CN104130964A - 一种海水螺旋藻培养液 - Google Patents
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Abstract
本发明的海水螺旋藻培养液,包含有如下浓度的组分:C6H5O7Fe5·H2O 3×10-3~10×10-3g/l、MnSO4·H2O 0.5×10-3~5×10-3g/l、NaH2PO4 60×10-3g/l、C10H14N2O8Na2·2H2O 12×10-3g/l、NaNO3 100×10-3~600×10-3g/l、CaCl2 50×10-3g/l、KCl 20×10-3g/l、MgSO4 100×10-3g/l、ZnSO4·7H2O 50×10-6g/l、CuSO4·5H2O 30×10-6g/l、Na2MoO4·2H2O29.2×10-6g/l、CoCl2·6H2O 28×10-6g/l,其中海水的盐度为30~35‰。
Description
技术领域
本发明属于藻类培养液制备技术领域,具体涉及一种海水螺旋藻培养液。
背景技术
螺旋藻,又称节旋藻,属于蓝藻门、蓝藻纲、螺旋藻属,是一类细胞结构简单的微型丝状藻。螺旋藻蛋白质含量高达60~70%以上,且富含β胡萝卜素、γ-亚麻酸、多种维生素、人体必需的微量矿物元素等,能够增强机体免疫力,抑制一些致癌物质的致癌作用,对生殖,心血管、呼吸、消化及神经***有良好的作用。螺旋藻是目前人类已知营养最丰富、全面、均衡的生物,具有极大开发潜力的水生生物资源。
螺旋藻属虽然有海水种类,但目前养殖的钝顶螺旋藻和极大螺旋藻都是淡水藻种。而且,目前制约螺旋藻生产的问题之一是其生产成本较高,其中培养液成本高是关键原因。
目前,螺旋藻培养经常使用的配方有Zarrouk配方、印度CFTRI配方以及MSS-1培养配方等。Zarrouk与印度CFTRI淡水培养配方需要多种营养盐成分,而且用量较大,因此成本高且配制复杂,而且用于海水螺旋藻培养效果不好。MSS-1培养配方可以应用于海水培养螺旋藻,虽然配制简单,但其中NaHCO3的用量较大,受热或加压后容易分解,因此在室内一级培养中不能通过加热方法消毒,导致培养的过程中很容易发生污染。
发明内容
本发明的目的是提供一种海水螺旋藻培养液,即一种新型的海水螺旋藻培养液,其中减去了NaHCO3的使用,使培养液可完全通过加热消毒,且配方中各成分使用量较少,但能够满足螺旋藻增殖所需营养,生长稳定,产量高,同时可以配成浓缩母液分次使用,成本降低而且使用方便。
本发明的海水螺旋藻培养液,包含有如下浓度的组分:C6H5O7Fe5·H2O3×10-3~10×10-3g/l、MnSO4·H2O0.5×10-3~5×10-3g/l、NaH2PO460×10-3g/l、C10H14N2O8Na2·2H2O12×10-3g/l、NaNO3100×10-3~600×10-3g/l、CaCl250×10-3g/l、KCl20×10-3g/l、MgSO4100×10-3g/l、ZnSO4·7H2O50×10-6g/l、CuSO4·5H2O30×10-6g/l、Na2MoO4·2H2O29.2×10-6g/l、CoCl2·6H2O28×10-6g/l,其中海水的盐度为30~35‰;
优选配方,包含有如下浓度的组分:C6H5O7Fe5·H2O6×10-3g/l、MnSO4·H2O4×10-3g/l、NaH2PO460×10-3g/l、C10H14N2O8Na2·2H2O12×10-3g/l、NaNO3400×10-3g/l、CaCl250×10-3g/l、KCl20×10-3g/l、MgSO4100×10-3g/l、ZnSO4·7H2O50×10-6g/l、CuSO4·5H2O30×10-6g/l、Na2MoO4·2H2O29.2×10-6g/l、CoCl2·6H2O28×10-6g/l,其中海水的盐度为30~35‰。
将上述培养母液按照1:500的比例加入到30~35‰的消毒海水中,制成螺旋藻海水培养液
本发明配方减去了NaHCO3的使用,使培养液完全可以通过加热消毒。而且,传统常用配方中的各成分用量较多,而本发明配方中各成分使用量少,其中用量最大的NaNO3也只有100×10-3~600×10-3g/l的使用量,通过各组分之间的协同作用来满足螺旋藻增殖所需的营养,同时可以配成浓缩母液分次使用,成本降低且使用方便。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的培养液进行详细的描述。
实施例1
取微量元素的化合物ZnSO4·7H2O5g、CuSO4·5H2O3g、Na2MoO4·2H2O2.92g、CoCl2·6H2O2.8g用1000mL蒸馏水定容,混合均匀使其完全溶解。取5mL该溶液、C6H5O7Fe5·H2O1.5g、MnSO4·H2O0.25g、NaH2PO430g、C10H14N2O8Na2·2H2O6g、NaNO350g、CaCl225g、KCl60g、MgSO450g用1000mL蒸馏水定容,混合均匀,加热煮沸使其完全溶解,同时达到消毒的目的,即可得到本发明的一种浓缩500倍的海水螺旋藻培养母液。
将上述浓缩培养母液按照1:500的比例加入到30~35‰的消毒海水中,制成螺旋藻海水培养液。将培养至对数生长期的螺旋藻液,摇匀,按照藻种与海水培养液的体积比为1:5的接种量接入海水培养液中,然后放在光照培养箱中,温度为24℃,光照强度为4000lx,光暗周期为12h:12h的条件下进行培养,每天取样用721型分光光度计在560nm测定吸光值(OD值),用来反映螺旋藻的生长情况,实验结果见表1。在相同的实验条件下,以Zarrouk培养液为对照组,比较评价不同培养液培养7天后螺旋藻的生长情况,实验结果见表2。表2中的比生长速率是反应藻类生长的重要指标,其高低反映了藻类的生长繁殖快慢,利用该指标评价不同培养液中螺旋藻的生长效果。比生长速率的计算公式:
K=(lgN-lgN0)/t
其中,N0-初始OD值;N-培养t天的OD值;t-培养天数。
实施例2
取微量元素的化合物ZnSO4·7H2O5g、CuSO4·5H2O3g、Na2MoO4·2H2O2.92g、CoCl2·6H2O2.8g用1000mL蒸馏水定容,混合均匀使其完全溶解。取5mL该溶液、C6H5O7Fe5·H2O3g、MnSO4·H2O2g、NaH2PO430g、C10H14N2O8Na2·2H2O6g、NaNO3200g、CaCl225g、KCl60g、MgSO450g用1000mL蒸馏水定容,混合均匀,加热煮沸使其完全溶解,并达到消毒的目的,即可得到本发明的一种浓缩500倍的海水螺旋藻培养母液。
将上述浓缩培养母液按照1:500的比例加入到30~35‰的消毒海水中,制成螺旋藻海水培养液。将培养至对数生长期的螺旋藻液,摇匀,按照藻种与海水培养液的体积比为1:5的接种量接入海水培养液中,然后放在光照培养箱中,温度为24℃,光照强度为4000lx,光暗周期为12h:12h的条件下进行培养,每天取样用721型分光光度计在560nm测定吸光值(OD值),用来反映螺旋藻的生长情况,实验结果见表1。培养7天后螺旋藻的生长情况评价结果见表2。
实施例3
取微量元素的化合物ZnSO4·7H2O5g、CuSO4·5H2O3g、Na2MoO4·2H2O2.92g、CoCl2·6H2O2.8g用1000mL蒸馏水定容,混合均匀使其完全溶解。取5mL该溶液、C6H5O7Fe5·H2O5g、MnSO4·H2O2.5g、NaH2PO430g、C10H14N2O8Na2·2H2O6g、NaNO3300g、CaCl225g、KCl60g、MgSO450g用1000mL蒸馏水定容,混合均匀,加热煮沸使其完全溶解,并达到消毒的目的,即可得到本发明的一种浓缩500倍的海水螺旋藻培养母液。
将上述浓缩培养母液按照1:500的比例加入到30~35‰的消毒海水中,制成螺旋藻海水培养液。将培养至对数生长期的螺旋藻液,摇匀,按照藻种与海水培养液的体积比为1:5的接种量接入海水培养液中,然后放在光照培养箱中,温度为24℃,光照强度为4000lx,光暗周期为12h:12h的条件下进行培养,每天取样用721型分光光度计在560nm测定吸光值(OD值),用来反映螺旋藻的生长情况,实验结果见表1。培养7天后螺旋藻的生长情况评价结果见表2。
表1:Zarrouk培养液与本发明实施例培养液处理的吸光值(OD值)变化
1d | 2d | 3d | 4d | 5d | 6d | 7d | |
Zarrouk配方 | 0.36 | 0.46 | 0.65 | 0.88 | 1.02 | 1.22 | 1.32 |
实施例1 | 0.35 | 0.55 | 0.71 | 0.91 | 1.09 | 1.27 | 1.35 |
实施例2 | 0.35 | 0.60 | 0.79 | 0.99 | 1.15 | 1.35 | 1.47 |
实施例3 | 0.36 | 0.59 | 0.77 | 1.03 | 1.15 | 1.36 | 1.48 |
表2:不同培养液的螺旋藻生长情况评价比较值
对照Zarrouk培养液与本发明配方3种实施例培养液处理对不同时间螺旋藻生长的作用结果(以吸光值表示)见表1。藻液光密度大小与螺旋藻群体生长的速度呈正比,从表1可见,7天内本发明各实施例处理的藻液吸光值均超过Zarrouk培养液处理,主要是在培养的第2~3天,Zarrouk培养液处理的藻液吸光值明显落后于其他处理。实施例2与实施例3处理的藻液吸光值高于实施例1。为节约成本从用药量大小来考虑,实施例2用药量虽然少于实施例3,但作用结果与实施例3差异不大,实施例2的培养液配方为本发明的优选配方。
比较评价Zarrouk培养液与本发明配方3种实施例培养液处理培养7天后对螺旋藻生长情况见表2,结果表明,本发明配方各实施例处理的螺旋藻比生长率均高于Zarrouk培养液处理,其中实施例2的比生长率最高,为0.89,说明培养7天后的螺旋藻生长情况,实施例2处理优于其他处理。从藻的颜色看,Zarrouk培养液与本发明配方实施例1处理中呈蓝绿色,实施例2、3处理中颜色更深,呈深蓝绿色,显示出生长良好的状态。
Claims (5)
1.一种海水培养液,其特征在于,所述的培养液包含有如下浓度的组分:C6H5O7Fe5·H2O3×10-3~10×10-3g/l、MnSO4·H2O0.5×10-3~5×10-3g/l、NaH2PO460×10-3g/l、C10H14N2O8Na2·2H2O12×10-3g/l、NaNO3100×10-3~600×10-3g/l、CaCl250×10-3g/l、KCl20×10-3g/l、MgSO4100×10-3g/l、ZnSO4·7H2O50×10-6g/l、CuSO4·5H2O30×10-6g/l、Na2MoO4·2H2O29.2×10-6g/l、CoCl2·6H2O28×10-6g/l,其中海水的盐度为30~35‰。
2.如权利要求1所述的海水培养液,其特征在于,所述的培养液包含有如下浓度的组分:C6H5O7Fe5·H2O6×10-3g/l、MnSO4·H2O4×10-3g/l、NaH2PO460×10-3g/l、C10H14N2O8Na2·2H2O12×10-3g/l、NaNO3400×10-3g/l、CaCl250×10-3g/l、KCl20×10-3g/l、MgSO4100×10-3g/l、ZnSO4·7H2O50×10-6g/l、CuSO4·5H2O30×10-6g/l、Na2MoO4·2H2O29.2×10-6g/l、CoCl2·6H2O28×10-6g/l,其中海水的盐度为30~35‰。
3.权利要求1或2所述的海水培养液在培养海水螺旋藻中的应用。
4.一种培养海水螺旋藻的方法,其特征在于,所述的方法中培养海水螺旋藻的培养液是用权利要求1或2所述的海水培养液配制的。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的培养液是用权利要求1或2所述的海水培养液按照1:500的比例加入到30~35‰的消毒海水中配制的。
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