CN104757328A - 一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料及其生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料及其生产方法，微藻复合活体饵料是由以下微藻藻种经培养后按细胞个数比例混合的微藻藻液组成：牟氏角毛藻10％～15％、三角褐指藻15％～20％、球等鞭金藻10％～15％、雨生红球藻10％～15％、蛋白核小球藻30％～35％和巴夫藻15％～20％，且总密度为1.2×105～5.8×105个细胞/mL。生产方法如下：(1)利用光生物反应器对微藻藻种分别进行培养，获得培养密度为1.1×109～5.6×1010个细胞/mL的微藻藻液；(2)将微藻藻液按细胞个数比例配制成微藻复合活体饵料，获得总密度为1.2×105～5.8×105个细胞/mL的微藻复合活体饵料。本申请将多种微藻细胞制成复合活体饵料，营养均衡，可提高鱼类育苗的成活率，并降低其发病率。
Description
技术领域
本发明属于微藻生物技术领域，特别涉及一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料及其生产方法。
背景技术
微藻的营养成份丰富而且全面，是水产养殖动物苗种的初级食物。微藻蛋白质质量较高，尤其是必需氨基酸的含量与鱼粉相当甚至更优，如天冬氨酸和谷氨酸可高达7.1-12.9％，半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸和组氨酸的含量在0.4-3.2％之间，其他氨基酸含量在3.2-13.5％之间。多不饱和脂肪酸(PUFA)是水产动物幼体发育所必需的营养，而微藻是PUFA的原初生产者。许多微藻，尤其是硅藻和金藻中，含有丰富的二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)。微藻中还含有丰富的维生素，如VA、VC、VD、VE、VK、VB族(B1、B2、B3、B5、B6、B12)、生物素、β-胡萝卜素和叶酸等，种类齐全且含量丰富，与部分人类食品中的含量和鱼类饲料推荐值相当。微藻中还含有多种结构特殊的微藻甾醇，已经发现并确认的有10多种，如角毛藻中富含岩藻甾醇，骨条藻、海链藻和扁藻中富含菜油甾醇和24-亚甲基胆固醇，红胞藻和球等鞭金藻中富含菜子甾醇，巴夫藻中含有豆甾醇和β-谷甾醇。甾醇是动物细胞膜的重要组成部分，能起到调节动物体内激素水平，抑制胆固醇吸收，促进胆固醇异化等重要生理学作用。微藻中丰富而均衡的营养成分(蛋白、脂肪酸、碳水化合物)和各种生物活性物质(PUFA、维生素、甾醇)，可满足水产养殖动物在幼苗期的正常生长发育的营养需求。
针对水产养殖产业需求，国外已有相应的产品问世，有微藻浓缩液和微藻干粉不同类型，以单藻种或多藻种复配，制成高蛋白型、高PUFA型等产品，分别适用于对虾、贝类育苗，以及轮虫、卤虫营养加富。主要品牌有Aqua Fauna公司的Alga Mac系列产品，Reed Mariculture公司的Roti Grow、Roti Green、InstantAlgae等系列产品，涉及小球藻、微拟球藻、球等鞭金藻、巴夫藻、海链藻和扁藻等藻种。
国内绝大部分水产育苗企业，在育苗生产中都是自备微藻养殖设施，自行生产各类饵料用微藻。但是一般育苗场都普遍缺乏相应的专业技术力量，只能利用各自的藻池和天然水体粗放培养，在饵料微藻种质、生产技术和应用方法上都各自为政，导致微藻种质混乱、供应不稳定、营养成分不平衡、饵料效价低、缺乏多品种集约化生产应用技术；同时，受限于微藻高密度养殖、采收技术和浓缩液保藏技术的限制，国内几乎没有统一的、专业化的饵料微藻质量标准和集中供应点。由于供应不及时，常与育苗进度脱节，很难满足育苗中对鲜活饵料的供应量和多品种的需求，由此导致育苗成活率低、种苗抗病能力差、育苗成本高，对于后期养成非常不利。
我国水产养殖规模世界第一，对饵料微藻的需求量巨大。按法国学者Muller-Feuga的计算，每百万尾海水鱼、双壳贝和对虾育苗所需要的微藻生物量折算干重分别为60、14和0.65公斤。按此方法，以我国2010年这三种水产养殖动物投苗量为依据，就需要微藻16000吨干重，而目前我国商业化微藻的产量尚不足10000吨，商业化水产饵料微藻的产量微乎其微。因此，该市场的前景非常广阔，经济效益和社会效益非常显著。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、省时省力、成本低廉的用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料及其生产方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料，由以下微藻藻种经培养后按细胞个数比例混合的微藻藻液组成：牟氏角毛藻10％～15％、三角褐指藻15％～20％、球等鞭金藻10％～15％、雨生红球藻10％～15％、蛋白核小球藻30％～35％和巴夫藻15％～20％，且总密度为1.2×105～5.8×105个细胞/mL。
为解决上述技术问题，本发明采用的另一个技术方案如下：
一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料的生产方法，包括如下步骤：
(1)藻种选择
根据鱼类幼苗的营养需求，选择微藻藻种为牟氏角毛藻、三角褐指藻、球等鞭金藻、雨生红球藻、蛋白核小球藻和巴夫藻；
(2)微藻培养
利用光生物反应器对步骤(1)中选择的微藻藻种分别进行培养，获得密度为1.1×109～5.6×1010个细胞/mL的微藻藻液；
(3)微藻复合活体饵料的配制
将步骤(2)中获得的微藻藻液，按以下细胞个数比例百分数配制成总密度为1.2×105-5.8×105个细胞/mL的微藻复合活体饵料；
牟氏角毛藻10～15％、三角褐指藻15～20％、球等鞭金藻10～15％、雨生红球藻10～15％、蛋白核小球藻30～35％和巴夫藻15～20％；
(4)将步骤(3)中获得的微藻复合活体饵料按0.1～0.3L/m3养殖水体的投喂密度投喂鱼类幼苗。
上述步骤(1)所述的鱼类幼苗为河豚仔鱼。
上述步骤(2)所述的培养，其中所述的牟氏角毛藻、三角褐指藻、球等鞭金藻、雨生红球藻和巴夫藻的培养温度为23℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基分别为f/2、f/2、f/2、BBM和康维方培养基；所述的蛋白核小球藻的培养温度为28℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基为BG11培养基。
本发明的用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料及其生产方法的优点和有益效果是：
(1)将微藻细胞做成活体饵料不仅可以避免因干燥所造成的营养损失，而且可提高鱼类幼苗的成活率，降低其发病率。
(2)由多种微藻细胞制成的微藻复合活体饵料可拟补因单一微藻所造成的营养不均衡，提高鱼类幼苗的生长速率和品质。
(3)本发明所研制的微藻复合活体饵料具有成本低、纯度高、效果好等特点，且易于实现工业化放大生产。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例：
一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料的生产方法，包括如下步骤：
(1)根据河豚仔鱼的营养需求，选择牟氏角毛藻、三角褐指藻、球等鞭金藻、雨生红球藻、蛋白核小球藻和巴夫藻为微藻藻种。
(2)利用光生物反应器(ZL201220434882.9)对步骤(1)中选择的微藻藻种分别进行培养，获得微藻藻液。其中牟氏角毛藻、三角褐指藻、球等鞭金藻、雨生红球藻和巴夫藻的培养温度为23℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基分别为f/2、f/2、f/2、BBM和康维方培养基；蛋白核小球藻培养温度为28℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基为BG11培养基。经光生物反应器培养后，分别获得密度为1.1×109(牟氏角毛藻)、3.7×1010(三角褐指藻)、1.5×1010(球等鞭金藻)、7.8×109(雨生红球藻)、5.6×1010(蛋白核小球藻)、9.2×109(巴夫藻)个细胞/mL的微藻藻液。
(3)将步骤(2)中获得的微藻藻液，按微藻细胞个数比例配置成用于河豚仔鱼的、不同总密度的微藻复合活体饵料。
实施例1-12中微藻细胞个数比例具体参数如表1所示。为评价微藻复合活体饵料的有益效果，以河豚仔鱼的成活率(％)和发病率(％)为指标，评价微藻复合活体饵料的效果如表1所示。
表1
对比例1：
(1)选择三角褐指藻为微藻藻种。
(2)利用光生物反应器(ZL201220434882.9)对步骤(1)中选择的微藻藻种进行培养，获得微藻藻液。三角褐指藻的培养温度为23℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基为f/2培养基。经光生物反应器培养后，获得培养密度为3.5×1010个细胞/mL的微藻藻液。
(3)将步骤(2)中获得的微藻藻液，配制成用于河豚仔鱼的、总密度为3.5×105个细胞/mL的微藻活体饵料。
(4)将步骤(3)中获得的微藻活体饵料按0.3L/m3水体投喂河豚仔鱼。
(5)经评价，利用本产品所喂养的河豚仔鱼30d，成活率为84.9％，发病率为23.3％。
对比例2：
(1)选择蛋白核小球藻为微藻藻种。
(2)利用光生物反应器(ZL201220434882.9)对步骤(1)中选择的微藻藻种进行培养，获得微藻藻液。蛋白核小球藻的培养温度为28℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基为BG11培养基。经光生物反应器培养，获得培养密度为5.2×1010个细胞/mL的微藻藻液。
(3)将步骤(2)中获得的微藻藻液，配制成用于河豚仔鱼的、总密度为5.2×105个细胞/mL的微藻活体饵料。
(4)将步骤(3)中获得的微藻活体饵料按0.2L/m3水体投喂河豚仔鱼。
(5)经评价，利用本产品所喂养的河豚仔鱼30d，成活率为81.4％，发病率为25.9％。
综上可见，采用本发明生产的由多种微藻细胞制成的微藻复合活体饵料比单独采用一种微藻细胞做活体饵料，更能提高鱼类幼苗的成活率，并降低其发病率。而且不同微藻细胞之间的混合比例对鱼类成活率及发病率等评价指标有较大影响，这主要是由于不同微藻细胞所富含的营养物质有差别，如硅藻类富含脂肪酸、小球藻富含蛋白质等，且在鱼类幼苗的不同生长阶段所需要的营养物质也会有所不同，因此需针对不同鱼类幼苗选择适合的微藻复合活体饵料。
Claims (4)
1.一种用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料，其特征在于，由以下微藻藻种经培养后按细胞个数比例混合的微藻藻液组成：牟氏角毛藻10％～15％、三角褐指藻15％～20％、球等鞭金藻10％～15％、雨生红球藻10％～15％、蛋白核小球藻30％～35％和巴夫藻15％～20％，且总密度为1.2×105～5.8×105个细胞/mL。
2.一种如权利要求1所述的用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)藻种选择
根据鱼类幼苗的营养需求，选择微藻藻种为牟氏角毛藻、三角褐指藻、球等鞭金藻、雨生红球藻、蛋白核小球藻和巴夫藻；
(2)微藻培养
利用光生物反应器对步骤(1)中选择的微藻藻种分别进行培养，获得密度为1.1×109～5.6×1010个细胞/mL的微藻藻液；
(3)微藻复合活体饵料的配制
将步骤(2)中获得的微藻藻液，按以下细胞个数比例百分数配制成总密度为1.2×105～5.8×105个细胞/mL的微藻复合活体饵料；
牟氏角毛藻10～15％、三角褐指藻15～20％、球等鞭金藻10～15％、雨生红球藻10～15％、蛋白核小球藻30～35％和巴夫藻15～20％；
(4)将步骤(3)中获得的微藻复合活体饵料按0.1～0.3L/m3养殖水体的投喂密度投喂鱼类幼苗。
3.根据权利要求2所述的用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料的生产方法，其特征在于，步骤(1)所述的鱼类幼苗为河豚仔鱼。
4.根据权利要求2所述的用于鱼类育苗的微藻复合活体饵料的生产方法，其特征在于，步骤(2)所述的培养，其中所述的牟氏角毛藻、三角褐指藻、球等鞭金藻、雨生红球藻和巴夫藻的培养温度均为23℃，接种密度均为1×104个细胞/mL，培养基分别为f/2、f/2、f/2、BBM和康维方培养基；所述的蛋白核小球藻的培养温度为28℃，接种密度为1×104个细胞/mL，培养基为BG11培养基。
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