CN103897079B - 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度 - Google Patents

添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度 Download PDF

Info

Publication number
CN103897079B
CN103897079B CN201410112390.1A CN201410112390A CN103897079B CN 103897079 B CN103897079 B CN 103897079B CN 201410112390 A CN201410112390 A CN 201410112390A CN 103897079 B CN103897079 B CN 103897079B
Authority
CN
China
Prior art keywords
quaternized
amino alkyl
alkyl methacrylate
sum
methacrylate copolymer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410112390.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103897079A (zh
Inventor
P·朗古斯
S·戈鲁贝
H·弗雷
B·奥波梅尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Roma Chemical Co ltd
Evonik Operations GmbH
Original Assignee
Evonik Roehm GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Evonik Roehm GmbH filed Critical Evonik Roehm GmbH
Publication of CN103897079A publication Critical patent/CN103897079A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103897079B publication Critical patent/CN103897079B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
    • C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
    • C08F220/10—Esters
    • C08F220/34—Esters containing nitrogen, e.g. N,N-dimethylaminoethyl (meth)acrylate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
    • C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
    • C08F220/10—Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F26/00—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen
    • C08F26/02—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen by a single or double bond to nitrogen

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及改善药物的渗透性和溶解性的方法，其基于添加化学改性的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其中化学改性为所存在的氨基烷基基团的一部分季铵化。

Description

添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的季铵化以改善药物 渗透性和溶解度
本分案申请是基于申请号为200880120805.2、申请日为2008年12月12日、发明名称为“添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的季铵化以改善药物渗透性和溶解度”的中国专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及改善药物渗透性和溶解度的策略，其基于添加经化学改性的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其中所述化学改性在于所存在的氨基烷基的一部分的季铵化。
背景技术
许多药物的低生物利用度在药物配制剂中是重大问题。就一定的施用途径的生物利用度而言，决定性的是活性成分的溶解度和渗透性。在良好渗透性下低溶解度也可以导致低的生物利用度，如同在低渗透性下高溶解度一样。为了克服溶解度和渗透性的问题，实行了很多策略。
例如在肠道内物质的渗透性可以通过使用特定助剂提高。这些助剂是例如壳聚糖和癸酸纳。在此认为，这些物质主要影响细胞旁路转运（Current Drug Delivery,2005,2,9-22）。但也可考虑其对跨细胞转运的积极影响。
对于甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E（Pharmacopeia japonica;以“碱性丁基化甲基丙烯酸酯共聚物（Basic butylated methacrylate copolymer）”列于欧洲药典中）而言可以显示，在与四环素同时口服给予时，四环素的AUC（"曲线下面积（Area under thecurve）"=被身体吸收的药物总量的量度）升高（EP1302201A1）。此外，EudragitE100，甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E商购可得的形式（公司），可以减少阳离子活性物质与粘液或胆酸的络合（Takemura,Controlled Release Society32nd Annual Meeting andExposition;EP1302201A1;Macromol.Biosci.,2005,5,207-213）。此外，Alasino等人可以证明，载有阿霉素的脂质体在Eudragit E100存在时较Eudragit E100不存在时在不改变脂质体大小的情况下释放更多的活性物质（Macromol.Biosci.,2005,5,207-213）。这说明了Eudragit E100改变脂质膜渗透性的作用。关于Eudragit E100能增加生物利用度的作用原理还未明确研究。可能的原理是胆酸的结合，阻止药物结合于粘液以及Eudragit E100与细胞膜的相互作用或紧密连接。
附图1显示甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E在文献中通用的表示方式（EudragitE）。由此显见，它是统计三元共聚物而非三元嵌段共聚物，即，m、n和o的值可变。
欧洲专利EP1302201A1描述了甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E与酸组合使用。所述化合物在[0052]段落中更明确地指定为EudragitE。酸的添加是必不可少的，因为该化合物在pH值大于5.5时难溶解，而它在不溶解的状态是无效的。
发明内容
本发明的任务是将甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E这样化学改性，使得其溶解度在没有添加其他物质如酸的情况下，在pH值大于5.5时显著增加。本发明的另一个任务是这种化学改性不限制甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E改善渗透性的作用。此外这种经改性的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E是无毒性的，且其应该有时间和成本有利地制备。
本发明的任务通过特征在于甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的氨基烷基的一部分的季铵化而实现。
具体地，本发明提供以下技术方案：
第1项、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其特征在于，一部分氨基烷基基团是季铵化的。
第2项、根据第1项的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其中所述的季铵化的氨基烷基的份额基于氨基烷基总数计大于10%，优选大于20%。
第3项、根据第1或2项的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其具有结构式
其中m表示甲基丙烯酸丁酯基团的总数，
n表示氨基烷基的总数，
o表示甲基丙烯酸甲酯基团的总数，和
q表示季铵化的氨基烷基基团的总数。
第4项、根据第1至3项之一的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的制备方法，其特征在于，所述季铵化通过与甲基卤或硫酸二甲酯反应而进行。
第5项、根据第4项的方法，特征在于所述甲基卤选自包括甲基碘、甲基溴、甲基氯的组，优选甲基碘。
第6项、根据第4或5项的方法，特征在于使用甲醇作为溶剂。
第7项、根据第1至3项之一的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的用途，其用于改善药物的渗透性和溶解度。
第8项、根据第7项的用途，其中所述共聚物与所述药物一起施用。
第9项、药物配制剂，其包含一种或多种药物和根据第1至3项之一的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E。
优选所述季铵化的氨基烷基占氨基烷基总量的10%以上，优选20%以上。然而季铵化度始终低于100%。
在优选的实施方式中，所述甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E具有结构式：
其中m表示甲基丙烯酸丁酯基团的总数，
n表示氨基烷基基团的总数，
o表示甲基丙烯酸甲酯基团的总数，和
q表示季铵化的氨基烷基基团的总数。
本发明的任务同样通过以上表征的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的制备方法完成，其中所述季铵化通过与甲基卤或硫酸二甲酯的反应完成。
在优选的实施方式中，所述甲基卤选自包括甲基碘、甲基溴、甲基氯的组，优选甲基碘。
优选甲醇作为溶剂应用于该方法。
此外，本发明还涉及以上表征的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E用以改善药物渗透性和溶解度的用途。
在优选的实施方式中，所述共聚物与所述药物一起给药。
本发明的任务也通过包含一种或多种药物和以上表征的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的药物配制剂完成。
发明人惊讶地发现，甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的季铵化衍生物（季铵化度>20%）能够暂时提高具有低渗透性的物质的渗透，而不会不可逆地损害单层的屏障功能。与用没有季铵化的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E相比，提高比率至少是同样高，有时明显更高。
季铵化的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E有时显著更高的改善渗透性的作用起初并没有预料到，因为由带电荷的分子已知的是，与其不带电荷的结构相似物相比，由于其降低的脂溶性而具有较低的通过上皮细胞和内皮细胞（Endothelien）的渗透系数。可以以一对物质东莨菪碱和N-丁基东莨菪碱为例。最后提到的化合物是季铵化合物（带永久正电荷），其仅显示低的肠内吸收率且几乎不通过血脑屏障。这是由于不足的脂溶性以及分子与生物膜之间的相互作用。
此外，可以表明，作为单层通透性量度的跨膜电阻（TEER）在细胞与季铵化共聚物在pH7.4下孵育时下降，而这一点不适用于原始的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E。这可以总结为季铵化衍生物非pH依赖性的溶解度和作用。因此，对比EP1302201A1的教导，本发明不需要酸的加入。由此对于口服给药而言提供优点，因为肠内pH视位置而定介于5.5和7.4。该性质使得能够在有机体内改善低渗透性药物的渗透，因此使其能够作为药物被研制和应用。
对几乎所有施用方法都可考虑使用根据本发明的作为生物利用度改善剂的物质。其可以涉及溶液、悬浮液、乳液、***物（Inserte）或其它适合的药物形式。此外，本发明可以用于需要克服吸收障碍的口服、皮肤、口腔、直肠、鼻腔或任何其它施用方法，以使能够实现药物局部或全身的效果。如此可考虑例如用于眼科的目的，即应用于眼睛。在这种情况下，所述物质可以改善特定药物通过角膜的渗透。
根据本发明用于季铵化衍生物制备（即使大规模的）的方法是容易实施的且时间和成本有利的。
定义
术语“渗透性”（=通透性），如本文使用的，理解为是指物质例如药物通过细胞膜，特别是上皮细胞膜的扩散。术语“细胞渗透性”或“上皮细胞渗透性”可以同义地使用。
术语“季铵化度”表示季铵氮原子（或季铵化的氨基烷基）的份额，基于在所给出甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E量中的氮原子（氨基烷基）总数计。
术语“药物”表示物质和物质的制剂，其是经确定用于人体或动物体上或体内的，以便：
-治愈、缓解、预防或辨别疾病、痛苦、身体伤害或疾病的不适，
-避开、清除或无害处理病原体、寄生物或外源物质，
-辨别或影响身体状况或功能或者精神状况和
-替代人体或动物体生产的活性成分或体液。
术语“生物利用度”表示对在全身循环（特别是：血液循环中）不变地供使用的物质份额的药理学量度。它说明物质（药物）多快和在什么范围内地被吸收和在作用位置被利用。
“Eudragit E100”（公司）是甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E（别名：聚（甲基丙烯酸丁酯，（2-二甲基氨基乙基）甲基丙烯酸酯，甲基丙烯酸甲酯）和“碱性丁基化的甲基丙烯酸丁酯共聚物”）商购可得的形式。“Eudragit E PO”（也是公司）是EudragitE100的粉末形式。
附图说明
图1显示甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E（Eudragit E）的结构式。
图2显示Eudragit E PO（公司）的1H NMR光谱（300MHz,MeOHd4）用以确定其单体组成。信号分类是按照字母a到j显示的。
图3显示Eudragit E PO（公司）用甲基碘季铵化的反应图解。
图4显示具有0%,22%,42%和65%季铵化度（自下而上）的Eudragit E PO（公司）的1H NMR光谱（300MHz,MeOHd4）；以灰色为背景的是与叔氮结合的甲基和亚甲基基团上的质子的信号。
图5显示通过1H NMR光谱法确定的季铵化度在最终65%季铵化情况下相对于时间的图表。
图6显示锥虫蓝-排斥的Caco-2细胞基于对照的百分比例的图表，以在pH6.5孵育1小时后由3个测量值确定的标准偏差给出。
图7显示Papp（表观渗透性）的图解图形，其具有在Eudragit E PO及其季铵化衍生物的存在下在pH6.5下孵育1小时后甘露醇的4个测量值的标准偏差。
图8显示表明在用等摩尔量聚合物孵育1小时后甘露醇-渗透性的可逆性的图表。相隔60分钟测量Papp。
图9显示在pH6.5顶端和pH7.4基底外侧的情况下以添加0.21μM浓度的Eudragit EPO和其季铵化衍生物的时间点的TEER值的百分比计，在聚合物存在下孵育1小时和在pH6.5顶端和pH7.4基底外侧无聚合物化合物孵育6小时的TEER值的进展。
图10显示在pH7.4顶端和基底外侧的情况下以添加0.21μM浓度的Eudragit E PO和其季铵化衍生物的时间点的TEER值的百分比计，在聚合物存在下孵育1小时和无聚合物化合物孵育6小时的TEER值的进展。
图11显示曲司氯铵的Papp图，其具有在pH6.5顶端和pH7.4基底外侧并在0.21μM浓度的Eudragit E PO和其季铵化衍生物存在下孵育2小时后的3到5个测量值的标准偏差。
图12显示他林洛尔的Papp图，其具有在pH6.5顶端和pH7.4基底外侧并在50μg/ml浓度Eudragit E PO的季铵化衍生物存在下的3个测量值的标准偏差。
具体实施方式
实施例
1.Eudragit E PO的季铵化
Eudragit E PO（公司）的单体组成经1H NMR光谱（附图2/表1）确定。这里所使用的氘代溶剂MeOHd4从Deutero公司获得。
BMA DMAEMA MMA
(m) (n) (o)
1H NMR 0.75 1.57 1
制备商数据 1 2 1
表1.聚合物Eudragit E PO的单体组成。BMA=甲基丙烯酸丁酯，DMAEMA=（2-二甲基氨基乙基）甲基丙烯酸酯，MMA=甲基丙烯酸甲酯。
所定义的季铵化的Eudragit E PO是通过甲基碘（MeI）上由Eudragit E PO的叔胺基团的双分子亲核取代制备。
对于典型的季铵化反应（附图3），将Eudragit E PO溶于单颈瓶中的甲醇（MeOH）（0.1g/ml;Acros Organics），其中起始化合物和相应的季铵化产物都是很好溶解的。称量出对于争取达到的季铵化度所需的MeI(Acros Organics)的量并加入到搅拌的溶液中。如果根据EPO单体组成的制备商数据（表1），在甲基化中使用相比对于争取达到的季铵化度理论所需少大约10%的MeI。因为DMAEMA相对于BMA和MMA一起的实际的物质量份额低10%，MeI量的减少是必需的。1到2小时后，所述聚合物通过缓慢滴入20倍体积的剧烈搅拌的二***中于-78℃析出。
为了通过1H NMR确定达到的季铵化度，取样并在高真空中干燥。氮的季铵化以及正电荷的引入导致所结合基团上的电子密度降低。在1H NMR光谱中该去屏蔽显示在明显的低场位移。因此，可以通过与叔氮相结合的基团的信号减弱来测定季铵化度。假设总是相同的起始化合物的单体组成情况下，附图4中所示的所有光谱中BMA丁基残基的亚甲基信号在1.66ppm的积分作为参考设定为2。因此，在所有光谱中与叔氮相结合的甲基的质子信号精确地通过同一个谱段（I甲基）积分。在起始化合物中该积分的值是9.44。因此，季氮原子基于氮原子的总数的份额，即季铵化度DQn按照以下公式提供：
对于具有65%季铵化度的Eudragit E PO的1H NMR信号:
1H NMR(300MHz,MeOHd4)δ=4.52(br,COOCH2CH2N(CH3)3 +),4.12(br,COOCH2CH2N(CH3)2),3.91(br,COOCH2CH2CH2CH3),3.64(br,COOCH3),3.42(br,COOCH2CH2N(CH3)3 +),2.68(br,COOCH2CH2N(CH3)2),2.35(br,COOCH2CH2N(CH3)2),2.21-1.75(br,CH2主链),1.65(br,COOCH2CH2CH2CH3),1.46(br,COOCH2CH2CH2CH3),1.30(br,CH3),1.23-0.69(br,CH3,COOCH2CH2CH2CH3)
为了追踪反应进展，从反应混合物中取65%季铵化的样本。通过在高真空中从反应混合物中分离所有挥发性成分来相应地终止反应。附图5显示根据二级动力学进行的SN2反应（=双分子，亲核取代）所预计的典型饱和曲线。所述争取达到的季铵化度在1小时后就已达到，且转化定量地进行。
在Eudragit E PO用甲基碘季铵化后，碘离子是带正电的铵基的抗衡离子。为了在细胞试验中能够尽可能的把不是由所述聚合物本身引起的效应排除在外，进行从碘离子到生物化学上无害的氯离子的离子交换。将离子交换树脂（Dowex Monosphere550A,带有OH-;Sigma Aldrich）悬浮于水中并填充于长约30cm直径约3cm的柱中。排出的水的pH值为8到9。然后由半浓缩的乙酸冲洗，直至pH值为酸性，随后用水冲洗直至排出的水为中性。随后将于10ml水中的300mg的季铵化化合物加入到柱中并用300ml水冲洗。取出1ml并混以浓缩的硝酸银溶液（Acros Organics）。如果观察到沉淀物，那么将溶液重复加入柱并用100ml水后冲洗。将pH值用HCl调节到1，乙酸和水离心移除，并将聚合物在60℃于真空干燥箱中多天干燥。终产物是无色固体（收率：>95%）。
2.在Caco-2细胞模型中研究季铵化的Eudragit E PO衍生物
A.方法
细胞培养
Caco-2细胞以100000个细胞每cm2的密度接种在24孔聚碳酸酯Transwell板（直径：0.33cm2）中。细胞在富集了100单位/ml青霉素，100mg/ml链霉素，1%非必需氨基酸和10%FBS的DMEM中在5%CO2和95%空气湿度下生长。所述试验在接种后20到22天进行。
为了维持细胞培养，将细胞在75cm2细胞培养瓶中贮藏，其在80-90%合生时用胰蛋白酶/EDTA溶液（0.25%/0.02%）进行胰蛋白酶化，每两天提供新鲜培养基。将这些细胞如前所述地进行胰蛋白酶化，并为了试验接种于Transwell板。所述用胰蛋白酶分开细胞的处理也称为传代。就该意义而言，只使用传代44到58次的细胞于该试验。
锥虫蓝排斥分析法
首先制备0.04%锥虫蓝在10mM MES/HBSS（pH6.5）中的溶液。胰蛋白酶化的Caco-2细胞，离心并重悬于10mM MES/HBSS（pH6.5）中。然后将这些细胞在1.5ml Eppendorf管中在10mM MES/HBSS（pH6.5）用0.21μM聚合物在室温下于旋转台上孵育1小时。然后将50μl细胞悬浮液与50μl锥虫蓝溶液混合，将20μl该混合物添加到血球计数板，并将细胞在光学显微镜下计数。在该实验中，完整的活细胞表现为对染料锥虫蓝的排斥，受损/死亡的细胞被染成蓝色。
对甘露醇的转运-再生（转运-恢复）分析
所述分析在24孔聚碳酸酯Transwell板中进行。将细胞用聚合物（0.21μM）、0.1mM甘露醇和1μCi/ml14C-甘露醇在25mM MES/HBSS(pH6.5)中的溶液在顶端面和在25mM HEPES/HBSS(pH7.4)中的溶液在基底外侧面孵育1小时。所述顶端和基底外侧溶液1小时后小心地移除并在顶端面替代为含有0.1mM甘露醇和1μCi/ml14C-甘露醇的25mM MES/DMEM+10%FBS(pH6.5)而在基底外侧替代为25mMHEPES/DMEM+10%FBS(pH7.4)。所述聚碳酸酯***物每小时一次地转移到新的装有缓冲液的24孔板。基底外侧培养基的样本用于闪烁计数。为了测定最初的甘露醇浓度，在试验开始时和顶端培养基替换后采集顶端培养基的样本，并用于闪烁计数。
对曲司氯铵的转运分析
曲司氯铵的转运通过HPLC分析。所述顶端细胞面用由10mMMES/HBSS(pH6.5)组成的转运缓冲液孵育，所述转运缓冲液包含浓度为0.21μM聚合物和2mM的曲司氯铵，而基底外侧的细胞面在10mMHEPES/HBSS(pH7.4)中孵育。自顶端面，在试验开始时抽取100μl样本并替换100μl新鲜缓冲液。在120分钟后转运实验通过移除过滤单元终止，并从基底外侧面采集样本。样本保存在-18℃直到通过HPLC测量样本。
对他林洛尔的转运分析
使用浓度为1μCi/ml的他林洛尔。所述顶端面用在10mMMES/HBSS缓冲液(pH6.5)中的聚合物溶液(0.2lμM)中孵育，而所述基底外侧面在10mM HEPES/HBSS缓冲液(pH7.4)中孵育。在开始时从顶端面采集20μl样本并在供体室重新添充20μl新鲜溶液。在30、60、90和120分钟后从基底外侧室采集500μl样本并分别替换500μl新鲜缓冲液。
闪烁计数
所述样本在Mini Vials A-管(Carl Roth公司&Co，Karlsruhe，德国)中借助液体闪烁计数仪(LC6000，Beckman Coulter，Unterschleiβheim，德国)在与4ml闪烁溶液Rotiszint22(Carl Roth公司&Co，Karlsruhe，德国)彻底混合后分析。计数持续时间对所有样本和试验设置为5分钟。
高效液相色谱法（HPLC）
测量利用Jasco HPLC***进行，其由Jasco PU-980泵、Jasco AS-950取样器（自动取样器）和Jasco UV-975UV/VIS检测器(Jasco Deutschland公司，Groβ-Umstadt，德国)组成，利用甲硫阿美铵作为内标。
色谱条件：
柱:LiChroCart125x4mm,RP-8,Superspher60(Merck Darmstadt,德国)
流动相:0.01M HEPES,0.003M K2HPO4x3H2O,300ml重蒸水,700ml乙腈,1.5ml85%磷酸
温度:室温
流速:1.2ml/min
检测:UV吸收210nm
注射体积:50μl
运行时间:7min
跨上皮电阻的测量（TEER=跨上皮电阻）
TEER的测量利用所谓“Chopstick”电极（Millicell ERS，Millipore，Bedford，美国）进行。对所述转运-再生试验，使用24孔聚碳酸酯Transwell板，将细胞首先顶端用25mMMES/DMEM(pH6.5)和基底外侧用25mM HEPES/DMEM+10%FBS(pH7.4)孵育20分钟。然后用吸量管加入浓缩聚合物溶液，以致所述聚合物在培养介质中的最终浓度为0.21μM。接着监测所述TEER一小时，然后在顶端面的培养基替换为新鲜缓冲液(25mM MES/DMEM(pH6.5)+10%FBS或25mMHEPES/DMEM(pH7.4)+10%FBS)。然后监测所述TEER的恢复6小时。
Papp（表观渗透性）的计算
所述Papp值按照下述公式计算：Papp=(Va/(A×t))×([药物]受体/[药物]开始,供体)，其中Va是在受体室以ml计的顶端体积，A是以cm2计的单层的面积，t是以s计的时间，[药物]受体是t秒之后在基底外侧室累积的药物浓度和[药物]开始,供体是在供体室的起始药物浓度。
B.结果
根据第1点合成的化合物中，在Caco-2模型中研究了具有22%、42%和65%季铵化度的三种衍生物（J Pharm Sci.,2000,89,63-75）。
为了研究Eudragit E PO季铵化衍生物的毒性，首先进行锥虫蓝排斥试验。如从附图6可见，所述季铵化化合物仅具有比Eudragit E PO稍高的毒性。此外，在细胞用季铵化化合物孵育时，所述跨膜电阻（TEER）和甘露醇转运增加都是可逆的（附图8和9）。这显示了，上皮细胞没有被所述物质不可逆损伤，且屏障功能在聚合物溶液移除后恢复。
在pH7.4时（顶端和基底外侧）Eudragit E PO在与季铵化衍生物等摩尔浓度下在TEER方面与对照是可比较的，而所述季铵化化合物引起TEER的显著下降（附图10）。可能是Eudragit E PO在中性pH下由于其较低的溶解度而无效。
除甘露醇渗透性提高以外（附图7），在细胞模型中，聚合物还提高了曲司氯铵（附图11）和他林洛尔（附图12）的渗透性。在甘露醇和曲司氯铵渗透性的情况下，比较了等摩尔量的所述季铵化衍生物和Eudragit E PO。在此显示，所述衍生物在等摩尔量下部分更强地、无论如何但是至少如Eudragit E PO同样强地提高所提及的物质的渗透性。

Claims (10)

1.甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其特征在于，一部分氨基烷基基团是季铵化的，并且所述的季铵化的氨基烷基的份额基于氨基烷基总数计大于20％。
2.根据权利要求1的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E，其特征在于所述共聚物E具有结构式
其中m表示甲基丙烯酸丁酯基团的总数，
n表示氨基烷基的总数，
o表示甲基丙烯酸甲酯基团的总数，和
q表示季铵化的氨基烷基基团的总数。
3.制备根据权利要求1或2的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E的方法，其特征在于，所述季铵化通过与甲基卤或硫酸二甲酯反应而进行。
4.根据权利要求3的方法，其特征在于所述甲基卤选自包括甲基碘、甲基溴、甲基氯的组。
5.根据权利要求3的方法，其特征在于所述甲基卤是甲基碘。
6.根据权利要求3的方法，其特征在于使用甲醇作为溶剂。
7.药物配制剂，其包含一种或多种药物和根据权利要求1或2的甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E。
8.甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E用于改善药物的渗透性和溶解度的用途，其中所述甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E中一部分氨基烷基基团是季铵化的，并且所述的季铵化的氨基烷基的份额基于氨基烷基总数计大于20％。
9.根据权利要求8的用途，其特征在于所述甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E具有结构式
其中m表示甲基丙烯酸丁酯基团的总数，
n表示氨基烷基的总数，
o表示甲基丙烯酸甲酯基团的总数，和
q表示季铵化的氨基烷基基团的总数。
10.根据权利要求8或9的用途，其特征在于所述共聚物与所述药物一起施用。
CN201410112390.1A 2007-12-13 2008-12-12 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度 Active CN103897079B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102007060175.3 2007-12-13
DE102007060175A DE102007060175A1 (de) 2007-12-13 2007-12-13 Quartärnisierung des Zusatzstoffs Aminoalkyl Methacrylat Copolymer E zur Verbesserung der Permeabilität und Löslichkeit von Arzneistoffen
CN2008801208052A CN101896207A (zh) 2007-12-13 2008-12-12 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2008801208052A Division CN101896207A (zh) 2007-12-13 2008-12-12 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103897079A CN103897079A (zh) 2014-07-02
CN103897079B true CN103897079B (zh) 2017-08-18

Family

ID=40339608

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410112390.1A Active CN103897079B (zh) 2007-12-13 2008-12-12 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度
CN2008801208052A Pending CN101896207A (zh) 2007-12-13 2008-12-12 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2008801208052A Pending CN101896207A (zh) 2007-12-13 2008-12-12 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度

Country Status (15)

Country Link
US (1) US8399523B2 (zh)
EP (1) EP2219676B1 (zh)
JP (1) JP5645668B2 (zh)
KR (1) KR101573554B1 (zh)
CN (2) CN103897079B (zh)
BR (1) BRPI0820888B8 (zh)
CA (1) CA2708431C (zh)
DE (1) DE102007060175A1 (zh)
ES (1) ES2562444T3 (zh)
HU (1) HUE026739T2 (zh)
IL (1) IL206016A (zh)
MX (1) MX2010006354A (zh)
PL (1) PL2219676T3 (zh)
SI (1) SI2219676T1 (zh)
WO (1) WO2009074336A1 (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2459219B1 (en) * 2009-07-30 2013-10-09 Evonik Röhm GmbH Aqueous carbonated medium containing an amino(meth)acrylate polymer or copolymer
EP3915543A1 (en) 2020-05-28 2021-12-01 Evonik Operations GmbH Solid self-nanoemulsifying drug delivery system (s-snedds)
EP3916029A1 (en) 2020-05-28 2021-12-01 Evonik Operations GmbH Novel methacrylate copolymer and compositions comprising it

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1726239A (zh) * 2002-12-13 2006-01-25 荷兰联合利华有限公司 聚合物和含该聚合物的洗衣用洗涤剂组合物

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179549A (en) * 1974-11-14 1979-12-18 Petrolite Corporation Quaternary ammonium adducts of polymerizable tertiary ammonium salts and acrylamide
JPS61174202A (ja) * 1985-01-29 1986-08-05 Mitsubishi Yuka Fine Chem Co Ltd 水溶性の感光性樹脂の製造方法
JPH075683B2 (ja) * 1986-09-09 1995-01-25 三菱レイヨン株式会社 帯電防止性に優れたメタクリル樹脂キヤスト板の製造方法
JP2520659B2 (ja) * 1987-09-10 1996-07-31 東京瓦斯株式会社 センサ―架台の海底着座方法及び装置
DE69528583T2 (de) * 1994-04-22 2003-07-10 Yamanouchi Pharma Co Ltd Kolon-spezifisches arzneistofffreisetzungssystem
AU734821B2 (en) * 1996-09-19 2001-06-21 Procter & Gamble Company, The Fabric softeners having increased performance
IT1294748B1 (it) 1997-09-17 1999-04-12 Permatec Tech Ag Formulazione per un dispositivo transdermico
FR2804122B1 (fr) * 2000-01-24 2002-02-22 Atofina Dispersions aqueuses sans sel de (co)polymeres hydrosolubles a base de monomeres cationiques, leur procede de fabrication et leurs applications
DE10013029A1 (de) * 2000-03-17 2001-09-20 Roehm Gmbh Mehrschichtige Arzneiform für die Colonfreigabe
CA2415643C (en) 2000-07-17 2010-11-16 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Pharmaceutical composition for oral use with improved absorption
JP2004517157A (ja) * 2001-01-29 2004-06-10 レーム ゲゼルシヤフト ミツト ベシユレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディートゲゼルシャフト 薬学的適用のための貯蔵安定性接着および結合剤
GB0114197D0 (en) 2001-06-11 2001-08-01 Syngenta Ltd Reactive polymeric surfactants
JP4464129B2 (ja) * 2001-09-19 2010-05-19 エラン ファーマ インターナショナル，リミティド ナノ粒子インスリン製剤
US6838078B2 (en) * 2002-01-16 2005-01-04 3M Innovative Properties Company Film-forming compositions and methods
GB0228537D0 (en) 2002-12-06 2003-01-15 Syngenta Ltd Particulate suspensions
US7087174B2 (en) * 2004-04-08 2006-08-08 Nalco Company Enhanced recovery of useful coal, potassium chloride and borax from screen bowl centrifuge
JP4362093B2 (ja) * 2004-08-06 2009-11-11 大日本印刷株式会社 帯電防止膜形成用の電離放射線硬化性組成物と帯電防止膜および帯電防止膜を備えた構造体
JP2006161259A (ja) * 2004-11-12 2006-06-22 Harima Chem Inc カチオン性表面サイズ剤、及び当該サイズ剤を塗工した紙
EP1810668A1 (en) 2006-01-23 2007-07-25 LEK Pharmaceuticals D.D. Coated formulations containing tolterodine tartrate

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1726239A (zh) * 2002-12-13 2006-01-25 荷兰联合利华有限公司 聚合物和含该聚合物的洗衣用洗涤剂组合物

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0820888B8 (pt) 2022-07-05
CN101896207A (zh) 2010-11-24
JP2011506370A (ja) 2011-03-03
CA2708431C (en) 2016-01-26
EP2219676A1 (de) 2010-08-25
JP5645668B2 (ja) 2014-12-24
IL206016A0 (en) 2010-11-30
BRPI0820888A2 (pt) 2015-06-16
KR101573554B1 (ko) 2015-12-01
MX2010006354A (es) 2010-12-20
CA2708431A1 (en) 2009-06-18
HUE026739T2 (en) 2016-07-28
SI2219676T1 (sl) 2016-03-31
ES2562444T3 (es) 2016-03-04
US8399523B2 (en) 2013-03-19
US20100286288A1 (en) 2010-11-11
KR20100106380A (ko) 2010-10-01
PL2219676T3 (pl) 2016-05-31
DE102007060175A1 (de) 2009-06-18
CN103897079A (zh) 2014-07-02
WO2009074336A1 (de) 2009-06-18
IL206016A (en) 2015-11-30
EP2219676B1 (de) 2015-12-09
BRPI0820888B1 (pt) 2019-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11547301B2 (en) Methods for collecting and testing bacteria containing samples from within the gastrointestinal tract
Tekade et al. Surface-engineered dendrimers for dual drug delivery: a receptor up-regulation and enhanced cancer targeting strategy
Kleinman et al. Effect of protonation and PAMAM dendrimer size on the complexation and dynamic mobility of 2-naphthol
CN103897079B (zh) 添加物甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物e的季铵化以改善药物渗透性和溶解度
CN104936579A (zh) 用于引发对免疫原的免疫响应的方法
CN103110954A (zh) 胆固醇修饰的生物可降解聚阳离子载体及制备方法和用途
Andretto et al. Hybrid core-shell particles for mRNA systemic delivery
CN104780926B (zh) 用于医学应用的带有侧伯胺的聚碳酸酯
US20190160007A1 (en) Integrated Nano System for Liver-Targeting Co-Delivery of Genes/Drugs and Preparation Method
CN103536934A (zh) 一种基于pamam的自组装纳米基因载体复合物及其制备方法
CN102731775A (zh) 聚精胺阳离子及其构建方法和纳米颗粒的制备方法
JP2009007547A (ja) 核酸キャリア及び核酸デリバリー方法
CN105560180A (zh) 叶酸特异性靶向活化态肝星状细胞的聚合物纳米载体及其药用用途
CN107496936A (zh) 一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药***及其制备方法
CN103267785A (zh) 一种检测药物包裹或释放过程的单分子分析方法
US20080187998A1 (en) Sulfonamide-based oligomers and polymers for destabilization of biological membranes
CN102675567B (zh) 一种水溶性可生物降解且高效抗菌的聚合物胶束及其制备方法
Chowdhary et al. A Formulation of Paromomycin Sulphate as a Promising Fucose-Conjugated Nanostructured Lipid Carrier for Antileishmanial Drug Delivery
Grooms-Williams et al. Toxicological Analysis of Avaren-Fc: A Potential HIV Microbicide
US20230055279A1 (en) Composition containing cationic hydroxyethyl cellulose
CN105764913A (zh) 用于药物输送的还原性或非还原性多核苷酸聚合物及其制备方法
Jorge DNA-Polyethylenimine-Fe (III) complexes for gene delivery. A combined Monte Carlo and experimental study

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1198044

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1198044

Country of ref document: HK

CP01 Change in the name or title of a patent holder
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: Darmstadt

Patentee after: Roma Chemical Co.,Ltd.

Address before: Darmstadt

Patentee before: EVONIK ROHM GmbH

Address after: Essen, Germany

Patentee after: Evonik Operations Ltd.

Address before: Essen, Germany

Patentee before: EVONIK DEGUSSA GmbH

TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20200624

Address after: Essen, Germany

Patentee after: EVONIK DEGUSSA GmbH

Address before: Darmstadt

Patentee before: Roma Chemical Co.,Ltd.