CN103999776B - 一种兰科植物快速繁殖培养基配方 - Google Patents

一种兰科植物快速繁殖培养基配方 Download PDF

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Abstract

本发明是一种兰科植物快速繁殖培养基配方，所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基：启动培养基、增殖培养基、生根壮苗培养基。该培养基配方中不添加任何植物激素，具有仿野生培养的特点。使用本发明的配方获得的兰科植物组培苗长势好且整齐，移栽成活率高。

Description

一种兰科植物快速繁殖培养基配方
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其是涉及一种兰科植物组织培养快速繁殖的培养基配方。
背景技术
兰科植物是被子植物中的一个大家族，是高等植物中除菊科外最大的科，据统计全世界已知的兰科植物约有800属近25000种，广泛分布于除两级和极端干旱沙漠地区以外的各种陆地生态***中，其中以热带地区种类最为丰富。中国传统的兰花，主要指兰属植物，称之为中国兰，兰花作为集观赏和药用于一身的植物不仅拥有广大的爱好者，而且成为中国传统文化的一个组成部分。然而，兰花的传统繁殖方式为分株繁殖，繁殖系数低、速度慢，受地理环境和季节的限制，很难达到快速、高效繁殖的目的，而且在自然条件下兰花种子虽多，但由于其不具有发育完全的胚，很难萌发。通过组织培养这一技术手段和方法是目前解决兰科植物繁殖的有效措施，但所使用的培养基绝大多数是添加化学合成植物激素以促进植物快速繁殖与生长，组培苗往往抗逆性差、移栽死亡率偏高。本发明提供的一种兰科植物组织培养快速繁殖培养基配方中不添加任何化学合成植物激素，不但增殖系数高、生长速度快，而且组培苗健康、环境适应能力强、移栽成活率高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状而提供的一种兰科植物组织培养快速繁殖培养基配方，以达到兰科植物快速繁殖及组培苗环境适应能力强的目的。
为了达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明是一种兰科植物快速繁殖培养基配方，所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号0.5~2.5g/L、花宝2号0.2~2.0g/L、蛋白胨0.1~1.0g/L、土豆20~45g/L、椰汁50~200ml/L、蔗糖10~30g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆15~40g/L、香蕉30~70g/L、蔗糖15~40g/L、蛋白胨0.5~1.5g/L、活性炭0.5~1.5g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆15~45g/L、香蕉30~80g/L、蔗糖10~30g/L、蛋白胨0.5~1.5g/L、苹果20~50g/L、活性炭0.5~1.5g/L。
优选的：兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.0~2.0g/L、花宝2号0.5~1.5g/L、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆25~40g/L、椰汁80~120ml/L、蔗糖10~20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆25~35g/L、香蕉40~60g/L、蔗糖20~30g/L、蛋白胨0.7~1.2g/L、活性炭0.8~1.3g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆20~40g/L、香蕉40~60g/L、蔗糖15~25g/L、蛋白胨0.8~1.2g/L、苹果30~40g/L、活性炭0.8~1.2g/L。
优选的：兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.5g/L、花宝2号1.0g/L、蛋白胨0.5g/L、土豆30g/L、椰汁100ml/L、蔗糖15g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉50g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、活性炭1.0g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉50g/L、蔗糖20g/L、蛋白胨1.0g/L、苹果35g/L、活性炭1.0g/L。
优选的：兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.5g/L、花宝2号1.0g/L、蛋白胨0.5g/L、土豆25g/L、椰汁80ml/L、蔗糖20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆35g/L、香蕉45g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、活性炭1.0g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉55g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、苹果40g/L、活性炭1.0g/L。
优选的：兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.2g/L、花宝2号1.5g/L、蛋白胨0.5g/L、土豆35g/L、椰汁120ml/L、蔗糖20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉55g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、活性炭1.0g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆35g/L、香蕉60g/L、蔗糖20g/L、蛋白胨1.0g/L、苹果35g/L、活性炭1.0g/L。
优选的：三个培养阶段的培养基的PH均为5.8~6.2。
优选的：启动培养所使用的外植体为兰科植物的种子。
优选的：三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。
本发明的有益效果：本发明的培养基配方中不添加任何化学合成植物激素，用该培养基培养兰科植物不但增殖系数高、生长速度快，而且组培苗健康、环境适应能力强、移栽成活率高。
附图说明
图1为利用本发明培养基配方培养30d的铁皮石斛组培苗
图2为利用本发明培养基配方培养90d的铁皮石斛组培苗
具体实施方式
为了加深对本发明的理解，下面将结合附图和实施例对本发明做进一步详细描述，该实施例仅用于解释本发明，并不对本发明的保护范围构成限定。
如图1-2所示，本发明是一种兰科植物快速繁殖培养基配方，所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号0.5~2.5g/L、花宝2号0.2~2.0g/L、蛋白胨0.1~1.0g/L、土豆20~45g/L、椰汁50~200ml/L、蔗糖10~30g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆15~40g/L、香蕉30~70g/L、蔗糖15~40g/L、蛋白胨0.5~1.5g/L、活性炭0.5~1.5g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆15~45g/L、香蕉30~80g/L、蔗糖10~30g/L、蛋白胨0.5~1.5g/L、苹果20~50g/L、活性炭0.5~1.5g/L；
启动培养所使用的外植体为兰科植物的种子，三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基，即启动培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基均以琼脂为支撑物的固体培养基，三个培养阶段的培养基的PH均为5.8~6.2。
优选的：所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.0~2.0g/L、花宝2号0.5~1.5g/L、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆25~40g/L、椰汁80~120ml/L、蔗糖10~20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆25~35g/L、香蕉40~60g/L、蔗糖20~30g/L、蛋白胨0.7~1.2g/L、活性炭0.8~1.3g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆20~40g/L、香蕉40~60g/L、蔗糖15~25g/L、蛋白胨0.8~1.2g/L、苹果30~40g/L、活性炭0.8~1.2g/L。
启动培养所使用的外植体为兰科植物的种子，三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基，即启动培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基均以琼脂为支撑物的固体培养基，三个培养阶段的培养基的PH均为5.8~6.2。
实施例1
铁皮石斛组织培养快速繁殖
（1）外植体：铁皮石斛果荚，果荚完整无裂缝；
（2）外植体消毒：将果荚用清水洗净，放入75%酒精20s，无菌水清洗2次，再将果荚放入0.1%的升汞中12min，无菌水清洗5~7次；
（3）接种及启动培养：在无菌环境下将消毒完成的果荚一侧开个小口，将种子播撒到无菌培养基中，即启动培养基中，启动培养基的配方为：花宝1号1.5g/L+花宝2号1.0g/L+蛋白胨0.5g/L+土豆30g/L+椰汁100ml/L+蔗糖15g/L+琼脂5.5g/L，PH6.0；
（4）增殖培养：启动培养25~35d后，将铁皮石斛小苗或原球茎转接到增殖培养基中，增殖培养基配方为：1/2MS+土豆30g/L+香蕉50g/L+蔗糖25g/L+蛋白胨1.0g/L+活性炭1.0g/L+琼脂5.5g/L，PH6.2；
（5）生根壮苗培养：增殖培养30~45d，将组培苗转接到生根壮苗培养基中，生根壮苗培养基配方为：1/2MS+土豆30g/L+香蕉50g/L+蔗糖20g/L+蛋白胨1.0g/L+苹果35g/L+活性炭1.0g/L+琼脂5.5g/L，PH5.8。培养40~60d完成生根壮苗培养；
（6）培养环境条件：除了启动培养首先暗培养10d，然后进行光照培养外，其它培养阶段均需要光照培养，光照强度与周期：2000~3000LX、14h/d；温度23±2℃；湿度40%，即，在启动培养时首先暗培养10d，然后进行光照培养，并且在增殖培养和生根壮苗培养阶段都进行光照培养。
实施例2
文心兰组织培养快速繁殖
（1）外植体：文心兰果荚，果荚完整无裂缝；
（2）外植体消毒：将果荚用清水洗净，放入75%酒精20s，无菌水清洗2次，再将果荚放入0.1%的升汞中12min，无菌水清洗5~7次；
（3）接种及启动培养：在无菌环境下将消毒完成的果荚一侧开个小口，将种子播撒到无菌培养基中，即将种子播撒到无菌启动培养基中，培养基的配方为：花宝1号1.5g/L+花宝2号1.0g/L+蛋白胨0.5g/L+土豆25g/L+椰汁80ml/L+蔗糖20g/L+琼脂5.0g/L，PH5.8；
（4）增殖培养：启动培养30d后，将文心兰小苗或原球茎转接到增殖培养基中，增殖培养基配方为：1/2MS+土豆35g/L+香蕉45g/L+蔗糖25g/L+蛋白胨1.0g/L+活性炭1.0g/L+琼脂5.0g/L，PH6.0；
（5）生根壮苗培养：增殖培养40~60d，将组培苗转接到生根壮苗培养基中，培养基配方为：1/2MS+土豆30g/L+香蕉55g/L+蔗糖25g/L+蛋白胨1.0g/L+苹果40g/L+活性炭1.0g/L+琼脂5.0g/L，PH6.0。培养60d左右完成生根壮苗培养；
（6）培养环境条件：除了启动培养首先暗培养7d，然后进行光照培养外，其它培养阶段均需要光照培养；光照强度与周期：1800~2500LX、14h/d；温度24±2℃；湿度35%，即在启动培养时首先暗培养7d，然后进行光照培养，并且在增殖培养和生根壮苗培养阶段都进行光照培养。
实施例3
白芨组织培养快速繁殖
（1）外植体：白芨果荚，果荚完整无裂缝；
（2）外植体消毒：将果荚用清水洗净，放入75%酒精20s，无菌水清洗2次，再将果荚放入0.1%的升汞中12min，无菌水清洗5~7次；
（3）接种及启动培养：在无菌环境下将消毒完成的果荚一侧开个小口，将种子播撒到无菌培养基中，培养基的配方为：花宝1号1.2g/L+花宝2号1.5g/L+蛋白胨0.5g/L+土豆35g/L+椰汁120ml/L+蔗糖20g/L+琼脂5.0g/L，PH6.0；
（4）增殖培养：启动培养25d后，将文心兰小苗或原球茎转接到增殖培养基中，培养基配方为：1/2MS+土豆30g/L+香蕉55g/L+蔗糖25g/L+蛋白胨1.0g/L+活性炭1.0g/L+琼脂5.0g/L，PH6.0；
（5）生根壮苗培养：增殖培养45d后，将组培苗转接到生根壮苗培养基中，培养基配方为：1/2MS+土豆35g/L+香蕉60g/L+蔗糖20g/L+蛋白胨1.0g/L+苹果35g/L+活性炭1.0g/L+琼脂5.0g/L，PH6.0。培养60d左右完成生根壮苗培养。
（6）培养环境条件：除了启动培养首先暗培养10d，然后进行光照培养外，其它培养阶段均需要光照培养；光照强度与周期：1800~3000LX、14h/d；温度24±2℃；湿度40%。
本发明的培养基配方中不添加任何化学合成植物激素，用该培养基培养兰科植物不但增殖系数高、生长速度快，而且组培苗健康、环境适应能力强、移栽成活率高，该培养基配方中不添加任何植物激素，具有仿野生培养的特点，使用本发明的配方获得的兰科植物组培苗长势好且整齐，移栽成活率高。

Claims (8)

1.兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号0.5~2.5g/L、花宝2号0.2~2.0g/L、蛋白胨0.1~1.0g/L、土豆20~45g/L、椰汁50~200ml/L、蔗糖10~30g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆15~40g/L、香蕉30~70g/L、蔗糖15~40g/L、蛋白胨0.5~1.5g/L、活性炭0.5~1.5g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆15~45g/L、香蕉30~80g/L、蔗糖10~30g/L、蛋白胨0.5~1.5g/L、苹果20~50g/L、活性炭0.5~1.5g/L。
2.根据权利要求1所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.0~2.0g/L、花宝2号0.5~1.5g/L、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆25~40g/L、椰汁80~120ml/L、蔗糖10~20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆25~35g/L、香蕉40~60g/L、蔗糖20~30g/L、蛋白胨0.7~1.2g/L、活性炭0.8~1.3g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆20~40g/L、香蕉40~60g/L、蔗糖15~25g/L、蛋白胨0.8~1.2g/L、苹果30~40g/L、活性炭0.8~1.2g/L。
3.根据权利要求1所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.5g/L、花宝2号1.0g/L、蛋白胨0.5g/L、土豆30g/L、椰汁100ml/L、蔗糖15g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉50g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、活性炭1.0g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉50g/L、蔗糖20g/L、蛋白胨1.0g/L、苹果35g/L、活性炭1.0g/L。
4.根据权利要求1所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.5g/L、花宝2号1.0g/L、蛋白胨0.5g/L、土豆25g/L、椰汁80ml/L、蔗糖20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆35g/L、香蕉45g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、活性炭1.0g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉55g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、苹果40g/L、活性炭1.0g/L。
5.根据权利要求1所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述兰科植物的快速繁殖的培养基包括如下三个培养阶段所使用的培养基，每个阶段的培养基的组成为：
a.启动培养基：花宝1号1.2g/L、花宝2号1.5g/L、蛋白胨0.5g/L、土豆35g/L、椰汁120ml/L、蔗糖20g/L；
b.增殖培养基：1/2MS、土豆30g/L、香蕉55g/L、蔗糖25g/L、蛋白胨1.0g/L、活性炭1.0g/L；
c.生根壮苗培养基：1/2MS、土豆35g/L、香蕉60g/L、蔗糖20g/L、蛋白胨1.0g/L、苹果35g/L、活性炭1.0g/L。
6.根据权利要求1-5的任一项所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述三个培养阶段的培养基的PH均为5.8~6.2。
7.根据权利要求1-5的任一项所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述的启动培养所使用的外植体为兰科植物的种子。
8.根据权利要求1-5的任一项所述兰科植物快速繁殖培养基，其特征在于：所述的三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。
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