CN103432184B - 牛蒡子提取物在制药或食品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种牛蒡子提取物作为制备防治抑郁症的药物或食品中的新用途。经药效试验表明，牛蒡子提取物具有较好的抗抑郁作用及抑郁症引起的继发性学习记忆下降，快感缺乏等症状的影响，可用于制备预防和治疗抑郁症的药物或食品中。所述食品是保健品或食品添加剂。药物可制成医学上可以接受的片剂、颗粒剂、胶囊剂或复方制剂等。该牛蒡子提取物经过22例抑郁症患者服用观察，有效率达90.1%。

Description

牛蒡子提取物在制药或食品中的应用

技术领域

本发明属于药品和食品领域，涉及牛蒡子提取物在制药或食品中的应用，特别是指牛蒡子提取物在防治抑郁症的药物或食品中的新用途。

背景技术

抑郁症是以意志消沉，思维迟钝，语言减少等为主要表现的精神障碍性疾病，其发病趋势逐年上升，是精神科***率最高的疾病。随着社会竞争的日益激烈，人们的生理和心理压力越来越大，抑郁症已成为现代社会的常见病、多发病。据世界卫生组织统计，全球抑郁症发病率约11%，目前位居世界第四大疾病。预计到2020年，抑郁症将成为给社会造成严重负担的第二大疾病（仅次于心血管疾病）。目前抑郁症的治疗仍首选西药，但毒副作用大，药价高及易复发等缺陷。所以研发高效、低毒及副作用小的防治抑郁症的药物已成为国际关注的课题。

牛蒡子来源于菊科牛蒡属牛蒡(Arctium lappa L)的干燥成熟的果实，为传统中药。其具有疏风散热、宣肺透疹、解毒利咽、滑肠通便之功效。牛蒡苷及其苷元为牛蒡子的主要活性成分，属于木脂素类化合物。现代药理研究表明，具有抗肿瘤、抗癌、降血糖、降血压、抗菌、抗病毒、抗过敏、抗炎、抗热休克以及增强机体免疫力等作用。

目前有关牛蒡子提取物制备及其用途方面的公开专利已有多项，大多是糖尿病或糖尿病肾病、糖尿病并发症、肾炎、******功能障碍、骨髓抑制等治疗方面的新用途。〔如CN102342929A; CN101766668A; CN1569019A; CN101007036A; CN1864705A; CN1491674; CN101081226A; CN102626417A等。但是牛蒡子提取物抗抑郁作用的研究，国内外尚未有文献及专利报道。

发明内容

本发明的目的在于提供牛蒡子提取物在制药或食品中的应用，特别是提供一种牛蒡子提取物作为制备防治抑郁症的药物或食品中的新用途，它具有预防与治疗各种原因引起的抑郁症及其继发的学习记忆下降、快感缺乏等作用。

本发明的技术方案为：

    牛蒡子提取物在制备防治抑郁症的药物或食品中的应用。

所述食品是保健食品或食品添加剂。

所述药物制剂的制备方法可以采用制药领域的常规方法，根据需要使用常规的药用辅料，制成各种剂型。如：为片剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸、分散片、口服崩解片、丸剂、口服液或复方制剂等。

本发明提供牛蒡子提取物的制备方法，该方法是采用制药工业常规的工艺方法制得：将牛蒡子切碎，加入牛蒡子重量5～10倍量的水或10～95%乙醇，回流提取2-3次，每次1-2h，合并滤液，减压浓缩至50～70℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，减压干燥或冷冻干燥得干浸膏，粉碎，得到牛蒡子提取物。

本发明提供的牛蒡子提取物的使用量一般以干品计，在药物、保健食品或食品添加剂的各种成品中占0.001～100%的重量比。当制备饮料时所添加浓度一般在0.1～50(W/W)范围。

    牛蒡子提取物，可以取其浸膏状的提取物或粉末状干品添加到辅料等制品中用于口服，也可以和其他的药材一起作为复方制剂服用。牛蒡子提取物食品还可以考虑制成糖果类、口香糖类、点心类等日常食品。

    通过小鼠急性毒性实验发现，未出现小鼠死亡现象，无中毒现象。

牛蒡子提取物作为制备防治抑郁症的药物或食品中的新用途，在预防与治疗各种原因引起的抑郁症及其继发的学习记忆下降、快感缺乏等方面效果显著。本发明牛蒡子提取物经过22例抑郁症患者服用观察，有效率达90.1%，无不良反应。

具体实施方式

以下结合具体情况，对本发明的具体实施方式做详细说明，但并不意味着对本发明的任何限制。

实施例1

牛蒡子提取物的制备

取牛蒡子1.0kg，粉碎，加70%乙醇回流提取2次，第一次加入10倍量，第二次加8倍量溶剂，每次回流提取2.0h，合并提取液，滤过，离心(1000rpm, 5min.)分离，减压回收乙醇（50～70℃、0.06～0.08MPa）并浓缩至相对密度为1.10的浸膏，减压干燥得干浸膏粉116g。

实施例2

牛蒡子提取物在药品中的应用

   牛蒡子冲剂的制备：取牛蒡子2.0kg，粉碎，加70%乙醇回流提取2次，第一次加入10倍量，第二次加8倍量溶剂，每次回流提取2.0h，合并提取液，滤过，离心(1000rpm, 5min.)分离，减压回收乙醇（50～70℃、0.06～0.08MPa）并浓缩至相对密度为1.05～1.15的浸膏。取浸膏1份，蔗糖2份，糊精1份均匀混合，制成软材，挤压过筛（10～15目）制成颗粒，60℃干燥，整粒，分装成200包，每包10g，相当于每袋含牛蒡子提取物1.0g。

实施例3

 牛蒡子提取物在食品中的应用

牛蒡子糖：牛蒡子提取物10.0g，赤砂糖50.0g，食用熟油和香精少许，制成牛蒡子糖20粒。

实施例四4

牛蒡子提取物对小鼠获得性绝望模型及对药物诱导抑郁状态的影响

1. 受试药物

牛蒡子提取物临用之前将其混悬于1%羧甲基纤维素钠（1%CMC-Na）0.5%吐温-80（0.5%Tween-80）中溶解备用。

阳性对照药物：利培酮（齐鲁制药有限公司，批号：903021k4），临用前用1%CMC-Na、0.5%Tween-80中溶解备用。

利血平：（广东帮民制药厂有限公司，批号：110605）。

动物

实验动物采用清洁级雄性昆明小鼠，体重22±2克。由延边大学动物室提供，合格证编号：SCXK(吉2011-007)。室温20-22℃，自由取食和饮水。

试验方法

3. 对行为绝望的影响

①    小鼠悬尾实验

动物随机分4组，即空白对照组；牛蒡子提取物750mg/kg及1500mg/kg两个剂量组；阳性药利培酮组。每组10只。按0.1ml/10g剂量给小鼠灌胃给药，每天一次，连续给药14天。末次灌胃给药1 h后，将小鼠尾尖部约2 cm处用胶布贴于细绳上并倒吊悬挂于距地面1.2 m的横杆上，使其头部距离地面约15 cm。悬挂总时间为6 min，统计后4 min内的累计不动时间（s）。

②    小鼠强迫游泳实验

动物分组与给药方法同①。

末次给药1h后，将小鼠单独放入直径14 cm，深20cm的圆柱形玻璃钢中，缸内水深10 cm，水温为23±2 ℃。从小鼠入水后记时6 min，记录比较各组后4 min内小鼠的累计不动时间（s）。

对利血平致小鼠抑郁模型的影响

动物随机分5组，即空白对照组、模型组、牛蒡子提取物组（750mg/kg及1500mg/kg两个不同剂量）、阳性药利培酮组。每组10只。按0.1ml/10g剂量给小鼠灌胃给药21天，每天一次。

除了空白对照组外，其它各组小鼠末次灌胃给药1 h后，尾静脉注射利血平2mg/kg，2h后测定小鼠肛温，计算两次体温的平均值。6h后将小鼠腹部朝上仰卧放置在平台上，实验中保持室温恒定在20-22℃，记录15s内不能将***翻正过来的动物数，计算小鼠运动不能率（各组15s内不能将***翻正过来的动物数/各组动物总数x100%）。

数据统计处理

试验结果用平均值±标准方差（x±SD）表示，用SPSS17.0统计软件，选用单因素方差分析(one-way ANOWA)，采用LSD法进行多重比较，组间比较采用独立样本t检验。小鼠运动不能率观测的组间比较采用X 2检验。以p<0.05判断为有统计学意义。

结果

6.1 对行为绝望的影响

    实验结果如表1、2所示，与溶媒对照组相比，牛蒡子提取物（750、1500mg/kg）可显著缩短悬尾实验及强迫游泳实验中小鼠不动时间。

 ①  对小鼠悬尾实验结果：

表1牛蒡子提取物对小鼠悬尾不动时间的影响（n=10,                                                ±SD）。

注：与空白对照组比较 ^★ P<0.05, ^★★ P<0.01

②对小鼠强迫游泳实验结果：

表2牛蒡子提取物对小鼠强迫游泳不动时间的影响（n=10,±SD）

注：与空白对照组比较 ^★ P<0.05， ^★★ P<0.01

6.2 对利血平诱导小鼠抑郁状态的影响：

实验结果如表3所示，与正常空白对照组相比，模型组经利血平注射后出现非常显著的抑郁症状，表现为运动不能、体温下降等。牛蒡子提取物（750、1500mg/kg）与模型组相比，可显著拮抗利血平诱导的体温下降、运动不能作用。

表3牛蒡子提取物对利血平诱导的小鼠体温下降及运动不能的影响（n=10,±SD）

注与空白对照组比较^▼▼P<0.01；与模型组比较  ^★★P<0.01；^★★★P<0.001

实施例5

对慢性应激抑郁小鼠的影响

1、  受试药物同上

2、动物动物分组与给药

动物随机分为正常对照组、模型组：慢性应激+溶媒组、慢性应激+给药组及慢性应激+阳性对照组。自造模第一天起灌胃给药21～42天，每天一次。

、试验方法

3.1慢性抑郁模型的建立

小鼠（正常对照组除外）每天随机给与不同的应激刺激，包括：禁食12h、禁水12h、夹尾1min、冷或热吹风5min、昼夜颠倒、潮湿饲养12h、悬吊5min、放入冷水1min等意想不到的刺激，平均每种刺激各3次。

对行为绝望的影响

①小鼠悬尾实验

在连续灌胃给药与慢性应激刺激28天，末次给药1 h后，测定动物对行为绝望的影响。

动物随机分4组，每组10只。模型组（溶媒组）；给药组：牛蒡子提取物750mg/kg及1500mg/kg两个剂量组；阳性对照组：利培酮组。每组10只。按0.1ml/10g剂量给小鼠灌胃给药14天，每天一次。

末次灌胃给药1 h后，将小鼠尾尖部约2 cm处用胶布贴于细绳上并倒吊悬挂于距地面1.2 m的横杆上，使其头部距离地面约15 cm。悬挂总时间为6 min，统计后4 min内的累计不动时间（s）。

②    小鼠强迫游泳实验

动物分组与给药方法同①。

末次给药1h后，将小鼠单独放入直径14 cm，深20cm的圆柱形玻璃钢中，缸内水深10 cm，水温为23±2 ℃。从小鼠入水后记时6 min，记录比较各组后4 min内小鼠的累计不动时间（s）。

对抑郁症继发的快感缺乏的影响

在连续灌胃给药与慢性应激刺激21天，末次灌胃给药1 h后测定每组动物1h内的1%蔗糖水消耗量。

对抑郁症继发的学习记忆下降的影响

①定位航行实验（place navigation）

历时5d，实验前1天不放置平台，让小鼠自由游泳2min。正式实验室将平台固定在SE象限，位于水面下1.5cm，水温稳定在。每天测试4次，每次从不同的入水点将动物面向池壁放入水中，检测时间为60s，在平台停留2s则算寻台成功，将动物从入水到寻台成功所需的时间记作逃避潜伏期，若60s内为找到平台则潜伏期记为60s。每次测试前先将动物置于平台停留15s，测试完毕不论是否成功均适应10s。

在连续灌胃给药与慢性应激刺激42天，末次灌胃给药1 h后，进行水迷宫实验，一共进行4天训练，测定每天潜伏期平均值，以评价动物空间记忆的获得能力。

②空间搜索实验（spatial probe）

定位航空实验结束次日，拆除平台，选择NW象限作为入水象限，通过动物在60s内传过元平台位置的次数，来评价动物的空间探索记忆能力

4、数据统计处理

同上。

、结果

5.1 对行为绝望的影响

在连续灌胃给药与慢性应激刺激28天，末次灌胃给药1 h后，测定动物对行为绝望的影响。实验结果如表4所示，与正常对照组相比，模型组显著延长悬尾实验及强迫游泳实验中小鼠不动时间，表明慢性抑郁模型造模成功。

牛蒡子提取物（750、1500mg/kg）与模型组相比，可显著缩短悬尾实验及强迫游泳实验中小鼠不动时间，且呈现一定的量效关系。

表4 对行为绝望的影响（n=10, ±SD）

注：模型组与正常对照组比较 ^▼ P<0.05, ^▼▼P<0.01；

与模型组比较 ^★ P<0.05, ^★★P<0.01。

对抑郁症继发的快感缺乏的影响

在连续灌胃给药与慢性应激刺激28天，末次灌胃给药1 h后测定每组动物1h内的1%蔗糖水消耗量。试验结果如表5所示，与正常对照组相比，模型组显著减少蔗糖水消耗量，表明慢性抑郁模型造模成功。

牛蒡子提取物（750、1500mg/kg）与模型组相比，可显著增加蔗糖水消耗量，且呈现一定的量效关系。

表5 药物对抑郁症继发的快感缺乏的影响（n=10,±SD）

注：模型组与正常对照组比较 ^▼ P<0.05；与模型组比较 ^★ P<0.05。

对抑郁症继发的学习记忆下降的影响

①定位航行实验（place navigation）

在连续灌胃给药与慢性应激刺激42天，末次灌胃给药1 h后，进行水迷宫实验，一共进行4天训练，测定每天潜伏期平均值，以评价动物空间记忆的获得能力，结果见表6。

表6 小鼠在Morris水迷宫中的逃避潜伏期（n=10, ±SD）

注：模型组与正常对照组比较 ^▼ P<0.05，^▼▼ P<0.00；与模型组比较 ^★ P<0.05。

②空间搜索实验（spatial probe）

定位航空实验结束次日，拆除平台，选择NW象限作为入水象限，通过动物在60s内传过元平台位置的次数，来评价动物的空间探索记忆能力，结果见表7。

表7 在Morris水迷宫实验第5天中的空间探索能力（n=10, ±SD）

注：模型组与正常对照组比较 ^▼▼▼ P<0.001；与模型组比较 ^★★ P<0.01.

以上的动物实验是对本发明的进一步详细说明，但并不意味着对本发明的任何限制。

实施例6

牛蒡子提取物治疗抑郁症22例临床疗效观察

1.      资料与方法

1.1 研究对象：所有病例均为延边大学附属医院2011年6月-2012年12月门诊患者，符合中国精神障碍分类与诊断标准第3版（CCMD-3）抑郁症诊断标准，17项汉密尔顿抑郁量表（HAMD）总分≥18分。共观察22例抑郁症患者，男12例，女10例，平均年龄分别为33.5±9.2岁。

1.2 治疗方法：治疗组给与牛蒡子冲剂（牛蒡子提取物），每袋10g，每次1袋，每天3次口服。1个月为1疗程，连续服用3个疗程。

1.3 疗效观察指标：以HAMD量表评分的变化来判断疗效，以治疗前后HAMD量表总分相比减分率≥50%为有效，减分率≤50%为无效，HAMD总分≤7分为治愈。

2. 结果：该牛蒡子提取物经过22例抑郁症患者服用观察，有效率达90.9%，

未见任何不良反应。

结论：以上实验证明：牛蒡子提取物具有明显的抗抑郁作用，因而可以用于制备防治抑郁症的药物或食品中。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.牛蒡子提取物在制备防治抑郁症的药物或食品中的应用，其中的牛蒡子提取物按以下制备方法制得：将牛蒡子切碎，加入牛蒡子重量5～10倍量的水或10~95%乙醇，回流提取2-3次，每次1-2h，合并滤液，减压浓缩至50～70℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，减压干燥或冷冻干燥得干浸膏，粉碎，得到牛蒡子提取物，其中，牛蒡子提取物是唯一活性成分。

2.根据权利要求1所述的牛蒡子提取物在制备防治抑郁症的药物或食品中的应用，其特征在于所述药物的制剂为片剂、颗粒剂或胶囊剂。 

3.根据权利要求1所述的牛蒡子提取物在制备防治抑郁症的药物或食品中的应用，其特征在于所述食品是保健食品或食品添加剂。