CN104650069B - 4-甲基二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种4‑甲基二氢嘧啶类化合物及其作为药物的用途，尤其是作为用于治疗和预防乙型肝炎的药物的应用。具体地说，本发明涉及通式(I)或(Ia)所示的化合物或其对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐，其中各变量如说明书所定义。本发明还涉及通式(I)或(Ia)所示的化合物或其对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐作为药物的用途，尤其是作为用于治疗和预防乙型肝炎的药物的用途。

Description

4-甲基二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
技术领域
本发明具体涉及一种4-甲基二氢嘧啶类化合物及其药物组合物，进一步涉及所述化合物或所述药物组合物在制备药物中的用途，尤其是在制备用于预防、处理、治疗或减轻乙型肝炎(HBV)感染的药物中的用途。
背景技术
乙型肝炎病毒属于肝病毒科。它可引起急性的和或持续/渐进的慢性病。乙型肝炎病毒还引起病理形态中的许多其他的临床表征——尤其是肝脏的慢性炎症、肝硬化和肝细胞的癌变。另外，与丁型肝炎的共同感染在疾病的发展过程中会产生不利影响。
被许可用于治疗慢性肝炎治疗的常规药物是干扰素和拉米夫定(lamivudine)。然而，干扰素只具有中等的活性，并具有较高的毒副反应；虽然拉米夫定(lamivudine)具有良好的活性，但其耐药性在治疗过程中增幅迅速，并在停止治疗之后常常出现反弹效应，拉米夫定(3-TC)的IC50值为300nM(Science,299(2003),893-896)。
Deres等报道了以Bay41-4109、Bay39-5493为代表的杂芳环取代的二氢嘧啶类(HAP)化合物，该类化合物能够通过阻止正常核衣壳的形成起到抑制HBV复制的作用。Bay41-4109在临床研究中表现了较好的药物代谢参数(Science,299(2003),893-896)。对其作用机制的研究发现，杂芳环取代的二氢嘧啶类化合物通过与核心蛋白的113-143氨基酸残基作用，改变了形成核衣壳的二聚体之间的夹角，导致形成不稳定的膨胀核衣壳，加速核心蛋白的降解(Biochem.Pharmacol.66(2003),2273-2279)。
目前仍然需要有新的能够有效地用作抗病毒药物的化合物，尤其是用作治疗和/或预防乙型肝炎的药物。
发明摘要
本发明涉及一种新的4-甲基二氢嘧啶类化合物及其药物组合物，以及所述化合物或所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、处理、治疗或减轻病毒性疾病，尤其是乙型肝炎(HBV)感染或乙型肝炎感染引起的疾病。
一方面，本发明涉及一种化合物，其为式(I)或(Ia)所示的化合物或式(I)或(Ia)所示化合物的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、前药、立体异构体、氮氧化物或药学上可接受的盐，
其中，R1为C6-10芳基或C1-9杂芳基；
R3为C6-10芳基或C1-9杂芳基；
A为一个键、-O-、-S-或-N(R5)-；
各R2和R5独立地为氢或C1-4烷基；
R为如下子结构式：
其中，Y为-(CR8R8a)m-N(R8)-、-(CR8R8a)-O-(CR8R8a)2-、-(CR8R8a)m-S(＝O)q-或-(CR7R6)m-O-；
Q为-(CR8R8a)m-；
X为-(CR8R8a)n-(CR8R9)-(CR8R8a)n-、-(CR8R9a)n-(CR8R8a)m-、-(CR8R8a)n-(CR8R9)-O-或-(CR8R9a)n-(CR8R8a)m-O-；
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基或烷基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢或烷基；
各R6独立地为烷基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基；
各R8和R8a独立地为氢、氰基或烷基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、卤素、卤代烷基或烷基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、烷基、烷氧基、羟基、烷基-S(＝O)q-、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、杂环基-S(＝O)q-、杂芳基-S(＝O)q-、芳基烷基、环烷基-S(＝O)q-或芳基-S(＝O)q-；
各n独立地为1、2、3或4；
各m独立地为0、1、2、3或4；
各q独立地为0、1或2；
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R8a、R9、R9a、R10、R10a和R11中所述的烷氧基、烷基-S(＝O)q-、杂环基-S(＝O)q-、杂芳基-S(＝O)q-、环烷基-S(＝O)q-、芳基-S(＝O)q-、芳基、C6-10芳基、杂芳基、C1-9杂芳基、烷基、C1-4烷基、环烷基、杂环基、芳基烷基、卤代烷基、***基和四唑基可以任选地被氢、氟、氯、溴、碘、氧代(＝O)、亚甲基(＝CH2)、烷基、烷氧基、氰基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、-COOH、羟基、硝基、烷氨基、氨基、三氟甲基、三氟甲氧基、卤代烷基取代的芳基、卤素取代的芳基或三氟甲磺酰基单取代或相同或不同的多取代。
一些实施例中，R为如下子结构式：
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基或C1-4烷基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢或C1-4烷基；
各R6独立地为C1-4烷基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R8和R8a独立地为氢或C1-4烷基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、C1-4卤代烷基或C1-4烷基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、羟基、C1-4烷基-S(＝O)q-、C6-10芳基、C1-9杂芳基、C3-6环烷基、C2-9杂环基、C2-9杂环基-S(＝O)q-、C1-9杂芳基-S(＝O)q-、C6-10芳基C1-4烷基、C3-6环烷基-S(＝O)q-或C6-10芳基-S(＝O)q-。
一些实施例中，R为如下子结构式：
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基、甲基、乙基或丙基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢、甲基、乙基或丙基；
各R6独立地为甲基、乙基或丙基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基；
各R8和R8a独立地为氢、甲基、乙基或丙基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲基、乙基或丙基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基-S(＝O)2-、苯基、吡啶基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、吡咯基、嘧啶基、哒嗪基、二唑基、***基、四唑基、噻吩基、吡唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡嗪基、吡喃基、三嗪基、环己基、环戊基、环丁基、环丙基、环丙基-S(＝O)2-、环丁基-S(＝O)2-、环戊基-S(＝O)2-、环己基-S(＝O)2-、萘基-S(＝O)2-或苯基-S(＝O)2-。
另一些实施例中，其中，
R1为苯基；
各R2和R5独立地为氢、甲基或乙基；
R3为吡啶基、恶唑基、异恶唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基或1-甲基-1H-咪唑基；
A为-O-；
其中，R1、R2、R3和R5中所述的吡啶基、恶唑基、异恶唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、1-甲基-1H-咪唑基、苯基、甲基和乙基可以任选地被氢、C1-4烷基、氟、氯或溴单取代或相同或不同的多取代。
一些实施例中，本发明涉及一种化合物，其为式(II)或(IIa)所示的化合物或式(II)或(IIa)所示化合物的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、前药、立体异构体、氮氧化物或药学上可接受的盐，
其中，R2为氢或C1-4烷基；
R3为噻唑基或1-甲基-1H-咪唑基；
R为如下子结构式：
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基、甲基、乙基或丙基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢或C1-4烷基；
各R6独立地为C1-4烷基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R8和R8a独立地为氢或C1-4烷基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、C1-4卤代烷基或C1-4烷基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、羟基、C1-4烷基-S(＝O)2-、C6-10芳基、C1-9杂芳基、C3-6环烷基、C2-9杂环基、C2-9杂环基-S(＝O)2-、C1-9杂芳基-S(＝O)2-、C6-10芳基C1-4烷基、C3-6环烷基-S(＝O)2-或C6-10芳基-S(＝O)2-；
各R12独立地为氢、氟、氯或溴；
各q独立地为0、1或2；
各n独立地为1、2、3或4；
各m独立地为0、1、2、3或4。
另一些实施例中，R为如下子结构式：
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲基、乙基或丙基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基-S(＝O)2-、苯基、吡啶基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、吡咯基、嘧啶基、哒嗪基、二唑基、***基、四唑基、噻吩基、吡唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡嗪基、吡喃基、三嗪基、环己基、环戊基、环丁基、环丙基、环丙基-S(＝O)2-、环丁基-S(＝O)2-、环戊基-S(＝O)2-、环己基-S(＝O)2-、萘基-S(＝O)2-或苯基-S(＝O)2-。
一方面，本发明涉及一种药物组合物，该药物组合物含有本发明所述化合物，及其药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或它们的组合。
一些实施例中，本发明所述药物组合物，其进一步地包含抗HBV药物。
另一些实施例中，本发明所述药物组合物，其中，所述抗HBV药物为HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂或干扰素。
又一些实施例中，本发明所述药物组合物，其中，所述抗HBV药物为选自拉米夫定、替比夫定、替诺福韦酯、恩替卡韦、阿德福韦酯、Alfaferone、Alloferon、西莫白介素、克拉夫定、恩曲他滨、法普洛韦、 干扰素、宝甘灵CP、因特芬、干扰素α-1b、干扰素α、干扰素α-2a、干扰素β-1a、干扰素α-2、白细胞介素-2、米伏替酯、硝唑尼特、聚乙二醇干扰素α-2a、病毒唑、罗扰素-A、西佐喃、Euforavac、安普利近、Phosphazid、Heplisav、干扰素α-2b、左旋咪唑和丙帕锗中的至少一种。
另一方面，本发明涉及所述化合物或所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、处理、治疗或减轻患者病毒性疾病。
一些实施例中，本发明所述的用途，其中，所述病毒性疾病是指乙型肝炎感染或乙型肝炎感染引起的疾病。
另一些实施例中，本发明所述的用途，其中，所述乙型肝炎感染引起疾病是指肝硬化或肝细胞癌变。
另一方面，本发明涉及所述化合物或药物组合物来制备用于预防、处理、治疗或减轻患者乙型肝炎疾病的药物的用途，包括给予患者如本发明所述化合物或本发明所述药物组合物的有效治疗剂量。
本发明另一方面涉及预防、处理、治疗或减轻患者HBV病症的方法，所述方法包含使用本发明的化合物药学上可接受的有效剂量对患者进行给药。
本发明另一方面涉及预防、处理、治疗或减轻患者HBV病症的方法，所述方法包含使用含有本发明的化合物的药物组合物的药学上可接受的有效剂量对患者进行给药。
本发明另一方面涉及使用一种包含本发明的化合物来生产用于预防、处理或治疗患者HBV病症，并减轻其严重程度的药物的用途。
本发明另一方面涉及使用一种包含本发明的化合物的药物组合物来生产用于预防、处理或治疗患者HBV病症，并减轻其严重程度的药物的用途。
其中一些实施例是，所述有机体是哺乳动物，另一些实施例是，所述有机体是人类。另一些实施例是，所述方法更进一步地包含激酶与HBV治疗剂的接触。
本发明另一方面涉及一种抑制HBV感染的方法，该方法包含细胞与本发明化合物或其组合物能有效抑制HBV的剂量接触。另外一些实施例是，所述方法更进一步地包含细胞与HBV剂的接触。
本发明另一方面涉及对患者HBV疾病的治疗，该方法包含患者需要有效治疗所需本发明化合物或其组合物给药的剂量。另外一些实施例是，所述方法更进一步地包含HBV的给药。
本发明另一方面涉及一种抑制患者HBV感染的方法，该方法包含患者需要有效治疗所需本发明化合物或其组合物给药的剂量。另一些实施例是，所述方法更进一步地包含HBV治疗的给药。
本发明另一方面涉及式(I)或式(Ia)所包含的化合物的制备、分离和纯化的方法。
前面所述内容只概述了本发明的某些方面，但并不限于这些方面。这些方面及其他的方面的内容将在下面做更加具体完整的描述。
本发明的详细说明书
定义和一般术语
现在详细描述本发明的某些实施方案，其实例由随附的结构式和化学式说明。本发明意图涵盖所有的替代、修改和等同技术方案，它们均包括在如权利要求定义的本发明范围内。本领域技术人员应认识到，许多与本文所述类似或等同的方法和材料能够用于实践本发明。本发明绝不限于本文所述的方法和材料。在所结合的文献、专利和类似材料的一篇或多篇与本申请不同或相矛盾的情况下(包括但不限于所定义的术语、术语应用、所描述的技术等等)，以本申请为准。
应进一步认识到，本发明的某些特征，为清楚可见，在多个独立的实施方案中进行了描述，但也可以在单个实施例中以组合形式提供。反之，本发明的各种特征，为简洁起见，在单个实施方案中进行了描述，但也可以单独或以任意适合的子组合提供。
除非另外说明，本发明所使用的所有科技术语具有与本发明所属领域技术人员的通常理解相同的含义。本发明涉及的所有专利和公开出版物通过引用方式整体并入本发明。
除非另外说明，应当应用本文所使用的下列定义。出于本发明的目的，化学元素与元素周期表CAS版，和《化学和物理手册》，第75版，1994一致。此外，有机化学一般原理可参考"Organic Chemistry",Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito:1999,和"March's Advanced Organic Chemistry”by Michael B.Smith and Jerry March,JohnWiley&Sons,New York:2007中的描述，其全部内容通过引用并入本文。
像本发明所描述的，本发明的化合物可以任选地被一个或多个取代基所取代，如上面的通式化合物，本发明的具体化合物，或像实施例里面特殊的例子，子类，和本发明所包含的一类化合物。应了解术语“任选取代的”与术语“取代或非取代的”可以交换使用。一般而言，术语“取代的”，表示所给结构中的一个或多个氢原子被具体取代基所取代。除非其他方面表明，一个任选的取代基团可以在基团各个可取代的位置进行取代。当所给出的结构式中不只一个位置能被选自具体基团的一个或多个取代基所取代，那么取代基可以相同或不同地在各个位置取代。其中所述的取代基可以是，但并不限于：氢、氟、氯、溴、碘、氧代(＝O)、亚甲基(＝CH2)、烷基、烷氧基、氰基、羟基、巯基、硝基、烷氨基、氨基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、环烷基、环烷基烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、卤代烷基取代的芳基、卤素取代的芳基或三氟甲磺酰基等。
在本说明书的各部分，本发明公开化合物的取代基按照基团种类或范围公开。特别指出，本发明包括这些基团种类和范围的各个成员的每一个独立的次级组合。例如，术语“C1-6烷基”特别指独立公开的甲基、乙基、C3烷基、C4烷基、C5烷基和C6烷基。
在本发明的各部分，描述了连接取代基。当该结构清楚地需要连接基团时，针对该基团所列举的马库什变量应理解为连接基团。例如，如果该结构需要连接基团并且针对该变量的马库什基团定义列举了“烷基”或“芳基”，则应该理解，该“烷基”或“芳基”分别代表连接的亚烷基基团或亚芳基基团。
除非另有说明或者上下文中有明显的冲突，本文所使用的冠词“一”、“一个(种)”和“所述”旨在包括“至少一个”或“一个或多个”。因此，本文所使用的这些冠词是指一个或多于一个(即至少一个)宾语的冠词。例如，“一组分”指一个或多个组分，即可能有多于一个的组分被考虑在所述实施方案的实施方式中采用或使用。
本发明所使用的术语“患者”是指人(包括成人和儿童)或者其他动物。在一些实施方案中，“患者”是指人。
术语“包含”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。
术语“立体异构体”是指具有相同化学构造，但原子或基团在空间上排列方式不同的化合物。立体异构体包括对映异构体、非对映异构体、构象异构体(旋转异构体)、几何异构体(顺/反)异构体、阻转异构体等。
术语“手性”是具有与其镜像不能重叠性质的分子；而“非手性”是指与其镜像可以重叠的分子。
术语“对映异构体”是指一个化合物的两个不能重叠但互成镜像关系的异构体。
术语“非对映异构体”是指有两个或多个手性中心并且其分子不互为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，如熔点、沸点、光谱性质和反应性。非对映异构体混合物可通过高分辨分析操作如电泳和色谱，例如HPLC来分离。
术语“烷基”或“烷基基团”，表示含有1至20个碳原子，饱和的直链或支链的一价烃基基团，其中，所述的烷基可以独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。除非另外详细说明，烷基基团含有1-20个碳原子。一些实施例中，烷基基团含有1-10个碳原子；另一些实施例中，烷基基团含有1-8个碳原子；另一些实施例中，烷基基团含有1-6个碳原子；另一些实施例中，烷基基团含有1-4个碳原子；另一些实施例中，烷基基团含有1-3个碳原子。
烷基基团的实例包括，但并不限于：甲基(Me，-CH3)、乙基(Et，-CH2CH3)、丙基(n-Pr，-CH2CH2CH3)、异丙基(i-Pr，-CH(CH3)2)、正丁基(n-Bu，-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基丙基或异丁基(i-Bu，-CH2CH(CH3)2)、1-甲基丙基或仲丁基(s-Bu，-CH(CH3)CH2CH3)、叔丁基(t-Bu，-C(CH3)3)、正戊基(-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)，3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、正己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)、正庚基、正辛基等等。
术语“卤代烷基”或“卤代烷氧基”表示烷基或烷氧基基团被一个或多个相同或不同的卤素原子所取代，其中，所述的烷基和烷氧基具有如本发明所述的含义。这样的实例包括，但并不限于：三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基等。
术语“烯基”表示含有2-12个碳原子的直链或支链一价烃基，其中至少有一个不饱和位点，即有一个碳-碳sp2双键，其中，所述烯基基团可以任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代，其包括“cis”和“trans”的定位，或者"E"和"Z"的定位。一些实施例中，烯基基团包含2-8个碳原子；另一些实施例中，烯基基团包含2-6个碳原子；又一些实施例中，烯基基团包含2-4个碳原子。烯基基团的实例包括，但并不限于：乙烯基(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)等。
术语“环烷基”表示含有3-12个碳原子的，单价或多价的非芳香性的饱和或部分不饱和单环、双环或三环体系。其中，所述环烷基基团可以任选地被一个或多个本发明描述的取代基所取代。一些实施例中，环烷基包含3-12个碳原子；另一些实施例中，环烷基包含3-8个碳原子；又一些实施例中，环烷基包含3-6个碳原子。环烷基基团的实例包括，但并不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。
术语“杂环基”是指包含3-12个环原子的，非芳香族的饱和或部分不饱和的单环、双环或三环体系，其中至少一个环原子选自氮、硫和氧原子。其中，所述杂环基基团可以任选地被一个或多个本发明描述的取代基所取代。除非另外说明，杂环基可以是碳基或氮基，且-CH2-基团可以任选地被-C(＝O)-替代。环的硫原子可以任选地被氧化成S-氧化物。环的氮原子可以任选地被氧化成N-氧化物。一些实施例中，杂环基为C2-10杂环基，表示杂环基含有2-10个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂环基为C2-9杂环基，表示杂环基含有2-9个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂环基为C2-7杂环基，表示杂环基含有2-7个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实 施例中，杂环基为C2-5杂环基，表示杂环基含有2-5个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子。杂环基的实例包括，但不限于：吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢嘧啶基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、高哌啶基、环氧丙基，2-吡咯啉基、二氢吲哚基、吡唑啉基、1，1-二氧硫代吗啉基等。杂环基中-CH2-基团被-C(＝O)-取代的实例包括，但不限于：2-氧代吡咯烷基、2-哌啶酮基、3-吗啉酮基、3-硫代吗啉酮基和氧代四氢嘧啶基等。
术语“杂环基烷基”表示杂环基基团通过烷基基团与分子其余部分相连，其中，杂环基和烷基具有本发明所述的含义。所述的杂环基烷基可以任选地被一个或多个本发明描述的取代基所取代。这样的实例包括，但并不限于：吡咯-2-甲基、吗啉-4-甲基、吡咯烷基甲基、哌啶甲基、哌啶乙基、吗啉甲基、吗啉基乙基等。
术语“卤素”或“卤原子”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。
术语“烷氧基”表示烷基基团通过氧原子与分子其余部分相连，其中烷基基团具有如本发明所述的含义。烷氧基基团的实例包括，但并不限于：甲氧基(MeO、-OCH3)、乙氧基(EtO、-OCH2CH3)、丙氧基(n-PrO、n-丙氧基、-OCH2CH2CH3)、异丙氧基(i-PrO、i-丙氧基、-OCH(CH3)2)、正丁氧基(n-BuO、n-丁氧基、-OCH2CH2CH2CH3)、2-甲基-l-丙氧基(i-BuO、i-丁氧基、-OCH2CH(CH3)2)、2-丁氧基(s-BuO、s-丁氧基、-OCH(CH3)CH2CH3)、叔丁氧基(t-BuO、t-丁氧基、2-甲基-2-丙氧基、-OC(CH3)3)、1-戊氧基(n-戊氧基、-OCH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊氧基(-OCH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊氧基(-OCH(CH2CH3)2)，2-甲基-2-丁氧基(-OC(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁氧基(-OCH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-l-丁氧基(-OCH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-l-丁氧基(-OCH2CH(CH3)CH2CH3)等。
术语“芳基”表示含有6-14个环原子，或6-12个环原子，或6-10个环原子的单环、双环和三环的碳环体系，其中，至少一个环体系是芳香族的，其中每一个环体系包含3-7个原子组成的环，且有一个或多个连接点与分子的其余部分相连。所述芳基基团可以任选地被一个或多个本发明描述的取代基所取代。术语“芳基”可以和术语“芳香环”交换使用。芳基基团的实例包括，但并不限于：苯基、2,3-二氢-1H-茚基、萘基和蒽等。
术语“芳基烷基”表示芳基基团通过烷基基团与分子其余部分相连，其中，芳基和烷基具有本发明所述的含义。所述的芳基烷基可以任选地被一个或多个本发明描述的取代基所取代。这样的实例包括，但并不限于：苄基、苯基乙基、萘基甲基等。
术语“杂芳基”表示含有5-14个环原子，或5-12个环原子，或5-10个环原子，或5-6个环原子的单环、双环和三环体系，其中至少一个环体系是芳香族的，且至少一个环体系包含一个或多个选自氮、氧、硫的杂原子，其中每一个环体系包含5-7个原子组成的环，且有一个或多个连接点与分子其余部分相连。术语“杂芳基”可以与术语“杂芳环”或“杂芳族化合物”交换使用。一些实施例中，杂芳基为C1-9杂芳基，表示杂芳基含有1-9个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂芳基为C1-7杂芳基，表示杂芳基含有1-7个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂芳基为C1-6杂芳基，表示杂芳基含有1-6个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂芳基为C1-5杂芳基，表示杂芳基含有1-5个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂芳基为C1-4杂芳基，表示杂芳基含有1-4个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子；另一些实施例中，杂芳基为C1-3杂芳基，表示杂芳基含有1-3个碳原子和至少一个选自O、S和N的杂原子。这样的实例包括，但并不限于以下的单环：呋喃基(如2-呋喃基和3-呋喃基)、咪唑基(如N-咪唑基、1-甲基-1H-咪唑基、2-咪唑基、 4-咪唑基和5-咪唑基)、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、哒嗪基(如3-哒嗪基)、噻唑基(2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基)、四唑基(如5-四唑基)、***基(如2-***基和5-***基)、2-噻吩基、3-噻吩基、吡喃基、吡唑基(如2-吡唑基)、异噻唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，3-***基、1，2，3-硫代二唑基、1，3，4-硫代二唑基、1，2，5-硫代二唑基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、二唑基、噻二唑基、三嗪基；也包括以下的双环，但绝不限于这些双环：苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基(如2-吲哚基)、嘌呤基、喹啉基(如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基)、异喹啉基(如1-异喹啉基、3-异喹啉基或4-异喹啉基)等。
术语“杂芳基烷基”表示杂芳基基团通过烷基基团与分子的其余部分相连，其中，烷基和杂芳基具有如本发明所述的含义。所述的杂芳基烷基可以任选地被一个或多个本发明描述的取代基所取代。这样的实例包括，但并不限于：吡啶-2-乙基、噻唑-2-甲基、咪唑-2-乙基、嘧啶-2-丙基等。
术语“烷基-S(＝O)q-”、“杂环基-S(＝O)q-”、“杂芳基-S(＝O)q-”、“环烷基-S(＝O)q-”和“芳基-S(＝O)q-”表示烷基、杂环基、杂芳基、环烷基和芳基通过亚磺酰基(-S(＝O)-)或磺酰基(-S(＝O)2-)与分子其余部分相连，其中，q、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基具有如本发明所述的含义，这样的实例包括，但并不限于：甲基亚磺酰基(-S(＝O)CH3)、环丙基-S(＝O)2-、环丁基-S(＝O)2-、环戊基-S(＝O)2-、环己基-S(＝O)2-、萘基-S(＝O)2-、苯基-S(＝O)2-、甲基磺酰基(-S(＝O)2CH3)等。
术语“烷基氨基”或“烷氨基”包括“N-烷基氨基”和“N,N-二烷基氨基”，其中氨基基团分别独立地被一个或两个烷基基团所取代。其中，烷基基团具有如本发明所述的含义。合适的烷基氨基基团可以是单烷基氨基或二烷基氨基，这样的实例包括，但并不限于：N-甲氨基、N-乙氨基、异丙基氨基、丙氨基、叔丁基氨基、正丁氨基、1-甲基丙基氨基、正戊基氨基、正己基氨基、N,N-二甲氨基、N,N-二乙氨基等。
术语“卤代烷基取代的芳基”表示芳基基团可以被一个或多个相同或不同的卤代烷基所取代，其中，卤代烷基和芳基具有如本发明所述的含义。这样的实例包括，但并不限于：2-三氟甲基苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基、3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、2,6-二(三氟甲基)苯基等。
术语“卤素取代的芳基”表示芳基基团可以被一个或多个相同或不同的卤素原子所取代，其中，卤素和芳基具有如本发明所述的含义。这样的实例包括，但并不限于：氟苯基、二氟苯基、三氟苯基、氯苯基、二氯苯基、三氯苯基、溴苯基、三溴苯基、二溴苯基、氟氯苯基、氟溴苯基、氯溴苯基等。
像本发明所描述的，体系中有两个连接点与分子其余部分相连，例如，式f所示，表示既可以是E端也可以是E’端与分子其余部分相连，即在分子结构合理的情况下，两端的连接方式可以互换。
另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本文中通篇采用的描述方式“各…和…独立地为”、“…和…各自独立地为”和“…和…分别独立地为”可以互换，应做广义理解，其既可以是指在不同基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响，也可以表示在相同的基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响。例如，如式e，多个n的具体选项相互之间不受影响，多个R9的具体选项互相之间不受影响。
像本发明所描述的，取代基画一个键连接到中心的环上形成的环体系(如下式所示)代表取代基在环上任何可取代的位置都可以取代。例如，式a代表环上任何可能被取代的位置，如式b、c、d、e、f、g和h所示
像本发明所描述的，双键上连接一个波浪键到其他的原子上形成的体系(如式k所示)代表含双键的化合物为(Z)构型或(E)构型，或者是(Z)构型与(E)构型的混合物。
除非其他方面表明，本发明所描述的结构式包括所有的同分异构形式(如对映异构、非对映异构和几何异构(或构象异构))：例如含有不对称中心的R、S构型，双键的(Z)、(E)异构体，和(Z)、(E)的构象异构体。因此，本发明的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体，非对映异构体，或几何异构体(或构象异构体)的混合物都属于本发明的范围。
本发明所使用的术语“前药”，代表一个化合物在体内转化为式(I)或式(Ia)所示的化合物。这样的转化受前体药物在血液中水解或在血液或组织中经酶转化为母体结构的影响。本发明前体药物类化合物可以是酯，在现有的发明中酯可以作为前体药物的有苯酯类、脂肪族(C1-24)酯类、酰氧基甲基酯类、碳酸酯、氨基甲酸酯类和氨基酸酯类。例如本发明里的一个化合物包含羟基，即可以将其酰化得到前体药物形式的化合物。其他的前体药物形式包括磷酸酯，如这些磷酸酯类化合物是经母体上的羟基磷酸化得到的。关于前体药物完整的讨论可以参考以下文献：T.Higuchi and V.Stella,Pro-drugs as Novel DeliverySystems,Vol.14of the A.C.S.Symposium Series,Edward B.Roche,ed.,BioreversibleCarriers in Drug Design,American Pharmaceutical Association and PergamonPress,1987,J.Rautio et al,Prodrugs:Design and Clinical Applications,NatureReview Drug Discovery,2008,7,255-270,and S.J.Hecker et al,Prodrugs ofPhosphates and Phosphonates,Journal of Medicinal Chemistry,2008,51，2328-2345。
除非其他方面表明，本发明的化合物的所有互变异构形式都包含在本发明的范围之内。另外，除非其他方面表明，本发明所描述的化合物的结构式包括一个或多个不同的原子的富集同位素。
“代谢产物”是指具体的化合物或其盐在体内通过代谢作用所得到的产物。一个化合物的代谢产物可以 通过所属领域公知的技术来进行鉴定，其活性可以通过如本发明所描述的那样采用试验的方法进行表征。这样的产物可以是通过给药化合物经过氧化、还原、水解、酰氨化、脱酰氨作用、酯化、脱脂作用、酶裂解等等方法得到。相应地，本发明包括化合物的代谢产物，包括将本发明的化合物与哺乳动物充分接触一段时间所产生的代谢产物。
本发明所使用的立体化学的定义和规则一般遵循S.P.Parker,Ed.,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；andEliel,E.and Wilen,S.,"Stereochemistry of Organic Compounds",John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994.
本发明的化合物的任何不对称原子(例如，碳等)都可以以外消旋或对映体富集的形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-构型形式存在。在某些实施方案中，各不对称原子在(R)-或(S)-构型方面具有至少50％对映体过量，至少60％对映体过量，至少70％对映体过量，至少80％对映体过量，至少90％对映体过量，至少95％对映体过量，或至少99％对映体过量。
本发明的化合物所有的立体异构形式，包括但绝不限于：非对映体、对映异构体、阻转异构体和它们的混合物，如外消旋混合物，组成了本发明的一部分。很多有机化合物都以光学活性形式存在，即它们有能力旋转平面偏振光的平面。在描述光学活性化合物时，前缀D、L或R、S用来表示分子手性中心的绝对构型。前缀d、l或(+)、(-)用来命名化合物平面偏振光旋转的符号，(-)或l是指化合物是左旋的，前缀(+)或d是指化合物是右旋的。这些立体异构体的化学结构是相同的，但是它们的立体结构不一样。特定的立体异构体可以是对映体，异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。50：50的对映体混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，这可能导致化学反应过程中没有立体选择性或立体定向性。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指等摩尔的两个对映异构体的混合物，缺乏光学活性。
术语“互变异构体”或“互变异构的形式”是指不同能量的可通过低能垒(lowenergy barrier)互相转化的结构异构体。若互变异构是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如质子互变异构体(protontautomer)(也称为质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体(valence tautomer)包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。酮-烯醇互变异构的具体实例是戊烷-2,4-二酮和4-羟基戊-3-烯-2-酮互变异构体的互变。互变异构的另一个实例是酚-酮互变异构。酚-酮互变异构的一个具体实例是吡啶-4-醇和吡啶-4(1H)-酮互变异构体的互变。除非另外指出，本发明化合物的所有互变异构体形式都在本发明的范围之内。
本发明所使用的“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的有机盐和无机盐。药学上可接受的盐在所属领域是为我们所熟知的，如文献：S.M.Berge et al.,describepharmaceutically acceptable salts in detail in J.Pharmaceutical Sciences,66:1-19,1977.所记载的。药学上可接受的无毒的酸形成的盐包括，但并不限于：与氨基基团反应形成的无机酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、高氯酸盐；有机酸盐，如乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、丙二酸盐；或通过书籍文献上所记载的其他方法如离子交换法来得到这些盐。其他药学上可接受的盐包括，己二酸盐、苹果酸盐、2-羟基丙酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、重硫酸盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊基丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、 棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等等。通过适当的碱得到的盐包括，碱金属，碱土金属，铵和N+(C1-4烷基)4的盐。本发明也拟构思了任何所包含N的基团的化合物所形成的季铵盐。水溶性或油溶性或分散产物可以通过季铵化作用得到。可以形成盐的碱金属或碱土金属包括钠、锂、钾、钙、镁等等。药学上可接受的盐进一步包括适当的、无毒的铵，季铵盐和抗平衡离子形成的胺阳离子，如卤化物、氢氧化物、羧化物、硫酸化物、磷酸化物、硝酸化物、C1-8磺酸化物和芳香磺酸化物。
本发明的“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的化合物所形成的缔合物。形成溶剂化物的溶剂包括，但并不限于：水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲亚砜、乙酸乙酯、乙酸和氨基乙醇。术语“水合物”是指溶剂分子是水所形成的缔合物。
术语“保护基团”或“Pg”是指一个取代基与别的官能团起反应的时候，通常用来阻断或保护特定官能团的功能性。例如，“氨基的保护基团”是指一个取代基与氨基基团相连来阻断或保护化合物中氨基的功能性，合适的氨基保护基团包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Cbz)和9-芴亚甲氧羰基(Fmoc)。相似地，“羟基保护基团”是指羟基的取代基用来阻断或保护羟基的功能性，合适的保护基团包括乙酰基和甲硅烷基。“羧基保护基团”是指羧基的取代基用来阻断或保护羧基的功能性，一般的羧基保护基包括-CH2CH2SO2Ph、氰基乙基、2-(三甲基硅烷基)乙基、2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基、2-(对甲苯磺酰基)乙基、2-(对硝基苯磺酰基)乙基、2-(二苯基膦基)乙基、硝基乙基等。对于保护基团一般的描述可参考文献：T W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,JohnWiley&Sons,New York,1991；and P.J.Kocienski,Protecting Groups,Thieme,Stuttgart,2005。
另外，本发明公开的化合物，包括它们的盐，也可以以它们的水合物形式或包含其溶剂(例如乙醇、DMSO等等)的形式得到，用于它们的结晶。本发明公开化合物可以与药学上可接受的溶剂(包括水)固有地或通过设计形成溶剂化物；因此，本发明旨在包括溶剂化的和未溶剂化的形式。
本发明给出的任何结构式也意欲表示这些化合物未被同位素富集的形式以及同位素富集的形式。同位素富集的化合物具有本发明给出的通式描绘的结构，除了一个或多个原子被具有所选择原子量或质量数的原子替换。可引入本发明化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，如2H， 3H，11C，13C，14C，15N，17O，18O，18F，31P，32P，35S，36Cl和125I。
另一方面，本发明所述化合物包括同位素富集的本发明所定义的化合物，例如，其中存在放射性同位素，如3H，14C和18F的那些化合物，或者其中存在非放射性同位素，如2H和13C。该类同位素富集的化合物可用于代谢研究(使用14C)、反应动力学研究(使用例如2H或3H)、检测或成像技术，如正电子发射断层扫描术(PET)或包括药物或底物组织分布测定的单光子发射计算机断层成像术(SPECT)，或可用于患者的放疗中。18F富集的化合物对PET或SPECT研究而言是特别理想的。同位素富集的式(I)所示化合物可以通过本领域技术人员熟悉的常规技术或本发明中的实施例和制备过程所描述使用合适的同位素标记试剂替代原来使用过的未标记试剂来制备。
此外，较重同位素特别是氘(即，2H或D)的取代可提供某些治疗优点，这些优点是由代谢稳定性更高带来的。例如，体内半衰期增加或剂量需求降低或治疗指数得到改善带来的。应当理解，本发明中的氘被看做式(I)化合物的取代基。可以用同位素富集因子来定义该类较重同位素特别是氘的浓度。本发明所使用的术语“同位素富集因子”是指所指定同位素的同位素丰度和天然丰度之间的比例。如果本发明化合物 的取代基被指定为氘，该化合物对各指定的氘原子而言具有至少3500(各指定氘原子处52.5％的氘掺入)、至少4000(60％的氘掺入)、至少4500(67.5％的氘掺入)，至少5000(75％的氘掺入)，至少5500(82.5％的氘掺入)、至少6000(90％的氘掺入)、至少6333.3(95％的氘掺入)、至少6466.7(97％的氘掺入)、至少6600(99％的氘掺入)或至少6633.3(99.5％的氘掺入)的同位素富集因子。本发明可药用的溶剂化物包括其中结晶溶剂可以是同位素取代的例如D2O、丙酮-d6、DMSO-d6的那些溶剂化物。
本发明化合物的描述
本发明涉及一种新的4-甲基二氢嘧啶类化合物及其药物组合物，以及所述化合物或所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、处理、治疗或减轻病毒性疾病，尤其是乙型肝炎(HBV)感染或乙型肝炎感染引起的疾病。
一方面，本发明涉及一种化合物，其为式(I)或(Ia)所示的化合物或式(I)或(Ia)所示化合物的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、前药、立体异构体、氮氧化物或药学上可接受的盐，
其中，R1为C6-10芳基或C1-9杂芳基；
R3为C6-10芳基或C1-9杂芳基；
A为一个键、-O-、-S-或-N(R5)-；
各R2和R5独立地为氢或C1-4烷基；
R为如下子结构式：
其中，Y为-(CR8R8a)m-N(R8)-、-(CR8R8a)-O-(CR8R8a)2-、-(CR8R8a)m-S(＝O)q-或-(CR7R6)m-O-；
Q为-(CR8R8a)m-；
X为-(CR8R8a)n-(CR8R9)-(CR8R8a)n-、-(CR8R9a)n-(CR8R8a)m-、-(CR8R8a)n-(CR8R9)-O-或-(CR8R9a)n-(CR8R8a)m-O-；
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基或烷基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢或烷基；
各R6独立地为烷基，或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基；
各R8和R8a独立地为氢、氰基或烷基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、 -(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、卤素、卤代烷基或烷基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成环烷基或杂环基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、烷基、烷氧基、羟基、烷基-S(＝O)q-、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、杂环基-S(＝O)q-、杂芳基-S(＝O)q-、芳基烷基、环烷基-S(＝O)q-或芳基-S(＝O)q-；
各n独立地为1、2、3或4；
各m独立地为0、1、2、3或4；
各q独立地为0、1或2；
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R8a、R9、R9a、R10、R10a和R11中所述的烷氧基、烷基-S(＝O)q-、杂环基-S(＝O)q-、杂芳基-S(＝O)q-、环烷基-S(＝O)q-、芳基-S(＝O)q-、芳基、C6-10芳基、杂芳基、C1-9杂芳基、烷基、C1-4烷基、环烷基、杂环基、芳基烷基、卤代烷基、***基和四唑基可以任选地被氢、氟、氯、溴、碘、氧代(＝O)、亚甲基(＝CH2)、烷基、烷氧基、氰基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、-COOH、羟基、硝基、烷氨基、氨基、三氟甲基、三氟甲氧基、卤代烷基取代的芳基、卤素取代的芳基或三氟甲磺酰基单取代或相同或不同的多取代。
一些实施例中，R为如下子结构式：
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基或C1-4烷基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起或形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢或C1-4烷基；
各R6独立地为C1-4烷基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R8和R8a独立地为氢或C1-4烷基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、C1-4卤代烷基或C1-4烷基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、羟基、C1-4烷基-S(＝O)q-、C6-10芳基、C1-9杂芳基、C3-6环烷基、C2-9杂环基、C2-9杂环基-S(＝O)q-、C1-9杂芳基-S(＝O)q-、C6-10芳基C1-4烷基、C3-6环烷基-S(＝O)q-或C6-10芳基-S(＝O)q-。
一些实施例中，R为如下子结构式：
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基、甲基、乙基或丙基，或当两个R4连接在同一个碳原子时，R4和R4和与之相连的碳原子一起或形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢、甲基、乙基或丙基；
各R6独立地为甲基、乙基或丙基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基；
各R8和R8a独立地为氢、甲基、乙基或丙基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、 -(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲基、乙基或丙基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基-S(＝O)2-、苯基、吡啶基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、吡咯基、嘧啶基、哒嗪基、二唑基、***基、四唑基、噻吩基、吡唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡嗪基、吡喃基、三嗪基、环己基、环戊基、环丁基、环丙基、环丙基-S(＝O)2-、环丁基-S(＝O)2-、环戊基-S(＝O)2-、环己基-S(＝O)2-、萘基-S(＝O)2-或苯基-S(＝O)2-。
另一些实施例中，其中，R1为苯基；
各R2和R5独立地为氢、甲基或乙基；
R3为吡啶基、恶唑基、异恶唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基或1-甲基-1H-咪唑基；
A为-O-；
其中，R1、R2、R3和R5中所述的吡啶基、恶唑基、异恶唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、1-甲基-1H-咪唑基、苯基、甲基和乙基可以任选地被氢、C1-4烷基、氟、氯或溴单取代或相同或不同的多取代。
一些实施例中，本发明涉及一种化合物，其为式(II)或(IIa)所示的化合物或式(II)或(IIa)所示化合物的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、前药、立体异构体、氮氧化物或药学上可接受的盐，
其中，R2为氢或C1-4烷基；
R3为噻唑基或1-甲基-1H-咪唑基；
R为如下子结构式：
各R4独立地为氢、氟、氯、溴、羟基、氨基、甲基、乙基或丙基，或当两个R4连接在同一个碳原子 时，R4和R4和与之相连的碳原子一起或形成如下基团：-C(＝CH2)-；
各R7独立地为氢或C1-4烷基；
各R6独立地为C1-4烷基；或R6和R7和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R8和R8a独立地为氢或C1-4烷基，或R8a和R8和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基；
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、C1-4卤代烷基或C1-4烷基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成C3-6环烷基或C2-9杂环基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、羟基、C1-4烷基-S(＝O)2-、C6-10芳基、C1-9杂芳基、C3-6环烷基、C2-9杂环基、C2-9杂环基-S(＝O)2-、C1-9杂芳基-S(＝O)2-、C6-10芳基C1-4烷基、C3-6环烷基-S(＝O)2-或C6-10芳基-S(＝O)2-；
各R12独立地为氢、氟、氯或溴；
各q独立地为0、1或2；
各n独立地为1、2、3或4；
各m独立地为0、1、2、3或4。
另一些实施例中，R为如下子结构式：
各R9独立地为-(CR10R10a)m-OH、***基、四唑基、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、 -(CR10R10a)m-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)m-C(＝O)N(R11)2；
各R9a独立地为***基、-(CR10R10a)n-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-R11、-(CR10R10a)m-S(＝O)qN(R11)2、-(CR10R10a)m-N(R11)2、-S(＝O)qOR11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)O-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-OC(＝O)-R11、-(CR10R10a)n-C(＝O)O-(CR10R10a)m-C(＝O)O-R11或-(CR10R10a)n-C(＝O)N(R11)2；
各R10和R10a独立地为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲基、乙基或丙基，或R10a和R10和与之相连的碳原子一起形成环己基、环戊基、环丁基或环丙基，或形成如下基团：-C(＝O)-；
各R11独立地为氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基-S(＝O)2-、苯基、吡啶基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、吡咯基、嘧啶基、哒嗪基、二唑基、***基、四唑基、噻吩基、吡唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡嗪基、吡喃基、三嗪基、环己基、环戊基、环丁基、环丙基、环丙基-S(＝O)2-、环丁基-S(＝O)2-、环戊基-S(＝O)2-、环己基-S(＝O)2-、萘基-S(＝O)2-或苯基-S(＝O)2-。
另一些实施例中，本发明所述的化合物，其包含以下其中之一的结构或其中之一结构的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、前药、立体异构体、氮氧化物或药学上可接受的盐：
一方面，本发明涉及一种药物组合物，该药物组合物包含本发明所述化合物，及其在药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或它们的组合。
一些实施例中，本发明所述的药物组合物，其进一步地包含抗HBV药物。
一些实施例中，本发明所述的药物组合物，其中，所述抗HBV药物为HBV聚合酶抑制剂、免疫调节 剂或干扰素。
一些实施例中，本发明所述的药物组合物，其中，所述抗HBV药物为选自拉米夫定、替比夫定、替诺福韦酯、恩替卡韦、阿德福韦酯、Alfaferone、Alloferon、西莫白介素、克拉夫定、恩曲他滨、法普洛韦、干扰素、宝甘灵CP、因特芬、干扰素α-1b、干扰素α、干扰素α-2、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β-1a、白细胞介素-2、米伏替酯、硝唑尼特、聚乙二醇干扰素α-2a、病毒唑、罗扰素-A、西佐喃、Euforavac、rintatolimod(安普利近)、Phosphazid、Heplisav、左旋咪唑和丙帕锗中的至少一种。
另一方面，本发明还涉及所述化合物或所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、处理、治疗或减轻患者病毒性疾病。
一些实施例中，本发明所述的用途，其中，所述病毒性疾病是指乙型肝炎感染或乙型肝炎感染引起的疾病。
另一些实施例中，本发明所述的用途，其中，所述乙型肝炎感染引起疾病是指肝硬化或肝细胞癌变。
另一方面，本发明涉及所述的化合物或药物组合物来制备用于预防、处理、治疗或减轻患者乙型肝炎疾病的药物的用途，包括给予患者如本发明所述化合物或本发明所述药物组合物的有效治疗剂量。
本发明另一方面涉及预防、处理、治疗或减轻患者HBV病症的方法，所述方法包含使用本发明的化合物药学上可接受的有效剂量对患者进行给药。
本发明另一方面涉及预防、处理、治疗或减轻患者HBV病症的方法，所述方法包含使用含有本发明的化合物的药物组合物的药学上可接受的有效剂量对患者进行给药。
本发明另一方面涉及使用一种本发明的化合物来生产用于预防、处理或治疗患者HBV病症，并减轻其严重程度的药物的用途。
本发明另一方面涉及使用一种包含本发明的化合物的药物组合物来生产用于预防、处理或治疗患者HBV病症，并减轻其严重程度的药物的用途。
其中一些实施例是，所述有机体是哺乳动物，另外一些实施方案是，所述有机体是人类。另外一些实施例是，所述方法更进一步地包含激酶与HBV治疗剂的接触。
本发明另一方面涉及一种抑制HBV感染的方法，该方法包含细胞与本发明化合物或其组合物能有效抑制HBV的剂量接触。另外一些实施例是，所述方法更进一步地包含细胞与HBV剂的接触。
本发明另一方面涉及对患者HBV疾病的治疗，该方法包含患者需要有效治疗所需本发明的化合物或其组合物给药的剂量。另外一些实施例是，所述方法更进一步地包含HBV的给药。
本发明另一方面涉及一种抑制患者HBV感染的方法，该方法包含患者需要有效治疗所需本发明的化合物或其组合物给药的剂量。另外一些实施例是，所述方法更进一步地包含HBV治疗的给药。
本发明另一方面涉及式(I)或式(Ia)所包含的化合物的制备、分离和纯化的方法。
本发明还包含本发明的化合物及其药学上可接受的盐的应用，用于生产医药产品有效抑制HBV感染，包括那些本发明所描述的。本发明的化合物在生产有效抑制HBV感染药物中的应用。本发明的化合物同样用于生产一种医药品用来减轻、阻止、控制或治疗患者乙型肝炎的病症。本发明包含药物组合物，该药物组合物包括式(I)或(Ia)所代表的化合物与至少一个药学上可接受的载体、辅剂或稀释剂的结合所需的有效治疗用量。
本发明同样包含有效抑制HBV感染的疾病，或对此病症敏感的方法，该方法包含使用式(I)或(Ia)所代 表化合物的治疗有效量对患者进行治疗。
除非其他方面表明，本发明的化合物所有的立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、代谢产物、盐和药学上可接受的前药都属于本发明的范围。
具体地说，盐是药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的”包括物质或组合物必须是适合化学或毒理学地，与组成制剂的其他组分和用于治疗的哺乳动物有关。
本发明的化合物的盐还包括用于制备或纯化式(I)或(Ia)所示化合物的中间体或式(I)或(Ia)所示化合物分离的对映异构体的盐，但不一定是药学上可接受的盐。
如果本发明的化合物是碱性的，则想得到的盐可以通过文献上提供的任何合适的方法制备得到，例如，使用无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸和磷酸等。或者使用有机酸，如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、苹果酸、2-羟基丙酸、枸橼酸、草酸、羟乙酸和水杨酸；吡喃糖酸，如葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸；α-羟酸，如柠檬酸和酒石酸；氨基酸，如天门冬氨酸和谷氨酸；芳香族酸，如苯甲酸和肉桂酸；磺酸，如对甲苯磺酸、苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、三氟甲磺酸等等或它们的组合。
如果本发明的化合物是酸性的，则想得到的盐可以通过合适的方法制备得到，如，使用无机碱或有机碱，如氨(伯氨、仲氨、叔氨)，碱金属氢氧化物，铵，N+(R14)4的盐和碱土金属氢氧化物等等。合适的盐包括，但并不限于：从氨基酸得到的有机盐，如甘氨酸和精氨酸，氨，如伯氨、仲氨和叔氨，N+(R14)4的盐，如R14是H、C1-4烷基、C6-10芳基、C6-10芳基C1-4烷基等，和环状氨，如哌啶，吗啉和哌嗪等，和从钠，钙，钾，镁，锰，铁，铜，锌，铝和锂得到无机盐。也包括适当的、无毒的铵，季铵盐和抗平衡离子形成的胺阳离子，如卤化物，氢氧化物，羧化物，硫酸化物，磷酸化物，硝酸化物，C1-8磺酸化物和芳香磺酸化物。
本发明化合物的药物组合物、制剂、给药和化合物及药物组合物的用途
本发明的药物组合物的特点包括式(I)或(Ia)的化合物，本发明所列出的化合物，或实施例1-16的化合物，和药学上可接受的载体、辅剂或赋形剂。本发明的组合物中化合物的量能有效的抑制乙型肝炎病毒，适用于治疗或减轻患者病毒引起的疾病尤其是急性和慢性持续的HBV病毒感染，HBV引发的慢性病毒病可能导致病态变严重，慢性乙型肝炎病毒感染在许多情况下可导致肝硬化和/或肝细胞癌变。
本发明的化合物适用于传染性肝炎的急性和慢性病毒感染的治疗，尤其是能有效的抑制乙型肝炎病毒(HBV)，适用于治疗或减轻患者病毒引起的疾病尤其是急性和慢性持续的HBV病毒感染，HBV引发的慢性病毒病可能导致病态变严重，慢性乙型肝炎病毒感染在许多情况下可导致肝硬化和/或肝细胞癌变。
本发明包括药物制剂，除了无毒，惰性的制药学上合适的载体外，还含有一种或多种本发明的化合物(I)或(Ia)或组合物或含有一种或多种活性成分(I)或(Ia)或本发明的组合物。
上述药物制剂也可以包含化合物(I)或(Ia)以外的其他活性药物成分。
本发明的化合物存在自由形态，或合适的、作为药学上可接受的衍生物。根据本发明，药学上可接受的衍生物包括，但并不限于，药学上可接受的前药，盐，酯，酯类的盐，或能直接或间接地根据患者的需要给药的其他任何加合物或衍生物，本发明其他方面所描述的化合物，其代谢产物或它的残留物。
像本发明所描述的，本发明药学上可接受的组合物进一步包含药学上可接受的载体，辅剂，或赋形剂，这些像本发明所应用的，包括任何溶剂，稀释剂，或其他液体赋形剂，分散剂或悬浮剂，表面活性剂，等渗剂，增稠剂，乳化剂，防腐剂，固体粘合剂或润滑剂，等等，适合于特有的目标剂型。如以下文献所描 述的：In Remington:The Science andPractice of Pharmacy,21st edition,2005,ed.D.B.Troy,Lippincott Williams&Wilkins,Philadelphia,and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,eds.J.Swarbrick and J.C.Boylan,1988-1999,Marcel Dekker,New York,综合此处文献的内容，表明不同的载体可应用于药学上可接受的组合物的制剂和它们公知的制备方法。除了任何常规的载体媒介与本发明的化合物不相容的范围，例如所产生的任何不良的生物效应或与药学上可接受的组合物的任何其他组分以有害的方式产生的相互作用，它们的用途也是本发明所考虑的范围。
可作为药学上可接受载体的物质包括，但并不限于：离子交换剂，铝，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白，如人血清蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘氨酸，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，盐，如氯化钠，锌盐，胶体硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，聚丙烯酸脂，蜡，聚乙烯-聚氧丙烯-阻断聚合体，羊毛脂，糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；淀粉如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素和它的衍生物如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和乙酸纤维素；树胶粉；麦芽；明胶；滑石粉；辅料如可可豆脂和栓剂蜡状物；油如花生油，棉子油，红花油，麻油，橄榄油，玉米油和豆油；二醇类化合物，如丙二醇和聚乙二醇；酯类如乙基油酸酯和乙基月桂酸酯；琼脂；缓冲剂如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原的水；等渗盐；林格(氏)溶液；乙醇；磷酸缓冲溶液；和其他无毒的合适的润滑剂如月桂硫酸钠和硬脂酸镁，着色剂，释放剂，包衣衣料，甜味剂，调味剂和香料，防腐剂和抗氧化剂。为方便起见，局部麻醉剂，防腐剂，缓冲剂等可直接溶于载体中。
本发明化合物的的药物组合物，可以以下方面的任意方式施与：口服给药、喷雾吸入法，经直肠给药，经鼻给药，局部给药，***给药，非肠道给药如皮下，静脉，肌内，腹腔内，鞘内，心室内，胸骨内，或颅内注射或输液，或借助一种外植的储器用药。优选的方式为口服给药，肌注，向腹膜内给药或静脉注射。
本发明化合物或含有药学上可接受的组合物可以是以单位剂量形式给药。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂、包合物、埋植剂、贴剂、擦剂等。
口服片剂和胶囊可以含有赋形剂如粘合剂，如糖浆，***胶，山梨醇，黄芪胶，或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，如乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸钙，山梨醇，氨基乙酸；润滑剂，如硬脂酸镁，滑石，聚乙二醇，硅土；崩解剂，如马铃薯淀粉；或可接受的增润剂如月桂醇钠硫酸盐。片剂可以用制药学上公知的方法包衣。
口服液可以制成水合油的悬浮液，溶液，乳浊液，糖浆或酏剂，也可以制成干品，用前补充水或其它合适的媒质。这种液体制剂可以包含常规的添加剂，如悬浮剂，山梨醇，纤维素甲醚，葡萄糖糖浆，凝胶，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶，氢化的食用油脂，乳化剂，如卵磷脂，山梨聚醣单油酸盐，***胶；或非水载体(可能包含可食用油)，如杏仁油，油脂如甘油，乙二醇，或乙醇；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，山梨酸。如需要可添加调味剂或着色剂。
栓剂可包含常规的栓剂基质，如可可黄油或其他甘油酯。
对胃外投药，液态剂型通常由化合物和一种消毒的载体制成。载体首选水。依照所选载体和药物浓度的不同，化合物既可溶于载体中也可制成悬浮溶液，在制成注射用溶液时先将化合物溶于水中，过滤消毒后装入封口瓶或安瓿中。
当皮肤局部施用时，本发明化合物可以制成适当的软膏，洗剂，或霜剂的形式，其中活性成分悬浮或溶解于一种或多种的载体中，其中软膏制剂可以使用的载体包括但不局限于：矿物油，液体凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蜡和水；洗剂和霜剂可使用的载体包括但不限于：矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60，十六烷酯蜡，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。
一般而言，已经证明有利的是无论在人体医药还是在兽医药中，本发明活性化合物的给药总量每24小时为约0.5-500mg，优选1-100mg/kg体重，如果合适的话，分多次单剂量给药，以达到所要求的效果。单剂量中含活性化合物的量优选为约1-80mg，更优选为1-50mg/kg体重，但也可以不按照上述的剂量，即取决于治疗对象的种类和体重、疾病的性质和严重程度、制剂的类型和药物的给药方式，以及给药周期或时间间隔。
本发明提供的药物组合物中还包含抗HBV药物。其中抗HBV药物为HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂或干扰素。
HBV药物有拉米夫定、替比夫定、替诺福韦酯、恩替卡韦、阿德福韦酯、Alfaferone、Alloferon、西莫白介素、克拉夫定、恩曲他滨、法普洛韦、干扰素、宝甘灵CP、因特芬、干扰素α-1b、干扰素α、干扰素α-2a、干扰素β-1a、干扰素α-2、白细胞介素-2、米伏替酯、硝唑尼特、聚乙二醇干扰素α-2a、病毒唑、罗扰素-A、西佐喃、Euforavac、rintatolimod、Phosphazid、Heplisav、干扰素α-2b、左旋咪唑、丙帕锗等。
本发明另一方面涉及一种本发明的化合物或药物组合物来制备用于预防、处理、治疗或减轻患者乙型肝炎疾病的药品的用途，包括给予患者药学上可接受的有效剂量对患者进行给药。乙型肝炎疾病是指由乙肝病毒感染或乙型肝炎感染导致引起的肝脏疾病，包括急性肝炎，慢性肝炎，肝硬化和干细胞癌。急性乙型肝炎病毒感染可以是无症状或表现为急性肝炎症状。慢性病毒感染患者患有活动性疾病，可发展为肝硬化和肝癌。
抗HBV药物可以与包含本发明的化合物的组合物分开给药，作为多给药方案的一部分。或者，那些药物可以是单剂型的一部分，与本发明的化合物混合在一起形成单个组合物。如果给药作为多给药方案的一部分，两个活性剂可以同时连续地或在一段时间内互相传递，从而得到目标试剂活性。
可以结合载体物质产生单剂型的化合物和组合物的用量(那些包含一个组合物像本发明所描述的)的改变取决于主治和特殊给药模式。正常地，本发明的组合物的量将不超过组合物包含作为唯一的活性剂的正常给药的量。另一方面，现公开的组合物的量的范围大约是现有组合物正常量的50％-100％，包含的试剂作为唯一活性治疗剂。在那些包含的组合物中，组合物将与本发明的化合物起协同作用。
本发明的化合物显示出较强的抗病毒作用。这类化合物对HBV具有出乎预料的抗病毒活性，因此适于用来治疗病毒引起的各种疾病，尤其是急性和慢性持久性HBV病毒感染引起的疾病。由HBV引起的慢性病毒性疾病可以导致各种不同严重程度的综合症状，众所周知，慢性乙肝病毒感染可导致肝硬化和/或肝细胞癌。
可用本发明化合物治疗的适应症的实例有：治疗可导致感染性肝炎的急性和慢性病毒感染的，例如异性肝炎病毒感染。特别优选的是慢性乙型肝炎感染的治疗和急性乙型肝炎病毒感染的治疗。
本发明涉及本发明化合物及其组合物用于制备治疗和预防病毒性疾病特别是乙型肝炎的药物的用途。
一般合成方法
一般地，本发明的化合物可以通过本发明所描述的方法制备得到，除非有进一步的说明，其中取代基 的定义如式(I)或(Ia)所示。下面的合成方法和实施例用于进一步举例说明本发明的内容。
所属领域的技术人员将认识到：本发明所描述的化学反应可以用来合适地制备本发明的其他化合物，且用于制备本发明的化合物的其它方法都被认为是在本发明的范围之内。例如，根据本发明那些非例证的化合物的合成可以成功地被所属领域的技术人员通过修饰方法完成，如适当的保护干扰基团，通过利用其他已知的试剂除了本发明所描述的，或将反应条件做一些常规的修改。另外，本发明所公开的反应或已知的反应条件也公认地适用于本发明其他化合物的制备。
下面所描述的实施例，除非其他方面表明，所有的温度定为摄氏度(℃)。除非其他方面表明，试剂购买于商品供应商如Aldrich Chemical Company,Arco Chemical Companyand Alfa Chemical Company，使用时都没有经过进一步纯化；一般的试剂从汕头西陇化工厂，广东光华化学试剂厂，广州化学试剂厂，天津好寓宇化学品有限公司，青岛腾龙化学试剂有限公司，和青岛海洋化工厂购买得到。
无水四氢呋喃，二氧六环，甲苯，***是经过金属钠回流干燥得到。无水二氯甲烷和氯仿是经过氢化钙回流干燥得到。乙酸乙酯，石油醚，正己烷，N,N-二甲基乙酰胺和N,N-二甲基甲酰胺是经无水硫酸钠事先干燥使用。
以下反应一般是在氮气或氩气正压下或在无水溶剂上套一干燥管(除非其他方面表明)，反应瓶都塞上合适的橡皮塞，底物通过注射器打入。玻璃器皿均是经过干燥的。
色谱柱是使用硅胶柱，硅胶(200-300目)购于青岛海洋化工厂。核磁共振光谱数据通过Bruker Avance400核磁共振谱仪或Bruker Avance III HD 600核磁共振谱仪来测定，以CDC13,d6-DMSO,CD3OD或d6-丙酮为溶剂(报导以ppm为单位)，用TMS(0ppm)或氯仿(7.25ppm)作为参照标准。当出现多重峰的时候，将使用下面的缩写：s(singlet，单峰),s,s(singlet，singlet，单峰，单峰),d(doublet，双峰),t(triplet，三重峰),m(multiplet，多重峰),br(broadened，宽峰),dd(doublet of doublets，四重峰),ddd(doublet ofdoublet of doublets，双双二重峰),dt(doublet of triplets，双三重峰),ddt(doubletof doublet of triplets，双双三重峰),dddd(doublet of doublet of doublet ofdoublets，双双双二重峰),td(triplet of doublets，三双重峰),br.s(broadenedsinglet，宽单峰)。偶合常数，用赫兹(Hz)表示。
低分辨率质谱(MS)数据通过配备G1312A二元泵和a G1316A TCC(柱温保持在30℃)的Agilent 6320系列LC-MS的光谱仪来测定的，G1329A自动采样器和G1315B DAD检测器应用于分析，ESI源应用于LC-MS光谱仪。
低分辨率质谱(MS)数据通过配备G1311A四元泵和G1316A TCC(柱温保持在30℃)的Agilent 6120系列LC-MS的光谱仪来测定的，G1329A自动采样器和G1315D DAD检测器应用于分析，ESI源应用于LC-MS光谱仪。
以上两种光谱仪都配备了Agilent Zorbax SB-C18柱，规格为2.1×30mm，5μm。注射体积是通过样品浓度来确定；流速为0.6mL/min；HPLC的峰值是通过在210nm和254nm处的UV-Vis波长来记录读取的。流动相为0.1％的甲酸乙腈溶液(相A)和0.1％的甲酸超纯水溶液(相B)。梯度洗脱条件如表1所示：
表1：低分辨率质谱流动相的梯度洗脱条件
时间(min) A(CH<sub>3</sub>CN，0.1％HCOOH) B(H<sub>2</sub>O，0.1％HCOOH)
0-3 5-100 95-0
3-6 100 0
6-6.1 100-5 0-95
6.1-8 5 95
化合物纯度是通过Agilent 1100系列高效液相色谱(HPLC)来评价的，其中UV检测在210nm和254nm处，Zorbax SB-C18柱，规格为2.1×30mm，4μm，10分钟，流速为0.6mL/min，5-95％的(0.1％甲酸乙腈溶液)的(0.1％甲酸水溶液)，柱温保持在40℃。
下面简写词的使用贯穿本发明：
DCM,CH2Cl2 二氯甲烷
CDC13 氘代氯仿
CCl4 四氯化碳
Boc 叔丁氧羰基
(Boc)2O 二碳酸二叔丁酯
TMSCl 三甲基氯硅烷
CuI 碘化亚铜
MeLi 甲基锂
g 克
mol 摩尔
mmol 毫摩尔
mL 毫升
L 升
h 小时
LiOH.H2O 单水氢氧化锂，氢氧化锂一水合物
DMSO-d6 氘代二甲基亚砜
PE 石油醚
EtOAc,EA 乙酸乙酯
NaHCO3 碳酸氢钠
NBS N-溴丁二酰亚胺
D2O 重水
mL 毫升
DMF 二甲基甲酰胺
Pd/C，Pd-C 钯碳
CH3OH，MeOH 甲醇
t1/2 半衰期
AUC 药时曲线下面积
Vss 稳态表观分布容积
CL,clearance 清除率
F,absolute bioavailability 生物利用度
Dose 剂量
Tmax 达峰时间
Cmax 最大浓度
hr*ng/mL 血药浓度*时间
合成方法
合成方法1
目标化合物3b可以通过合成方法1制备得到，其中R1、R2、R3、A和R具有如本发明所述的含义。化合物1b在溴化试剂的作用下发生溴代反应得到化合物2b，化合物2b与RH在碱性条件下反应得到目标化合物3b。
合成方法2
化合物7b可以通过合成方法2制备得到，其中，Z为-O-或-S-，R14为氢或甲基，R13为氢、甲基、乙基、丙基或异丙基，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物4-1b与wittig试剂发生wittig反应得到化合物4b，化合物4b在还原剂的作用下发生还原反应得到化合物5b，化合物5b水解后得到化合物6b，化合物6b脱保护得到化合物7b。
合成方法3
化合物13b可以通过合成方法3制备得到，其中，R14为氢或甲基，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物8b在氧化剂如戴斯-马丁氧化剂的作用下得到化合物9b，化合物9b与wittig试剂发生wittig反应得到化合物10b，化合物10b在还原剂的作用下发生还原反应得到化合物11b，化合物11b水解后得到化合物12b，化合物12b脱保护得到化合物13b。
合成方法4
化合物17b可以通过合成方法4制备得到，其中，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物14b在CuI、MeLi与TMSCl的作用下得到化合物15b，化合物15b水解得到化合物16b，化合物16b脱保护得到化合物17b。
合成方法5
化合物24b可以通过合成方法5制备得到，其中，R14为氢或甲基，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物18b在还原剂的作用下得到化合物19b，化合物19b在氧化剂如戴斯-马丁氧化剂的作用下得到化合物20b，化合物20b与wittig试剂发生wittig反应得到化合物21b，化合物21b在还原剂的作用下得到化合物22b，化合物22b水解后得到化合物23b，化合物23b脱保护得到化合物24b。
合成方法6
化合物34b可以通过合成方法6制备得到，其中，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物25b在三甲基硅烷化重氮甲烷与正丁基锂的作用下得到化合物26b，化合物26b在醋酸铑的作用下得到化合物27b，化合物27b与DAST反应得到化合物28b，化合物28b在还原剂的作用下得到化合物29b，化合物29b在氧化剂如戴斯-马丁氧化剂的作用下得到化合物30b，化合物30b与wittig试剂发生wittig反应得到化合物31b，化合物31b在还原剂的作用下得到化合物32b，化合物32b水解后得到化合物33b，化合物33b脱保护得到化合物34b。
合成方法7
化合物40b可以通过合成方法7制备得到，其中，Z为-O-或-S-，R14为氢或甲基，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物35b在氧化剂如戴斯-马丁氧化剂的作用下得到化合物36b，化合物36b与wittig试剂发生wittig反应得到化合物37b，化合物37b水解后得到化合物38b，化合物38b在还原剂的作用下发生还原反应得到化合物39b，化合物39b脱保护得到化合物40b。
合成方法8
化合物47b可以通过合成方法8制备得到，其中，Z为-O-或-S-，R14为氢或甲基，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物41b在还原剂的作用下得到化合物42b，化合物42b在氧化剂如戴斯-马丁氧化剂的作用下得到化合物43b，化合物43b与wittig试剂发生wittig反应得到化合物44b，化合物44b在还原剂的作用下得到化合物45b，化合物45b水解后得到化合物46b，化合物46b脱保护得到化合物47b。
合成方法9
化合物51b可以通过合成方法9制备得到，其中，Z为-O-或-S-，Pg为氨基保护基，如Boc、Fmoc、Cbz等。化合物48b在CuI与MeLi的作用下得到化合物49b，化合物49b水解得到化合物50b，化合物50b脱保护得到化合物51b。
具体实施方式
下面的实施例可以对本发明做进一步的描述，然而，这些实施例不应作为对本发明的范围的限制。
实施例1化合物3-(4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吗啉-2-基)丙酸的合成
步骤1)化合物2-(3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)吗啉-4–甲酸苄酯的合成
将2-甲酰基吗啉-4–甲酸苄酯(1.5g,6mmol)和甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦(2.01g,6mmol)溶于DCM(30mL)，氮气保护下25℃反应12小时，浓缩反应液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝3/1)得到无色油状物(0.88g,48％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:306.1[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.35-7.29(m,5H),6.82-6.78(m,1H),6.09-6.01(m,1H),5.15-5.10(m,2H),4.20-4.11(q,2H),3.94-3.88(m,2H),3.77-3.65(m,3H),3.60-3.58(m,1H),3.02(br.s,1H),2.74(br.s,1H).
步骤2)化合物3-(4-((苄氧)羰基)吗啉-2-基)丙烯酸的合成
将2-(3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸苄酯(0.86g,2.82mmol)溶于无水甲醇(4mL)，加入氢氧化钠(1.12g,28.2mmol)的水(2mL)溶液，25℃反应1小时，加入EtOAc(100mL)和水(50mL)，0℃下用浓盐酸调pH至1-2，分层，浓缩有机层后得到无色油状物(0.79g,96％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:292.1[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.37-7.19(m,5H),6.82-6.79(m,1H),6.09-6.02(m,1H),5.15-5.08(m,2H),4.10-4.01(m,2H),3.94-3.80(m,2H),3.60-3.55(m,1H),3.02(br.s,1H),2.74(br.s,1H).
步骤3)化合物3-(吗啉-2-基)丙酸的合成
将3-(4-((苄氧)羰基)吗啉-2-基)丙烯酸(0.52g,1.8mmol)、Pd-C(10％,0.05g)和无水乙醇(4mL)置于反应瓶中，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，浓缩滤液后得到白色固体(0.2g,70％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.1[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.66-3.52(m,3H),2.96-2.69(m,4H),2.33-2.21(m,2H),1.69-1.54(m,2H).
步骤4)化合物6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯的合成
将4-(4-氟苯基)-4,6-二甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(1.7g,4.92mmol,合成方法参照WO2013144129A1)溶于CCl4(40mL)，76℃加入NBS(0.96g,5.41mmol)，加毕，保温反应30分钟，冷却，浓缩反应液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝8/1)得到黄色油状物(1.4g,67％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:424.1[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ9.24(br,1H),8.02(d,1H),7.98(br.s,1H),7.55-7.35(m,2H),7.16(t,2H),4.52(d,1H),4.37(d,1H),3.49(s,3H),1.90(br.s,3H).
步骤5)化合物3-(4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吗啉-2-基)丙酸的合成
于反应瓶中依次加入6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.47g, 1.1mmol)、2-丙酸吗啉(0.18g,1.1mmol)、碳酸钾(0.3g,2.2mmol)和无水乙醇(10mL)，氮气保护下25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩，残余物经柱层析分离纯化(DCM/CH3OH(v/v)＝25/1)得到黄色固体(0.13g,24％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:503.2[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ12.05(br,1H),9.45(d,1H),8.02(d,1H),7.93(d,1H),7.44-7.37(m,2H),7.13-7.09(m,2H),3.84-3.75(m,1H),3.64-3.45(m,3H),3.42(s,3H),2.78-2.64(m,2H),2.48-2.44(m,1H),2.35-2.16(m,3H),2.01-1.92(m,1H),1.80(s,3H),1.66-1.59(m,2H).
实施例2化合物(2R,3S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-甲酸的合成
步骤1)化合物(2R,3S)-2-甲基-4-苄基-5-氧代吗啉-3-甲酸苄酯的合成
于反应瓶中依次加入(2R,3S)-2-甲基-4-苄基-5-氧代-3-吗啉甲酸(1.07g,4.25mmol)(合成方法参照Helvetica Chimica Acta,87,2004,90-105)、碳酸钾(1.16g,8.5mmol)、乙腈(20mL)和苄溴(0.87g,5.1mmol)，65℃反应6小时，过滤，滤液浓缩，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝4/1)得到无色油状物(1.23g,85％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:340.3[M+H]+；
1H NMR(600MHz,CDCl3):δ7.42-7.18(m,10H),5.52(d,1H),5.22(q,2H),4.33(q,2H),4.23-4.21(m,1H),3.76-3.74(m,2H),1.23(d,3H).
步骤2)化合物(2R,3S)-2-甲基-4-苄基-3-吗啉甲酸苄酯的合成
将(2R,3S)-2-甲基-4-苄基-5-氧代-3-吗啉甲酸苄酯(15.7g,46.1mmol)溶于THF(60mL)，氮气保护-10℃下，缓慢滴加硼烷四氢呋喃溶液(1mol/L,69.2mL)，滴毕，升温至25℃反应16小时，后降温至-10℃，滴加甲醇至无气泡冒出，随后加入水(10mL)，浓缩，向残余物中加入EtOAc(150mL)，依次用氢氧化钠溶液(2mol/L,50mL×2)和饱和食盐水(50mL×2)洗涤，有机层浓缩后得到无色油状物(13g,86.7％)。MS(ESI,pos.ion)m/z:326.3[M+H]+；
1H NMR(600MHz,CDCl3):δ7.33-7.27(m,10H),5.22(s,2H),3.80-3.70(m,4H),3.27(d,1H),2.90(d,1H),2.71(d,1H),2.22-2.18(m,1H),1.15(d,3H).
步骤3)化合物(2R,3S)-2-甲基-3-吗啉甲酸的合成
于反应瓶中依次加入(2R,3S)-2-甲基-4-苄基-3-吗啉甲酸苄酯(10g,30.76mmol)、无水甲醇(100mL)和Pd/C(10％,1g)，氢气氛围下25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩后得到白色固体(3.8g,85％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:146.2[M+H]+；
1H NMR(600MHz,D2O):δ4.01-3.98(m,1H),3.82-3.77(m,1H),3.76-3.72(m,1H),3.37(d,1H),3.27-3.24(m,1H),3.19-3.14(m,1H),1.26(d,3H).
步骤4)化合物(2R,3S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-甲酸的合成
于反应瓶中依次加入6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.47g,1.1mmol)、(2R,3S)-2-甲基吗啉-3-甲酸(0.16g,1.1mmol)、碳酸钾(0.3g,2.2mmol)和无水乙醇(15mL)，氮气保护下25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩，残余物经柱层析分离纯化(DCM/CH3OH(v/v)＝25/1)得黄色固体(0.2g,37％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:489.1[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ13.09(br,1H),9.59(s,1H),8.03(d,1H),7.93(br.s,1H),7.42-7.39(m,2H),7.11(t,2H),3.83(d,1H),3.76-3.64(m,2H),3.57-3.43(m,2H),3.41(d,3H),2.90(d,1H),2.74(t,1H),2.37(q,1H),1.81(d,3H),1.19-1.17(m,3H).
实施例3化合物(3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)硫代吗啉-3-甲酸1,1-二氧化物的合成
于反应瓶中依次加入6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.61g,1.45mmol)、(R)-硫代吗啉-3-甲酸1,1-二氧化物(0.43g,2.4mmol)、碳酸钾(0.4g,2.9mmol)和无水乙醇(25mL)，氮气保护下40℃反应12小时，过滤，滤液浓缩后残余物经柱层析分离纯化(DCM/CH3OH(v/v)＝25/1)得到黄色固体(50mg,6.6％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:523.1[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ13.23(br,1H),9.51(s,1H),8.01(d,1H),7.93(br.s,1H),7.51-7.41(m,2H),7.19-7.09(m,2H),4.23-4.14(m,1H),4.05(t,1H),3.83(dd,1H),3.58-3.39(m,6H),3.18-3.03(m,3H),1.78(s,3H).
实施例4化合物3-((2R)-4,4-二氟-1-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吡咯烷-2-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
将(S)-4,4-二氟-2-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.84g,20.57mmol)溶于DCM(120mL)，25℃加入乙氧甲酰基亚甲基三苯基膦(8.59g,24.69mmol)，保温反应12小时，浓缩反应液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝3/1)得到浅黄色油状物(3.96g,63％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:206[M+H-100]+；250[M+H-56]+；
1H NMR(600MHz,CDCl3):δ6.83(m,1H),5.91(d,1H),4.65(d,1H),4.22(d,2H),3.86(s,1H),3.73(m,1H),2.66(d,1H),2.26(dd,1H),1.45(d,9H),1.31(t,3H).
步骤2)化合物(R)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中加入(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.5g,1.8mmol)、乙醇(10mL)和Pd/C(10％,60mg)，氢气氛围下25℃反应12小时,过滤，滤液浓缩后得无色油状物(0.45g,89.46％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3):δ4.15(dd,2H),3.98-3.82(m,1H),3.77(t,1H),3.62(dd,1H),2.61-2.43(m,1H),2.40-2.26(m,2H),2.19-2.07(m,2H),1.91-1.83(m,1H),1.49(s,9H),1.28(t,3H).
步骤3)化合物(R)-3-(1-(叔丁氧羰基)-4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸的合成
将(R)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.45g,1.46mmol)溶于乙醇(10mL)，加入LiOH.H2O(0.62g,1.47mmol)的水(10mL)溶液，25℃反应2小时。反应结束后，加入氢氧化钠溶液(2mol/L,4mL)和水(10mL)，用***(30mL×2)萃取，分层后，弃去有机层，水层用2mol/L的盐酸调pH至4，再用DCM(50mL×2)萃取，有机层浓缩后得到浅黄色油状物(0.25g,61.1％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:180[M+H-100]+；224[M+H-56]+；
1H NMR(600MHz,CDCl3):δ4.30-4.09(m,1H),4.02-3.78(m,1H),3.69-3.56(m,1H),2.61-2.48(m,1H),2.47-2.35(m,1H),2.22-2.09(m,1H),1.92-1.79(m,1H),1.49(s,9H).
步骤4)化合物(R)-3-(4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸盐酸盐的合成
于反应瓶中加入(R)-3-(1-(叔丁氧羰基)-4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸(0.25g,0.90mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(50mL)，25℃反应1小时，浓缩反应液后得到白色粉末(0.15g,77.9％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:180.1[M+H]+.
步骤5)化合物3-((2R)-4,4-二氟-1-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吡咯烷-2-基)丙酸的合成
于反应瓶中依次加入6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.3g,0.7mmol)、(R)-3-(4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸盐酸盐(0.15g,0.7mmol))、碳酸钾(0.19g,1.4mmol)和无水乙醇(15mL)，氮气保护下40℃反应12小时，过滤，滤液浓缩，残余物经柱层析分离纯化(DCM/CH3OH (v/v)＝25/1)得到黄色固体(0.2g,55％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:523.2[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.12(br,1H),9.36(br,1H),8.02(d,1H),7.93(s,1H),7.46(br,2H),7.16-7.11(m,2H),4.05-3.96(m,1H),3.79-3.60(m,3H),3.44(s,3H),3.18-2.88(m,2H),2.35-2.27(m,2H),2.15-1.95(m,2H),1.84(s,3H),1.65-1.55(m,1H).
实施例5化合物3-((2S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吗啉-2-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(R)-2-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-2-(羟甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(2.17g,10mmol)溶于DCM(44mL)，0℃加入戴斯-马丁氧化剂(5.1g,12mmol)，加毕，保温反应2小时，加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)，分层后，有机层依次用饱和碳酸氢钠溶液(40mL)和饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩有机层后得到无色油状物(1.81g,84％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.2[M+H-56]+.
步骤2)化合物(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-2-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.81g,8.4mmol)、DCM(40mL)和(三苯基膦烯)乙酸乙酯(2.93g,8.4mmol)按实施例4步骤1所述的方法实施得到无色油状物(1.94g,81％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:186.1[M+H-100]+.
步骤3)化合物(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.94g,6.8mmol)、无水乙醇(40mL)和Pd-C(10％,0.2g)按实施例4步骤2所述的方法实施得到无色油状物(1.78g,91％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:232.1[M+H-56]+.
步骤4)化合物(S)-3-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-2-基)丙酸的合成
将(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.78g,6.2mmol)、无水乙醇(10mL)、LiOH.H2O(2.6g,62mmol)和水(10mL)按实施例4步骤3所述的方法实施得到无色油状物(1.59g,99％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.2[M+H-100]+.
步骤5)化合物(S)-3-(吗啉-2-基)丙酸盐酸盐的合成
将(S)-3-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-2-基)丙酸(1.59g,6.1mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,15mL)，25o反应4小时，过滤，得到白色固体(0.94g,79％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.1[M+H]+；
1H NMR(400MHz,D2O):δ4.10-4.02(m,1H),3.80-3.74(m,2H),3.32-3.25(m,2H),3.10(td,1H),2.89(t,1H), 2.47-2.43(m,2H),1.88-1.70(m,2H).
步骤6)化合物3-((2S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吗啉-2-基)丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.78g,0.18mmol)、(S)-3-(吗啉-2-基)丙酸盐酸盐(36mg,0.18mmol)、碳酸钾(56mg,0.36mmol)和乙醇(2mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(31mg,33％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:503.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.38(s,1H),7.85(d,1H),7.55-7.46(m,1H),7.42(dd,2H),7.08-6.93(m,2H),3.90(d,1H),3.69(dt,4H),3.46(s,3H),2.72(d,2H),2.53-2.37(m,3H),2.12(ddd,2H),1.90(s,3H),1.83-1.71(m,2H).
实施例6化合物3-((3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-3-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(S)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-3-(羟甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.47g,6.77mmol)溶于DCM(30mL)，0℃加入戴斯-马丁氧化剂(3.44g,8.12mmol)，保温反应1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液(30mL)，继续搅拌30分钟，分层，有机层依次用饱和碳酸氢钠溶液(30mL×3)和饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液直接用于下一步反应。
步骤2)化合物(R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(S)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.46g,6.77mmol)溶于DCM(40mL)，25℃加入(三苯基膦烯)乙酸乙酯(2.36g,6.77mmol)，保温反应12小时，过滤，滤液浓缩后，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝10/1)得到无色油状物(1.05g,54％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:186.1[M+H-100]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.69(dd,1H),5.89(dd,1H),4.56(s,1H),4.20-4.12(m,2H),3.94-3.82(m,2H),3.77-3.65(m,2H),353-3.43(m,1H),3.27-3.10(m,1H),1.41(s,9H),1.29-1.23(m,3H).
步骤3)化合物(R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.05g,3.68mmol)、无水乙醇(20mL)和Pd-C(10％,0.2g)，氢气氛围30℃反应12小时，过滤，滤液浓缩，得到无色油状物(0.96g,91％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:188.1[M+H-100]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.12(q,2H),3.98(s,1H),3.84-3.69(m,3H),3.56(dd,1H),3.42(td,1H),3.12(t,1H),2.37-2.27(m,2H),2.25-2.15(m,1H),1.92-1.83(m,1H),1.45(s,9H),1.25(t,3H).
步骤4)化合物(R)-3-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-3-基)丙酸的合成
将(R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.96g,3.34mmol)溶于无水乙醇(10mL)，加入LiOH.H2O(1.4g,33.4mmol)的水(10mL)溶液，25℃反应30分钟，加入EtOAc(150mL)和水(50mL)，冰浴冷却，用浓盐酸调pH至5-6，分层，有机层用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩有机层后得到无色油状物(0.85g,98％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.1[M+H-100]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.08(br,1H),4.03(br,1H),3.88-3.72(m,3H),3.58(dd,1H),3.44(td,1H),3.13(t,1H),2.43-2.29(m,2H),2.27-2.20(m,1H),1.94-1.83(m,1H),1.46(s,9H).
步骤5)化合物(R)-3-(吗啉-3-基)丙酸盐酸盐的合成
于反应瓶中依次加入(R)-3-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-3-基)丙酸(0.9g,3.47mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,15mL)，25℃反应4小时，过滤，得到白色固体(0.53g,78％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.1[M+H]+；
1H NMR(400MHz,D2O):δ4.04-3.96(m,2H),3.75-3.68(m,1H),3.52(dd,1H),3.40-3.35(m,1H),3.34-3.29(m,1H),3.22-3.15(m,1H),2.47(t,2H),1.83(ddd,2H).
步骤6)化合物3-((3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-3-基)丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(184mg,0.43mmol)、(R)-3-(吗啉-3-基)丙酸盐酸盐(85mg,0.43mmol)、碳酸钾(119mg,0.87mmol)和乙醇(5mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(39mg,18％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:503.8[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ8.09-8.06(m,1H),7.75-7.67(m,1H),7.56-7.49(m,1H),7.34-7.23(m,1H),7.25-7.12(m,2H),3.85-3.81(m,1H),3.80-3.75(m,2H),3.70-3.61(m,2H),3.59-3.54(m,1H),3.42(d,3H),2.90(s,1H),2.64(t,1H),2.54-2.40(m,3H),2.31-2.25(m,1H),2.10-2.02(m,1H),1.97-1.91(m,1H),1.80(s,3H).
实施例7化合物3-((3S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-3-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(R)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(S)-3-(羟甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(2.17g,10mmol)溶于DCM(44mL)，0℃加入戴斯-马丁氧化剂(5.1g,12mmol)，保温反应1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)，继续搅拌30分钟，分层，有机 层依次用饱和碳酸氢钠溶液(40mL×3)和饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩有机层，得微黄色油状物(1.72g,80％)。
步骤2)化合物(S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-3-甲酰基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.72g,8mmol)溶于DCM(40mL)，25℃加入(三苯基膦烯)乙酸乙酯(2.78g,8mmol)，保温反应12小时，过滤，浓缩滤液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝10/1)得到无色油状物(1.78g,78％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:186.2[M+H-100]+.
步骤3)化合物(S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.78g,6.2mmol)、无水乙醇(40mL)和Pd-C(10％,0.2g)，氢气氛围下30℃反应12小时，过滤，浓缩滤液得到无色油状物(1.66g,93％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:188.1[M+H-100]+.
步骤4)化合物(S)-3-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-3-基)丙酸的合成
将(S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.66g,5.8mmol)溶于无水乙醇(10mL)，加入LiOH.H2O(2.43g,58mmol)的水(10mL)溶液，25℃反应30分钟，加入EtOAc(150mL)和水(50mL)，冰浴冷却，用浓盐酸调pH至5-6，分层，有机层用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩有机层后得到无色油状物(1.44g,96％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.1[M+H-100]+.
步骤5)化合物(S)-3-(吗啉-3-基)丙酸盐酸盐的合成
于反应瓶中依次加入(S)-3-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-3-基)丙酸(1.44g,5.55mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,15mL)，25℃反应4小时，过滤，得到白色固体(0.92g,85％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:160.3[M+H]+.
步骤6)化合物3-((3S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-3-基)丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(184mg,0.43mmol)、(S)-3-(吗啉-3-基)丙酸盐酸盐(85mg,0.43mmol)、碳酸钾(119mg,0.87mmol)和乙醇(5mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(35mg,15％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:503.2[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.85(d,1H),7.45(d,1H),7.43-7.36(m,2H),6.97(t,2H),3.88-3.84(m,1H),3.85-3.79(m,2H),3.70-3.62(m,2H),3.58-3.56(m,1H),3.46(2s,3H),2.91(s,1H),2.66(t,1H),2.55-2.39(m,3H),2.38-2.28(m,1H),2.13-2.02(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.88(s,3H).
实施例8化合物3-((2R,3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(2S,3R)-2-(苄胺)-3-羟基丁酸的合成
于反应瓶中依次加入L-苏氨酸(16.7g,140mmol)、氢氧化钠溶液(2mol/L,70mL,140mmol)和苯甲醛(14.56g,137mmol)，25℃反应1小时，降温至0℃，分批加入硼氢化钠(3g,80mmol)，加毕，升温至25℃反应12小时。反应结束后，用DCM(30mL×3)萃取，分层后，弃去有机层。10℃下，用浓盐酸调水层的pH至2后，5℃搅拌析晶4小时，过滤，得到白色固体(19.5g,68％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:210.1[M+H]+.
步骤2)化合物(2R,3S)-4-苄基-2-甲基-5-氧代吗啉-3-甲酸的合成
于反应瓶中依次加入(2S,3R)-2-(苄胺)-3-羟基丁酸(21.4g,102.4mmol)、四氢呋喃(110mL)和碳酸钾(42.5g,307.2mmol)的水(70mL)溶液，0℃下，缓慢滴加氯乙酰氯(17.8g,157.7mmol)，滴毕，0℃反应3小时后，滴加氢氧化钠(16.4g,409.6mmol)的水(40mL)溶液，滴毕，5℃反应4小时，升温至25℃后，反应液用PE(50mL×2)萃取，分层后，水层冷却至15℃，缓慢滴加浓盐酸调pH至析出大量固体，10℃搅拌12小时，过滤，滤饼用水洗涤后，得到白色固体(18.1g,71％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:250.1[M+H]+.
步骤3)化合物((2R,3R)-4-苄基-2-甲基吗啉-3-基)甲醇的合成
0℃氮气保护下，将70％红铝甲苯溶液(153mL,549mmol)缓慢滴入(2R,3S)-4-苄基-2-甲基-5-氧代吗啉-3-甲酸(26.5g,106mmol)的甲苯(237mL)溶液中，滴毕，25℃反应12小时，降温至10℃，滴加乙醇(43mL)，用氢氧化钠溶液(2mol/L,50mL×3)洗涤，分层后，弃去水层，有机层用盐酸(2mol/L,100mL×2)萃取，分层后，弃去有机层，向水层中加入EtOAc(300mL)，用氢氧化钠溶液(2mol/L)调pH至7-8，分层后，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到淡黄色固体(12.2g,52％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:222.1[M+H]+.
步骤4)化合物(2R,3R)-3-(羟甲基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入((2R,3R)-4-苄基-2-甲基吗啉-3-基)甲醇(9.5g,43mmol)、MeOH(100mL)、Pd/C(0.95g,10％)和(Boc)2O(10g,46mmol)，氢气氛围25℃反应24小时，过滤，滤液浓缩后，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝2/1)得到淡黄色油状物(8.5g,85％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:132.2[M+H-100]+.
步骤5)化合物(2R,3S)-3-甲酰基-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(2R,3R)-3-(羟甲基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(8.5g,36.7mmol)和DCM(170mL)，0℃加入戴斯-马丁氧化剂(18.7g,44mmol)，保温反应3小时，加入饱和NaHCO3溶液(170mL)， 搅拌30分钟，分层后，有机层依次用饱和NaHCO3溶液(85mL×2)和饱和食盐水(85mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，有机层浓缩后得到无色油状物(5.8g,69％)。
步骤6)化合物(2R,3R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中加入(2R,3S)-3-甲酰基-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.3g,5.6mmol)和DCM(40mL)，0℃加入乙氧甲酰基亚甲基三苯基膦(1.95g,5.6mmol)，25℃反应12小时，浓缩反应液，残余物经柱层析分离纯化(EtOAc/PE(v/v)＝1/16)得到无色油状物(0.73g,41％)。
MS(ESI,Pos.ion)m/z:200.2[M+H-100]+；
1H NMR(600MHz,CDCl3):δ6.96(dd,1H),5.89(dd,1H),4.21-4.04(m,2H),4.04-3.90(m,1H),3.90-3.79(m,1H),3.79-3.22(m,4H),1.44(s,9H),1.40(s,3H),1.26(m,3H).
步骤7)化合物(2R,3R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中加入(2R,3R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.73g,2.4mmol)、EtOAc(35mL)和Pd/C(10％,0.73g,6.86mmol)，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩后得到无色油状物(0.7g,95％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:202.2[M+H-100]+.
步骤8)化合物3-((2R,3R)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸的合成
于反应瓶中加入(2R,3R)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.84g,2.8mmol)、乙醇(10mL)和LiOH.H2O(1.2g,28mmol)的水(10mL)溶液，25℃反应30分钟，加入EtOAc(15mL)和水(10mL)，0℃用浓盐酸调pH至5～6，分层，有机层用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到无色油状物(0.62g,86％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:174.2[M+H-100]+；
MS(ESI,Neg.ion)m/z:272.2[M-H]-.
步骤9)化合物3-((2R,3R)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸盐酸盐的合成
于反应瓶中加入3-((2R,3R)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸(0.62g,2.3mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,10mL)，25℃反应4小时，过滤，滤饼用EtOAc(10mL)洗涤，得到灰白色固体(0.36g,92％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:174.1[M+H]+.
步骤10)化合物3-((2R,3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(90mg,0.21mmol)、3-((2R,3R)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸盐酸盐(36mg,0.21mmol)、碳酸钾(59mg,0.42mmol)和乙醇(2.5mL)按实施例1步骤5中所述的方法实施得到黄色油状物(28mg,28％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:517.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.87-7.83(m,1H),7.47(d,1H),7.42(dd,2H),6.97(t,2H),4.12-3.99(m,2H),3.83-3.68(m,3H),3.50(s,2H),3.42(s,2H),2.43-2.28(m,5H),2.06-2.01(m,1H),1.88(d,3H),1.42(d,3H).
实施例9化合物3-((2S,3S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(2R,3S)-2-(苄胺)-3-羟基丁酸的合成
于反应瓶中依次加入D-苏氨酸(16.7g,140mmol)、氢氧化钠溶液(2mol/L,70mL,140mmol)和苯甲醛(14.56g,137mmol)，25℃反应1小时，降温至0℃，分批加入硼氢化钠(3g,80mmol)，加毕，升温至25℃反应12小时，停止反应，用DCM(30mL×3)萃取，分层后，弃去有机层，水层降温至5℃，用浓盐酸调pH至1-2，保温搅拌析晶4小时，过滤，得到白色固体(20.9g,73％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:210.1[M+H]+.
步骤2)化合物(2S,3R)-4-苄基-2-甲基-5-氧代吗啉-3-甲酸的合成
于反应瓶中依次加入(2R,3S)-2-(苄胺)-3-羟基丁酸(21.4g,102.4mmol)、四氢呋喃(110mL)和碳酸钾(42.5g,307.2mmol)的水(70mL)溶液，0℃缓慢滴加氯乙酰氯(17.8g,157.7mmol)，滴毕，保温反应3小时，滴加氢氧化钠(16.4g,409.6mmol)的水(40mL)溶液，滴毕，降温至3℃反应4小时，升温至25℃，反应液用PE(50mL×2)萃取，水层冷却至15℃，滴加浓盐酸调pH至大量固体析出，10℃搅拌12小时，过滤，滤饼用水洗涤，得到白色固体(16.1g,63％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:250.1[M+H]+.
步骤3)化合物((2S,3S)-4-苄基-2-甲基吗啉-3-基)甲醇的合成
0℃氮气保护下，将70％红铝甲苯溶液(153mL,549mmol)缓慢滴入(2S,3R)-4-苄基-2-甲基-5-氧代吗啉-3-甲酸(26.5g,106mmol)的甲苯(237mL)溶液中，滴毕，25℃反应12小时，降温至10℃，滴加乙醇(43mL)，用氢氧化钠(50mL×3,2mol/L)洗涤，有机层用盐酸(100mL×2,2mol/L)萃取，分层后，弃去有机层，水层加入EtOAc(300mL)，用氢氧化钠溶液(2mol/L)调pH至8，分层后，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到淡黄色固体(9.5g,40％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:222.1[M+H]+.
步骤4)化合物(2S,3S)-3-(羟甲基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入((2S,3S)-4-苄基-2-甲基吗啉-3-基)甲醇(9.5g,43mmol)、MeOH(100mL)、Pd/C(0.95g,10％)和(Boc)2O(10g,46mmol)，氢气氛围25℃反应24小时，过滤，浓缩滤液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝2/1)得到淡黄色油状物(8.9g,90％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:132.2[M+H-100]+.
步骤5)化合物(2S,3S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
0℃下将戴斯-马丁氧化剂(19.5g,46mmol)加入(2S,3S)-3-(羟甲基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(8.9g,38mmol)的DCM(250mL)溶液中，加毕，保温反应3小时，加入2-(三苯基膦烯)乙酸乙酯(40g,115mmol)，升温至25℃反应12小时，加入饱和NaHCO3溶液(250mL)，搅拌1小时后静置分层，有机层依次用饱和NaHCO3溶液(150mL×2)和饱和食盐水(150mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后，残余物经柱 层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝20/1)得到淡黄色油状物(9.5g,83％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:200.2[M+H-100]+.
步骤6)化合物(2S,3S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(2S,3S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(9.5g,32mmol)、MeOH(200mL)和Pd/C(0.95g,10％)，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩后得到无色油状物(8g,83％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:202.3[M+H-100]+.
步骤7)化合物3-((2S,3S)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基吗啉-3-基)-丙酸的合成
于反应瓶中依次加入(2S,3S)-3-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(7.9g,26.2mmol)、乙醇(150mL)和LiOH.H2O(4.2g,100mmol)的水(50mL)溶液，25℃反应30分钟，浓缩反应液，加入EtOAc(300mL)和水(100mL)，0℃下，用浓盐酸调pH至4-6，分层后，有机层用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到无色油状物(6.5g,91％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:174.2[M+H-100]+.
步骤8)化合物3-((2S,3S)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸盐酸盐的合成
于反应瓶中依次加入3-((2S,3S)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基吗啉-3-基)-丙酸(1g,3.7mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,10mL)，25℃反应4小时，过滤，得到白色固体(0.6g,77％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:174.3[M+H]+；
1H NMR(600MHz,D2O):δ4.05(dd,1H),3.84-3.79(m,1H),3.74-3.70(m,1H),3.34(d,1H),3.21(td,1H),3.10(td,1H),2.55(t,2H),2.06-2.03(m,1H),1.82-1.76(m,1H),1.26(d,3H).
步骤9)化合物3-((2S,3S)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(283mg,0.67mmol)、3-((2S,3S)-2-甲基吗啉-3-基)丙酸盐酸盐(140mg,0.67mmol)、碳酸钾(190mg,1.36mmol)和乙醇(10mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(113mg,33％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:517.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.22(s,1H),7.86(t,1H),7.44(d,3H),6.98(t,2H),4.15-3.90(m,2H),3.85-3.65(m,3H),3.51(s,2H),3.45(s,2H),2.42-2.21(m,5H),2.08-2.05(m,1H),1.78(d,3H),1.42(d,3H).
实施例10化合物3-((2R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-2-基)-2-甲基丙酸的合成
步骤1)化合物(R)-2-(3-乙氧基-2-甲基-3-氧代丙烷-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸苄酯的合成
将(S)-2-甲酰基吗啉-4-甲酸苄酯(4.99g,20mmol)溶于DCM(180mL)，加入乙氧甲酰基亚乙基三苯基膦(7.25g,20mmol)，25℃反应12小时，过滤，浓缩滤液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝15/1)得到无色油状物(3g,45％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:334.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.38-7.30(m,5H),6.48(d,1H),5.12(s,2H),4.31-4.23(m,1H),4.13(q,2H),3.84-3.79(m,3H),3.52(td,1H),3.02(br,1H),2.83(br,1H),1.83(s,3H),1.22(t,3H).
步骤2)化合物(R)-3-(4-((苄氧)羰基)吗啉-2-基)-2-甲基丙烯酸的合成
将(R)-2-(3-乙氧基-2-甲基-3-氧代丙烷-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸苄酯(2.3g,6.9mmol)溶于乙醇(46mL)，加入LiOH.H2O(2.89g,69mmol)的水(23mL)溶液，25℃反应1小时，浓缩反应液，向残余物中加入EtOAc(250mL)，用浓盐酸调pH至4-5，分层，有机层用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到无色油状物(2g,95％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:306.2[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.82(br,1H),7.41-7.33(m,5H),6.74(d,1H),5.19(s,2H),4.33-4.20(m,1H),4.05-3.85(m,3H),3.64-3.58(m,1H),3.20-3.05(m,1H),2.88(br,1H),1.93(s,3H).
步骤3)化合物3-((R)-4-((苄氧)羰基)吗啉-2-基)-2-甲基丙酸的合成
于反应瓶中依次加入(R)-3-(4-((苄氧)羰基)吗啉-2-基)-2-甲基丙烯酸(2g,6.6mmol)、Pd/C(10％,200mg)和乙醇(40mL)，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，浓缩滤液，得到无色油状物(1.9g,94％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:308.1[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.70(br,1H),7.41-7.33(m,5H),5.17(s,2H),4.07-3.85(m,3H),3.59-3.42(m,2H),3.02(br,1H),2.84-2.67(m,2H),2.03-1.78(m,1H),1.65-1.45(m,1H),1.31-1.22(m,3H).
步骤4)化合物2-甲基-3-((R)-吗啉-2-基)丙酸的合成
将3-((R)-4-((苄氧)羰基)吗啉-2-基)-2-甲基丙酸(0.7g,2.3mmol)溶于苯甲醚(14mL)，氮气保护0℃下，加入无水三氯化铝(1.84g,13.8mmol)，加毕，升温至25℃反应12小时，冰浴降温，滴加水(20mL)，随后加入EtOAc(40mL)，分层，弃去有机层，水层用EtOAc(40mL×4)萃取，水层用氢化化钠溶液(3mol/L)调pH至7，离心，取上清液，浓缩上清液得产物粗品，白色固体(0.4g,100％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:174.3[M+H]+.
步骤5)化合物3-((2R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-2-基)-2-甲基丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(614mg,1.45mmol)、2-甲基-3-((R)-吗啉-2-基)丙酸(251mg,1.45mmol)、碳酸钾(404mg,2.89mmol)和乙醇(10mL)按实施例1步骤5中所述的方法实施得到黄色油状物(35mg,5％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:517.8[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.34(d,1H),7.84(t,1H),7.41(d,3H),6.97(t,2H),3.95-3.84(m,2H),3.76-3.67(m,2H),3.62(t,2H),3.45(d,3H),2.69-2.62(m,3H),2.55-2.48(m,2H),2.43-2.30(m,3H),1.89(s,3H),1.64-1.53(m,2H).
实施例11化合物3-(2R,3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-2-甲基丙酸的合成
步骤1)化合物(2R,3R)-3-(3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,3S)-3-甲酰基-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(2.29g,10mmol)溶于DCM(100mL)，0℃加入2-(三苯基膦亚基)丙酸甲酯(3.48g,10mmol)，25℃反应12小时，浓缩反应液，残余物经柱层析分离纯化(EtOAc/PE(v/v)＝1/16)得到无色油状物(1.59g,53％)。
MS(ESI,Pos.ion)m/z:200.1[M+H-100]+.
步骤2)化合物(2R,3R)-3-(3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,3R)-3-(3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.59g,5.3mmol)溶于MeOH(50mL)，加入Pd/C(1.59g,1.5mmol)，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，浓缩滤液，得到无色油状物(1.15g,72％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:202.2[M+H-100]+.
步骤3)化合物3-((2R,3R)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基吗啉-3-基)-2-甲基丙酸的合成
将(2R,3R)-3-(3-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-2-甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.0g,3.3mmol)溶于乙醇(35mL)，加入LiOH.H2O(1.38g,33mmol)的水(35mL)溶液，25℃反应30分钟，加入EtOAc(60mL)和水(30mL)，0℃下滴加浓盐酸调pH至5～6，分层，有机层用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到无色油状物(0.9g,90％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:188.1[M+H-100]+.
步骤4)化合物3-((2R,3R)-2-甲基吗啉-3-基)-2-甲基丙酸盐酸盐的合成
于反应瓶中加入3-((2R,3R)-4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基吗啉-3-基)-2-甲基丙酸(0.9g,3mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,60mL)，25℃反应4小时，浓缩反应液，得到浅棕色油状物(0.51g,76％)。
MS(ESI,Pos.ion)m/z:188.3[M+H]+.
步骤5)化合物3-(2R,3R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-2-甲基丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(283mg,0.67mmol)、3-((2R,3R)-2-甲基吗啉-3-基)-2-甲基丙酸盐酸盐(170mg,0.76mmol)、碳酸钾(190mg,1.36mmol)和乙醇(10mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(51mg,14％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:531.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.89(d,1H),7.52-7.36(m,3H),6.99(t,2H),4.13-4.03(m,1H),4.01-3.89(m,2H),3.78-3.71(m,1H),3.69-3.64(m,1H),3.63-3.59(m,1H),3.57-3.50(m,1H),3.50-3.41(m,3H),3.38(d,1H),3.28-3.17(m,1H),2.83-2.62(m,2H),2.60-2.44(m,3H),2.40-2.20(m,2H),1.93-1.84(dd,3H).
实施例12化合物5-((2R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-吗啉-2-基)戊酸的合成
步骤1)化合物(R)-3-(吗啉-2-基)丙酸乙酯的合成
于反应瓶中依次加入(R)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)吗啉-4-甲酸苄酯(3.4g,10.65mmol)、Pd/C(10％,340mg)和乙醇(60mL)，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩后得到无色油状物(1.9g,95.5％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:188.2[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ4.05(q,2H),3.70-3.67(m,2H),3.38(td,1H),3.75(d,1H),2.66-2.57(m,2H),2.37-2.27(m,3H),1.63-1.52(m,2H),1.18(t,3H).
步骤2)化合物(R)-2-(3-乙氧基-3氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(R)-3-(吗啉-2-基)丙酸乙酯(1.83g,9.77mmol)、(Boc)2O(2.56g,11.73mmol)和乙醇(40mL)，25℃加入三乙胺(1.48g,14.66mmol)，保温反应12小时，浓缩反应液，向残余物中加入EtOAc(200mL)，有机层依次用1％盐酸(100mL×2)和饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到微黄油状物(2.8g,100％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:232.3[M+H-56]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ4.05(q,2H),3.80-3.67(m,3H),3.36-3.23(m,2H),2.83(br,1H),2.53(br,1H),2.43-2.30(m,2H),1.73-1.56(m,2H),1.40(s,9H),1.18(t,3H).
步骤3)化合物(R)-2-(3-羟丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入四氢锂铝(0.43g,11.34mmol)，0℃加入无水四氢呋喃(40mL)，滴加(R)-2-(3-乙氧基-3氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(2.7g,9.45mmol)的无水四氢呋喃(20mL)溶液，滴毕，保温反应1小时，依次加入水(0.5mL)、氢氧化钠溶液(10％,1mL)和水(1.5mL)，继续搅拌30分钟，加入EtOAc(300mL)，有机层用饱和食盐水(150mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，滤液浓缩后，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝2/1)得到无色油状物(1.34g,58％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:190.2[M+H-56]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.93-3.82(m,3H),3.71-3.62(m,2H),3.53(td,1H),3.41-3.35(m,1H),2.93(td,1H),2.65(dd,1H),2.12(s,1H),1.75-1.68(m,2H),1.64-1.52(m,2H),1.48(s,9H).
步骤4)化合物(R)-2-(3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(R)-2-(3-羟丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.34g,5.5mmol)和DCM(50mL)，0℃加入戴斯-马丁氧化剂(2.8g,6.6mmol)，保温反应1小时，加入饱和NaHCO3溶液(50mL)淬灭反应，继续搅拌20分钟后，分层，有机层依次用饱和NaHCO3溶液(50mL×2)和饱和氯化钠水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后残余物直接用于下一步反应。
步骤5)化合物(R)-2-(5-乙氧基-5-氧代戊基-3-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-2-(3-氧代丙基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.93g,3.83mmol)溶于DCM(50mL)，25℃加入(三苯基膦烯)乙酸乙酯(1.33g,3.83mmol)，保温反应12小时，过滤，滤液浓缩后，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝6/1)得到无色油状物(0.86g,72％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:214.3[M+H-100]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.99-6.91(m,1H),5.87-5.81(m,1H),4.19(q,2H),3.90-3.80(m,3H),3.48(td,1H),3.37-3.31(m,1H),2.95-2.75(m,1H),2.59(t,1H),2.42-2.22(m,2H),1.69-1.58(m,2H),1.46(s,9H),1.29(t,3H).
步骤6)化合物(R)-2-(5-乙氧基-5-氧代戊基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
于反应瓶中依次加入(R)-2-(5-乙氧基-5-氧代戊基-3-烯-1-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.86g,2.74mmol)、Pd/C(10％,172mg)和乙醇(30mL)，氢气氛围25℃反应12小时，过滤，滤液浓缩后得到无色油状物(0.75g,100％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:216.3[M+H-100]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.12(q,2H),3.88-3.78(m,3H),3.48(td,1H),3.35-3.27(m,1H),2.90(td,1H),2.56(t,1H),2.29(t,2H),1.69-1.59(m,2H),1.54-1.48(m,2H),1.46(s,9H),1.43-1.31(m,2H),1.25(t,3H).
步骤7)化合物(R)-5-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-2-基)戊酸的合成
于反应瓶中依次加入(R)-2-(5-乙氧基-5-氧代戊基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.75g,2.38mmol)、乙醇(7.5mL)和LiOH.H2O(1g,23.8mmol)的水(7.5mL)溶液，25℃反应1小时，向反应液中加入EtOAc(180mL)和水(50mL)，用浓盐酸调pH至6-7，分层后，有机层用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到无色油状物(0.5g,74％)。
MS(ESI,neg.ion)m/z:286.2[M-H]-；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.04(br,1H),3.95-3.75(m,3H),3.50(td,1H),3.38-3.30(m,1H),2.93(td,1H),2.58(t,1H),2.36(t,2H),1.73-1.63(m,2H),1.58-1.49(m,2H),1.47(s,9H),1.44-1.34(m,2H).
步骤8)化合物(R)-5-(吗啉-2-基)戊酸盐酸盐的合成
于反应瓶中依次加入(R)-5-(4-(叔丁氧羰基)吗啉-2-基)戊酸(0.5g,1.74mmol)、EtOAc(1mL)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,8mL)，25℃反应3小时，过滤，用少量EtOAc洗涤，25℃真空干燥6小时，得到白色固体(0.31g,80％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:188.2[M+H]+；
1H NMR(400MHz,D2O):δ4.03(dd,1H),3.81-3.71(m,2H),3.27(t,2H),3.10(td,1H),2.85(t,1H),2.32(t,2H),1.59-1.45(m,4H),1.44-1.27(m,2H).
步骤9)化合物5-((2R)-4-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)- 吗啉-2-基)戊酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(283mg,0.67mmol)、(R)-5-(吗啉-2-基)戊酸盐酸盐(150mg,0.67mmol)、碳酸钾(190mg,1.36mmol)和乙醇(10mL)按实施例1步骤5中所述的方法实施得到黄色油状物(81mg,23％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:531.3[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.44(s,1H),7.88(d,1H),7.48-7.41(m,3H),6.99(t,2H),3.92(d,1H),3.75(dd,1H),3.71-3.56(m,3H),3.49(s,3H),2.72(s,2H),2.48-2.31(m,3H),2.17-2.06(m,1H),1.92(s,3H),1.75-1.63(m,2H),1.60-1.50(m,2H),1.49-1.39(m,2H).
实施例13化合物3-((2S)-4,4-二氟-1-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吡咯烷-2-基)丙酸的合成
步骤1)化合物(R)-4,4-二氟-2-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-4,4-二氟-2-(羟甲基)吡咯-1-甲酸叔丁酯(10g,42.2mmol)、DCM(200mL)与戴斯-马丁氧化剂(21.5g,50.6mmol)按实施例5步骤1所述的方法实施得到浅黄色油状物(4.8g,48％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:180.1[M+H-56]+.
步骤2)化合物(R)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基-1-烯-1-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-4,4-二氟-2-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.84g，20.57mmol)、DCM(120mL)与乙氧甲酰基亚甲基三苯基膦(8.59g,24.69mmol)按实施例4步骤1中所述的方法实施得到浅黄色油状物(3.83g,61％)。MS(ESI,pos.ion)m/z:206.0[M+H-100]+.
步骤3)化合物(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.8g，12.4mmol)、MeOH(80mL)和Pd/C(10％,0.38g)按实施例4步骤2所述方法实施得到无色油状物(3.3g,86％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:208.1[M+H-100]+.
步骤4)化合物(S)-3-(1-(叔丁氧羰基)-4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸的合成
将(S)-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.2g,10.4mmol)、乙醇(32mL)和LiOH.H2O(2.2g,52.1mmol)的水(32mL)溶液按实施例4步骤3所述的方法实施得到浅褐色油状物(2.53g,87％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:224.1[M+H-56]+.
步骤5)化合物(S)-3-(4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸盐酸盐的合成
将(S)-3-(1-(叔丁氧羰基)-4,4-二氟吡咯烷-2-基)丙酸(2.5g,9mmol)和氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,50mL)按实施例4步骤4所述方法实施得到白色粉末(1.6g,83％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:180.2[M+H]+；
1H NMR(600MHz,D2O):δ4.00-3.94(m,1H),3.82(dd,1H),3.72(dd,1H),2.83-2.76(m,1H),2.57-2.47(m,2H),2.39-2.32(m,1H),2.16-2.03(m,2H).
步骤6)化合物3-((2S)-4,4-二氟-1-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吡咯烷-2-基)丙酸的合成
将6-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(614mg,1.45mmol)、(2S)-4,4-二氟-吡咯烷-2-基)丙酸盐酸盐(312mg,1.45mmol)、碳酸钾(808mg,5.80mmol)和乙醇(20mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(48mg,6％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:523.8[M+H]+；
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.09(d,1H),7.84(t,1H),7.49-7.33(m,3H),7.01-6.95(m,2H),3.59(d,1H),3.50(s,1H),3.39(s,2H),3.22-3.20(m,1H),3.18-3.04(m,2H),2.55-2.43(m,1H),2.38-2.22(m,3H),1.85(s,3H),1.77-1.66(m,1H).
实施例14化合物(3S)-4-((6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吗啉-3-甲酸盐酸盐的合成
步骤1)化合物2-(2-溴-4-氟苄叉基)-3-氧代丁酸甲酯的合成
于反应瓶中加入2-溴-4-氟苯甲醛(30.0g,147.8mmol)、乙酰乙酸甲酯(19.22g,147.8mmol)、哌啶(1.01g,11.82mmol)、醋酸(768.9mg,11.82mmol)和乙醇(120mL)，30℃反应12小时，浓缩反应液，残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝20/1)得到浅黄色液体(29.7g,66.7％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:301.0[M+H]+.
步骤2)化合物2-乙酰基-3-(2-溴-4氟苯基)-丁酸甲酯的合成
于反应瓶中加入CuI(16.2g,85mmol)和无水四氢呋喃(200mL)，氮气保护0℃下，缓慢滴加甲基锂的***溶液(1.6mol/L,53.2mL,85mmol)，保温反应1小时后降温至-78℃，滴加2-(2-溴-4-氟苄叉基)-3-氧代丁酸甲酯(10.0g,34.0mmol)的无水四氢呋喃(50mL)，滴毕，保温反应1小时，加入饱和氯化铵溶液(50mL)，EtOAc(100mL×2)萃取，有机层用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后残余物经柱层析分离纯化(PE/EtOAc(v/v)＝20/1)得到浅黄色油状物(7.98g,73.9％)。
MS(ESI,neg.ion)m/z:315.0[M-H]-.
步骤3)化合物2-乙酰基-3-(2-溴-4-氟苯基)-2-丁烯酸甲酯的合成
将2-乙酰基-3-(2-溴-4氟苯基)-丁酸甲酯(14.0g,44.2mmol)溶于无水四氢呋喃(200mL)，氮气保护下加入氢化钠(60％,2.65g,66.3mmol)，25℃滴加苯基氯化硒(12.7g,66.3mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液，滴毕，保温反应1小时，加入PE/***的混合溶剂(150mL,v/v＝1/1)，依次用饱和碳酸氢钠溶液(60 mL)和饱和食盐水(50mL)洗涤，浓缩有机层，加入DCM(150mL)，H2O2溶液(30％,14mL)，25℃反应2小时，加入DCM(100mL)，有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(60mL)和饱和食盐水(60mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩有机层后残余物经柱层析分离纯化(EtOAc/正己烷(v/v)＝1/20)得到浅黄色液体(10.0g,71％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:315.00[M+H]+.
步骤4)化合物4-(2-溴-4氟苯基)-4,6-二甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯的合成
将2-噻唑甲脒盐酸盐(10.4g,63.6mmol)和碳酸氢钠(10.7g,127.2mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(200mL)中，升温至120℃，滴加2-乙酰基-3-(2-溴-4-氟苯基)-2-丁烯酸甲酯(10.0g,31.8mmol)的N-甲基吡咯烷酮(10mL)溶液，保温反应5小时，冷却至30℃，加水(300mL)，EtOAc(600mL)萃取，有机层浓缩后，残余物经柱层析分离纯化(EtOAc/正己烷(v/v)＝1/3)得到黄色固体(1.28g,10.0％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:424.0[M+H]+.
步骤5)化合物4-(2-溴-4氟苯基)-6-(溴甲基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯的合成
将4-(2-溴-4氟苯基)-4,6-二甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.5g,1.18mmol)溶于DCM(30mL)，40℃加入NBS(0.23g,1.3mmol)，保温反应30分钟，浓缩反应液得到黄色油状物(0.3g,50％)。
步骤6)化合物(3S)-4-((6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吗啉-3-甲酸的合成
于反应瓶中加入4-(2-溴-4氟苯基)-6-(溴甲基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.24g,0.47mmol)、(S)-3-吗啉甲酸(61.6mg,0.47mmol)、碳酸钾(129.9mg,0.94mmol)和无水乙醇(20mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色油状物(25mg,9.1％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:552.05[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ8.14(d,2H),7.69(dd,1H),7.56(d,1H),7.29(td,1H),4.17(s,3H),4.03(d,4H),3.83(s,3H),3.34(d,3H),2.02(d,3H).
实施例15化合物(2S)-1-((6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)-甲基)-4,4-二氟吡咯烷-2-甲酸的合成
于反应瓶中依次加入4-(2-溴-4氟苯基)-4-甲基-6-溴甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.6g,1.18mmol)、(S)-4,4-二氟吡咯烷-2-甲酸盐酸盐(0.22g,1.18mmol)、碳酸钾(0.33g,2.36mmol)和无水乙醇(20mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色固体(0.17g,24.3％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:573.05[M+H]+；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.03(d,2H),7.68(s,1H),7.51(s,1H),7.27(s,1H),4.20-3.83(m,3H),3.78 (d,1H),3.46(d,1H),3.32(s,2H),3.16(d,1H),2.76(s,1H),2.46-2.35(m,1H),2.05-1.85(m,3H).
实施例16化合物(2R,3S)-4-((6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)-2-甲基吗啉-3-甲酸的合成
将4-(2-溴-4-氟苯基)-4-甲基-6-溴甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(0.6g,1.18mmol)、(2R,3S)-2-甲基吗啉-3-甲酸(0.17g,1.18mmol)、碳酸钾(325.7mg,2.36mmol)和无水乙醇(20mL)按实施例1步骤5所述的方法实施得到黄色固体(0.1g,15％)。
MS(ESI,pos.ion)m/z:567.1[M+H]+；
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ8.03(d,2H),7.68(s,1H),7.51(s,1H),7.27(s,1H),4.20-3.83(m,3H),3.78(d,1H),3.46(d,1H),3.32(s,2H),3.16(d,1H),2.76(s,1H),2.46-2.35(m,1H),2.05-1.85(m,3H).
实施例17：用HBV HepG2.2.15细胞株进行体外抗HBV药效活性测定实验
1、实验方法：
qPCR检测细胞培养液病毒DNA含量并计算化合物对病毒抑制一半时的浓度(EC50)，具体实验方法如下：
接种HepG2.2.15细胞到96孔细胞培养板(40,000细胞/孔)，第二天加入不同浓度待测化合物的细胞培养液处理细胞(化合物最高终浓度为16.4μM，3倍梯度稀释，9个稀释点，双复孔)。第五天更换含待测药物的培养液，第八天收集培养上清并提取上清中的DNA。
病毒DNA提取：参照QIAamp 96DNA Blood Kit(QIAGEN 51161)。
定量PCR：按照PCR体系配置反应混合液，将混合液加入96孔PCR反应板(定量专用)；加入按比例稀释好的标准品模板(标准品模板最高浓度为1×107拷贝数/μl，9倍稀释7个点，最低浓度为10拷贝数/μl)；加入样本模板；用封板膜将96孔板封上；按照设定程序运行定量PCR仪。
化合物对HBV复制抑制百分率计算：％Inh.＝【1-加化合物处理HBV DNA量/DMSO对照处理HBV DNA量】×100。
计算化合物对HBV复制的EC50值：应用GraphPad Prism 5分析软件，选用“四参数逻辑斯谛方程”从而计算出EC50值。
2、实验结果：见表2
表2：化合物在HBV HepG2.2.15细胞株的抗HBV活性
实施例 EC<sub>50</sub>(μmol) 实施例 EC<sub>50</sub>(μmol)
实施例1 0.4 实施例7 0.09
实施例2 0.3996 实施例9 0.12
实施例4 0.8 实施例10 0.45
实施例5 1.0 实施例12 0.6
实施例6 0.9 实施例13 0.4
3、结论：
本发明所述的化合物显示出较强的抗HBV病毒的作用。这类化合物对HBV具有出乎预料的抗病毒活性，因此适用于治疗因HBV病毒感染引起的各种疾病。
实施例18：测试化合物在ICR小鼠体内的PK测定实验
1、实验方法：
ICR小鼠经口灌胃给予10mg/kg或经尾静脉注射2mg/kg的测试化合物。
给药后按时间点(0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8和24小时)眼眶静脉采血，收集于加EDTA-K2的抗凝管内。血浆样品经液液萃取后，在三重四极杆串联质谱仪上，以多重反应离子监测(MRM)方式进行定量分析。采用WinNonlin 6.3软件用非房室模型法计算药动学参数。
2、实验结果：见表3：
表3：化合物在ICR小鼠体内的PK数据
注：Roche-11—(2S)-4,4-二氟-1-((6-(4-氟苯基)-5-(甲氧羰基)-6-甲基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)甲基)吡咯-2-甲酸(具体合成参见专利WO2013144129A1)；N/A—表示没有进行相关检测；AUClast—0-24h的AUC；AUCINF—0-无穷时间的AUC；
表3结果显示：ICR小鼠灌胃给药后，实施例1在小鼠体内吸收迅速，在血浆中的达峰时间为0.083小时，实施例1的AUClast为1430hr*ng/mL暴露量较好，明显高于Roche-11，说明化合物在小鼠体内的吸收良好。静脉给药后，实施例1的清除率为4.68L/h/Kg，稳态表观分布容积为0.41L/kg。以实施例的AUClast计算，小鼠灌胃给予10mg/kg实施例1的绝对生物利用度分别为67.14％，生物利用度较好，高于Roche-11的31％。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种化合物，其包含以下其中之一的结构或其中之一结构的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、立体异构体或药学上可接受的盐：
2.一种药物组合物，其包含权利要求1所述的化合物，及其药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或它们的组合。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其进一步包含抗HBV药物。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述抗HBV药物为HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂或干扰素。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中，所述抗HBV药物为选自拉米夫定、替比夫定、替诺福韦酯、恩替卡韦、阿德福韦酯、Alfaferone、Alloferon、西莫白介素、克拉夫定、恩曲他滨、法普洛韦、干扰素、宝甘灵CP、因特芬、干扰素α-1b、干扰素α、干扰素α-2a、干扰素β-1a、干扰素α-2、白细胞介素-2、米伏替酯、硝唑尼特、聚乙二醇干扰素α-2a、病毒唑、罗扰素-A、西佐喃、Euforavac、安普利近、Phosphazid、Heplisav、干扰素α-2b、左旋咪唑和丙帕锗中的至少一种。
6.权利要求1所述化合物或权利要求2-5任一项所述药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、处理、治疗或减轻患者病毒性疾病。
7.根据权利要求6所述的用途，其中，所述病毒性疾病是指乙型肝炎感染或乙型肝炎感染引起的疾病。
8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述乙型肝炎感染引起疾病是指肝硬化或肝细胞癌变。
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WO2018045911A1 (zh) * 2016-09-09 2018-03-15 浙江海正药业股份有限公司 二氢嘧啶类化合物及其制备方法和用途
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MY194471A (en) * 2016-11-18 2022-11-30 Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd Dihydropyrimidine compound and preparation method and use thereof
EP3856740A4 (en) * 2018-09-30 2021-12-15 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. CONDENSED TETRACYCLIC COMPOUNDS AND USES THEREOF IN MEDICINE
CA3130596A1 (en) 2019-03-25 2020-10-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Solid forms of a compound of hbv core protein allosteric modifier
CA3160543A1 (en) * 2019-12-20 2021-06-24 Gang Deng Heteroaryldihydropyrimidine derivatives and methods of treating hepatitis b infections

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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