CN105055399A - 一种用于糖尿病防治的天然产物组合及其应用 - Google Patents

Abstract

<b />本发明涉及一种用于糖尿病防治的天然产物组合。所述的组合包含葡萄糖苷酶抑制剂芒果苷，和一些能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物。本发明所述的组合在降低血糖、提高胰岛素敏感性等方面均有良好的作用，对糖尿病的防治具有积极的意义。

Description

一种用于糖尿病防治的天然产物组合及其应用

技术领域

本发明涉及医疗保健领域，特别涉及一种用于糖尿病防治的天然产物组合。

背景技术

糖尿病是一组由于胰岛素分泌缺陷和/或胰岛素作用障碍所致的以高血糖为特征的代谢性疾病。持续高血糖与长期代谢紊乱等可导致全身组织器官，特别是眼、肾、心血管及神经***的损害及其功能障碍和衰竭。据最新的统计数据显示：我国20岁以上的人群中糖尿病患病率为9.7%（9000万—1亿）。据世界卫生组织估计，2005到2015年间中国由于糖尿病及相关心血管疾病导致的经济损失达5577亿美元。

芒果苷(Mangiferin)，又称莞知母宁，是一种四羟基吡酮的碳糖苷，属双苯吡酮类黄酮类化合物。结构式如图1所示。

图1芒果苷的化学结构式

芒果苷主要作为一种治疗慢性支气管炎的天然产物使用，研究证实：芒果苷具有抗氧化、抗细菌、抗病毒、免疫调节及抗肿瘤等多方面的生理活性和药理作用。芒果苷可抑制α-糖苷酶活性，使葡萄糖在肌肉和脂肪细胞中的转换增加，大量葡萄糖进入组织，降低血糖，同时它也能使α-葡萄糖苷酶失活，葡萄糖基无法水解成游离葡萄糖进入血液。

一些能协同芒果苷产生作用、提升作用效果的天然产物包括亚麻木酚素、菜豆蛋白、绿原酸、1-脱氧野尻霉素和根皮苷中的一种或多种。它们的结构式如图2所示。

图2一些能协同芒果苷产生作用、提升作用效果的天然产物化学结构式

亚麻木酚素（FlaxLignans），又称开环异落叶松酚二葡萄糖苷，是存在于亚麻籽种皮中的一种生理活性物质。具有抗肿瘤生成作用、***及抗***效应、抑制芳香酶活性、抑制DNA和RNA合成、抗病毒、真菌等特性。

菜豆蛋白（Phaseolin）是来源于白芸豆种子的提取物，是一种α-淀粉酶抑制剂，可有效抑制淀粉分解，具有减肥的功效。

绿原酸（ChlorogenicAcid），又称咖啡单宁酸，是由咖啡酸和奎尼酸组成的羧酚酸。具有多种生物活性，如：心血管保护作用、抗氧化作用、抗紫外及抗辐射作用、抗诱变及抗癌作用、抗菌作用、抗病毒作用、降脂降糖作用、免疫调节作用等。

1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin），是一种强效α-葡萄糖苷酶抑制剂，具有抑制糖分转化、降低血液中糖含量的功效。

根皮苷（Phloridzin），又称根皮甙，是根皮素的葡萄糖苷，属于黄酮类中的二氢查尔酮类物质。具有降低血糖、改善记忆力、抗氧化、抗癌等多种重要的生物活性。

发明内容

本发明提供了一种新的天然产物组合，以及其在防治各种原因引起的糖尿病方面的用途。这种由葡萄糖苷酶抑制剂芒果苷，和一些能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物组合，可作为药物、功能食品、保健品、普通食品的主要成分用于糖尿病的防治。

本发明提供了将葡萄糖苷酶抑制剂芒果苷，和一些能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物配合用于糖尿病防治的方法，二者联用发挥了协同增效的作用，在防治糖尿病方面有明显的效果，为防治糖尿病提供了一种新的手段和选择。

本发明提供了葡萄糖苷酶抑制剂芒果苷，和一些能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物组合物，该组合物以芒果苷与能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物作为有效成分。具体地，本发明的组合物中芒果苷与能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物，以实际存在量计算，其重量比值在1:0.05——0.05:1之间，优选的在1:0.5——0.5:1之间，最优选的为1:0.8。

本发明的天然产物组分可以为市售产品，也可以由植物原料按常规提取制备而成的含量产品或人工合成替代品。

本发明的天然产物组合，可以作为药品、功能食品、保健品、普通食品的原料使用。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。同时通过实验例来进一步阐述发明所述组合物的有益效果，这些实验例包括本发明组合物用于对糖苷酶抑制效果的体外实验、餐后血糖稳定初步人群事实实验、对糖尿病所致血糖/心脏质量指数/左心室质量指数的影响实验、对糖尿病肾病大鼠的影响实验。

亚麻木酚素、菜豆蛋白、绿原酸、1-脱氧野尻霉素和根皮苷

实施例1：

取含量为95%的芒果苷10g与15g菜豆蛋白含量为50%的白芸豆提取物混合均匀，即得。

实施例2：

取含量为95%的芒果苷10g与8g含量为95%的亚麻木酚素混合均匀，即得。

实施例3：

取含量为95%的芒果苷10g与8g含量为95%的根皮苷混合均匀，即得。

实施例4：

取含量为95%的芒果苷10g与8g含量为95%的绿原酸混合均匀，即得。

实施例5：

取含量为95%的芒果苷10g与8g含量为95%的1-脱氧野尻霉素混合均匀，即得。

实施例6：

取含量为95%的芒果苷10g与1g含量为95%的1-脱氧野尻霉素、2g含量为95%的绿原酸、2g含量为95%的根皮苷、2g含量为95%的亚麻木酚素、1g含量为95%菜豆蛋白，混合均匀，即得。

实施例7：

取含量为95%的芒果苷10g与4g含量为95%的绿原酸、4g含量为95%菜豆蛋白，混合均匀，即得。

实施例8：

取含量为95%的芒果苷10g与8g含量为50%的绿原酸、8g含量为50%菜豆蛋白，混合均匀，即得。

实施例9：

取含量为50%的芒果苷20g与16g含量为50%菜豆蛋白，混合均匀，即得。

实施例10：

取含量为20%的芒果苷10g与8g含量为20%菜豆蛋白，混合均匀，即得。

实验例1：对糖苷酶抑制效果的体外实验

实验测定了芒果苷及实施例1—10对α-葡萄糖苷酶和大鼠小肠糖苷酶的抑制活性。整个检测在96孔板上进行，设3个组,每组4个复孔,分别为：对照组(缓冲液+底物+酶液)、空白对照组(缓冲液)、样品测定组(样品+底物+酶液)。操作方法为：预先往板孔里加入80μL样品溶液(用0.1mol·L^-1pH7.0磷酸缓冲液分别稀释成6个浓度梯度(20～1000g·ml^-1)，然后加入40μL的20×10^-3mol·L^-1底物(PNPG)，37℃保温5min，加入酶溶液40μL，37℃保温15min，加入160μL的0.2mol·L^-1Na₂CO³终止酶反应。最后在酶标仪上405nm处测定吸光度值，按下列方法计算抑制率，抑制率(%)=[(a-b)-(c-b)/(a-b)]×100%，并计算相应的IC₅₀。计量资料以x±s表示，应用t检验评价试验结果。实验结果及数据统计见表1。

表1：芒果苷及实施例1-10对芒果苷抑制活性

实验结果表明：芒果苷及按实施例1-10方法所制的样品对α-葡萄糖苷酶和大鼠小肠糖苷酶均有良好的抑制活性，且实施例1-10组均优于芒果苷组。

实验例2：餐后血糖稳定初步人群事实实验

随机选择糖尿病患者30例。患者均符合1997年WHO糖尿病2型诊断标准，年龄40至70岁，病程1至15年，病情稳定。在试验期间，不改变原有药物治疗，排除急性脑血管意外、急性心肌梗死、手术、感染、肿瘤等患者。所有入选对象于第1天早餐进食豆浆1碗（300毫升），茶叶蛋1个，稞麦面包2片（50克），热量约399.8kca；第2天给予同样饮食的同时使用按实施例6方法所制样品。分别于第1天和第2天测定早餐前空腹血糖，及进食早餐后30min、60min、90min、120min、180min的血糖值，结果见表2。

表230例糖尿病患者第1天和第2天进食前后血糖变化情况

注:“＊”为组内进食后Vs进食前,其中“＊”为P<0.05，“＊＊”为P<0.01；“Δ”为第1天和第2天进食后相同时间点比较，其中“Δ”为P<0.05，“ΔΔ”为P<0.01。

实验结果表明：30例患者在第1天及第2天进食后血糖均明显升高，且均在进食后60min时达到最高峰，在120min时已呈现明显下降。其中第1天60min时的血糖值约为当天空腹血糖的1.89倍，进食前后血糖波动范围为6.37mmol/L；第2天60min时的血糖值约为当天空腹血糖的1.51倍，进食前后血糖波动范围为3.59mmol/L。第1天餐后血糖与空腹血糖比较、餐后血糖与空腹血糖比值和进食前比较，第60min、第90min、第120min均呈显著差异，分别为P<0.01、P<0.01、P<0.05；第2天餐后血糖与空腹血糖比较、餐后血糖与空腹血糖比值和进食前比较，仅第60min、第90min时具有显著差异，均为P<0.05。第2天餐后血糖、餐后血糖与空腹血糖比值显著低于第1天相同时间点，P<0.05，表明实施例6所制样品可以有效控制糖尿病患者的血糖水平。

实施例3：对糖尿病所致血糖、心脏质量指数、左心室质量指数的影响实验

70只雄性大鼠，体重220-280g，适应性饲养1周后，随机选取60只大鼠一次性尾静脉注射链尿佐菌素（STZ）45mg/kg造成糖尿病模型，另外10只为空白对照组，只注射等体积的柠檬酸缓冲液。3天后，测大鼠空腹血糖，血糖≥16.7mmol/L为糖尿病模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、芒果苷组、实施例1—5组，每组各10只。空白对照组每天给予蒸馏8ml/kg；模型对照组每天给予蒸馏水8ml/kg；芒果苷给药组以芒果苷作为试验药物每天给以10mg/kg；按实施例1-5组方法所制样品作为试验药物每天给以20mg/kg。共给药2周。尾静脉取血，用血糖检测仪测定大鼠空腹血糖；普通天平称大鼠体重，电子天平称大鼠心脏质量、左心室质量，计算大鼠心脏质量指数和左心室质量指数，结果见表3。

表3各试验成分对大鼠血糖、心脏质量指数及左心室质量指数的影响（X±S）

实验结果表明：与正常组相比，模型组的血糖值、心脏质量指数、左心室质量指数明显上升；与糖尿病模型组相比，芒果苷组、实施例组血糖、心脏质量指数、左心室质量指数均有下降，且呈剂量依赖性，并且实施例组均优于芒果苷组和对照组，证明两者联合使用效果明显。

实施例4：对糖尿病肾病大鼠的影响实验

大鼠适应性饲养14天后，随机分为空白对照组（10只）与造模组。造模组禁食不禁水12h后，经腹腔一次注射链脲菌素（STZ）45mg/kg，三天后以尾静脉取血测空腹血糖大于16.7mmol/L为造模成功，空白对照组注射等体积的生理盐水作为对照。一周后血糖仍不低于此水平的60只糖尿病大鼠随机分为给药试验组与模型组并开始给药。试验共分六组，给药组每天灌胃给药一次。空白对照组每天给予蒸馏水8ml/kg；模型对照组每天给予蒸馏水8ml/kg；芒果苷给药组以芒果苷作为试验药物每天给以10mg/kg；协同给药组以协同药物作为试验药物每天给以8mg/kg；按实施例7-10组方法所制样品作为试验药物每天给分别给以20mg/kg，共给药4周。末次给药前24h所有大鼠用代谢笼收集尿液，保存于-18℃冰箱中，用于测定尿白蛋白；末次给药后1h，大鼠腹腔注射水合氯醛300mg/kg麻醉，腹静脉采血，分离血清，检测血肌酐、尿肌酐，计算得内生肌酐清除率（Ccr）。结果见表4。

表4各试验成分对糖尿病大鼠尿白蛋白、Ccr的影响（X±S）

实验结果表明：与正常组相比，模型组的尿白蛋白值明显上升，Ccr有所下降；与模型组相比，芒果苷组、对照组以及实施例组尿白蛋白显著下降，Ccr有所上升，并且实施例组均优于芒果苷组和对照组，证明两者联合使用效果明显。

Claims (12)

1.一种用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：组合中包含糖苷酶抑制剂芒果苷，以及一些能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物。

2.如权利1所述的可协同芒果苷产生作用、提升作用效果的天然产物，其特征在于：所述的天然产物包括亚麻木酚素、菜豆蛋白、绿原酸、1-脱氧野尻霉素和根皮苷中的一种或多种。

3.一种用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的天然产物组合中，以实际存在量计算，芒果苷与能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物的用量比值在1:0.05—0.05:1之间；优选的芒果苷与能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物的用量比值在1:0.5—0.5:1之间；最优选的芒果苷与能协同其产生作用、提升作用效果的天然产物的用量比值为1:0.8。

4.如权利1-3所述的用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的芒果苷来源于漆树科植物芒果树，或百合科植物知母，或五层龙属植物，或人工合成替代品。

5.如权利1-3所述的用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的亚麻木酚素来源于亚麻科植物亚麻，或人工合成替代品。

6.如权利1-3所述的用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的菜豆蛋白来源于豆科植物多花菜豆，或人工合成替代品。

7.如权利1-3所述的用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的绿原酸来源于忍冬科植物金银花、山银花，或茜草科植物小果咖啡、中果咖啡、大果咖啡，或杜仲科植物杜仲，或人工合成替代品。

8.如权利1-3所述的用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的1-脱氧野尻霉素来源于桑科植物、鸭跖草科植物、百合科植物，或人工合成替代品。

9.如权利1-3所述的用于糖尿病防治的天然产物组合，其特征在于：所述的根皮苷来源于壳斗科石柯属植物、蔷薇科苹果属植物，或人工合成替代品。

10.如权利1-3任一项所述的天然产物组合物，其特征在于：所述的用于糖尿病防治的天然产物组合为主要有效成分开发出的各种剂型，包括但不限于片剂、胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸、口崩片、缓释片、缓释胶囊、控释片、控释胶囊、水针、冻干粉针、无菌粉针、输液。

11.权利要求1-3任一项所述的天然产物组合物的用途，其特征在于：所述的用于糖尿病防治的天然产物组合为主要有效成分，制备成各种形态的药品、功能食品、保健品或食品。

12.权利要求1-3任一项所述的天然产物组合物的用途，其特征在于：所述的药物用于预防和治疗糖尿病。