CN104030851A

CN104030851A - 一种添加柚子皮的香菇培养基

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Publication number: CN104030851A
Application number: CN201410311130.7A
Authority: CN
Inventors: 王运凤
Original assignee: Luxuriant Source Guilin Agrotechnique Development Corp Ltd
Current assignee: Luxuriant Source Guilin Agrotechnique Development Corp Ltd
Priority date: 2014-06-30
Filing date: 2014-06-30
Publication date: 2014-09-10

Abstract

本发明公开了一种添加柚子皮的香菇培养基，其特征在于，由以下重量百分比的原料制成：木屑47％～57％，辅料28％～38％，柚子皮8％～13％，糖0.8％～1.3％，石膏0.7％～1.4％，硫酸镁0.2％～0.6％。采用本发明的香菇培养基培养香菇，在香菇生长过程中，可以有效抑制杂菌生长，保护菌种，同时培养出的香菇抗氧化能力增强。

Description

一种添加柚子皮的香菇培养基

技术领域

本发明涉及食用菌培养基领域，特别涉及一种添加柚子皮的香菇培养基。

背景技术

我国已成为食用菌生产大国，至2013年为止，我国生产的食用菌生产量占世界总产量的70％以上。食用菌生产已成为与种植业、养殖业并重的农村三大产业，是我国山区或贫困地区农民脱贫致富的重要途径。然而，在我国食用菌生产存在着原料消耗大、经济效率低、产出比倒挂等严重现象。

香菇作为一种食用菌，含有高蛋白、低脂肪、多糖、多种氨基酸和多种维生素。香菇具有多种药用功能，如提高机体免疫功能，抗氧化，延缓衰老，防癌抗癌，降血压、降血脂、降胆固醇，香菇还对糖尿病、肺结核、传染性肝炎、神经炎等治疗作用，又可用于消化不良、便秘等。

香菇在培养过程中，可能由于场地卫生条件差、灭菌不彻底、接种操作不当，包装破损等原因，被一些杂菌污染，菌种成活率降低，影响香菇的生长，给生产造成损失。如何寻找一种具有抗菌功能的香菇培养基成为食用菌领域的新需求。

柚子是芸香科植物柚的成熟果实，主要产于我国福建、江西、广东、广西等南方地区，现在我国的湖南、浙江、四川等地均有栽培。柚子清香、酸甜、凉润，营养丰富，药用价值很高，是人们喜食的名贵水果之一，也是医学界公认的最具食疗价值的水果。柚子皮是柚子的表皮又名橘红，性温，味苦、辛，有理气化痰、健脾消食、散寒燥湿的作用。而人们在食用了柚子后，柚子皮往往被当成垃圾丢弃，不仅为环境保护带来负担，同时也降低了柚子整体的功效价值。柚子皮中含有大量的柚皮苷，是属于黄酮类化合物又称黄碱素，是一类低分子天然植物成分，是植物在长期自然选择过程中产生的一些次生代谢产物。许多研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化、抗过敏、抗菌消炎、抗突变、降压、降血糖、抗肿瘤、延缓衰老和保肝护胃等功效。还有研究表明，柚子皮中含有非常丰富的蛋白质、有机酸、维生素以及钙、磷、镁、钠等人体必需的元素。将柚子皮应用在香菇培养基中具有广阔的市场前景和经济价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抗菌功能，能够提高香菇抗氧化功效的添加柚子皮的香菇培养基。

为实现上述目的，本发明采取如下方案：

一种添加柚子皮的香菇培养基，由以下重量百分比的原料制成：木屑47％～57％，辅料28％～38％，柚子皮8％～13％，糖0.8％～1.3％，石膏0.7％～1.4％，硫酸镁0.2％～0.6％。

本发明所述的添加柚子皮的香菇培养基，优选由以下重量百分比的原料制成：木屑52％，辅料33％，柚子皮12.5％，糖1.0％，石膏0.9％，硫酸镁0.6％。

本发明所述的辅料优选为米糠、棉籽壳、玉米芯、玉米粉、麦麸、花生粕、豆粕中的两种或两种以上，以任意比例混合。在配方中添加这些辅料，有利于提高培养基的糖分与维生素含量，促进香菇生长，提高香菇的产量。

本发明所述的糖优选为蔗糖或葡萄糖。因本发明所用木屑木质素含量高，为提高香菇对木质的利用率，在配料中适当提高糖的含量，以诱导木质素酶的产生并提高木质素酶的活性。

一种添加柚子皮的香菇培养基的制备方法，包括如下步骤：

(1)将木屑粉碎成1～2mm颗粒，将柚子皮晒干，粉碎成30～50目细粉；

(2)将木屑颗粒、辅料、柚子皮细粉、石膏混合，将糖和硫酸镁溶于水中倒入混合料中，边搅拌边喷水至含水率为60％～70％；

(3)将培养基装入规格为30×40×0.005cm聚乙烯薄膜料筒袋后，在常压状态下进行，将培养基在110℃蒸汽中灭菌12～24h，冷却至25～30℃，即得添加柚子皮的香菇培养基。

相比现有技术，本发明的有优点在于：

1、柚子皮中的黄酮及黄酮类物质对革兰氏阳性球菌，如葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌等，和革兰氏阴性杆菌，如大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌等都有抑制作用。在香菇培养基中添加柚子皮，有效抑制杂菌生长，保护香菇菌种。

2、柚子皮中的黄酮类物质成分具有抗氧化作用，本发明通过在香菇培养基加入柚子皮，可以增强香菇抗氧化功效。

3、柚子皮富含丰富的蛋白质、有机酸、维生素以及钙、磷、镁、钠等人体必需的元素，作为废料处理，浪费资源，将柚子皮添加到香菇培养基中，变废为宝，充分利用资源，提高柚子皮的利用价值。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。

实施例1

一种添加柚子皮的香菇培养基，由以下重量百分比的原料制成：柳树木屑47％，米糠18％、棉籽壳10％、玉米芯10％、柚子皮12.1％，葡萄糖1.3％，石膏1.4％，硫酸镁0.2％。

一种添加柚子皮的香菇培养基的制备方法，包括如下步骤：

(1)将柳树木屑粉碎成1mm颗粒，将柚子皮晒干，粉碎成30目细粉；

(2)将柳树木屑颗粒、米糠、棉籽壳、玉米芯、柚子皮细粉、石膏、混合，将葡萄糖和硫酸镁溶于水中倒入混合料中，边搅拌边喷水至含水率为60％；

(3)将培养基装入规格为30×40×0.005cm聚乙烯薄膜料筒袋后，在常压状态下进行，将培养基在110℃蒸汽中灭菌12h，冷却至25℃，即得添加柚子皮的香菇培养基。

实施例2

一种添加柚子皮的香菇培养基，由以下重量百分比的原料制成：杨树木屑52％，玉米粉10％，麦麸10％，花生粕8％，豆粕5％，柚子皮12.5％，葡萄糖1.0％，石膏0.9％，硫酸镁0.6％。

一种添加柚子皮的香菇培养基的制备方法，包括如下步骤：

(1)将杨树木屑粉碎成1.5mm颗粒，将柚子皮晒干，粉碎成40目细粉；

(2)将杨树木屑颗粒、玉米粉、麦麸、花生粕、豆粕、柚子皮细粉、石膏混合，将葡萄糖和硫酸镁溶于水中倒入混合料中，边搅拌边喷水至含水率为65％；

(3)将培养基装入规格为30×40×0.005cm聚乙烯薄膜料筒袋后，在常压状态下进行，将培养基在110℃蒸汽中灭菌18h，冷却至25℃，即得添加柚子皮的香菇培养基。

实施例3

一种添加柚子皮的香菇培养基，由以下重量百分比的原料制成：杨树木屑53.7％，米糠20％，麦麸10％，豆粕6％，柚子皮8％，蔗糖1.1％，石膏0.7％，硫酸镁0.5％。

一种添加柚子皮的香菇培养基的制备方法，包括如下步骤：

(2)将杨树木屑颗粒、米糠、麦麸、豆粕、柚子皮细粉、石膏混合，将蔗糖和硫酸镁溶于水中倒入混合料中，边搅拌边喷水至含水率为65％；

(3)将培养基装入规格为30×40×0.005cm聚乙烯薄膜料筒袋后，在常压状态下进行，将培养基在110℃蒸汽中灭菌20h，冷却至26℃，即得添加柚子皮的香菇培养基。

实施例4

一种添加柚子皮的香菇培养基，由以下重量百分比的原料制成：木屑57％，麦麸15％，棉籽壳13％，柚子皮13％，蔗糖0.8％，石膏0.8％，硫酸镁0.4％。

一种添加柚子皮的香菇培养基的制备方法，包括如下步骤：

(1)将木屑粉碎成1mm颗粒，将柚子皮晒干，粉碎成50目细粉；

(2)将木屑颗粒、麦麸、棉籽壳、柚子皮细粉、石膏混合，将蔗糖和硫酸镁溶于水中倒入混合料中，边搅拌边喷水至含水率为70％；

(3)将培养基装入规格为30×40×0.005cm聚乙烯薄膜料筒袋后，在常压状态下进行，将培养基在110℃蒸汽中灭菌24h，冷却至27℃，即得添加柚子皮的香菇培养基。

对比例

一种香菇培养基，由以下重量百分比的原料制成：杨树木屑54％，玉米粉12％，麦麸10％，花生粕9％，豆粕5％，葡萄糖1.0％，石膏0.9％，硫酸镁0.6％，水7.5％。

一种香菇培养基的制备方法，包括如下步骤：

(2)将杨树木屑颗粒、玉米粉、麦麸、花生粕、豆粕、石膏混合，将葡萄糖和硫酸镁溶于水中倒入混合料中，边搅拌边喷水至含水率为65％；

(3)将培养基装入规格为30×40×0.005cm聚乙烯薄膜料筒袋后，在常压状态下进行，将培养基在110℃蒸汽中灭菌18h，冷却至25℃，即得香菇培养基。

试验例1:本发明添加柚子皮的香菇培养基对杂菌的抑制作用

1、培养基液体制备：将本发明实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、对比例分别按料液比1:30加水提取，提取三次，合并提取液，浓缩至一定体积，加3倍95％的乙醇沉淀，取上清液浓缩、干燥，得实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、对比例培养基粗提物备用。

2、供试菌种及其纯化培养与鉴定：

葡萄球菌、链球菌、炭疽杆菌、大肠杆菌、变形杆菌，由广西大学动物科技学院提供。

菌种采用连续划线法进行纯化，培养后的菌落采用革兰氏染色法进行鉴别，鉴别后的菌种斜面培养、备用。

革兰氏染色法：细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌，后者为革兰氏阴性菌。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

3、细菌培养基的配制：

采用牛肉膏蛋白胨培养基，为了增加细菌的生长速度，每1kg水中加入10g葡萄糖以对培养基进行改良，0.1Mpa灭菌20min，制成平板。

4、供试菌液的制备：

挑取经纯化和鉴定的菌落，接种于普通肉汤培养基中，36℃恒温振荡培养至浑浊。然后吸取一定量菌液接种于数支大试管中，重复上述条件培养。菌液10倍稀释，分别取0.1ml涂于平板，36℃恒温培养，菌落形成后计数，制成5×10⁸CFU/ml菌液。

5、打孔器法测定本发明添加柚子皮的香菇培养基对杂菌的抑制作用：

用R＝0.6cm的打孔器在平板上打孔，涂布己经准备好的菌液，然后在孔中加入浓度为100g/L的不同培养基备用粗提物的溶液，37℃恒温培养2～3天后观察，测其抑菌圈的大小。

6、试验结果：

表1 加入不同香菇培养基溶液抑菌圈半径的大小统计单位：cm

	变形杆菌	葡萄球菌	链球菌	大肠杆菌	炭疽杆菌
						实施例1	1.45	1.47	1.65	1.79	1.66
实施例2	1.57	1.55	1.70	1.86	1.74
						实施例3	1.46	1.48	1.69	1.77	1.65
实施例4	1.51	1.50	1.64	1.74	1.69
						对比例	0.2	0.3	0.2	0.3	0.2

从表1可以看出，本发明实施例1、实施例2、实施例3、实施例4的添加柚子皮的香菇培养基对葡萄球菌、链球菌、炭疽杆菌、大肠杆菌、变形杆菌有较强的抑制作用，对比例的未添加柚子皮的香菇培养基对杂菌抑制作用极其微弱。

试验例2：本发明培养的香菇抗氧化作用

1、材料：本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇。

2、试验方法：

(1)香菇粗体物制备提取方法：将本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇10g，分别粉碎，按料液比1：25加水提取，提取三次，合并提取液，浓缩至一定体积，加3倍95％的乙醇沉淀，取上清液浓缩、干燥，得香菇粗提物备用。

(2)还原力的测定：样品将铁***(K₃Fe(CN)₆)还原成亚铁***(K₄Fe(CN)₆),亚铁***再与Fe³⁺作用，生成亚铁氰化铁(普鲁士蓝)，以在700nm波长处检测普鲁士蓝的吸光度表示还原力的大小，吸光度越高，样品的还原力就越强，抗氧化性越强。在700nm波长处，分别测定浓度为5mg/ml的本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物的吸光值。

(3)清除超氧阴离子实验：在产生超氧阴离子自由基(O^2-·)的反应体系中，分别加入浓度为5mg/ml的本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物，测定它们清除率。

(4)清除羟基自由基的实验：FeSO₄与H₂O₂反应产生·OH，在体系内加入水杨酸，可捕捉羟基自由基并产生有色物质，该物质在510nm处有最大吸收，当反应体系中存在·OH自由基清除剂时，此氧化过程受到抑制，吸光度值则降低。在FeSO₄与H₂O₂反应体系中，分别加入浓度为30mg/ml的本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物，测定清除率。

(5)模拟胃液pH条件下的NO^2-清除反应作用：清除亚硝酸盐是有效防止N-亚硝基化合物致癌的途径之一。在模拟体系中加入分别加入浓度为14mg/ml的本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物，测定清除率。

(6)DPPH法测定香菇抗氧化活性：DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基，广泛用于抗氧化评价体系中。在体系中，分别加入浓度为30mg/ml的本发明实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物，测定清除率。

3、试验结果：

表1 不同培养基培养的香菇粗提取物的还原能力

	实施例2	实施例3	对比例
				吸光值	1.641	1.613	0.897

表1结果表明，实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物具有抗氧化性，实施例2、实施例4抗氧化性优于对比例。

表2 不同培养基培养的香菇粗提取物清除超氧阴离子的能力

	实施例2	实施例3	对比例
				清除率	46％	41％	21％

表2表明，实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物都具有清除超氧阴离子的能力，实施例2、实施例3清除能力优于对比例。

表3 不同培养基培养的香菇粗提取物清除羟基自由基的能力

	实施例2	实施例3	对比例
				清除率	78％	71％	47％

表3表明，实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物都具有清除羟基自由基的能力，实施例2、实施例3清除能力优于对比例。

表4 不同培养基培养的香菇粗提取物对NO^2-清除作用

	实施例2	实施例3	对比例
				清除率	59％	57％	41％

表4表明，实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物对NO^2-都有清除作用，实施例2、实施例3清除能力优于对比例。

表5 不同培养基培养的香菇粗提取物对DPPH清除效果

	实施例2	实施例3	对比例
				清除率	71％	67％	39％

表5表明，实施例2、实施例3、对比例培养的香菇粗提取物对DPPH都有清除效果，实施例2、实施例3清除效果优于对比例，表明添加柚子皮的香菇培养基培养的香菇具有很好的抗氧化性。

综合上述氧化反应体系试验结果，可知实施例2、实施例3、对比例培养的香菇具有抗氧化性，而实施例2、实施例3优于对比例，说明添加柚子皮的香菇培养基能够增强香菇的抗氧化功效。

Claims

1.一种添加柚子皮的香菇培养基，其特征在于，由以下重量百分比的原料制成：木屑47％～57％，辅料28％～38％，柚子皮8％～13％，糖0.8％～1.3％，石膏0.7％～1.4％，硫酸镁0.2％～0.6％。

2.根据权利要求1所述的添加柚子皮的香菇培养基，其特征在于，由以下重量百分比的原料制成：木屑52％，辅料33％，柚子皮12.5％，糖1.0％，石膏0.9％，硫酸镁0.6％。

3.根据权利要求1或2所述的添加柚子皮的香菇培养基，其特征在于：所述的辅料为米糠、棉籽壳、玉米芯、玉米粉、麦麸、花生粕、豆粕中的两种或两种以上。

4.根据权利要求1或2所述的添加柚子皮的香菇培养基，其特征在于：所述的糖为蔗糖或葡萄糖。