CN101537001A - 作为jak-stat3信号通路抑制剂的化合物的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了作为JAK－STAT3信号通路抑制剂的化合物的应用，具体地说是一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用，该应用为肿瘤患者提供了新的治疗候选药物，有可能进一步提高对患者的疗效，改善其预后。式I的化合物或其药学上可接受的盐对多种肿瘤细胞有效，预示该化合物可用于包括脑瘤、生殖泌尿***肿瘤、淋巴***肿瘤、胃癌、喉癌、鼻咽癌、皮肤癌、骨癌、血癌、白血病、乳腺癌及组织细胞性淋巴癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、***癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌等多种癌症的治疗。式中各基团定义详见说明书。

Description

作为JAK-STAT3信号通路抑制剂的化合物的应用

技术领域

本发明涉及一类作为JAK-STAT3信号通路抑制剂的化合物的应用。

技术背景

肿瘤是目前人类健康和生命的头号杀手，其发病率仅次于心血管类疾病。并且随着环境污染及其它因素的影响，恶性肿瘤的发病率呈快速上升趋势。根据世界卫生组织2003年公布的数据，2000年全球共有恶性肿瘤患者1000万，因恶性肿瘤死亡者高达620万，占总死亡人数的12％～25％。预期到2020年，全球每年新发病例将达1500万。近年来，虽有一些新型的酪氨酸蛋白抑制剂等靶向新药的开发上市，但仍远远无法满足日益增长的临床癌症病人的需要。抗肿瘤药物研发也仍是目前药物研发界的重要研究方向。

信号传导与转录激活因子(Signal Transducer and Activator of Transcription，STAT)是细胞因子及生长因子受体信号下游效应器，通常能将细胞表面受体产生的信号转导至细胞核内，并在核内与特异性的DNA启动子序列结合从而调控基因的表达。STAT蛋白家族有七个不同的家族成员：Stat1，Stat2，Stat3，Stat5a，Stat5b，Stat6。STAT信号途径对于正常的细胞生理过程是必需的，例如胚胎发育，器官形成及发挥功能，先天及后天获得性免疫功能，以及对细胞分化、生长和凋亡的调控。STAT3是STATS的一个家族成员，它在大量的肿瘤细胞系及人类肿瘤中被上游异常的酪氨酸激酶组成性激活。异常的STAT3信号通过刺激细胞增殖、促进血管生成，抑制凋亡而参与人类肿瘤的发生和发展。

编码STAT3的基因在人类定位于第17号染色体(17q21.31)，STAT3蛋白结构可分为6个功能区：N端的氨基酸保守序列、螺旋区、DNA结合域、连接区、SH2结构域和C端的转录活化区。其中SH2区是STATs结构中最保守和功能最重要的的部分，参与STAT蛋白的酪氨酸磷酸化，并在STAT二聚体的形成中起重要作用。此区附近的705位酪氨酸磷酸化是STAT3活化的标志。此外，STAT蛋白的C端还有一丝氨酸磷酸化位点(Ser 727)，是多种丝氨酸激酶的底物，其磷酸化水平可调节STAT3转录活性[CHUNG J，UCHID A E，GRAMMERT C，et al.Mol Cell Biol，1997(17)：6508]。STAT3在早期胚胎发育和骨髓细胞的分化中发挥着不可缺少的重要作用[CHAKRABORTY A，DYER K F，CASCIO M，et al.Blood，1999，93(1)：15]。此外，STAT3还参与了细胞生长、分化、恶性转化及凋亡抑制等活动的调控[LEEMAN R J，LUI V W，GRANDIS J R.Expert Opin Biol Ther，2006，6(3)：231]。

STAT3信号途径可以通过非受体酪氨酸激酶、生长因子受体及细胞因子受体三条途径激活。非受体酪氨酸激酶激活STAT3不需要受体的参与[Smithgall T.E.，Briggs S.D.，Schreiner S.，Lerner E.C.，Cheng H.，Wilson M.B.Oncogene，19：2612-2618，2000；Lin T.S.，Mahajan S.，Frank D.A.Oncogene，19：2496-2504，2000；Danial N.N.，Rothman P.Oncogene，19：2523-2531，2000]；当细胞因子如IL-6与细胞表面的同源受体结合，受体二聚化从而激活受体相关的酪氨酸激酶例如JAKs，进而激活受体的胞质段[Darnell J.E.，Jr.，Kerr I.M.，Stark G.R.Science(Wash.DC)，264：1415-1421，1994；Ihle J.N.Curr.Opin.Cell Biol.，13：211-217，2001]；当生长因子如EGF与受体结合，由于受体自身具有酪氨酸激酶活性而在受体的胞质尾段[Bromberg J.，Darnell J.E.，Jr.Oncogene，19：2468-2473，2000；Bowman T.，Garcia R.，Turkson J.，Jove R.Oncogene，19：2474-2488，2000]。酪氨酸磷酸化的受体提供停泊位点以招募胞质中的单体STAT3[Heim M.H.，Kerr I.M.，Stark G.R.，Darnell J.E.，Jr.Science(Wash.DC)，267：1347-1349，1995]。单体STAT3通过其SH2结构域与受体结合并形成二聚体。[Darnell J.E.，Jr.Science(Wash.DC)，277：1630-1635，1997；Chen X.，Vinkemeier U.，Zhao Y.，Jeruzalmi D.，Darnell J.E.，Jr.，Kuriyan J.Cell，93：827-839，1998]。在几分钟时间内，STAT3二聚体易位至细胞核，在细胞核中与特异的DNA启动子序列结合诱导相应基因如抗凋亡基因Bcl-XL，Mcl-1[Grandis J.R.，Drenning S.D.，Zeng Q.，Watkins S.C.，Melhem M.F.，Endo S.，Johnson D.E.，Huang L.，He Y.，Kim J.D.Proc.Natl.Acad.Sci.USA，97：4227-4232，2000；Epling-Burnette P.K.，Liu J.H.，Catlett-Falcone R.，Turkson J.，Oshiro M.，Kothapalli R.，Li Y.，Wang J.M.，Yang-Yen H.F.，KarrasJ.，Jove R.，Loughran T.P.，Jr.J.Clin.Investig.，107：351-362，2001；Epling-Burnette P.K.，ZhongB.，Bai F.，Jiang K.，Bailey R.D.，Garcia R.，Jove R.，Djeu J.Y.，Loughran T.P.，Jr.，Wei S.J.Immunol.，166：7486-7495，2001]；细胞周期调控基因c-Myc，cyclins D1/D2[Bowman T.，BroomeM.A.，Sinibaldi D.，Wharton W.，Pledger W.J.，Sedivy J.M.，Irby R.，Yeatman T.，Courtneidge S.A.，Jove R.Proc.Natl.Acad.Sci.USA，98：7319-7324，2001；Sinibaldi D.，Wharton W.，Turkson J.，Bowman T.，Pledger W.J.，Jove R.Oncogene，19：5419-5427，2000.]；血管生成基因VEGF表达[NIU G，WRIGHT K L，HUANG M，et al.Oncogene，2002，21(13)：2000-2008]，从而对细胞的的增殖、存活，血管形成及肿瘤形成进行调控。

在正常生理状态下，STAT3的激活是快速而短暂的，仅维持数分钟到几小时，对于正常细胞的生理功能起着关键性作用。STAT3是EGFR、IL-6/JAK、Src等多个致癌性酪氨酸激酶信号通道的汇聚的焦点，在多种肿瘤细胞中均发现有持续性过度激活(如图表1所示)。STAT3过度激活后诱导上述与细胞增殖、分化、凋亡密切相关的关键基因的异常高表达，通过各种途径促进细胞增殖、恶性转化、阻碍细胞凋亡，表现出致癌作用。

表1STAT在人类肿瘤细胞(细胞系或原代细胞)中的活化情况：

STAT3在人类多种恶性肿瘤中高表达，且与肿瘤分化程度、浸润转移及预后密切相关。因此，STAT3小分子抑制(JAK-STAT3信号通路抑制剂)可作为肿瘤临床治疗的一个新的策略。

目前针对STAT3的临床治疗策略主要有(1)STAT3上游酪氨酸激酶抑制剂：①JAK家族激酶抑制剂；②Src家族激酶抑制剂；③EGF受体抑制剂；④Bcr-Abl酪氨酸激酶抑制剂；(2)阻断STAT3基因表达或蛋白功能：①显性-负向STAT蛋白。STAT3β，是STAT3的截短形式，仍可以形成二聚体并与DNA结合，但不能激活基因表达；②STAT3反义寡核苷酸(3)小分子抑制STAT3激活及二聚化。目前已有Stattic及STA-21等几个新型的STAT3小分子抑制剂的报导。

近年来，随着新药开发成本的快速上升，而药物开发成功率的逐步下滑，大部分药物专利到期，后备新药难以跟进的情况下，制药公司纷纷在现有药物基础上开发新的专利保护药物。“老药新用”已成为国际药物研发的一个热点。

氯硝柳胺(Niclosamide)，又名灭绦灵、育末生，最早于1959年由德国施劳夫斯特等人合成成功，由德国拜耳公司进行工业化生产。原为杀钉螺药物，在血吸虫病治疗领域具有卓越的疗效，氯硝柳胺还能制成涂敷剂以预防急性血吸虫感染，杀灭钉螺以及血吸虫尾蚴、毛蚴，具有灭螺效果好、毒副作用小、对人及畜的毒性低等特点，是治疗血吸虫病的生力军。此外，氯硝柳胺也是一种广谱、高效、低毒的人及牲畜驱绦虫药物。已被收入中国药典、英国药典、欧洲药典等。

该药对于人类其其它温血性动物及植物安全性极高，基本无毒害作用，人口服安全剂量高达2克/天以上，惟对鱼类有害。临床毒副作用为轻微头晕、胸闷、腹部不适或腹痛、发热、骚痒等。

目前，尚未有该药或其衍生物或其类似物及其盐类用于癌症临床治疗的文献报导。

发明内容

本发明需要解决的技术问题之一是提供一类作为JAK-STAT3信号通路抑制剂的化合物的新应用。

解决上述技术问题的技术方案如下：

具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，作为JAK-STAT3信号通路抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，

其中：

以下的a为0或1；b为0或1；n任选为0，1，2或3；

Ar为不含或含有氮、硫、或氧杂原子的芳香环；

R₁任选自：

7)H；

8)卤素(F，Cl，Br，I)；

9)O_aC₁-C₆烷基；

10)O_aC₁-C₆环烷基；

11)O_aC₁-C₆杂环基；

12)O_aC₀-C₈-NR₃R₄；

所述烷基、环烷基、和杂环基任选被0个或1个或多个选自R₃的取代基取代；

R₂为芳环(Ar)上的0～5个取代基，每个取代基分别任选自：

14)H；

15)卤素；

16)(CO)_bO_aC₁-C₆烷基；

17)(CO)_bO_aC₁-C₆环烷基；

18)(CO)_bO_aC₁-C₆杂环基；

19)(CO)_bO_aC₀-C₈-NR₃R₄；

20)C₁-C₃全氟或部分氟代烷基

21)(C＝O)_aNR₆R₅；

22)OH；

23)CN；

24)NO₂；

25)SO₂NR₃R₄；

26)COOH；

所述烷基、环烷基、和杂环基任选被0个或1个或多个选自R₄的取代基取代；

R₃和R₄各自独立选自：

1)H；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₆烷基；

3)(C＝O)_aO_b芳基；

4)O_bC₁-C₃全氟或部分氟代烷基；

5)(C＝O)_aO_bC₃-C₆环烷基；

6)(C＝O)_aO_b杂环基；

所述烷基、芳基、环烷基、和杂环基任选被0～3个选自R₃的取代基取代；或者R₃和R₄以及连接它们的原子形成一个4～7元的单环或每个环为4～7元的双环，并任选含有1～3个选自N、O和S的杂原子，所述单环或双环任选被一个或多个选自R₃的取代基取代。

优选地，Ar为苯基的化合物及其药用盐；更优选地，Ar为苯基，n为0的化合物及其药用盐；更优选为，氯硝柳胺及其药用盐作为JAK-STAT3信号通路抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

优选地，所述化合物具有以下式II～IV结构之一：

R₁～R₄的定义与上述相同。

所述化合物氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的有效浓度是1×10^-8～1×10^-5M。

本发明的另一需要解决的技术问题是提供一种抗肿瘤药用组合物。

具体技术方案如下：

一种抗肿瘤药用组合物，包括有具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体。

优选地，所述肿瘤(癌症)为以下的任一种：组织细胞性淋巴癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、***癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、***癌、鼻咽癌、表皮细胞癌、宫茎癌、口腔癌、人纤维肉瘤、白血病等。

本发明提供了具有式1的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物的用途，为肿瘤患者提供了新的治疗候选药物，有可能进一步提高对患者的疗效，改善其预后。具有式1的化合物或其药学上可接受的盐可用作AK-STAT3信号通路小分子抑制剂，用于制备的药物对多种肿瘤细胞有效，预示该化合物有可用于包括脑瘤、生殖泌尿***肿瘤、淋巴***肿瘤、胃癌、喉癌、鼻咽癌、皮肤癌、骨癌、血癌、白血病、乳腺癌及组织细胞性淋巴癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、***癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、等多种癌症的治疗。

此外，所述化合物还可以通过与目前应用的或正处开发阶段的抗肿瘤药物联合用药增加其临床效果。

附图说明

图1是B037(氯硝柳胺)对表皮细胞癌的抑制活性的示意图；

图2是B037(氯硝柳胺)对乳腺癌的抑制活性的示意图；

图3是B037(氯硝柳胺)对肝癌的抑制活性的示意图；

图4是B037(氯硝柳胺)对宫茎癌的抑制活性的示意图；

图5是B037(氯硝柳胺)对口腔癌的抑制活性的示意图；

图6是B037(氯硝柳胺)对人纤维肉瘤的抑制活性的示意图；

图7是B037(氯硝柳胺)对结肠癌的抑制活性的示意图；

图8是B037(氯硝柳胺)对肾癌的抑制活性的示意图；

图9是B037(氯硝柳胺)对***癌的抑制活性的示意图；

图10是B037(氯硝柳胺)对肺癌的抑制活性的示意图；

图11是western blot试验表明B037选择性降低Cyclin D3的水平，而对Cyclin E的水平不产生影响的示意图；

图12是western blot试验表明B037选择性抑制STAT3的磷酸化，而对MAPK信号通路节点蛋白Raf、MEK、ErK的磷酸化不产生影响的示意图；

图13是划痕修复试验表明B037剂量依赖性地抑制OS-RC-2肿瘤细胞的增殖和迁移的示意图；

图14是荧光免疫试验表明B037剂量依赖性地抑制STAT3向细胞核的转移的示意图。

具体实施方式

本发明所述化合物可具有不对称中心、手性轴及手性面，且存在的外消旋物、外消旋物混合物及单一非对映体和所有可能的同分异构体及其混合物包括旋光异构体均包括在本发明内。另外，本发明公开的化合物可以互变异构体存在，且两种互变异构形式都包括在本发明的范围内，即使仅描述了其中一种互变异构结构。

当任何变量(例如R₁、R₂、R₃、R₄等)在任何组分中出现超过一次，则其每次出现的定义独立于其它每次出现的定义.同样，允许取代基及变量的组合，只要这种组合使化合物稳定。自取代基划入环***的线表示所指的键可连接到任何能取代的环原子上。如果环***为.多环，其意味着这种键仅连接到邻近环的任何适当的碳原子上.要理解本领域普通技术人员可选择本发明化合物的取代基及取代型式而提供化学上稳定的并可通过本领域技术和下列提出的方法自可容易获得的原料容易的合成的化合物。如果取代基自身被超过一个基团取代，应理解这些基团可在相同碳原子上或不同碳原子上，只要使结构稳定.短语“任选被一个或多个取代基取代”被认为与短语“任选被至少一个取代基取代”相当且在此情况下优选的实施方案将具有0-3个取代基。

本发明所用术语“烷基”和“亚烷基”意指包括具有特定碳原子数目的支链的和直链的饱和脂肪烃基。例如，“C₁-C₆烷基“中”C₁-C₆“的定义包括以直链或支链排列的具有1、2、3、4、5或6个碳原子的基团。例如，”C₁-C₆烷基“具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基等。术语“环烷基”指具有特定碳原子数目的单环饱和脂肪烃基。例如“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。

”烷氧基”代表通过氧桥连接的指明数目的碳原子的环状的或非环状的烷基。因此“烷氧基”包括上述烷基和环烷基的定义.

如果未明确碳原子的数目，术语“烯基”指直链、支链或环状的，含有2-6个碳原子及至少一个碳-碳双键的非芳香烃基。优选存在一个碳-碳双健，并可存在最多达4个非芳香性的碳碳双健。因此，“C₂-C₆烯基”指具有2-6个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或环状部分可含有双键且如果指明了取代的烯基则此部分可被取代。

术语“炔基”指直链、支涟或环状的，含有2-6个碳原子及至少一个碳碳三键的非芳香烃基。可存在最多达3个碳碳三健。因此，″C₂-C₆炔基”指具有2-6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或环状部分可含有三键且如果指明了取代的炔基则此部分可被取代。

在某些例子中，取代基可用包括0在内的一定范围碳原子数目定义，例如(C₀-C₆)亚烷基-芳基。如果芳基被认为是苯基，则此定义包括苯基自身，也包括-CH₂Ph、-CH₂CH₂Ph、-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)Ph等。

本发明所用“芳基”是指环中多达7个原子的任何稳定的单环或每个环中多达7个原子双环碳环，其中至少一个环为芳香环。这种芳基的实例包括苯基、萘基、四氢萘基、茚满基及联苯基。在芳基取代基是双环的且一个环为非芳香性的例子中，应理解经芳香环而连接。

本发明所用术语“杂芳基”代表环中多达7个原子的稳定的单环或每个环中多达7个原子双环碳环，其中至少一个环为芳香环且含有1-4个选自O、N和S的杂原子.本定义范围内的杂芳基包括但不限于：丫啶基、咔唑基、噌啉基、喹噁啉基、吡唑基(pyrrazolyl)、吲哚基、苯并***基、吠喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并吠喃基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹啉。对于下列杂芳基的定义，“杂芳基”也理解为包括任何含有氮的杂芳基的N-氧化物衍生物。在杂芳基取代基是双环的且含有一个环为非芳香性或不含有杂原子的例子中，应理解各自经芳香环或经含杂原子环连接。

本发明中所用术语“杂环”或“杂环基”是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的5元-10元芳香性或非芳香性杂环，且包括双环基团.“杂环基”因此包括上面提及的杂芳基，也包括其二氢化及四氢化类似物。“杂环基”进一步的实例包括但不限于：苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并吡唑基、苯并***基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基，indolazinyl、吲唑基、异苯并吠喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、奈吡啶基、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹噁啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、***基、氮杂环丁烷基、1，4-二噁烷基、氮杂环庚烷基(hexallydroazepinyl)、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基(thiomorpholinyl)、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢***基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲基二氧基苯甲酰基、四氢呋哺基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。杂环取代基的连接可通过碳原子或通过杂原子实现.

在一个实施方案中，杂环选自2-氮杂卓(上草下卓)酮、苯并咪唑基、2一二氮杂卓(上草下卓)酮、咪唑基、2-咪唑啉酮、吲哚基、异喹啉基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基和噻吩基。

正如本领域技术人员所理解的，本发明中所用“卤素”(“halo”)或“卤素”意指包括氯、氟、溴和碘。

除非另有定义，烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基取代基可为未被取代的或取代的。例如，(C₁-C₆)烷基可被一个、两个或三个选自OH、氧代、卤素、烷氧基、二烷基氨基或杂环基例如吗啉基、哌啶基等的取代基取代。

在某些例子中，定义R₃和R₄使其可与连接它们的氮共同形成4-7元单环或每个环为4-7元的双环杂环，且任选含有除氮外一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子，所述杂环任选被一个或多个选自R⁵的取代基取代。可如此形成的杂环的实例包括但不限于下列的杂环，须牢记杂环任选被一个或多个(且优选一个、两个或三个)选自R₃的取代基取代：

在一个实施方案中R₁选自：氢，卤素，羟基，或(C₁-C₆)烷基，烷氧基。

在一个实施方案中，R₂选自任选被氢、卤素、烷基、硝基、氰基，三氟甲基、酰胺基、酯基、全氟或部分氟代烷基、羧基、磺酰胺基等。

在另一个实施方案中，Ar为取代苯基；在另一个实施方案中，Ar为取代吡碇基。

在另一个实施方案中，n为0。

在一个实施方案中，a为0，b为1。或在一个实施方案中，a为0，b为0。

本发明包括氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物的游离形式，也包括其药学上可接受的盐及立体异构体。本发明中一些特定的示例性化合物为胺类化合物的质子化了的盐。术语“游离形式”指以非盐形式的胺类化合物。包括在内的药学上可接受盐不仅包括本发明所述特定化合物的示例性盐，也包括所有式I化合物游离形式的典型的药学上可接受的盐。可使用本领域已知技术分离所述化合物特定盐的游离形式。例如，可通过用适当的碱稀水溶液例如NaOH稀水溶液、碳酸钾稀水溶液、稀氨水及碳酸氢钠稀水溶液处理该盐使游离形式再生。游离形式在某些物理性质例如在极性溶剂中溶解度上与其各自盐形式多少有些区别，但是为发明的目的这种酸盐及碱盐在其它药学方面与其各自游离形式相当。

可通过常规化学方法自含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物合成本发明的药学上可接受的盐。通常，通过离子交换色谱或通过游离碱和化学计算量或过量的所需盐形式的无机或有机酸在适当溶剂或多种溶剂的组合中反应制备碱性化合物的盐。类似的，通过和适当的无机或有机碱反应形成酸性化合物的盐。

因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过碱性本发明化合物和无机或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括得自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐，也包括自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等制备的盐。

如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”指通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐.得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。得自药学上可接受的有机无毒碱的盐，所述碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代的胺包括天然存在的取代胺、环状胺及碱性离子交换树脂例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N一乙基吗啉、N一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、羟钴胺、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪，哌啶、呱咤、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。

由于在生理条件下化合物中脱质子化的酸性部分例如竣基可为阴离子的，而这种带有的电荷然后可被内部带有阳离子的质子化了的或烷基化的碱性部分，例如四价氮原子平衡抵消，所以应注意本发明化合物是潜在的内盐或两性离子。

本发明涉及的本发明涉及具有式1的化合物(氯硝柳胺及其化学衍生物)，以及其药学上可接受的盐作为JAK-STAT3信号通路小分子抑制剂，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。如本领域技术人员所理解的，本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐用于制备治疗人类及其它哺乳动物的肿瘤等过度增殖性疾病。

在一个实施方案中，本申请提供了一种利用氯硝柳胺及具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐治疗人或其它哺乳动物肿瘤等过度增殖性疾病或症状。

在一个实施方案中，本申请所设计的化合物及其药学可接受的盐可以用于治疗或控制组织细胞性淋巴癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、***癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、***癌、鼻咽癌、表皮细胞癌、宫茎癌、口腔癌、人纤维肉瘤、白血病等过度增殖性疾病。

在一个实施方案中，本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐可以与目前应用的或正处开发阶段的***受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞抑制剂、抗增殖剂、蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白激酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、细胞增殖及生存信号抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂，细胞毒类药物、酪氨酸蛋白抑制剂、EGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、丝氨酸/苏氨酸蛋白抑制剂、Bcr-Abl抑制剂，c-Kit抑制剂，Met抑制剂，Raf抑制剂，MEK抑制剂，MMP抑制剂，拓扑异构酶抑制剂、组氨酸去乙酰化酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂、CDK抑制剂，Bcl-2家族蛋白抑制剂，MDM2家族蛋白抑制剂、IAP家族蛋白抑制剂、STAT家族蛋白抑制剂、PI3K抑制剂、AKT抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、COX-2抑制剂、p53、p53激活剂、VEGF抗体、EGF抗体等药物联合用药增加其临床效果。

本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐可根据下面的方法用于治疗下列的疾病以及下面没有列出的其它疾病：

1)一种利用包含本申请所涉及的、利用氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的乳腺癌的方法。包括但不局限于侵袭性导管癌、侵袭性小叶癌、原位管癌和原位小叶癌。

2)一种利用包含本申请所涉及的、利用氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物的化合物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的呼吸道癌的方法。包括但不局限于小细胞、非小细胞肺癌以及支气管腺瘤和胸膜肺母细胞瘤。

3)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的脑癌的方法。包括但不局限于脑干和眼下神经胶质瘤、小脑和大脑星形细胞瘤、室管膜细胞瘤以及神经外胚层和松果瘤体。

4)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的雄、雌性生殖器官的肿瘤的方法。雄性生殖器官的肿瘤包括但不限于***和睾丸癌。雌性生殖器官的肿瘤包括但不限于子宫内膜癌、***、卵巢癌、***癌和外阴癌以及子宫内瘤。

5)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的消化道的肿瘤的方法。包括但不限于***癌、结肠癌、结肠直道癌、食道癌、胃癌、胰腺癌直肠癌、小肠癌或唾腺癌。

6)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的尿道的肿瘤的方法。包括但不限于膀胱癌、***癌、肾癌、肾盂癌、输尿管癌或尿道癌。

7)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物的眼癌的方法。包括但不限于眼内黑素瘤和视网膜细胞瘤。

8)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物肝癌的方法。包括但不限于肝细胞瘤(具有或不具有纤维板变化的干细胞癌)，胆管癌(肝内胆管癌)以及混合的肝细胞性胆管癌。

9)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物皮肤癌的方法。包括但不限于扁平细胞癌、卡波济氏肉瘤、恶性黑素瘤、默克氏细胞皮肤癌以及非黑素瘤细胞癌。

10)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物头颈癌的方法。包括但不限于喉、下咽、鼻咽、口咽癌以及唇和口腔癌。

11)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物淋巴瘤的方法。包括但不限于AIDS相关淋巴瘤、非何杰金淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、何杰森病和中枢神经***淋巴瘤。

12)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～V结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物肉瘤的方法。包括但不限于软组织肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维性组织细胞瘤、林把肉瘤和横纹肌肉瘤。

13)一种利用包含本申请所涉及的、氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的药用组合物治疗人或其它哺乳动物白血病的方法。包括但不限于急性髓样白血病、急性林细胞白血病、慢性淋细胞白血病、慢性骨髓性白血病以及多毛细胞白血病。

服用方式与剂量范围

根据标准药学技术，本发明化合物可单独或在药用组合物中与药学上可接受的受体、辅料或稀释剂组合给予哺乳动物，优选人。可口服或皮下、肌注、腹膜内、静脉、直肠及局部、眼睛、肺部、鼻腔、胃肠外给予化合物。

在一个实施方案中，利用氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物治疗或控制癌症等患者时，服用剂量范围为在口服0.1～500毫克/天/公斤体重。适当的给药方式为每日单剂量给药或每日二次、三次、四次等多次给药或利用缓释技术给药。对于多种大型哺乳动物，其优选的剂量范围为0.1～1500毫克/天/公斤体重，优选于0.5～100毫克/天/公斤体重。对于平均体重为70公斤的病人，其每日剂量为1～500毫克。对于一些特别搞活性化合物，成年病人每日剂量可低达0.1毫克/天。

剂型

这种含有活性成分的药用组合物可制成适于口服给药形式，例如片剂、含片、锭剂、水或油混悬液、可分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊剂或软胶囊剂、或糖浆剂或酏剂。可根据药用组合物制造领域中任何已知方法制备预期口服给予的组合物，并且为提供药学上精制的及适口的制剂，这种组合物可含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的药剂。片剂含有活性成分与无毒的适用于制造片剂的药学上可接受的辅料。这些辅料可为例如，惰性稀释剂例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂(granulating)和崩解剂例如微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠(sodium crosscarmellose)、玉米淀粉或海藻酸；粘合剂例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或***胶；及润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可不包衣或通过已知技术包衣从而掩盖药物的不良味道或延长在胃肠道中崩解和吸收且因而提供持续更长时间的药物效应。例如，可采用水溶性掩盖味道的原料例如羟丙基-甲基纤维素或羟丙纤维素，或采用延时原料例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。片剂剂型可为0.1毫克/片、0.2毫克/片、0.25毫克/片、0.5毫克/片，1毫克/片，2毫克/片，5毫克/片，10毫克/片，25毫克/片，50毫克/片，100毫克/片，and 250毫克/片。其它剂型如胶囊等可作相似剂量参考。

口服使用的制剂也可制成硬明胶胶囊剂，其中活性成分混合于惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或白陶土中；或制成软明胶胶囊剂，其中活性成分混合于水溶性载体例如聚乙烯二醇或油性介质如花生油、液体石蜡或橄榄油中。

水混悬液含有与适于制造水混悬液的辅料混合的活性材料。这种辅料为助悬剂例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶及***胶；分散剂或湿润剂可为天然存在的磷脂例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或烯化氧与长链脂肪醇的缩合产物例如十七碳乙烯氧基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或烯化氧与得自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇一油酸，或烯化氧与得自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。此水混悬液也可含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙基酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，和一种或多种甜味剂例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。

可通过将活性成分混悬于植物油例如花生油、橄榄油、麻油或椰子油中，或矿物油例如液体石蜡中制备油性混悬液。这种油性混悬液可含有增稠剂例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。可加入上文所述的甜味剂和调味剂以提供适合口服的制剂。可通过加入抗氧化剂例如丁羟茴醚(butylated hydroxyanisol)或α生育酚储存这些组合物。

可分散粉剂或颗粒剂适于通过加入水制备水混悬液而提供与分散剂或湿润剂、助悬剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。适当的分散剂或湿润剂及助悬剂已通过上文涉及的例子说明。也可存在其他辅料例如甜味剂、调味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸而储存。

本发明组合物也可制成水包油乳状液的形式。油相可为植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡或其混合物。适当的乳化剂可为天然存在的磷脂例如大豆卵磷脂，及酯类或得自脂肪酸和己糖醇酐混合物的偏酯，例如去水山梨糖醇单油酸酯，及所述偏酯和烯化氧的缩合产物例如聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。此乳剂也可含有甜味剂、调味剂、防腐剂和抗氧化剂。

可使用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖制备糖浆剂和酏剂。这种制剂也可含有湿润剂、防腐剂、调味剂和着色剂及抗氧化剂。

药用组合物可制成无菌可注射的水溶液。在可接受的载体和溶剂中可采用水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。

这种无菌可注射制剂也可制成活性成分溶于油相中的无菌可注射水包油微乳剂。例如，首先将活性成分溶于豆油和卵磷脂的混合物中，然后将油溶液放入水和甘油的混合物中并处理而制成微乳剂。

这种可注射的溶液或微乳剂可通过局部单次快速静脉注射(local bolus injection)导入患者血流中。可选择的，以这种方法给予溶液或微乳有利于维持化合物的恒定循环浓度。为维持这种恒定浓度，可利用连续静脉注射递送装置。这种装置的一个实施例为DeltecCADD-PLUS^TM model 5400静脉注射泵。

这种药用组合物可制成用于肌内或皮下给药的无菌可注射溶液或油状混悬液形式。可根据已知技术使用上文中提到的分散剂或湿润剂及助悬剂制备这种混悬液。无菌可注射制剂也可制成在无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。另外，常规采用非挥发油作为溶剂或混悬介质。为此目的，可采用任何无刺激性的非挥发油包括合成的甘油一酯或甘油二酯。另外，发现在可注射制剂中使用脂肪酸例如油酸。

氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物也可以直肠给药的栓剂形式给药。可通过混合药物与适当的无刺激性辅料而制备这些组合物，其在常温下为固体但在直肠温度下为液体并因此在直肠中熔化从而释放药物。这种原料包括可可脂、甘油明胶、氢化的植物油、各种分子量聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。

为局部使用，采用含有氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物的乳膏、软膏剂、凝胶剂、溶液剂或混悬液等(为这种应用目的，局部应用包括口腔洗剂和漱口剂)。

本发明化合物可经适当的鼻内载体和递送装置的局部使用以鼻内形式给药，或经皮肤使用本领域普通技术人员熟知的皮肤贴剂的形式给药。以经皮肤递送***形式给药后，整个给药方案的给药剂量理所当然比间歇给药连续。本发明化合物也可以栓剂递送，采用的基质例如可可脂、甘油明胶、氢化的植物油、各种分子量聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。

如果给予受试人本发明化合物，正常由开处方医师通常根据每个患者的年龄、体重、性别和反应，及患者症状严重性相应改变剂量而确定日剂量。

药物代谢物及前药

本申请所涉及的氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物及其药学可接受的盐的代谢产物，以及可以在体内转变为本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐的结构的前药，也包含在本申请的权利要求中。

联合用药

氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物可以与已知的治疗或改进相似病状的其它药物联用。联合给药时，原来药物的给药方式&剂量保持不变，而同时或随后服用氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物。当氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物与其它一种或几种药物同时服用时，优选使用同时含有一种或几种已知药物和氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物的药用组合物。药物联用也包括在重叠的时间段服用氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物与其它一种或几种已知药物。当氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物与其它一种或几种药物进行药物联用时氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物或已知药物的剂量可能比它们单独用药时的剂量较低。

可以与氯硝柳胺及其具有式I～IV结构的化学衍生物进行药物联用的药物或活性成分包括但不局限为：

***受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞抑制剂、抗增殖剂、蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白激酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、细胞增殖及生存信号抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂，细胞毒类药物、酪氨酸蛋白抑制剂、EGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、丝氨酸/苏氨酸蛋白抑制剂、Bcr-Abl抑制剂，c-Kit抑制剂，Met抑制剂，Raf抑制剂，MEK抑制剂，MMP抑制剂，拓扑异构酶抑制剂、组氨酸去乙酰化酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂、CDK抑制剂，Bcl-2家族蛋白抑制剂，MDM2家族蛋白抑制剂、IAP家族蛋白抑制剂、STAT家族蛋白抑制剂、PI3K抑制剂、AKT抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、COX-2抑制剂、p53、p53激活剂、VEGF抗体、EGF抗体等。

在一个实施方案中，可以与氯硝柳胺及其具有式I～V结构的化学衍生物进行药物联用的药物或活性成分包括但不局限为：阿地白介素、阿仑膦酸、干扰素、阿曲诺英、别嘌醇、别嘌醇钠、帕洛诺司琼盐酸盐、六甲蜜胺、氨基格鲁米特、氨磷汀、氨柔比星、安丫啶、阿纳托唑、多拉司琼、aranesp、arglabin、三氧化二砷、阿诺新、5-氮胞苷、硫唑嘌呤、卡介苗或tice卡介苗、贝他定、醋酸倍他米松、倍他米松磷酸钠制剂、贝沙罗汀、硫酸博来霉素、溴尿甘、bortezomib、白消安、降钙素、阿来佐单抗注射剂、卡培他滨、卡铂、康士得、cefesone、西莫白介素、柔红霉素、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、克拉屈滨、氯屈磷酸、环磷酰胺、阿糖胞昔、达卡巴嗪、放线菌素D、柔红霉素脂质体、***、磷酸***、戊酸***、地尼白介素2、狄波美、地洛瑞林、地拉佐生、己烯雌酚、大扶康、多西他奇、去氧氟尿苷、阿霉素、屈***酚、钦-166-壳聚糖复合物、eligard、拉布立酶、盐酸表柔比星、阿瑞吡坦、表阿霉素、阿法依伯汀、红细胞生成素、依铂、左旋咪唑片、***制剂、17-β-***、雌莫司汀磷酸钠、炔雌醇、氨磷汀、羟磷酸、凡毕复、依托泊甙、法倔唑、他莫昔芬制剂、非格司亭、非那司提、非雷司替、氟尿苷、氟康唑、氟达拉滨、5-氟脱氧尿嘧啶核苷一磷酸盐、5-氟尿嘧啶、氟***、氟他胺、福麦斯坦、1-β-D-阿糖呋喃糖胞噻啶-5’-硬脂酰磷酸酯、福莫司汀、氟维司群、丙种球蛋白、吉西他滨、吉妥单抗、甲磺酸伊马替尼、卡氮芥糯米纸胶囊剂、戈舍瑞林、盐酸格拉尼西隆、组氨瑞林、和美新、氢化可的松、赤型-羟基壬基腺嘌呤、羟基脲、替坦异贝莫单抗、伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α、干扰素-α2、干扰素α-2A、干扰素α-2B、干扰素α-n1、干扰素α-n3、干扰素β、干扰素γ-1a、白细胞介素-2、内含子A、易瑞沙、依立替康、凯特瑞、硫酸香菇多糖、来曲唑、甲酰四氢叶酸、亮丙瑞林、亮丙瑞林醋酸盐、左旋四咪唑、左旋亚叶酸钙盐、左甲状腺素钠、左甲状腺素钠制剂、洛莫司汀、氯尼达明、屈***酚、氮芥、甲钴胺、甲羟孕酮醋酸酯、醋酸甲地孕酮、美法仑、酯化***、6-琉基嘌呤、美司钠、氨甲蝶呤、氨基乙酰丙酸甲酯、米替福新、美满霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托葱醌、曲洛司坦、柠檬酸阿霉素脂质体、奈达铂、聚乙二醇化非格司亭、奥普瑞白介素、neupogen、尼鲁米特、三苯氧胺、NSC-631570、重组人白细胞介素1-β、奥曲肽、盐酸奥丹西隆、去氢氢化可的松口服溶液剂、奥沙利铂、紫杉醇、***磷酸钠制剂、培门冬酶、派罗欣、喷司他丁、溶链菌制剂、盐酸匹鲁卡品、毗柔比星、普卡霉素、卟吩姆钠、泼尼莫司汀、司替***龙、***、倍美力、丙卡巴脐、重组人类红细胞生成素、雷替曲塞、利比、依替膦酸铼-186、美罗华、力度伸-A、罗莫肽、盐酸毛果芸香碱片剂、奥曲肽、沙莫司亭、司莫司汀、西佐喃、索布佐生、唬钠甲强龙、帕福斯酸、干细胞治疗、链佐星、氯化锶-89、左旋甲状腺素钠、他莫昔芬、坦舒洛辛、他索那明、tastolactone、泰索帝、替西硫津、替莫唑胺、替尼泊苷、丙酸睾酮、***、硫鸟嘌呤、噻替哌、促甲状腺激素、替鲁膦酸、拓扑替康、托瑞米芬、托西莫单抗、曲妥珠单抗、曲奥舒凡、维A酸、甲氨喋呤片剂、三甲基密胺、三甲曲沙、乙酸曲普瑞林、双羟萘酸曲普瑞林、优福定、尿苷、戊柔比星、维司力农、长春碱、长春新碱、长春酰胺、长春瑞滨、维鲁利秦、右旋丙亚胺、净司他丁斯酯、枢复宁、紫杉醇蛋白质稳定制剂、acolbifene、干扰素r-lb、affinitak、氨基喋呤、阿佐昔芬、asoprisnil、阿他美坦、阿曲生坦、BAY43-9006、阿瓦斯丁、CCI-779、CDC-501、西乐葆、西妥昔单抗、克立那托、环丙孕酮醋酸酯、地西他滨、DN-101、阿霉素-MTC、dSLIM、度他雄胺、edotecarin、依氟鸟氨酸、依喜替康、芬维A胺、组胺二盐酸盐、组氨瑞林水凝胶植入物、钬-166 DOTMP、伊班膦酸、干扰素γ、内含子-PEG、ixabepilone、匙孔形血蓝蛋白、L-651582、兰乐肽、拉索昔芬、libra、lonafamib、米泼昔芬、米诺屈酸酯、MS-209、脂质体MTP-PE、MX-6、那法瑞林、奈莫柔比星、新伐司他、诺拉曲特、奥利默森、onco-TCS、osidem、紫杉醇聚谷氨酸酯、帛米酸钠、PN-401、QS-21、夸西洋、R-1549、雷洛昔芬、豹蛙酶、13-顺维A酸、沙铂、西奥骨化醇、T-138067、tarceva、二十二碳六烯酸紫杉醇、胸腺素α1、嘎唑呋林、tipifarnib、替拉扎明、TLK-286、托瑞米芬、反式MID-lo7R、伐司朴达、伐普肽、vatalanib、维替泊芬、长春氟宁、Z-100和唑来麟酸或它们的组合。

所提供的实施例的目的是帮助进一步理解本发明。采用特定的原料、物种是为描述本发明而不是限制其合理的范围。

实施例1

5-氯-N-(4-氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(4-fluorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法：

混合1mmol 5-氯-2-甲氧基苯甲酸和2ml二氯亚砜，加热回流一个小时。蒸除二氯亚砜，然后加入无水四氢呋喃2ml稀释，待用。

2mmol的4-氟苯胺类化合物，溶解于2ml无水四氢呋喃中，然后在室温条件下滴加到前面制备的5-氯-2-甲氧基苯甲酰氯溶液中，室温搅拌过夜。薄层层析检测反应结束后，室温下，加入适量水和二氯甲烷，混合物转入分液漏斗，取有机层。有机层溶液依次用适量稀氢氧化钠溶液(1次)，饱和氯化钠溶液(1次)，5％盐酸溶液(2次)，饱和氯化钠溶液(1次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到固体，无须进一步纯化。

制备的固体全部溶于5ml无水二氯甲烷中，室温搅拌，氩气保护。三溴化硼0.1ml用2ml无水二氯甲烷稀释，缓慢滴加前面所述的溶液中，室温搅拌，薄层层析监测反应，反应完毕。缓慢加入4M氢氧化钾溶液2ml，再加入适量水和二氯甲烷，然后转入分液漏斗，取水层。浓盐酸滴加入搅拌中的水层，调节pH至析出大量固体，然后用乙酸乙酯溶解萃取，有机层再用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得到产品，无须进一步纯化。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ12.12(s，1H)，9.92(s，1H)，8.02(d，J＝1.6Hz，1H)，7.77～7.80(m，3H)，7.46～7.49(m，1H)，7.15～7.20(m，3H)，7.00(d，J＝8.8Hz，1H)；

MS(ES+APCI)，m/z：266.1(M+H)⁺，264.0(M-H)^-

实施例2

5-氯-N-(3，4-二氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(3，4-difluorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.60(s，1H)，10.52(s，1H)，7.86～7.91(m，2H)，7.43～7.48(m，3H)，7.46～7.49(m，1H)，7.02(d，J＝1.6Hz，1H)

MS(ES+APCI)，m/z：284.1(M+H)⁺，282.0(M-H)^-

实施例3

5-氯-N-(4-(4-***啉基)苯基)-2-羟基苯甲酰胺

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ10.41(s，1H)，7.99(d，J＝2.0Hz，1H)，7.54(d，J＝8.8Hz，2H)，7.43～7.46(m，1H)，6.94～6.99(m，3H)，

MS(ES+APCI)，m/z：333.0(M+H)⁺，331.2(M-H)^-

实施例4

5-氯-N-(4-腈苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(4-cyanophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.48(s，1H)，10.66(s，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.80～7.82(m，2H)，7.44～7.47(m，1H)，7.00(d，J＝8.8Hz，1H)

MS(APCI)，m/z：279.1(M+H)⁺，271.0(M-H)^-

实施例5

5-氯-N-(4-三氟甲基苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-(4-(trifluoromethyl)phenyl)benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ10.66(s，1H)，7.93(d，J＝7.6Hz 2H)，7.88(d，J＝2.8Hz，1H)，7.74(d，J＝8Hz，2H)，7.46～7.49(m，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H)

MS(APCI)，m/z：316.0(M+H)⁺，314.0(M-H)^-

实施例6

5-氯-N-(3.5-二氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(3，5-difluorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ10.61(s，1H)，7.81(d，J＝2.4Hz 1H)，7.46～7.50(m，3H)，6.98～7.04(m，2H)，

MS(APCI)，m/z：284.0(M+H)⁺，282.0(M-H)^-

实施例7

5-氯-N-(3-氯-4-氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(3-chloro-4-fluorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.60(s，1H)，10.50(s，1H)，8.01～8.03(m，1H)，7.87(s，1H)，7.64～7.66(m，1H)，7.41～7.48(m，2H)，7.02(d，J＝8.8Hz 1H)

MS(APCI)，m/z：300.0(M+H)⁺，298.0(M-H)^-

实施例8

5-氯-N-(3-乙炔苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(3-ethynylphenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.69(s，1H)，10.45(s，1H)，7.91(d，J＝9.2Hz，1H)，7.72(d，J＝8.0Hz 1H)，7.49(d，J＝2.4Hz 1H)，7.38～7.42(m，1H)，7.26(d，J＝7.6Hz 1H)，7.03(d，J＝8.8H，1H)，4.22(s，1H)

MS(APCI)，m/z：272.0(M+H)⁺，270.0(M-H)^-

实施例9

5-氯-N-(3，4，5-三氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-(3，4，5-trifluorophenyl)benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)，δ11.47(s，1H)，10.63(s，1H)，7.82(s，1H)，7.68～7.72(m，2H)，7.47～7.49(m，1H)，7.02～7.07(m，1H)

MS(APCI)，m/z：302.1(M+H)⁺，300.0(M-H)^-

实施例10

5-氯-2-羟基-N-(3，4，5-三甲基苯基)苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-mesitylbenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ12.36(s，1H)，10.03(s，1H)，8.06～8.09(mt，1H)，7.49～7.51(m，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz 1H)，6.95(s，2H)，2.26(s，3H)，2.14(s，6H)

MS(APCI)，m/z：290.0(M+H)⁺，288.1(M-H)^-

实施例11

5-氯-N-(3-氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(3-fluorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.62(s，1H)，10.51(s，1H)，7.87(s，1H)，7.69(d，J＝11.6Hz，1H)，7.45(d，J＝7.2Hz，2H)，7.37～7.41(t，1H)，7.00(d，J＝8.4Hz，1H)，6.93～6.95(m，1H)

MS(APCI)，m/z：266.0(M+H)⁺，264.0(M-H)^-

实施例12

5-氯-N-(2，3，4-三氟苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-(2，3，4-trifluorophenyl)benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ12.13(s，1H)，10.67(s，1H)，7.92(s，1H)，7.88(d，J＝5.6Hz，1H)，7.48(d，J＝8.8Hz 1H)，7.33～7.38(m，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H).

MS(APCI)，m/z：300.0(M+H)⁺，302.1.0(M-H)^-

实施例13

5-氯-N-(4-溴苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(N-(4-bromophenyl)-5-chloro-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ10.48(s，1H)，7.91(d，J＝2.4Hz，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，2H)，7.55(d，J＝8.8Hz，2H)，7.44～7.47(m，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz，1H)

MS(APCI)，m/z：326.0(M+H)⁺，324.0(M-H)^-

实施例14

5-氯-N-(4-甲基苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(N-(4-bromophenyl)-5-chloro-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.98(s，1H)，10.35(s，1H)，7.98(d，J＝2.4Hz，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，2H)，7.45～7.47(m，1H)，7.18(d，J＝8.0Hz，2H)

7.01(d，J＝8.8Hz，1H)

MS(APCI)，m/z：262.0(M+H)⁺，260.1(M-H)^-

实施例15

5-氯-N-(4-氮吡啶基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-(pyridin-4-yl)benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.25(s，1H)，8.61，(s，2H)，8.00，(s，2H)，7.83，(s，1H)，7.46，(d，J＝8.4Hz，1H)，7.22(d，J＝8.4Hz 1H)

MS(APCI)，m/z：249.0(M+H)⁺，247.0(M-H)^-

实施例16

5-氯-N-(2-氯-4-三氟甲基苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(2-chloro-4-(trifluoromethyl)phenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ12.40(s，1H)，11.14(s，1H)，，8.71(d，J＝8.8Hz，1H)，7.95(d，J＝2.8Hz，2H)，7.72～7.76(m，1H)，7.49～7.54(m，1H)，7.08(d，J＝8.8Hz，1H)

MS(APCI)，m/z：349.9(M+H)⁺，348.0(M-H)^-

实施例17

5-氯-N-(4-氯苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(4-chlorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)，δ11.67(s，1H)，10.45(s，1H)，7.90(s，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz 2H)，7.40～7.46(t，2H)，7.00(d，J＝8.8Hz，1H).

实施例18

5-氯-N-(2，4-二氯苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(2，4-dichlorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)，δ12.29(s，1H)，10.92(s，1H)，8.44(d，J＝9.2Hz，1H)，7.98(d，J＝2.4Hz，1H)，7.75(d，J＝1.6Hz，1H)，7.48～7.51(m，2H)，7.08(d，J＝8.4Hz 1H).

MS(ES+APCI)，m/z：315.9(M+H)⁺，313.9(M-H)^-

实施例19

5-氯-N-(3-氯苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(3-chlorophenyl)-2-hydroxy

benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)，δ11.61(s，1H)，10.50(s，1H)，7.89～7.92(m，2H)，7.61～7.63(m，1H)，7.46～7.49(m，1H)，7.39～7.43(m，1H)，7.20～7.22(m，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H)

MS(ES+APCI)，m/z：282.0(M+H)⁺，280.0(M-H)^-

实施例20

5-氯-N-(4-甲氧基苯基)-2-羟基苯甲酰胺

5-(chloro-2-hydroxy-N-(4-methoxyphenyl)benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ12.08(s，1H)，10.32(s，1H)，8.01(d，J＝2.8Hz，1H)，7.60(d，J＝8.8Hz，2H)，7.45～7.48(m，1H)，7.00(d，J＝8.8Hz，1H)，6.96(d，J＝8.8Hz，2H)，3.76(s，3H)

MS(ES+APCI)，m/z：278.0(M+H)⁺，276.0(M-H)^-

实施例21

5-氯-N-(3-甲氧基苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-(3-methoxyphenyl)benzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.81(s，1H)，10.38(s，1H)，7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，7.46～7.47(m，1H)，7.40(s，1H)，7.25～7.31(m，2H)，7.01～7.06(t，1H)，6.72～6.75(m，1H)，3.77(s，3H)

MS(ES+APCI)，m/z：278.0(M+H)⁺，276.0(M-H)^-

实施例22

5-氯-N-苄基-2-羟基苯甲酰胺

(N-benzyl-5-chloro-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ12.50(s，1H)，9.37～9.40(t，1H)，7.99～8.00(d，J＝2.4Hz，1H)，7.44～7.47(m，1H)，7.35(d，J＝4.4Hz，4H)，7.26～7.29(m，1H)，6.96(d，J＝8.8Hz 1H))，4.52(d，J＝5.6Hz，2H)

MS(ES+APCI)，m/z：262.0(M+H)⁺，260.0(M-H)^-

实施例23

5-氯-N-苯基-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-2-hydroxy-N-phenylbenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)，δ11.86(s，1H)，10.40(s，1H)，7.98(s，1H)，7.70(d，J＝7.6Hz，2H)，7.47～7.49(m，1H)，7.36～7.40(m，2H))，7.17(d，J＝3.2Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，1H).

MS(ES+APCI)，m/z：248.0(M+H)⁺，246.0(M-H)^-

实施例24

5-氯-N-(2-氯苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(2-chlorophenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)，δ11.73(s，1H)，8.45(s，1H)，8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(s，1H)，7.41～7.47(m，2H)，7.34～7.37(m，1H)，7.14～7.18(m，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz，1H).

实施例25

5-氯-N-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(5-chloro-N-(4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl)-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.47(s，1H)，10.65(s，1H)，8.29(s，1H)，7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.85(d，J＝1.6Hz，1H)，7.71(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45～7.47(m，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz，1H).

实施例26

5-氯-N-(1H-1，2，4三氮唑苯基)-2-羟基苯甲酰胺

(N-(4-(1H-1，2，4-triazol-1-yl)phenyl)-5-chloro-2-hydroxybenzamide)

合成方法如实施例1。

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)，δ11.94(s，1H)，11.74(s，1H)，10.55(s，1H)，9.24(s，1H)，8.21(s，1H)，7.84～7.93(m，4H)，7.46(d，J＝7.6Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，1H).

实施例27

用不同浓度的化合物(1×10^-8～1×10^-5M)分别处理A549(肺腺癌)、Du145(***癌)、Hela(***)、HepG2(肝癌)、OS-RC-2(肾癌)、结肠癌(HT-29)等肿瘤细胞，72小时后MTT，再孵育4小时，然后用酶标仪测定其在570nm的吸光值。结果发现，化合物处理可明显降低各种细胞对MTT的吸收，说明化合物可显著抑制这些细胞的增殖，抑制率与药物浓度成正相关。根据化合物对这些肿瘤细胞的生长抑制作用，我们计算出化合物对肿瘤细胞细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)为1×10^-8～1×10^-5M。参见图1-图10和表1和表2。

表1.部分化合物对不同肿瘤细胞生长抑制的IC₅₀(μM)

表2.氯硝柳胺(B037)对不同肿瘤细胞生长抑制的IC₅₀(μM)

细胞系	A549(肺腺癌)	L-78(肺鳞癌)	Du145(***癌)	PC3(***癌)	KB(口腔癌)	A431(表皮细胞癌)
							B037 IC50(μM)	2.8	0.6	0.8	6.7	0.5	8.4
细胞系	MCF-7(乳腺癌)	HT-29(结肠癌)	HT-1080(人纤维肉瘤)	HepG2(肝癌)	OS-RC-2(肾癌)	Hela(***)
							B037 IC50(μM)	2	7.4	3	1.1	1.9	1.2

实施例28

用不同浓度的氯硝柳胺(1×10^-8～1×10^-5M)处理Du145(***癌)细胞，分别在处理后12、24、36、48小时取细胞用PI(碘化丙啶)处理，然后用流式细胞仪检测，发现氯硝柳胺能明显的延长Du145细胞的G1期，并且G1期随着药物浓度的增大而变长(表3.)。

表3.氯硝柳胺(B037)对***癌细胞Du145细胞周期的影响

实施例29

肿瘤细胞Du145或HepG2按标准细胞培养方法培养在六孔板中，所用培养基为ATCC推荐用培养基，含10％FCS。

细胞生长至80-90％时，将培养基换成相应的无血清培养基，血清饥饿16-24小时后，培养基中加入不同浓度的D147或溶媒对照。药物处理两小时后，在培养基中加入EGF(终浓度为100ng/ml)处理30分钟后，吸去培养基，用4℃预冷的1XPBS(pH7.2)清洗，向培养孔中加入0.1ml的1XSDS样品缓冲液裂解细胞，迅速用细胞刮刮起细胞，收集细胞裂解液到1ml的Eppendorf管中，对细胞裂解液进行超声处理以降低裂解液的粘度，随后将细胞裂解液在95℃煮沸5分钟，使蛋白彻底变性，放冷后，将细胞裂解液离心，将上清转移至另一Eppenforf管中，以此为细胞样品液。30μl细胞样液经12.5％的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离，随后将分离好的蛋白经凝胶经湿法转移至PVDF膜上。转移完毕后，将膜用含5％脱脂奶粉的1XTBST室温封闭一小时，用1XTBST请洗3次，5分钟/次，将膜同适当稀释的一抗(MEK，pMEK，Erk，pErK，STAT3，pSTAT3，CyclinD3，CyclinE，CyclinB1，Caspase3，Caspase9，GAPDH等)稀释液敷育，室温或4℃过夜，再将膜用1XTBST清洗3次，5分钟/次，随后将膜同适当稀释的HRP标记的二抗稀释液孵育，室温1小时。随后将膜用1XTBS清洗3次，5分钟/次，然后按Apharmsham ECL PLUS DETECTION SYSTEM的手册上ECL检测方法检测膜上结合的蛋白。western blot试验表明B037选择性降低Cyclin D3的水平，而对Cyclin E的水平不产生影响(图11)；B037选择性抑制STAT3的磷酸化，而对MAPK信号通路节点蛋白Raf、MEK、ErK的磷酸化不产生影响(图12)。

1XSDS样品缓冲液：62.5mM Tris-HCl(pH6.8)，2％w/v SDS，10％glycerol，50mM DTT，0.01％bromophenol blue

1XTBST：50mM Tris-HCl，pH7.4，150mM NaCl，0.1％Tween-20.

一抗稀释液：1XTBST，含0.05％Tween-20，5％BSA.

二抗稀释液：1XTBST，5％脱脂奶粉。

实施例30

(细胞划痕实验)

将OS-RC-2细胞接种于六孔板，用含10％FBS的1640培养基培养。当细胞的汇合度达到80％-90％的汇合度时，用灭菌的枪头在细胞层的中间划痕。随后用PBS清洗两次去除悬浮的细胞，再用含0.25％DMSO或含0.5μM，1.0μM，2.5μM B037的1640培养基继续培养36小时。通过比较0小时和36小时各处理组划痕区的三个标记区域的相差显微照片，分析B037对细胞的增殖及迁移能力的影响。划痕修复试验表明B037剂量依赖性地抑制OS-RC-2肿瘤细胞的增殖和迁移(图13)。

Claims (9)

1.具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，作为JAK-STAT3信号通路抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，

其中：

以下的a为0或1；b为0或1；n任选为0，1，2或3；

Ar为不含或含有氮、硫、或氧杂原子的芳香环；

R₁任选自：

1)H；

2)卤素(F，Cl，Br，I)；

3)O_aC₁-C₆烷基；

4)O_aC₁-C₆环烷基；

5)O_aC₁-C₆杂环基；

6)O_aC₀-C₈-NR₃R₄；

所述烷基、环烷基、和杂环基任选被0个或1个或多个选自R₃的取代基取代；

R₂为Ar上的0～5个取代基，每个取代基分别任选自：

1)H；

2)卤素；

3)(CO)_bO_aC₁-C₆烷基；

4)(CO)_bO_aC₁-C₆环烷基；

5)(CO)_bO_aC₁-C₆杂环基；

6)(CO)_bO_aC₀-C₈-NR₃R₄；

7)C₁-C₃全氟或部分氟代烷基

8)(C＝O)_aNR₆R₅；

9)OH；

10)CN；

11)NO₂；

12)SO₂NR₃R₄；

13)COOH；

所述烷基、环烷基、和杂环基任选被0个或1个或多个选自R4的取代基取代；

R₃和R₄各自独立选自：

1)H；

2)(C＝O)_aO_bC₁-C₆烷基；

3)(C＝O)_aO_b芳基；

4)O_bC₁-C₃全氟或部分氟代烷基；

5)(C＝O)_aO_bC₃-C₆环烷基；

6)(C＝O)_aO_b杂环基；

所述烷基、芳基、环烷基、和杂环基任选被0～3个选自R₃的取代基取代；或者R₃和R₄以及连接它们的原子形成一个4～7元的单环或每个环为4～7元的双环，并任选含有1～3个选自N、O和S的杂原子，所述单环或双环任选被一个或多个选自R₃的取代基取代。

2、根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述式I化合物的Ar为苯基。

3、根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述式I化合物的Ar为苯基，n为0。

4、根据权利要求3所述的应用，其特征是，所述应用为氯硝柳胺及其药学上可接受的盐作为JAK-STAT3信号通路抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

5、根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述化合物具有以下式II～IV结构之一：

R₁～R₄的定义与权利要求1中的R₁～R₄相同。

6、根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征是，所述具有式I的化合物或其药学上可接受的盐的有效浓度是1×10^-8～1×10^-5M。

7、根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征是，所述肿瘤为以下中的任一种：组织细胞性淋巴癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、***癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、***癌、鼻咽癌、表皮细胞癌、宫茎癌、口腔癌、人纤维肉瘤、白血病。

8、一种抗肿瘤药用组合物，其特征是：包括有权利要求1中式I所示的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体。

9、根据权利要求8所述的抗肿瘤药用组合物，其特征是：还包含有选自以下化合物中的一种或多种：***受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞抑制剂、抗增殖剂、蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白激酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、细胞增殖及生存信号抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂。

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