CN103827089A

CN103827089A - 具有血管发生抑制活性的新化合物、其制备方法及包含其的药物组合物

Info

Publication number: CN103827089A
Application number: CN201280046679.7A
Authority: CN
Inventors: 金知汉; 金济学; 李浚光; 郑邯宣; 韩南锡; 朴勇; 姜承勋; 郑喜真; 李璟泰; 崔慧恩; 池龙夏; 李柱翰; 白受憙
Original assignee: Boryung Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Boryung Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-07-27
Filing date: 2012-07-27
Publication date: 2014-05-28
Also published as: RU2015140132A3; BR112014001963A2; JP2014521640A; EP2754655A2; RU2014107488A; EP2754655A4; RU2015140132A; US20140256711A1; KR101412794B1; WO2013015657A3; JP5894669B2; KR20130013163A; MX2014001052A; US9227955B2; WO2013015657A2

Abstract

本发明公开了由化学式I表示的抗血管发生化合物或其药用盐、其制备方法和包含其的药用组合物。因为化学式I的化合物有效地抑制血管发生，所以化学式I的化合物可用于预防和治疗由血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病，并可用作抗血管发生剂。

Description

具有血管发生抑制活性的新化合物、其制备方法及包含其的药物组合物

技术领域

本发明涉及具有针对血管发生的抑制活性的新化合物，制备其的方法，及包含其的药物组合物。

本发明涉及用于预防或治疗由VEGF(血管内皮生长因子)的异常活性引起的疾病或症状的药物组合物。

背景技术

尽管在世界范围内对癌症进行了广泛的研究，但在实践中还是难以治愈癌症，这是由于癌症自身的多样性以及癌症的多变的致病机制。已经进行了不断的尝试以开发新的抗癌剂，其能够克服化学抗性的问题同时不引起副作用。然而，仍然需要开发适当的有效药物。

肿瘤的生长在不形成支持生长的新血管的情况下是无能力的。随着肿瘤生长，其快速地使其血液供应过度生长，变得其中氧不足。该肿瘤缺氧导致肿瘤坏死。此外，肿瘤血管***被肿瘤自身的压力破坏，这使缺氧恶化。为了绕过与此相关的问题，因此肿瘤表达对于形成新血管所需的蛋白质以促进血管发生。

迄今，对新血管形成的大量研究导致出现涉及血管发生或新血管形成的多种因子，包括血管发生因子，如VEGF(血管内皮生长因子)，bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)，HGF(肝细胞生长因子)，EGF(表皮生长因子)和血管生成素，具有酪氨酸激酶活性的血管发生因子受体，如FGFR(成纤维细胞生长因子受体)，Flk-1／KDR，Flt-1，Flt-3，Tie-1，Tie-2／Tek，和Eph，和内源性血管发生抑制剂，如血管抑素和内皮抑素，提供了对血管发生或新血管形成和人类疾病之间的关系以及血管发生和新血管形成的机制的认识，并且暗示了用于调节血管发生的多种方法。其中，VEGF作为用于选择性抑制血管发生的靶标已经引发极大兴趣，因为发现它与癌症进展和治愈率密切相关并且其受体Flk-1／KDR以高特异性被表达在内皮细胞上。

关于癌症和血管形成之间的关系，Dr.Folkman在1971年首先推测，血管发生在肿瘤生长中发挥重要作用(J.Folkman，Tumor Angiogenesis：Therapeutic Implications(肿瘤血管发生：治疗推断).New England Journal ofMedicine，285,1182-1186,1971)。自从在1990年报道了烟曲霉素(fumagillin)(一种来自微生物的复杂生物分子)对血管发生的选择性抑制作用，抗血管发生剂作为癌症的治疗剂被密切关注(D.Ingber，T.Fujita等.Syntheticanalogues of fumagillin that inhibit angiogenesis and suppress tumor growth(抑制血管发生并抑制肿瘤生长的烟曲霉素的合成类似物).Nature，348,555-557,1990)。此外，内源性血管发生抑制剂，如血管抑素(angiostatin)(M.S.O′Reilly,L Holmgren，Y. Shing，C.Chen，R.A.Rosenthal，M.Moses，W. S.Lane，Y. Cao，E.H.Sago和J.Forkman.，Angiostatin：a novel angiogenesisinhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis LungCarcinoma(血管抑素：一种介导对Lewis肺癌转移的抑制的新型血管发生抑制剂)，Cell，79,3 1 5-328,1 994)，和内皮抑素(endostatin)(M.S.O′Reilly,T.Boehm，C.Chen等，Endostatin：an endogenous inhibitor of angiogenesis andtumor growth(内皮抑素：一种血管发生和肿瘤生长的内源性抑制剂).Cell，88,277-285,1997)目前已被证明在动物模型中具有有效的抗癌活性，其作为抗癌剂的用途吸引了极大关注。

此外，与其他抗癌剂相比，血管发生抑制剂作为抗癌剂在以下方面具有优势：因为血管发生对于癌症的生长和转移是必需的，所以血管发生抑制剂能够同时阻断癌症生长和转移；并且血管发生抑制剂靶向正常的二倍体血管内皮细胞而不是非整倍体癌细胞，不会引起由于癌细胞的异质性和遗传不稳定性所致的抗性问题；血管发生抑制剂能够针对任何类型的癌症发挥抑制活性，因为血管发生对于肿瘤的生长是必要的，而其他抗癌剂显示窄的针对特定或若干癌症的治疗谱；并且因为除了若干病例(如伤口愈合、月经等)以外，血管发生在成人中非常少，所以在使用血管发生抑制剂时由其他抗癌剂引起的副作用将被极大减少。

除了涉及癌症的生长和转移以外，血管发生是多种血管发生疾病的直接病因，所述血管发生疾病包括类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)[Kwon，Ho-Jung，Journal of the Korean Endocrine Society,Vol 16，No.3，200 1]，糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy)[Kwoak，No-Hoon，Journalof the Korean Endocrine Society,Vol.16，No.3，2001]，眼病(ophthalmicdiseases)如角膜炎(keratitis)、充血(hyperemia)、黄斑变性(maculardegeneration)、脉络膜新血管形成(choroidal neovascularization)和新生血管性青光眼(neovascular glaucoma)[YS Kwon，HS Hong，JC Kim，JS Shin，YSSon.Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.February 2005 vol.46 no.2 454-460]，和角膜新血管形成(corneal neovascularization)[Kim，J.H.，Lee J.Y.，Chung S.K.和Joo C.K.Journal of the Korean Ophthalmological Society,Vol.40，No.3，662-666]，银屑病(psoriasis)[D.Creamer，D.Sullivan，R.Bicknell和J.Barker.Angiogenesis Volume 5，Number 4，231-236]，血管瘤(hemangiomas)，其可能导致肺部气道堵塞，危及生命[Birgit M.Kraling等.American Journal ofPathology,Vol.148，No.4，April 1996]，和肥胖(obesity)，并且因此预期可用于预防和治疗与血管增生相关的疾病以及癌症。

现有技术文献

非专利文献

(非专利文献1)1.Angiogenesis in cancer，vascular，rheumatoid and otherdisease(癌症、血管病、风湿病和其他疾病中的血管发生).Folkman J.NatMed.1995 1(1)27-31.综述。

(非专利文献2)2.General mechanisms of metastasis(转移的一般机理).Woodhouse E.C.，ChuaquiR.F.，Liotta L.A..Cancer.1997，Vol 80(8 Suppl)1529-1537.综述。

(非专利文献3)3.Anti-invasive and anti-angiogenic activities of naturallyoccurring dibenzodiazepine BU-4664L and its derivatives(天然存在的二苯并二氮革BU-4664L及其衍生物的抗侵入和抗血管发生活性).Miyanaga S.，Sakurai H.，Saiki I.，Onaka H.，Igarashi Y. Bioorg.Med.Chem.Lett.20 1 0 20(3)963-965

(非专利文献4)4.Tumor Angiogenesis：Therapeutic Implications(肿瘤血管发生：治疗推断).J.Folkman.New England Journal of Medicine，285，1182-1186，1971

(非专利文献5)5.Synthetic analogues of fumagillin that inhibitangiogenesis and suppress tumor growth(抑制血管发生并抑制肿瘤生长的烟曲霉素的合成类似物).D.Ingber，T.Fujita等.Nature，348，555-557,1990

(非专利文献6)6.Angiostatin：a novel angiogenesis inhibitor thatmediates the suppression of metastases by a Lewis Lung Carcinoma(血管抑素：一种介导对Lewis肺癌转移的抑制的新血管发生抑制剂).M.S.O′Reilly，L Holmgren，Y. Shing，C.Chen，R.A.Rosenthal，M.Moses，W. S.Lane，Y.Cao，E.H.Sago和J.Forkman.Cell，79，315-328，1994

(非专利文献7)7.Endostatin：an endogenous inhibitor of angiogenesisand tumor growth(内皮抑素：一种血管发生和肿瘤生长的内源性抑制剂).M.S.O′Reilly,T.Boehm，C.Chen，et a1.Cell，88，277-285，1997

(非专利文献8)8.Angiogenesis Regulation Low-Molecular Compounds(血管发生调节低分子化合物).Journal of the Korean Endocrine Society,Vol.16，No.3，2001

(非专利文献9)9.Study on Neovascularization in Diabetic Retinopathy(对糖尿病性视网膜病变中的新血管形成的研究).Journal of the KoreanEndocrine Society,Kwoak，No-Hoon，Vol.6，No.3，2001

(非专利文献10)10.Inhibitory Effect of Rapamycin on CornealNeovascularization In Vitro and In Vivo(雷帕霉素对角膜新血管形成的体外和体内抑制效果).YS Kwon，HS Hong，JC Kim，JS Shin，YS Son.Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.February 2005 vol.46 no.2 454-460

(非专利文献11)11.Angiogenesis in psoriasis(银屑病中的血管发生).D.Creamer，D.Sullivan，R.Bicknell和J.Barker.Angiogenesis Volume 5，Number 4，2002，pp.23 1-236(6)

(非专利文献12)12.E-Selectin Is Present in Proliferating EndothelialCells in Human Hemangiomas (E-Selectin存在于人血管瘤中的增生性内皮细胞中).Birgit M.Kraling等.American Journal ofPathology,Vol.148，No.4，April1996

发明内容

技术问题

本发明的目的是提供具有抗血管发生(anti-antiogenic)活性的新型化合物、其制备方法以及包含其的药物组合物。

技术方案

根据一个方面，本发明提出由以下化学式I表示的化合物或其药用盐：

[化学式I]

其中，

X₁和X₂独立地是卤素原子(F，Cl，Br，I)或氢原子，

Y是-NH-；-S-；或-O-，

R₁表示具有1至5个取代基的哌啶基、哌嗪基、氮杂二环[2.2.2]辛基或苯基，所述1至5个取代基选自由以下各项组成的组：苄基，苯基氧基，1，1-嘧啶乙基，吡啶甲基，C_1-4烷基，C_3-6烯基(C_3-6alkene)，和叔丁氧基羧基及丙二酰-2-基(malon-2-yl)，

其中所述C_1-4烷基被0至3个取代基取代，所述0至3个取代基选自由以下各项组成的组：R₃R₄N-、羟基和卤素原子，其中R₃和R₄独立地是C_1-4烷基，

其中所述苄基、所述苯基氧基、所述嘧啶甲基和所述嘧啶甲基独立地被0至4个卤素原子取代，

R₂表示具有1或2个取代基的C_1-4烷基，所述1或2个取代基选自被0至3个具有0至3个卤素取代基的苄基取代的吗啉基、被0至3个卤素原子取代的苯基、吡啶基、嘧啶基和哌嗪基；C_5-10烷基；C_1-4烷基氧基羰基氨基；C_1-4烷氧基C1-4烷基；甲苯磺酰氨基；具有0至3个取代基的苯基，所述0至3个取代基选自C_1-4烷基、卤素、硝基和苯氧基；具有0至3个取代基的吡啶基，所述0至3个取代基选自C1-4烷基氧基羰基和C_1-4烷基；氮杂环庚烷-2-酮基(azepan-2-only)；1，3，4-***基；被0至3个C_1-4烷基取代的嘧啶基；吡咯烷基；被0至2个C_1-4烷基取代的噻唑基；被0至3个C_1-4烷基取代的2，3-二羟基吲哚；或

或

其中R₅和R₆各自独立地是C_1-4烷基、C_1-4烷基硫烷基(C_1-4alkyl sulfanyl)或硫羟(thio1)，并且

R₇和R₈各自独立地是C_1-4烷基氧基羰基、苯基或苄基。

在一个优选的实施方案中，R₁是1-苄基哌啶-4-基；1-苄基哌啶-3-基；4-苯氧基苯基；1-(2-羟基乙基)-哌啶-4-基；1-(2-羟基乙基)-哌啶-3-基；1-(2-羟基乙基)-哌嗪-4-基；2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基；叔丁氧基羰基哌啶-4-基；叔丁氧基羰基哌啶-3-基；1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基；甲基哌啶-4-基；甲基哌嗪-4-基；哌啶-4-基；哌啶-3-基；1-(2-羟基乙基)-2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基；1-芳基哌啶-4-基(1-烯丙基哌啶-4-基)；[2-(N，N-二甲基氨基)乙基]哌啶-4-基；(叔丁基氧基羰基)哌啶-3-基：(丙二酰-2-基)哌啶-4-基；(吡啶-2-基)甲基哌啶-4-基；(吡啶-3-基)甲基哌啶-4-基；或1-(6-氯-5-氟嘧啶-4-基)乙基哌啶-4-基。更优选地，R ₁是1-苄基哌啶-4-基；1-苄基哌啶-3-基；1-(2-羟基乙基)-哌啶-4-基；哌啶-3-基；或叔丁氧基羰基哌啶-3-基。

在一个优选的实施方案中，R₂是3-氯苯基；4-苯氧基苯基；3，3-二甲基-2，3-二氢-1H-吲哚-6-基；4-(4-氟苄基)-吗啉-2-基甲基；1，3，4-***-2-基；4，6-二甲基嘧啶-2-基；(S)-吡咯烷-3基；2-(吗啉-1-基)乙基；叔丁氧基羰基氨基；(3-甲氧基羰基)吡啶-6-基；对甲苯磺酰氨基；吡啶-4-基甲基；1，2-二苯基乙基；2-甲氧基乙基；5-甲基噻唑-2-基；3-甲基吡啶-2-基；氮杂环庚烷-2-酮-3-基；4-氟苄基；2-乙基己基；3-甲基-2-甲基硫烷基-3，4-二氢喹唑啉-4-酮-6-基；(3，4-二甲氧基)苯基；

更优选地，R₂是3-氯苯基；4-苯氧基苯基；5-甲基噻唑-2-基；或

除非另外说明，“化学式I的化合物”包括其所有外消旋物、其光学异构体和其溶剂化物(水合物)，不管是结晶或非结晶。

代表性的化学式I的化合物或其药用盐的具体实例包括：

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]，

N-(3-氯苯基)-2-(4-苯氧基苯胺基)烟酰胺[104]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[110]，

2-(4-苯氧基苯胺基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[11 1]，

N-(3-氯苯基)-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[201]，

N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[208]，

2-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[210]，

N-(3-氯苯基)-2-(1-甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[214]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[218]，

N-(3-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基氨基)烟酰胺[240]，

N-(3-氯苯基)-2-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基氨基)烟酰胺[241]，

(R)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[267]

(S)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[273]，

(R)-N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺[270]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺[276]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺[301]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺[302]，

6-氯-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)苄基哌啶-4-基氨基]烟酰胺[311]，

6-氯-N-(3-氯苯基)-5-氟-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[3 12]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3，3-二甲基-2，3-二氢-1H-吲哚-6-基)烟酰胺[117]，

N-(3，3-二甲基-2，3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-(4-苯氧基苯胺基)烟酰胺[118]，

N-(3-氯苯基)-2-(4-哌啶基氨基)烟酰胺[224]，

(R)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[269]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[275]，

N-(3-氯苯基)-2-(1-(2-羟基乙基)-2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[242]，

2-(1-芳基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[243]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-N，N-二乙基氨基-乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[244]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[248]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[249]，

2-{1-[1-(6-氯-5-氟嘧啶-2-基)乙基]哌啶-4-基氨基}-N-(3-氯苯基)烟酰胺[250]，

(R)-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺[268]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺[274]，

2-{4-[3-(3-氯苯基氨基甲酰基)吡啶-2-基氨基]哌啶-1-基}丙二酸[246]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氧基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[289]，

2-(1-苄基哌啶-4-基硫烷基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[290]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-[4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基]烟酰胺[404]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(1，3，4-***-2-基)烟酰胺[406]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)烟酰胺[407]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(S)-吡咯烷-3-基烟酰胺[408]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-2-(吗啉-1-基)乙基烟酰胺[409]，

N′-[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]肼甲酸叔丁酯[410]，

6-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}烟酸甲酯[412]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(对甲苯磺酰氨基)烟酰胺[424]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(吡啶-4-基甲基)烟酰胺[425]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(1，2-二苯基乙基)烟酰胺[426]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(2-甲氧基乙基)烟酰胺[427]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)烟酰胺[428]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-甲基吡啶-2-基)烟酰胺[429]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(氮杂环庚烷-2-酮-3-基)烟酰胺[430]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-氟苄基)烟酰胺[431]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(2-乙基己基)烟酰胺[436]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-甲基-2-甲基硫烷基-3，4-二氢喹唑啉-4-酮-6-基)烟酰胺[439]，

6-苄基-2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[440]，

6-乙氧基氨基甲酸酯-2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[441]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[442]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3，4-二甲氧基苯基)烟酰胺[443]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[501]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[502]，

2-{[2-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[503]，

2-{[6-氯-2-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[504]，

2-{[6-氯-5-氟-2-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[505]，

2-{[2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[506]，

2-{[2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[507]，

2-{[6-氯-5-氟-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[508]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[509]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[510]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯-5-氟吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[511]，

6-氯-N-(2-乙基己基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[515]，

N-(2-乙基己基)-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[517]，

6-氯-N-(2-乙基己基)-5-氟-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[519]，

2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(2-乙基己基)烟酰胺[520]，

2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯-N-(2-乙基己基)-5-氟烟酰胺[522]，及其药用盐.

代表性的化学式I的化合物具有以下结构式：

更优选的根据本发明的化学式I的化合物或药用盐是：

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[110]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[218]，

(S)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[273]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[275]，

2-(1-苄基哌啶-4-基硫烷基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[290]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)烟酰胺[428]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4，5，6，7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[509]，及其药用盐。

更优选的是2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]或其药用盐。

当在本文中使用时，术语“药用盐”意指本领域中通常用于制备药物的无机或有机酸的盐。无机酸可以是盐酸、溴酸、硫酸或磷酸，而有机酸的实例包括柠檬酸，乙酸，乳酸，锡酸(stannic acid)，富马酸，甲酸，丙酸，草酸，三氟乙酸，甲磺酸，苯磺酸，马来酸，苯甲酸，葡糖酸，羟基乙酸，琥珀酸，4-吗啉乙磺酸，樟脑磺酸，4-硝基苯磺酸，羟基-O-磺酸，4-甲苯磺酸，半乳糖醛酸，双羟萘酸(embonic acid)，谷氨酸，天冬氨酸。

根据另一方面，本发明提供一种用于制备化学式I的化合物的方法，所述方法包括在碱存在下使由以下化学式II表示的化合物与由化学式III表示的化合物反应(下文中称为“制备方法1”)：

[化学式II]

[化学式III]

H₂N-R₂

其中，

X₁，X₂，R₁和R₂分别如前文中所定义，

Z是氯或溴。

在制备方法1中，化学式II的化合物和化学式III的化合物可以是商购获得的，或可以使用已知方法合成。例如，化学式II的化合物可以根据以下的教导合成：有机合成合订本(Organic Synthesis Collective Volume)1，(1941)12[F.K.Thayer]，有机合成合订本1，147(1941)[B.Helferich和W. Schaefer]和有机合成合订本2，292(1943)[JohnR.Ruhoff]。对于化学式III的化合物，可以参考Journal ofmedicinal chemistry,vol 22，1171(1979)[E.w. Byrnes等]，和Journal of the Chemical Society.Perkin Transactions 1.1984，229[Lars J.S.Knutsen等]。

制备方法1中使用的碱可以合适地选自本领域技术人员已知的那些碱。优选地，例如，其是选自以下的有机叔碱：三乙胺，N,N-二异丙基乙基胺，N-甲基吗啉，DBU(1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯)，N-甲基哌啶，4-二甲基氨基吡啶，N,N-二甲基苯胺，2,6-二甲基吡啶(2，6-lutidine)，4-N,N-一甲基氨基吡啶和吡啶。在制备方法1中，所用的碱与化学式II的化合物的摩尔比为1～5∶1，并且优选以3∶1的摩尔比使用。

只要其典型地被用于本领域中的酰胺反应，任何溶剂都可以用作制备方法1的反应溶剂。例如，乙腈，氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，N,N-一甲基甲酰胺，和N-甲基吡咯烷酮可以优选地单独或组合地使用。

制备方法1的反应可以在多种温度进行，但是优选-10至室温(30℃)。更优选地，在于0至10℃加入碱后，反应可以在室温或环境温度进行。然而，反应温度可以取决于所用碱的种类、反应溶剂及其量。

根据另一方面，本发明提供一种用于制备化学式I的化合物的方法，所述方法包括在碱存在下使由以下化学式IV表示的化合物与由以下化学式V表示的化合物反应(下文中称为“制备方法2”)：

[化学式IV]

[化学式V]

Y-R₁

其中，

X₁，X₂，R₁，和R₂分别如前文中所定义，并且

Y是-NH₂，-SH，或-OH。

在制备方法2中，碱可以是本领域技术人员通常可获得的无机碱或在常温以固相存在的有机碱。优选地，其选自由以下各项组成的组：碳酸钾，碳酸氢钾，碳酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化钙，氢氧化钡，甲醇钠，乙醇钠，叔丁醇钠，叔丁醇钾，氢化钠，氢化钾，硼氢化钠，氰基硼氢化钠，和4-N,N-一甲基氨基吡啶。

在制备方法2中，所用的碱与化学式IV的化合物的摩尔比为1～2∶1，并且优选以1.2～1.5∶1的摩尔比使用。

可用于制备方法2的反应溶剂是本领域技术人员在100℃以上进行回流可用的有机溶剂。优选地，可以单独地或组合地使用二甲苯，甲苯，DMF，DMSO，二

烷，二甲基吡啶，吡啶，和N，N-二甲基苯胺。二甲苯是指邻二甲苯、间二甲苯和对二甲苯中的任一种。2,3-二甲基吡啶，2,4-二甲基吡啶，2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基吡啶，3，4-二甲基吡啶和3，5-二甲基吡啶落入二甲基吡啶的范围内。更优选的是邻二甲苯(邻-二甲苯)。

制备方法2的反应可以在室温或回流温度范围内进行，其中后者是优选的。

根据另一方面，本发明提供一种用于预防或治疗血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病的药物组合物，所述药物组合物包含化学式I的化合物或其药用盐。所述药用盐如上所述。

此外，根据其另一方面考虑的是一种用于预防或治疗由血管内皮生长因子(VEGF)的异常活性引起的疾病或症状的方法，所述方法包括将治疗有效量的化学式I的化合物或其药用盐施用至有需要的哺乳动物，包括人。

由血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病或症状包括癌症，类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)，糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy)，角膜炎(keratitis)，充血(hyperemia)，黄斑变性(macular degeneration)，脉络膜新血管形成(choroidal neovascularization)，新生血管性青光眼(neovascularglaucoma)，角膜新血管形成的眼病(ophthalmic diseases of cornealneovascularization)，银屑病(psoriasis)，肺部的气道阻塞性血管瘤(airwayobstructive hemangiomas)，和由血管发生所致的肥胖。

在优选的实施方案中，由血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病或症状是癌症。

根据另一方面，本发明提供一种用于抑制血管形成的药物组合物，所述药物组合物包含化学式I的化合物或其药用盐。根据本发明的用于抑制血管形成的药物组合物优选是抗癌剂。

此外，本发明的药物组合物可以进一步包含一种或多种活性成分，所述一种或多种活性成分表现出与化学式I的化合物或其药用盐的活性相当或类似的活性。

除了所述活性成分以外，根据本发明的组合物可以包含至少一种药用载体。药用载体的实例包括盐水溶液，无菌水，林格溶液(Ringer’s solution)，缓冲盐水溶液，右旋糖溶液，麦芽糊精溶液，甘油，乙醇及其两种以上的混合物。如果需要，组合物还可以包含其他常规添加剂，如抗氧化剂，缓冲剂和抑菌剂。此外，组合物可以另外包含稀释剂，分散剂，表面活性剂，粘合剂和润滑剂以被配制成注射制剂，如水溶液，混悬剂和乳剂，丸剂，胶囊剂，粒剂或片剂。此外，取决于其组分或目的，组合物可以优选地使用本领域中已知的合适方法，例如，描述于Remington′s PharmaceuticalScience(Remington药物科学)(最新版)，Mack Publishing Company,EastonPA的方法配制。

根据意图用途，组合物可以经口或经由肠胃外途径施用(例如，静脉内，皮下，腹膜内或局部)。用于任何特定患者的具体治疗有效剂量水平可以根据包括以下各项在内的各种因素变化：患者体重，年龄，性别，总体健康状况和饮食，给药时间，给药途径，组合物的***速率和疾病的严重度。化学式I的化合物或其药用盐可以以约5至75 mg并且优选5至50 mg的日剂量施用。所述日剂量可以优选地在单剂中给出。

对于预防和治疗血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病的应用，组合物可以被单独使用或与包括手术，激素疗法，化疗和／或生物反应调节剂在内的其他疗法组合使用。

根据另一方面，本发明提供一种用于预防或治疗疾病的方法，所述方法包括将化学式I的化合物(以上列举的化合物中的至少一种)或其药用盐施用至包括哺乳动物在内的受试者。

根据另一方面，本发明提供一种用于预防或治疗疾病的方法，所述方法包括将化学式I的化合物(以上列举的化合物中的至少一种)或其药用盐施用至包括哺乳动物在内的受试者，其中所述疾病选自由以下各项组成的组：癌症，类风湿性关节炎，糖尿病性视网膜病变，角膜炎，充血，黄斑变性，脉络膜新血管形成，新生血管性青光眼，角膜新血管形成的眼病，银屑病，肺部的气道阻塞性血管瘤，和由血管发生所致的肥胖。

有益效果

因为本发明能够有效地抑制血管内皮生长因子的活性，因此本发明的化合物可用于预防和治疗由血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病，并且可用作抗血管发生剂。

附图说明

图1和2是照片，其显示实验实施例2-2的结果。

图3和4是照片，其显示实验实施例4的结果。

图5和6是照片，其显示实验实施例5的结果。

图7和8是照片，其显示实验实施例6的结果。

图9是照片，其显示实验实施例7的结果。

具体实施方式

通过以下实施例，可以获得对本发明的更好理解，提出这些实施例用于举例说明而不被解释为限制本发明。

在以下实施例中，除非具体说明，所有试剂和溶剂购自Aldrich、TCI、Wako或Junsei，而¹H-NMR和质谱数据分别使用Gemini 200(Verian)和11 00MSD(Hewlett Packard)测得。

除非另外说明，用于实施例中的干燥剂是‘硫酸钠’。

制备例

用于制备表1的化合物的中间体在以下制备例中合成。

制备例1：制备2-氨基-4,5,6,7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯盐酸盐(参考：WO 2010／112124)

向哌啶-2-酮盐酸盐(5g，37.43mmol，1.05当量)，氰基乙酸甲酯(37.43mmol，1.05当量)和硫(35.65mmol 1.05当量)在甲醇(20mi)中的的溶液中加入二乙胺(35.65mmol)。将反应混合物在室温搅拌5小时，并将由此形成的沉淀用异丙醇(10 ml)和甲醇(20 ml)洗涤并用热空气干燥从而得到标题化合物。收率42.6％，碱化的Cpd¹H NMR(CDCl₃)δ 6.01(s，2H)，3.79-3.77(m，5H)，3.07(t，2H)，2.72(m，2H)ppm

制备例2：制备2-氨基-6-苄基-4,5,6,7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯(参考：WO 2010／112124)

以与制备例1中相同的方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1-苄基哌啶-2-酮代替哌啶-2-酮盐酸盐。收率81.4％¹H NMR(CDCl₃)δ 7.37-7.30(m，5H)，6.01(s，2H)，3.78(s，3H)，3.68(s，2H)，3.41(s，2H)，2.85-2.75(m，4H)ppm

制备例3：制备2-氨基-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-乙酯3-甲酯(参考：WO 2010／112124)

以与制备例1中相同的方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的哌啶-2-酮-1-基乙氧基氨基甲酸酯代替哌啶-2-酮盐酸盐。收率：78.1％，¹H NMR(CDCl₃)δ 6.05(s，2H)，4.40(s，2H)，4.17(q，2H)，3.80(s，3H)，3.67(t，2H)，2.81(t，2H)，1.28(t，3H)ppm

制备例4：制备2-氨基-4，7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯(参考：WO 2010／112124)

以与制备例1中相同的方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的哌啶-2-酮-1-基叔丁氧基氨基甲酸酯代替哌啶-2-酮盐酸盐。收率：80.9％，¹H NMR(CDCl₃)δ 6.07(s，2H)，4.35(s，2H)，3.79(s，3H)，3.61(t，2H)，2.78(t，2H)，1.47(s，9H)ppm

制备例5：制备2-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺

步骤1.制备2-氯烟酰氯

将2-氯烟酸(10g，63.47mmol，1当量)在70 ml的二氯甲烷中的溶液在冰浴中搅拌。在向所述溶液逐滴加入亚硫酰二氯(76.16 mmol，1.2当量)达30 min后，除去冰浴，并将溶液在室温搅拌30 min然后在回流下搅拌1小时。将反应混合物冷却并在未经进一步纯化下用于下一步骤。

步骤2.制备2-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺

将在步骤1中获得的溶液置于冰浴中并在室温添加三乙胺(152.32mmol，2.4当量)达30 min。再次，向反应混合物加入3-氯苯胺(76.16mmol，1.2当量)达30 min，之后在回流下搅拌3小时。当在薄层二氧化硅色谱法的监测下完成反应时，将反应混合物冷却至室温并用纯水将反应终止。然后利用MC(二氯甲烷，50 ml)将所得的溶液萃取两次或三次。合并的有机层用70 ml的1N-HCl洗涤并用碳酸氢钠中和。在用硫酸钠干燥后，在减压下浓缩合并的有机层。通过柱色谱法的纯化(流动相；30(v／v)％EA，在己烷中)得到标题化合物。总收率：81.6％¹H NMR(CDCl₃+4滴CD₃OD)δ8.41(dd，1H)，8.00(dd，1H)，7.74(st，1H)，7.49(d，1H)，7.35(dd，1H)，7.27(t，1H)，7.13(d，1H)ppm

制备例6：制备2-氯-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式合成标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-苯氧基苯胺代替3-氯苯胺。总收率：91.2％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.52(dd，1H)，8.22(dd，1H)，8.17(s，1H)，7.62(d，2H)，7.46-7.32(m，3H)，7.15-7.0(m，5H)ppm

制备例7：制备N-(1-乙酰基-3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-氯烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1-乙酰基-6-氨基-3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚代替3-氯苯胺。总收率：80.4％¹H NMR(CDCl₃)δ 9.01(s，1H)，8.42(d，1H)，8.07(d，1H)，8.05(s，1H)，7.93(d，1H)，7.33(dd，1H)，7.14(d，1H)，3.75(s，2H)，2.07(s，3H)，1.37(s，6H)ppm

制备例8：制备2，6-二氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺

步骤1.制备2,6-二氯烟酰氯

以与在制备例5的步骤1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2,6-二氯烟酸代替2-氯烟酸。

步骤2.制备2,6-二氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在步骤1中获得的2,6-二氯烟酰氯代替2-氯烟酰氯。总收率：75.3％¹H NMR(CDCl₃+2滴DMSO-d₆)δ 9.82(s，1H)，7.89(d，1H)，7.77(st，1H)，7.52(dt，1H)，7.34(d，1H)，7.23(t，1H)，7.08(dq，1H)ppm

制备例9：制备2，6-二氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺

步骤1.制备2，6-二氯-5-氟烟酰氯

以与在制备例5的步骤1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2,6-二氯-5-氟烟酸代替2-氯烟酸。

步骤2.制备2,6-二氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在步骤1中获得的2,6-二氯-5-氟烟酰氯代替2-氯烟酰氯。总收率：78.4％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.35(s，1H)，8.08(d，1H)，7.76(s，1H)，7.48-7.19(m，3H)ppm

制备例10：制备2-[(2-氯吡啶-3-羰基)-氨基]-4，7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的制备例4中获得的2-氨基-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替3-氯苯胺。总收率：56.7％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.58(d，1H)，8.23(d，1H)，7.44(m，1H)，4.57(s，2H)，3.92(s，3H)，3.69(t，2H)，2.92(t，2H)，1.49(s，9H)ppm

制备例11：制备2-[r2，6-二氯吡啶-3-羰基)-氨基]-4，7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2,6-二氯烟酰氯代替2-氯烟酰氯，并且使用相同摩尔量的在制备例4中获得的2-氨基-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替3-氯苯胺。总收率：43.4％¹H NMR(CDCl₃)δ7.65(d，1H)，7.39(m，1H)，3.82(s，2H)，3.78(s，3H)，3.48(t，2H)，2.98(t，2H)，1.60(s，9H)ppm

制备例12：制备N-(1-乙酰基-3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-氯烟酰胺{2-[(2,6-二氯-5-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯}

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例9中获得的2,6-二氯-5-氟烟酰氯代替2-氯烟酰氯，并且使用相同摩尔量的在制备例4中获得的2-氨基-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替3-氯苯胺。收率：49.7％¹HNMR(CDCl₃)δ 8.12(d，1H)，4.56(s，2H)，3.92(s，3H)，3.69(t，2H)，2.92(t，2H)，1.50(s，9H)ppm

制备例13：制备N-(2-乙基己基)-2-氯烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-乙基己胺代替3-氯苯胺。总收率：92.4％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.41(d，1H)，8.04(d，1H)，7.31(m，1H)，6.50(br，1H)，3.41(t，2H)，1.58(m，1H)，1.48-1.28(m，8H)，0.97-0.88(m，6H)ppm

制备例14：制备2,6-二氯-N-(2-乙基己基)-烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的制备例8的2,6-二氯烟酰氯代替2-氯烟酰氯，并且使用相同摩尔量的2-乙基己基胺代替3-氯苯胺。总收率：89.6％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.09(d，1H)，7.37(d，1H)，6.55(br，1H)，3.43(t，2H)，1.59(m，1H)，1.49-1.29(m，8H)，0.97-0.88(m，6H)ppm

制备例15：制备N-(2-乙基己基)-2，6-二氯-5-氟烟酰胺

以与在制备例5的步骤2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的制备例8的2,6-二氯-5-氟烟酰氯代替2-氯烟酰氯，并且使用相同摩尔量的2-乙基己胺代替3-氯苯胺。总收率：90.1％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.0(d，1H)，6.65(br，1H)，3.44(t，2H)，1.58(m，1H)，1.48-1.27(m，8H)，0.97-0.88(m，6H)ppm

制备例16：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟酸

步骤1.制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟腈(nicotinonitrile)

在回流下，在500 ml的邻二甲苯中，将100 g的2-氯烟腈100g、108.82g的无水碳酸钾，和133.83 ml的4-氨基-1-苄基哌啶一起搅拌24小时。将该反应混合物冷却至室温，加入500 ml的乙酸乙酯和1,000 ml的纯水，并用浓HCl调至约2～3的pH。获得由此形成的含水级分，再用300 ml的乙酸乙酯洗涤，并且在冰浴中同时搅拌，用氢氧化钠调至约9～10的pH。在完成氢氧化钠后，将级分再搅拌1小时，过滤，用水洗涤，并且热空气干燥从而得到137.4 g的标题化合物(收率：71.5％)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.26(dd，1H)，7.63(dd，1H)，7.36-7.28(m，5H)，6.59(m，1H)，5.0(d，1H)，4.14-3.97(m，1H)，3.53(s，2H)，2.88(d，2H)，2.22(t，2H)，2.1-1.98(m，2H)，1.68-1.47(m，2H)ppm

步骤2.制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟酸

向100 g的在步骤1中获得的2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟腈在200 ml的异丙醇的溶液中加入63.22 g的氢氧化钾，之后在回流下搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，与800 ml的纯水和500 ml的乙酸乙酯混合，并用浓HCl调至2～3的pH。获得水层，用500 ml的乙酸乙酯洗涤，并且在冰浴中同时搅拌的情况下用氢氧化钠调节pH为6～8。在额外1小时的搅拌期间形成沉淀物，并用纯水洗涤。用300 ml的纯水将沉淀物调成浆料，搅拌30 min，并过滤。用150 ml的丙酮再将滤液调成浆料，搅拌30 min，并过滤。将该滤液用少量的丙酮洗涤并且热空气干燥从而得到93.7 g的标题化合物(收率：88.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.89(d，1H)，8.29(d，1H)，8.10(d，1H)，7.57-7.42(m，5H)，4.35(s，2H)，4.30(m，1H)，3.47(d，2H)，2.73(t，2H)，2.39(d，2H)，2.01-1.80(m，2H)ppm

制备例17：制备4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶

参考：J.Med.Chem.50(2007)3561

步骤1.制备1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯

将0.5 g的4-哌啶基氨基甲酸叔丁酯，0.21 ml的2-溴乙醇和2.76 g的K₂CO₃在10 ml的乙腈中的溶液在回流下搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温，过滤以除去固体，并浓缩。浓缩物通过硅胶柱色谱法纯化(流动相：20(v／v)％EA，在己烷中)从而得到0.58 g的标题化合物(收率：94％)。¹HNMR(CDCl₃)δ 4.76(d，1H)，3.65(t，2H)，3.48(m，1H)，2.92(m，2H)，2.59(t，2H)，2.26(m，2H)，1.94(m，2H)，1.52(m，2H)，1.44(s，9H)ppm

步骤2：制备4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶

向0.58 g的在步骤1中获得的1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯在10 ml的乙醇中的溶液中加入1 ml的浓HCl，之后在回流下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩以除去溶剂。向残余物中加入10 ml的蒸馏水，用饱和碳酸氢钠水溶液中和，并用10 ml的二氯甲烷萃取两次。在用干燥剂干燥后，在减压下浓缩该级分从而得到0.33 g的标题化合物(收率：95％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 3.68(s，2H)，3.60(t，2H)，2.86(d，2H)，2.69(m，1H)，2.53(t，2H)，2.11(t，2H)，1.82(d，2H)，1.42(t，2H)ppm

制备例18：制备3-氨基-1-苄基哌啶

参考：J.Med.Chem.23(1980)848

步骤1.制备3-(N-乙酰氨基)-1-苄基哌啶

将2 g的3-(N-乙酰氨基)哌啶和1.3 g的碳酸氢钠在7 ml的DMF(二甲基甲酰胺)中的溶液在冰浴中搅拌30 min。向反应混合物中逐滴加入1.7ml的苄基氯达15 min，并在室温搅拌15小时。通过在减压下浓缩除去溶剂，之后添加纯水。过滤以获得由此形成的固体并且使用二***重结晶从而得到2.13 g的标题化合物(收率：87.5％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.31(m，5H)，4.15-4.03(m，1H)，3.49(s，2H)，2.59(d，1H)，2.43(d，2H)，2.19(m，1H)，1.98(s，3H)，1.92(d，2H)，1.74-1.52(m，4H)ppm

步骤2：制备3-氨基-1-苄基哌啶

将2.13 g的3-(N-乙酰胺基)-1-苄基哌啶在10 ml的6 N HCl中的溶液在回流下搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温，并加入6 N氨水直至pH调至9～10。在进行4轮萃取(每轮用15 ml的氯仿)后，萃取物用硫酸钠干燥并在减压下浓缩从而得到1.21 g的标题化合物(收率：96.3％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.31(m，5H)，3.51(s，2H)，2.93-2.61(m，3H)，2.06(t，1H)，1.90-1.52(m，4H)，1.20-1.02(m，1H)ppm

制备例19：制备4-(1-溴乙基)-6-氯-5-氟嘧啶

参考：Org.Process Res.Dev.5(2001)28

将5 g的6-氯-4-乙基-5-氟嘧啶，6.65 g的NBS，和0.51 g的AIBN在50 ml的二氯甲烷中的溶液在回流下搅拌12小时。将反应冷却至室温并加入30 ml的纯水。获得有机层，并用30 ml的二氯甲烷萃取含水级分。合并由此获得的有机层并用30 ml的10％焦亚硫酸钠洗涤，然后用纯水洗涤。在用干燥剂脱水后，将获得的产物在减压下浓缩从而得到6.95 g的标题化合物(收率：95.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.80(s，1H)，5.35(q，1H)，2.08(d，3H)ppm

制备例20：制备6-氨基-3-甲基-2-甲基硫烷基-3H-喹唑啉-4-酮

参考：Bioorg.Med.Chem.14(2006)8608

步骤1.制备3-甲基-6-硝基-2-硫代(thioxo)-2,3-二氢-1H-喹唑啉-4-酮

将3.48 g的5-硝基邻氨基苯甲酸，1.68 g的异硫氰酸甲酯，和3.72 ml的三乙胺在70 ml的乙醇中的溶液在回流下搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩以除去溶剂。将残余物在二***中重结晶从而得到3.91 g的标题化合物(收率86.2％)¹H NMR(DMSO-d₆)δ 8.19(d，1H)，8.16(sd，1H)，8.05(dd，1H)，3.67(s，3H)ppm

步骤2.制备2-甲硫基-3-甲基-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮

将3.91 g的在步骤1中获得的3-甲基-6-硝基-2-硫代-2,3-二氢-1H-喹唑啉-4-酮，8.24 ml的碘甲烷，和2.73 g的无水碳酸钾在82 ml的丙酮中的溶液在回流下搅拌8小时。在保持热的同时，将反应混合物过滤以除去沉淀物，并用丙酮洗涤。将滤液在减压下浓缩，并将残余物用20 ml的异丙醇调成浆料并搅拌30 min。将所得的混合物过滤和干燥从而得到2.84 g的标题化合物(收率：68.7％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 8.30(d，1H)，8.26(sd，1H)，8.16(dd，1H)，3.56(s，3H)，2.71(s，3H)ppm

步骤3.制备6-氨基-2-甲硫基-3-甲基-3H-喹唑啉-4-酮

将1.5 g的在步骤2中获得的2-甲硫基-3-甲基-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮，6.73 g的氯化锡(II)二水合物，和0.11 g的硼氢化钠在10 ml的乙醇中的溶液在回流下搅拌3小时。向反应混合物中加入20 ml的纯水，并用2N-氢氧化钠水溶液中和。在通过减压下浓缩除去乙醇后，将残余物用1 5 ml的二***萃取两次。将萃取物用干燥剂干燥并在减压下浓缩从而得到0.55g的标题化合物(收率：41.7％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.02(d，1H)，6.71(s，1H)，6.68(d，1H)，3.57(s，3H)，2.62(s，3H)ppm

实施例

在以下实施例中合成表1的化合物。

实施例1：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]

将在制备例5中制备的2-氯-(N-3-氯苯基)烟酰胺(280mg，1.05mmol，1.05当量)，4-氨基-1-苄基哌啶(1.0 mmol)和无水碳酸钾(1.3 mmol)在邻二甲苯中的溶液在回流下搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，加入乙酸乙酯，并用1N HCl萃取两次。将由此形成的水层用30 ml的乙酸乙酯洗涤，通过加入2 N氢氧化钠将pH调至约9～10，并用20 ml的二氯甲烷萃取两次或三次。将水层用干燥剂干燥，并在减压下浓缩。将通过硅胶色谱法纯化获得的所需级分在减压下浓缩并在真空干燥，从而得到标题化合物。收率：66.5％¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.15～8.30(m，2H)，8.03(d，1H)，7.90(s，1H)，7.66(d，1H)，7.60(d，1H)，7.30～7.60(m，6H)，7.19(d，1H)，6.70(m，1H)，4.10(bs，1H)，3.95(s，1H)，2.85～3.15(m，2H)，2.70～2.85(m，2H)，1.90～2.15(m，2H)，1.60～1.85(m，2H)ppm

实施例2：制备N-(3-氯苯基)-2-(4-苯氧基苯胺基)烟酰胺[104]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-苯氧基苯胺代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：72.3％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 8.37(d，1H)，8.21(d，1H)，7.92(s，1H)，7.60～7.76(m，3H)，7.30～7.43(m，3H)，7.21(d，1H)，7.06(t，1H)，6.90～7.05(m，5H)ppm

实施例3：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[110]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的制备例6的2-氯-(N-4-苯氧基苯基)烟酰胺代替2-氯-(N-3-氯苯基)烟酰胺(收率：69.1％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.23(s，1H)，8.32(s，1H)，8.21(d，1H)，8.09(d，2H)，7.66(d，1H)，7.70(d，2H)，7.20～7.45(m，6H)，6.95～7.18(m，5H)，3.90～4.10(m，1H)，3.47(s，2H)，2.675～2.80(m，2H)，2.05～2.25(m，2H)，1.95～2.05(m，2H)，1.35～1.60(m，2H)ppm

实施例4：制备2-(4-苯氧基苯胺基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[111]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的制备例6的2-氯-(N-4-苯氧基苯基)烟酰胺代替2-氯-(N-3-氯苯基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的4-苯氧基苯胺代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：77.8％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.50(s，1H)，10.33(s，1H)，8.35(d，1H)，8.25(d，1H)，7.69～7.82(m，4H)，7.30～7.46(m，4H)，6.88～7.18(m，1 1H) ppm

实施例5：制备N-(3-氯苯基)-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[201]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：82.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.26(d，1H)，7.80(d，1H)，7.68～7.63(m，2H)，7.35(d，1H)，7.28(t，1H)，7.13(d，1H)，6.56-6.47(m，1H)，4.65-4.46(m，1H)，2.05(d，2H)，1.30(s，6H)，1.14(s，6H)，1.02(t，2H)ppm

实施例6：制备N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[208]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-氨基-1-Boc-哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：42.3％)。¹HNMR(CDCl₃)δ 8.23(d，1H)，8.03(d，1H)，7.75(d，1H)，7.63(s，1H)，7.40(d，1H)，7.27(t，1H)，7.12(d，1H)，4.26-4.10(m，1H)，3.96(d，2H)，2.98(t，2H)，1.98(d，2H)，1.50-1.36(m，11H)ppm

实施例7：制备2-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[210]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的3-氨基-1-氮杂二环[2.2.2]辛烷代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：24.5％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.19(d，1H)，7.95(d，1H)，7.86(d，1H)，7.10-7.03(m，2H)，6.86-6.79(m，1H)，6.58-6.50(m，1H)，4.40(s，1H)，4.03(d，1H)，3.80-3.61(m，2H)，3.33(d，1H)，3.18-2.95(m，2H)，2.47-2.36(m，1H)，1.95-1.69(m，4H)ppm

实施例8：制备N-(3-氯苯基)-2-(1-甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[214]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-氨基-1-甲基哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：87.3％)。¹HNMR(CDCl₃)δ 8.26(d，1H)，8.01(d，1H)，7.75-7.65(m，2H)，7.41-7.12(m，3H)，6.68-6.62(m，1H)，4.16-4.05(m，1H)，3.75-3.4(m，2H)，2.86(d，2H)，2.37(s，3H)，2.15-2.05(m，2H)，1.76-1.60(m，2H)ppm

实施例9：制备N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[218]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：64.6％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.18(d，1H)，7.96(d，1H)，7.74(d，1H)，7.61(s，1H)，7.47(d，1H)，7.22(t，1H)，7.06(d，1H)，6.48-6.41(m，1H)，3.54(t，2H)，3.03(d，2H)，2.74(t，2H)，2.48(t，2H)，2.22(t，1H)，2.05-1.94(m，2H)，1.59-1.35(m，2H)ppm

实施例10：制备N-(3-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基氨基)烟酰胺[2401

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1-氨基-4-甲基哌嗪代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：93.8％)。¹HNMR(CDCl₃)δ 8.47-8.37(m，2H)，7.93(s，1H)，7.51(d，1H)，7.28(t，1H)，7.21-7.08(m，2H)，3.27(t，4H)，2.62(t，4H)，2.37(s，3H)ppm

实施例11：制备N-(3-氯苯基)-2-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基氨基)烟酰胺[241]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1-氨基-4-(2-羟基乙基)哌嗪代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：77.3％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.47-8.37(m，2H)，7.91(s，1H)，7.51(d，1H)，7.28(t，1H)，7.21-7.08(m，2H)，3.66(t，2H)，3.29(t，4H)，2.75(t，2H)，2.65(t，2H)ppm

实施例12.制备N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺

12-A)制备(R)-N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺[270]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的(R)-3-氨基-1-Boc-哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：43.8％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.24(br，2H)，8.08(d，1H)，7.78(d，1H)，7.70(s，1H)，7.39(d，1H)，7.25(t，1H)，7.12(d，1H)，6.57-6.51(m，1H)，4.21-4.06(m，1H)，3.95-3.86(m，1H)，3.62-3.49(m，2H)，3.30-3.18(m，2H)，2.04-1.86(m，1H)，1.68-1.56(m，2H)，1.42(s，9H)ppm

12-B)制备(S)-N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺[276]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的(S)-3-氨基-1-Boc-哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：51.7％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.24(d，1H)，8.08(d，1H)，7.71(d，1H)，7.69(s，1H)，7.16(d，1H)，7.27(t，1H)，7.12(d，1H)，6.59-6.51(m，1H)，4.21-4.06(m，1H)，3.95-3.86(m，1H)，3.62-3.52(m，1H)，3.30-3.18(m，2H)，2.04-1.96(m，1H)，1.98-1.56(m，3H)，1.42(s，9H)ppm

实施例13：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺[301]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例8中获得的2,6-二氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺代替2-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺(收率：48.7％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.21(d，1H)，7.75(s，1H)，7.64(s，1H)，7.60(d，1H)，7.39-7.25(m，6H)，7.14(d，1H)，4.15-3.98(m，1H)，3.53(s，2H)，2.79(d，2H)，2.21(t，2H)，2.06-1.93(m，2H)，1.67-1.48(m，2H)ppm

实施例14：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺[302]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例9中获得的2,6-二氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺代替2-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺(收率：66.6％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.73(s，1H)，7.88(d，1H)，7.76(s，1H)，7.48(d，1H)，7.27(t，1H)，7.12(d，1H)，4.96(d，1H)，4.02(m，1H)，3.56(s，2H)，2.89(d，2H)，2.22(t，2H)，2.09(d，2H)，1.59(m，2H)ppm

实施例15：制备6-氯-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)苄基哌啶-4-基氨基]烟酰胺[311]

以与在实施例13中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。(收率：74.5％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.32(d，1H)，7.78(d，1H)，7.67(s，1H)，7.41(d，1H)，7.27(t，1H)，7.13(d，1H)，6.53(d，1H)，4.17-4.08(m，1H)，3.74(t，2H)，3.12(d，2H)，2.78(t，2H)，2.61(t，2H)，2.12(d，2H)，1.88-1.68(m，2H)ppm

实施例16：制备6-氯-N-(3-氯苯基)-5-氟-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[312]

以与在实施例1中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例9中获得的2,6-二氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺代替2-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶(收率：81.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.73(s，1H)，7.88(d，1H)，7.76(s，1H)，7.48(d，1H)，7.29(t，1H)，7.12(d，1H)，4.98(d，1H)，4.04(m，1H)，3.62(t，2H)，2.92(d，2H)，2.59(t，2H)，2.32(t，2H)，2.12(d，2H)，1.62(m，2H)ppm

实施例17：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)烟酰胺[117]

步骤1.制备N-(1-乙酰基-3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟酰胺

将在制备例7中制备的N-(1-乙酰基-3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-氯烟酰胺(361 mg，1.05 mmol，1.05当量)，4-氨基-1-苄基哌啶(1.0mmol)和无水碳酸钾(1.3 mmol)在邻二甲苯中的溶液在回流下搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，在减压下浓缩，并且在未经进一步纯化下立即用于下一步骤。

步骤2.制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)烟酰胺

将在步骤1中获得的残余物置于10 ml的乙醇中并在浓HCl水溶液(过量)中在回流下搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩以除去溶剂。将残余物溶解在10 ml的蒸馏水中，并通过逐滴加入20(wt／wt)％氢氧化钠水溶液调至pH为9～10。将该混合物用20 ml的氯仿萃取，用硫酸钠干燥以除去水，并在减压下浓缩。通过柱色谱法纯化(流动相：10(v／v)％丙酮，在氯仿中)得到标题化合物。(总收率：46.1％)¹H NMR(CDCl₃)，δ 8.21(d，1H)，7.97(d，1H)，7.64(d，1H)，7.20～7.40(m，4H)，6.99(d，2H)，6.67(d，1H)，6.49(dd，1H)，4.06(bs，1H)，3.52(s，2H)，3.32(s，2H)，2.85(d，2H)，2.25(t，2H)，1.95～2.10(m，2H)，1.48～1.72(m，2H)，1.29(s，6H)ppm

实施例18：制备N-(3，3-二甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基)-2-(4-苯氧基苯胺基)烟酰胺[118]

以与在实施例17的步骤1和2中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-苯氧基苯胺代替4-氨基-1-苄基哌啶(总收率：54.3％)。¹H NMR(CDCl₃)，δ 10.20(s，1H)，8.32(d，1H)，7.78(d，1H)，7.72(s，1H)，7.62(d，3H)，7.31(t，3H)，6.95～7.11(m，5H)，6.68～6.85(m，1H)，3.34(s，2H)，1.32(s，6H)ppm

实施例19：制备N-(3-氯苯基)-2-(4-哌啶基氨基)烟酰胺[224]

将1.0g的在实施例6中获得的N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-4-基氨基)烟酰胺在10 ml的乙醇中的溶液与5 ml的浓HCl水溶液混合并在回流下搅拌8小时。将反应溶液冷却至室温，在减压下浓缩以除去溶剂，并且通过逐滴加入饱和碳酸氢钠水溶液调至pH为9～10。在每轮使用30 ml的乙酸乙酯的三轮萃取后，将萃取物用干燥剂干燥以除去水，并在减压下浓缩并在真空干燥从而得到0.69 g的标题化合物(收率：89.9％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.23(d，1H)，7.99(d，2H)，7.7(d，1H)，7.66(s，1H)，7.36(d，1H)，7.27(t，1H)，7.10(d，1H)，6.53-5.45(m，1H)，4.18-4.05(m，1H)，3.43(t，1H)，3.09(d，2H)，2.74(t，2H)，2.15-2.01(m，2H)，1.57-1.36(m，2H)ppm

实施例20：制备N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺

20-A)制备(R)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[269]

以与在实施例19的步骤中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于0.5 g的在实施例12-A中制备的(R)-N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺作为原料从而得到0.35 g的标题化合物(收率：91.2％)。¹H NMR 8.26(d，1H)，8.08(d，1H)，7.72(d，1H)，7.67(s，1H)，7.37(d，1H)，7.26(t，1H)，7.11(d，1H)，6.57-6.51(m，1H)，4.18-4.08(m，1H)，3.72(br，1H)，3.21(d，1H)，2.97-2.88(m，1H)，2.79-2.60(m，2H)，2.14-1.96(m，2H)，1.82-1.68(m，1H)，1.66-1.48(m，2H)ppm

20-B)制备(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[275]

以与在实施例19的步骤中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于0.5 g的在实施例12-B中制备的(S)-N-(3-氯苯基)-2-(1-叔丁氧基氨基甲酰基哌啶-3-基氨基)烟酰胺作为原料从而得到0.34g的标题化合物(收率：88.6％)。¹H NMR 8.22(d，1H)，8.03(d，1H)，7.71(d，1H)，7.67(s，1H)，7.37(d，1H)，7.26(t，1H)，7.11(d，1H)，6.52-6.46(m，1H)，4.18-4.08(m，1H)，3.17(d，1H)，2.95(m，1H)，2.74-2.53(m，2H)，2.14-1.96(m，2H)，1.82-1.68(m，1H)，1.66-1.48(m，2H)ppm

实施例21：制备N-(3-氯苯基)-2-(1-(2-羟基乙基)-2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[242]

将N-(3-氯苯基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺(330mg，1mmol，1当量)，2-溴乙醇(1.2mmol)，和无水碳酸钾(1.2mmol)在5 ml的乙腈中的溶液在回流下搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。滤液在减压下浓缩。硅胶柱色谱法(流动相：10(v／v)％甲醇，在氯仿中)得到标题化合物。收率：37.1％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.22(d，1H)，7.79(d，1H)，7.69(d，1H)，7.65(s，1H)，7.37(d，1H)，7.27(t，1H)，7.10(d，1H)，6.51-6.45(m，1H)，4.64-4.45(m，1H)，3.88(t，2H)，3.49(t，2H)，2.08-1.96(m，3H)，1.28(s，6H)，1.13(s，6H)，1.0(t，2H)ppm

实施例22：制备2-(1-芳基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[243]

以与在实施例21中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的实施例19的N-(3-氯苯基)-2-(4-哌啶基氨基)烟酰胺代替N-(3-氯苯基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的芳基溴代替2-溴乙醇(收率：36.8％)。¹H NMR(CD₃0D)δ 8.22(d，1H)，8.08(d，1H)，7.86(s，1H)，7.53(d，1H)，7.34(t，1H)，7.15(d，1H)，6.76-6.68(m，1H)，5.79(t，1H)，4.72-4.62(m，2H)，4.33-4.20(m，1H)，4.07(dd，1H)，3.58-3.4(m，3H)，3.19(t，2H)，2.32(d，2H)，1.89-1.68(m，2H)ppm

实施例23.制备N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-N,N-二乙基氨基-乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[244]

以与在实施例22中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-氯乙基-N,N-％乙基胺代替芳基溴(收率：47.5％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.19(d，1H)，8.06(s，1H)，7.93(d，1H)，7.65(d，1H)，7.59(s，1H)，7.33(d，1H)，7.21(s，1H)，7.06(d，1H)，6.48-6.40(m，1H)，4.07-3.93(m，1H)，2.79(d，2H)，2.59-2.40(m，8H)，2.18(t，2H)，1.98(d，2H)，1.62-1.46(m，2H)，0.97(t，6H)ppm

实施例24.制备N-(3-氯苯基)-2-[1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[248]

以与在实施例22中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-氯甲基吡啶代替芳基溴(收率：56.6％)。¹H NMR(CD₃0D)δ 8.49(d，1H)，8.26(d，1H)，8.02(d，1H)，7.89-7.80(m，2H)，7.59-7.52(m，2H)，7.37-7.31(m，2H)，7.14(d，1H)，6.68-6.60(m，1H)，4.09-3.97(m，1H)，3.71(s，2H)，2.88(d，2H)，2.39(t，2H)，2.12-2.01(m，2H)，1.73-1.57(m，2H)ppm

实施例25：制备N-(3-氯苯基)-2-[1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[249]

以与在实施例22中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的3-氯甲基吡啶代替芳基溴(收率：43.8％)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.49(m，1H)，8.26(d，1H)，7.99(d，1H)，7.77-7.65(m，3H)，7.41-7.25(m，3H)，7.17-7.11(m，1H)，6.55-6.49(m，1H)，4.23-4.08(m，1H)，3.10(d，2H)，2.76(d，2H)，2.06(d，2H)，1.68(s，2H)，1.43(q，2H)ppm

实施例26：制备2-{1-[1-(6-氯-5-氟嘧啶-4-基)乙基]哌啶-4-基氨基}-N-(3-氯苯基)烟酰胺[250]

以与在实施例22中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例19中制备的4-(1-溴乙基)-6-氯-5-氟嘧啶代替芳基溴(收率：44.9％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.22(d，1H)，8.18(s，1H)，8.06(d，1H)，7.72(d，1H)，7.61(s，1H)，7.33(d，1H)，7.22(t，1H)，7.08(d，1H)，6.55-6.47(m，1H)，5.34(q，1H)，4.43-4.23(m，3H)，3.28(t，2H)，2.13(d，2H)，1.98(d，3H)，1.67-1.46(m，2H)ppm

实施例27：制备N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺

27-A)制备(R)-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺[268]

以与在实施例21中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的实施例20-A的(R)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺代替N-(3-氯苯基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺(收率：64.7％)。¹HNMR(CDCl₃)δ 8.48(br，1H)，8.40(s，1H)，8.17(d，1H)，7.76(d，1H)，7.59(s，1H)，7.42(d，1H)，7.19(t，1H)，7.03(d，1H)，6.48-6.40(m，1H)，4.35-4.23(m，1H)，3.61(t，2H)，3.13(br，2H)，2.69(d，1H)，2.60-2.36(m，4H)，1.85-1.58(m，3H)ppm

27-B)制备(S)-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺[274]

以与在实施例21中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的实施例20-B的(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺代替N-(3-氯苯基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺(收率：60.8％)。¹HNMR(CDCl₃)δ 8.50(br，1H)，8.22(d，1H)，7.97(s，1H)，7.73(d，1H)，7.61(s，1H)，7.45(d，1H)，7.25(t，1H)，7.09(d，1H)，6.53-6.47(m，1H)，4.33(br，1H)，3.61(t，2H)，2.76-2.45(m，6H)，1.85-1.58(m，4H)ppm

实施例28：制备2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺

28-A)制备(R)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[267]

以与在实施例21中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的实施例20-A的(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺代替N-(3-氯苯基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的苄基氯代替2-溴乙醇(收率：64.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.33(d，1H)，8.24(d，1H)，7.83(s，1H)，7.74(s，1H)，7.68(d，1H)，7.47-7.13(m，7H)，6.53-6.46(m，1H)，4.39-4.27(m，1H)，2.69(d，1H)，2.53-2.34(m，3H)，1.85-1.58(m，6H)ppm

28-B)制备(S)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[273]

以与在实施例21中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的实施例20-B的(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺代替N-(3-氯苯基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的苄基氯代替2-溴乙醇(收率：68.2％)。

¹H NMR(CDCl₃)δ 8.33(d，1H)，8.22(d，1H)，7.86(s，1H)，7.82(s，1H)，7.71(d，1H)，7.45-7.12(m，7H)，6.53-6.46(m，1H)，4.32(br，1H)，2.68(d，1H)，2.53-2.34(m，3H)，1.97(s，2H)，1.81-1.55(m，4H)ppm

实施例29：制备2-(4-(3-(3-氯苯基氨基甲酰基)吡啶-2-基氨基)哌啶-1-基)丙二酸[246]

步骤1.制备2-(4-(3-(3-氯苯基氨基甲酰基)吡啶-2-基氨基)哌啶-1-基)丙二酸二乙酯

将0.25 g的在实施例1 9中获得的N-(3-氯苯基)-2-(4-哌啶基氨基)烟酰胺，0.2 ml的2-溴丙二酸二乙酯和0.16 g的无水碳酸钾在5 ml的乙腈中的溶液在回流下搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，与10 ml的乙酸乙酯混合，并用1N HCl水溶液萃取三次。将由此获得的水层再次用15 ml的乙酸乙酯洗涤，用饱和碳酸氢钠水溶液调至pH为约9，并且在未经进一步纯化下用于下一步骤。

步骤2.制备2-(4-(3-(3-氯苯基氨基甲酰基)吡啶-2-基氨基)哌啶-1-基)丙二酸

向在步骤1中获得的混合物加入0.16 g的氢氧化钠，并在50℃加热3小时同时搅拌。将反应混合物冷却至室温，并用10 ml的乙酸乙酯萃取三次。在利用饱和盐水的两轮萃取后，使用干燥剂除去水。将所得的溶液在减压下浓缩并通过硅胶色谱法纯化(流动相：30(v／v)％己烷，在EA中)从而得到0.05 g的标题化合物(总收率：15％)。¹H NMR(CDCl₃+4滴CD₃OD)δ 8.12(d，1H)7.80(d，1H)，7.63(s，1H)，7.4(d，1H)，7.22(t，1H)，7.05(d，1H)，6.53-6.47(m，1H)，4.12-3.98(m，1H)，3.10-3.0(m，2H)，2.71(t，2H)，2.03(d，2H)，1.99(s，1H)，1.49-1.3(m，2H)ppm

实施例30：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氧基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[289]

将1-苄基-4-羟基哌啶(209mg，1.1mmol，1.1当量)和95w％氢氧化钠(1.2mmol)在5 ml的二甲基甲酰胺中的溶液在室温搅拌30 min，与2-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺(1.0mmol)混合，并在回流下搅拌20小时。将反应混合物冷却至室温，并加入20 ml的纯水以终止反应。在每轮使用20 ml的乙酸乙酯的两轮萃取后，用干燥剂除去水并将所得的产物在减压下浓缩。然后，对通过浓缩获得的残余物进行硅胶柱色谱法(流动相：30(v／v)％己烷，在EA中)从而获得所需级分。将所需级分在减压下干燥从而得到0.25g的标题化合物(收率：33.7％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.60(d，1H)，8.29(d，1H)，7.88(s，1H)，7.48(d，1H)，7.36-7.27(m，6H)，7.17-7.05(m，2H)，5.51-5.38(m，1H)，3.59(s，2H)，2.89-2.80(m，2H)，2.42(t，2H)，2.29-2.23(m，2H)，2.06-1.87(m，2H)ppm

实施例31：制备2-(1-苄基哌啶-4-基硫烷基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[290]

以与在实施例30中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1-苄基-4-巯基哌啶代替1-苄基-4-羟基哌啶同时甲醇钠充当碱。收率：42.8％，¹H NMR(CDCl₃)δ 8.52-8.46(m，2H)，7.88(d，1H)，7.46(d，1H)，7.32-7.25(m，6H)，7.18，7.02(m，2H)，4.08-3.96(m，1H)，2.52(s，2H)，2.88-2.82(m，2H)，2.25(t，2H)，2.16-1.97(m，2H)，1.88-1.68(m，2H)

实施例32.制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-[4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基]烟酰胺[404]

步骤1：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟酰氯

将在制备例16中制备的2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)烟酸(311 mg，1.0mmol，1.0当量)和亚硫酰二氯(1.5mmol)在5 ml的二氯甲烷中的溶液在回流下搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温并在未经进一步纯化下立即用于下一步骤。

步骤2：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-[4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基]烟酰胺

将在步骤1中获得的溶液在冰浴中冷却至4～5℃，之后逐滴加入三乙胺(0.42ml，3.0mmol)达5 min。向该反应溶液中加入4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(1.2mmol)，并在室温搅拌30 min然后在回流下再搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用饱和盐水洗涤。在用干燥剂除去水后，将所得的溶液在减压下浓缩。为了获得所需级分，对残余物进行二氧化硅柱色谱法(流动相：30(v／v)％己烷，在EA中)从而得到标题化合物(总收率：53.0％)¹H NMR(CDCl₃)δ 8.20(d，1H)，8.12(d，1H)，7.54(d，1H)，7.36-7.24(m，7H)，7.01(t，2H)，6.46-6.38(m，1H)，4.08-3.98(m，1H)，3.87(d，1H)，3.73-3.61(m，4H)，3.53(s，2H)，3.45(s，2H)，3.32-3.19(m，2H)，2.85-2.61(m，4H)，2.32-2.14(m，3H)，2.08-1.88(m，3H)ppm

实施例33：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(1，3，4-***-2-基)烟酰胺[406]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-氨基-1，3，4-***代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：20.8％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.57(m，1H)，8.23(m，1H)，7.97(m，2H)，7.32(m，5H)，6.47(m，1H)，6.14(br，1H)，3.92(m，1H)，3.52(s，2H)，2.86(m，2H)，2.25(m，2H)，1.97(m，2H)，1.56(m，2H)ppm

实施例34：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)烟酰胺[407]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-氨基-4,6-二甲基嘧啶代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：19.3％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.26(d，1H)，8.10(m，1H)，8.05(m，1H)，7.36(m，6H)，6.50(m，1H)，4.12(m，1H)，3.57(s，2H)，2.83(m，2H)，2.29(m，2H)，2.05(m，2H)，1.64(m，2H)，1.28(s，6H)ppm

实施例35：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(S)-吡咯烷-3-基烟酰胺[408]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的(S)-3-氨基-吡咯烷代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：13.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.19(d，1H)，8.05(d，1H)，7.44(d，1H)，7.11(m，5H)，6.50(m，1H)，4.12(m，1H)，3.53(s，2H)，2.82(m，4H)，2.32-1.93(m，9H)，1.61(m，4H)ppm

实施例36：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-2-(吗啉-1-基)乙基烟酰胺[409]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1-(2-氨基乙基)吗啉代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：74.8％)。¹H NMR(CD₃OD)δ 8.12(d，1H)，7.97(d，1H)，7.86(d，1H)，7.35(m，5H)，6.54(m，1H)，4.95(m，1H)，3.71(t，2H)，3.56(s，2H)，3.38(d，2H)，2.83(d，2H)，2.53(m，4H)，2.31(m，2H)，2.02(d，2H)，1.61(m，2H)ppm

实施例37：制备N′-[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]肼甲酸叔丁酯[410]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的Boc-肼代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：19.3％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.13(m，1H)，7.92(m，1H)，7.36(m，5H)，6.52(m，1H)，3.98(m，1H)，3.56(s，2H)，2.86(d，2H)，2.31(m，2H)，2.02(m，2H)，1.51(m，11H)ppm

实施例38：制备6-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基1氨基}烟酸甲酯[412]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的6-氨基烟酸甲酯代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：28.6％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.92(s，1H)，8.63(s，1H)，8.35(s，1H)，8.29(d，1H)，8.18(d，1H)，7.78(d，1H)，7.35(m，5H)，6.53(m，1H)，4.13(m，1H)，3.97(s，3H)，3.56(s，2H)，2.86(d，2H)，2.28(t，2H)，2.09(d，2H)，1.65(m，2H)ppm

实施例39：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(对甲苯磺酰氨基)烟酰胺[424]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的对甲苯磺酰肼代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：37.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.15(d，1H)，7.82(d，2H)，7.41-7.12(m，7H)，6.35-6.27(m，1H)，3.91-3.78(m，1H)，3.51(s，2H)，2.28(d，2H)，2.41(s，3H)，2.13(t，2H)，1.89(d，2H)，1.37-1.18(m，2H)ppm

实施例40：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(吡啶-4-基甲基、烟酰胺[425]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-氨基甲基吡啶代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：67.8％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.46(m，3H)，8.16(m，2H)，7.72(m，2H)，7.32-7.17(m，5H)，6.39(m，1H)，4.51(d，2H)，4.01(m，1H)，3.48(s，2H)，2.78(d，2H)，2.21(t，2H)，1.98(d，2H)，1.59(m，2H)ppm

实施例41：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(1，2-二苯基乙基)烟酰胺[426]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的1，2-二苯基乙基胺代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：84.3％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.19(d，1H)，7.98(d，1H)，7.46-7.22(m，15H)，7.11(d，1H)，6.44(m，1H)，6.25(d，1H)，5.43(q，1H)，4.01(m，1H)，3.52(s，2H)，3.20(dd，2H)，2.81(d，2H)，2.23(t，2H)，2.02(d，2H)，1.59(m，2H)ppm

实施例42：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(2-甲氧基乙基)烟酰胺[427]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-甲氧基乙基胺代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：77.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.17(s，1H)，8.16(s，1H)，7.55(d，1H)，7.31(m，5H)，6.60(br，1H)，6.42(m，1H)，4.02(m，1H)，3.58-3.50(m，6H)，3.35(s，3H)，2.79(d，2H)，2.22(t，2H)，2.01(d，2H)，1.61(m，2H)ppm

实施例43：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)烟酰胺[428]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-氨基-5-甲基噻唑代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：12.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.73(d，1H)，8.19(d，1H)，7.59(s，1H)，7.32(m，5H)，6.53(d，1H)，4.19(m，1H)，3.47(s，2H)，2.82(d，2H)，2.42(s，3H)，2.24(t，2H)，2.10(d，2H)，1.70(m，2H)ppm

实施例44：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-甲基吡啶-2-基)烟酰胺[429]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-氨基-3-甲基吡啶代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：9.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.28(d，1H)，8.27(s，1H)，8.11(m，1H)，7.89(m，1H)，7.64(d，1H)，7.32(m，5H)，7.11(m，1H)，6.52(m，1H)，4.08(m，1H)，3.54(s，2H)，2.83(d，2H)，2.34(s，3H)，2.26(t，2H)，2.06(d，2H)，1.58(m，2H)ppm

实施例45：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(氮杂环庚烷-2-酮-3-基)烟酰胺[430]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的3-氨基-氮杂环庚烷-2-酮代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：50.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.20(m，2H)，7.69(d，1H)，7.55(d，1H)，7.33(m，5H)，6.48(m，1H)，6.14(m，1H)，4.64(m，1H)，4.06(m，1H)，3.54(s，2H)，3.32(m，2H)，2.85(d，2H)，2.32-1.43(m，12H)ppm

实施例46：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-氟苄基)烟酰胺[431]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-氟苄基胺代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：81.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.19(m，2H)，7.54(d，1H)，7.30(m，6H)，7.03(t，2H)，6.50(br，1H)，6.42(m，1H)，4.05(m，1H)，3.55(s，2H)，2.83(d，2H)，2.25(t，2H)，2.05(d，2H)，1.63(m，2H)ppm

实施例47：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(2-乙基己基)烟酰胺[436]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的2-乙基己胺代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：89.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.27(d，1H)，8.08(d，1H)，7.51(d，1H)，7.30(m，5H)，6.44(m，1H)，6.05(m，1H)，4.02(m，1H)，3.52(s，2H)，3.34(t，2H)，2.27(t，2H)，2.06(d，2H)，1.62(m，2H)，1.45-1.36(m，8H)，0.93(m，6H)ppm

实施例48：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-甲基-2-甲基硫烷基-3，4-二氢喹唑啉-4-酮-6-基)烟酰胺[439]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例20中获得的6-氨基-3-甲基-2-甲基硫烷基-3H-喹唑啉-4-酮代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：77.0％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 8.28-7.95(m，5H)，7.73-7.46(m，6H)，6.72(m，1H)，4.31(m，1H)，3.53(s，3H)，3.47(s，2H)，3.24-3.11(m，2H)，2.66(s，3H)，2.58(m，2H)，2.20(m，2H)，1.78(m，2H)ppm

实施例49：制备6-苄基-2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[440]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例2中获得的2-氨基-6-苄基-4,5,6,7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：84.4％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.42(d，1H)，8.28(d，1H)，7.88(d，1H)，7.35(m，10H)，6.57(m，1H)，4.12(m，1H)，3.91(s，3H)，3.72(s，2H)，3.61(s，2H)，3.55(s，2H)，2.93-2.82(m，6H)，2.27(t，2H)，2.07(d，2H)，1.67(m，2H)ppm

实施例50.制备6-乙氧基氨基甲酸酯-2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[441]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例3中获得的2-氨基-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-乙酯3-甲酯代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：

81.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.43(d，1H)，8.26(d，2H)，7.88(d，1H)，7.41(m，5H)，6.61(m，1H)，4.58(s，2H)，4.23-4.15(m，3H)，3.91(s，3H)，3.82(s，2H)，3.73(st，2H)，3.09(d，2H)，2.90(t，2H)，2.57(t，2H)，2.20(d，2H)，1.91(m，2H)ppm

实施例51：制备2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢-噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[442]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例1中获得的2-氨基-4,5,6,7-四氢-噻吩[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯盐酸盐代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺，同时三乙胺的量增加至4.0当量(总收率：83.1％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.40(d，1H)，8.20(d，1H)，7.75(d，1H)，7.25-7.18(m，5H)，6.49(m，1H)，4.07(m，1H)，3.82(m，5H)，3.09-2.72(m，6H)，2.22(t，2H)，2.07(d，2H)，1.64(m，2H)ppm

实施例52：制备2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3，4-二甲氧基苯基)烟酰胺[443]

以与在实施例32中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的3，4-二甲氧基苯胺代替4-(4-氟苄基)吗啉-2-基甲基胺(总收率：89.9％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.23(d，1H)，8.01(d，1H)，7.68(d，1H)，7.59(s，1H)，7.34-7.25(m，5H)，6.90(m，2H)，6.51(m，1H)，4.06(m，1H)，3.91(s，3H)，3.89(s，3H)，3.52(s，2H)，2.82(d，2H)，2.24(t，2H)，2.03(t，2H)，1.61(m，2H)ppm

实施例53：制备2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[501]

将在制备例11中获得的2-[(2,6-二氯吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯(510 mg，1.05 mmol，1.05当量)，4-氨基-1-苄基哌啶(1.0 mmo1)和无水碳酸钾(1.2 mmo1)在邻二甲苯中的溶液在回流下搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，并进一步在浓HCl水溶液(过量)中在回流下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，加入10ml的乙酸乙酯，并用20 ml的蒸馏水／轮萃取两次。之后，将水层再次用20 ml的乙酸乙酯洗涤，并用2 N氢氧化钠水溶液调至pH为约9～10。将所得的混合物用20 ml的二氯甲烷／轮萃取两次，用30 ml的饱和盐水洗涤，并用干燥剂干燥以除去水。然后通过在减压下浓缩除去溶剂。为了获得所需级分，进行通过硅胶柱色谱法的纯化(流动相=10(v／v)％甲醇，在氯仿中)从而得到标题化合物。收率：72.3％¹H NMR(DMSO-d₆)δ 7.46(d，1H)，7.39(d，1H)，7.32(m，5H)，6.62(d，1H)，6.41(d，1H)，4.43(s，2H)，3.83(m，1H)，3.69(s，2H)，3.59(m，2H)，2.73(m，4H)，2.08(t，2H)，1.82(d，2H)，1.51(m，2H)ppm

实施例54：制备2-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[502]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例12中获得的2-[(2,6-二氯-5-氟-吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替2-[(2,6-二氯吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯。收率：51.4％，¹H NMR(CDCl₃)δ 7.83(d，1H)，7.34(m，5H)，5.04(m，1H)，4.06(m，1H)，3.92(m，5H)，3.54(s，3H)，3.12(t，2H)，2.88(m，4H)，2.21(m，2H)，2.07(m，2H)，1.59(m，2H)ppm

实施例55：制备2-{[2-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[503]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例10中获得的2-[(2-氯吡啶-3-羰基)-氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替2-[(2,6-二氯吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯，并使用相同摩尔量的在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。收率：67.7％，¹H NMR(CDCl₃)δ 8.52(m，1H)，8.26(d，1H)，7.88(d，1H)，6.61(m，1H)，4.26(m，1H)，3.99-3.87(m，5H)，3.73(t，2H)，3.12(m，2H)，2.98-2.80(m，4H)，2.59-2.12(m，6H)，1.68(m，2H)ppm

实施例56：制备2-{[6-氯-2-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[504]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。收率：74.4％，¹H NMR(CDCl₃)δ 7.31(d，1H)，6.55(d，1H)，6.23(m，1H)，6.09(br，1H)，4.02(m，1H)，4.82(s，3H)，3.77(t，2H)，3.64(t，2H)，2.93-2.82(m，4H)，2.58(d，2H)，2.33(t，2H)，2.11-1.75(m，4H)，1.54(m，2H)ppm

实施例57：制备2-{[6-氯-5-氟-2-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[505]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例12中获得的2-[(2,6-二氯-5-氟-吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替2-[(2,6-二氯吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯，并使用相同摩尔量的在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。收率：50.3％，¹H NMR(CDCl₃)δ7.83(d，1H)，5.02(m，1H)，4.06(m，1H)，3.92(m，5H)，3.62(t，2H)，3.13(t，2H)，2.96-2.81(m，4H)，2.58(t，2H)，2.34(t，2H)，2.11(d，2H)，1.58(m，2H)ppm

实施例58：制备2-{[2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[506]

以与在实施例55中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶代替4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶。收率：86.0％，¹H NMR(CDCl₃)δ 8.33-8.24(m，2H)，7.88(d，1H)，6.58(m，1H)，4.59(m，1H)，3.92(m，5H)，3.11(t，2H)，2.78(st，2H)，2.08(d，2H)，1.33(s，6H)，1.26-1.1(m，8H)ppm

实施例59：制备2-{[2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[507]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。收率：77.9％，¹H NMR(CDCl₃)δ 8.28(d，1H)，7.42(d，1H)6.39(m，1H)，6.15(m，1H)，5.99(br，1H)，4.39(m，1H)，3.97-3.75(m，5H)，3.52(m，2H)，2.03(m，2H)，1.68(m，2H)，1.42(s，6H)，1.18(s，6H)ppm

实施例60：制备2-{[6-氯-5-氟-2-(2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[508]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例12中获得的2-[(2,6-二氯-5-氟-吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯代替2-[(2,6-二氯吡啶-3-羰基)氨基]-4,7-二氢-5H-噻吩并[2，3-c]吡啶-3，6-二甲酸6-叔丁酯3-甲酯，并且使用相同摩尔量的4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。收率：49.2％，¹H NMR(CDCl₃)δ 7.83(d，1H)，4.91(m，1H)，4.48(m，1H)，3.92(m，5H)，3.12(d，2H)，2.80(m，2H)，2.06(d，2H)，1.33(s，6H)，1.25(m，2H)，1.17(s，6H)ppm

实施例61：制备2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[509]

以与在实施例55中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例18中获得的3-氨基-1-苄基哌啶代替4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶。收率：80.1％，¹H NMR(CDCl₃)δ 8.52(m，1H)8.26(d，1H)，7.83(d，1H)，7.51-7.11(m，5H)，6.54(m，1H)，4.38(m，1H)，4.18(s，2H)，3.89(s，3H)，3.59(m，2H)，3.33(d，2H)，3.04(m，2H)，2.74-2.43(m，4H)，1.89-1.64(m，4H)ppm

实施例62：制备2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[510]

以与在实施例53中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例18中获得的3-氨基-1-苄基哌啶代替4-氨基-1-苄基哌啶。收率：73.5％，¹H NMR(CDCl₃)δ 7.30(m，6H)，6.55(m，1H)，6.51(d，1H)，6.09(br，1H)，4.54(s，2H)，4.23(m，1H)，3.86-3.72(m，5H)，3.49(m，2H)，2.92(t，2H)，2.63-2.28(m，4H)，1.80-1.59(m，6H)ppm

实施例63.制备2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯-5-氟吡啶-3-羰基1氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[511]

以与在实施例57中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例18中获得的3-氨基-1-苄基哌啶代替4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶。收率：53.7％，¹H NMR(CDCl₃)δ 7.83(d，1H)，7.34(m，5H)，5.89(m，1H)，4.33(m，1H)，3.92(m，5H)，3.51(m，2H)，3.12(t，2H)，2.81(t，2H)，2.74-2.48(m，2H)，2.34-2.15(m，2H)，1.80-1.62(m，4H)ppm

实施例64：制备6-氯-N-(2-乙基己基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[515]

将在制备例14中制备的2,6-二氯-N-(2-乙基己基)-烟酰胺(318mg，1.05mmol，1.05当量)，在制备例17中获得的4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶(1.0mmol)和无水碳酸钾(1.2mmol)在5 ml的邻二甲苯中的溶液在回流下搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，加入15 ml的乙酸乙酯，并萃取两次，每轮使用30 ml的1 N HCl水溶液。将由此获得的水层再次用乙酸乙酯洗涤，并用2 N氢氧化钠水溶液调至pH为约9～10。之后，将反应混合物用20 ml的二氯甲烷萃取两次，用饱和盐水洗涤，并且通过干燥剂除去水。为了获得所需级分，通过在减压下浓缩除去溶剂。进行通过硅胶柱色谱法的纯化(流动相：20(v／v)％EA，在己烷中)从而得到标题化合物。收率：77.9％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.35(d，1H)，7.45(d，1H)，6.44(d，1H)，6.01(br，1H)，4.03(m，1H)，3.62(t，2H)，3.32(t，2H)，2.87(d，2H)，2.56(t，2H)，2.33(t，2H)，2.07(d，2H)，1.59(m，2H)，1.42-1.16(m，8H)，0.98-0.91(m，6H)ppm

实施例65：制备N-(2-乙基己基)-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[517]

以与在实施例64中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例13中获得的2-氯-N-(2-乙基己基)烟酰胺代替2，6-二氯-N-(2-乙基己基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶代替4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶。收率：84.4％¹H NMR(CDCl₃)δ8.13(d，1H)，7.82(d，1H)，7.49(d，1H)，6.40(m，1H)，6.21(br，1H)，4.44(m，1H)，3.26(t，2H)，1.98(dd，2H)，1.49(m，1H)，1.22(m，14H)，1.07(m，8H)，0.89-0.81(m，6H)ppm

实施例66：制备6-氯-N-(2-乙基己基)-5-氟-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[519]

以与在实施例64中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例15中获得的2,6-二氯-N-(2-乙基己基)-5-氟烟酰胺代替2,6-二氯-N-(2-乙基己基)烟酰胺，并且使用相同摩尔量的4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶代替4-氨基-1-(2-羟基乙基)哌啶。收率：61.7％¹H NMR(CDCl₃)δ 7.85(d，1H)，7.34(d，1H)，4.37(m，1H)，3.42-3.28(m，2H)，2.02(dd，2H)，1.53(m，1H)，1.30(m，14H)，1.13(m，8H)，1.01-0.87(m，6H)ppm

实施例67：制备2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(2-乙基己基)烟酰胺[5201

以与在实施例65中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例18中获得的3-氨基-1-苄基哌啶代替4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶。收率：87.3％¹H NMR(CDCl₃)δ 8.29(d，1H)，8.15(d，1H)，7.53(d，1H)，7.41-7.21(m，5H)，6.40(m，1H)，6.31(br，1H)，4.28(m，1H)，3.48(s，2H)，3.34(m，2H)，2.90-2.27(m，5H)，1.86-1.54(m，4H)，1.41-1.22(m，8H)，0.95-0.90(m，6H)ppm

实施例68：制备2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯-N-(2-乙基己基)-5-氟烟酰胺[522]

以与在实施例66中的相同方式制备标题化合物，不同之处在于使用相同摩尔量的在制备例18中获得的3-氨基-1-苄基哌啶代替4-氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶。收率：70.2％¹H NMR(CDCl₃)δ 7.83(d，1H)，7.31(m，5H)，6.94(m，1H)，5.70(br，1H)，4.29(m，1H)，3.52(d，2H)，3.41(t，2H)，2.68-2.52(m，3H)，1.73-1.56(m，4H)，1.33-1.21(m，8H)，0.93-0.87(m，6H)ppm

<实验例>

对于以下实验例的测试结果，提供记号“#”以指示相对于未处理对照的p<0.05的显著性，记号“*”指示相对于VEGF刺激HUVEC组的p<0.05的显著性，记号“**”指示相对于VEGF刺激HUVEC组的p<0.01的显著性，记号“***”指示相对于VEGF刺激HUVEC组的p<0.001的显著性。这些统计学显著性水平使用ANOVA和Dunnett事后检验(post-hoc test)确定。

实验例1：细胞生存力-MTS测定

1)方法

将生长在DMEM(Dulbeco改良的Eagle培养基，Gibco#11885)中的A-431(黑色素瘤，人，ATCC CRL-1555^TM)细胞以1x10⁴个细胞／孔的密度接种到96孔板中并在5％C0₂的供应下在37℃温育18小时直至细胞稳定地粘附至底部。将测试物质舒尼替尼(sunitinib)(由Boryung PharmaceuticalSynthesis Institute合成)(100，50，25，12.5，6.25，3.125，1.56，0.78 μM)、化学式I的化合物(100，50，25，12.5，6.25，3.125，1.56，0.78 μM)和对照(培养基)系列地稀释并施加至96孔板。在所述测试化合物存在下温育48小时后，测定细胞的生存力。

向每孔中的细胞中加入21 μl的MTS溶液[(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑

Promega，Cat#G5421；2mg／ml]和PMS溶液[吩嗪甲硫酸盐(Phenazine methosulfate)，Sigma#P9625；1 mg／ml]的20∶1(v／v)混合物，并温育2小时，之后在微板读数器(分子装置(Molecular device)，spectraMax M2)上测量在490 nm的吸光度。相对于对照(培养基)，由甲

(formazan)的测量来确定关于药物浓度的生存力，结果在下表2中给出。

2)结果

测试材料及其浓度：

-阴性对照：培养基

-阳性对照：舒尼替尼，100，50，25，12.5，6.25，3.125，1.56，0.78tM，

-化学式I的化合物：100，50，25，12.5，6.25，3.125，1.56，0.78μM。

表2

化学式I的化合物和舒尼替尼针对人黑色素细胞(A-431)的细胞毒性的

MTS测定

测试化合物	IC_5o(μM)	测试化合物	IC_5o(μM)
				对照	-	267	20.9
舒尼替尼	22	269	88.9
				103	40.6	273	40.9
104	28.6	274	110.9
				110	22.2	275	94.6
11 1	135	290	54.8
				117	91.1	301	67.6
201	54.5	302	38.1
				208	86.1	3 11	62.3
241	164	3 12	20.68
				242	81.9	426	39.7
243	170	428	125
				244	94.6	436	34
246	100.7	443	140
				249	102.5	51 5	23.8
250	26.1	517	50.7

如在表2中可看到的，化学式I的化合物具有的IC_so值类似于或高于舒尼替尼(一种目前用于晚期肾癌的抗癌剂)的IC_so值，表明它们具有更低的毒性和更高的安全性。

实验例2：对HUVEC中VEGF诱导的细胞迁移的抑制作用

2-1.Transwell测定

1)方法

为了考察实施例中获得的化合物对HUVEC(人脐静脉内皮细胞)中的VEGF(血管内皮生长因子)诱导的细胞迁移的抑制作用，transwell测定如下进行。

将由ATCC(美国典型培养物保藏中心)提供的HUVEC在含有10％FBS、青霉素(100单位／ml)和100 μg/ml硫酸链霉素加上多种生长因子的EGM-2(内皮生长培养基-2(Endothelial growth Medium-2)培养基)中在37℃在5％CO₂的气氛中温育。在用不含生长因子的EBM-2(内皮基本培养基-2(Endothelial Basal Medium-2)培养基)进行培养基变换后，对细胞进行transwell测定。与VEGF一起加入在DMSO(二甲亚砜)中的多个浓度的测试化合物(化合物103，110，218，275，276，290，312，428，442和509，以及舒尼替尼)。

将HUVEC以2x10⁵个细胞／孔的浓度接种至24-transwell平板，并用舒尼替尼(1tM)和多个浓度的化学式I的化合物温育1小时，然后用10ng／ml VEGF温育24小时，其作用是诱导细胞生长和增殖。

24小时后，利用乙醇固定细胞达1 min并且用染料染色。通过计数移动通过孔隙的细胞来评估细胞迁移。

此外，用在表3中给出的不同浓度的化合物250号(实施例26)处理细胞，并对细胞迁移进行测定，利用化合物103，110，218，273，275，276，290，312，428，442和509进行同样测定。将结果与在非处理(无处理)或用10 ng／mL VEGF处理后获得的那些结果进行比较。

2)结果

结果表示为移动穿过膜的HUVEC的平均数目(n=3)。化合物103，110，218，273，275，276，290，312，428，442和509的测试结果概述在表3中，化合物250的测试结果概述在表4中。

表3

测试化合物	迁移细胞的数目／视野
		无处理	7
VEGF处理的对照	22^#
		103(0.1 lam)	16***
103(0.5 lam)	12***
		103(1 lam)	8***
110(25 lam)	10***
		21 8(25 lam)	7.5***
273(50 lam)	12***
		275(50 lam)	11***
276(50 lam)	12.5***
		290(50 lam)	14.5***
3 12(50 lam)	14***
		428(25 lam)	14.5***
442(25 lam)	15***
		509(25 lam)	1***
舒尼替尼(1lam)	16.5***

表4

测试化合物	迁移细胞的数目／视野
		无处理	3.8±1.29
VEGF(1 0ng/m1)	42.5±2.69^#
		VEGF+250(25nM)	33±2.54**
VEGF+250(50nM)	20.3±1.08***
		VEGF+250(100nM)	12.5±2.5***
250(100nM)	4.5±1.11

由表3和4的数据明显的是，化学式I的化合物抑制HUVEC的VEGF诱导的迁移。尤其是，与抗癌剂舒尼替尼相比，化合物103对HUVEC的VEGF诱导的迁移抑制性更强。此外，化合物250显示显著的对VEGF诱导的HUVEC迁移的抑制作用，即使是在低浓度下。

2-2.伤口愈合测定

1)方法

使用无菌、一次性细胞刮棒(BD Falcon，Bedford，USA)刮取HUVEC的单层，并将细胞用PBS温和地洗涤。将细胞用舒尼替尼(1 μM)或化合物103(0.1，0.5，1 μM)处理1小时然后用10ng／ml VEGF处理24小时。24小时后，在装配有照相机(Canon Powershot640)的显微镜下监测通过刮取的单层细胞的细胞迁移并拍照。

此外，以与化合物103相同的方式施加表6中所示的多个浓度的化合物250(实施例26)，之后在显微镜下监测细胞的迁移并拍照。为了比较，细胞没有进行处理(对照)或仅用10ng／mL VEGF处理。

2)结果

化合物103的结果显示在表5和图1中，并且化合物250的结果显示在表6和图2中。

表5

测试化合物	伤口闭合(μM)
		对照	110
VEGF(1 0ng/m1)	380^#
		VEGF+103(0.1μM)	200***
VEGF+103(0.5μM)	180***
		VEGF+103(1 μM)	155***
VEGF+舒尼替尼(1μM)	210***

表6

测试化合物	伤口闭合(gM)
		对照	120
VEGF(1 0ng/ml)	290^#
		VEGF+250(25nM)	210^**
VEGF+250(50nM)	165^***
		VEGF+250(100nM)	120^***
250(100nM)	125

如表5中所示，证实了，化合物103对VEGF诱导的HUVEC的迁移具有抑制作用，并且与舒尼替尼相比以更高的效率抑制VEGF诱导的HUVEC的迁移。

而且，如表6中可看到的，化合物250高度抑制VEGF诱导的HUVEC的迁移，即使是在低至nlm水平的浓度下。

实验例3：对HUVEC中的VEGF诱导的细胞增殖的抑制作用(BrdU混合测定)

1)方法

进行BrdU混合测定以考察通过VEGF诱导的DNA合成的HUVEC的增殖是否被BRN-103抑制。将如在实验例2中那样生长的HUVEC以1×10⁴个细胞／孔的浓度接种到96孔板中。将细胞用舒尼替尼(1 μM)或化合物103(0.1，0.5，或1 μM)温育1小时，然后用10 ng/ml VEGF温育24小时。之后，使用BrdU混合测定试剂盒(Roche)荧光地测量细胞中的DNA合成。

同样地，以与化合物103相同的方式，将细胞用表8中给出的多个浓度的化合物250(实施例26)处理，然后用VEGF处理。以与化合物103相同的方式，也对胞内DNA进行定量。为了比较，细胞没有处理(对照)或仅用10 ng／mL VEGF处理。

2)结果

化合物103的结果在表7中给出，并且化合物250的结果在表8中给出。

表7

测试化合物	BrdU混合(OD 450nm)
		对照	0.65
VEGF(10 ng／ml)	1.3^#
		VEGF+103(0.1μM)	1.0***
VEGF+103(0.5μM)	0.8***
		VEGF+103(1 μm)	0.7***
103(1μm)	0.7
		VEGF+舒尼替尼(1 μm)	0.84***

表8

测试化合物	BrdU混合(OD 450nM)
		对照	0.65±0.05
VEGF(10ng/ml)	0.9±0.01^#
		VEGF+250(25nM)	0.79±0.02^**
VEGF+250(50nM)	0.75±0.03^***
		VEGF+250(100nM)	0.7±0.05^***
250(100nM)	0.7±0.05

如在表7中可看到的，本发明的化合物103以剂量依赖方式抑制VEGF诱导的HUVEC的增殖。本发明的化合物103相比于舒尼替尼显示更高的效力。

如在表8中可看到的，化合物250同样抑制VEGF诱导的HUVEC的增殖。此外，化合物250对VEGF诱导的HUVEC的增殖具有优异的抑制作用，即使是在非常低的浓度下。

实验例4：对HUVEC的VEGF诱导的管形成的抑制作用(体表外毛细结构形成测定)

1)方法

将HUVEC用舒尼替尼(1μM)或化合物103(0.1，0.5，或1μM)预处理1小时。在将HUVEC以3x10⁵个细胞／孔的浓度接种到Matrigel涂覆的48孔板中后，将HUVEC用10 ng/ml VEGF处理4小时。在装配有照相机的显微镜下对其中形成了管的HUVEC进行监测并拍照以计数细胞。

同样将HUVEC用表10给出的多个浓度的化合物250(实施例26)处理，与化合物103一样，在装配有照相机的显微镜下对其中形成了管的HUVEC进行监测并拍照。

2)结果

化合物103的结果概述在图4和表9中，并且化合物250的结果概述在图4和表10中。

表9

测试化合物	管的数目／视野
		对照	50
VEGF(10 ng／ml)	140^#
		VEGF+103(0.1μM)	90**
VEGF+103(0.5μM)	80***
		VEGF+103(1μM)	60***
VEGF+舒尼替尼(1 μM)	100***

表10

测试化合物	管的数目／视野
		对照	30±5
VEGF(10ng/ml)	60±4^#
		VEGF+250(25nM)	45±6^**
VEGF+250(50nM)	35±2^***
		VEGF+250(100nM)	28±4^***
250(100nM)	27±2

如由表9的数据明显的是，VEGF诱导的管形成被化合物103抑制，表明本发明的化合物阻断VEGF诱导的血管发生。并且，与舒尼替尼相比，化合物103在抑制管形成方面更有效。

如由表10的数据明显的是，VEGF诱导的管形成也被化合物103抑制，表明本发明的化合物阻断VEGF诱导的血管发生。特别地，化合物250对管形成保持高的抑制作用，即使是在低浓度下。

实验例5：对小鼠主动脉中VEGF诱导的出芽(sprouting)的抑制作用

5-1体表外微血管出芽测定

1)方法

将切离自5周龄C57BL／6小鼠的主动脉环(aortic ring)放置在Matrigel涂覆的48孔板中，并用舒尼替尼(1μ M)或化合物103(0.1，0.5，1μM)温育1小时，然后用10 ng／ml VEGF温育7天。在装配配有照相机的显微镜下对来自该主动脉环的边缘的芽进行拍照。

同样地，在将切离白六周龄Spague-Dawley大鼠的主动脉环用各个浓度(10nM，50nM，100nM)的化合物250(实施例26)处理并且然后用VEGF处理后，与化合物103相同地，在装配有照相机的显微镜下对来自主动脉环的边缘的芽进行拍照。

2)结果

如图5和6中所示的，化合物103和250抑制VEGF诱导的主动脉出芽。

特别地，证实了化合物250具有有效的针对主动脉出芽的抑制活性，即使是在低至nM水平的浓度下。

实验例6：对VEGF诱导的HUVEC中的VEGFR2活化的抑制作用(蛋白质印迹法分析)

1)方法

如下地进行检测以观察化学式I的化合物对VEGF诱导的VEGFR2活化的效果。

将HUVEC用舒尼替尼(1μM)或化合物103(0.1，0.5，1μM)预处理1小时，然后用VEGF(10 ng/ml)处理5min。在以4000rpm离心3min以收集细胞后，将细胞沉淀用PBS(磷酸盐缓冲盐水)洗涤一次。将洗涤过的细胞沉淀悬浮在含有各自5μl／mL的亮抑酶肽(leupeptin)和抑酶肽(aprotinin)的裂解缓冲液(50mM HEPES pH 7.0，250mM NaCl，5mM EDTA，0.1％Nonidet P-40，1 mM苯基甲基磺酰氟和0.5 mM原钒酸钠)中，并在4℃进行反应达20。在通过微离心除去细胞碎片后，快速将上清冷却，并使用Bio-Rad蛋白质测定试剂对蛋白质水平定量。将40 μg的来自各测试组的细胞蛋白质通过10％SDS-PAGE跑胶，并且转移到PVDF膜上。

为了进行免疫印迹，将所述膜在4℃在封闭溶液(5％脱脂奶)中温育过夜，并与一抗反应4小时。在用Tween 20／Tris缓冲盐水(TTBS)洗涤4次后，将膜与辣根过氧化物酶缀合的二抗的1∶1000(v／v)稀释液在室温反应1小时，用TTBS洗涤三次，并通过化学发光方法(Amersham Life Science)鉴定。

与化合物103相同地，将HUVEC用多个浓度(10nM，50nM，100nM)的化合物250(实施例26)处理，然后用VEGF处理，并且分析针对VEGF诱导的VEGFR2活化的抑制活性。

2)结果

化合物103的结果在图7中给出，并且化合物250的结果在图8中给出。

在图7和8中，记号“-”指示不存在列于左侧的相应成分，而记号″+″指示存在列于左侧的相应成分。如在图7和8中可看到的，VEGF诱导p-VEGFR(Tyr-1175)的表达，而化学式I的化合物与舒尼替尼一样抑制p-VEGFR(Tyr-1175)的表达。因此，发现6-HM通过减量调节COX-2(一种PGE₂合酶)的表达抑制PGE₂产生。因此，根据本发明的化学式I的化合物针对对细胞的迁移和增殖有重要影响的VEGFR2通路发挥作用。

实验例7：对HUVEC中VEGF诱导的AKT／ERK和eNOS活化的抑制作用(蛋白印迹法分析)

1)方法

如下地进行检测以观察以上实施例中制备的化学式I的化合物对HUVEC中的AKT(丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶B)／ERK(胞外信号调节激酶)和eNOS(内皮氧化氮合酶)的VEGF诱导的活化的作用(内皮氧化氮合酶)。

将HUVEC用舒尼替尼(1μM)或化合物103(0.1，0.5，1μM)预处理1小时，然后用VEGF(10 ng／ml)处理10 min(p-ERK)，30 min(p-AKT)，和1小时(p-eNOS)。在以4000 rpm离心3 min以收集细胞后，将细胞沉淀用PBS(磷酸盐缓冲盐水)洗涤一次。将细胞沉淀悬浮在含有各自5μl／mL的亮抑酶肽(leupeptin)和抑酶肽(aprotinin)的裂解缓冲液(50mM HEPES pH7.0，250mM NaCl，5mM EDTA，0.1％Nonidet P-40，1 mM苯基甲基磺酰氟和0.5 mM原钒酸钠)中，并在4℃进行反应达20 min。在通过微离心除去细胞碎片后，快速将上清冷却。

使用Bio-Rad蛋白质测定试剂进行蛋白质定量。将40μg的来自各测试组的细胞蛋白质通过10％SDS-PAGE跑胶，并且转移到PVDF膜上。

为了进行免疫印迹，将所述膜在4℃在封闭溶液(5％脱脂奶)中温育过夜，并与一抗反应4小时。在用Tween 20／Tris缓冲盐水(TTBS)洗涤4次后，将膜与辣根过氧化物酶缀合的二抗的1∶1000(v／v)稀释液在室温反应1小时，用TTBS洗涤三次，并通过化学发光方法(Amersham Life Science)可视化。来自三个独立实验的测量值中的代表显示在图5中。

2)结果

在图9中，记号“-”指示不存在列于左侧的相应成分，而记号″+″指示存在列于左侧的相应成分。如在图5中可见，VEGF诱导p-ERK(在10 min)和p-AKT(在30 min)的表达。化合物103减少p-AKT的表达，但不抑制p-ERK的表达。对比地，观察到舒尼替尼减小p-AKT和p-ERK两者的水平。此外，在用化合物103或舒尼替尼处理的两个组中，AKT和ERK下游的因子p-eNOS被减量调节。因此，根据本发明的化学式I的化合物通过对在与舒尼替尼不同的通路中参与HUVEC中的细胞迁移和增殖的eNOS进行减量调节来抑制细胞的迁移和增殖。

Claims

1.一种由以下化学式I表示的化合物，或其药用盐：

[化学式I]

其中，

X₁和X₂独立地是卤素原子(F，Cl，Br，I)或氢原子，

Y是-NH-；-S-；或-O-，

R₁表示具有1至5个取代基的哌啶基、哌嗪基、氮杂二环[2.2.2]辛基或苯基，所述1至5个取代基选自由以下各项组成的组：苄基，苯基氧基，1，1-嘧啶乙基，吡啶甲基，C_1-4烷基，C_3-6烯基，和叔丁氧基羧基及丙二酰-2-基，

其中所述C_1-4烷基被0至3个选自R₃R₄N-、羟基和卤素原子中的取代基取代，其中R₃和R₄独立地是C_1-4烷基，

R₂表示具有1或2个取代基的C_1-4烷基，所述1或2个取代基选自由吡啶基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、被0至3个具有0至3个卤素取代基的苄基取代的吗啉基和被0至3个卤素原子取代的苯基组成的组；C_5-10烷基；C_1-4烷基氧基羰基氨基；C_1-4烷氧基C1-4烷基；甲苯磺酰氨基；具有0至3个取代基的苯基，所述0至3个取代基选自由C_1-4烷基、卤素、硝基和苯氧基组成的组；具有0至3个取代基的吡啶基，所述0至3个取代基选自由C1-4烷基氧基羰基和C_1-4烷基组成的组；氮杂环庚烷-2-酮基；1，3，4-***基；被0至3个C_1-4烷基取代的嘧啶基；吡咯烷基；被0至2个C_1-4烷基取代的噻唑基；被0至3个C_1-4烷基取代的2，3-二羟基吲哚；

其中R₅和R₆各自独立地是C_1-4烷基、C_1-4烷基硫烷基或硫羟，并且

R₇和R₈各自独立地是C_1-4烷基氧基羰基、苯基或苄基。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药用盐，其中R₁是1-苄基哌啶-4-基；1-苄基哌啶-3-基；4-苯氧基苯基；1-(2-羟基乙基)-哌啶-4-基；1-(2-羟基乙基)-哌啶-3-基；1-(2-羟基乙基)-哌嗪-4-基；2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基；叔丁氧基羰基哌啶-4-基；叔丁氧基羰基哌啶-3-基；1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基；甲基哌啶-4-基；甲基哌嗪-4-基；哌啶-4-基；哌啶-3-基；1-(2-羟基乙基)-2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基；1-芳基哌啶-4-基；[2-(N，N-二甲基氨基)乙基]哌啶-4-基；(叔丁基氧基羰基)哌啶-3-基：(丙二酰-2-基)哌啶-4-基；(吡啶-2-基)甲基哌啶-4-基；(吡啶-3-基)甲基哌啶-4-基；或1-(6-氯-5-氟嘧啶-4-基)乙基哌啶-4-基。

3.根据权利要求2所述的化合物或其药用盐，其中R₁是1-苄基哌啶-4-基；1-苄基哌啶-3-基；1-(2-羟基乙基)-哌啶-4-基；哌啶-3-基；或叔丁氧基羰基哌啶-3-基。

4.根据权利要求1所述的化合物或其药用盐，其中R₂是3-氯苯基；4-苯氧基苯基；3，3-二甲基-2，3-二氢-1H-吲哚-6-基；4-(4-氟苄基)-吗啉-2-基甲基；1，3，4-***-2-基；4，6-二甲基嘧啶-2-基；(S)-吡咯烷-3基；2-(吗啉-1-基)乙基；叔丁氧基羰基氨基；(3-甲氧基羰基)吡啶-6-基；对甲苯磺酰氨基；吡啶-4-基甲基；1，2-二苯基乙基；2-甲氧基乙基；5-甲基噻唑-2-基；3-甲基吡啶-2-基；氮杂环庚烷-2-酮-3-基；4-氟苄基；2-乙基己基；3-甲基-2-甲基硫烷基-3，4-二氢喹唑啉-4-酮-6-基；(3，4-二甲氧基)苯基；

5.根据权利要求4所述的化合物或其药用盐，其中R₂是3-氯苯基；

4-苯氧基苯基；5-甲基噻唑-2-基；或

6.根据权利要求1所述的化合物或其药用盐，其选自由以下各项组成的组：

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]，

N-(3-氯苯基)-2-(4-苯氧基苯胺基)烟酰胺[104]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[110]，

2-(4-苯氧基苯胺基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[11 1]，

N-(3-氯苯基)-2-(2，2，6，6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[201]，

2-(1-氮杂二环[2.2.2]辛-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[210]，

N-(3-氯苯基)-2-(1-甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[214]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[218]，

N-(3-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基氨基)烟酰胺[240]，

N-(3-氯苯基)-2-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基氨基)烟酰胺[241]，

(R)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[267]，

(S)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[273]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯-N-(3-氯苯基)烟酰胺[301]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-6-氯-N-(3-氯苯基)-5-氟烟酰胺[302]，

N-(3-氯苯基)-2-(4-哌啶基氨基)烟酰胺[224]，

(R)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[269]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[275]，

2-(1-芳基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[243]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[248]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[249]，

(R)-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺[268]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-3-基氨基]烟酰胺[274]，

2-(4-(3-(3-氯苯基氨基甲酰基)吡啶-2-基氨基)哌啶-1-基)丙二酸[246]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氧基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[289]，

2-(1-苄基哌啶-4-基硫烷基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[290]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(1，3，4-***-2-基)烟酰胺[406]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)烟酰胺[407]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(S)-吡咯烷-3-基烟酰胺[408]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-2-(吗啉-1-基)乙基烟酰胺[409]，

N′-[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]肼甲酸叔丁酯[410]，

6-{[2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}烟酸甲酯[412]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(对甲苯磺酰氨基)烟酰胺[424]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(吡啶-4-基甲基)烟酰胺[425]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(1，2-二苯基乙基)烟酰胺[426]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(2-甲氧基乙基)烟酰胺[427]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)烟酰胺[428]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-甲基吡啶-2-基)烟酰胺[429]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(氮杂环庚烷-2-酮-3-基)烟酰胺[430]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-氟苄基)烟酰胺[431]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(2-乙基己基)烟酰胺[436]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3，4-二甲氧基苯基)烟酰胺[443]，

2-{[2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[506]，

2-{[2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[507]，

2-{[6-氯-5-氟-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[508]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[509]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[510]，

2-{[2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯-5-氟吡啶-3-羰基]氨基}-4,5,6,7-四氢噻吩并[2，3-c]吡啶-3-甲酸甲酯[511]，

N-(2-乙基己基)-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[517]，

6-氯-N-(2-乙基己基)-5-氟-2-(2，2,6,6-四甲基哌啶-4-基氨基)烟酰胺[519]，

2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(2-乙基己基)烟酰胺[520]，

2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-6-氯-N-(2-乙基己基)-5-氟烟酰胺[522]，及其药用盐。

7.根据权利要求6所述的化合物或药用盐，其选自由以下各项组成的组：

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(4-苯氧基苯基)烟酰胺[110]，

N-(3-氯苯基)-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[218]，

(S)-2-(1-苄基哌啶-3-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[273]，

6-氯-N-(3-氯苯基)-5-氟-2-[1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基氨基]烟酰胺[312]，

(S)-N-(3-氯苯基)-2-(3-哌啶基氨基)烟酰胺[275]，

2-(1-苄基哌啶-4-基硫烷基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[290]，

2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(5-甲基噻唑-2-基)烟酰胺[428]，

8.根据权利要求7所述的化合物或其药用盐，其是2-(1-苄基哌啶-4-基氨基)-N-(3-氯苯基)烟酰胺[103]或其药用盐。

9.一种用于制备根据权利要求1所述的由化学式I表示的化合物的方法，所述方法包括在碱存在下使由以下化学式II表示的化合物与由以下化学式III表示的化合物反应；

[化学式111

[化学式III]

H₂N-R₂

其中，

X₁、X₂、R₁和R₂分别如权利要求1中所定义，并且

Z是氯或溴。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述碱选自由以下各项组成的组：三乙胺，N，N-二异丙基乙胺，N-甲基吗啉，DBU(1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯)，N-甲基哌啶，4-二甲基氨基吡啶，N，N-二甲基苯胺，2，6-二甲基吡啶，4-N，N-二甲基氨基吡啶和吡啶。

11.制备根据权利要求1所述的由化学式I表示的化合物的方法，所述方法包括在碱存在下使由以下化学式IV表示的化合物与由以下化学式V表示的化合物反应：

[化学式IV]

[化学式V]

Y-R₁

其中，

X₁、X₂、R₁和R₂分别如权利要求1中所定义，并且

Y是-NH₂，-SH或-OH。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述碱选自由以下各项组成的组：碳酸钾，碳酸氢钾，碳酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化钙，氢氧化钡，甲醇钠，乙醇钠，叔丁醇钠，叔丁醇钾，氢化钠，氢化钾，硼氢化钠，氰基硼氢化钠和4-N,N-二甲基氨基吡啶。

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述反应在二甲苯中进行。

14.根据权利要求11所述的方法，其中所述二甲苯是邻二甲苯。

15.一种用于预防或治疗由血管内皮生长因子(VEGF)的异常活性引起的疾病或症状的药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，或其药用盐。

16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述疾病或症状选自：癌症，类风湿性关节炎，糖尿病性视网膜病变，角膜炎，充血，黄斑变性，脉络膜新血管形成，新生血管性青光眼，角膜新血管形成的眼病，银屑病，肺部的气道阻塞性血管瘤和由血管发生所致的肥胖。

17.根据权利要求16所述的药物组合物，其中所述疾病或症状是癌症。

18.一种用于抑制血管形成的药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，或其药用盐。

19.根据权利要求18所述的药物组合物，其是抗癌剂。

20.一种预防或治疗由血管内皮生长因子(VEGF)的异常活性引起的疾病或症状的方法，所述方法包括将由以下化学式I表示的化合物或其药用盐施用于受试者：

[化学式I]

其中，

X₁和X₂独立地是卤素原子(F，Cl，Br，I)或氢原子，

Y是-NH-；-S-；或-O-，

其中所述C_1-4烷基被0至3个取代基取代，所述0至3个取代基选自R₃R₄N-、羟基和卤素原子，其中R₃和R₄独立地是C_1-4烷基，

R₂表示具有1或2个取代基的C_1-4烷基，所述1或2个取代基选自吡啶基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、被0至3个具有0至3个卤素取代基的苄基取代的吗啉基和被0至3个卤素原子取代的苯基；C_5-1()烷基；C_1-4烷基氧基羰基氨基；C_1-4烷氧基C1-4烷基；甲苯磺酰氨基；具有0至3个取代基的苯基，所述0至3个取代基选自C_1-4烷基、卤素、硝基和苯氧基；具有0至3个取代基的吡啶基，所述0至3个取代基选自C1-4烷基氧基羰基和C_1-4烷基；氮杂环庚烷-2-酮基；1，3，4-***基；被0至3个C_1-4烷基取代的嘧啶基；吡咯烷基；被0至2个C_1-4烷基取代的噻唑基；被0至3个C_1-4烷基取代的2，3-二羟基吲哚；或

R₇和R₈各自独立地是C_1-4烷基氧基羰基、苯基或苄基。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述由血管内皮生长因子的异常活性引起的疾病或症状选自：癌症，类风湿性关节炎，糖尿病性视网膜病变，角膜炎，充血，黄斑变性，脉络膜新血管形成，新生血管性青光眼，角膜新血管形成的眼病，银屑病，气道阻塞性血管瘤和由血管发生所致的肥胖。