CN103399102A - 一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法 - Google Patents

一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103399102A
CN103399102A CN2013102829170A CN201310282917A CN103399102A CN 103399102 A CN103399102 A CN 103399102A CN 2013102829170 A CN2013102829170 A CN 2013102829170A CN 201310282917 A CN201310282917 A CN 201310282917A CN 103399102 A CN103399102 A CN 103399102A
Authority
CN
China
Prior art keywords
tobacco
salanesol
saponification
extraction
solanesol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013102829170A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103399102B (zh
Inventor
杜咏梅
张怀宝
侯小东
李丹丹
付秋娟
刘翠翠
蒯雁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tobacco Research Institute of CAAS
Original Assignee
Tobacco Research Institute of CAAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tobacco Research Institute of CAAS filed Critical Tobacco Research Institute of CAAS
Priority to CN201310282917.0A priority Critical patent/CN103399102B/zh
Publication of CN103399102A publication Critical patent/CN103399102A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103399102B publication Critical patent/CN103399102B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明公开了一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其步骤包括：一、烟草茄尼醇的同时超声提取、皂化：取烟草或烟草制品碾成烟草粉末，置于离心玻璃管中，分别加入提取溶剂和皂化剂，同时超声提取、皂化烟草茄尼醇；二、烟草茄尼醇提取液的洗涤、分离：提取液冷却至室温，加入一定体积的水，充分振荡，离心；三、移取上层溶液0.500mL，流动相稀释至5.000mL，用0.22um有机滤膜过滤至液相色谱安培瓶中，待测；四、对所得待测液进行液相色谱测定。本发明提取、皂化、分离均在离心管中完成，溶剂用量少，操作简单，节约成本，减少污染，提高工作效率，适用于批量样品分析，且测定结果准确性及精密度高。

Description

一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法
技术领域
本发明涉及一种烟草活性物质的检测方法，尤其涉及一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法。
背景技术
烟草是茄尼醇含量最高的植物，茄尼醇具有抗菌、消炎、治疗心血管疾病及抗溃疡等作用，是合成辅酶Q10、维生素K2不可替代的中间体，并可合成抗癌增效剂SDB。
目前，烟草茄尼醇检测一般采用色谱分析方法，由于茄尼醇分子量大，沸点高，气相色谱测定需进行复杂的衍生化处理，液相色谱法是茄尼醇普遍采用的方法。
茄尼醇在烟草体内以游离醇和化合态（主要以乙酸酯、棕榈酸酯、亚油酸酯）两种形式存在，因此，烟草茄尼醇提取物，需通过皂化反应，将化合态茄尼醇游离出来，才能准确测定烟草总茄尼醇含量。现有的烟草茄尼醇测定一般应用非极性溶剂（正己烷、石油醚等）索式提取法提取，提取液在水浴加热回流条件下进行皂化，皂化后的提取液再通过液液萃取获得总茄尼醇测定液，方法繁琐，步骤复杂，测定周期长，检测效率低，不利于批量操作，且消耗大量有机溶剂。
发明内容
本发明为了克服现有技术中存在的上述缺点，提供一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法。该方法应用超声波技术，降低了烟草茄尼醇的提取、皂化温度，使烟草茄尼醇的提取、皂化、分离均在离心管中完成，适用于批量检测，且溶剂用量少，操作简单，节约成本，减少污染，提高工作效率，测定结果准确性及精密度高。
为达到上述目的，本发明所采用的技术解决方案是：一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其步骤包括：
一、烟草茄尼醇的同时超声提取、皂化：取烟草或烟草制品碾成烟草粉末，置于离心玻璃管中，分别加入提取溶剂和皂化剂，同时超声提取、皂化烟草茄尼醇；
二、烟草茄尼醇提取液的洗涤、分离：提取液冷却至室温，加入一定体积的水，充分振荡，离心；
三、移取上层溶液0.500mL，流动相稀释至5.000mL，用0.22um有机滤膜过滤至液相色谱安培瓶中，待测；
四、对所得待测液进行液相色谱测定。
进一步的，所述步骤一中烟草或烟草制品包括各种类型的调制后烟叶、青烟叶、烟梗以及提取烟碱后的烟草残渣，烘干粉碎成烟草粉末，称量0.1g，精确至0.0001 g，所用提取溶剂为正己烷，加入量为5.000 ml，所用皂化剂为0.1moL/L的氢氧化钠乙醇溶液，加入量为1.0ml。
进一步的，所述步骤一中，所用离心管体积等于或大于20 ml，并带有聚四氟乙烯密封盖，茄尼醇在提取、皂化过程中，应旋紧密封盖，以防止溶剂挥发影响结果测定的准确性。
进一步的，所述步骤一中，超声提取、皂化的条件是：超声频率45KHz，温度40℃-50℃，时间30min；提取皂化完成后，冷却至室温，加入8 ml水，充分振荡，3000转/分离心10min，利用液液分配原理，将烟草中的茄尼醇转移至上层正己烷相中，提取后样品残渣、皂化剂保留在下层水相中。
进一步的，步骤四中液相色谱测定条件是：使用超高效液相色谱仪，色谱柱：BEH C18 1.7um 2.1*100mm，流动相：甲醇：乙腈=50：50，流速：0.5 mL/min，柱温：30℃，检测波长：210nm。
本发明的有益效果是：应用超声波技术，降低了烟草茄尼醇的提取、皂化温度，且烟草茄尼醇的提取、皂化、分离均在离心管中完成，溶剂用量少，操作简单，节约成本，减少污染，提高工作效率，适用于批量样品分析，且测定结果准确性及精密度高。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
图1为本发明烟草茄尼醇标准品及样品的液相色谱图。
具体实施方式
一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其步骤包括：
一、烟草茄尼醇的同时超声提取、皂化：取烟草或烟草制品碾成烟草粉末，置于离心玻璃管中，分别加入提取溶剂和皂化剂，同时超声提、皂化烟草茄尼醇；
二、烟草茄尼醇提取液的洗涤、分离：提取液冷却至室温，加入一定体积的水，充分振荡，离心；
三、移取上层溶液0.500mL，流动相稀释至5.000mL，用0.22um有机滤膜过滤至液相色谱安培瓶中，待测。
四、对所得待测液进行液相色谱测定。
进一步的，所述步骤一中烟草或烟草制品包括各种类型的调制后烟叶、青烟叶、烟梗以及提取烟碱后的烟草残渣，烘干粉碎成烟草粉末，称量0.1g，精确至0.0001 g，所用提取溶剂为正己烷，加入量为5.000 ml，所用皂化剂为0.1moL/L的氢氧化钠乙醇溶液，加入量为1.0ml。
进一步的，所述步骤一中，所用离心管体积等于或大于20 ml，并带有聚四氟乙烯密封盖，茄尼醇在提取、皂化过程中，应旋紧密封盖，以防止溶剂挥发影响结果测定的准确性。
进一步的，所述步骤一中，超声提取、皂化的条件是：超声频率：45KHz，温度40℃-50℃，时间30min；提取皂化完成后，冷却至室温，加入8 ml水，充分振荡，3000转/分离心10min，利用液液分配原理，将烟草中的茄尼醇转移至上层正己烷相中，提取后样品残渣、皂化剂保留在下层水相中。
进一步的，步骤四中液相色谱测定条件是：使用超高效液相色谱仪，色谱柱：BEH C18 1.7um 2.1*100mm，流动相：甲醇：乙腈=50：50，流速：0.5 mL/min，柱温：30℃，检测波长：210nm。
称取过40目筛烟草粉末样品0.1g(精确至0.0001g)于20mL带有聚四氟乙烯密封盖的离心玻璃管中，加入1.0mL0.1moL/L的氢氧化钠乙醇溶液，5.000 mL正己烷溶液，盖上密封盖，振荡，混匀，放入恒温超声提取器中，在超声频率45KHz，温度40℃-50℃条件下，提取30min，取出，冷却至室温，旋开密封盖，加入8 mL去离子水，盖紧瓶盖，充分振荡后， 3000转/分离心10min，移取0.500mL上层正己烷茄尼醇提取液，流动相稀释至5.000 mL，用0.22um有机滤膜过滤至液相色谱安培瓶中，应用液相色谱进行检测，如图1所示。
表一、添加回收率试验结果
Figure 2013102829170100002DEST_PATH_IMAGE002
表2 精密度试验结果
2.1 不同烟草样品的平行试验结果                                  
Figure 2013102829170100002DEST_PATH_IMAGE004
2.2 同一烟草样品不同测定日期试验结果
时间 第一天 第二天 第三天 第四天 第五天 第六天 平均值 RSD%
测定值% 0. 860 0.887 0.892 0.912 0.934 0.878 0.900 2.49
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本专利揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其特征在于，步骤包括：
一、烟草茄尼醇的同时超声提取、皂化：取烟草或烟草制品碾成烟草粉末，置于离心玻璃管中，分别加入提取溶剂和皂化剂，同时超声提取、皂化烟草茄尼醇；
二、烟草茄尼醇提取液的洗涤、分离：提取液冷却至室温，加入一定体积的水，充分振荡，离心；
三、移取上层溶液0.500mL，流动相稀释至5.000mL，用0.22um有机滤膜过滤至液相色谱安培瓶中，待测；
四、对所得待测液进行液相色谱测定。
2.根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其特征在于：所述步骤一中烟草或烟草制品包括各种类型的调制后烟叶、青烟叶、烟梗以及提取烟碱后的烟草残渣，烘干粉碎成烟草粉末，称量0.1g，精确至0.0001 g，所用提取溶剂为正己烷，加入量为5.000 ml，所用皂化剂为0.1moL/L的氢氧化钠乙醇溶液，加入量为1.0ml。
3.根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其特征在于：所述步骤一中，所用离心管体积等于或大于20 ml，并带有聚四氟乙烯密封盖，茄尼醇在提取、皂化过程中，应旋紧密封盖，以防止溶剂挥发影响结果测定的准确性。
4.根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其特征在于：所述步骤一中，超声提取、皂化的条件是：超声频率45KHz，温度40℃-50℃，时间30min；提取皂化完成后，冷却至室温，加入8 ml水，充分振荡，3000转/分离心10min，利用液液分配原理，将烟草中的茄尼醇转移至上层正己烷相中，提取后样品残渣、皂化剂保留在下层水相中。
5.根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法，其特征在于：步骤四中液相色谱测定条件是：使用超高效液相色谱仪，色谱柱：BEH C18 1.7um 2.1*100mm，流动相：甲醇：乙腈=50：50，流速：0.5 mL/min，柱温：30℃，检测波长：210nm。
CN201310282917.0A 2013-07-08 2013-07-08 一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法 Expired - Fee Related CN103399102B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310282917.0A CN103399102B (zh) 2013-07-08 2013-07-08 一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310282917.0A CN103399102B (zh) 2013-07-08 2013-07-08 一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103399102A true CN103399102A (zh) 2013-11-20
CN103399102B CN103399102B (zh) 2014-12-17

Family

ID=49562765

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310282917.0A Expired - Fee Related CN103399102B (zh) 2013-07-08 2013-07-08 一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103399102B (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103630631A (zh) * 2013-12-17 2014-03-12 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种主流烟气中茄尼醇滤嘴截留量的测定方法
CN104101662A (zh) * 2014-08-01 2014-10-15 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种检测新鲜烟叶萜类化合物代谢组学方法
CN104655777A (zh) * 2015-02-16 2015-05-27 国家烟草质量监督检验中心 一种用于测定电子烟烟液及气溶胶中茄尼醇含量的方法
CN105938126A (zh) * 2016-07-18 2016-09-14 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种lc-ms/ms检测卷烟主流烟气中茄尼醇的方法
CN106198807A (zh) * 2016-07-18 2016-12-07 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种lc‑ms/ms检测卷烟侧流烟气中茄尼醇的方法
CN107814825A (zh) * 2017-10-26 2018-03-20 合肥万丰油脂有限公司 一种从大豆油脱臭馏出物中提取豆甾醇的工艺方法
CN108519446A (zh) * 2018-02-12 2018-09-11 云南中烟工业有限责任公司 一种测定烟草中茄尼醇的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102520079A (zh) * 2011-11-18 2012-06-27 贵州省烟草科学研究所 一种利用uplc快速测定烟叶中茄尼醇含量的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102520079A (zh) * 2011-11-18 2012-06-27 贵州省烟草科学研究所 一种利用uplc快速测定烟叶中茄尼醇含量的方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHEN, JUNHUI; LIU, XIANPING; XU, XIAOQIN: "Rapid determination of total solanesol in tobacco leaf by ultrasound-assisted extraction with RP-HPLC and ESI-TOF/MS", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
刘建国; 秦张峰; 王建国: "水-正己烷-甲醇体系的液液平衡研究", 《燃料化学学报》 *
童康琼，兰明蓉，赵云飞，冀志霞，陈守文: "高效液相色谱法测定烟叶中的总茄尼醇", 《烟草化学》 *
舒俊生，陈开波，徐志强，毛健: "反相高效液相色谱法测定烟草中的茄尼醇", 《现代食品科技》 *
韩敬美，刘春波，赵伟，何沛，***: "UPLC-UV 法快速测定烟草中游离茄尼醇的含量", 《烟草化学》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103630631A (zh) * 2013-12-17 2014-03-12 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种主流烟气中茄尼醇滤嘴截留量的测定方法
CN104101662A (zh) * 2014-08-01 2014-10-15 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种检测新鲜烟叶萜类化合物代谢组学方法
CN104101662B (zh) * 2014-08-01 2015-07-08 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种检测新鲜烟叶萜类化合物代谢组学方法
CN104655777A (zh) * 2015-02-16 2015-05-27 国家烟草质量监督检验中心 一种用于测定电子烟烟液及气溶胶中茄尼醇含量的方法
CN105938126A (zh) * 2016-07-18 2016-09-14 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种lc-ms/ms检测卷烟主流烟气中茄尼醇的方法
CN106198807A (zh) * 2016-07-18 2016-12-07 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种lc‑ms/ms检测卷烟侧流烟气中茄尼醇的方法
CN107814825A (zh) * 2017-10-26 2018-03-20 合肥万丰油脂有限公司 一种从大豆油脱臭馏出物中提取豆甾醇的工艺方法
CN108519446A (zh) * 2018-02-12 2018-09-11 云南中烟工业有限责任公司 一种测定烟草中茄尼醇的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN103399102B (zh) 2014-12-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103399102B (zh) 一种测定烟草及烟草制品总茄尼醇的方法
CN104535664B (zh) 一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法
CN103822999B (zh) 一种全自动QuEChERS前处理一体机及前处理方法
CN205374391U (zh) 一种毒素检测用固相萃取小柱
CN103901129A (zh) 一种磁分离-气相色谱检测十种有机磷农药方法
CN104330496B (zh) 食用植物油中9种营养物的检测方法
CN104997840A (zh) 一种异叶青兰五环三萜类组分的样品前处理方法及其应用
CN104535548B (zh) 一种管内固相微萃取技术用于牛奶中磺胺类抗菌药的快速检测方法
CN104880522A (zh) 正己烷预处理-高效液相色谱串联质谱法测定蜂蜡中氯霉素残留量的方法
CN105859715A (zh) 一种从吴茱萸中分离纯化吴茱萸碱和吴茱萸次碱的临界流体色谱方法
CN201876442U (zh) 一种用于牛奶中抗生素在线检测的无缝链接的装置
CN103901143B (zh) 一种用于少量生物血清中四溴双酚a分析的前处理方法
CN104730184A (zh) 绝缘油中糠醛及呋喃衍生物含量的测定方法
CN106841498B (zh) 一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法
CN103901140B (zh) 一种用于生物染毒后粪便中四溴双酚a分析的前处理方法
Liu et al. Two‐dimensional LC–MS analysis of components in Swertia franchetiana Smith
CN202614733U (zh) 检测变压器油中甲苯甲酰基苯骈三氮唑钝化剂含量的设备
CN102175793B (zh) 一种检测塑料制品中苏丹红含量的方法
CN102721763B (zh) 一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法
CN102262141B (zh) 一种用高效液相色谱仪检测3,3′,4′,5-四氯水杨酰苯胺的方法
CN204973135U (zh) 新型农、兽药残留净化前处理吸管
CN102901778A (zh) 检测乳或乳制品中氯霉素的预处理方法及乳或乳制品中氯霉素检测方法
CN104391055B (zh) 一种检测、分析粮食中苯并[a]芘的方法
CN103837615B (zh) 一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法
CN102621027A (zh) 一种茶皂素中皂苷的定量检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C53 Correction of patent of invention or patent application
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Du Yongmei

Inventor after: Zhang Huaibao

Inventor after: Hou Xiaodong

Inventor after: Li Dandan

Inventor after: Wang Aihua

Inventor after: Fu Qiujuan

Inventor after: Yan Ning

Inventor before: Du Yongmei

Inventor before: Zhang Huaibao

Inventor before: Hou Xiaodong

Inventor before: Li Dandan

Inventor before: Fu Qiujuan

Inventor before: Liu Cuicui

Inventor before: Kuai Yan

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: DU YONGMEI ZHANG HUAIBAO HOU XIAODONG LI DANDAN FU QIUJUAN LIU CUICUI KUAI YAN TO: DU YONGMEI ZHANG HUAIBAO HOU XIAODONG LI DANDAN WANG AIHUA FU QIUJUAN YAN NING

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20141217

Termination date: 20160708

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee