CN105017249B

CN105017249B - 一种1,2,4-***[4,3-α]吡啶环的腙衍生物的制备方法

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Publication number: CN105017249B
Application number: CN201510332312.7A
Authority: CN
Inventors: 翟志文; 赵文; 杨明艳; 孙召慧; 刘幸海; 翁建全; 谭成侠
Original assignee: Zhejiang University of Technology ZJUT
Current assignee: Guangdong Gaohang Intellectual Property Operation Co ltd; Pizhou Qizhi Agricultural Development Co ltd
Priority date: 2015-06-16
Filing date: 2015-06-16
Publication date: 2016-11-23
Anticipated expiration: 2035-06-16
Also published as: CN105017249A

Abstract

本发明公开了一种含[1,2,4]***[4,3‑a]吡啶环的腙类化合物的制备方法。它在乙醇中，2,3‑二氯吡啶与水合肼微波制得化合物（II）；化合物（II）和草酸二乙酯通过微波反应合成化合物（III）；化合物（III）经重结晶纯化，与水合肼反应微波制备得到化合物（IV）；化合物（IV）与酮或醛以乙醇为溶剂，微波反应获得含***吡啶环的腙类化合物。本发明采用在微波条件下制备，其操作简单、对设备要求低，后处理方法，且产品收率高，纯度高，与其他方法相比，收率提高15%以下，而且该化合物为具有杀菌活性，特别是针对番茄细菌性斑点病、黄瓜枯萎病、番茄灰霉病等的防治具有良好的效果，为新农药的研发提供了基础。

Description

一种1,2,4-***[4,3-α]吡啶环的腙衍生物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种腙类化合物的制备方法，具体涉及一种微波条件下的[1,2,4]***[4,3-a]吡啶环的腙类化合物的制备方法。

背景技术

现如今，无论是在农药化学、医疗化学、高分子化学、配位化学，还是在工业化学领域含氮杂环化合物的合成都是一重要方向。一些报道显示稠杂环化合物通常具有单杂环的混合属性。吡啶环并***环被证明是合成新型活性化合物的一种好方法。其中1,2,4-***和吡啶类衍生物往往显示广泛和多样的活性。而酰腙作为一种Schiff碱由于其配位能力强，生物药理活性较好，能与生物体内许多微量元素反应，具有独特的生物活性和较强的的抑菌、抗病毒和抗肿瘤的活性，在新药研发中此类衍生物也具有非常重要的价值。此外，微波辅助合成方法在合成化学中已经成为一种加速反应时间、提高反应效率、提升反应安全环保性的重要手段。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明目的是提供一种微波的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法。

本发明的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物，其结构式如式（I）所示：

(I)

式（I）中：R为亚乙基，苯亚乙基，2-羟基-4-甲氧基苯亚甲基，2-羟基苯亚甲基，3-硝基苯亚甲基，5-氯-2-羟基苯亚甲基，5-溴-2-羟基苯亚甲基，1-(4-氟苯基)亚乙基，4-(二乙氨基)-2-羟基苯亚甲基，4-(二甲氨基)-2-羟基苯亚甲基，呋喃-2-基亚甲基，3,4,5-三甲氧基苯亚甲基，4-硝基苯亚甲基，2,4-二氯苯亚甲基，2-甲基苯亚甲基或4-（三氟甲基）苯亚甲基，R’为氢或者甲基。

本发明一种1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其包括如下步骤：

1）在乙醇为溶剂条件下，2,3-二氯吡啶与水合肼微波制得化合物（II）；

2）然后将化合物（II）和草酸二乙酯通过微波反应合成化合物（III）的粗产物；

3）将步骤2）化合物（III）的粗产物经重结晶纯化，而后与水合肼反应微波制备得到化合物（IV）；

4）最后，化合物（IV）与酮或醛以乙醇为溶剂，微波反应获得式（I）所示的含***吡啶环的腙类化合物；

制备过程如下所示：

。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤3）中重结果用的重结晶溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正己烷或乙醇中的一种或多种。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于：所述的2,3-二氯吡啶与水合肼的物质的量之比为1：1.0~5.0，优选为1：3。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤1）中的2,3-二氯吡啶，乙醇与水合肼的反应温度为70-100℃；所述的2,3-二氯吡啶、乙醇与水合肼的反应时间为10-100min。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于所述的反应温度为80℃，反应时间为30 min。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤2）中的化合物（II）与草酸二乙酯物质的量之比为1:1.0~1.5；化合物（II）与草酸二乙酯的反应温度为170-200℃；化合物（II）与草酸二乙酯的反应时间为10-100min。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于化合物（II）与草酸二乙酯物质的量之比为1:1.2，反应温度为190℃，反应时间为30 min。如权利要求6所述的，其特征在于所述的物质的量之比优选为1:3，反应温度优选为80℃，反应时间优选为30 min；

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤3）中的化合物（III）与水合肼物质的量之比为1:1~5，优选为1:3；化合物（III）与水合肼的反应温度为70-100℃；化合物（III）与水合肼的反应时间为10-100min，反应温度优选为80℃，反应时间优选为30 min。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤4）中化合物（IV）与醛或酮物质的量之比为1:1~5；化合物（IV）与醛或酮的反应温度为70-100℃；化合物（IV）与醛或酮的反应时间为1-100min。

所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于化合物（IV）与醛或酮物质的量之比为1:1.2，反应温度为80℃，反应时间为10 min。

与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一种含[1,2,4]***[4,3-a]吡啶环的腙类化合物的制备方法，该方法采用在微波条件下制备，其操作简单、对设备要求低，后处理方法，且产品收率高，纯度高，与其他方法相比，收率提高15%以上，而且该化合物具有杀菌活性，特别是针对番茄细菌性斑点病、黄瓜枯萎病、番茄灰霉病等的防治具有良好的效果，为新农药的研发提供了基础。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此，应明确的是，在本发明的权利要求所限定范围内，可进行各种变换和改动。

本发明的含[1,2,4]***[4,3-a]吡啶环的腙类化合物（I）可以如下方法合成：

将2,3-二氯吡啶(7.5 mmol)溶解在乙醇(300 mL)中，然后逐滴加入水合肼(22.5 mmol)，然后在CEM 单模聚焦微波反应器中，在80^oC下微波辐射30min，得到3-氯-2-肼吡啶式（II）。式（II）化合物(1 mmol)与草酸二乙酯(1.2mmol), 然后在CEM 单模聚焦微波反应器中，在190^oC下反应30min，反应完成后倒入碎冰中(40 mL)形成沉淀后过滤。粗产物在乙醇中重结晶得到式（III）化合物，式（III）化合物(10 mmol)与水合肼(30 mmol) 然后在CEM 单模聚焦微波反应器中，在80^oC下反应30min，得到式（IV）化合物。最后，将化合物（IV）和酮类或醛类化合物以1：1.2的摩尔比，然后在CEM 单模聚焦微波反应器中，在80^oC下反应10min，在乙醇做溶剂下反应制得式I。

实施例1~17，只是通过改变酮类和醛类化合物，其它合成条件不改变。

实施例1

8-氯-N'-(1-苯亚乙基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体, 产率 95%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 2.51(s, 3H, CH₃), 7.08(t, J=7.0Hz, 1H, Py), 7.46(s, 3H, Ar), 7.56(d, J=7.5Hz, 1H, Py), 7.94(s, 2H, Ar), 9.38(d, J=7.0Hz, 1H, Py), 10.35(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 314(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₅H₁₂ClN₅O (%), calculated: C, 57.42; H, 3.86; N, 22.32; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例2

8-氯-N'-亚乙基-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色晶体，产率93%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 1.95(s, 3H, CH₃), 7.24(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.82(d, J=7.3Hz, 1H, Py), 9.11(d, J=7.0Hz, 1H, Py), 10.03(s, 1H, CH), 11.02(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 238(M+1)⁺. Elemental anal. For C₉H₈ClN₅O (%), calculated: C, 45.49; H, 3.39; N, 29.47; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例3

8-氯-N'-(2-羟基-4-甲氧基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼，黄白色固体，产率92%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 3.79(s, 3H, OCH₃), 6.55(t, J=9.0Hz, 1H, Ar), 7.25(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.43(d, J=8.5Hz, 1H, Py), 7.83(d, J=7.3Hz, 1H, Ar), 8.74(s, 1H, Ar), 9.22(d, J=7.0Hz, 1H, Py), 11.49(s, 1H, CH), 11.97(s, 1H, NH), 13.01(s, 1H, OH). MS (ESI), m/z: 346(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₅H₁₂ClN₅O₃ (%), calculated: C, 52.11; H, 3.50; N, 20.26; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例4

8-氯-N'-(2-羟基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率 97%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 6.92-6.96(m, 2H, Ar), 7.23-7.33(m, 2H, Ar), 7.54(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.82(s, 1H, CH), 8.28(d, J=7.3Hz, 1H, Py), 9.21(d, J=7.0Hz, 1H, Py), 11.13 (s, 1H, NH), 13.10(s, 1H, OH). MS (ESI), m/z: 316(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₄H₁₀ClN₅O₂ (%), calculated: C, 53.26; H, 3.19; N, 22.18; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例5

8-氯-N'-(3-硝基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率 94%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 7.28(m, 1H, Ar), 7.79-7.85(m, 2H, Ar), 8.17(m, 1H, Py), 8.31(m, 1H, Py), 8.58(s, 1H, CH), 8.75(s, 1H, Ar), 9.21(s, 1H, Py), 13.09(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 345(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₄H₉ClN₆O₃ (%), calculated: C, 48.78; H, 2.63; N, 24.38; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例6

8-氯-N'-(5-氯-2-羟基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率92%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 6.98(d, J=8.7Hz, 1H, Ar), 7.28(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.35(d, J=8.5Hz, 1H, Py), 7.68(s, 1H, Ar), 7.93(d, J=7.4Hz, 1H, Ar), 8.82(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 11.05(s, 1H, NH), 13.16(s, 1H, OH). MS (ESI), m/z: 350(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₄H₉Cl₂N₅O₂ (%), calculated: C, 48.02; H, 2.59; Cl, 20.25; N, 20.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例7

8-氯- N'-(5-溴-2-羟基苯亚甲基) -[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄变色固体，产率 91%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 6.92(d, J=8.7Hz, 1H, Ar), 7.27(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.45(d, J=8.5Hz, 1H, Py), 7.80(s, 1H, Ar), 7.84(d, J=7.4Hz, 1H, Ar), 8.82(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 11.10(s, 1H, NH), 13.15(s, 1H, OH). MS (ESI), m/z: 350(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₄H₉Cl₂N₅O₂ (%), calculated: C, 48.02; H, 2.59; Cl, 20.25; N, 20.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例8

8-氯-N'-(1-(4-氟苯基)亚乙基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率 98%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 2.47(s, 3H, CH₃), 7.05-7.13(m, 3H, Ar and Py), 7.54(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.90-7.93(m, 2H, Ar), 9.35(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 10.31(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 332(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₅H₁₁ClFN₅O (%), calculated: C, 54.31; H, 3.34; N, 21.11; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例9

8-氯-N'-(4-(二乙氨基)-2-羟基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率90%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 1.18-1.25(m, 6H, 2CH₃), 3.36-3.42(m, 4H, 2CH₂), 6.62(m, 2H, Ar), 7.03-7.10(m, 2H, Py and Ar), 7.52(d, J=7.2Hz, 1H, Py), 8.25(s, 1H, Ar), 8.45(s, 1H, CH), 9.34(d, J=7.1Hz, 1H, Py), 10.22(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 387(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₈H₁₉ClN₆O₂ (%), calculated: C, 55.89; H, 4.95; N, 21.73; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例10

8-氯-N'-(4-(二甲氨基)-2-羟基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率92%, m.p.280-281C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 2.99(s, 6H, 2CH₃), 6.78(d, J=8.8Hz, 2H, Ar), 7.24(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.54(d, J=8.7Hz, 1H, Ar), 7.81(d, J=7.2Hz, 1H, Py), 8.49(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 12.50(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 343(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₆H₁₅ClN₆O (%), calculated: C, 56.06; H, 4.41; N, 24.52; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例11

8-氯-N'-(呋喃-2-基亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率90%, m.p.278-279C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 6.93(d, 2H, Furan), 7.07(t, J=6.9Hz, 1H, Py), 7.54-7.57(m, 2H, Py and Furan), 8.32(s, 1H, CH), 9.33(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 11.20(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 290(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₂H₈ClN₅O₂ (%), calculated: C, 49.75; H, 2.78; N, 24.18; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例12

8-氯-N'-(3,4,5-三甲氧基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率94%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 3.96(s, 9H, 3OCH₃), 7.04(s, 2H, Ar), 7.28(t, J=7.0Hz, 1H, Py), 7.84(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 8.55(s, 1H, CH), 9.21(d, J=7.2Hz, 1H, Py), 12.83(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 390(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₇H₁₆ClN₅O₄ (%), calculated: C, 52.38; H, 4.14; N, 17.97; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例13

8-氯-N'-(4-硝基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率96%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 7.27(t, J=7.0Hz, 1H, Py), 7.72(t, J=7.8Hz, 1H, Py), 7.84-7.87(m, 2H, Ar), 8.10-8.17(m, 2H, Ar), 9.08(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.8Hz, 1H, Py), 12.21(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 345(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₄H₉ClN₆O₃ (%), calculated: C, 48.78; H, 2.63; N, 24.38; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例14

8-氯-N'-(2,4-二氯苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率98%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 7.27(t, J=7.0Hz, 1H, Py), 7.53(d, J=8.3Hz, 1H, Ar), 7.74(s, 1H, Ar), 7.85(d, J=7.2Hz, 1H, Py), 8.03(d, J=8.5Hz, 1H, Ar), 9.05(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 12.13(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₇H₁₆ClN₅O₄ (%), calculated: C, 45.62; H, 2.19; N, 19.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例15

8-氯-N'-(2-甲基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率97%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 2.37(s, 3H, CH₃), 7.24-7.28(m, 1H, Ar), 7.37(t, J=7.5Hz, 1H, Py), 7.53(d, J=7.5Hz, 1H, Ar), 7.57(s, 1H, Ar), 7.73(d, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.84(d, J=7.2Hz, 1H, Py), 8.51(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 12.91(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₇H₁₆ClN₅O₄ (%), calculated: C, 45.62; H, 2.19; N, 19.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例16

8-氯-N'-(4-(三氟甲基)苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黄白色固体，产率90%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 7.28(t, J=7.2Hz, 1H, Py), 7.82-7.85(m, 3H, Ar and Py), 7.97(d, J=8.0Hz, 2H, Ar) 8.72(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 13.02(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₅H₉ClF₃N₅O (%), calculated: C, 48.99; H, 2.47; N, 19.05; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例17

8-氯-N'-(4-甲基苯亚甲基)-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼，黄白色固体，产率95%, m.p.>300C;¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz), δ: 2.36(s, 3H, CH₃), 6.68(t, J=7.5Hz, 1H, Py), 7.65(d, J=7.5Hz, 2H, Ar), 7.85(d, J=7.4Hz, 2H, Ar), 8.07(d, J=4.4Hz, 1H, Py), 8.51(s, 1H, CH), 9.21(d, J=6.9Hz, 1H, Py), 12.78(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369(M+1)⁺. Elemental anal. For C₁₇H₁₆ClN₅O₄ (%), calculated: C, 45.62; H, 2.19; N, 19.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22.71。

实施例18 杀菌活性测试

试验对象：番茄细菌性斑点病、黄瓜枯萎病、番茄灰霉病。

试验方法：采用盆栽试验法。分别将黄瓜种子和番茄种子经过50℃浸泡后，催芽后播种于育苗钵中，待生长至2片真叶供试验。

药剂准备：供试药，取药配成100 ppm，取实施例1-17种化合物各5 mg，加丙酮溶解后再加10 %吐温80，最后加水充分溶解。因100ppm为100 mg/L所以加水量=5 mg*1000/100 mg=50 ml，因有机溶剂最终含量≤1% 所以加丙酮的量=50 ml*1%=0.5 ml（溶解），因吐温最终含量为0.1% 所以50 ml水里应有吐温0.05 ml，即：应加10 %吐温0.05 ml。

对照药剂：3%中生菌素WP→800倍液0.01 g药+8 ml水；75%甲基托布津WP→1000倍液0.01 g药+15 ml水；50%嘧菌环胺水分散粒剂→1000倍液0.01 g药+15ml水。

施药方法：番茄细菌性斑点病和番茄灰霉病实验中，番茄苗长出两片复叶时，用喷壶将供试药剂与对照药剂均匀喷施在供试植株上。黄瓜枯萎病实验中，将黄瓜种子浸泡于各要处理2h后进行接种处理。

接种方法：

番茄细菌性斑点病采用菌悬液喷雾法接种：将培养好的番茄细菌性斑点病菌兑蒸馏水稀释成3×107cfu/ml菌悬液，用喷壶喷雾接种。接种后保湿培养。

番茄灰霉病采用打菌丝接种法接种：通过纱布过滤把液体培养基和菌块分开，用粉碎仪把带有少量液体的培养基的菌块打碎，再用过滤好的液体培养基与打碎的菌块混合配成一定浓度的溶液，并用分光光度计测定溶液透光率（λ=630 nm，OD=9.8）。

黄瓜枯萎病采用培根浸种法接种：将在PD培养基中培养好的黄瓜枯萎病菌用纱布过滤菌丝，调节孢子浓度到1×106 cfu/ml浸泡种子。

待清水充分发病后进行病情调查，并计算病情指数和防治效果。

杀菌活性测试试验结果如表1所示。

表 1 100ppm 下各化合物的杀菌活性（ % 防效）

从上表1 杀菌活性结果表明，与对照药剂中生菌素、甲基托布津和嘧菌环胺相比，本发明的制得的含[1,2,4]***[4,3-a]吡啶环的腙类化合物（I）对番茄细菌性斑点病、黄瓜枯萎病及番茄灰霉病都有优异的杀菌效果，其使用范围更广，药效更明显，适于推广应用。

Claims

1.一种1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其包括如下步骤：

3）将步骤2）化合物（III）的粗产物经重结晶纯化，而后与水合肼微波反应制备得到化合物（IV）；

4）最后，化合物（IV）与酮或醛以乙醇为溶剂，微波反应获得式（I）所示的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物；

制备过程如下所示：

，

式（I）中：R为2-羟基-4-甲氧基苯亚甲基，2-羟基苯亚甲基，3-硝基苯亚甲基，5-氯-2-羟基苯亚甲基，5-溴-2-羟基苯亚甲基，1-(4-氟苯基)亚乙基，4-(二乙氨基)-2-羟基苯亚甲基，4-(二甲氨基)-2-羟基苯亚甲基，呋喃-2-基亚甲基，3,4,5-三甲氧基苯亚甲基，4-硝基苯亚甲基，2,4-二氯苯亚甲基，2-甲基苯亚甲基或4-（三氟甲基）苯亚甲基，R’为氢或者甲基。

2.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤3）中重结晶用的重结晶溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正己烷或乙醇中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于：所述的2,3-二氯吡啶与水合肼的物质的量之比为1：1.0~5.0。

4.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤1）中的2,3-二氯吡啶，乙醇与水合肼的反应温度为70-100℃；所述的2,3-二氯吡啶、乙醇与水合肼的反应时间为10-100min。

5.根据权利要求4所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于所述的反应温度为80℃，反应时间为30 min。

6.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤2）中的化合物（II）与草酸二乙酯物质的量之比为1:1.0~1.5；化合物（II）与草酸二乙酯的反应温度为170-200℃；化合物（II）与草酸二乙酯的反应时间为10-100min。

7.根据权利要求6所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于化合物（II）与草酸二乙酯物质的量之比为1:1.2，反应温度为190℃，反应时间为30 min。

8.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤3）中的化合物（III）与水合肼物质的量之比为1:1~5；化合物（III）与水合肼的反应温度为70-100℃；化合物（III）与水合肼的反应时间为10-100min。

9.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤4）中化合物（IV）与醛或酮物质的量之比为1:1~5；化合物（IV）与醛或酮的反应温度为70-100℃；化合物（IV）与醛或酮的反应时间为1-100min。

10.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于化合物（IV）与醛或酮物质的量之比为1:1.2，反应温度为80℃，反应时间为10 min。

11.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于：所述的2,3-二氯吡啶与水合肼的物质的量之比为1：3。

12.根据权利要求1所述的1,2,4-***[4,3-a]吡啶环的腙衍生物的制备方法，其特征在于步骤3）中的化合物（III）与水合肼物质的量之比为1:3；化合物（III）与水合肼的反应温度为80℃；化合物（III）与水合肼的反应时间为30 min。