CN103340396B - 一种食药用菌菌粉的生产方法 - Google Patents
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Landscapes
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Abstract
本发明属于真菌保健品技术领域，具体涉及一种食药用菌菌粉的生产方法，具体包括培养基制作、接种、菌丝体生长、采收、菌丝体深加工等过程。固体培养基选用小麦和玉米作为原料，并优化生产工艺。所得到的菌丝体与天然子实体营养成分一样，但菌丝体培养时间大大缩短，人工培育的时间仅为13-15h，固体培养时培养基选用的玉米或小麦和玉米的混合物，纯天然食品，含丰富的营养物质，价格低廉，膨化可以使物料的细胞壁破碎，不影响物料的营养成分,能使细胞内的营养成分更利于消化、吸收,同时膨化过的菌丝体成分稳定性好、保质期提高40%。
Description
技术领域
本发明属于真菌保健品技术领域，具体涉及一种食药用菌菌粉的生产方法。
背景技术
健康管理新观念的兴起，倡导国民将80%的医疗投入，提前用于保健预防，不仅能从根本上提高生命质量，而且1元钱的保健投入，可以节省8.59元的医药费和100元的抢救费。随着国人以及全球保健意识的逐步增强，“治病不如防病”的新观念日渐深入人心，使人们越来越重视保健。食药用菌是惟一敢谈疗效的保健品，针对提升机体免疫机能，压倒病邪，十分有效。正确食用食药用菌，能发挥其应有的效果。蛹虫草与灵芝均属具有保健功能的食药用菌。
蛹虫草为子囊菌亚门，麦角菌目，麦角菌科、虫草属的模式种。学名为Cordycepsmilitaris，又名北冬虫夏草、北蛹虫草、虫草等。经研究和检测证明，蛹虫草是传统冬虫夏草的最理想代用品。目前，蛹虫草菌丝体大多是是蛹虫草经过人工培养而成的。蛹虫草菌丝体所含的活性有效成分，如氨基酸类、多糖类、腺苷、核苷、脂肪酸、甘露醇和微量元素等大多与天然蛹虫草相近。其药理分析也表明与天然冬虫夏草有相似之处。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳痿遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。
灵芝（Ganoderma Lucidum），为多孔菌科真菌灵芝Ganoderma Lucidum（Leyss.ex Fr.）Karst.的子实体。主要含有氨基酸、多肽、蛋白质、真菌溶菌酶（fungal lysozyme），以及糖类（还原糖和多糖）、麦角甾醇、三萜类、香豆精苷、挥发油、硬脂酸、苯甲酸、生物碱、维生素B2及C等；可滋补强壮，用于健脑、消炎、利尿、益肾等。目前，传统的保健食品采用的灵芝菌丝体人工栽培料以阔叶林的木屑、椴木为主，中国发明专利CN101622938A公开了一种以桉树为主的栽培方法,该技术方案成本相对低,但是所得的灵芝中三萜类化合物和多糖的含量较低。另外，也有公开的料袋栽培灵芝如中国发明专利CN102765988A公开了一种灵芝栽培袋料，以豆秸屑、豆渣、大豆黄浆水栽培料，然而培育时间至少66天。
随着人们越来越关注食品的营养价值，对以蛹虫草和灵芝为原料的食品和保健品将越来越受到人们的喜爱，但是蛹虫草和灵芝的研究远没有象其它食药用菌的研究深入，国内外专家在人工培育食药用菌的研究工作主要在于得出菌种的最佳生长规律，以期培育出更高质量和产量的食药用菌，目前蛹虫草的子实体人工培育的时间为40天左右，灵芝的子实体培育时间为50-60天；但是短期内的培育目标并未见报导，且培育用的培养基都是大米，成本高；成品基本是子实体或直接制成粉末，未经过膨化环节，保质期时间短，且不易消化、吸收。
发明内容
针对现有技术中的不足，本发明提供一种食药用菌菌粉的生产方法。
本发明所述食药用菌菌粉的生产方法，具体包括以下步骤：
1)培养基制作：按重量比1:0-1取玉米和小麦混合先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量35%-65%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将食药用菌菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度16-28℃，观察菌丝体铺满料袋，需7-10h，光照着色，13-15h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时放置阳光下晾晒至干或在30-40℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将晾干或烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，再二次粉碎，分装，即得菌粉成品。
本发明对步骤1）培养基制作时玉米和小麦的重量比进行了优选，优选地，上述步骤1）培养基制作时玉米和小麦的重量比为1:0.1-1。
本发明还公开了上述步骤1）接种时食药用菌菌种的培育方法，包括以下步骤：
a.斜面菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯200g、葡萄糖18g、琼脂19g；
培养基制作：将配方中马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖、琼脂充分溶解，加水至1000ml，分装入试管中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出放置斜面备用；
接种：将食药用菌菌种在超净工作台上转接到制好的斜面培养基上，食药用菌生长的温度为16-28℃，暗光中培养2-3d；
b.揺瓶菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯160g、葡萄糖16g、硫酸镁0.6g、磷酸二氢钾1.2g；
培养基制作：将配方中马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖，硫酸镁，磷酸二氢钾，充分溶解，加水定容到800ml，装入揺瓶中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出冷却备用；
接种：在超净工作台上，将斜面菌种块1cm×1cm接入揺瓶中，静止24h后置于摇床上进行悬浮培养，转速120r/min，培养5-7d，形成均匀小球后即可用；
c.发酵罐菌种培养
培养基配方：豆粉750g、葡萄糖 1500g、蔗糖 3000g、硫酸镁112g、磷酸二氢钾225g、大豆油50ml；
培养基制作：把豆粉、葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、大豆油倒入发酵罐中，充分溶解，用水定容到150L，加热灭菌之后冷却等待接种；
接种：发酵罐进料口持续高温消毒，将揺瓶中的菌液注入发酵罐中，用消毒过的棉塞将进料口密封，食药用菌生长的温度为16-28℃，然后培养5-7d，镜检后，作为食药用菌菌种接入料袋。
本发明对食药用菌进行了优选，优选地，上述食药用菌为蛹虫草、灵芝；更优选地是，蛹虫草Cordyceps militaris（L.：Fr.）Link，其保藏号为CGMCC No.1854或灵芝属Ganoderma lucidum（Leyss ex Fr.）Karst的菌种，其保藏号为CGMCC 5.616。
本发明对步骤a斜面菌种培养和步骤c发酵罐菌种培养食药用菌的生长温度进行了优选，优选地，上述斜面菌种培养和发酵罐菌种培养时，蛹虫草生长温度16-25℃，灵芝生长温度20-28℃；更优选地是，上述斜面菌种培养和发酵罐菌种培养时，蛹虫草生长温度21℃，灵芝生长温度25℃。
本发明对步骤2)菌丝体生长的室内温度进行了优选，优选地，上述步骤2)菌丝培养室内温度：蛹虫草生长温度16-25℃，灵芝生长温度20-28℃；更优选地是，上述步骤2) 菌丝培养室内温度：蛹虫草菌丝体生长的室内温度为21℃，灵芝菌丝体生长的室内温度为25℃。
本发明对步骤4）所用的膨化机进行了优选，优选的是：步骤4）所用膨化机的型号是SX85-11。
本发明与现有技术相比具有以下突出的优点：
1.按照药典的检测标准，本发明所述的菌丝体与天然子实体营养成分一样，但从固体培养时间分析，蛹虫草和灵芝菌丝体人工培育需要时间13-15h即可，菌丝体培养时间大大缩短，即便是包含菌种培育的时间，本发明所述的菌丝体的培养时间也在15d左右，远少于传统方法所用的时间。
2.固体培养时培养基仅为玉米或小麦和玉米的混合物，小麦、玉米是人类主要粮食来源，纯天然食品，含丰富的营养物质，价格低廉。人们食用菌丝体和玉米或小麦和玉米混合的产品，不但补充了菌丝体营养物质同时小麦和玉米的营养物质也得到补充。
3.膨化使细胞壁破碎，细胞内的营养物质更被容易吸收。该工艺简单易操作，只需将膨化机温度设定为120℃即可，膨化可以使所得菌丝体的细胞壁破碎，不影响物料的营养成分。通过分光光度法检测，膨化使菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期至少提高40%，膨化能使细胞内的营养成分在膨化破壁前后营养成分一致，且更利于消化、吸收。
4. 用高效液相色谱法测定，本发明所得蛹虫草菌丝体的破壁后菌粉中的虫草素和腺苷含量至少为5.99‰、1.40‰；用紫外分光光度法测定，本发明所得灵芝菌丝体的破壁后菌粉中的三萜类化合物含量至少为3.5%；用苯酚-硫酸法测定，本发明所得蛹虫草菌丝体的破壁后菌粉中的多糖和灵芝菌丝体的破壁后菌粉中的多糖，含量至少为12.44%、2.0%，其菌粉中各组分含量达到甚至高于现有技术水平，同时两种菌丝体破壁后菌粉组分经稳定性检测结果表明稳定性好。
具体实施方式
通过以下实例来对本发明作进一步具体说明，但并不仅限于以下实施例和实施例中的工艺参数范围。
实施例1、蛹虫草菌种的培育方法
1）斜面菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯200g、葡萄糖18g、琼脂19g；
培养基制作：将配方中去皮马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖、琼脂充分溶解，加水至1000ml，分装入试管中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出放置斜面备用；
接种：将蛹虫草Cordyceps militaris（L.：Fr.）Link，其保藏号为CGMCC No.1854在超净工作台上转接到制好的斜面培养基上，蛹虫草生长的温度为21℃，暗光中培养2-3d；
2）揺瓶菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯160g、葡萄糖16g、硫酸镁0.6g、磷酸二氢钾1.2g；
培养基制作：将配方中去皮马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖，硫酸镁，磷酸二氢钾，充分溶解，加水定容到800ml，装入揺瓶中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出冷却备用；
接种：在超净工作台上，将斜面菌种块1cm×1cm接入揺瓶中，静止24h后置于摇床上进行悬浮培养，转速120r/min，培养5-7d，形成均匀小球后备用；
3）发酵罐菌种培养
培养基配方：豆粉750g、葡萄糖 1500g、蔗糖 3000g、硫酸镁112g、磷酸二氢钾225g、大豆油50ml；
培养基制作：把处方量的豆粉、葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、大豆油倒入发酵罐中，充分溶解，用水定容到150L，加热灭菌之后冷却等待接种；
接种：发酵罐进料口持续高温消毒，将揺瓶中的菌液注入发酵罐中，用消毒过的棉塞将进料口密封，蛹虫草生长的温度为21℃，然后培养5-7d，镜检后，作为食药用菌菌种接入料袋。
实施例2、灵芝菌种的培育方法
1）斜面菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯200g、葡萄糖18g、琼脂19g；
培养基制作：将配方去皮中马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖、琼脂充分溶解，加水至1000ml，分装入试管中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出放置斜面备用；
接种：将灵芝属Ganoderma lucidum（Leyss ex Fr.）Karst的菌种，其保藏号为CGMCC 5.616在超净工作台上转接到制好的斜面培养基上，灵芝生长的温度为25℃，暗光中培养2-3d；
2）揺瓶菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯160g、葡萄糖16g、硫酸镁0.6g、磷酸二氢钾1.2g；
培养基制作：将配方中去皮马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖，硫酸镁，磷酸二氢钾，充分溶解，加水定容到800ml，装入揺瓶中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出冷却备用；
接种：在超净工作台上，将斜面菌种块1cm×1cm接入揺瓶中，静止24h后置于摇床上进行悬浮培养，转速120r/min，培养5-7d，形成均匀小球后备用；
3）发酵罐菌种培养
培养基配方：豆粉750g、葡萄糖 1500g、蔗糖 3000g、硫酸镁112g、磷酸二氢钾225g、大豆油50ml；
培养基制作：把处方量的豆粉、葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、大豆油倒入发酵罐中，充分溶解，用水定容到150L，加热灭菌之后冷却等待接种；
接种：发酵罐进料口持续高温消毒，将揺瓶中的菌液注入发酵罐中，用消毒过的棉塞将进料口密封，灵芝生长的温度为25℃，然后培养5-7d，镜检后，作为食药用菌菌种接入料袋。
实施例3、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：取玉米10kg，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量35%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例1培育的蛹虫草菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，即蛹虫草菌丝体生长的室内温度为16℃，观察菌丝体铺满料袋，需10h，光照着色，15h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时放置阳光下晾晒至干；
4) 菌丝体深加工：将晾干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5) 通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高40%，且膨化破壁前后营养成分一致；用高效液相色谱法测定，菌粉中的虫草素和腺苷分别含量为6.10‰、1.40‰；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为12.45%。
实施例4、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：按重量比1:0.1取玉米和小麦共10kg混合，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量45%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例1培育的蛹虫草菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，即蛹虫草菌丝体生长的室内温度为25℃，观察菌丝体铺满料袋，需7h，光照着色，13h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时在30℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5) 通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高42%，且膨化破壁前后营养成分一致；用高效液相色谱法测定，菌粉中的虫草素和腺苷分别含量为5.99‰、1.41‰；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为12.44%。
实施例5、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：按重量比1: 1取玉米和小麦共10kg混合，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量55%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例1培育的蛹虫草菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，即蛹虫草菌丝体生长的室内温度为21℃，观察菌丝体铺满料袋，需8h，光照着色，14h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时在35℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5) 通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高41%，且膨化破壁前后营养成分一致；用高效液相色谱法测定，菌粉中的虫草素和腺苷分别含量为6.15‰、1.41‰；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为12.48%。
实施例6、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：按重量比1:0.8取玉米和小麦共10kg混合，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量65%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例1培育的蛹虫草菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，即蛹虫草菌丝体生长的室内温度为23℃，观察菌丝体铺满料袋，需9h，光照着色，15h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时在40℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5) 通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高45%，且膨化破壁前后营养成分一致；用高效液相色谱法测定，菌粉中的虫草素和腺苷分别含量为6.45‰、1.48‰；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为12.49%。
实施例7、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：取玉米10kg，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量35%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例2培育的灵芝菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，灵芝菌丝体生长的室内温度为20℃，观察菌丝体铺满料袋，需8h，光照着色，15h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时放置阳光下晾晒至干；
4) 菌丝体深加工：将晾干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5）通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高40%，且膨化破壁前后营养成分一致；用紫外分光光度法测定，菌粉中的三萜类化合物含量为3.6%；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为2.1%。
实施例8、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：按重量比1: 0.1取玉米和小麦共10kg混合，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量42%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例2培育的灵芝菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，灵芝菌丝体生长的室内温度为28℃，观察菌丝体铺满料袋，需10h，光照着色，13h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时在30℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5）通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高44%，且膨化破壁前后营养成分一致；用紫外分光光度法测定，菌粉中的三萜类化合物含量为3.5%；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为2.0%。
实施例9、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：按重量比1: 0.8取玉米和小麦共10kg混合，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量53%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例2培育的灵芝菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，灵芝菌丝体生长的室内温度为25℃，观察菌丝体铺满料袋，需8h，光照着色，14h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时在35℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5）通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高41%，且膨化破壁前后营养成分一致；用紫外分光光度法测定，菌粉中的三萜类化合物含量为3.9%；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为2.5%。
实施例10、一种食药用菌菌粉的生产方法
1)培养基制作：按重量比1: 0.5取玉米和小麦共10kg混合，先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量65%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
接种：在超净工作台上，将实施例2培育的灵芝菌种接入料袋，得菌袋；
2)菌丝体生长：将菌袋移近通风干燥且避光的菌丝培养室，调节菌丝培养室内温度，灵芝菌丝体生长的室内温度为27℃，观察菌丝体铺满料袋，需9h，光照着色，15h收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时在40℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，最后再二次粉碎，分装，即得成品。
5）通过分光光度法检测，膨化使所得菌丝体氧化酶彻底失活性，其菌粉的保质期提高40%，且膨化破壁前后营养成分一致；用紫外分光光度法测定，菌粉中的三萜类化合物含量为4.5%；用苯酚-硫酸法测定，菌粉中的多糖含量为2.9%。
实施例11、菌粉稳定性检测
9.1用高效液相色谱方法测定蛹虫草菌粉中的虫草素、腺苷
9.1.1 供试品溶液的制备：取蛹虫草菌丝体，研成细粉，取0.5g，精密称定，放入容量瓶中，精密加90%甲醇10ml，摇匀，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用90%甲醇补足失的重量，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即为供试品溶液。
9.1.2 稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液10μl，按色谱条件分别在0、2、4、8h测定虫草素和腺苷的峰面积。结果显示虫草素的RSD为1.14%，腺苷的RSD为1.01%，表明供试品溶液在8h内稳定。
9.2用紫外分光光度法测定灵芝菌粉中的三萜类化合物
9.2.1 样品溶液的制备：取灵芝菌丝体，研成细粉，取0.5g，加入三氯甲烷50ml，搅拌均匀超声波（50℃、45kHz）处理1h，冷却后过滤，除去杂质，提取液定容至50ml，即为样品溶液。
9.2.2 稳定性试验：吸取样品液0.1ml，按标准曲线，分别在0-5、5-30、30-60、60-100min几个时段进行吸光度测定，观察其稳定性。结果表明显色液适合在5-30min内测定吸光度，RSD为1.01%。
9.3用苯酚-硫酸法测定蛹虫草和灵芝菌粉中的多糖
9.3.1 样品溶液制备：取蛹虫草或灵芝菌丝体，研成细粉，取2g干粉加入90ml水加热回流，2h后，提取液抽滤后定容至100ml，取10ml加入150ml无水乙醇，4℃放置，12h沉淀多糖，离心，弃上清，沉淀加水溶解，并定容至50ml，得到样品溶液。
9.3.2 稳定性试验：取0.4ml样品溶液并加入水补足到1.0ml，按照标准曲线下自“加入5%苯酚溶液”起操作。试验结果表明，显色适合在20min内测定。
Claims (1)
1.一种食药用菌菌粉的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：
所述的食药用菌是蛹虫草、灵芝；
1) 培养基制作：按重量比1:0.1-1 取玉米和小麦混合先淘洗，再用水煮2h，小麦、玉米皮完好不破损，捞出控水至含水量35-65%，装袋；料袋121℃蒸汽高压灭菌2h，料袋温度降至室温，待接种用；
食药用菌菌种的培育方法，包括以下步骤：
a. 斜面菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯200g、葡萄糖18g、琼脂19g ；
培养基制作：将配方中去皮马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min 后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖、琼脂充分溶解，加水至1000ml，分装入试管中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出放置斜面备用；
接种：将食药用菌菌种在超净工作台上转接到制好的斜面培养基上，蛹虫草生长温度21℃，灵芝生长温度25℃，暗光中培养2-3d；
b. 揺瓶菌种培养
培养基配方：去皮马铃薯160g、葡萄糖16g、硫酸镁0.6g、磷酸二氢钾1.2g；
培养基制作：将配方中去皮马铃薯切片煮沸，继续小火煮20-30min后过滤得马铃薯营养液，在马铃薯营养液中加入葡萄糖，硫酸镁，磷酸二氢钾，充分溶解，加水定容到800ml，装入揺瓶中，加棉塞放入高压灭菌锅中121℃灭菌40min，取出冷却备用；
接种：在超净工作台上，将斜面菌种块1cm×1cm 接入揺瓶中，静止24h 后置于摇床上进行悬浮培养，转速120r/min，培养5-7d，形成均匀小球后备用；
c. 发酵罐菌种培养
培养基配方：豆粉750g、葡萄糖 1500g、蔗糖 3000g、硫酸镁112g、磷酸二氢钾225g、大豆油50ml ；
培养基制作：把配方中豆粉、葡萄糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、大豆油倒入发酵罐中，充分溶解，用水定容到150L, 加热灭菌之后冷却等待接种；
接种：发酵罐进料口持续高温消毒，将揺瓶中的菌液注入发酵罐中，用消毒过的棉塞将进料口密封，蛹虫草生长温度21℃，灵芝生长温度25℃，然后培养5-7d，镜检后，在超净工作台上，作为经培育的食药用菌菌种接入料袋,得菌袋；
2) 菌丝体生长：将菌袋移进通风干燥且避光的菌丝培养室，调节蛹虫草菌丝体生长的室内温度为21℃，灵芝菌丝体生长的室内温度为25℃，观察菌丝体铺满料袋，需7-10h，光照着色，13-15h 收料；
3) 采收：去袋，菌丝体和培养基同时放置阳光下晾晒至干或在30-40℃下烘干；
4) 菌丝体深加工：将晾干或烘干的菌丝体用粉碎机粉碎，然后用膨化机破壁膨化，膨化温度设定为120℃，再二次粉碎，分装，即得菌粉成品。
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