CN104435995B - 草果在制备治疗和/或预防大肠杆菌病的中兽药中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了草果在制备治疗和/或预防大肠杆菌病的中兽药中的用途。本发明还提供了一种治疗和/或预防家禽大肠杆菌病的中兽药,它是以草果为活性成分,加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂,所述制剂的给药剂量为0.5~2g/kg·d。本发明草果在低的给药剂量下,可以有效治疗和预防鸡大肠杆菌病,可用于替代抗生素,为临床给药提供了一种新的、安全有效地用药选择。
Description
技术领域
本发明涉及草果在制备治疗和/或预防大肠杆菌病的中兽药中的用途。
背景技术
大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌所致的一组疾病,各种家畜和家禽都有此病,特别是幼畜十分易感,常发生严重腹泻和败血症,影响生长发育,严重者导致死亡,给养殖业带来重大的经济损失。
鸡大肠杆菌病是由致病型大肠杆菌引起的鸡的一种急性或慢性传染病。由于感染鸡的日龄、抵抗力、大肠杆菌致病力和感染途径不同而可以由许多症状和病变不同的病型,如胚胎、幼雏死亡和脐炎、急性败血症、气囊炎、卵黄性腹膜炎、大肠杆菌输卵管炎、肠炎、大肠杆菌肉芽肿,大肠杆菌脑病以及全眼球炎等十多个病型。世界所有养鸡业发达地区和国家都有本病的发生和流行,而且有越来越严重的倾向。我国也有本病的发生和流行,特别近十多年来,大肠杆菌已成为严重危害养鸡业的主要传染病之一。
目前,防治大肠杆菌病通常采用抗生素等抗菌药,导致多重耐药菌的产生,治疗成本增加,治疗难度加大,更为重要的是,抗菌药物在肌肉、内脏和鸡蛋中残留严重,对食品安全危害极大。中药作为祖国医学的宝贵遗产,具有独特的资源优势,且毒副作用小、不易产生抗药性。
草果,为姜科植物草果Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire的干燥成熟果实。味辛,性温,归脾、胃经。具有燥湿温中,截疟除痰的功能,用于寒湿内阻,脘腹胀痛,痞满呕吐,疟疾寒热,瘟疫发热。
研究表明,草果具有镇痛、抗胃溃疡、抗乙肝病毒的作用,可以用于治疗乙型肝炎、腹部术后腹胀等疾病。另外,草果还具有抗氧化性、抗诱变、防霉的作用,未见报道其治疗大肠杆菌病的报告。
发明内容
本发明的技术方案是提供了草果在制备治疗大肠杆菌病的中兽药中的新用途。
本发明提供了草果在制备治疗大肠杆菌病的中兽药中的用途。
其中,所述治疗大肠杆菌病的中兽药是治疗家禽大肠杆菌病的药物。
家禽,是指人工豢养的鸟类动物,主要为了获取其肉、卵和羽毛,也有作为其他用处,如信鸽、宠物等。一般为雉科和鸭科动物,如鸡、鸭、鹅等,也有其他科的鸟类如火鸡、鸽、鹌鹑和各种鸣禽。
优选地,所述药物是以草果为活性成分,加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂,所述制剂的给药剂量为0.5~2g/kg·d。进一步优选地,所述制剂的给药剂量为0.5g/kg·d。
其中,所述制剂为液体制剂、气体制剂、固体制剂或半固体制剂。所述固体制剂为散剂。
本发明还提供了一种治疗鸡大肠杆菌病的中兽药,它是以草果为活性成分,加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂,所述制剂的给药剂量为0.5~2g/kg·d。
优选地,所述制剂的给药剂量为0.5g/kg·d。
所述制剂为液体制剂、气体制剂、固体制剂或半固体制剂。所述固体制剂为散剂。
本发明草果可以有效抑制大肠杆菌,治疗和预防鸡大肠杆菌病,在给药剂量低至0.5g/kg·d的情况下,治疗鸡大肠杆菌病的效果优异,可用于替代抗生素,副作用小,生产成本低,临床应用前景良好。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1 本发明药品的制备
取草果,粉碎,加上药学上可接受的辅料或辅助性成分,即得。
以下通过药效学试验进一步证明本发明的有益效果。
试验例1 药效实验
1材料及仪器
1.1药物
发明药物:草果。
1.2实验菌株
大肠埃希菌质控菌株ATCC25922,大肠埃希菌标准株CMCC(B)44102,大肠埃希菌临床分离株18株。
1.3实验动物
小鼠(SPF级)[成都中医药大学实验动物研究中心,生产许可证号:SCXK(川)2008-11,使用合格证号:SCXK(川)2008-049]。
四川省达州市某鸡场1日龄金陵黄鸡。
1.4培养基、试剂及耗材
Mueller-Hinton agar(OXOID,批号:729683),Mucin from porcine stomach,Type II(SIGMA,批号:108k0010),营养琼脂(北京奥博星生物技术有限责任公司,批号:20082502),Mcfarland Standard(bioMeriéux,Inc.批号:821772701)等。
1.5实验仪器
多点接种仪(日本佐久间制作所,SAKUMA MIT-P型),实验室用高压灭菌器(SANYO,MLS-3780型),CO2INCUBATOR(SANYO,MOC-15A),节能净化工作台(成都新光非兰特净化工程有限公司)。
2试验方法
2.1发明药物的制备
将草果粉碎成细粉,过筛后备用。
2.2发明药物的体外抗菌活性
菌液配置:将过夜培养的对数期受试菌株用无菌生理盐水调至菌液浓度1.5×106CFU/ml。
含药平板的制备:分别称量发明药物4.5g、3g、1.5g、0.75g、0.375g、0.188g于一次性无菌平皿中,加入15ml灭菌MH培养基混匀后备用,各药物在平板中的稀释梯度分别为300mg/ml~12.5mg/ml。以平板内加入等量生理盐水代替药物制备阳性对照平板。
体外抑菌活性测定及结果判定:采用多点接种仪将实验菌株的菌液加入不同浓度梯度的含药平板和阳性对照平板,并以生理盐水代替菌液作阴性对照。37℃恒温培养18~24h,观察各菌株在含不同浓度梯度药物平板中的生长情况。以无细菌生长平板内药物的最小浓度为此药对该菌株的最低抑菌浓度(MIC)。
2.3发明药物体内抗大肠埃希菌活性
菌株毒力的测定:将大肠埃希菌ATCC25922于37℃恒温培养至对数期,采用2倍稀释法用生理盐水分别对其进行稀释,配置成不同浓度梯度的菌液。取1份稀释的菌液与1份10%胃膜素混合,对小鼠进行腹腔注射,并以5%胃膜素做阴性对照。在对照小鼠不死亡的前提下,记录各剂量组小鼠24~48h内的死亡率,测定SPF小鼠全部死亡的最低细菌量(稀释度),即该菌液的最小致死量(MLD)。
体内抗大肠埃希菌活性试验:实验分为2组,即空白组和发明药组。选择标准体重的KM小鼠(SPF),雌雄各半,每组小鼠10只,其中实验组每天自由采食配好的专用饲料,空白组自由采食未加发明药的基础饲料,连续饲喂21d,每7d对小鼠进行称重,观察发明药对小鼠体重的影响及其毒性反应,同时观察小鼠的采食量和饲料的适口性。21d用大肠埃希菌进行攻毒,统计分析攻毒后小鼠72h内的存活率。以不添加发明药的基础日粮饲喂且不攻毒的为空白组;以基础日粮饲喂21d后进行攻毒的为模型组,以注射不含大肠埃希菌的5%胃膜素为胃膜素对照组。
数据统计:每7d进行小鼠称重,观察发明药对小鼠增重的影响,以及攻毒后72h内小鼠的死亡或存活数,统计其存活率。
2.4发明药物治疗鸡大肠埃希菌病的临床试验
实验分组:选取1日龄金陵黄鸡,适应性饲喂6d,7日龄随机分为5组,即发明药高、中、低剂量组,空白组和模型组,每组18只。
菌株毒力的测定:将实验菌株于37℃恒温培养至对数期,采用2倍稀释法用生理盐水分别对其进行稀释,配置成不同浓度梯度的菌液,对21日龄金陵黄鸡进行肌肉注射,并以生理盐水做阴性对照。在对照组不死亡的前提下,记录24~48h内鸡的死亡率,测定鸡全部死亡的最低细菌量(稀释度),即该菌液的最小致死量。
发明药治疗鸡大肠埃希菌病疗效:将草果细粉分别以4%(高剂量组)、2%(中剂量组)、1%(低剂量组)的比例混匀于基础饲料中,空白组和模型组饲喂不含发明药的基础饲料,让鸡自由采食,每7d对各组小鸡进行称重,连续饲喂14d,第14d用大肠埃希菌ATCC25922的最小致死量进行攻毒,观察发明药对实验鸡增重的影响,以及发明药治疗鸡大肠埃希菌病的疗效。
3实验结果
3.1发明药物的体外抑菌活性
采用琼脂平板稀释法测定了发明药物对20株大肠埃希菌标准株和临床分离株的MIC,结果见表1。
表1:发明药物对大肠埃希菌的体外抑菌活性
由上表可知,本发明药物对所有受试大肠埃希菌标准株和临床分离株有相同的抑菌活性,MIC均为300mg/ml。
3.2发明药对小鼠体重的影响
分别在给药前,给药后7d、14d和21d对各组小鼠进行称重,SPSS软件统计分析各组小鼠体重,结果见表2。
表2:发明药对小鼠体重的影响
由上表可知,发明药混于饲料中连续饲喂小鼠21d,小鼠无任何不良反应,小鼠增重情况总体良好。与空白组小鼠比较,实验组小鼠体重在不同时间段均无明显统计学差异。说明发明药对小鼠无任何毒性和不良反应,能有效添加于饲料中进行饲喂。
3.3发明药体内抗大肠埃希菌感染疗效
将发明药混入小鼠基础日粮中,连续饲喂小鼠21d,第21d用MLD大肠埃希菌菌液对小鼠进行攻毒,统计攻毒后72h内小鼠的存活率,结果见表3。
表3:发明药体内抗大肠埃希菌感染疗效
由上表可知,本发明药添加于饲料中饲喂小鼠,具有明显的体内抗大肠埃细菌活性,能明显延长小鼠存活时间,72h内小鼠存活率为30.0%。
3.4发明药对鸡体重的影响
分别在给药前(0d),给药后第7d和14d对各组鸡的体重进行称重,用SPSS软件统计分析各组小鼠体重变化,结果见表4。
表4:发明药对鸡体重的影响
由上表可知,与空白组的鸡体重比较,发明药高、中、低剂量组在给药前均无明显统计学差异;在给药后第7d,除发明药中剂量组较空白组平均体重偏轻外,发明药高、低剂量组的平均体重均高于空白组,但各组之间相互比较,均无明显统计学差异(P>0.05);在给药后第14d,高、中、低剂量组的平均体重均高于空白组的平均体重,但各组之间相互比较,均无明显统计学差异。
实验结果说明,本发明草果对鸡生长无副作用,反而能在一定程度上增加鸡的体重。
3.5发明药治疗鸡大肠埃希菌病的疗效
分别从前期饲喂14d的空白组、高剂量组、中剂量组和低剂量组中随机选择10只小鸡进行临床试验,即用预试的MLD大肠埃希菌菌液对各组小鸡进行攻毒,分别统计攻毒后48h和7d内鸡的存活率,结果见表5。
表5:发明药治疗鸡大肠埃希菌病的疗效
由上表可知:
1、与对照组相比,本发明药高、中、低3个剂量组的存活率均明显提高,说明本发明草果对鸡大肠埃希菌病具有明显的治疗和预防作用;
2、与高、中剂量相比,本发明低剂量组的给药量最少,但效果反而更优。
本发明药高、中、低剂量组的给药剂量分别为2g/kg·d、1g/kg·d、0.5g/kg·d。
因此,采用本发明草果治疗或预防鸡大肠杆菌时,给药剂量为0.5~2g/kg·d,优选0.5g/kg·d。
综上,本发明草果可以有效抑制大肠杆菌,治疗和预防鸡大肠杆菌病,其中,在给药剂量为0.5g/kg·d时,效果优良。
Claims (6)
1.草果在制备治疗和/或预防大肠杆菌病的中兽药中的用途,其中,所述治疗和/或预防大肠杆菌病的中兽药是治疗和/或预防家禽大肠杆菌病的中兽药,其中,所述中兽药的药剂量为0.5g/kg·d;所述中兽药是以草果为活性成分,加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述制剂为液体制剂、气体制剂、固体制剂或半固体制剂。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于:所述固体制剂为散剂。
4.一种治疗和/或预防家禽大肠杆菌病的中兽药,其特征在于:它是以草果为活性成分,加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂,所述制剂的给药剂量为0.5g/kg·d。
5.根据权利要求4所述的中兽药,其特征在于:所述制剂为液体制剂、气体制剂、固体制剂或半固体制剂。
6.根据权利要求5所述的中兽药,其特征在于:所述固体制剂为散剂。
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