天麻有性繁殖萌发菌三级种的培养基及培育方法
技术领域
本发明属于菌种培育方法技术领域,具体涉及一种天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,本发明还涉及一种天麻有性繁殖萌发菌三级种的培养基。
背景技术
天麻为多年生草本植物,分布于我国大部分地区。其干燥块茎是一味常用而较名贵的中药,临床多用于头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫、抽搐、破伤风等症。天麻的获得过去一直依赖野生资源,20世纪70年代野生变家种成功后,家种天麻成为主要商品来源。天麻已被世界自然保护联盟评为易危物种,并被列入《濒危野生动植物物种国际贸易公约》的附录Ⅱ中,同时也被列入我国《国家重点保护野生植物名录(第二批)》中,为Ⅱ级保护植物,是治疗心脑血管疾病药物的主要原料之一。
天麻生于腐殖质较多而湿润的林下,向阳灌丛及草坡亦有。天麻在我国普遍栽培,分布较广,家种天麻主产于陕西南部、四川北部、湖北西部等地。天麻通常采用块茎繁殖,但是由于受杂菌影响,会出现逐代退化现象,产量低而不稳定,极大的影响天麻生产。生产天麻的另一种方法就是采用种子有性繁殖,但是自然条件下,天麻种子有性繁殖发芽率低,仅为1%。天麻有性繁殖种子萌发须依靠萌发菌供给营养,在萌发菌的作用下可提高天麻种子萌芽率,且有利于形成天麻圆球茎,并生长成为常见的天麻块茎。国内已探明的天麻种子萌发菌有紫萁小菇、石斛小菇、兰小菇和开唇兰小菇,其中石斛小菇在天麻人工种植中应用较多。
目前在天麻有性繁殖萌发菌的培育过程中,常采用锯末屑、白糖、麸皮、淀粉等混合而成的坯料作为培养基,这种粉末状混合培养基通常由于杂菌侵袭以及水分太多不易控制,影响萌发菌的生长,且培养基料成分复杂,工艺过程繁琐,制作成本较高。
专利名称:天麻萌发菌种的培养基,申请日:2010.11.04,公开号:CN102153377A,公开日:2011.08.17,公布了一种天麻萌发菌种的培养基配方,该培养基采用青木树果子为主要原料,与麦麸、锯末、食糖、淀粉混合而成,这种基料虽然可以使得天麻种子萌发率有了大幅度提高,但是存在青木树果子获取受季节限制,不能随时采摘,不易获取,基料配方复杂的缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,解决了现有的天麻有性繁殖萌发菌培育过程中杂菌干扰严重以及配方复杂的问题。
本发明的另一个目的在于提供一种天麻有性繁殖萌发菌三级种的培养基,解决了现有的培养基基料配方复杂,成本高的问题。
本发明所采用的技术方案是:天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,包括如下步骤:
第一步,备料
采摘青冈木树叶,并晾干备用;
第二步,浸泡
将第一步中的青冈木树叶置于清水中浸泡20~30小时;
第三步,沥水
捞出第二步制得的青冈木树叶,置于干燥处沥水,使得青冈木树叶中水份含量为65%~70%;
第四步,拌料
将经过第三步处理的青冈木树叶与含水量62%~68%的木屑按照质量比为4:1的比例进行混合,并搅拌均匀,制得混合料;
第五步,装袋
将第四步制得的混合料装入菌种袋中,装入量为菌种袋容量的80%~82%;
第六步,覆盖
将第五步的菌种袋的剩余空间装满木屑,木屑覆盖于所述混合料的顶层;
第七步,灭菌
将经过第六步处理的菌种袋放入灭菌室中,灭菌室的温度设置为124~125℃,灭菌室的压强设置为0.14~0.15MPa,进行灭菌处理3小时;
第八步,冷却
将经过第七步处理的菌种袋放入温度不高于18℃的室内,冷却3~5小时,使得菌种袋的温度不高于20℃;
第九步,接入二级母种
在无菌环境下将天麻有性繁殖萌发菌原种接入菌种袋中;
第十步,培养
将经过第九步处理的菌种袋放置于温度为20~24℃的培养室中培养40~50天,制得天麻有性繁殖萌发菌三级种。
本发明的特点还在于,
第九步中的天麻有性繁殖萌发菌原种为紫萁小菇、石斛小菇、兰小菇或开唇兰小菇中的一种。
本发明所采用的另一个技术方案是:天麻有性繁殖萌发菌三级种的培养基,按照质量百分比由以下原料组成:72%~76%的青冈木树叶,24%~28%的木屑,以上各组分的质量之和为100%。
本发明的特点还在于,
青冈木树叶的水份含量为65%~70%。
木屑的水份含量为62%~68%。
本发明的有益效果是:本发明的天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法采用青冈木树叶作为培养基料的主要原料,将青冈木树叶与木屑混合,形成培养基料,在萌发菌生长初期木屑为萌发菌的生长提供足量养分,提高萌发菌成活率,随着萌发菌的生长,青冈木树叶含有足量养分,可长时间、持续为萌发菌生长提供养分,保证萌发菌快速生长,同时,青冈木树叶获取容易,且新鲜的青冈木树叶杂菌滋生少,可有效减小萌发菌培养过程中杂菌的侵袭。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
天麻有性繁殖萌发菌三级种的培养基,按照质量百分比由以下原料组成:72%~76%的青冈木树叶,24%~28%的木屑,以上各组分的质量之和为100%。其中木屑为任意树种的木材制得的木屑,青冈木树叶以及木屑的获取都十分容易,培养基的组成配方简单,成本低,并且青冈木树叶的杂菌滋生少,十分有利于天麻有性繁殖萌发菌的培养。
实施例1
天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,包括如下步骤:
第一步,备料
采摘青冈木树叶,并晾干备用;
第二步,浸泡
将第一步中的青冈木树叶置于清水中浸泡20小时;
第三步,沥水
捞出第二步制得的青冈木树叶,置于干燥处沥水,使得青冈木树叶中水份含量为65%;
第四步,拌料
将经过第三步处理的青冈木树叶与含水量62%的木屑按照质量比为4:1的比例进行混合,并搅拌均匀,制得混合料;
第五步,装袋
将第四步制得的混合料装入菌种袋中,装入量为菌种袋容量的80%;
第六步,覆盖
将第五步的菌种袋的剩余空间装满木屑,木屑覆盖于混合料的顶层,制得培养基,培养基中含有质量份数为72%的青冈木树叶和质量份数为28%的木屑;
第七步,灭菌
将经过第六步处理的菌种袋放入灭菌室中,灭菌室的温度设置为124℃,灭菌室的压强设置为0.14MPa,进行灭菌处理3小时;
第八步,冷却
将经过第七步处理的菌种袋放入温度不高于18℃的室内,冷却3小时,使得菌种袋的温度不高于20℃;
第九步,接入二级母种
在无菌环境下将石斛小菇原种接入菌种袋中;
第十步,培养
将经过第九步处理的菌种袋放置于温度为20℃的培养室中培养40天,制得天麻有性繁殖萌发菌三级种。
本实施例制得的天麻有性繁殖萌发菌三级种,使得天麻萌发率超过80%,并且基本排除了天麻有性繁殖萌发菌生长过程中杂菌的干扰,使得天麻后期的生长很少出现乱根,提高了天麻的产量。
实施例2
天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,包括如下步骤:
第一步,备料
采摘青冈木树叶,并晾干备用;
第二步,浸泡
将第一步中的青冈木树叶置于清水中浸泡30小时;
第三步,沥水
捞出第二步制得的青冈木树叶,置于干燥处沥水,使得青冈木树叶中水份含量为70%;
第四步,拌料
将经过第三步处理的青冈木树叶与含水量68%的木屑按照质量比为4:1的比例进行混合,并搅拌均匀,制得混合料;
第五步,装袋
将第四步制得的混合料装入菌种袋中,装入量为菌种袋容量的82%;
第六步,覆盖
将第五步的菌种袋的剩余空间装满木屑,木屑覆盖于混合料的顶层,制得培养基,培养基中含有质量份数为76%的青冈木树叶和质量份数为24%的木屑;
第七步,灭菌
将经过第六步处理的菌种袋放入灭菌室中,灭菌室的温度设置为125℃,灭菌室的压强设置为0.15MPa,进行灭菌处理3小时;
第八步,冷却
将经过第七步处理的菌种袋放入温度不高于18℃的室内,冷却5小时,使得菌种袋的温度不高于20℃;
第九步,接入二级母种
在无菌环境下将紫萁小菇原种接入菌种袋中;
第十步,培养
将经过第九步处理的菌种袋放置于温度为24℃的培养室中培养50天,制得天麻有性繁殖萌发菌三级种。
本实施例制得的天麻有性繁殖萌发菌三级种,使得天麻萌发率超过83%,并且基本排除了天麻有性繁殖萌发菌生长过程中杂菌的干扰,使得天麻后期的生长很少出现乱根,提高了天麻的产量。
实施例3
天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,包括如下步骤:
第一步,备料
采摘青冈木树叶,并晾干备用;
第二步,浸泡
将第一步中的青冈木树叶置于清水中浸泡25小时;
第三步,沥水
捞出第二步制得的青冈木树叶,置于干燥处沥水,使得青冈木树叶中水份含量为68%;
第四步,拌料
将经过第三步处理的青冈木树叶与含水量65%的木屑按照质量比为4:1的比例进行混合,并搅拌均匀,制得混合料;
第五步,装袋
将第四步制得的混合料装入菌种袋中,装入量为菌种袋容量的81%;
第六步,覆盖
将第五步的菌种袋的剩余空间装满木屑,木屑覆盖于混合料的顶层,制得培养基,培养基中含有质量份数为73%的青冈木树叶和质量份数为27%的木屑;
第七步,灭菌
将经过第六步处理的菌种袋放入灭菌室中,灭菌室的温度设置为124.5℃,灭菌室的压强设置为0.145MPa,进行灭菌处理3小时;
第八步,冷却
将经过第七步处理的菌种袋放入温度不高于18℃的室内,冷却4小时,使得菌种袋的温度不高于20℃;
第九步,接入二级母种
在无菌环境下将兰小菇原种接入菌种袋中;
第十步,培养
将经过第九步处理的菌种袋放置于温度为22℃的培养室中培养45天,制得天麻有性繁殖萌发菌三级种。
本实施例制得的天麻有性繁殖萌发菌三级种,使得天麻萌发率超过85%,并且基本排除了天麻有性繁殖萌发菌生长过程中杂菌的干扰,使得天麻后期的生长很少出现乱根,提高了天麻的产量。
实施例4
天麻有性繁殖萌发菌三级种的培育方法,包括如下步骤:
第一步,备料
采摘青冈木树叶,并晾干备用;
第二步,浸泡
将第一步中的青冈木树叶置于清水中浸泡28小时;
第三步,沥水
捞出第二步制得的青冈木树叶,置于干燥处沥水,使得青冈木树叶中水份含量为66%;
第四步,拌料
将经过第三步处理的青冈木树叶与含水量62%的木屑按照质量比为4:1的比例进行混合,并搅拌均匀,制得混合料;
第五步,装袋
将第四步制得的混合料装入菌种袋中,装入量为菌种袋容量的80%;
第六步,覆盖
将第五步的菌种袋的剩余空间装满木屑,木屑覆盖于混合料的顶层,制得培养基,培养基中含有质量份数为75%的青冈木树叶和质量份数为25%的木屑;
第七步,灭菌
将经过第六步处理的菌种袋放入灭菌室中,灭菌室的温度设置为124℃,灭菌室的压强设置为0.15MPa,进行灭菌处理3小时;
第八步,冷却
将经过第七步处理的菌种袋放入温度不高于18℃的室内,冷却4小时,使得菌种袋的温度不高于20℃;
第九步,接入二级母种
在无菌环境下将开唇兰小菇原种接入菌种袋中;
第十步,培养
将经过第九步处理的菌种袋放置于温度为22℃的培养室中培养45天,制得天麻有性繁殖萌发菌三级种。
本实施例制得的天麻有性繁殖萌发菌三级种,使得天麻萌发率超过87%,并且基本排除了天麻有性繁殖萌发菌生长过程中杂菌的干扰,使得天麻后期的生长很少出现乱根,提高了天麻的产量。