CN104662022A - 治疗实体瘤的手段和方法 - Google Patents

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Abstract

在通式I的细胞毒性化合物中，R是由C1-C4直链或支链烷基取代的亚甲基、甲基或H，R1选自下组：H、C1-C4直链或支链烷基、甲氧基、甲氧基取代有1至3个氟、卤素；R2是H或者C1-C4直链或支链烷基；X是CH或N；Y是CH或N。

Description

治疗实体瘤的手段和方法
技术领域
本发明涉及在癌症患者中治疗实体癌肿瘤，尤其是弥散性实体癌肿瘤的手段和相应的方法。
发明背景
需要为患弥散性癌症的患者开发新型且有效的抗癌药物。用于实体瘤的药物开发与归因于3-D肿瘤组织中复杂生物物理和代谢情况的特定问题相关联，所述3-D肿瘤组织可能难以在实验性体外***中模拟。已知缺氧和营养物的受限扩散导致静息和对传统抗癌剂及放射治疗的抗性。此外，抗癌药物必需能够穿透进入肿瘤实质，以有毒浓度接触癌细胞。一些临床应用于治疗实体瘤的药物显示进入3-D肿瘤块的穿透性较差，这也许是其功效有限的原因之一。多细胞球体(MCS)模拟人实体瘤优于2-D单层培养物，并且因此比单层培养物更适用于筛选在实体瘤上有活性的药物。
细胞死亡通常细分为三种细胞死亡类型：凋亡(I型)、自噬性细胞死亡(II型)和坏死(III型)。凋亡由胱冬酶活化介导。自噬是一种用于长寿细胞蛋白和受损细胞器降解的进化上保守机制。自噬的主要特征是自噬体的形成。自噬体的形成需要III类磷脂酰基醇-3激酶的活化，并且还依赖两个泛素样缀合***(Atg-Atg12和Atg8)。自噬在营养缺失情况中保护细胞，而当自噬受到抑制时细胞经历凋亡。在胱冬酶抑制状况下的细胞死亡过程中也观察到自噬的形态学特征。
发明目的
本发明的首要目的是提供实体癌肿瘤的有效治疗手段。
本发明的另一个目的是提供采用该手段的治疗方法。
本发明的其他目的将通过以下发明内容、以附图形式说明的多个优选实施方式和所附权利要求书而显见。
发明内容
本发明公开了一种有效治疗实体癌肿瘤的手段。该手段是通式I的化合物，其中R是由C1-C4直链或支链烷基取代的亚甲基或甲基或H，R1选自下组：H、C1-C4直链或支链烷基、甲氧基、甲氧基取代有1至3个氟、卤素；R2是H或C1-C4直链或支链烷基；X是CH或N；Y是CH或N；如果R1是H或C1-C4烷基，R2是H或C1-C4直链或支链烷基，X是N且Y是N，则R不包括H或甲基。
R2优选是H。本发明的化合物的优选实施方式包括R＝H，R1＝6-CH3，R2＝H，X和Y＝CH；R＝CH2C(CH3)3，R1＝6-CH3，R2＝H，X和Y＝N；R＝CH2CH3，R1＝6-CH3，R2＝H，X和Y＝N。
根据本发明的优选的方面，该通式的化合物还可在未被R1取代的单-、双-或三-氮杂咔唑基的6、7、8、9位之一上被C1-C4直链或支链烷基取代。
本发明的化合物包含其任何药学上可接受的盐、盐/溶剂复合物、金属复合物(排除带任意Fe2+、Fe3+、Co2+的金属复合物)、溶剂复合物和前药。
本发明的化合物可以其在连接1-吡啶-2-基部分和亚氨基芴-2-基部分的N＝C键处为顺式/反式异构体的混合物存在。由于异构化率在生理条件下是相当的，异构体被假定对身体发挥相似或基本相同的药理作用。
本发明的化合物是细胞穿透性铁螯合剂。尽管不希望受理论约束，发明人相信本发明化合物的抗癌作用是基于其铁螯合性质。
本发明的化合物在数种体外和体内模型中显示出细胞毒性作用。该细胞毒性作用存在为线粒体呼吸的降低。已知结肠癌组织含有的葡萄糖浓度为正常组织的约10％，并且有提出癌组织依赖通过三羧酸循环的需氧呼吸(Hirayama A等，Cancer Res 69(2009)4918-4925)。在体外HCT116结肠癌多细胞球体模型中，10μM/L浓度的本发明的化合物产生的细胞死亡对应于50％或更低的存活指数(SI)。在这种应用中，在10μM/L的化学化合物浓度下50％或更低的细胞存活的限制被认为是显著细胞毒性作用并如此界定。对于球体的细胞毒性活性表明，本发明的化合物对增殖的和静息的细胞群都有影响。虽然在常氧条件下在高葡萄糖培养基中本发明的化合物也对单层HCT116结肠癌细胞培养物的细胞增殖有影响，但是葡萄糖饥饿提高了抗增殖活性。
本发明的化合物诱导线粒体功能障碍并且增加对葡萄糖的依赖性。葡萄糖的消耗增加了癌细胞对本发明的化合物的敏感性，导致提高的细胞毒性和凋亡。
本发明公开了本发明的化合物在治疗人实体癌肿瘤中的用途。根据优选的方面，本发明的细胞穿透性铁螯合剂优选与自噬抑制剂联用用于这种治疗。
本发明的另一个优选方面公开了包含本发明的铁螯合剂和药物运载体的药物组合物。本发明的药物组合物可通过任何合适的途径(例如经口或胃肠外)给予。合适的运载体包含，例如二甲亚砜和水性介质，诸如包含二甲亚砜和水的混合物。优选的流体运载体是能够溶解本发明化合物的那些。其它优选的流体运载体，尤其是水性运载体，是以良好分散形式(例如尺寸为10μm或更小的微粒形式)包含本发明化合物的那些。
本发明的另一个优选方面公开了一种治疗人内实体癌的方法，该方法包括给予此人药理学上有效剂量的本发明的铁螯合剂或其药学上可接受的盐、前药复合物。所述药理学上有效剂量优选由本发明药物组合物包含着给予。
本发明的另一个优选方面公开了一种治疗人实体癌的方法，该方法包括使癌症处于葡萄糖饥饿并给予此人药理学上有效剂量的本发明的铁螯合剂或其药学上可接受的盐、前药复合物。
本发明的化合物诱导体外和体内的自噬反应。在此，优选与自噬抑制剂联合给予本发明的化合物。优选的自噬抑制剂是氯喹。就该方面而言，公开了自噬抑制剂和细胞穿透性铁螯合剂联合治疗实体瘤的应用。所述“联合”应理解为所述自噬抑制剂和所述细胞穿透性铁螯合剂的给予有紧密时间关系例如在同一时间或在至多一天和甚至一周的期间内给予。所述自噬抑制剂和所述细胞穿透性铁螯合剂可以包含它们的药物组合物的形式或以分开的药物组合物的形式给予。若以药物组合物形式给予，所述组合包含药学上可接受的运载体。
在所述自噬抑制剂和所述细胞穿透性铁螯合剂的组合中，优选所述自噬抑制剂选自氯喹。其它优选的自噬抑制剂包括羟氯喹、3-甲基腺嘌呤、腺苷、巴佛洛霉素A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷、渥曼青霉素和长春碱。
用于本发明应用的其它自噬抑制剂是WO 2011/011522 A2中公开的通式II的那些，其通过引用纳入本文。
本发明还公开了一种治疗受癌症影响的人内实体瘤的方法，所述方法包括以紧密时间关系如在同一时间或在一天或一周内给予此人药理学上有效剂量的本发明细胞穿透性铁螯合剂和自噬抑制剂的组合。可通过任何合适途径给予，例如胃肠外或经口地，以分开的药物组合形式，其一包含所述自噬抑制剂和药学上可接受的运载体(例如，二甲亚砜)，或者在同时给予时采用单一药物组合形式，所述药物组合包含药学上可接受的运载体(例如，二甲亚砜)。
本发明的另一个优选方面公开了一种治疗人内实体癌的方法，所述方法包括同时或以紧密时间关系(例如一小时或一天或一周内)联合给予此人药理学上有效剂量的自噬抑制剂和细胞穿透性铁螯合剂。优选以上述一种或多种药物组合物形式且通过胃肠外或经口或其它合适的途径给予。
接下来通过参照多种优选实施方式来更详细描述本发明，所述实施方式由含有多个图像的图说明。
附图简要说明
图1a-11显示了本发明的化合物在HCT116结肠癌细胞模型中的细胞毒性；
图2a-2h显示了本发明不包含但具有相似结构的化合物没有相当的细胞毒性。
具体实施方式
材料与方法
本发明化合物
制备了本发明的通式I的示例性化合物(表1)。
表1.本发明示例性化合物
表2显示了本发明不包含的通式II的数个新化合物。它们的细胞毒性低或基本没有。制备它们用于比较。
表2.本发明不包含的示例性化合物
一般方法
所用全部溶剂为HPLC级或更高级别。通过在使用前至少24小时向溶剂加入过量的分子筛来建立无水环境。采用安捷伦(Agilent)质谱仪正电离模式获得低分辨率电喷雾电离质谱。在Merck硅胶60(230-400目)上进行快速色谱。用安捷伦质谱仪：安捷伦1100***得到分析LC/MS数据。(a)ACE C8柱，(50x 3.0mm，5μM)；梯度：3分钟内，水/0.1％TFA中10-97％乙腈，1.0ml/分钟。(b)：Xbridge C18柱，(3.5μm，50x 3.0mm)；梯度：3分钟内10mM NH4HCO3(pH 10)中10％至97％乙腈，1mL/分钟。化学结构的名称采用Marvin Skech 5.2.6(ChemAxon)的手段来确定。
实施例1.本发明化合物1-8的合成所用5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基-肼中间体的一般制备过程
硫代氨基脲(50mg，0.11mmol)、相应的靛红(0.12mmol)和K2CO3(23.4mg，0.17mmol)溶于水(1mL)中并回流1.5小时。然后将温度调整到室温。使用HOAc对混合物进行酸化并滤去沉淀物。对母液进行浓缩。在以下步骤中使用粗2H，3H，5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-硫酮衍生物而不需要纯化。
对相应的2H，3H，5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-硫酮衍生物(0.1mmol)和水合肼(10mL)的混合物回流4小时。冷却形成沉淀物并滤出。用THF和二***洗涤沉淀物，并在室温下干燥。使用所得的5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基肼中间体而不需要进一步纯化。
实施例2.本发明的化合物1-8的一般制备过程
相应的5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基肼中间体(0.1mmol)悬浮在含5％乙酸的水(1mL)中并加热至50℃。向温悬浮液中加入2-乙酰吡啶(0.50mL)并将反应保持在50℃下持续3小时。过滤反应混合物。固体产物用乙醇彻底洗涤并在室温下干燥。
2-[(1E)-1-(2-{7-氯-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物1)。纯度：98％(主要异构体)；LC/MS：rt 1.7760(主要异构体)，1.945(次要异构体)，MS ESI+/MS ESI+ms/z 338[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{6-氯-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物2)。纯度：96％(主要异构体)；LC/MS：rt 1.667(主要异构体)，1.868(次要异构体)，MS ESI+/MS ESI+ms/z 338[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{8-甲氧基-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物3)。纯度：99％；LC/MS：rt 1.661(主要异构体)；MS ESI+/MSESI+ms/z 334[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{8-(三氟甲氧基)-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物4)。纯度：99％(主要异构体)；LC/MS：rt 1.996(主要异构体)，2.166(次要异构体)；MS ESI+/MS ESI+ms/z 388[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{6，8-二甲基-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物5)。纯度：92％(主要异构体)；LC/MS：rt 2.016(主要异构体)，1.878(次要异构体)；MS ESI+/MS ESI+ms/z 332[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{9-溴-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物6)。纯度：99％(主要异构体)；LC/MS：rt 1.744(主要异构体)，1.927(次要异构体)；MS ESI+/MS ESI+ms/z 383/385[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{8-氯-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物7)。纯度：98％；LC/MS：rt 1.800；MS ESI+/MS ESI+ms/z 338/340[M+H]+。
2-[(1E)-1-(2-{9-甲基-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物8)。纯度：92％(主要异构体)；LC/MS：rt 1.790(主要异构体)，1.941(次要异构体)；MS ESI+/MS ESI+ms/z 318[M+H]+。
实施例3.本发明的化合物9和10的制备过程
向含5％乙酸的水(0.67mL)中的3-肼基-6-甲基-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚(20mg，0.09mmol)的搅拌悬浮液中加入相应的酮(0.47mmol)并且将反应在50℃下搅拌以下的具体时间。在冷却之后，加入水(1mL)，滤出沉淀物并且用1∶1和2∶1的水/乙腈或二***洗涤。
2-[(1E)-1-(2-{6-甲基-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-基}肼-1-亚基)丙基]吡啶(化合物9)。反应混合物在50℃下搅拌1小时15分钟。沉淀物形成并用二***洗涤以得到99％纯度的标题化合物，方法B，LC/MS：rt 1.851(主要异构体)，1.982(次要异构体)；MS ESI+/MS ESI+ms/z 332[M+H]+。
2-(3，3-二甲基-N-{6-甲基-5H-[1，2，4]三嗪并[5，6-b]吲哚-3-}丁烷腙基)吡啶(化合物10)。反应在50℃下搅拌2小时，然后在60℃下搅拌过夜，并最终在80℃下搅拌3天。滤出固体并且用二***和乙腈洗涤以得到90％纯度的标题化合物，方法B，LC/MS：rt 2.25，MS ESI+/MS ESI+ms/z 374[M+H]+。
实施例4.制备2-和3-[(1Z)-1-(2-{8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚-2-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶的过程
2，6-二氯-3-(3-甲基-2-硝基苯基)吡啶。在微波管中，270mg的2-硝基-3-溴-甲苯(1.25mmol)和240mg的2，6-二氯-吡啶-3-硼酸(240mg)溶解在4ml的溶剂混合物(1，4-二噁烷/H2O，4∶1)中，向其中加入碳酸钾(345mg)，之后加入28mg的四Pd(PPh3)4(0.025mmol)，用氮气脱气5分钟，在100℃下的微波反应器中持续15分钟，并蒸发以去除大部分的溶剂。残留物溶解在50ml的乙酸乙酯中，用3x 10ml的盐水洗涤，并用MgSO4干燥。在蒸发溶剂之后，通过快速色谱(庚烷/乙酸乙酯，85∶15)纯化残留物。得到白色粉末状的纯标题化合物(99mg，28％)。LC-MS：rt 1.803；MS ESI+/MS ESI+ms/z 283[M+H]+。
2-(2，6-二氯吡啶-3-基)-6-甲基苯胺。在玻璃烧瓶中，282mg的2，6-二氯-3-(3-甲基-2-硝基苯基)吡啶(1mmol)溶解在20ml的甲醇中，然后加入325mg的锌粉(5mmol)和570μl的乙酸(10mmol)。该混合物在室温下搅拌30分钟，然后在75℃下搅拌1小时。在完成反应之后，过滤反应混合物以取出沉淀物，并且用20ml的甲醇洗涤沉淀物，然后蒸发以去除主体溶剂。残留物溶解在乙酸乙酯和盐水中，并且通过色谱纯化(庚烷/乙酸乙酯，90∶10)。LC-MS：rt 1.734；MS ESI+/MS ESI+ms/z 253[M+H]+。
2-氯-8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚。2-(2，6-二氯吡啶-3-基)-6-甲基苯胺(154mg，0.61mmol)、59mg的碘酸铜、70mg的L-脯氨酸(0.61mmol)和398mg的Cs2CO3(1.22mmol)与8ml的DMF混合，在90℃下加热1小时，然后在100℃下加热5小时，用乙酸乙酯稀释，并用盐水洗涤以去除大部分的DMF和碱。通过快速色谱(庚烷/乙酸乙酯90∶10)纯化残留物，产量49mg。LC-MS：rt 1.730；MS ESI+/MS ESI+ms/z 217[M+H]+。
2-肼基-8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚。2-氯-8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚(33mg，0.15mmol)悬浮在0.8ml的水合肼中，并在85℃下搅拌过周末。起始产物已被完全转化。冷却混合物以形成沉淀物。滤出粗产物以产生21mg的粗标题化合物，其用于下一步骤而不需要纯化。LC-MS：rt1.320；MS ESI+/MS ESI+ms/z 213[M+H]+。
3-[(1Z)-1-(2-{8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚-2-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物19)。2-肼基-8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚(10mg，0.05mmol)悬浮在包含27μl 3-乙酰吡啶的0.5ml 5％乙酸中并在室温下搅拌30分钟，然后在50℃下再搅拌30分钟。在冷却至室温后，收集已经形成的沉淀物并通过制备型HPLC纯化(C18柱，10mM NH4HCO3(pH 10)中45-85％甲醇梯度，25ml/分钟)。得到90％纯度的标题化合物(1mg)。LC-MS：A，rt1.674，B rt 2.314；MS ESI+/MS ESI+ms/z 316[M+H]+。
2-[(1Z)-1-(2-{8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚-2-基}肼-1-亚基)乙基]吡啶(化合物11)。2-肼基-8-甲基-8H，8aH，9H-吡啶并[2，3-b]吲哚(10mg，0.05mmol)悬浮在0.5ml 5％乙酸和28μl 2-乙酰吡啶的混合物中并在室温下搅拌30分钟。温度升高50℃并将混合物再搅拌30分钟，然后冷却至室温。形成沉淀，其通过制备型HPLC(C18柱，10mM NH4HCO3(pH 10)中45-85％甲醇梯度，25ml/分钟)纯化。得到95％纯度的标题化合物(1mg)。LC-MS：A，rt 1.805，B，rt 2.608；MS ESI+/MS ESI+ms/z 316[M+H]+。
缩写：ACN，乙腈；DCM，二氯甲烷；DMF，二甲基甲酰胺；rt，停留时间；RT，室温；LC，液相色谱；SI，存活指数
实施例5.细胞培养，MCS生成和体外测定细胞毒性
HCT116结肠癌细胞维持于37℃5％CO2下的McCoy′s 5A改良培养基/10％胎牛血清中。使用Herrmann R等，Screening for compounds that induceapoptosis of cancer cells grown as multicellular spheroids(筛选诱导生长成多细胞球体的癌细胞的凋亡的化合物).J Biomol Screen 2008；13：1-8的改良方法制备MCS。含10,000个细胞的细胞悬液(200μl)加至聚-HEMA包被的96孔板的各孔中。然后这些孔通过另添加170μl培养基来过载以获得凸表面弯曲。在各板的角上置放塑料土隔片(3mm)以防止盖子接触培养基。然后，倒置所述板以使细胞沉积在液/气界面，并温和振荡孵育。孵育24小时后，使所述板归为正常。首先通过抽吸移出过量培养基，然后移出塑料土隔片。所述板在药物处理前孵育4天。药物处理24小时后，向所述培养基添加NP40至0.1％的浓度以从MCS提取经胱冬酶切割的K18并包括从死亡细胞释放到培养基的物质。采用25mL培养基/提取物，使用M30 CytoDeath ELISA试验(ELISA(M等，A novel high-through-put assay forscreening of pro-apoptotic drugs(用于筛选促凋亡药物的新型高通量试验).Invest New Drugs 2002；20：253-9)的变体，经开发以供体外应用(瑞典布罗马的Peviva公司(Peviva AB))测定经胱冬酶切割的角蛋白-18(K18-Asp396)。通过Friedrich等，A reliable tool to determine cell viability in complex 3-d culture：the acidphosphatase assay(测定复杂3-d培养中细胞活力的可靠工具：酸性磷酸酶试验).J Biomol Screen 2007；12：92537所述的酸性磷酸酶(APH)方法进行活力测量。减去背景活性。在HCT116结肠癌细胞模型中测定本发明的化合物(图1a-11)和本发明不包含的结构相关化合物(图2a-2h)的细胞毒性并且表示为细胞取决于化合物浓度的存活指数。
实施例6.本发明的化合物显示出体内细胞毒性
将本发明的化合物(化合物11)静脉内注射到NMRI小鼠中。在16mg/kg的最大耐受剂量(MTD)下，观察到约100μM的初始血浆浓度，＞10-倍于体外肿瘤细胞系和初期患者结直肠癌细胞的IC50。该化合物快速分布并且最终以4-5小时的半衰期消除。本发明的化合物的全身毒性低。高至4.5mg/kg的剂量没有在动物的血浆参数(如肝ALT、血糖和总蛋白)中产生值得关注的变化，它们也没有阻止动物体重增加。
实施例7.本发明的化合物是细胞穿透性铁螯合剂
为了测试本发明的化合物的细胞毒性是否取决于铁消耗，先向HCT116细胞中加入氯化铁后再加入本发明的化合物。发现氯化铁完全终止了本发明的化合物对表达野生型p53的HCT116细胞和p53基因已破坏的HCT116细胞的影响。
实施例8.药物组合物
本发明的化合物溶解于包含至少2摩尔当量盐酸的有机溶剂，例如甲醇中。通过加入第二种溶剂，例如乙醇，化合物的二盐酸盐从溶液中以二盐酸盐本身或者与沉淀用溶剂形成的复合物(例如化合物·2HCl.EtOH)形式沉淀出来。二盐酸盐/乙醇复合物是本发明的化合物用于药物组合物的优选实施方式。其优选以冷沉淀物的形式使用。如果需要，该冷沉淀物可与标准粉末药物赋形剂如甘露醇、淀粉和微晶纤维素一起整合入片剂中。该赋形剂应该是低碱性的。当在水中悬浮时，它们不应该使pH升至超过7.0，而是提供5.0-7.0的pH。
用含0.1mg/L至15mg/L的二盐酸盐/乙醇复合物的5％甘露醇水溶液(用于提供等张性)进行室温稳定性研究。发现越弱的溶液降解越快。例如，在储存100小时后每升包含15mg化合物的溶液约2.5％的化合物11降解，而每升包含2mg化合物的溶液中约5％的化合物降解，并且每升包含0.1mg化合物的溶液中约三分之一的化合物降解。HPLC揭示了数种降解产物的形成。

Claims (13)

1.通式I的细胞毒性化合物，其中R是由C1-C4直链或支链烷基取代的亚甲基或甲基或H，R1选自下组：H、C1-C4直链或支链烷基、甲氧基、甲氧基取代有1至3个氟、卤素；R2是H或者C1-C4直链或支链烷基；X是CH或N；Y是CH或N；如果R1是H或C1-C4烷基，R2是H或者C1-C4直链或支链烷基，X是N且Y是N，则R不包括H或甲基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R2是H。
3.如权利要求2所述的化合物，所述化合物选自下组：R＝H，R1＝6-CH3，R2＝H，X和Y＝CH；R＝CH2C(CH3)3，R1＝6-CH3，R2＝H，X和Y＝N；R＝CH2CH3，R1＝6-CH3，R2＝H，X和Y＝N。
4.如权利要求1或2所述的化合物，在未被R1取代的单-、双-或三-氮杂咔唑基的6、7、8或9位之一上还被C1-C4直链或支链烷基取代。
5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物的顺式、反式异构体的混合物。
6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物的药学上可接受的盐、盐/溶剂复合物、金属复合物、溶剂复合物或前药，所述金属复合物排除带Fe2+、Fe3+、和/或Co2+的金属复合物。
7.权利要求6所述的药学上可接受的盐，选自盐酸盐和二盐酸盐。
8.包含权利要求1-7中任一项所述的化合物和药学上可接受的运载体的药物组合物。
9.权利要求1-7中任一项所述的化合物或权利要求8所述的药物组合物在治疗人实体癌肿瘤中的用途。
10.权利要求1-7中任一项所述的化合物或权利要求8所述的药物组合物联同自噬抑制剂在治疗人实体癌肿瘤中的用途。
11.一种治疗人实体癌肿瘤的方法，所述方法包括给予此人药学上有效剂量的权利要求1-7中任一项所述的化合物或权利要求8所述的药物组合物。
12.如权利要求11所述的方法，所述方法包括联合给予自噬抑制剂与权利要求1-7中任一项所述的化合物或权利要求8所述的药物组合物。
13.如权利要求10所述的用途或权利要求12所述的方法，所述自噬抑制剂选自下组：氯喹、羟氯喹、3-甲基腺嘌呤、腺苷、巴佛洛霉素A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷、渥曼青霉素、长春碱。
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