CN104146970A - 治疗精神疾病的冻干粉针剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及治疗精神疾病的冻干粉针剂。具体地说，本发明涉及一种冷冻干燥粉针剂，其中包含：作为活性成分的说明书所述式I化合物或其药学可接受的盐，作为赋形剂的甘露醇和/或甘氨酸，以及任选的pH调节剂，所述赋形剂与所述活性成分的重量比为1～1000：1。本发明粉针具有良好的稳定性。

Description

治疗精神疾病的冻干粉针剂

本申请是2014年8月25日提交的中国专利申请号201310161241.X，发明名称为“治疗精神疾病的注射剂”案的分案申请，其全部内容引入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及可用于治疗中枢神经***疾病的冻干粉针剂形式的注射剂。

背景技术

以下式I化合物：

其中R1为溴，R2和R3为甲基，

由于含有上述特定的的结构，WO00/69836中报道该化合物(说明书60页实施例Ic-8)是短效中枢神经***(CNS)抑制剂，具有包括镇静催眠、抗焦虑、肌肉松弛和抗惊厥作用。它们可用于以下临床治疗方案中的静脉给药：如手术期间中的手术前镇静、抗焦虑和遗忘用途；在短期诊断、手术或内窥镜程序期间的清醒性镇静；在施用其它麻醉剂和止痛剂之前和/或同时，作为用于全身麻醉的诱导和维持的组分；ICU镇静等，据CN101501019A(PAION，申请号CN200780028964.5)中报道，该化合物的游离碱不是很稳定，只适于低温5℃保存，在40℃/75％相对湿度(开放)的条件下，储存的样品潮解，颜色变成黄色到橙色，并且相对于初始含量显示含量显著的降低。因此人们合成式(I)化合物的盐，希望能增加其化学稳定性，以便用于药物的制备。

已有CN101501019A和US20100075955A1(TILBROOK)分别报道了式I化合物的苯磺酸盐、乙磺酸盐。CN102964349A(恒瑞，申请号201110456864.0)报道了式I化合物的对甲苯磺酸盐。

已有报道式I化合物或其盐存在稳定性方面的担忧，这对于该类化合物用于临床治疗相关疾病是不利的。

发明内容

本发明目的在于一种有益的药物组合物特别是冷冻干燥的药物组合物例如冷冻干燥粉针剂，期待其具有良好的药学性质例如稳定性。已经出人意料地发现，将式I化合物或其盐与药用辅料一起配制成冷冻干燥粉针剂时，其中包含甘露醇或甘氨酸是有利的，特别是对于其化学稳定性是有利的。

因此，本发明第一方面提供了一种药物组合物，其为作为注射制剂的冷冻干燥粉针剂，其中包含：

作为活性成分的以下式I化合物或其药学可接受的盐：

其中R1为溴，R2和R3为甲基，

作为赋形剂的甘露醇和/或甘氨酸，

以及任选的pH调节剂，

所述赋形剂与所述活性成分的重量比为1～1000：1，例如2～500：1，例如4～400：1，例如5～300：1，例如10～300：1。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其在冷冻干燥前溶液中的固形物含量为2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。或者，该冻干粉针剂中式I化合物和甘露醇的重量之和占冷冻干燥前溶液体积的2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，所得溶液中的固形物含量为2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。或者，该冻干粉针剂用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，其中式I化合物和甘露醇的重量之和占复溶溶液体积的2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，所得溶液根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5。在一个实施方案中，pH值为3.0～4.0。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中该冻干粉针剂用水制成每1ml中含式I化合物或其药学可接受的盐2mg的溶液并根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5。在一个实施方案中，pH值为3.0～4.0。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中水份含量低于5％，优选低于4％，优选低于3％，更优选低于2％。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中还包括pH调节剂。在一个实施方案中，该pH调节剂的种类不受特别限制，只要其可以将所述冻干粉针剂(和/或在配制该冻干粉针剂过程中将配制中间物)的pH值调节至期望的范围即可。在一个实施方案中，所述pH调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、乙酸、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、枸橼酸、枸橼酸钠、酒石酸、马来酸或其组合。此外，pH调节剂的量也是不受限制的，例如本领域技术人员通常将待调节物料的pH值调节到预期的值或范围即可。此外，在冷冻干燥粉针剂中，还可以添加具有缓冲功能的物质例如上述的酸和碱组成的酸碱对以使本发明冷冻干燥粉针剂的粉末处于相对稳定的酸碱度环境下，例如可以使用适量的乙酸和氢氧化钠以组成乙酸-乙酸钠缓冲对，或者可以使用磷酸盐组成酸碱对，还可以使用氢氧化钠和枸橼酸组成枸橼酸钠酸碱对。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中还包含络合剂。在一个实施方案中，所述的络合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸钙钠或其组合。络合剂的选择是本领域技术人员根据经验可以容易确定的，例如其通常在冷冻干燥粉针剂中点粉针剂粉末总重量的0.1～5％，特别是0.1～5％，特别是0.2～2％，特别是0.25～1％，特别是0.5～1％。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中还包含其它药用辅料，例如选自：氯化钠、葡萄糖、右旋糖苷、山梨醇、羟丙基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、甘露醇、乳糖、蔗糖、山梨醇、D-山梨醇、赤藻糖醇、木糖醇、果糖、聚乙烯吡咯烷等。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中所述式I化合物的药学可接受的盐是对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐或乙磺酸盐。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中所述式I化合物的药学可接受的盐是对甲苯磺酸盐或苯磺酸盐。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其中所述式I化合物的药学可接受的盐选自以下式Ia化合物或式Ib化合物：

在本发明中，上述式Ia化合物为式I化合物的对甲苯磺酸盐，式Ib化合物为式I化合物的苯磺酸盐。在本发明中，提及式I化合物时，如其语境中未特别指明，是指式I所示游离碱以及它的药学可接受的盐例如上述对甲苯磺酸盐和苯磺酸盐。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)根据冷冻干燥前溶液中的固形物含量确定配液体积，称取处方量的式I化合物或其药学可接受的盐和赋形剂，以及除pH调节剂以外的其它任选的辅料，加入约占处方全量90％的注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭，必要时用酸溶液或碱溶液调节至pH2.5～4.5，例如pH3.0～4.0；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸溶液或碱溶液调节至pH2.5～4.5，例如pH3.0～4.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明上述的冷冻干燥粉针剂，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

根据本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂，其是呈玻璃瓶密封包装的单位剂量制剂形式。在一个实施方案中，所述每个“单位剂量制剂形式”中包含式I化合物或其药学可接受的盐的量折合成其以式I表示的游离碱计为0.1～100mg，例如为0.1～50mg，例如为0.1～25mg，例如为0.5～20mg，例如约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg。例如每瓶粉针剂剂中包含式I化合物或其药学可接受的盐的量折合成其以式I表示的游离碱计为0.1～100mg，例如为0.1～50mg，例如为0.1～25mg，例如为0.5～20mg，例如约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg。

本发明人已经出人意料地发现，在将式I化合物特别是式Ia化合物或式Ib化合物与本发明所述赋形剂一起配制时出现了出人意料的良好效果，特别是稳定性的效果，而这种效果不会因为继续添加其它药用辅料而消失，并且这种效果与所述赋形剂通常在冷冻干燥粉针剂制造领域中应用所能产生的“赋形”效果完全不同。

本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一实施方案的冷冻干燥粉针剂方法，其基本上包括以下步骤：

(a)根据冷冻干燥前溶液中的固形物含量确定配液体积，称取处方量的式I化合物或其药学可接受的盐和赋形剂，以及除pH调节剂以外的其它任选的辅料，加入约占处方全量90％的注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭，必要时用酸溶液或碱溶液调节至pH2.5～4.5，例如pH3.0～4.0；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸溶液或碱溶液调节至pH2.5～4.5，例如pH3.0～4.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量是2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.05％～1％，优选0.05％～0.5％。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(b)中所述酸溶液和碱溶液是使用选自下列的pH调节剂配制成的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、乙酸、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、枸橼酸、枸橼酸钠、酒石酸、马来酸或其组合。这些水溶液的浓度是本领域技术人员公知的，例如1～10％，例如2％～5％。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(d)中除去水份后所得冷冻干燥物料中水份含量低于5％，优选低于4％，优选低于3％，更优选低于2％。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，虽然其描述的具体步骤在某些细节上或者语言描述上与下文具体实施方式部分的制备例中所描述的步骤有所区别，然而，本领域技术人员根据本发明全文的详细公开完全可以概括出根据本发明第二方面任一实施方案的方法步骤。

本发明任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

本发明冷冻干燥粉针剂涉及的活性成分为以下式I化合物或其药学可接受的盐：

式中R1为溴，R2和R3为甲基；

式I化合物的化学名为3-[(4S)-8-溴-1-甲基-6-(2-吡啶基)-4H-咪唑［１，2-a][1，4]苯并二氮杂-4-基]丙酸甲酯，

在本发明中，优选的式I化合物为其苯磺酸盐或者对甲苯磺酸盐。

在本发明中，优选的式I化合物为选自下列的式Ia化合物或式Ib化合物：

本发明还提供在受试者中产生镇静或催眠状态的方法，该方法包括对该受试者施用有效量的冷冻干燥粉针剂。

根据本发明还提供在受试者中引起抗焦虑的方法，该方法包括对该受试者施用有效量的冷冻干燥粉针剂。

根据本发明进一步提供在受试者中引起肌肉松弛的方法，该方法包括对该受试者施用有效量的冷冻干燥粉针剂。

根据本发明进一步提供在受试者中治疗惊厥状态的方法，该方法包括对该受试者施用有效量的冷冻干燥粉针剂。

在本发明中，所述受试者适合地是哺乳动物，优选人类。

用于上述疾病的本发明第一方面或第二方面所述固体药物组合物，其给予哺乳动物例如人的剂量通常可以是0.001-5.0mg/kg体重/天，优选是0.001-2.0mg/kg体重/天。

根据本发明，术语“赋形剂”亦可称为辅料、填充剂等。

本文所用的“药学可接受的赋形剂”指的是可用于配制药物的赋形剂，其对生物体基本上没有不良影响，并且通常是生物体可耐受的。

在本发明中，优选的本发明冻干粉针剂在用水制成每1ml中含式I化合物2mg的溶液后，再根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法即pH值测定法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5。在一个实施方案中，pH值为3.0～4.0。本发明人出人意料地发现，这样得到的组合物具有特别优异的效果。

虽然本领域技术人员理解，本发明的赋形剂可以是任一种可用于冷冻干燥的赋形剂，特别是甘露醇、乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、氯化钠、及其组合，然而在本发明中，特别优选的赋形剂是甘露醇和/或甘氨酸。

在一个实施方案中，本发明提供的是冷冻干燥的药物制剂，其中所述赋形剂与式I化合物或其盐的重量比为1～1000：1，例如2～500：1，例如4～400：1，例如5～300：1，例如10～300：1。此外，该冻干粉针剂在冷冻干燥前溶液中的固形物含量为2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。这样，在冷冻干燥前所配制的药液是包括以下组成的配方：

在一个实施方案中，本发明组合物是冷冻干燥的药物制剂，其中所述赋形剂与式I化合物或其盐的重量比为1～1000：1，例如2～500：1，例如4～400：1，例如5～300：1，例如10～300：1。此外，该冷冻干燥得到的冻干粉针剂，其在用水制成每1ml中含式I化合物或其盐2mg的溶液后，根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5，优选pH值为3.0～4.0。这样，在冷冻干燥得到的冻干粉针剂中包括：1重量份的式I化合物或其盐、1～1000重量份(优选2～500重量份，优选4～400重量份，优选5～300重量份，优选10～300重量份)的赋形剂、以及任选的pH调节剂。在一个实施方案中，发现在特别优选的本发明组合物中，所述赋形剂与式I化合物或其盐的重量比为10～300：1，并且在冷冻干燥前固形物含量为2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)时具有出人意料的优异性能。在一个实施方案中，发现在特别优选的本发明组合物中，所述赋形剂与式I化合物或其盐的重量比为10～300：1，并且所用注射用水是式I化合物重量的200～2000倍，在此比率范围内，在此情况下配制的冷冻干燥粉针剂具有出人意料的优点，例如稳定性好、用注射用水重新溶解(即复溶)快。

冷冻干燥粉针剂的制备过程是本领域技术人员公知的制药工艺，例如如下冻干曲线A和冻干曲线B所示的两种示意性的冻干曲线：

冷冻干燥粉针剂中的水含量是一般低于5％，优选低于4％，优选低于3％，更优选低于2％。水份控制可通过适当调整冷冻干燥程序来控制。该冷冻干燥粉针剂中的水份含量可根据许多已知方法来测定，例如干燥失重法。

在本发明中，为了在必要时调节药液的pH值，可以向组合物中加入适当的pH调节剂。尽管本发明人仅用不具缓冲能力的强酸或强碱溶液例如氢氧化钠水溶液和盐酸水溶液进行调节，然而，本领域技术人员理解，如果用这种不具缓冲能力的pH调节剂处理能满足体系的pH要求，则具有缓冲能力的pH调节剂将更加能够实现本发明目的，因此这些缓冲剂不但能够调节pH值，而且能稳定pH值。因此本发明所列任一pH调节剂或其组合均包括在本发明精神和范围内。

在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中，固形物的含量优选是2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。由于冻干粉针剂通常是在管状西林瓶中进行冷冻干燥得到，本领域技术人员理解这种产品在获得成品甚至在供医生使用之前，通常均呈现一个圆饼状，尽管该圆饼的体积理论上讲会比原有水溶液的体积少(稍有缩小)，然而通常这种缩小通常不会缩小到原水溶液体积50％，通常会在原水溶液体积的80-120％之间，更通常在原水溶液体积的90-100％之间，而从终产品西林瓶内可观察到原水溶液液面痕迹(主体饼状物因冻干缩小后残留在瓶壁上的液面痕迹，即便西林瓶中的冻干品因各种原因例如碰撞等原因而呈粉末状，通常仍然可以保留原有的液面痕迹)，据此痕迹亦可估计出该冷冻干燥组合物在冷冻干燥之前的水溶液体积。因此，虽然本发明提供的是一种基本无水的冷冻干燥粉针剂，然而根据该粉针剂仍然可以大致估计出其在配制时，至少在冷冻干燥开始之前的药液体积，根据该估计出的体积以及西林瓶中的干燥终产物的重量，亦可计算到在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中的固形物的含量。因此，根据本发明第一方面的冻干粉针剂，其在配制时的药液的固形物含量为2～20％(w/v)，例如3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

术语“固形物含量”是指固体物质(例如本发明式I化合物或其盐及所用的全部赋形剂，重量/克)加入到溶剂(例如注射用水)中，溶解后得到一个溶液，所述固体物质的重量除以终溶液体积的百分数(重量/体积百分数，例如g/100ml)。例如在本发明中，以1mg式Ia化合物和赋形剂100mg甘露醇加适量注射用水溶液，配制成终体积为1ml的溶液，其固形物含量即约为10％。

在本发明中，符号％，根据其所使用的语境，可以具有本领域技术人员容易理解的含义。例如在提及固形物含量时，该符号表示重量/体积的百分数(w/v，例如g/100ml)；又例如在提及冷冻干燥粉针剂中的“水含量”时，例如水含量在5％以下，此时该符号％表示重量/重量的百分数(w/w，g/100g)。一般而言，在固体分散在液体中时，％表示重量/体积百分数；在固体分散在固体中或者液体分散在固体中(例如粉针的含水量)时，％表示重量/重量百分数。在其它情况下，如无另外说明，符号％表示重量/重量百分数。

在配制本发明的药液时，本领域技术人员公知，可使用例如约0.45um的微孔滤膜进行粗滤过滤，在将药液灌装到西林瓶中之前，可以使用例如约0.22um的微孔滤膜进行精滤过滤以除菌，必要时可以过滤多次。

根据本发明的冻干粉针剂，其为冷冻干燥粉针剂。在一个实施方案中，该冷冻干燥粉针剂为单剂量制剂(例如西林瓶装的粉针剂)，每一单位剂量中式I化合物的量可以例如但不限于0.1～100mg，例如为0.1～50mg，例如为0.1～25mg，例如为0.5～20mg，例如约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg。

在本发明冷冻干燥粉针剂中，其中包含的式I化合物或其盐相对于粉针剂粉末总重量的百分含量可以使用本发明【测定方法A】方法采用外标法进行测定。

在本发明冷冻干燥粉针剂中，其中包含的甘露醇可以通过中国药典2010年版二部收载的“甘露醇”和/或“甘露醇注射液”中的鉴别方法来鉴别其存在与否，例如将本发明的冻干粉针剂粉末配制的饱和水溶液1ml，加三氯化铁试液与氢氧化钠试液各0.5ml，生成棕黄色沉淀，振摇不消失，滴加过量氢氧化钠试液，即溶解成棕色溶液，如果显示此现象表明本发明粉针中添加有甘露醇。还可以通过中国药典2010年版二部收载的“甘露醇注射液”中的【含量测定】的方法来测定粉针剂中的甘露醇的含量，从而可以计算出粉针剂中活性成分与甘露醇的重量比。

在本发明冷冻干燥粉针剂中，其中包含的甘氨酸可以通过中国药典2010年版二部收载的“甘氨酸冲洗液”中的鉴别方法来鉴别其存在与否，还可以通过【含量测定】的方法来测定粉针剂中的甘氨酸的含量，从而可以计算出粉针剂中活性成分与甘氨酸的重量比。

根据本发明的冻干粉针剂，其用注射用水复溶，通常而言复溶时间在30秒内，优选在20秒内，更优选在15秒内。

根据本发明的冻干粉针剂，其用水制成每1ml中含式I化合物2mg的溶液并根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5，优选pH值为3.0～4.0。

在本发明中，式I化合物，或者式Ia化合物或式Ib化合物，以及它们的标准品，均可采用现有技术公开的方法制备.

本发明提供的冻干粉针剂可以在在25℃以下干燥处保存至少24个月，可以满足一般的冷冻干燥粉针剂的贮藏要求。

本发明第一方面或第二方面所述固体药物组合物可以作为短效CNS抑制剂，它们可用于按以下临床设定口服给药：围手术期事件中的手术前镇静、抗焦虑和遗忘用途；在短期诊断、手术或内窥镜程序期间的清醒性镇静；在施用其它麻醉剂或止痛剂之前和/或同时，作为用于全身麻醉的诱导和维持的组分；ICU镇静。此外，本发明第一方面或第二方面所述固体药物组合物可用于镇静、催眠、抗焦虑、肌肉松弛、抗惊厥等精神疾病。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。在下面制备粉针剂时所列的组方中，式I化合物计算量均以其游离碱的形式计算，所列配方均为每一单位剂量制剂(例如粉针剂每瓶)中所含式I化合物游离碱的量，下面制备组合物时每批次制备量均为1000个单位剂量制剂的量，例如以1000瓶粉针剂的量投料。

本发明各种色谱分析中，酸根显示的色谱峰在计算时均忽略不计。

分析测试方法

以下【HPLC法A】可用于测定本发明粉针中的有关物质及其变化情况以及粉针活性剂的含量。

【HPLC法A】：

在HP1100 Agilent色谱仪上进行纯度分析：

色谱柱：Phenomenex Gemini C185μm(2.0×50mm)(保护柱Phenomenex Gemini C18，2 x 4mm)，美国菲罗门公司

柱温：40℃；进样量：10μl

流速：0.8ml/分钟

检测：紫外检测，波长：254nm；

流动相A：2mmol的NH4HCO3(用NH3溶液调节至pH10)

流动相B：乙腈

梯度洗脱程序：

洗脱时间/分钟	流动相A(％)	流动相B(％)
			0	90	10
25	10	90
			28.8	10	90
29	90	10
			34	90	10

样品配制：取各种试样(原料药或粉针剂组合物)适量，加乙腈-水混合液(乙腈：水＝50：50，其中含有1mmol的NH₄HCO₃，并且用NH₃溶液调节至pHl0)适量溶解并制成浓度约1mg/ml的溶液，必要时过滤。

计算方法：以式I化合物色谱峰为主峰，其相对保留时间为1，读取相对保留时间在0.60～2.00之间的全部色谱峰的峰面积(峰面积小于主峰面积的0.01％的杂质峰忽略不计，酸根峰不计)，以面积归一化法计算各杂质峰的含量以及，用外标法以峰面积计算活性成分的含量，并计算最大单一杂质含量以及总杂质含量。

本发明药物组合物中的活性成分其七元环4位为S-异构体，药物中可能混杂有少量的R-异构体。以下【HPLC法B】可用于测定本发明组合物中的R-异构体(即以下式Ix表示的化合物)及其变化情况。

式中R1为溴，R2和R3为甲基；

【HPLC法B】：

在HP1100 Agilent色谱仪上进行纯度分析：

运行时间：至主峰保留时间的2.5倍以上

色谱柱：Daicel Chrialcel OJ-H(5μm)4.6×250mm(保护柱Daicel Chrialcel OJ-H分析保护柱5μm4.0×10mm)，日本大赛璐(Daicel)

柱温：40℃

进样量：10μl

流速：1.0ml/分钟

检测：紫外检测，波长：225nm(单波长检测器)；

流动相：己烷：乙醇＝93：7

样品配制：取各种试样(原料药或粉针剂组合物)适量，加流动相适量超声处理使溶解并稀释浓度约1mg/ml的溶液，必要时过滤。

计算方法：以式I化合物色谱峰为主峰，其相对保留时间为1，读取主峰的峰面积以及相对保留时间在1.10～1.25之间的杂质峰(其为R异构体即式Ix化合物)的峰面积，R异构体含量(％)＝[R异构体峰面积÷(R异构体峰面积+S异构体峰面积)]×100％。

在以上各种HPLC法中，不论式I化合物是以其游离碱形式配液还是以其药用盐的形式配液，因苯磺酸或者对甲苯磺酸或其它酸根的解离，它们在色谱***中均显示与式I游离碱具有相同的保留时间，这是色谱分析领域公知的。

制备例1：制备式Ix化合物(其可用于分析检测的对照品)

本发明涉及的R-异构体(即式Ix表示的化合物)可参考WO00/69836中记载的方法进行，具体如下：

步骤1：参考WO00/69836说明书23-24页Int-1的制备方法，使用Fmoc-D-Glu(OMe)-OH(购自吉尔生化)为原料得到以下式Int-1x中间体(其为Int-1的异构体)：

步骤2：接着参考WO00/69836说明书34-35页Example I-1的制备方法，使用Int-1x中间体和WO00/69836说明书24记载的中间体Int-2为原料，得到以下Ex I-10x化合物(其为WO00/69836说明书38页记载的Example I-10化合物的异构体)：

步骤3：接着参考WO00/69836说明书60-61页Example Ic-8的制备方法，使用Ex I-10x为原料，得到以下式Ix表示的化合物(其为WO00/69836说明书60页记载的Example Ic-8化合物的R-异构体)

式中R1为溴，R2和R3为甲基。

接着参考本发明下文制备例7的方法对其纯化，得到白色固体。经测定，其分子式C₂₁H₁₉BrN₄O₂，ESIMS461(M+Na，碱)，439(M+H)。色谱纯度99.53％【HPLC法B】，S异构体含量0.46％【HPLC法A】。在【HPLC法A】法测试中相对于S异构体而言，该R异构体的相对保留时间约为1.17。该R异构体在本发明中作为活性成分式I化合物或其盐的异构体杂质对待。

制备例2：制备式I化合物(其可用于分析检测的对照品以及粉针制备的原料)

照WO00/69836说明书60-61页Example Ic-8的制备方法，使用0.5mol的Ex I-10为原料投料，得到以下式I化合物：

式中R1为溴，R2和R3为甲基。

取所得式I化合物100g，加至50℃的800ml乙醇-乳酸-水(三者体积比45：2：53)混合溶液中搅拌使溶解；过滤，使滤液在5℃的温度下静置10～12小时以进行重结晶，滤出结晶，干燥，得式I化合物。重复该操作2次，得到的产物色谱纯度99.65％【HPLC法A】；R异构体杂质含量0.26％【HPLC法B】。

制备例3：制备式I化合物对甲苯磺酸盐(即式Ia化合物，其可用于分析检测的对照品以及粉针制备的 原料)

取制备例2化合物碱(式I化合物)10g溶于60ml乙酸乙酯中，然后将与上述碱等摩尔比的对甲苯磺酸溶于10ml甲醇中，并滴加到式I化合物碱的乙酸乙酯溶液中，搅拌析晶，抽滤，减压干燥得式I化合物的对甲苯磺酸盐，白色固体。HPLC：99.63％【HPLC法A】；R异构体杂质含量0.27％【HPLC法B】。

制备例4：制备式I化合物苯磺酸盐(即式Ib化合物，其可用于分析检测的对照品以及粉针制备的原料)

取制备例2化合物碱(式I化合物，10g)加入小瓶中并在环境温度下添加甲苯(60ml)。向该溶液中添加与上述碱等摩尔比的苯磺酸(配制成1M的乙醇溶液)并搅拌该反应混合物15分钟，此后，过滤从该溶液沉淀的固体，用甲苯洗涤并在真空下在40℃烘干，得白色固体。HPLC：99.47％【HPLC法A】；R异构体杂质含量0.25％【HPLC法B】。

另外，以下各类试验中所使用的式I化合物的乙磺酸盐参照US20100075955A1说明书第[0101]段记载的方法制备得到(以下可简称式I乙磺酸盐)。

试验例1：式I化合物与赋形剂组合试验

取式Ia化合物与如下表所示一定量的甘露醇或甘氨酸一起溶解于适量注射用水(水的量是使溶解后的溶液中固形物含量为10％)中，并用1M盐酸和/或1M氢氧化钠调节溶液值至3.7，药液分装到5ml的西林瓶中，每瓶1ml药液，经冷冻干燥(冻干曲线A)使水分含量降至1％以下，密塞。

将各粉针剂样品置于50℃恒温箱中放置4个月(在本发明中可简称为“50℃4月”处置)。对于每一试样，使用【HPLC法B】测定它们在0月时的R异构体含量(％)，并测定它们在50℃4月时的R异构体含量(％)，按下式计算R异构体增加百分数：

R异构体增加百分数＝[(50℃4月R异构体含量—0月R异构体含量)÷0月R异构体含量]×100％

结果见以下表1。

表1：

甘露醇：式Ia化合物	R异构体增加(％)	甘氨酸：式Ia化合物	R异构体增加(％)
				0	274	0	274
1	241	1	250
				2	206	2	211
3	148	3	159
				4	60	4	67
5	32	5	33
				7.5	34	7.5	33
10	28	10	28

15	26	15	26
				25	30	25	28
50	33	50	30
				100	29	100	24
150	32	150	34
				200	28	200	35
250	27	250	33
				300	31	300	32
350	33	350	36
				400	34	400	28
500	32	500	27
				1000	33	1000	32

上表中第一栏“甘露醇：式Ia化合物”表示混合时甘露醇：式Ia化合物二者重量比，例如该值为0时表示0份甘露醇与1份式Ia化合物混合，该值为100时表示100份甘露醇与1份式Ia化合物混合，等等；类似地第三栏亦具有类似含义。

根据上表结果可见，式Ia化合物与甘露醇或甘氨酸组合时能够更好地耐受高温环境，特别是在式I化合物或其药学可接受的盐与所述甘露醇或甘氨酸的重量比为1：4～400，例如10～300范围内，具有明显优异的结果，即R异构体含量增加不明显。

尽管式I化合物或其药学可接受的盐与所述甘露醇或甘氨酸的重量比为1：500或1：1000时，显示有与较低赋形剂时有同样的稳定性能，但是由于本发明粉针剂在配制成药液以供注射时，其中复溶的液射液中固形物浓度应当较低，例如固形物浓度应当低于20％，而活性成分应当有一定的绝对量以提供有效治疗剂量，例如每次注射活性剂5mg时，对于1：1000粉针，应当溶解成至少25ml的溶液，才能达到固形物浓度应当低于20％的程度并容纳5mg活性药物，而在临床上对于快速注射给药，25ml的溶液明显体积过大。因此在以上表1中，式I化合物或其药学可接受的盐与所述甘露醇或甘氨酸的重量比为1：4～400，例如10～300范围内是非常适合临床应用的。

另外，分别取表1中所得各粉针剂，揭开瓶盖塑料顶，用注射器从瓶塞穿刺注入注射用水(用量约为相应样品冷冻干燥前溶液体积的3倍)，用秒表记录复溶时间，每批样品测试5次，取平均值。

结果，式Ia化合物与所述甘露醇或甘氨酸的重量比为1：4～400范围内的各试样，复溶时间均在5～12秒范围内，例如甘露醇：式Ia化合物＝100的试样复溶时间为6秒。然而出人意料的是，式Ia化合物与所述甘露醇或甘氨酸的重量比为1：500～1000范围内的各试样，复溶时间均在26～44秒范围内，例如甘氨酸：式Ia化合物＝500的试样复溶时间为38秒。由此显示式Ia化合物与所述甘露醇或甘氨酸的重量比为1：4～400范围内的各试样具有良好的溶解性能，非常有利于临床的使用，而当赋形剂相对量进一步增加时，溶解缓慢而不利于临床使用。

试验例2：式I化合物与赋形剂组合试验

参照以上试验例1的方法，不同的仅仅是活性药物改用为式Ib化合物。结果与表1中的基本相同，R异构体增加(％)与表1中相应配比所得结果相差均不超过5个百分点(式I化合物的盐与所述赋形剂的重量比为1：4～1000范围内)或者均不超过15个百分点(式I化合物的盐与所述有机酸的重量比为1：0～3范围内)。例如，甘露醇：式Ib化合物＝50配比中，R异构体增加(％)为31％；又例如甘氨酸：式Ib化合物＝50配比中，R异构体增加(％)为34％。

参照以上试验例1的方法中的表1第一栏和第二栏，不同的仅仅是将所用的甘露醇替换为甘露醇和甘氨酸等量混合物。结果与表1中的基本相同，R异构体增加(％)与表1中相应配比所得结果相差均不超过5个百分点(式I化合物的盐与所述赋形剂的重量比为1：4～1000范围内)或者均不超过15个百分点(式I化合物的盐与所述有机酸的重量比为1：0～3范围内)。这显示使用甘露醇和甘氨酸组合作为赋形剂时同样可以发挥对活性剂的稳定效果。

参照以上试验例1的方法，不同的仅仅是活性药物改用为式I乙磺酸盐。结果令人遗憾的是，在式I化合物的盐与所述赋形剂的重量比为1：0～1000全部范围内，R异构体增加(％)均在150～250％范围内。显示甘露醇或甘氨酸对式I乙磺酸盐不能发挥对活性剂的稳定效果。

参照以上试验例1的方法中的表1第一栏和第二栏，不同的仅仅是将所用的甘露醇替换为冷冻干燥粉针剂常用的赋形剂右旋糖苷、山梨醇、乳糖、葡萄糖、或氯化钠，结果令人遗憾的是，在式I化合物的盐与这些其它的赋形剂的重量比为1：0～1000全部范围内，R异构体增加(％)均在150～250％范围内。显示其它常用赋形剂对式I化合物的盐均不能发挥对活性剂的稳定效果。

参照以上试验例1的方法中的表1第一栏和第二栏，不同的是将所用的式Ia化合物替换为式Ib化合物，并且将所用的甘露醇替换为冷冻干燥粉针剂常用的赋形剂右旋糖苷、山梨醇、乳糖、葡萄糖、或氯化钠，结果令人遗憾的是，在式I化合物的盐与这些其它的赋形剂的重量比为1：0～1000全部范围内，R异构体增加(％)均在150～250％范围内。显示其它常用赋形剂对式I化合物的盐均不能发挥对活性剂的稳定效果。

参照以上试验例1的方法中的表1第一栏和第二栏，不同的仅仅是向每一配方中补加与甘露醇等量的其它常用的赋形剂右旋糖苷、山梨醇、乳糖、葡萄糖(再补充占固形物重量0.5％的依地酸钙钠，以发挥金属络合作用)、或氯化钠(再补充占固形物重量5％的枸橼酸钠，以发挥酸碱缓冲作用)，例如在“甘露醇：式Ia化合物”为50的配方中，向其中补加与甘露醇等重量的50份上述其它赋形剂中的一种。结果与表1中的基本相同，R异构体增加(％)与表1中相应配比所得结果相差均不超过5个百分点(式I化合物的盐与所述赋形剂的重量比为1：4～1000范围内)或者均不超过15个百分点(式I化合物的盐与所述有机酸的重量比为1：0～3范围内)。这显示使用甘露醇和其它赋形剂组合时同样可以发挥对活性剂的稳定效果。

试验例3：式I化合物与赋形剂组合试验

取式Ia化合物与如下表2所示一定量的甘露醇一起溶解于适量注射用水(水的量是使溶解后的溶液中固形物含量在10～12％范围内)中，并用1M盐酸和/或1M氢氧化钠调节溶液值至2.5、3.0、3.5、4.0、4.5，药液分装到5ml的西林瓶中，每瓶1ml药液，经冷冻干燥(冻干曲线A)使水分含量降至1％以下，密塞。

将各粉针剂样品置于50℃恒温箱中放置4个月(在本发明中可简称为“50℃4月”处置)。对于每一试样，使用【HPLC法B】测定它们在0月时的R异构体含量(％)，并测定它们在50℃4月时的R异构体含量(％)，计算各样品的R异构体增加百分数。

表2：

以上表中结果显示，在将冷冻干燥前溶液调节至pH3.0～4.0范围内后，对于发挥本发明赋形剂改善稳定性的性能是有益的。

试验例4：式I化合物与赋形剂组合试验

参照以上试验例3的方法，不同的仅仅是活性药物改用为式Ib化合物。结果与表2中的基本相同，R异构体增加(％)与表2中相应配比所得结果相差均不超过6个百分点。例如，甘露醇：式Ib化合物＝100配比且pH为3.5的试验中，R异构体增加(％)为33％。

参照以上试验例3的方法，不同的仅仅是将甘露醇替换为甘氨酸。结果与表2中的基本相同，R异构体增加(％)与表2中相应配比所得结果相差均不超过6个百分点。

参照以上试验例3的方法，不同的是将活性药物改用为式Ib化合物，并且将甘露醇替换为甘氨酸。结果与表2中的基本相同，R异构体增加(％)与表2中相应配比所得结果相差均不超过6个百分点。

这些结果显示，本发明冷冻干燥粉针剂在将冷冻干燥前溶液调节至pH3.0～4.0范围内后，对于发挥本发明赋形剂改善稳定性的性能是有益的。

实施例部分

以下以实施例形式制备本发明冷冻干燥粉针剂。其中使用的pH调节剂，如无另外说明，是1M氢氧化钠溶液或者1M盐酸溶液，其用量是使制备粉针剂时，使冷冻干燥前所配制的溶液的pH值调节至规定值(在标明值的±0.05范围内)或范围。下文制备步骤为了举例的目的，并基于各举例的可比较性而作了某些具体描述，本领域技术人员根据已有知识完全可以从中概括得到本发明制备冻干粉针剂的方法。下面实施例所列配方是每瓶装量配方，实际制备时每批次以投料1000瓶的量制备。

实施例1：制备本发明粉针剂

配方：

式Ia化合物	2mg，
		甘露醇	100mg，
pH调节剂	至pH3.5，
		注射用水	至1ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和赋形剂，置于不锈钢桶中，加入处方量约90％的注射用水，使各组分溶解，再按溶液体积加入0.2％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值，再补加注射用水至处方全量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)将药液灌装3～6倍容量的西林瓶中，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于2％；冻干结束后，进行液压加塞；扎铝盖，即得。在本发明中实施例1的样品可简称为Ex1或者E1；其它制备例的样品亦可类似表示，例如实施例2的样品可简称为Ex2或者E2。

实施例2：除了甘露醇用量改为50mg且调节pH至4.0以外，其它与实施例1相同，控制水分低于3％。

实施例3：除了甘露醇用量改为150mg且调节pH至3.0以外，其它与实施例1相同。

实施例4：除了活性药物用量改为25mg以外，其它与实施例1相同。

实施例5：除了活性药物用量改为0.25mg以外，其它与实施例1相同。

实施例6：

配方：

式Ia化合物	10mg，
		甘氨酸	100mg，
pH调节剂	至pH3.5，
		注射用水	至1ml。

制法参照实施例1，但是使用冻干曲线B进行冷冻干燥。

实施例7：除了活性药物用量改为0.33mg且加入0.5mg乙二胺四乙酸二钠以外，其它与实施例6相同。

实施例8：

配方：

式Ib化合物	1mg，
		甘露醇	100mg，
枸橼酸钠	5mg，
		pH调节剂	至pH3.5，

注射用水

至1ml。

制法参照实施例1。

实施例9：除了赋形剂改为甘氨酸外，其它与实施例8相同。

实施例10：除了赋形剂改为甘露醇50mg和甘氨酸50mg外，其它与实施例8相同。

实施例11：除了补加9mg氯化钠外，其它与实施例8相同。

实施例12.

配方：

式Ia化合物	2.5mg，
		甘氨酸	80mg，
氯化钠	9mg，
		依地酸钙钠	0.125mg，
pH调节剂	至pH3.5，
		注射用水	至1ml。

制法参照实施例1，得到的粉针剂水分为2.89％。

试验例5：粉针剂的外观和溶解性测定

分别取以上各实施例1～12所得粉针剂，揭开瓶盖塑料顶，用注射器从瓶塞穿刺注入注射用水(用量约为相应样品冷冻干燥前溶液体积的3倍)，用秒表记录复溶时间，每批样品测试5次，取平均值。

结果，全部实施例粉针的复溶时间均在4～12秒范围内，显示本发明粉针具有良好的溶解性。另外Ex1至Ex12的粉针外观均呈结实、完整的圆饼状，无裂块、喷瓶等异常情况，显示产品的冻干形态良好。

试验例6：测定各实施例粉针样品高温放置后的残余率

本试验例中，测定各实施例所得的冷冻干燥粉针剂在40℃下放置6个月后，其中式I化合物的含量[40℃，6月，可称为高温平均含量，mg/瓶，测定10瓶的平均值]相对于该试样在20℃下处理相应时间时式I化合物的含量[20℃，6月，可称为常温平均含量，mg/瓶，测定10瓶的平均值]的百分数，即残余百分数(％)，即

其中，高温平均含量(mg/瓶)和常温平均含量(mg/瓶)是样品溶解后经上文所述【HPLC法A】测定并经计算得到的每瓶中式I化合物的含量(10瓶的均值)。

结果显示，Ex1至Ex12的残余百分数(％)均在97.5％～100.5％之间，例如Ex1的残余百分数(％)为98.8％。Ex1至Ex12在40℃下经6个月处理后颜色无变化。

另外，对上述40℃6月处置的样品，用上文所述【HPLC法B】测试它们的R异构体含量(％)，即粉针剂粉末中R异构体相对于R异构体和S异构体总和的含量，计算式如下：

R异构体含量(％)＝[R异构体峰面积÷(R异构体峰面积+S异构体峰面积)]×100％

另外还测试了这些试样经20℃6月处置条件下的R异构体含量(％)。参考试验例1的方法计算这些试样的R异构体增加百分数，计算式如下：

R异构体增加百分数＝[(40℃6月R异构体含量—20℃6月R异构体含量)÷20℃6月R异构体含量]×100％

结果显示，Ex1至Ex12的R异构体增加百分数均在22％～38％之间，例如Ex1的残余百分数(％)为28％。

另外，还使用【HPLC法A】测定了各实施例样品在0月时最大单一杂质相对于活性成分的含量以及总杂质相对于活性成分的含量。结果显示，Ex1至Ex12各样品的最大单一杂质含量均低于0.5％，均在0.1～0.25％范围内；Ex1至Ex12各样品的总杂质含量均低于1.0％，均在0.35～0.45％范围内。

另外，还使用【HPLC法A】测定了各实施例样品在40℃6月时最大单一杂质相对于活性成分的含量以及总杂质相对于活性成分的含量。结果显示，Ex1至Ex12各样品的最大单一杂质含量均低于0.5％，均在0.20～0.33％范围内；Ex1至Ex12各样品的总杂质含量均低于1.0％，均在0.40～0.55％范围内。

这些结果显示本发明粉针具有良好的化学稳定性，并且符合一般药品上市的稳定性加速试验要求。

试验例7：粉针剂酸碱度的测定

分别取各实施例所得粉针剂粉末适量，用水制成每1ml中含式I化合物2mg的溶液，根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定该溶液的pH值。结果，实施例1-12的各样品的pH值与其配制时的pH值相差均在0.1个pH单位以内。例如实施例1的配方pH值为pH3.5，而其所得粉针剂按以上方法测定，结果为pH3.54，相差0.04个pH单位。

分别取各实施例所得粉针剂粉末，观察其冷冻干燥前残留的液面线，向其中缓缓加注射用水溶解并稀释至液面线，根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定该溶液的pH值。结果，实施例1-12的各样品的pH值与其配制时的pH值相差均在0.1个pH单位以内。例如实施例1的配方pH值为pH3.5，而其所得粉针剂按以上方法测定，结果为pH3.53，相差0.03个pH单位。

Claims (10)

1.一种冷冻干燥粉针剂，其中包含：

作为活性成分的以下式I化合物或其药学可接受的盐：

其中R1为溴，R2和R3为甲基，

作为赋形剂的甘露醇和/或甘氨酸，

以及任选的pH调节剂，

所述赋形剂与所述活性成分的重量比为4～500：1，例如5～400：1，例如10～350：1。

2.根据权利要求1的冷冻干燥粉针剂，其用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，所得溶液中的固形物含量为3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)；或者，该冻干粉针剂用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，其中式I化合物和甘露醇的重量之和占复溶溶液体积的3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

3.根据权利要求1的冷冻干燥粉针剂，其在冷冻干燥前溶液中的固形物含量为3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)；或者，该冻干粉针剂中式I化合物和甘露醇的重量之和占冷冻干燥前溶液体积的3～18％(w/v)，例如5～15％(w/v)。

4.根据权利要求1至3任一项的冷冻干燥粉针剂，其用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，所得溶液根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5；在一个实施方案中，pH值为3.0～4.0。

5.根据权利要求1至4任一项的冷冻干燥粉针剂，其中该冻干粉针剂用水制成每1ml中含式I化合物或其药学可接受的盐2mg的溶液并根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为2.5～4.5；在一个实施方案中，pH值为3.0～4.0。

6.根据权利要求1至5任一项的冷冻干燥粉针剂，其中水份含量低于5％，优选低于4％，优选低于3％，更优选低于2％。

7.根据权利要求1至6任一项的冷冻干燥粉针剂，其中还包括pH调节剂、络合剂、和/或其它药用辅料；进一步地，

所述pH调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、乙酸、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、枸橼酸、枸橼酸钠、酒石酸、马来酸或其组合；

所述络合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸钙钠或其组合；

所述其它药用辅料选自：氯化钠、葡萄糖、右旋糖苷、山梨醇、羟丙基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、甘露醇、乳糖、蔗糖、山梨醇、D-山梨醇、赤藻糖醇、木糖醇、果糖、聚乙烯吡咯烷等。

8.根据权利要求1至7任一项的冷冻干燥粉针剂，其中所述式I化合物的药学可接受的盐是对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐或乙磺酸盐；或者，其中所述式I化合物的药学可接受的盐是对甲苯磺酸盐或苯磺酸盐；或者，其中所述式I化合物的药学可接受的盐选自以下式Ia化合物或式Ib化合物：

9.根据权利要求1至8任一项的冷冻干燥粉针剂，其是呈玻璃瓶密封包装的单位剂量制剂形式；在一个实施方案中，所述每个单位剂量制剂形式中包含式I化合物或其药学可接受的盐的量折合成其以式I表示的游离碱计为0.1～100mg，例如为0.1～50mg，例如为0.1～25mg，例如为0.5～20mg，例如约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约2mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg。

10.制备权利要求1至9任一项的冷冻干燥粉针剂方法，其基本上包括以下步骤：

(a)根据冷冻干燥前溶液中的固形物含量确定配液体积，称取处方量的式I化合物或其药学可接受的盐和赋形剂，以及除pH调节剂以外的其它任选的辅料，加入约占处方全量90％的注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭，必要时用酸溶液或碱溶液调节至pH2.5～4.5，例如pH3.0～4.0；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要时用酸溶液或碱溶液调节至pH2.5～4.5，例如pH3.0～4.0；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。进一步地，该方法如本发明第二方面任一实施方案所述。