CN103242399A

CN103242399A - 一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法

Info

Publication number: CN103242399A
Application number: CN 201310179358
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2013-05-15
Filing date: 2013-05-15
Publication date: 2013-08-14

Abstract

本发明公开了一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法。方法步骤如下：a取构树叶原料粉碎，用5-10倍量饱和石灰水浸泡2-3次，提取液合并过滤依次用超滤膜、纳滤膜进行分子截留，截留液调节ph2-3加入聚酰胺树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩得浓缩液；b上述浓缩液采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。采用该方法生产芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷，工艺操作简单，收率高，易于工业化。

Description

一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法。

背景技术

构树为桑科楮属植物，以乳液、根皮、树皮、叶、果实及种子入药。叶清热、凉血、利湿、杀虫，用于鼻衄、肠炎、痢疾等。现代研究发现，构树叶中含有大量黄酮物质，其中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷就是其中成分之一。

芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷是以芹菜素为母体的黄酮苷，分子式C21H18O11，分子结构式：

。

通过文献检索，目前提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷方法都较繁琐，而且很难工业化生产。如专利（申请号：201210009876.）“透骨草中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷的提取分离工艺”，该专利公开的方法是称取透骨草干燥粗粉，加入以粗粉10倍量的60％乙醇浸泡过夜后，超声提取三次，合并提取液并减压浓缩，将浓缩液分别用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇等溶剂各萃取三次，由此得到正丁醇提取物并进行硅胶柱层析，采用不同梯度氯仿-甲醇＝45∶1～氯仿-甲醇＝1∶1对正丁醇提取物进行洗脱；用薄层色谱TLC检测，合并相同组分，浓缩至小体积，再经反复纯化得到化合物。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷与不足，提供一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的高效、简便方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的：

一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法，其特征在于以下步骤:

a取构树叶原料粉碎，用5-10倍量饱和石灰水浸泡2-3次，提取液合并过滤依次用超滤膜、纳滤膜进行分子截留，截留液调节ph2-3加入聚酰胺树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩得浓缩液；

b上述浓缩液采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。

所述的超滤膜为截留分子量2000-6000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量200-400的中空纤维素膜。

所述的乙醇溶液梯度洗脱为2-5倍柱体积20-30%乙醇洗脱杂质，3-7倍柱体积40-55%洗脱有效成分。

步骤b中所述的高速逆流色谱分离的溶剂***可选氯仿、甲醇、水溶剂***，混合比例5-10:3-7:6-13，取上相做固定相，下相做流动相。

利用本发明从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷，方法操作简单，易于实现工业化生产，而且原料易得。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

取构树叶粉碎，称取2kg，用7倍量饱和石灰水溶液浸泡2次，每次3小时，提取液，用截留分子量2000的中空纤维素膜过滤，透过液再用截留分子量400的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液调节ph3加入聚酰胺树脂柱饱和吸附，先用3倍柱体积30%乙醇洗脱杂质，再用4倍50%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩得浓缩液。取氯仿、甲醇、水按5:3:7比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱管中做固定相，开动主机，转速800rpm，同时泵入下相做流动相，平衡后，设置流速2ml/min，同时用流动相溶解浓缩液，注入高速逆流色谱仪，紫外检测器在线检测，收集流分，减压干燥，得淡黄色粉末芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷1.2g，含量98.1%。

实施例2：

取构树叶粉碎，称取2kg，用5倍量饱和石灰水溶液浸泡3次，每次2小时，提取液，用截留分子量4000的中空纤维素膜过滤，透过液再用截留分子量300的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液调节ph2加入聚酰胺树脂柱饱和吸附，先用4倍柱体积20%乙醇洗脱杂质，再用6倍45%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩得浓缩液。取氯仿、甲醇、水按8:3:5比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱管中做固定相，开动主机，转速900rpm，同时泵入下相做流动相，平衡后，设置流速3ml/min，同时用流动相溶解浓缩液，注入高速逆流色谱仪，紫外检测器在线检测，收集流分，减压干燥，得淡黄色粉末芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷1.3g，含量98.5%。

实施例3：

取构树叶粉碎，称取2kg，用6倍量饱和石灰水溶液浸泡2次，每次3小时，提取液，用截留分子量3000的中空纤维素膜过滤，透过液再用截留分子量300的中空纤维素膜纳滤，收集浓缩液调节ph3加入聚酰胺树脂柱饱和吸附，先用4倍柱体积25%乙醇洗脱杂质，再用3倍60%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩得浓缩液。取氯仿、甲醇、水按9:4:10比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱管中做固定相，开动主机，转速850rpm，同时泵入下相做流动相，平衡后，设置流速2ml/min，同时用流动相溶解浓缩液，注入高速逆流色谱仪，紫外检测器在线检测，收集流分，减压干燥，得淡黄色粉末芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷1.4g，含量96.5%。

Claims

1.一种从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法，其特征在于以下步骤：

2.根据权利要求1所述的从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法，其特征在于步骤a中所述的超滤膜为截留分子量2000-6000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量200-400的中空纤维素膜。

3.根据权利要求1所述的从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法，其特征在于步骤a中所述的乙醇溶液梯度洗脱为2-5倍柱体积20-30%乙醇洗脱杂质，3-7倍柱体积40-55%洗脱有效成分。

4.根据权利要求1所述的从构树叶中提取芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法，其特征在于步骤b中所述的高速逆流色谱分离的溶剂***可选氯仿、甲醇、水溶剂***，混合比例5-10:3-7:6-13，取上相做固定相，下相做流动相。