。

综上，本发明的保健品制剂可以有效的阻止乙醇导致肝脏GSH耗竭和TG含量的升高，减轻肝细胞脂肪变性，具有预防肝损伤的功能。

根据上述生化与病理检验结果，依据***《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》的判定标准，本发明的制剂对化学性肝损伤具有辅助保护作用。

(三)对比试验

处方1：申请号为200910102475.0的发明专利“一种防治酒精性肝病的中药保健品制剂及其制备方法”中公开的处方。

处方2：本发明处方，属于对处方1的改进处方。

具体的改进理由为：

1、由于葛花未列入国家药监局颁布的“食药两用名单”或“可用于食品的物品名单”中，故方中有葛花在申报中有法规的风险。考虑处方中去掉葛花，调整其他组方配比，以保证效果。

2、经预试验，去掉葛花后，经调整葛根及处方其他药物配比，经志愿者试食，两个处方解酒效果相当。

在3个月时间内20名志愿试食者中，同一人分别对两个处方样品进行试食，饮酒前半小时服4粒，自述在饮酒中和饮酒后其胃部不适、头晕、呕吐等症状均比不食用明显好，酒量有明显增加的，若酒后再服4粒，第二天人较清醒。而对两个处方感觉不到明显差异(见表19)。

表19志愿试食者自述解酒效果

比较	酒量	胃部不适	呕吐现象	头晕症状
					处方1	增加()	缓解	减少	轻或无
处方2	增加	舒适	减少	轻或无
					不服用	无增减	有不适感	呕吐	头晕

目前，本发明处方经广东省疾控中心试验表明，本品安全无毒，对化学性肝损伤具有辅助治疗功能。新处方已经国家保健食品审评中心审核通过，核发批件。

本发明的有益效果是：

(1)本发明配方遵循我国传统中医药理论，方中用葛根甘凉之性，走脾胃，能生津止渴，针对酒精湿热内蕴致伤津口渴，标本兼顾，以为君药。次用枳椇子甘、平，止渴、除烦，以解热盛伤津致口渴心烦，另有解酒毒之功治本以祛邪；大枣甘温之性，助气血化生以养肝血，又兼顾补脾助运以扶正；乌梅之酸味平性重在生津，治标为主；三药共助君药以为臣药。砂仁之辛温，助脾健运有利化湿，辛行中焦气机，针对胃脘胀满、口中甜腻等，是为佐药。甘草兼顾健脾补气、有调和诸药，以为佐使药。以上诸药共用，体现肝脾同治，气血兼顾，祛邪扶正的配方特点。

(2)申请人对原有的配比进行了改进，去除了葛花，调整了葛根等组分的处方量，经动物试验表明，新处方仍然具有良好的保护化学性肝损伤的作用，可以有效的防治酒精性肝病的发生。且属无毒级，作为保健食品使用安全。

(3)本发明是以金元时代《脾胃论》的葛花解酲汤及明代《普济方》中的“葛花丸”为基础方，结合贵州民间的习用配方，经加减而成。原方以汤剂或大蜜丸为用。为保持原方疗效，根据方中各药的有效成分及性质经试验我们选用了以水为溶剂提取方中6味药的药效成分。

现代研究表明方中葛根富含异黄酮、皂苷等有效成分；药理研究发现，葛根所含异黄酮类化合物以葛根素为代表，具有解酒保肝等作用，具有很大的开发利用价值。枳椇子的有效成分为皂苷和糖苷、生物碱、脂肪酸等，其水溶性部分具有较好治疗酒精中毒保肝的活性。其它几味药则含黄酮、挥发油等有效成分。本工艺综合考虑方中各味药物的有效成分特性和生产实际，选择了水为提取溶剂。比较起有机溶剂的使用，选用纯化水作提取溶剂更加安全、经济、环保、吸收快、生物利用度高等优点。

(4)在提取工艺参数考察中，我们采用正交设计对提取条件和工艺参数进行了研究。选择了功效成分：总黄酮和葛根素的提取率作为工艺考察指标，以提高产品工艺合理性和质量可控性。

(5)对于水提物易吸湿等缺点，在制粒过程中加入适量的淀粉，一方面可降低该制剂的吸湿性，又可增加颗粒流动性，改善和提高产品吸湿稳定性和装量差异合格率。

(6)本品可以通过现代生物提取纯化和制剂手段，制成胶囊剂，可降低服用量，提高生物利用度，剂型经典、方便服用、携带和储存，便于规模化生产、提高产品质量的可控性和稳定性。

附图说明

图1是本发明制剂颗粒吸湿曲线。

图2是本发明制剂颗粒临界相对湿度曲线。

图3是本发明实施例1中药保健品胶囊剂生产工艺流程图。

具体实施方式

实施例1一种保护化学性肝损伤的中药保健品胶囊剂的制备

制备所采用的生产环境及管理应符合GMP要求，制剂生产过程中粉碎、过筛、混合、制粒、干燥、整粒、总混、内包装等工艺过程均在符合GB17405-1998《保健食品良好生产规范》的生产洁净区条件下操作，其它步骤在一般生产区操作。具体操作为：

1、前处理：枳椇子、乌梅、大枣、砂仁拣选备用；葛根、甘草拣选、必要时切片，备用。各原辅料均应按相应标准检验合格后才能领用。

2、配料：按配方比例称取各原辅料，备用。称量前核对原辅料品名、批号、规格、数量；以电子称称定。

3、提取：葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草，第一次加8倍量水浸泡1h，煎煮1小时，第二次加6倍量水煎煮1h，合并煎液，滤过(不锈钢网，80目)。

4、浓缩：滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃，真空度-0.07MPa)的稠膏。

5、干燥：70℃，真空度-0.07MPa减压干燥6小时，粉碎，过65目筛。

6、混合：将干膏粉加入淀粉混合均匀。

7、制粒：95％乙醇湿法制粒，过24目筛。

8、整粒：湿颗粒60℃干燥4h，用24目筛整粒。

9、总混：颗粒在V型混合机中混合。

10、胶囊填充：颗粒用0号胶囊灌装，装量0.4g/粒。胶囊壳应符合《中国药典》2010年版二部第1204页项下的要求。

11、内包装：将检验合格的胶囊用口服固体药用高密度聚乙烯瓶包装，每瓶装32粒，口服固体药用高密度聚乙烯瓶应符合YBB00122002的规定。

12、外包装、检验、入库。(其生产工艺流程图见图3)

实施例2一种保护化学性肝损伤的中药保健品胶囊剂的制备

制备所采用的生产环境及管理应符合GMP要求，制剂生产过程中粉碎、过筛、混合、制粒、干燥、整粒、总混、内包装等工艺过程均在符合GB17405-1998《保健食品良好生产规范》的生产洁净区条件下操作，其它步骤在一般生产区操作。具体操作为：

1、前处理：枳椇子、乌梅、大枣、砂仁拣选备用；葛根、甘草拣选、必要时切片，备用。各原辅料均应按相应标准检验合格后才能领用。

2、配料：按配方比例称取各原辅料，备用。称量前核对原辅料品名、批号、规格、数量；以电子称称定。

3、提取：葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草，第一次加6倍量水浸泡1.5h，煎煮1.5小时，第二次加7倍量水煎煮1h，合并煎液，滤过(不锈钢网，80目)。

4、浓缩：滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃，真空度-0.07MPa)的稠膏。

5、干燥：70℃，真空度-0.07MPa减压干燥5小时，粉碎，过65目筛。

6、混合：将干膏粉加入淀粉混合均匀。

7、制粒：90％乙醇湿法制粒，过24目筛。

8、整粒：湿颗粒70℃干燥3h，用24目筛整粒。

9、总混：颗粒在V型混合机中混合。

10、胶囊填充：颗粒用0号胶囊灌装，装量0.4g/粒。胶囊壳应符合《中国药典》2010年版二部第1204页项下的要求。

11、内包装：将检验合格的胶囊用口服固体药用高密度聚乙烯瓶包装，每瓶装32粒，口服固体药用高密度聚乙烯瓶应符合YBB00122002的规定。

12、外包装、检验、入库。

实施例3一种保护化学性肝损伤的中药保健品胶囊剂的制备

制备所采用的生产环境及管理应符合GMP要求，制剂生产过程中粉碎、过筛、混合、制粒、干燥、整粒、总混、内包装等工艺过程均在符合GB17405-1998《保健食品良好生产规范》的生产洁净区条件下操作，其它步骤在一般生产区操作。具体操作为：

1、前处理：枳椇子、乌梅、大枣、砂仁拣选备用；葛根、甘草拣选、必要时切片，备用。各原辅料均应按相应标准检验合格后才能领用。

2、配料：按配方比例称取各原辅料，备用。称量前核对原辅料品名、批号、规格、数量；以电子称称定。

3、提取：葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草，第一次加10倍量水浸泡1h，煎煮1小时，第二次加5倍量水煎煮1h，合并煎液，滤过(不锈钢网，80目)。

4、浓缩：滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃，真空度-0.07MPa)的稠膏。

5、干燥：70℃，真空度-0.07MPa减压干燥7小时，粉碎，过65目筛。

6、混合：将干膏粉加入淀粉混合均匀。

7、制粒：98％乙醇湿法制粒，过24目筛。

8、整粒：湿颗粒70℃干燥5h，用24目筛整粒。

9、总混：颗粒在V型混合机中混合。

10、胶囊填充：颗粒用0号胶囊灌装，装量0.4g/粒。胶囊壳应符合《中国药典》2010年版二部第1204页项下的要求。

11、内包装：将检验合格的胶囊用口服固体药用高密度聚乙烯瓶包装，每瓶装32粒，口服固体药用高密度聚乙烯瓶应符合YBB00122002的规定。

12、外包装、检验、入库。

实施例4一种保护化学性肝损伤的中药保健品颗粒剂制备

制备所采用的生产环境及管理应符合GMP要求，制剂生产过程中粉碎、过筛、混合、制粒、干燥、内包装等工艺过程均在符合GB17405-1998《保健食品良好生产规范ke》的生产洁净区条件下操作，其它步骤在一般生产区操作。具体操作为：

1、前处理：枳椇子、乌梅、大枣、砂仁拣选备用；葛根、甘草拣选、必要时切片，备用。各原辅料均应按相应标准检验合格后才能领用。

2、配料：按配方比例称取各原辅料，备用。称量前核对原辅料品名、批号、规格、数量；以电子称称定。

3、提取：按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加6倍量水浸泡1h，煎煮2次，每次1.5h，合并煎液，滤过(不锈钢网，80目)。

4、浓缩：滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃，真空度-0.07MPa)的稠膏。

5、干燥：70℃，真空度-0.07MPa减压干燥6小时，过65目筛。

6、粉碎，混合：加入适量可溶性淀粉，制粒。

6、分装：袋装，10g/袋。

7、外包装、检验、入库。

实施例5一种保护化学性肝损伤的中药保健品口服液的制备

制备所采用的生产环境及管理应符合GMP要求，制剂生产过程中醇沉、浓缩、稀释、灌装、内包装等工艺过程均在符合GB17405-1998《保健食品良好生产规范》的生产洁净区条件下操作，其它步骤在一般生产区操作。具体操作为：

1、前处理：枳椇子、乌梅、大枣、砂仁拣选备用；葛根、甘草拣选、必要时切片，备用。各原辅料均应按相应标准检验合格后才能领用。

2、配料：按配方比例称取各原辅料，备用。称量前核对原辅料品名、批号、规格、数量；以电子称称定。

3、按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加10倍量水浸泡0.5h，煎煮3次，每次1h，合并煎液，滤过(不锈钢网，80目)。

4、浓缩：滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃，真空度-0.07MPa)的清膏。

5、醇沉：60％乙醇沉淀24小时，过滤，减压回收乙醇。

6、灌装：加水稀释至每个处方2500ml，灌装10ml/瓶。

7、外包装、检验、入库。

Claims (8)

1.一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，其特征在于，按照重量份计算，它是由葛根380～420份、枳椇子300～340份、大枣280～320份、乌梅280～320份、砂仁130～170份、甘草130～170份和淀粉60～100份制成的。

2.根据权利要求1所述的一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，其特征在于，按照重量份计算，它是由葛根400份、枳椇子320份、大枣300份、乌梅300份、砂仁150份、甘草150份和淀粉80份制成的。

3.根据权利要求1所述的一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，其特征在于，所述的中药保健品制剂为口服制剂。

4.根据权利要求1所述的一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂，其特征在于，所述的口服制剂为胶囊剂。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的保护化学性肝损伤的中药保健品制剂的制备方法，其特征在于，按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加6～10倍量水浸泡0.5～1.5h，煎煮2～3次，每次1～2h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至70℃、真空度-0.07MPa下相对密度为1.25～1.28的稠膏，按比例加入辅料淀粉混合均匀，制成各种不同的剂型，即得。

6.根据权利要求5所述的一种防治化学性肝损伤的中药保健品制剂的制备方法，其特征在于，按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加6～10倍量水浸泡1～2h，第一次煎煮1～1.5小时，第二次加5～7倍量水煎煮1～1.5h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至70℃、真空度-0.07MPa下相对密度为1.25～1.28的稠膏，继续在70℃、真空度-0.07MPa下减压干燥5～7小时，粉碎，过65目筛，制成干膏粉，然后再在干膏粉中按照比例加入辅料淀粉，混合均匀后，用90～98％乙醇过24目筛，制粒，60～80℃干燥3～5小时，过24目筛，整粒，总混，灌装胶囊，即得胶囊剂。

7.根据权利要求6所述的一种防治化学性肝损伤的中药保健品制剂的制备方法，其特征在于，按照比例称取葛根、枳椇子、乌梅、大枣、砂仁、甘草净药材，加8倍量水浸泡1h，第一次煎煮1小时，第二次加6倍量水煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至70℃、真空度-0.07MPa下相对密度为1.25～1.28的稠膏，继续在70℃、真空度-0.07MPa下减压干燥6小时，粉碎，过65目筛，制成干膏粉，然后再在干膏粉中按照比例加入辅料淀粉，混合均匀后，用95％乙醇过24目筛，制粒，60℃干燥4小时，过24目筛，整粒，总混，灌装胶囊，即得胶囊剂。

8.根据权利要求6或7所述的一种保护化学性肝损伤的中药保健品制剂的制备方法，其特征在于，所述滤过采用80目的不锈钢网进行。