CN103352016A - 利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥 - Google Patents

利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥 Download PDF

Info

Publication number
CN103352016A
CN103352016A CN2013102784589A CN201310278458A CN103352016A CN 103352016 A CN103352016 A CN 103352016A CN 2013102784589 A CN2013102784589 A CN 2013102784589A CN 201310278458 A CN201310278458 A CN 201310278458A CN 103352016 A CN103352016 A CN 103352016A
Authority
CN
China
Prior art keywords
enteromorpha
alteromonas
colwelliana
fermentation
ferment
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013102784589A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103352016B (zh
Inventor
王鹏
王进
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ocean University of China
Original Assignee
Ocean University of China
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ocean University of China filed Critical Ocean University of China
Priority to CN201310278458.9A priority Critical patent/CN103352016B/zh
Publication of CN103352016A publication Critical patent/CN103352016A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103352016B publication Critical patent/CN103352016B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Fertilizers (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及利用Alteromonas colwellianaA321发酵浒苔制备生物肥。经过斜面培养、种子培养、菌种培养、菌剂制备、浒苔发酵、配制的过程，获得浒苔生物有机肥。本发明提供的Alteromonas colwelliana A321是自主定向诱导筛选菌株，于2012年4月23日保藏在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2012132。采用该菌剂能够将浒苔细胞间质和细胞壁中的特征多糖、蛋白及纤维素的高效降解，充分释放浒苔内部的营养元素，提高浒苔的发酵速度。

Description

利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥
技术领域
生物技术
技术背景
浒苔营养丰富，干基含蛋白质9～14％，灰分32～36％，水分6.7～9％，脂肪2％，其余是碳水化合物，约40％。特别是浒苔具有海洋生物所特有的海藻多糖、高度不饱和脂肪酸、藻朊酸和天然生长调节物质等，是海洋中分布广泛、储量巨大的植物。特别是由于近年来绿潮浒苔的频繁爆发，每年大量的浒苔被打捞上岸而无法有效处理，有些浒苔常年堆积于岸边不仅造成资源的浪费，还污染周围的环境，不利于旅游业、渔业等行业的发展。为了充分利用浒苔资源，解决浒苔对环境的危害，将浒苔进行发酵，生产出一种浒苔生物有机肥的方法是切实需要的。目前，浒苔作为海洋中具有开发价值的植物之一，国内外对浒苔的降解与开发利用还处于探索阶段。
现在市场上的微生物发酵菌剂主要有：1、养分合成类，如固氮菌、光合细菌等；2、养分降解释放类，如纤维素降解菌、磷细菌等；3、抗菌抑病类，地衣芽孢杆菌，短小芽孢杆菌等。这些菌剂大多是针对陆生植物秸秆及废弃物的降解而研发。相比陆生植物，浒苔含有丰富的特异性多糖糖链，具有调节植物生长和增强抗病力的作用，其含量占干基的10～30％。浒苔多糖的单糖组成包括木糖、半乳糖、***糖、鼠李糖和葡萄糖，这些单糖通过1→4连接着β-L-***呱喃糖残基，并且这种β-L-***呱喃糖残基的部分C-3上具有硫酸基团。常见陆生微生物或酶制剂无法有效降解浒苔多糖，进而导致现有的微生物菌剂难以利用被浒苔多糖紧密包裹的藻体纤维素及蛋白，故不能对浒苔进行充分的降解。经检索，赵明等利用EM菌剂研究了浒苔堆肥化处理条件，纯浒苔堆肥温度不到50℃。黄连光等利用自然菌研究了浒苔堆肥化处理条件，纯浒苔堆肥最高温度只有54℃，达到最高温度需要7天。专利中：朱强利用枯草芽孢杆菌、假交替单胞菌、短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和绿色木霉组成的复合微生物菌剂对浒苔和秸秆的混合物进行了发酵。单俊伟等开发了一种利用细菌、真菌和放线菌组成微生物菌剂发酵浒苔的方法。没有关于与本专利相关细菌发酵浒苔的相关报道与专利。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能高效发酵浒苔生物质的海洋微生物菌剂以及利用该菌株制备浒苔生物有机肥的方法。
本发明中提及的菌株是在青岛海域的海水中分离的Alteromonas colwelliana A321，该交替单胞菌A321于2012年4月23日保藏在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2012132。
本发明应用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔，最高温度可达66℃，15天发酵完成。利用该种微生物进行发酵具有升温迅速、温度高、周期短、组织降解彻底等特点，该菌种Alteromonas colwellianaA321作用稳定，能够高效特异性降解浒苔多糖，解离被包裹的藻体纤维素和蛋白等物质，有效释放浒苔内部的营养元素，能够有效地促进作物的生长和品质的提高。
具体实施方式
Alteromonas colwelliana A321的生产方法
1、斜面培养：在无菌条件下，将Alteromonas colwelliana A321原始菌种接种于固体培养基上，28℃下培养3天。
2、种子培养：将步骤1培养的菌种无菌条件下接种于液体培养基，28℃，200r/min摇床培养3天。Alteromonas colwelliana A321的菌悬液光密度OD600达到3.0。
3、菌种培养：按液体培养基的体积比为8％的接种量，将种子液接种于发酵罐中，28℃，200r/min培养3天。
4、菌剂的制备：将制得的菌种发酵液，添加载剂并通过喷雾干燥技术进行干燥，制得Alteromonas colwelliana A321菌剂。
其中，步骤1～3中Alteromonas colwelliana A321所用的培养基为浒苔多糖培养基：浒苔多糖10g，氯化钠10g，氯化钙0.1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化铵1g，磷酸高铁0.02g，硫酸铁0.01g，水1000mL，pH7.0。固态培养基是在液态培养基中添加了适量的琼脂所得。
浒苔发酵方法
原料：浒苔。Alteromonas colwelliana A321菌接种量：0.5％。
1、菌剂的预处理：先用水溶解，充分搅拌。
2、配料：料水1∶2.0，C/N值30∶1，pH7.5，料堆高度60cm。
3、发酵：将Alteromonas colwelliana A321按0.5％的接种量均匀泼洒在待发酵物上，并充分混匀。发酵过程中，每3天翻堆一次，连续翻堆5次，15天发酵完成。
Alteromonas colwelliana A321降解浒苔的特征性产物检测
1、样品预处理：称取10g浒苔发酵终产物，溶解与90mL蒸馏水中。添加400mL无水乙醇，静置30min，3000rpm离心10分钟，收集上清液并旋转蒸发浓缩至10mL，获得Alteromonas colwelliana A321降解浒苔的特征寡糖浓缩液。
2、取该浓缩液进行GC和ESI-MS分析，得到Alteromonas colwelliana A321降解浒苔的特异性产物——硫酸化鼠李糖，其分子量为244Da。该产物可作为鉴定该菌株发酵浒苔的特征性指标。

Claims (3)

1.一株菌Alteromonas colwellianaA321，该菌种保藏单位：中国典型培养物保藏中心。地址：中国武汉，武汉大学。保藏日期为2012年04月23日，保藏号为M2012132。 
2.利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔生产生物肥。
3.权利要求2所述的发酵浒苔，其产物含有的特征物质是硫酸化鼠李糖，分子量为244Da。 
CN201310278458.9A 2013-06-27 2013-06-27 利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥 Active CN103352016B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310278458.9A CN103352016B (zh) 2013-06-27 2013-06-27 利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310278458.9A CN103352016B (zh) 2013-06-27 2013-06-27 利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103352016A true CN103352016A (zh) 2013-10-16
CN103352016B CN103352016B (zh) 2015-03-11

Family

ID=49308430

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310278458.9A Active CN103352016B (zh) 2013-06-27 2013-06-27 利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103352016B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105602995A (zh) * 2016-01-21 2016-05-25 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 一种液体深层快速发酵制备浒苔生物肥的方法
CN108239176A (zh) * 2016-12-27 2018-07-03 中国海洋大学 低分子量浒苔多糖及其制备方法、硫酸化低分子量浒苔多糖及其制备方法以及应用
CN113429227A (zh) * 2021-08-24 2021-09-24 烟台上水医药科技有限公司 枯草芽孢杆菌在生物发酵中的应用
CN114410542A (zh) * 2022-02-15 2022-04-29 青岛中尚奇生物科技有限公司 一株天蓝色弧菌及其在降解浒苔中的应用
CN114480201A (zh) * 2022-02-15 2022-05-13 青岛中尚奇生物科技有限公司 一株强力降解浒苔蛋白的需钠弧菌及其制备有机肥的应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1560226A (zh) * 2004-03-02 2005-01-05 中国海洋大学 用Alteromonas sp.nov.SY37-12菌株生产琼胶酶
CN101486612A (zh) * 2009-03-02 2009-07-22 中国海洋大学生物工程开发有限公司 微生物发酵法处理浒苔生产海藻肥的方法
CN102604868A (zh) * 2012-03-21 2012-07-25 清华大学深圳研究生院 一种交替单胞菌及其在抑制赤潮藻生长中的应用
CN102813057A (zh) * 2012-09-17 2012-12-12 中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所 一种利用浒苔浸提液生产发酵饲料的方法
CN103451119A (zh) * 2012-06-03 2013-12-18 中国海洋大学 一种交替单胞菌及其用它生产凝胶型浒苔多糖降解酶的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1560226A (zh) * 2004-03-02 2005-01-05 中国海洋大学 用Alteromonas sp.nov.SY37-12菌株生产琼胶酶
CN101486612A (zh) * 2009-03-02 2009-07-22 中国海洋大学生物工程开发有限公司 微生物发酵法处理浒苔生产海藻肥的方法
CN102604868A (zh) * 2012-03-21 2012-07-25 清华大学深圳研究生院 一种交替单胞菌及其在抑制赤潮藻生长中的应用
CN103451119A (zh) * 2012-06-03 2013-12-18 中国海洋大学 一种交替单胞菌及其用它生产凝胶型浒苔多糖降解酶的方法
CN102813057A (zh) * 2012-09-17 2012-12-12 中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所 一种利用浒苔浸提液生产发酵饲料的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张绪 等: "海藻酸分解菌研究进展", 《生命科学》 *
彭玉辅 等: "溶藻微生物的研究进展", 《生物技术通报》 *
李小彩 等: "溶藻细菌及溶藻物质研究进展", 《INDUSTRIAL WATER TREATMENT》 *
汪辉等: "一株海洋细菌对中肋骨条藻的溶解效应及其溶藻特性", 《中国环境科学》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105602995A (zh) * 2016-01-21 2016-05-25 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 一种液体深层快速发酵制备浒苔生物肥的方法
CN105602995B (zh) * 2016-01-21 2019-05-17 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 一种液体深层快速发酵制备浒苔生物肥的方法
CN108239176A (zh) * 2016-12-27 2018-07-03 中国海洋大学 低分子量浒苔多糖及其制备方法、硫酸化低分子量浒苔多糖及其制备方法以及应用
CN108239176B (zh) * 2016-12-27 2021-08-17 中国海洋大学 低分子量浒苔多糖及其制备方法、硫酸化低分子量浒苔多糖及其制备方法以及应用
CN113429227A (zh) * 2021-08-24 2021-09-24 烟台上水医药科技有限公司 枯草芽孢杆菌在生物发酵中的应用
CN114410542A (zh) * 2022-02-15 2022-04-29 青岛中尚奇生物科技有限公司 一株天蓝色弧菌及其在降解浒苔中的应用
CN114480201A (zh) * 2022-02-15 2022-05-13 青岛中尚奇生物科技有限公司 一株强力降解浒苔蛋白的需钠弧菌及其制备有机肥的应用
CN114410542B (zh) * 2022-02-15 2023-08-11 青岛中尚奇生物科技有限公司 一株天蓝色弧菌及其在降解浒苔中的应用
CN114480201B (zh) * 2022-02-15 2023-08-11 青岛中尚奇生物科技有限公司 一株强力降解浒苔蛋白的需钠弧菌及其制备有机肥的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN103352016B (zh) 2015-03-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105567612B (zh) 一种园林废弃物降解复合菌剂制备及应用
CN106701621B (zh) 一种用于低温状态下腐熟的秸秆腐熟剂的制备方法
CN101941851B (zh) 采用餐厨废弃物制备生化腐植酸的技术与工艺
CN103598420B (zh) 一种香蕉茎叶青贮的微生物复合菌剂及其制备方法
CN102453676B (zh) 秸秆发酵剂及其在秸秆发酵中的应用方法
CN103478413A (zh) 一种混菌固态发酵银杏叶渣生产蛋白饲料的方法
CN110331109B (zh) 一株枯草芽孢杆菌及其培养方法与应用
CN111363684B (zh) 一种木质纤维高效降解复合菌剂及其在堆肥中的应用
CN106520615A (zh) 快速降解玉米秸秆的复合菌系、其制备方法及预处理方法
CN106350469A (zh) 耐高温的具有纤维素降解能力的芽孢杆菌及其应用
CN102174423B (zh) 一种降解秸秆的地衣芽孢杆菌ch15及其菌剂
CN104945118A (zh) 一种香菇栽培基质的制作方法
CN103352016B (zh) 利用Alteromonas colwelliana A321发酵浒苔制备生物肥
CN101914450B (zh) 一种堆肥生物脱水真菌菌剂及其制备方法
CN104059862A (zh) 一种纤维素降解菌剂和原料菌株及其制备方法和应用
CN107974421A (zh) 一种嗜酸乳杆菌及其筛选方法和应用、一种菌剂
CN102488087A (zh) 一种茶籽饼粕的生物脱毒方法
CN103408335B (zh) 微生物法对葡萄栽培产生的农业废弃物无害化处理方法
CN101933439A (zh) 一种利用植物油提高桑黄液体培养菌丝量的方法
CN106987572B (zh) 一种厌氧发酵玉米秸秆生产木聚糖酶的方法
CN109957527A (zh) 一种直接分解农作物秸秆发酵产沼气的专用微生物复合菌剂制备及其应用方法
CN113151089B (zh) 一种水稻秸秆酵储料、制备方法及其用途
CN112725314B (zh) 一种自然共生的混合培养物发酵粗饲料生产内切葡聚糖酶的方法
CN104073445B (zh) 一种秸秆与粪便沼气发酵预处理微生物菌剂
CN106609250B (zh) 一种发酵中药渣有机肥菌剂的制备方法及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant