CN103998063B - 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途 - Google Patents

聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN103998063B
CN103998063B CN201280053588.6A CN201280053588A CN103998063B CN 103998063 B CN103998063 B CN 103998063B CN 201280053588 A CN201280053588 A CN 201280053588A CN 103998063 B CN103998063 B CN 103998063B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
acute
disease
adm
lung
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201280053588.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103998063A (zh
Inventor
I.弗拉默
J.克贝尔林
H-G.纳切
N.格里贝诺夫
R.肖赫-卢普
S.维特罗克
M.克尔恩伯格
F.文德尔
G.雷德利希
A.克诺尔
J.马利
I.普里特查德
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bayer Pharma AG
Original Assignee
Bayer Pharma AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Pharma AG filed Critical Bayer Pharma AG
Priority to CN201610837728.9A priority Critical patent/CN107412740B/zh
Publication of CN103998063A publication Critical patent/CN103998063A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103998063B publication Critical patent/CN103998063B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/23—Calcitonins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/0075—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a dry powder inhaler [DPI], e.g. comprising micronized drug mixed with lactose carrier particles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/0078—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a nebulizer such as a jet nebulizer, ultrasonic nebulizer, e.g. in the form of aqueous drug solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic

Abstract

本发明涉及新型聚乙二醇（PEG）基肾上腺髓质素前药，涉及其制备方法，涉及其用于治疗和/或预防疾病的用途，并涉及其用于制备用于治疗和/或预防疾病，尤其是心血管病症、水肿性病症和/或炎性病症的药物的用途。

Description

聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途
本发明涉及新型聚乙二醇（PEG）基肾上腺髓质素前药，涉及其制备方法，涉及其用于治疗和/或预防疾病的用途，和涉及其用于制备用于治疗和/或预防疾病，尤其是心血管病症、水肿性病症和/或炎性病症的药物的用途。
在肾上腺、肺、肾脏、心肌和其它器官中产生52个氨基酸肽类激素肾上腺髓质素（ADM）。ADM的血浆水平在较低的皮摩尔范围内。ADM是肽的降钙素基因相关肽（CGRP）族的一员并由此结合到由CRLR和RAMP 2或3（降钙素受体样受体和受体活性修饰蛋白2或3）组成的异源二聚体G蛋白偶联受体上。ADM受体的活化导致在带有该受体的细胞中腺苷3',5'-环一磷酸（cAMP）的细胞内升高。ADM受体存在于几乎所有包括内皮细胞的器官中的不同细胞类型上。人们认为ADM被中性肽链内切酶代谢并主要在其中高度表达ADM-受体的肺中被清除[综述参见Gibbons C., Dackor R., Dunworth W., Fritz-Six K., Caron K.M.,MolEndocrinol 21(4),783–796 (2007)]。
来自文献的实验数据表明，ADM涉及多种功能性作用，尤其包括血压调节、支气管舒张、肾功能、激素分泌、细胞生长、分化、神经传递和免疫反应的调节。此外，ADM在内皮细胞的增殖与再生过程中作为自分泌因子起到了关键作用[综述参见García M.A., Martín-Santamaría S., de Pascual-Teresa B., Ramos A., Julián M., Martínez A., ExpertOpin Ther Targets, 10(2), 303-317 (2006)]。
有大量来自文献的证据表明ADM对完整的内皮屏障功能而言不可或缺，并且给药超生理水平的ADM在包括败血症、急性肺损伤和肠道炎症的动物实验中的多种炎性病况中产生强烈的抗水肿和抗炎作用[综述参见Temmesfeld-Wollbrück B., Hocke A.C.,Suttorp N., Hippenstiel S., Thromb Haemost；98, 944－951 (2007)]。
迄今为止，在具有可测血液动力学终点的心血管适应症如肺动脉高血压、高血压、心力衰竭和急性心肌梗塞中进行了ADM的临床试验。ADM在患有前述病况的患者中的几项研究中显示了血液动力学效果。但是，效果仅仅是短暂的，并在结束给药后立即终止。这种发现与ADM的已知药代动力学特性充分相关。药效尤其包括降低全身与肺动脉血压和增加心输出量[Troughton R.W., Lewis L.K., Yandle T.G., Richards A.M., Nicholls M.G.,Hypertension, 36(4), 588-93 (2000)；Nagaya N., Kangawa K., Peptides,. 25(11),2013-8 (2004)；Kataoka Y., Miyazaki S., Yasuda S., Nagaya N., Noguchi T.,Yamada N., Morii I., Kawamura A., Doi K., Miyatake K., Tomoike H., KangawaK., J Cardiovasc Pharmacol, 56(4), 413-9 (2010)]。
总之，基于来自大量动物实验数据和人的第一轮临床试验的实验数据，提高ADM至超生理水平被认为是治疗人与动物的多种病况的目标机理。但是，使用ADM作为治疗剂的主要限制是连续输液治疗的不方便的适用性（这排除了其用于大多数的潜在适应症）以及与ADM推注给药造成的低血压相关的潜在受限的安全限度（safety margins）。
本发明的目的是提供可用于治疗疾病，特别是心血管病症、水肿性病症和炎性病症的新型化合物。
许多治疗活性肽或蛋白质受困于在体内的高清除率。存在几种形成此类药物的可注射储库型剂型（injectable depot）的途径，这些途径涉及使用大分子。
以非共价键合状态含有药物分子的聚合物基质是公知的。这些也可以以水凝胶、微粒子或胶束形式注射。此类药物产品的释放动力学可能相当不可靠，具有高患者间变异性。此类聚合物的产生可能损害敏感的药物物质，或者该药物物质会在其降解过程中与该聚合物发生副反应（D.H. Lee等人, J. Contr. Rel., 2003, 92, 291-299）。
肽或蛋白质永久PEG化以提高它们的溶解度、降低免疫原性和通过降低肾清除率来延长半衰期是自20世纪80年代初为人公知的概念（Caliceti P.,Veronese F.M., Adv.Drug Deliv. Rev.2003, 55, 1261-1277）。对于几种药物已经成功采用了这种方法，但是对许多例子而言，PEG化在一定程度上降低药物物质的功效，使得这一概念不再适宜（T.Peleg-Shulman等人, J. Med. Chem., 2004, 47, 4897-4904）。
合适的替代方法是聚合物基前药。IUPAC对前药的现行定义描述了以下术语（International Union of Pure and Applied Chemistry and International Union ofBiochemistry: GLOSSARY OF TERMS USED IN MEDICINAL CHEMISTRY (Recommendations1998); Pure & Appl. Chem.第70卷, 第5期, 1998, 第1129-1143页）：
前药：前药是经历生物转化后展示其药理作用的任何化合物。前药由此可以看作是含有以短暂方式使用的专门化无毒保护性基团以改变或消除母体分子中不合意性质的药物。
载体连接前药（载体前药）：载体连接前药是含有给定活性物质与暂时性载体基团的临时连接的前药，所述暂时性载体基团产生改善的物理化学或药代动力学性质并通常通过水解裂解可容易地在体内除去。
级联前药：级联前药是载体基团的裂解仅在暴露活化基团之后才变得有效的前药。
有PEG基载体前药的几个实例，它们大多数需要酶激活（主要通过酶水解引发）活性药物与载体之间的连接基。由于酯类在体内非常容易和不可预测地裂解，载体前药的直接酯连接基的可用性存在限制（J. Rautio等人, Nature Reviews Drug discovery,2008, 7 255-270）。
通常使用的替代方法是级联连接到肽或蛋白质中的胺官能团的连接基。在级联连接基中，作为级联中速率限制步骤已经除去掩蔽基团。这激活了连接基团以便在第二位置分解以释放肽或蛋白质。通常，掩蔽基团可以通过酶机理除去（R.B.Greenwald等人在WO2002/089789中，Greenwald,等人, J. Med. Chem. 1999, 42, 3657-3667，F.M.H.DeGroot等人在WO2002/083180和WO2004/043493中，以及D. Shabat等人在WO2004/019993中）。
不依赖于酶激活的替代方法是U. Hersel等人在WO2005/099768中的概念。在他们的方法中，以纯粹的pH依赖方式通过内部亲核试剂的攻击除去酚上的掩蔽基团。这激活了连接基以便进一步分解。
如U. Hersel等人在WO2005/099768所提到的那样，“Greenwald, DeGroot和Shabat描述的前述前药体系中的缺点在于在临时连接***后释放可能有毒的芳族小分子副产物如醌甲基化物。可能有毒的本体以1:1的化学计量比与药物一起释放并可能呈现高的体内浓度”。同样的问题也同样适用于Hersel等人的体系。
对于小的有机分子来说，存在数量众多的不同前药途径（J. Rautio等人, NatureReviews Drug discovery, 2008, 7 255-270）。U. Hersel等人所用的作为他们的掩蔽基团的释放机理的途径自20世纪80年代晚期已经用作小分子的酚类基团的前药途径（W.S.Saari在EP 0296 811中和W.S. Saari等人, J. Med. Chem. 1990, 第33卷, 第1期, 第97-101页）。
替代的胺基前药体系基于作为级联前药的双羟乙基甘氨酸的缓慢水解。双羟乙基甘氨酸的羟基被易于被酯酶水解的酯掩蔽（R. Greenwald等人, J. Med. Chem. 2004,47, 726–734和D. Vetter等人在WO 2006/136586中）。
用作成像剂和治疗剂的标记肾上腺髓质素衍生物是已知的（J. Depuis等人在CA2567478和WO 2008/138141中）。在这些ADM衍生物中，能够结合放射性同位素的络合笼状分子结构以直接方式或经由间隔基单元（可能还包括短PEG间隔基）连接到ADM的N端。这些药物的诊断或治疗价值来自于放射性分子的靶向递送。
与上述前药途径（其均基于掩蔽胺官能团）不同，本发明基于掩蔽ADM中酪氨酸的酚基。基于该酚基上氨基甲酸酯的内部亲核试剂辅助裂解，使用载体连接前药。相对于上述其它前药类别的关键优点在于该连接基分解产物——永久连接到该载体上的环状脲——的毒理学无害性。此外，该前药的分解不取决于会导致裂解动力学的高患者间变异性的酶机理。该裂解机理仅依赖于pH，因为在酸性pH下质子化的内部胺在更高（中性）pH下活化以充当攻击基于酪氨酸的酚类氨基甲酸酯的亲核试剂。
在本发明内容中，现在描述了一种化合物，其充当具有与AMD相比延长的药理作用持续时间的缓释ADM-前药，并且其基于这种特定作用机理——在肠胃外给药后——在体内发挥持续的消炎和血液动力学作用，分别例如内皮屏障功能的稳定化和降低血压。
本发明提供下式的化合物以及其盐、其溶剂合物和其盐的溶剂合物：
其中
n代表数字0、1、2或3，
R1代表氢、甲基、乙基、正丙基或异丙基，
R2代表用甲氧基封端的直链或支链PEG 20kDa至80kDa。
本发明的化合物是式（I）化合物以及其盐、其溶剂合物和其盐的溶剂合物，式（I）所涵盖并具有下文中具体说明的式的化合物和其盐、其溶剂合物以及其盐的溶剂合物，式（I）所涵盖并在下文中作为操作实施例具体说明的化合物和其盐、其溶剂合物以及其盐的溶剂合物，如果式（I）所涵盖并在下文中具体说明的化合物还不是盐、溶剂合物以及盐的溶剂合物的话。
取决于它们的结构，本发明的化合物可以以立体异构体形式存在（对映异构体，非对映异构体）。本发明因此涵盖对映异构体或非对映异构体及其特定混合物。立体异构同质成分可以以已知方式由此类对映异构体和/或非对映异构体的混合物中分离。
当本发明的化合物以互变异构形式存在时，本发明涵盖所有互变异构形式。
在本发明内容中，优选的盐是本发明化合物的生理学可接受的盐。还包括本身不适于药物应用但是例如可用于分离或提纯本发明化合物的盐。
本发明的化合物的生理学可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。
本发明的化合物的生理学可接受的盐还包括惯用碱的盐，例如和优选碱金属盐（例如钠盐和钾盐）、碱土金属盐（例如钙盐和镁盐）和衍生自氨或具有1至16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺例如和优选乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙基胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄基胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。
在本发明内容中，溶剂合物指的是在固体状态或液体状态下通过与溶剂分子配位形成复合物的本发明化合物的那些形式。水合物是其中与水配位的溶剂合物的特定形式。在本发明内容中优选的溶剂合物是水合物。
在本发明内容中，在R2中提到的用甲氧基封端指的是该聚乙二醇（PEG）在未键合至氧的末端处被甲氧基取代，即-PEG 40kDa-OMe。
优选的是式（I）的化合物，其中：
n代表数字1或2，
R1代表氢或甲基，
R2代表用甲氧基封端的直链PEG 40kDa。
还优选式（I）的化合物以及其盐、其溶剂合物和其盐的溶剂合物，其中：
n代表数字1或2，
R1代表氢，
R2代表用甲氧基封端的直链PEG 40kDa。
还优选式（I）的化合物，其中n代表数字1。
还优选式（I）的化合物，其中R1代表氢。
还优选式（I）的化合物，其中-NHR1取代基所键合的碳原子具有S构型。
还优选式（I）的化合物，其中R2代表用甲氧基封端的直链PEG 40kDa。
还优选式（I）的化合物，其具有式（Ia）的结构：
其中
n、R1和R2各自如上定义。
在基团的特殊组合或优选组合中给出的特定基团定义也可以替换成其它组合的任何基团定义，而不考虑指定的基团的特殊组合。
非常特别优选的是前述优选范围的两个或更多个的组合。
本发明进一步提供制备式（I）化合物、或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物的方法，其中式（II）化合物：
其中
n和R1各自如上定义，
与式（III）化合物反应
其中
R2如上定义。
该反应通常在惰性溶剂中，优选在0℃至50℃的温度范围内在标准压力下实施。
惰性溶剂是例如pH 3至5的柠檬酸盐缓冲液、甘氨酸-盐酸盐缓冲液、邻苯二甲酸盐缓冲液或乙酸盐缓冲液，优选pH 4的柠檬酸盐缓冲液。
式（III）化合物是已知的或可以通过已知方法由合适的起始化合物合成。
式（II）化合物是已知的或可以通过以下方法制备：使式（IV）化合物
其中
n和R1各自如上定义，
在第一阶段中与式（V）化合物反应
并在第二阶段中与酸反应。
第一阶段中的反应通常在惰性溶剂中在脱水试剂的存在下，任选在碱的存在下，优选在室温至70℃的温度范围内在标准压力下实施。
惰性溶剂是例如卤代烃如二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷，醚如二氧杂环己烷、四氢呋喃或1,2-二甲氧基乙烷，或其它溶剂如丙酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、2-丁酮或乙腈。同样可能使用该溶剂的混合物。优选二甲基甲酰胺。
本发明中合适的脱水试剂是例如碳二亚胺类，例如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二异丙基-、N,N'-二环己基碳二亚胺、N-(3-二甲基氨基­异丙基)-N'-乙基­碳二亚胺盐酸盐（EDC）、N-环己基­碳二亚胺-N‘-丙氧基甲基­聚苯乙烯（PS-碳二亚胺），或羰基­化合物如羰基­二咪唑，或1,2-噁唑鎓­化合物如2-乙基-5-苯基-1,2-­噁唑鎓3-硫酸盐或2-叔丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，或酰基氨基化合物如2-乙氧基-1-乙氧基­羰基-1,2-二氢喹啉，或丙烷膦酸酐，或氯甲酸异丁酯，或双-(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯或苯并***基氧基三­(二甲基­氨基)鏻六氟磷酸盐或O-(苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐（HBTU）、苯并***-1-基-N-四甲基脲四氟硼酸盐（TBTU）、2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐（TPTU）或O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐（HATU），或1-羟基­苯并***（HOBt）或苯并***-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻­六氟磷酸盐（BOP）或苯并***-1-基氧基三(吡咯烷并)­鏻六氟磷酸盐（PYBOP）或N-羟基琥珀酰亚胺，或这些与碱的混合物。
碱是例如碱金属碳酸盐，例如碳酸钠或碳酸钾，或碳酸氢钠或碳酸氢钾，或有机碱如三烷基胺，例如三乙胺、N-甲基­吗啉、N-甲基­哌啶、4-二甲基­氨基­吡啶或N,N-二异丙基乙胺，优选N,N-二异丙基乙胺。
优选地，该缩合用TBTU在N,N-二异丙基乙胺的存在下进行。
第二阶段反应任选在惰性溶剂中，优选在室温至60℃的温度范围内在标准压力下实施。
惰性溶剂是例如卤代烃如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳或1,2-二氯乙烷，或醚如四氢呋喃或二氧杂环己烷，优选二氯甲烷。
酸是例如三氟乙酸或在二氧杂环己烷中的盐酸，优选浓缩三氟乙酸。浓缩三氟乙酸可以在添加清除剂如水、酚、苯甲硫醚和1,2-乙二醇的情况下使用。优选这些清除剂各自为1至5%。
式（V）化合物是已知的，或可以通过已知方法由合适的起始化合物（实施例14A）合成。
式（IV）化合物是已知的，或可以通过以下方法制备：使式（VI）化合物
其中
n和R1各自如上定义,
与钯（0）源和还原剂反应。
该反应通常在惰性溶剂中，任选在弱碱的存在下，优选在0℃至50℃的温度范围内在标准压力下实施。
惰性溶剂是例如卤代烃如二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷，醚如二氧杂环己烷、四氢呋喃或1,2-二甲氧基乙烷，或其它溶剂如丙酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、2-丁酮或乙腈。同样可能使用溶剂的混合物。优选四氢呋喃。
钯（0）源是例如四(三苯基膦)钯（0）、三(二亚苄基丙酮)二钯（0）或在该反应过程中原位还原为钯（0）的钯（II）源，优选四(三苯基膦)钯（0）。
还原剂是例如甲酸或三乙基甲硅烷，优选甲酸。
碱是例如三乙胺、N,N-二异丙基乙胺或磷酸钾溶液，优选三乙胺。
式（VI）化合物是已知的或可以通过以下方法制备：使式（VII）化合物
其中
n和R1各自如上定义，
与式（VIII）化合物反应：
。
该反应通常在惰性溶剂中，在脱水试剂的存在下，任选在碱的存在下，优选在室温至70℃的温度范围内在标准压力下实施。
惰性溶剂是例如卤代烃如二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷，醚如二氧杂环己烷、四氢呋喃或1,2-二甲氧基乙烷，或其它溶剂如丙酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、2-丁酮或乙腈。同样可能使用溶剂的混合物。优选二氯甲烷。
本发明中合适的脱水试剂是例如碳二亚胺类，例如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二异丙基-、N,N'-二环己基碳二亚胺、N-(3-二甲基氨基­异丙基)-N'-乙基­碳二亚胺盐酸盐（EDC）、N-环己基­碳二亚胺-N‘-丙氧基甲基­聚苯乙烯（PS-碳二亚胺），或羰基­化合物如羰基­二咪唑，或1,2-噁唑鎓­化合物如2-乙基-5-苯基-1,2-­噁唑鎓3-硫酸盐或2-叔丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，或酰基氨基化合物如2-乙氧基-1-乙氧基­羰基-1,2-二氢喹啉，或丙烷膦酸酐，或氯甲酸异丁酯，或双-(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯或苯并***基氧基三­(二甲基­氨基)鏻六氟磷酸盐或O-(苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐（HBTU）、苯并***-1-基-N-四甲基脲四氟硼酸盐（TBTU）、2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐（TPTU）或O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐（HATU），或1-羟基­苯并***（HOBt）或苯并***-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻­六氟磷酸盐（BOP）或苯并***-1-基氧基三(吡咯烷并)­鏻六氟磷酸盐（PYBOP）或N-羟基琥珀酰亚胺，或这些与碱的混合物。
碱是例如碱金属碳酸盐，例如碳酸钠或碳酸钾，或碳酸氢钠或碳酸氢钾，或有机碱如三烷基胺，例如三乙胺、N-甲基­吗啉、N-甲基­哌啶、4-二甲基­氨基­吡啶或N,N-二异丙基乙胺，优选N,N-二异丙基乙胺。
优选地，该缩合用HATU在N,N-二异丙基乙胺的存在下进行。
式（VII）和（VIII）化合物是已知的或可以通过已知方法由合适的起始化合物合成。
本发明的化合物的制备可以通过下列合成方案来例示：
方案1
。
本发明的化合物显示出不可预见的药理活性可用范围。
因此，它们适于用作在人和动物中治疗和/或预防疾病的药物。
本发明的化合物的不同之处在于是特定的肾上腺髓质素（ADM）释放前药。
本发明进一步提供本发明的化合物用于治疗和/或预防病症，尤其是心血管病症、水肿性病症和/或炎性病症的用途。
对本发明而言，术语“治疗”包括抑制、延缓、减轻、缓解、阻止、减少疾病、病症、病况或病情、其发展和/或进展和/或其症状，或造成疾病、病症、病况或病情、其发展和/或进展和/或其症状的衰退。术语“预防（prevention）”包括降低患有、感染或经历疾病、病症、病况或病情、其状态、发展和/或进展和/或其症状的风险。术语预防包括防治（prophylaxis）。治疗或预防疾病、病症、病况或病情可以是部分或完全的。
在其药理性质基础上，本发明的化合物可用于治疗和/或预防心血管疾病，特别是心力衰竭，尤其是慢性和急性心力衰竭、舒张性和收缩性（充血性）心力衰竭、急性失代偿性心力衰竭、心脏功能不全、冠心病、心绞痛、心肌梗死、缺血再灌注损伤、缺血性和出血性卒中、动脉硬化、动脉粥样硬化、高血压尤其是原发性高血压、恶性原发性高血压、继发性高血压、肾血管性高血压和肾脏和内分泌病症继发的高血压、高血压性心脏病、高血压性肾疾病、肺动脉高血压，尤其是继发性肺动脉高血压、具有或不具有急性肺心病的肺栓塞后的肺动脉高血压、原发性肺动脉高血压和周围动脉闭塞性疾病。
本发明的化合物此外适于治疗和/或预防妊娠[怀孕引发的]水肿和具有和不具有高血压的蛋白尿（先兆子痫）。
本发明的化合物此外适于治疗和/或预防肺部病症，如慢性阻塞性肺疾病、哮喘、急性和慢性肺水肿、吸入的有机尘埃和真菌、放线菌或其它来源的粒子造成的变应性肺泡炎和肺炎、急性化学性支气管炎、急性和慢性化学性肺水肿（例如在吸入光气、氮氧化物后）、神经源性肺水肿、辐射造成的急性和慢性肺部表现、急性和慢性间质性肺病症（例如但不限于药物引起的间质性肺病症，例如继发于博来霉素治疗）、成人或儿童包括新生儿的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）、肺炎和败血症继发的ALI/ARDS、吸引术继发的吸入性肺炎和ALI/ARDS（例如但不限于反刍胃内容物造成的吸入性肺炎）、烟气吸入继发的ALI/ARDS、输血相关的急性肺损伤（TRALI）、外科手术、创伤或烧伤后的ALI/ARDS或急性肺功能不全、呼吸机相关性肺损伤（VILI）、胎粪吸入后的肺损伤、肺纤维化和高山病。
本发明的化合物此外适于治疗和/或预防慢性肾脏疾病（阶段1-5）、肾机能不全、糖尿病性肾病变、高血压性慢性肾脏病、肾小球肾炎、急进性和慢性肾炎综合征、非特异性肾炎综合征、肾病综合征、遗传性肾病、急性和慢性肾小管间质性肾炎、急性肾损伤、急性肾功能衰竭、创伤后肾功能衰竭、创伤和手术后肾损伤、心肾综合征以及肾移植的保护与功能改善。
该化合物此外适于治疗和/或预防糖尿病及其相继症状，如糖尿病大血管和微血管病变、糖尿病性肾病变和神经性病变。
本发明的化合物此外可用于治疗和/或预防中枢和外周神经***病症，如病毒性和细菌性脑膜炎和脑炎（例如带状疱疹脑炎）、脑损伤、原发性或继发性[转移]脑和脊髓的恶性肿瘤、脊神经根炎和多发性神经根炎、格林-巴利综合征[急性(后-)感染性多发性神经炎，米勒费雪综合征]、肌萎缩性脊髓侧索硬化[进行性脊髓性肌萎缩]、帕金森氏病、急性和慢性多发性神经病、疼痛、脑水肿、阿尔茨海默氏病、神经***的退行性疾病和中枢神经***的脱髓鞘疾病例如但不限于多发性硬化。
本发明的化合物此外适于治疗和/或预防门静脉高血压和肝纤维化[肝硬化]及其后遗症如食管静脉曲张和腹水，适于治疗和/或预防恶性肿瘤或炎症继发的胸腔积液和适于治疗和/或预防淋巴水肿和静脉曲张继发的水肿。
本发明的化合物此外适于治疗和/或预防胃肠道的炎性病症如炎性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎和肠道的中毒与血管病症。
本发明的化合物此外适于治疗和/或预防败血症、败血症性休克、非感染性起因的全身炎症反应综合征（SIRS）、出血性休克、具有器官功能障碍或多器官衰竭（MOF）的败血症或SIRS、创伤性休克、中毒性休克、过敏性休克、荨麻疹、昆虫叮咬和叮咬相关过敏、血管神经性水肿[巨大荨麻疹，昆克氏水肿]、急性喉炎和气管炎、以及急性梗阻性喉炎[哮吼]和会厌炎。
该化合物此外适于治疗和/或预防风湿病类型的疾病和视为自身免疫性疾病的其它疾病，例如但不限于多发性关节炎、红斑狼疮、硬皮病、紫癜和血管炎。
本发明的化合物此外适于治疗眼内高压（青光眼）、糖尿病性视网膜病和黄斑水肿。
本发明的化合物此外可用于治疗和/或预防外科手术介入，特别是使用心肺机对心脏的介入（例如搭桥手术、心脏瓣膜移植）、对颈动脉的介入、对主动脉的介入和颅盖的工具开启或穿透的介入后的手术相关性局部缺血状态以及其后续症状。
该化合物此外适于外科手术介入中的一般性治疗和/或预防，目的在于加速伤口愈合和缩短完全恢复时间。它们进一步适于促进伤口愈合。
该化合物此外适于治疗和/或预防骨密度与结构的病症，例如但不限于骨质疏松、骨软化症和甲状旁腺功能亢进有关的骨骼病症。
该化合物此外适于治疗和/或预防性功能障碍，特别是男性***功能障碍。
该化合物优选适于治疗和/或预防心力衰竭、冠心病、缺血性和/或出血性卒中、高血压、肺动脉高血压、周围动脉闭塞性疾病、先兆子痫、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、急性和/或慢性肺水肿、吸入的有机尘埃和真菌、放线菌或其它来源的粒子造成的变应性肺泡炎和/或肺炎、和/或急性化学性支气管炎、急性和/或慢性化学性肺水肿、神经源性肺水肿、辐射造成的急性和/或慢性肺部表现、急性和/或慢性间质性肺病症、成人或儿童包括新生儿的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）、肺炎和败血症继发的ALI/ARDS、吸引术继发的吸入性肺炎和ALI/ARDS、烟气吸入继发的ALI/ARDS、输血相关的急性肺损伤（TRALI）、外科手术、创伤和/或烧伤后的ALI/ARDS和/或急性肺功能不全、和/或呼吸机相关性肺损伤（VILI）、胎粪吸入后的肺损伤、肺纤维化、高山病、慢性肾脏疾病、肾小球肾炎、急性肾损伤、心肾综合征、淋巴水肿、炎性肠病、败血症、败血性休克、非感染性起因的全身炎症反应综合征（SIRS）、过敏性休克、炎性肠病和/或荨麻疹。
该化合物更优选适于治疗和/或预防心力衰竭、高血压、肺动脉高血压、哮喘、急性和/或慢性化学性肺水肿、成人或儿童包括新生儿的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）、肺炎和败血症继发的ALI/ARDS、吸引术继发的吸入性肺炎和ALI/ARDS、烟气吸入继发的ALI/ARDS、输血相关的急性肺损伤（TRALI）、外科手术、创伤和/或烧伤后的ALI/ARDS和/或急性肺功能不全、和/或呼吸机相关性肺损伤（VILI）、胎粪吸入后的肺损伤、败血症、败血性休克、非感染性起因的全身炎症反应综合征（SIRS）、过敏性休克、炎性肠病和/或荨麻疹。
本发明进一步提供本发明的化合物用于治疗和/或预防病症，特别是上述病症的用途。
本发明进一步提供本发明的化合物用于制备用于治疗和/或预防病症，特别是上述病症的药物的用途。
本发明进一步提供使用有效量的本发明的化合物治疗和/或预防病症，特别是上述病症的方法。
本发明进一步提供包含本发明的化合物和一种或多种其它活性成分，特别是用于治疗和/或预防上述病症的活性成分的药物。示例性和优选活性成分组合是：
ACE抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂、β-2受体激动剂、磷酸二酯酶抑制剂、糖皮质激素受体激动剂、利尿剂或重组血管紧张素转化酶-2或乙酰水杨酸（阿司匹林）。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物与ACE抑制剂联合给药，所述ACE抑制剂例如且优选是依那普利、喹那普利、卡托普利、赖诺普利、雷米普利、地拉普利、福辛普利、培多普利、西拉普利、咪达普利、贝那普利、莫西普利、螺普利或川多普利(trandopril)。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物与血管紧张素受体拮抗剂联合给药，所述血管紧张素受体拮抗剂例如且优选是氯沙坦、坎地沙坦、缬沙坦、替米沙坦或恩布沙坦。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物与β-2受体激动剂联合给药，所述β-2受体激动剂例如且优选是沙丁胺醇、吡布特罗、沙美特罗、特布他林、非诺特罗、妥布特罗、克仑特罗、瑞普特罗或福莫特罗。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物与磷酸二酯酶（PDE）抑制剂联合给药，所述磷酸二酯酶（PDE）抑制剂例如且优选是米利酮、氨吡酮、匹莫苯丹、西洛他唑、西地那非、伐地那非或他达拉非。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物与糖皮质激素受体激动剂联合给药，所述糖皮质激素受体激动剂例如且优选是皮质醇、可的松、氢化可的松、强的松、甲基强的松龙、甲烯强的松龙（prednylidene）、地夫可特、氟可龙、去炎松、***或倍他米松。
在本发明的优选实施方案中，本发明的化合物与利尿剂联合给药，所述利尿剂例如且优选是速尿、托拉塞米和氢***。
本发明进一步涉及包含通常与一种或多种惰性、无毒、药学适宜的赋形剂一起的至少一种本发明的化合物的药物，并涉及其用于前述目的的用途。
本发明的化合物可以全身和/或局部起作用。为此，它们可以以合适的方式，例如通过肠胃外、经肺、经鼻、舌下、经舌、口腔、皮肤、透皮、结膜、视神经途径或作为植入物或支架给药。
本发明的化合物可以以适于这些给药途径的给药形式给药。
可以在避免吸收步骤（例如静脉内、动脉内、心脏内、脊柱内或腰椎内）或包含吸收步骤（例如肌肉内、皮下、皮内、经皮或腹膜内）的情况下进行肠胃外给药。适于肠胃外给药的给药形式包括用于以溶液、混悬剂、乳剂、冻干物或消毒粉末形式注射或输注的制剂。
适于其它给药途径的是例如用于吸入的药物形式（包括粉末吸入装置、喷雾器）、滴鼻剂、滴眼剂、溶液或喷雾剂；膜/片或水性混悬剂（洗液，摇振混合物）、亲脂性混悬剂、软膏剂、霜剂、透皮治疗***（例如贴剂）、乳剂、糊剂、泡沫剂、扑粉、植入物或支架。
肠胃外给药是优选的，尤其是静脉内给药。
本发明的化合物可以转化为所述给药形式。这可以以本身已知的方式，通过与惰性、无毒、药学适宜的赋形剂混合来进行。这些赋形剂包括载体（例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇）、溶剂（例如液体聚乙二醇）、乳化剂和分散剂或润湿剂（例如十二烷基硫酸钠、聚氧失水山梨糖醇油酸酯(polyoxysorbitan oleate)）、粘合剂（例如聚乙烯基吡咯烷酮）、合成和天然聚合物（例如白蛋白）、稳定剂（例如抗氧化剂，例如抗坏血酸）、着色剂（例如无机颜料，例如氧化铁）和口味和/或气味掩蔽剂。
通常发现在肠胃外给药情况下有利的是给予大约0.001至5毫克/千克体重、优选大约0.01至1毫克/千克体重的量以实现有效结果。
尽管如此，在某些情况下可能需要偏离所述的量，特别是根据体重、给药途径、对活性成分的个体响应、制剂的性质以及进行给药的时间或时间间隔。例如，在一些情况下小于前述最小量可能是足够的，而在其它情况下必须超过所述上限。在给药量较大的情况下将这些分为每天多份独立剂量是明智的。
下列操作实施例例示本发明。本发明不限于这些实施例。
下面的试验与实施例中的百分比除非另行说明均为重量百分比；份数是重量份。液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度数据各自基于体积。
A．实施例
缩写
AA 　　氨基酸
Acm 　　乙酰胺基甲基
ADM 　　肾上腺髓质素(人)
ADM(2-52)　　ADM AA 2至AA 52的肽序列，包括二硫键和C-端酰胺
approx.　 　大约
Boc　 　叔丁氧基羰基
CDI 　　羰基二咪唑
d 　　天, 双峰(在NMR中)
TLC 　　薄层色谱法
DCI 　　直接化学电离(在MS中)
dd 　　双二重峰(在NMR中)
DIEA 　　N,N-二异丙基乙胺
DMAP 　　4-二甲基氨基吡啶
DMF 　　N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 　　二甲基亚砜
of theory　　理论值的(产率)
eq. 　　当量
ESI 　　电喷雾电离(在MS中)
Fmoc 　　(9H-芴-9-基甲氧基)羰基
h　 　小时
HATU 　　O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐
HPLC 　　高压/高效液相色谱法
LC-MS 　　液相色谱法联用质谱法
m　 　多重峰(在NMR中)
min 　　分钟
MS　 　质谱法
NMR 　　核磁共振光谱法
pbf 　　2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基
PEG 　　聚乙二醇
RP　 　反相(在HPLC中)
RT　 　室温
Rt 　　保留时间(在HPLC中)
s　 　单峰(在NMR中)
TBTU 　　苯并***-1-基-N-四甲基-脲四氟硼酸盐
tBu　 　叔丁基
TFA　 　三氟乙酸
THF　 　四氢呋喃
Trt　 　三苯甲基。
氨基酸和肽序列的命名法根据：
International Union of Pure and Applied Chemistry and InternationalUnion of Biochemistry: Nomenclature and Symbolism for Amino Acids andPeptides (Recommendations 1983). 在：Pure & Appl. Chem. 56, 第5卷, 1984, 第595–624页。
俗名 符号 单字母符号
丙氨酸 Ala A
精氨酸 Arg R
天冬酰胺 Asn N
天冬氨酸 Asp D
半胱氨酸 Cys C
谷氨酸 Glu E
谷氨酰胺 Gln Q
甘氨酸 Gly G
组氨酸 His H
异亮氨酸 Ile I
亮氨酸 Leu L
赖氨酸 Lys K
蛋氨酸 Met M
苯丙氨酸 Phe F
脯氨酸 Pro P
丝氨酸 Ser S
苏氨酸 Thr T
色氨酸 Trp W
酪氨酸 Tyr Y
缬氨酸 Val V。
LC-MS和MS方法
方法1（LC-MS）：仪器类型：Waters ACQUITY SQD UPLC***；柱：Waters AcquityUPLC HSS T3 1.8 µ 50 mm×1 mm；流动相A：1升水 + 0.25毫升99%强度甲酸，流动相B：1升乙腈 + 0.25毫升99%强度甲酸；梯度：0.0分钟90% A → 1.2分钟5% A → 2.0分钟5% A；炉温：50℃；流速：0.40 ml/min；UV-检测：210-400 nm。
方法2（LC-MS）：MS仪器：类型：Waters (Micromass) Quattro Micro；HPLC仪器类型：Agilent 1100系列；柱：Thermo Hypersil GOLD 3 µ 20 mm×4 mm；流动相A：1升水 +0.5毫升50%强度甲酸，流动相B：1升乙腈 + 0.5毫升50%强度甲酸；梯度：0.0分钟100% A →3.0分钟10% A → 4.0分钟10% A；炉温：50℃；流速：2.0 ml/min；UV-检测：210 nm。
方法3（HPLC）：仪器类型：HP 1200系列；UV DAD；柱：Phenomenex Luna 5微米 C5100Å, 150 mm×4.6 mm；流动相A：1升水 + 0.5毫升50%强度甲酸，流动相B：1升乙腈 + 0.5毫升50%强度甲酸；梯度：0.0分钟95%A → 5分钟5% A；→ 5.8分钟95% A → 6.2分钟95%A；流速：2.5 ml/min；炉温：RT；UV检测：210 nm。
方法4（HPLC）：仪器类型：HP 1200系列；UV DAD；柱：Merck ChromolithFastgradient RP18 50 mm×2 mm；流动相A：1升水 + 0.5毫升50%强度甲酸, 流动相B：1升乙腈 + 0.5毫升50%强度甲酸；梯度：0.0分钟95% A → 2.9分钟5% A → 3.2分钟5% A；流速：3 ml/min；炉温：RT；UV检测：210 nm。
方法5（DCI MS）：仪器类型：Thermo Fisher-Scientific DSQ；化学电离；反应物氨气；源温度：200℃；电离能量70eV。
方法6（MALDI MS）：仪器类型：Kratos PC-Kompact SEQ V1.2.2 MALDI TOF MS，正离子电离模式，Linear high，功率：75。
微波合成器：Biotage Emrys Initiator II合成器，具有可变小瓶尺寸，最高至20毫升反应体积，和“Robot 60”样品处理器。
pH4柠檬酸盐缓冲液：Fluka No 82566；柠檬酸盐缓冲液pH 4，用叠氮化钠稳定
组成：柠檬酸，~0.056 M；叠氮化钠，~0.05%；氯化钠，~0.044 M；氢氧化钠，~0.068M。
40kDa甲氧基聚(乙二醇)马来酰亚胺基丙酰胺(直链40k mPEG 马来酰亚胺)；
CAS No 724722-89-8；来自Dr. Reddys Inc., Lot No 233101301；重均分子量，Mw(GPC) 40500 Da；多分散性(GPC) 1.08。
起始化合物
实施例1A
N-(叔丁氧基羰基)-O-[(4-硝基苯氧基)羰基]-L-酪氨酸烯丙酯
将36.7克（114.3毫摩尔）N-Boc-L-酪氨酸烯丙酯、23.0克（114.3毫摩尔）氯甲酸4-硝基苯酯、17.5毫升（125.7毫摩尔）三乙胺和1.40克（11.4毫摩尔）4-二甲基氨基吡啶在1000毫升二氯甲烷中混合并在室温下搅拌2小时。反应混合物用大约500毫升水和大约250毫升盐水萃取并经大约100克硫酸钠干燥。通过旋转蒸发除去溶剂（大约40℃，大约200mbar，大约30分钟），产品溶解在温热的***中并在4℃下结晶整夜。将晶体滤出，用冷***洗涤并在高真空中干燥（大约0.1 mbar，18小时）。产量为29.86克（59.6毫摩尔，理论值的52%）的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.23 min., m/z = 487 (M+H)+。
实施例2A
(2S)-4-{[(4-{(2S)-3-(烯丙氧基)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代丙基}苯氧基)羰基]-氨基}-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁酸
将4.0克（8.22毫摩尔）来自实施例1A的化合物溶解在60毫升二氯甲烷中。加入1.795（8.22毫摩尔）(2S)-4-氨基-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁酸和1.43毫升（8.22毫摩尔）N,N-二异丙基乙胺。将反应混合物分为3份。各份在密封管中在微波合成器中在75℃下加热30分钟。从混合的反应混合物中通过旋转蒸发除去溶剂（大约40℃，大约200 mbar，大约30分钟）。粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约600毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷/乙酸乙酯4/1、二氯甲烷/乙酸乙酯1/1、二氯甲烷/甲醇4/1和二氯甲烷/甲醇1/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得4.02克（6.54毫摩尔，理论值的80%）的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.07 min., m/z = 564 (M-H)-。
实施例3A
O-({(3S)-4-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-(三苯甲基硫烷基)丙-2-基]氨基}-3-[(叔丁氧基-羰基)氨基]-4-氧代丁基}氨基甲酰基)-N-(叔丁氧基羰基)-L-酪氨酸烯丙酯
将2.50克（4.42毫摩尔）的来自实施例2A的化合物溶解在100毫升二氯甲烷中。加入1.602克（4.42毫摩尔）S-三苯甲基-L-半胱氨酰胺(cysteinamide)、0.77毫升（4.42毫摩尔）N,N-二异丙基乙胺和1.68克（4.42毫摩尔）HATU。将反应混合物分为5份。各份在密封管中在微波合成器中在60℃下加热30分钟。从混合的反应混合物中通过旋转蒸发除去溶剂（大约40℃，大约200 mbar，大约30分钟）。将粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约600毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷/乙酸乙酯2/1、二氯甲烷/乙酸乙酯1/1、二氯甲烷/甲醇20/1和二氯甲烷/甲醇10/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得4.12克（3.30毫摩尔，理论值的75%，73％纯度）的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.36 min., m/z = 911 (M+H)+。
实施例4A
O-({(3S)-4-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-(三苯甲基硫烷基)丙-2-基]氨基}-3-[(叔丁氧基羰基)-氨基]-4-氧代丁基}氨基甲酰基)-N-(叔丁氧基羰基)-L-酪氨酸
将4.14克（4.55毫摩尔）的来自实施例3A的化合物溶解在90毫升四氢呋喃中。加入3.17毫升（22.8毫摩尔）三乙胺、0.86毫升（22.8毫摩尔）甲酸和0.526克（0.455毫摩尔）四(三苯基膦)钯（0）。该反应混合物在室温下搅拌整夜。该反应用大约100毫升水稀释，并用大约100毫升二氯甲烷萃取两次。合并的有机相用盐水萃取，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩至干燥。粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约500毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷、二氯甲烷/甲醇20/1和二氯甲烷/甲醇1/1。将含有产品的级分合并并在减压下浓缩至干燥。得到2.62克纯度94.5%的粗产物。该产物通过制备RP-HPLC在C18上用水/甲醇梯度进一步提纯以产生2.35克（2.70毫摩尔，理论值的59%）纯产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.22 min., m/z = 871 (M+H)+。
实施例5A
甲基(2-氧代四氢呋喃-3-基)氨基甲酸叔丁酯
根据Alberico, Dino；Paquin, Jean-Francois；Lautens, Mark；Tetrahedron,2005, 第61卷, 第6283-6297页合成该化合物。
将5.18克（25.7毫摩尔）(四氢-2-氧代-3-呋喃基)氨基甲酸叔丁酯、4.81毫升（77.2毫摩尔）碘甲烷溶解在100毫升干燥的二甲基甲酰胺中。将该溶液冷却至0℃并加入1.34克（60%在矿物油中，33.5毫摩尔）氢化钠。将反应升温至室温并搅拌整夜。将该反应混合物添加到大约400毫升水中，该混合物用大约300毫升乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相经硫酸钠干燥并在减压下浓缩至干燥。获得8.70克（25.7毫摩尔，理论值的100%，63%纯度）的目标产物。
分析数据与文献一致。产物在不经过进一步提纯的情况下用于下一合成步骤。
实施例6A
2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-4-(1,3-二氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丁酸
将8.70克（大约25毫摩尔，大约63%纯度）的来自实施例5A的化合物溶解在560毫升二甲基甲酰胺中。加入8.23克（44.4毫摩尔）酞酰亚胺钾（potassium ophtalimide）并将反应混合物加热至150℃持续7小时。通过旋转蒸发除去大约400毫升的溶剂（大约60℃，大约10 mbar，大约30分钟）。将该反应混合物倾倒在大约100毫升水、200克冰和15毫升乙酸的混合物上。在剩余的冰融化后，将该反应混合物过滤，滤液用大约100毫升二氯甲烷萃取3次。合并的有机相经硫酸钠干燥并在减压下浓缩至干燥。粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约70毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷/乙酸乙酯9/1至二氯甲烷/乙酸乙酯6/4。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得2.39克（6.04毫摩尔，理论值的24%）产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 0.92 min., m/z = 363 (M+H)+。
实施例7A
4-氨基-2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]丁酸
将11.8克（32.6毫摩尔）的来自实施例6A的化合物溶解在大约640毫升乙醇中并向反应混合物中添加23.8毫升（488毫摩尔）水合肼。在搅拌整夜后，将反应混合物过滤，滤液在减压下浓缩至干燥。粗产物溶解在乙醇中，加入大约50克硅胶，在减压下除去溶剂。所得固体添加到大约500克硅胶柱上并层析。所用溶剂是二氯甲烷/甲醇9/1至二氯甲烷/甲醇1/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得2.98克（12.8毫摩尔，理论值的39%）产物。
LC-MS (方法2): Rt = 0.21 min., m/z = 233 (M+H)+。
DCI MS (方法5): m/z = 233 (M+H)+。
实施例8A
4-{[(4-{(2S)-3-(烯丙氧基)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代丙基}苯氧基)羰基]-氨基}-2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]丁酸
将0.931克（1.92毫摩尔）的来自实施例1A的化合物溶解在30毫升二氯甲烷中。加入0.455克（1.92毫摩尔）来自实施例7A的化合物。将反应混合物分为2份。各份在密封管中在微波合成器中在80℃下加热30分钟。在减压下从合并的反应混合物中除去溶剂。粗产物通过制备RP-HPLC在C18柱上用9/1至1/9的水/甲醇梯度提纯。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得0.523克（0.85毫摩尔，理论值的44%）的呈2种非对映异构体的混合物形式的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.08和1.11 min., m/z = 578 (M-H)-。
实施例9A
O-[(4-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-(三苯甲基硫烷基)丙-2-基]氨基}-3-[(叔丁氧基羰基)-(甲基)氨基]-4-氧代丁基)氨基甲酰基]-N-(叔丁氧基羰基)-L-酪氨酸烯丙酯
将2.24克（3.86毫摩尔）的来自实施例8A的化合物溶解在100毫升二氯甲烷中。加入1.401克（3.86毫摩尔）S-三苯甲基-L-半胱氨酰胺、0.67毫升（3.86毫摩尔）N,N-二异丙基乙胺和1.47克（3.86毫摩尔）HATU。将该反应混合物分成5份。这些份在密封管中在微波合成器中在60℃下加热30分钟。通过旋转蒸发从合并的反应混合物中除去溶剂 (大约40℃，大约200 mbar，大约30分钟）。粗产物通过制备RP-HPLC在C18柱上用9/1至1/9的水/甲醇梯度提纯。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得3.26克（2.75毫摩尔，理论值的71%，78%纯度）的呈非对映异构体混合物形式的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.41和1.43 min., m/z = 924 (M+H)+。
实施例10A
O-[(4-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-(三苯甲基硫烷基)丙-2-基]氨基}-3-[(叔丁氧基羰基)-(甲基)氨基]-4-氧代丁基)氨基甲酰基]-N-(叔丁氧基羰基)-L-酪氨酸
将2.2克（2.38毫摩尔）的来自实施例9A的化合物溶解在48毫升四氢呋喃中。加入1.66毫升（11.9毫摩尔）三乙胺、0.45毫升（11.9毫摩尔）甲酸和0.275克（0.238毫摩尔）四(三苯基膦)钯（0）。反应混合物在室温下搅拌整夜。该反应用大约50毫升水稀释并用大约50毫升二氯甲烷萃取两次。合并的有机相用盐水萃取，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩至干燥。粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约100克硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷、二氯甲烷/甲醇50/1和二氯甲烷/甲醇4/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得1.44克（1.61毫摩尔，理论值的68%）的呈非对映异构体混合物形式的产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.20和1.24 min., m/z = 884 (M+H)+。
实施例11A
N5-[(4-{(2S)-3-(烯丙氧基)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代丙基}苯氧基)羰基]-N2-(叔丁氧基羰基)-L-鸟氨酸
将6.00克（12.33毫摩尔）的来自实施例1A的化合物溶解在120毫升二氯甲烷中。加入2.57克（12.33毫摩尔）N2-(叔丁氧基羰基)-L-鸟氨酸。将反应混合物分为6份。这些份在密封管中在微波合成器中在75℃下加热90分钟。合并的反应混合物用大约100毫升饱和氯化铵溶液萃取。水相各用大约30毫升二氯甲烷反萃两次。合并的有机相用大约50毫升盐水萃取并经硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂。粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约600毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷、二氯甲烷/甲醇40/1至二氯甲烷/甲醇1/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得2.63克（4.06毫摩尔，理论值的33%，89%纯度）的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.03 min., m/z = 578 (M-H)-。
实施例12A
N5-[(4-{(2S)-3-(烯丙氧基)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氧代丙基}苯氧基)羰基]-N2-(叔丁氧基羰基)-L-鸟氨酰基-S-三苯甲基-L-半胱氨酰胺
将1.20克（2.07毫摩尔）的来自实施例11A的化合物溶解在48毫升二氯甲烷中。加入0.750克（2.07毫摩尔）S-三苯甲基-L-半胱氨酰胺、0.36毫升（2.07毫摩尔）N,N-二异丙基乙胺和0.787克（2.07毫摩尔）HATU。将反应混合物分为3份。这些份在密封管中在微波合成器中在60℃下加热30分钟。通过旋转蒸发从合并的反应混合物中除去溶剂 (大约40℃，大约200 mbar，大约30分钟）。粗产物溶解在二氯甲烷中，并在大约400毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷/乙酸乙酯2/1、二氯甲烷/乙酸乙酯1/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得1.30克（1.5毫摩尔，理论值的56%，82%纯度）的目标产物。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.35 min., m/z = 924 (M+H)+。
实施例13A
N2-(叔丁氧基羰基)-N5-[(4-{(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羧乙基}苯氧基)-羰基]-L-鸟氨酰基-S-三苯甲基-L-半胱氨酰胺
将3.06克（2.33毫摩尔）的来自实施例12A的化合物溶解在46毫升四氢呋喃中。加入1.63毫升（11.6毫摩尔）三乙胺、0.44毫升（11.6毫摩尔）甲酸和0.265克（0.233毫摩尔）四(三苯基膦)钯（0）。反应混合物在室温下搅拌整夜。反应用大约50毫升水稀释并用大约50毫升二氯甲烷萃取两次。合并的有机相用盐水萃取，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩至干燥。粗产物溶解在二氯甲烷中并在大约500毫升硅胶上层析。所用溶剂是二氯甲烷，二氯甲烷/甲醇40/1和二氯甲烷/甲醇1/1。将含有产物的级分合并并在减压下浓缩至干燥。获得1.40克纯度为86%的粗产物。产物通过制备RP-HPLC在C18柱上用水/甲醇梯度进一步提纯以产生2种级分：0.93克产物（理论值的45%）。
LC-MS（方法1）：Rt = 1.18 min., m/z = 885 (M+H)+。
实施例14A
Tentagel基酰胺树脂键合ADM（2-52）
在自动化肽合成仪（Protein Technologies Inc. Symphony）上在Tentagel基酰胺树脂上逐步组装肽。平行使用8个聚丙烯反应容器，实施相同的化学。各容器装载0.05毫摩尔的Tentagel基Rink树脂，总批量大小为0.4毫摩尔。
各氨基酸以相对于树脂载量8倍摩尔过量（8 fold molar access）添加。该氨基酸是Fmoc保护的（作为N-端保护基团）并且下示保护基团用于侧链官能团。还加入188毫克（0.59毫摩尔，7.8当量）TBTU和0.21毫升（1.2毫摩尔，16当量）DIEA。反应在作为溶剂的DMF中实施，而DMF以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用。每个氨基酸的反应时间为大约1小时。使用20%的哌啶/DMF实现Fmoc保护基团的***，而20%的哌啶/DMF以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用。
偶联顺序如下：
1. Tyr(tBu) (Tyr = Y = 人ADM的AA 52)
2. Gly (Gly = G = 人ADM的AA 51)
3. Gln(Trt) (Gln = Q = 人ADM的AA 50)
4. Pro (Pro = P = 人ADM的AA 49)
5. Ser(tBu) (Ser = S = 人ADM的AA 48)
6. Ile (Ile = I = 人ADM的AA 47)
7. Lys(Boc) (Lys = K = 人ADM的AA 46)
8. Ser(tBu) (Ser = S = 人ADM的AA 45)
9. Arg(pbf) (Arg = R = 人ADM的AA 44)
10. Pro (Pro = P = 人ADM的AA 43)
11. Ala (Ala = A = 人ADM的AA 42)
12. Val (Val = V = 人ADM的AA 41)
13. Asn(Trt) (Asn = N = 人ADM的AA 40)
14. Asp(OtBu) (Asp = D = 人ADM的AA 39)
15. Lys(Boc) (Lys = K = 人ADM的AA 38)
16. Asp(OtBu) (Asp = D = 人ADM的AA 37)
17. Lys(Boc) (Lys = K = 人ADM的AA 36)
18. Asp(OtBu) (Asp = D = 人ADM的AA 35)
19. Thr(tBu) (Thr = T = 人ADM的AA 34)
20. Phe (Phe = F = 人ADM的AA 33)
21. Gln(Trt) (Gln = Q = 人ADM的AA 32)
22. Tyr(tBu) (Tyr = Y = 人ADM的AA 31)
23. Ile (Ile = I = 人ADM的AA 30)
24. Gln(Trt) (Gln = Q = 人ADM的AA 29)
25. His(Trt) (His = H = 人ADM的AA 28)
26. Ala (Ala = A = 人ADM的AA 27)
27. Leu (Leu = L = 人ADM的AA 26)
28. Lys(Boc) (Lys = K = 人ADM的AA 25)
29. Gln(Trt) (Gln = Q = 人ADM的AA 24)
30. Val (Val = V = 人ADM的AA 23)
31. Thr(tBu) (Thr = T = 人ADM的AA 22)
32. Cys(Trt) (Cys = C = 人ADM的AA 21)
33. Thr(tBu) (Thr = T = 人ADM的AA 20)
34. Gly (Gly = G = 人ADM的AA 19)
35. Phe (Phe = F = 人ADM的AA 18)
36. Arg(pbf) (Arg = R = 人ADM的AA 17)
37. Cys(Acm) (Cys = C = 人ADM的AA 16)
38. Gly (Gly = G = 人ADM的AA 15)
39. Phe (Phe = F = 人ADM的AA 14)
40. Ser(tBu) (Ser = S = 人ADM的AA 13)
41. Arg(pbf) (Arg = R = 人ADM的AA 12)
42. Leu (Leu = L = 人ADM的AA 11)
43. Gly (Gly = G = 人ADM的AA 10)
44. Gln(Trt) (Gln = Q = 人ADM的AA 9)
45. Phe (Phe = F = 人ADM的AA 8)
46. Asn(Trt) (Asn = N = 人ADM的AA 7)
47. Asn(Trt) (Asn = N = 人ADM的AA 6)
48. Met (Met = M = 人ADM的AA 5)
49. Ser(tBu) (Ser = S = 人ADM的AA 4)
50. Gln(Trt) (Gln = Q = 人ADM的AA 3)
51. Arg(pbf) (Arg = R = 人ADM的AA 2)。
使用Cys(Trt)和Cys(Acm)保护实现树脂上的氧化并伴随着保护基团的***以及使用碘的二硫键的氧化（8当量的碘加8当量的DIEA，反应时间为30分钟）。通过样品裂解和使用HPLC与MALDI-MS的分析证实氧化。
将8个批次合并用于进一步使用。
实施例15A
O-{[(3S)-3-氨基-4-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-硫烷基丙-2-基]氨基}-4-氧代丁基]-氨基甲酰基}-L-酪氨酰-肾上腺髓质素(2-52)
向0.075毫摩尔的实施例14A的化合物中添加520毫克（0.6毫摩尔，8当量）的实施例4A的化合物。还加入188毫克（0.59毫摩尔，7.8当量）TBTU和0.21毫升（1.2毫摩尔，16当量）DIEA。反应用DMF作为溶剂进行，而DMF以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用。反应时间在室温下为大约1小时。以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用浓缩的TFA使肽从树脂上***并伴随着完全脱保护，而TFA含有清除剂（各自1-5%的水、苯酚、苯甲硫醚和1,2-乙二醇）。反应时间为2½小时。将粗产物冷冻干燥并通过RP色谱法使用0.1%TFA/水和0.1%TFA/乙腈作为流动相以确保在提纯与冻干过程中pH始终保持低于4来进行提纯。将通过MALDI-MS分析含有正确离子的所有级分合并。产量为44.0毫克部分提纯的肽（大约0.0035毫摩尔，理论值的大约4.7%；估计纯度：大约50%，主要杂质：ADM (2-52)）。
MALDI MS（方法6）：m/z = 6275(M+H)+和5866 (杂质: (ADM(2-52)+H)+)。
实施例16A
O-{[4-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-硫烷基丙-2-基]氨基}-3-(甲基氨基)-4-氧代丁基]-氨基甲酰基}-L-酪氨酰-肾上腺髓质素(2-52)
向0.075毫摩尔的实施例14A的化合物中添加530毫克（0.6毫摩尔，8当量）的实施例10A的化合物。还加入188毫克（0.59毫摩尔，7.8当量）TBTU和0.21毫升（1.2毫摩尔，16当量）DIEA。反应用DMF作为溶剂进行，而DMF以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用。反应时间在室温下为大约1小时。以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用浓缩的TFA使肽从树脂上***并伴随着完全脱保护，而TFA含有清除剂（各自1-5%的水、苯酚、苯甲硫醚和1,2-乙二醇），反应时间为2½小时。将粗产物冷冻干燥并通过RP色谱法使用0.1%TFA/水和0.1%TFA/乙腈作为流动相以确保在提纯与冻干过程中pH始终保持低于4来进行提纯。将通过MALDI-MS分析含有正确离子的所有级分合并。产量为34.0毫克部分提纯的肽（大约0.0026毫摩尔，理论值的大约3.5%；估计纯度：大约50%，主要杂质：ADM (2-52)）。
MALDI MS (方法6): m/z = 6289(M+H)+ 和5866 (杂质: (ADM(2-52)+H)+)。
实施例17A
O-{[(4R)-4-氨基-5-{[(2R)-1-氨基-1-氧代-3-硫烷基丙-2-基]氨基}-5-氧代戊基]-氨基甲酰基}-L-酪氨酰-肾上腺髓质素(2-52)
向0.075毫摩尔的实施例14A的化合物中添加530毫克（0.6毫摩尔，8当量）的实施例13A的化合物。还加入188毫克（0.59毫摩尔，7.8当量）TBTU和0.21毫升（1.2毫摩尔，16当量）DIEA。反应用DMF作为溶剂进行，而DMF以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用。反应时间在室温下为大约1小时。以足以溶胀该树脂并自由摇动其的量使用浓缩的TFA使肽从树脂上***并伴随着完全脱保护，而TFA含有清除剂（各自1-5%的水、苯酚、苯甲硫醚和1,2-乙二醇），反应时间为2½小时。将粗产物冷冻干燥并通过RP色谱法使用0.1%TFA/水和0.1%TFA/乙腈作为流动相以确保在提纯与冻干过程中pH始终保持低于4来进行提纯。将通过MALDI-MS分析含有正确离子的所有级分合并。产量为47毫克部分提纯的肽（大约0.0037毫摩尔，理论值的大约5.0%；估计纯度：大约50%，主要杂质：ADM (2-52)）。
MALDI MS (方法6): m/z = 6289(M+H)+ 和5866 (杂质: (ADM(2-52)+H)+)。
操作实施例
实施例1
O-{[(3S)-3-氨基-4-({(2R)-1-氨基-3-[(2,5-二氧代-1-{3-氧代-3-[(2-{ω-甲氧基-聚-氧乙烯[40kDa]}乙基)氨基]丙基}吡咯烷-3-基)硫烷基]-1-氧代丙-2-基}氨基)-4-氧代丁基]氨基甲酰基}-L-酪氨酰-肾上腺髓质素(2-52)
将44毫克实施例15A的粗肽与426毫克（10.5微摩尔，1.5当量，来自Dr. Reddys)40 kDa甲氧基聚(乙二醇)马来酰亚胺基丙酰胺一起在9毫升pH 4的柠檬酸盐缓冲液中在室温下搅拌整夜。粗反应混合物以两部分注射到具有Phenomenex Luna 10µ Proteo C5 100AAXIA 250 mm×21.2 mm柱的制备HPLC***上并用水/乙腈（均含有0.1%的TFA）梯度层析。在自动级分收集器上在20毫升试管中收集级分。为确保充足的酸性，在收集前向各瓶内充以0.5毫升乙酸。
完全除去ADM(2-52)（其是实施例15A的副产物并且在该反应中不发生PEG化）以及未反应的PEG。
合并含有实施例1的所有级分。在旋转蒸发仪上在30℃水浴温度和大约50 mbar下大约30分钟部分去除乙腈。
在添加0.5毫升乙酸后，将剩余溶液冷冻干燥。实施例1的总产量为109毫克（2.35微摩尔，理论值的33%）。
HPLC (方法3): Rt = 4.23 - 4.30 min。
实施例2
O-{[(3-N-甲基-氨基-4-({(2R)-1-氨基-3-[(2,5-二氧代-1-{3-氧代-3-[(2-{ω-甲氧基-聚-氧乙烯[40kDa]}乙基)氨基]丙基}吡咯烷-3-基)硫烷基]-1-氧代丙-2-基}氨基)-4-氧代丁基]氨基甲酰基}-L-酪氨酰-肾上腺髓质素(2-52)
将15毫克实施例16A的粗肽与145毫克（3.58微摩尔，1.5当量，来自Dr. Reddys)40 kDa甲氧基聚(乙二醇)马来酰亚胺基丙酰胺一起在5毫升pH 4的柠檬酸盐缓冲液中在室温下搅拌整夜。粗反应混合物注射到具有Phenomenex Jupiter 10µ C18 300A 250 mm×21.2 mm柱的制备HPLC***上并用水/乙腈（均含有0.1%的TFA）梯度层析。在自动级分收集器上在20毫升试管中收集级分。为确保充足的酸性，在收集前向各瓶内充以0.5毫升乙酸。
完全除去ADM(2-52)（其是实施例16A的副产物并且在该反应中不发生PEG化）以及未反应的PEG。
合并含有实施例2的所有级分。在旋转蒸发仪上在30℃水浴温度和大约50 mbar下大约30分钟部分去除乙腈。
在添加0.5毫升乙酸后，将剩余溶液冷冻干燥。实施例2的总产量为50毫克（1.08微摩尔，理论值的43%）。
HPLC (方法4): Rt = 2.02 - 2.08 min。
实施例3
O-{[(4S)-4-氨基-5-({(2R)-1-氨基-3-[(2,5-二氧代-1-{3-氧代-3-[(2-{ω-甲氧基-聚-氧乙烯[40kDa]}乙基)氨基]丙基}吡咯烷-3-基)硫烷基]-1-氧代丙-2-基}氨基)-5-氧代戊基]氨基甲酰基}-L-酪氨酰-肾上腺髓质素(2-52)
将15毫克实施例17A的粗肽与145毫克（3.58微摩尔，1.5当量，来自Dr. Reddys)40 kDa甲氧基聚(乙二醇)马来酰亚胺基丙酰胺一起在5毫升pH 4的柠檬酸盐缓冲液中在室温下搅拌整夜。将粗反应混合物注射到具有Phenomenex Jupiter 10µ Proteo 90A AXIA250 mm×21.2 mm柱的制备HPLC***上并用水/乙腈（均含有0.1%的TFA）梯度层析。在自动级分收集器上在20毫升试管中收集级分。为确保充足的酸性，在收集前向各瓶内充以0.5毫升乙酸。
完全除去ADM(2-52)（其是实施例17A的副产物并且在该反应中不发生PEG化）以及未反应的PEG。
合并含有实施例3的所有级分。在旋转蒸发仪上在30℃水浴温度和大约50 mbar下大约30分钟部分去除乙腈。
在添加0.5毫升乙酸后，将剩余溶液冷冻干燥。实施例3的总产量为19.5毫克（0.42微摩尔，理论值的17%）。
HPLC (方法4): Rt = 2.02 - 2.08 min。
B．药理活性评价
采用下列试验体系可以证实本发明的化合物治疗疾病的适用性：
1）试验说明（体外）
1a）在重组肾上腺髓质素-受体报告细胞上的试验
借助于携带人肾上腺髓质素受体的重组中国仓鼠卵巢（CHO）细胞系量化本发明的化合物的活性。可以通过水母发光蛋白发光测定通过配体对受体进行的活化。已经详细描述了细胞系的构建和测定程序[Wunder F., Rebmann A., Geerts A和Kalthof B., MolPharmacol,73, 1235–1243 (2008)]。简而言之：细胞以4000个细胞/孔的密度在不透明的384孔微量滴定板上接种并生长24小时。在除去培养基后，在细胞培养孵化器中在补充有0.2 mM 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）的不含Ca2+的Tyrode溶液（130 mM氯化钠，5 mM氯化钾，20 mM HEPES (4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)，1 mM氯化镁和4.8 mM碳酸氢钠，pH 7.4）中用0.6 µg/ml腔肠素负载细胞3小时。在含有0.1%的牛血清白蛋白的不含钙2+的Tyrode溶液中经6分钟添加化合物。在即将添加钙2+至3 mM的最终浓度前通过使用合适的光度计开始测量水母发光蛋白发光。发光测量60秒。在一个典型的实验中，在1×10-13至3×10-6 M的浓度范围内测试化合物。
为了确定活性肾上腺髓质素从本发明化合物的释放，化合物在pH 7.4下的补充有胎牛血清、细胞培养基或来自不同物种的血浆的Tyrode溶液中在不同浓度下孵育最长24小时的不同时间跨度。在将样品添加到肾上腺髓质素受体报告细胞中之前，通过加入4 mMEDTA（乙二胺四乙酸）来缓冲各个孵育介质的钙2+含量。
在适当的预孵育后，实施例比预孵育之前更有效地激活该肾上腺髓质素受体报告细胞。这通过以下事实指示：在预孵育后测定的EC50值小至预孵育前的十分之一，并可以解释为从化合物中释放了活性肾上腺髓质素。
在下表1中给出了在补充有2.5%胎牛血清的缓冲液中在孵育24小时之前和之后的实施例的代表性EC50值：
表1
实施例编号 EC50T=0h [nM] EC50T=24h [nM]
ADM 0.5 2.5
1 110 8.4
2 > 1000 161
3 124 12.3
1b）内皮细胞中的跨细胞电阻试验
在体外渗透试验中在人脐静脉细胞（HUVEC，Lonza）中表征本发明的化合物的活性。通过使用ECIS设备（ECIS：Electric Cell-substrate Impedance Sensing；AppliedBiophysics Inc; Troy, NY），使用已经在其上接种细胞的小的金电极连续测量在内皮单层上的跨内皮电阻（TEER）的变化。HUVEC在96孔传感器电极板（96W1E，Ibidi GmbH，Martinsried）上生长以融合单层并通过炎性刺激如均已经证实导致内皮细胞接触中止（break down）和TEER降低的凝血酶、TNF-α、IL-1β、VEGF、组胺和过氧化氢来诱发高通透性（hyperpermeability）。凝血酶以0.5 U/ml的最终浓度使用。测试化合物在添加凝血酶之前或之后添加。在典型试验中，在1×10-10至1×10-6 M浓度范围内测试化合物。
该实施例在该试验中在≤ 10-6 M的浓度下抑制凝血酶诱发的高通透性。
1c）内皮细胞中的体外渗透性试验
在另一种内皮高通透性体外模型中，对于调节大分子渗透性检查本发明的化合物的活性。人脐静脉内皮细胞（HUVECS）生长至涂有纤连蛋白的Transwell®过滤膜（24孔板，6.5毫米，用0.4微米聚碳酸酯膜***；Costar #3413）上融合，该过滤膜将组织培养室分为上下部分，内皮细胞在上部室的底部上生长。上部室的介质补充有250 µg/ml的40 kDaFITC-葡聚糖（Invitrogen，D1844）。通过添加凝血酶至0.5 U/ml的最终浓度来诱发该单层的高通透性。每30分钟从下部室中收集介质样品，并在合适的荧光计中测量作为大分子渗透性经时变化参数的相对荧光。凝血酶激发诱发几乎加倍的跨越内皮单层的FITC-葡聚糖转换。在典型试验中，在1×10-10至1×10-6 M浓度范围内测试化合物。
该实施例在该试验中在≤ 10-6 M的浓度下抑制凝血酶诱发的高通透性。
2．试验说明（体内）
2a）遥测的、血压正常的Wistar大鼠的血压和心率测量
通过无线电遥测测量血压和心率在自由活动的清醒的雌性Wistar大鼠（体重>200克）中研究本发明的化合物诱导的心血管作用。简而言之，该遥测***（DSI Data ScienceInternational，MN，USA）由3个基本部件组成：植入式发射器（TA11PA-C40）、接收器（RA1010）和基于计算机的采集软件（Dataquest™ A.R.T. 4.1，适用于Windows）。在实验前用仪器为大鼠装备长期使用至少14天的压力植入物。传感器导管用4-0缝线打结数次以制造距导管尖端0.5厘米的制动器（stopper）。在导管植入前用戊巴比妥（Nembutal，Sanofi：50 mg/kg i.p.）麻醉大鼠。在将腹部皮肤剃毛后，在腹部正中切口，并将流体填充的传感器导管向上***到髂分叉与肾动脉之间的暴露的降主动脉中。导管在制动器处绑缚数次。遥测导管尖端恰好位于肾动脉尾部并用组织粘合剂固定。发射器主体在腹部闭合前贴到内腹膜壁上。采用腹部切口的双层闭合，分别缝合腹膜和肌肉壁，之后闭合外皮。为了术后防止感染和疼痛，注射单剂抗生素（土霉素10% R，5.0 ml/kg s.c.，beta-pharma GmbH&Co，Germany）和镇痛药（Rimadyl R，5.0 ml/kg s.c.，Pfizer，Germany）。为24只动物安装硬件配置。各鼠笼定位在单独的接收器平台顶部。在激活植入的发射器后，联机数据采集***，采样数据并将遥感压力信号转换为mm Hg。气压参考考虑了绝对压力（相对于真空）与环境大气压的关系。数据采集软件每5分钟以10秒间隔对样品血流动力学数据预先定义。数据采集至文件在给药受试化合物前2小时开始，并在24小时周期完成后结束。在典型试验中，受试化合物以1至1000 微克/千克体重的剂量（指的是肽组分）以推注形式皮下或静脉内给药。
野生型肾上腺髓质素（Bachem，H-2932）在以≤300微克/千克体重的剂量测试时在该试验中以≤4小时的持续时间诱导血压降低[图1]。
图1：在皮下给药ADM或如所示的媒介物（虚线）后由遥测的血压正常的雌性Wistar大鼠记录的平均动脉血压（MABP）的24小时概况。以来自每组4只动物的平均30分钟间隔的平均值±SEM 绘制数据点。在给药后一小时，用ADM治疗的动物显示了峰值处近20%的MABP平均降低（实心圆）。在大约3.5小时后，MABP已经回至基线水性，并在媒介物治疗动物的MABP的范围内（空心圆）。
在该试验中，本发明的物质在≤ 500微克/千克体重剂量（指的是肽组分）下诱导最长10小时的血压降低[图2]。
图2：在皮下给药实施例1或如所示的媒介物（虚线）后由遥测的血压正常的雌性Wistar大鼠记录的平均动脉血压（MABP）的24小时概况。以来自每组6只动物的平均30分钟间隔的平均值±SEM 绘制数据点。以150微克/千克（指的是肽组分）给药实施例1直到给药后6小时仍降低MABP大约15至19%（实心圆）。在给药后6小时至14小时之间，MABP逐渐回至基线值，并最终在媒介物治疗动物的MABP的范围内。
2b）Wistar大鼠的皮肤血管渗漏试验
采用皮内组胺激发试验评价本发明的化合物对健康动物的血管屏障功能的作用。雄性Sprague Dawley大鼠（体重>200克）用异氟烷（环境空气中2%-3%）麻醉并令其呈仰卧位。将腹部剃毛并将导管***股静脉。以静脉推注形式给药单独的媒介物（0.5毫升PBS+0.1%牛血清白蛋白）或适当剂量的受试化合物。在15分钟后，给药第二次注射的100 µl/kg2%伊文思蓝（Sigma）溶液并随后立即将100微升适当浓度的组胺溶液（例如0 – 2.5 – 5 –10 – 20 – 40 µg/ml）皮内注射到腹部皮肤中。伊文思蓝是一种高度血浆蛋白结合染料，并因此用作富含蛋白质的流体外渗和血管渗漏的指示剂。该程序后30分钟，通过过量使用异氟烷并随后颈部错位处死大鼠，并切除腹部皮肤。使用8毫米活检穿孔器切除风疹块，将组织样品称重并转移至甲酰胺中保持48小时以萃取伊文思蓝。样品在合适的光度计上在620纳米和750纳米波长下测量，并根据公式A620(校正的) = A620 - (1.426×A750 + 0.030)对血红素色素校正及针对标准曲线计算该样品的伊文思蓝含量[方法改编自Wang L.F.,Patel M., Razavi H.M., Weicker S., Joseph M.G., McCormack D.G., Mehta S.,Am.Respir Crit Care Med, 165(12), 1634-9 (2002)]。
本发明的物质在该试验中降低了组胺激发引起的富含蛋白质的血浆流体的外渗。
2c）小鼠的LPS气管内滴注
采用脂多糖（LPS）的气管内激发用于检验本发明的化合物对急性肺损伤的作用。雄性BALB/c小鼠（平均动物体重20-23克）用异氟烷（7%）麻醉并使用微量移液管滴注在100微升盐水中的来自E.coli的LPS（例如血清型055:B5；Sigma）。用于激发的LPS的通常剂量为1至10毫克/千克体重。在滴注之前和之后的不同时间点，通过皮下途径将受试化合物给药。通常剂量为1至300微克/千克体重。在该试验中，受试化合物给药的典型时间点为LPS激发之前15分钟或之后1小时。在滴注LPS后48小时，小鼠用异氟烷深度麻醉并通过颈部错位处死小鼠。在气管插管后，用0.5毫升冰冷的盐水灌洗支气管肺泡空间。制备肺并称重。在细胞计数器（Cell Dyn 3700，Abbott）上计数支气管肺泡灌洗流体（BALF）中的细胞。在该试验中，在LPS激发后48小时，可再现地发现作为肺水肿量度的肺重量相比假手术对照组增加了大约50%或更多。由于在各组中肺重量仅显示极低的差异性，使用绝对肺重量作为参数。白细胞计数总是发现在LPS激发后在BALF中相比对照组显著增加。
在以≤ 300微克/千克体重的剂量（指的是肽组分）以推注形式给药时，在48小时后，给药本发明的物质导致肺重量和在BALF中的白细胞计数显著降低。
2d）小型猪的急性肺损伤诱发
通过使用脂多糖（LPS）或油酸作为激发物在麻醉的小型猪中诱发急性肺损伤。具体地：大约3.5至5.5千克体重的雌性Göttingen小型猪（Ellegaard，Denmark）通过在用肌内注射Ketavet®/Stresnil®术前用药后连续静脉输注Ketavet®、Dormicum®和Pancuronium®保持麻醉状态。在气管内插管后，使用小儿呼吸机（Sulla 808V；Dräger，Germany）以30至50毫升潮气量和25分钟-1的恒定频率用氧气空气混合物对动物进行人工通气。通过经由氧/空气混合物比例调节吸入氧浓度（FiO2），由此将动脉血二氧化碳分压（PaCO2）调节至大约40 mmHg。在放置安装到合适的压力传感器与记录设备上的必要的探针和导管后常规测量下列心血管和呼吸参数：中心静脉压（经由左颈静脉）、动脉血压和心率（BP和HR；经由左颈动脉）、左心室压力（LVP；使用经由右颈动脉引入左心室的Millar导管[FMI，Mod.:SPC-340S，REF: 800-2019-1, 4F]）、肺动脉压（PAP；使用经由左侧颈静脉放入肺动脉的ARROW Berman血管造影球囊导管[REF.: AI-07134 4 Fr. 50cm]）、心输出量（CO）和通过使用与置入右股动脉的Pulsion 4F热稀释导管（PV2014L08N）连接的PiCCO***（Pulsion，Germany）获得的血管外肺水指数（EVWLI）。用于测量CVP、BP、HR、LVP和PAP的导管安装到Ponemah记录***。进行动脉血气分析以确定PaO2/FiO2。根据American-EuropeanConsensus Conference on ARDS，低于300 mmHg的PaO2/FiO2被视为预示着存在急性肺损伤。取决于采用的实验方案，试验的持续时间为实施激发诱导的肺损伤后4至5小时不等。在试验结束时，通过放血处死猪，从肺中收集支气管肺泡灌洗流体（BALF）。通过使用血细胞计数器（Cell DYN 3700）测定BALF的细胞含量。
在一种典型设置中，经由气管内插管以5毫克/千克体重剂量气管内滴注盐水中的脂多糖（LPS；E.coli 0111:B4；Sigma L2630），由此诱发急性肺损伤。响应于该激发，PAP和EVWLI提高，同时PaO2/FiO2降低至低于300 mmHg。BALF的细胞含量显著提高。在LPS激发前15分钟以静脉推注形式给药本发明的化合物1改善或阻止了LPS诱发的变化。
在其它实验方案中，用乙醇（1:1）稀释的油酸（OA；Sigma-Aldrich，O1008）以100毫克/千克体重的最终剂量经15分钟静脉内输注。用OA激发导致PAP和EVLWI升高，以及PaO2/FiO2降低至低于300 mmHg。通过在开始OA输注前15分钟给药本发明的化合物1改善或阻止了变化。
发现≤30微克/千克体重的实施例1的剂量（指的是肽组分）在所述试验体系中是有效的。
C．药物组合物的示例性实施方案
本发明的化合物可以以下列方式转化为药物制剂：
静脉注射液：
本发明的化合物以低于饱和溶解度的浓度溶解在生理可接受的溶剂（例如pH 4至pH 7的缓冲液、等渗氯化钠溶液、5%葡萄糖溶液和/或30%PEG 400溶液）中。该溶液通过过滤灭菌并装入无菌以及无热原的注射容器中。
皮下注射液：
本发明的化合物以低于饱和溶解度的浓度溶解在生理可接受的溶剂（例如pH 4至pH 7的缓冲液、等渗氯化钠溶液、5%葡萄糖溶液和/或30%PEG 400溶液）中。该溶液通过过滤灭菌并装入无菌以及无热原的注射容器中。

Claims (14)

1.下式的化合物，或其盐
其中：
n代表数字0、1、2或3，
R1代表氢、甲基、乙基、正丙基或异丙基，
R2代表用甲氧基封端的直链或支链PEG 20kDa至80kDa。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于：
n代表数字1或2，
R1代表氢或甲基，
R2代表用甲氧基封端的直链PEG 40kDa。
3.如权利要求1或2所述的化合物，其特征在于：
n代表数字1或2，
R1代表氢，
R2代表用甲氧基封端的直链PEG 40kDa。
4.制备如权利要求1所述的式(I)化合物或其盐的方法，其特征在于式(II)化合物
其中
n和R1各自如权利要求1中所定义，
与式(III)化合物反应
其中
R2如权利要求1中所定义。
5.如权利要求1或2所述的化合物，用于治疗和/或预防疾病。
6.如权利要求1至3中任一项所述的化合物用于制备用于治疗和/或预防心血管病症、水肿性病症和/或炎性病症的药物的用途。
7.一种药物，其包含与惰性无毒药学上合适的赋形剂组合的如权利要求1至3中任一项所述的化合物。
8.一种药物，其包含与其它活性成分组合的如权利要求1至3中任一项所述的化合物。
9.如权利要求7或8所述的药物，用于治疗和/或预防心血管病症、水肿性病症和/或炎性病症。
10.如权利要求1至3中任一项所述的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防心力衰竭、冠心病、缺血性和/或出血性卒中、高血压、肺动脉高血压、周围动脉闭塞性疾病、先兆子痫、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、急性和/或慢性肺水肿、吸入的有机尘埃和真菌、放线菌或其它来源的粒子造成的变应性肺泡炎和/或肺炎、和/或急性化学性支气管炎、神经源性肺水肿、辐射造成的急性和/或慢性肺部表现、急性和/或慢性间质性肺病症、成人或儿童包括新生儿的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)、吸引术继发的吸入性肺炎、输血相关的急性肺损伤(TRALI)，外科手术、创伤和/或烧伤后的急性肺功能不全，和/或呼吸机相关性肺损伤(VILI)、胎粪吸入后的肺损伤、肺纤维化、高山病、肾小球肾炎、急性肾损伤、心肾综合征、淋巴水肿、炎性肠病、败血症、败血性休克、非感染性起因的全身炎症反应综合征(SIRS)和/或荨麻疹。
11.权利要求10的用途，其中所述急性和/或慢性肺水肿是急性和/或慢性化学性肺水肿。
12.权利要求10的用途，其中所述成人或儿童包括新生儿的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)是肺炎和败血症继发的ALI/ARDS、吸引术继发的ALI/ARDS、烟气吸入继发的ALI/ARDS，外科手术、创伤和/或烧伤后的ALI/ARDS。
13.权利要求6或权利要求10-12中任一项所述的用途，其中如权利要求1至3中任一项所述的化合物肠胃外给药或通过吸入给药。
14.如权利要求1或2所定义的化合物，用于治疗和/或预防心血管病症、水肿性病症和/或炎性病症的方法。
CN201280053588.6A 2011-11-03 2012-10-30 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途 Active CN103998063B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610837728.9A CN107412740B (zh) 2011-11-03 2012-10-30 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11187735.3 2011-11-03
EP11187735 2011-11-03
PCT/EP2012/071507 WO2013064508A1 (en) 2011-11-03 2012-10-30 Polyethylene glycol based prodrug of adrenomedullin and use thereof

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610837728.9A Division CN107412740B (zh) 2011-11-03 2012-10-30 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103998063A CN103998063A (zh) 2014-08-20
CN103998063B true CN103998063B (zh) 2016-09-21

Family

ID=47146369

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280053588.6A Active CN103998063B (zh) 2011-11-03 2012-10-30 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途
CN201610837728.9A Active CN107412740B (zh) 2011-11-03 2012-10-30 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610837728.9A Active CN107412740B (zh) 2011-11-03 2012-10-30 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途

Country Status (45)

Country Link
US (3) US9603936B2 (zh)
EP (2) EP3075395B1 (zh)
JP (2) JP5995984B2 (zh)
KR (2) KR101965467B1 (zh)
CN (2) CN103998063B (zh)
AR (2) AR088582A1 (zh)
AU (2) AU2012331244B2 (zh)
BR (1) BR112014010708B1 (zh)
CA (1) CA2854134C (zh)
CL (1) CL2014000948A1 (zh)
CO (1) CO7020863A2 (zh)
CR (1) CR20140184A (zh)
CU (1) CU24184B1 (zh)
CY (2) CY1117354T1 (zh)
DK (2) DK2773376T3 (zh)
DO (2) DOP2014000078A (zh)
EA (2) EA025631B1 (zh)
EC (2) ECSP14013326A (zh)
ES (2) ES2659195T3 (zh)
GT (1) GT201400085A (zh)
HK (1) HK1246147A1 (zh)
HR (2) HRP20160285T1 (zh)
HU (2) HUE027333T2 (zh)
IL (3) IL232037B (zh)
IN (1) IN2014CN03290A (zh)
JO (2) JOP20190001B1 (zh)
LT (1) LT3075395T (zh)
MA (1) MA35618B1 (zh)
ME (1) ME02379B (zh)
MX (2) MX361287B (zh)
MY (2) MY173372A (zh)
NO (1) NO3075395T3 (zh)
PE (2) PE20181493A1 (zh)
PL (2) PL3075395T3 (zh)
PT (1) PT3075395T (zh)
RS (2) RS54623B1 (zh)
SG (2) SG11201400924TA (zh)
SI (2) SI2773376T1 (zh)
TN (1) TN2014000185A1 (zh)
TR (1) TR201802124T4 (zh)
TW (2) TWI583396B (zh)
UA (1) UA111098C2 (zh)
UY (2) UY34419A (zh)
WO (1) WO2013064508A1 (zh)
ZA (1) ZA201600434B (zh)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IN2014DN03213A (zh) * 2011-11-03 2015-05-22 Bayer Ip Gmbh
EP2896400A1 (en) * 2014-01-17 2015-07-22 Université Catholique De Louvain Method for increasing the bioavailability of inhaled compounds
EP3127914A4 (en) 2014-03-20 2017-11-22 University of Miyazaki Long-acting adrenomedullin derivatives
EP3197481A1 (en) * 2014-09-26 2017-08-02 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Stabilized adrenomedullin derivatives and use thereof
AU2016324119B2 (en) * 2015-09-18 2019-11-14 Himuka AM Australia Pty Ltd. Long-acting adrenomedullin derivative
WO2018181638A1 (ja) 2017-03-29 2018-10-04 国立大学法人宮崎大学 長時間作用型アドレノメデュリン誘導体
GB201707938D0 (en) * 2017-05-17 2017-06-28 Univ Sheffield Compounds
EP3986918A1 (en) 2019-06-18 2022-04-27 Bayer Aktiengesellschaft Adrenomedullin-analogues for long-term stabilization and their use
JPWO2021112220A1 (zh) * 2019-12-05 2021-06-10
US20230364245A1 (en) 2020-04-03 2023-11-16 Bayer Aktiengesellschaft Pharmaceutical formulations polyethylene glycol-based prodrugs of adrenomedullin and use
WO2021198327A1 (en) * 2020-04-03 2021-10-07 Bayer Aktiengesellschaft Liquid pharmaceutical formulations polyethylene glycol-based prodrugs of adrenomedullin and use
AU2021341508A1 (en) 2020-09-10 2023-05-25 Precirix N.V. Antibody fragment against fap
CN112457218B (zh) * 2020-11-05 2022-08-09 宁夏医科大学 2,4-二氨基丁酸衍生物的合成方法
CN117957021A (zh) 2021-08-20 2024-04-30 拜耳公司 用于制备聚乙二醇化肾上腺髓质素的方法、它的中间体及其用途
WO2023203135A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Precirix N.V. Improved radiolabelled antibody
WO2023213801A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Precirix N.V. Pre-targeting

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5020040A (en) * 1987-06-24 1991-05-28 Digital Equipment Corporation Overwriting system for magneto-optical recording with self timing track
US4812590A (en) 1987-06-25 1989-03-14 Merck & Co., Inc. Carbamates of 4-hydroxyanisole as prodrugs for chemotherapy of melanoma
US6090800A (en) 1997-05-06 2000-07-18 Imarx Pharmaceutical Corp. Lipid soluble steroid prodrugs
US6624142B2 (en) 1997-12-30 2003-09-23 Enzon, Inc. Trimethyl lock based tetrapartate prodrugs
CA2292902C (en) 1999-12-24 2012-12-18 Alain Cadieux Use of calcitonin gene-related peptide in the prevention and alleviation of asthma and related bronchospastic pulmonary diseases
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
AU2003256038A1 (en) 2002-08-30 2004-03-19 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Self-immolative dendrimers releasing many active moieties upon a single activating event
AU2003282624A1 (en) 2002-11-14 2004-06-03 Syntarga B.V. Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers
WO2005009768A1 (en) 2003-07-23 2005-02-03 Meggitt Aerospace Equipment Composite seal
CA2786794C (en) 2004-03-23 2017-09-12 Complex Biosystems Gmbh Aromatic polymeric cascade prodrug linker reagent
US8703098B2 (en) 2004-05-24 2014-04-22 Institut De Cardiologie De Montreal Labelled adrenomedullin derivatives and their use for imaging and therapy
GB2427360A (en) 2005-06-22 2006-12-27 Complex Biosystems Gmbh Aliphatic prodrug linker
JP2010513476A (ja) * 2006-12-20 2010-04-30 ジーイー・ヘルスケア・アクスイェ・セルスカプ 造影剤
DK2155781T3 (da) 2007-05-11 2013-06-17 Inst Cardiologie Montreal Mærkede adrenomedullinderivater og deres anvendelse til visualisering og terapi
US9561285B2 (en) 2010-01-22 2017-02-07 Ascendis Pharma As Carrier-linked carbamate prodrug linkers
IN2014DN03213A (zh) * 2011-11-03 2015-05-22 Bayer Ip Gmbh

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Adrenomedullin in the treatment of pulmonary hypertension;Noritoshi Nagaya，et al;《Peptides》;20041111;第25卷;2013-2018 *
Pharmacokinetic and biodistribution properties of poly(ethylene glycol)-protein conjugates;Paolo Caliceti,et al;《Advanced drug delivery reviews》;20031231;第55卷;1261-1277 *

Also Published As

Publication number Publication date
TW201332573A (zh) 2013-08-16
BR112014010708B1 (pt) 2021-03-02
JOP20190001B1 (ar) 2022-03-14
CL2014000948A1 (es) 2014-09-05
ECSP18071104A (es) 2018-10-31
RS54623B1 (en) 2016-08-31
KR20150000462A (ko) 2015-01-02
ME02379B (me) 2016-06-20
CO7020863A2 (es) 2014-08-11
EP2773376B1 (en) 2016-01-13
DK2773376T3 (en) 2016-04-18
IL252281A0 (en) 2017-08-31
US20170204137A1 (en) 2017-07-20
NO3075395T3 (zh) 2018-04-21
RS56819B1 (sr) 2018-04-30
TWI653051B (zh) 2019-03-11
SG10201607516SA (en) 2016-10-28
HK1246147A1 (zh) 2018-09-07
CN107412740B (zh) 2021-02-09
US9649363B2 (en) 2017-05-16
KR101965467B1 (ko) 2019-04-03
MX350341B (es) 2017-09-04
EP3075395A1 (en) 2016-10-05
CR20140184A (es) 2014-05-27
JP2014532682A (ja) 2014-12-08
CY1117354T1 (el) 2017-04-26
IL232037B (en) 2018-12-31
TW201720467A (zh) 2017-06-16
JO3385B1 (ar) 2019-03-13
JOP20190001A1 (ar) 2017-06-16
IN2014CN03290A (zh) 2015-07-03
SI3075395T1 (en) 2018-03-30
KR20180108892A (ko) 2018-10-04
MA35618B1 (fr) 2014-11-01
PL3075395T3 (pl) 2018-04-30
EA201400528A1 (ru) 2014-10-30
JP5995984B2 (ja) 2016-09-21
DOP2018000203A (es) 2018-10-15
ES2568063T3 (es) 2016-04-27
CA2854134C (en) 2020-04-21
MX2014004384A (es) 2014-04-30
JP6177975B2 (ja) 2017-08-09
US10035818B2 (en) 2018-07-31
MX361287B (es) 2018-12-03
TN2014000185A1 (en) 2015-09-30
EA025631B1 (ru) 2017-01-30
DOP2014000078A (es) 2014-07-15
US9603936B2 (en) 2017-03-28
SI2773376T1 (sl) 2016-05-31
ECSP14013326A (es) 2014-05-31
MY194197A (en) 2022-11-21
GT201400085A (es) 2015-03-05
CY1119897T1 (el) 2018-06-27
EA201600495A1 (ru) 2016-10-31
UA111098C2 (uk) 2016-03-25
IL258229B (en) 2020-02-27
NZ714621A (en) 2017-10-27
NZ622997A (en) 2015-12-24
JP2017014264A (ja) 2017-01-19
IL258229A (en) 2018-06-28
UY37922A (es) 2018-11-30
PE20141219A1 (es) 2014-09-13
HUE027333T2 (en) 2016-09-28
DK3075395T3 (en) 2018-02-19
BR112014010708A2 (pt) 2017-04-25
PE20181493A1 (es) 2018-09-18
AU2017203423A1 (en) 2017-06-08
PL2773376T3 (pl) 2016-07-29
HRP20160285T1 (hr) 2016-04-22
IL252281B (en) 2021-01-31
EA029410B1 (ru) 2018-03-30
CN103998063A (zh) 2014-08-20
AR088582A1 (es) 2014-06-18
HRP20180319T1 (hr) 2018-03-23
MY173372A (en) 2020-01-21
CA2854134A1 (en) 2013-05-10
TWI583396B (zh) 2017-05-21
CU24184B1 (es) 2016-07-29
AU2012331244A1 (en) 2014-04-17
CN107412740A (zh) 2017-12-01
HUE036535T2 (hu) 2018-07-30
KR102004668B1 (ko) 2019-07-26
PT3075395T (pt) 2018-02-13
CU20140051A7 (es) 2014-10-02
TR201802124T4 (tr) 2018-03-21
AR113830A2 (es) 2020-06-17
AU2017203423B2 (en) 2019-01-31
AU2012331244B2 (en) 2017-06-15
UY34419A (es) 2013-05-31
IL232037A0 (en) 2014-05-28
WO2013064508A1 (en) 2013-05-10
US20140287984A1 (en) 2014-09-25
ES2659195T3 (es) 2018-03-14
SG11201400924TA (en) 2014-09-26
EP3075395B1 (en) 2017-11-22
ZA201600434B (en) 2017-05-31
LT3075395T (lt) 2018-02-26
EP2773376A1 (en) 2014-09-10
US20160367636A1 (en) 2016-12-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103998063B (zh) 聚乙二醇基肾上腺髓质素前药及其用途
CN104144705B (zh) 用于肽的可释放性连接的基于酪氨酸的连接体
CN107001440A (zh) 稳定化的肾上腺髓质素衍生物及其用途
NZ622997B2 (en) Polyethylene glycol based prodrug of adrenomedullin and use thereof
NZ714621B2 (en) Polyethylene glycol based prodrug of adrenomedullin and use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1197652

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1197652

Country of ref document: HK