CN103205374B - 一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用 - Google Patents

一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN103205374B
CN103205374B CN201310082969.3A CN201310082969A CN103205374B CN 103205374 B CN103205374 B CN 103205374B CN 201310082969 A CN201310082969 A CN 201310082969A CN 103205374 B CN103205374 B CN 103205374B
Authority
CN
China
Prior art keywords
feed
aflatoxin
fermented feed
milk
acid bacteria
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201310082969.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103205374A (zh
Inventor
于洁
姚国强
其木格苏都
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
XIAMEN HEMEIKESHENG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
XIAMEN HEMEIKESHENG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by XIAMEN HEMEIKESHENG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical XIAMEN HEMEIKESHENG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201310082969.3A priority Critical patent/CN103205374B/zh
Publication of CN103205374A publication Critical patent/CN103205374A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103205374B publication Critical patent/CN103205374B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Fodder In General (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

一株在发酵饲料中抑制霉菌生长、降低黄曲霉毒素B1含量，改善发酵饲料品质的乳酸菌及其应用。技术方案是：所述乳酸菌为植物乳杆菌M-9（Lactobacillus plantarum M-9）已于2012年10月29日，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号：CGMCC No.6740。本发明还公开了该乳酸菌的制备和使用方法。

Description

一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌及其应用
技术领域
本发明涉及一株发酵饲料用乳酸菌，具体是一株可抑制发酵饲料中霉菌生长、降低黄曲霉毒素含量、改善发酵饲料品质的降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌及其应用。
背景技术
黄曲霉毒素(Aflatoxin，AFT)是一类结构和理化性质相似的真菌次级代谢物，分别为B1、B2、G1、G2、M1和M2等，在所有黄曲霉毒素中，B1的毒性最强且化学性质最稳定，它具有很强的致癌性、致突变性和致畸形，是国际上认可的A类致癌物。黄曲霉毒素在作物生长过程、饲料加工、贮藏及运输过程中皆可产生。饲料发霉及由此产生的毒素中毒是世界范围内普遍存在的问题，实验证明，动物摄入AFB1后，在肝、肾、肌肉、血、乳汁以及鸡蛋中可检测到黄曲霉毒素B1及其代谢产物，从而造成动物性食品的污染，威胁人类健康。因此掌握黄曲霉毒素的防治措施，对保障粮油食品质量安全和确保动物性食品安全尤为重要。目前，生物去除黄曲霉毒素由于效率高、无毒副作用越来越受到关注。
乳酸菌是近年来正在推广的微生物添加剂，一些研究表明乳酸菌的代谢产物乳酸、醋酸、苯乳酸、丙酸和蛋白类等物质具有抑制黄曲霉生长和产毒素的能力，乳酸菌在生长过程中形成的代谢物可以抑制毒素合成或将毒素转化成无毒性的物质，乳酸菌还可通过细胞壁成分吸附黄曲霉毒素，达到去除真菌毒素的目的。因此乳酸菌在降低饲料中的黄曲霉毒素具有广阔的发展前景。
本发明针对上述课题，从分离于自然发酵饲料的130株植物乳杆菌中，筛选出一株具有抑制霉菌、降低黄曲霉毒素、改善发酵饲料品质的植物乳杆菌M-9（Lactobacillus plantarum M-9）。
发明内容
本发明的目的在于提供一株能够抑制发酵饲料中霉菌生长、降低黄曲霉毒素含量、改善发酵饲料品质的降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌及其应用。
本发明的技术方案是：
一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌，其特征在于：所述乳酸菌为植物乳杆菌M-9（Lactobacillus plantarum M-9），从130株植物乳杆菌中筛选出，具有降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1含量的特性；已于2012年10月29日，在地址为中国北京市朝阳区大屯路，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No.6740。
所述植物乳杆菌在发酵饲料中的应用，具体制备方法如下：
植物乳杆菌的活化和培养，其特征在于：将冷冻保存的Lactobacillusplantarum M-9接种于MRS液体培养基中，在温度37℃下培养18-22h，如此传代培养2-3次得到所述的活化Lactobacillus plantarum M-9菌种；所述的MRS液体培养基组成如下：10g蛋白胨、5g牛肉膏、4g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三钠、1mL吐温80、0.2g硫酸镁、0.05g硫酸锰加入1000mL蒸馏水，调节pH至6.5，121℃灭菌15min。
菌粉制备：将上述活化的菌种离心后，添加菌种保护剂冻干成菌粉，使其含Lactobacillus plantarum M-9活菌数在2.0×1011cfu/g。
植物乳杆菌在发酵饲料中的使用方法：向饲料原料中加入煮沸并冷却至室温的自来水，使饲料含水量达到40%。以接种量2×106cfu/g向全价饲料中接种Lactobacillus plantarum M-9菌粉，充分混匀。准确称取50g饲料原料于真空包装袋中，将包装袋压实以尽量排空空气，用封口机将包装袋封口，常温发酵。
发酵饲料的品质检测：全价饲料在恒温发酵期间，在0d，1d,2d，3d，4d和5d分别进行取样测定霉菌的活菌数和黄曲霉毒素B1等。
本发明提供的植物乳杆菌具有下述的积极效果：
本发明Lactobacillus plantarum M-9在发酵饲料中具有抑制霉菌生长的特性。
本发明Lactobacillus plantarum M-9添加到发酵饲料中可以降低饲料中黄曲霉毒素B1的含量、提高发酵饲料的品质。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明；下述实施例只是说明性的，并不限制本发明的保护范围。
下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。
一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌，所述乳酸菌为植物乳杆菌M-9（Lactobacillus plantarum M-9），从130株植物乳杆菌中筛选出，具有降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1含量的特性；已于2012年10月29日，在地址为中国北京市朝阳区大屯路，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No.6740。
所述植物乳杆菌在发酵饲料中的应用，具体制备方法如下：
植物乳杆菌的活化和培养，其特征在于：将冷冻保存的Lactobacillusplantarum M-9接种于MRS液体培养基中，在温度37℃下培养18-22h，如此传代培养2-3次得到所述的活化Lactobacillus plantarum M-9菌种；所述的MRS液体培养基组成如下：10g蛋白胨、5g牛肉膏、4g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三钠、1mL吐温80、0.2g硫酸镁、0.05g硫酸锰加入1000mL蒸馏水，调节pH至6.5，121℃灭菌15min。
菌粉制备：将上述活化的菌种离心后，添加菌种保护剂冻干成菌粉，使其含Lactobacillus plantarum M-9活菌数在2.0×1011cfu/g。
植物乳杆菌在发酵饲料中的使用方法：向饲料原料中加入煮沸并冷却至室温的自来水，使饲料含水量达到40%。以接种量2×106cfu/g向全价饲料中接种Lactobacillus plantarum M-9菌粉，充分混匀。准确称取50g饲料原料于真空包装袋中，将包装袋压实以尽量排空空气，用封口机将包装袋封口，常温发酵。
实验1：Lactobacillus plantarum M-9在发酵豆粕饲料中抑制霉菌的特性
将活化的菌种离心后，添加保护剂冻干成菌粉，以接种量2×106cfu/g向含水量为40%豆粕饲料中接种Lactobacillus plantarum M-9菌粉，充分混匀。准确称取50g全价饲料于真空包装袋中，将包装袋压实以尽量排空空气，用封口机将包装袋封口，常温发酵。全价饲料在恒温发酵期间，分别在0d，1d，2d，3d，4d和5d进行取样，准确称取10g发酵饲料样品于装有玻璃珠的250mL灭菌三角瓶中，加入90g灭菌蒸馏水，置于摇床上160r/min摇动15min，取0.5mL稀释液用0.85%（w/v）灭菌生理盐水梯度稀释至适当倍数时，选取100μL稀释液涂布于马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar），30℃恒温培养箱中厌氧培养48h后，对霉菌进行计数。发酵豆粕样品在发酵过程中的霉菌动态变化见表1。
表1发酵豆粕样品在发酵过程中的霉菌的活菌数变化
注：同行肩标不同小写字母表示差异显著（P<0.05）
发酵豆粕中霉菌的动态变化如表1所示，在发酵初期，由于发酵温度适宜，豆粕中pH较高，发酵环境中含有少量的氧气，导致霉菌有一定程度的增殖。随着豆粕中pH的降低及环境中氧气的消耗，霉菌生长受到限制，发酵结束时，实验组中的霉菌活菌数降至1.10log CFU/g，而空白对照组为3.51log CFU/g。实验结果表明，添加Lactobacillus plantarum M-9可以有效的抑制霉菌的生长。
实验2：Lactobacillus plantarum M-9降低发酵豆粕饲料中黄曲霉毒素B1的含量
将活化的菌种离心后，添加保护剂冻干成菌粉，以接种量2×106cfu/g向含水量为40%豆粕饲料中接种Lactobacillus plantarum M-9菌粉，充分混匀。准确称取50g豆粕饲料于真空包装袋中，将包装袋压实以尽量排空空气，用封口机将包装袋封口，常温发酵。豆粕饲料在恒温发酵期间，分别在0d，1d，2d，3d，4d和5d进行取样，从密封袋中准确称取适量豆粕饲料置于65℃烘箱中风干至恒重，并将其粉碎后，称取1g左右采用酶联免疫测试盒来测定黄曲霉毒素B1的含量。发酵豆粕样品在发酵期间黄曲霉毒素B1含量的变化见表2。
表2发酵豆粕样品在发酵期间黄曲霉毒素B1含量的变化
注：同行肩标不同小写字母表示差异显著（P<0.05）
由实验结果可知，同对照组相比，添加乳酸菌的豆粕在发酵期间AFB1含量降低，在发酵结束时，实验组中的AFB1为0.27μg/kg，AFB1含量分别减少了93.57%，结果表明，在豆粕添加乳酸菌能显著降低豆粕中AFB1的含量，从而提高豆粕的饲用安全性。

Claims (4)

1.一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌，其特征在于：所述乳酸菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)M-9，从130株植物乳杆菌中筛选出，具有降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1含量的特性；该菌菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No.6740，保藏日期为2012年10月29日。
2.如权利要求1所述的降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌的活化和培养方法，其特征在于：将冷冻保存的Lactobacillus plantarumM-9接种于MRS液体培养基中，在温度37℃下培养18-22h，如此传代培养2-3次得到活化的LactobacillusplantarumM-9菌种；所述的MRS液体培养基组成如下：10g蛋白胨、5g牛肉膏、4g酵母浸粉、20g葡萄糖、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三钠、1mL吐温80、0.2g硫酸镁、0.05g硫酸锰，1000mL蒸馏水，调节pH至6.5，121℃灭菌15min。
3.一种如权利要求1所述的降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌的菌粉的制备方法，其特征在于：将活化的菌种离心后，加入菌种保护剂冻成干粉，使其含乳酸菌活菌数在2.0×1011cfu/g。
4.如权利要求1所述的降低发酵饲料中黄曲霉毒素B1的乳酸菌的使用方法，其特征在于：向混合均匀的饲料中加入煮沸并冷却至室温的自来水，使饲料含水量达到40％；以接种量2×106cfu/g向饲料中接种由Lactobacillusplantarum M-9制备的菌粉，充分混匀，准确称取50g全价饲料于真空包装袋中，将包装袋压实以尽量排空空气，用封口机将包装袋封口，常温发酵。
CN201310082969.3A 2013-03-15 2013-03-15 一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用 Active CN103205374B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310082969.3A CN103205374B (zh) 2013-03-15 2013-03-15 一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310082969.3A CN103205374B (zh) 2013-03-15 2013-03-15 一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103205374A CN103205374A (zh) 2013-07-17
CN103205374B true CN103205374B (zh) 2015-05-13

Family

ID=48752783

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310082969.3A Active CN103205374B (zh) 2013-03-15 2013-03-15 一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103205374B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106635894A (zh) * 2016-11-29 2017-05-10 内蒙古和美科盛生物技术有限公司 一种用于生料固体发酵的保鲜菌粉及其制备工艺

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105199938B (zh) * 2015-09-25 2017-12-19 湖北工业大学 一种低黄曲霉毒素传统食醋的制备方法
CN105230966A (zh) * 2015-09-30 2016-01-13 河南科技大学 一种兽用发酵饲料及其制备方法
CN105219677A (zh) * 2015-10-26 2016-01-06 山东华牧天元农牧股份有限公司 一种降解黄曲霉毒素的复合微生物制剂及其应用
CN105941872A (zh) * 2016-05-16 2016-09-21 中国农业大学 一种布氏乳杆菌菌剂及其制备方法和应用
CN106261474B (zh) * 2016-08-08 2019-10-18 广东海洋大学 一种利用乳酸菌降解食品中真菌毒素的方法
CN107889935A (zh) * 2017-12-04 2018-04-10 大连百安泰生物科技有限公司 一种半湿状益生菌制品及其制备方法与应用
CN108795780A (zh) * 2018-06-30 2018-11-13 沈阳农业大学 一种筛选鉴定拮抗黄曲霉菌的菌株的方法
CN110791460B (zh) * 2019-12-04 2021-04-16 青岛农业大学 一株抑制黄曲霉生长及毒素产生的菌株
CN111575213B (zh) * 2020-05-29 2021-11-02 江南大学 一种微生物复合菌剂及其在制备发酵饲料中的应用
CN112410243A (zh) * 2020-09-21 2021-02-26 内蒙古农业大学 一种植物乳杆菌nm28-2及其应用
CN112655863B (zh) * 2020-12-22 2023-05-30 昆明理工大学 一种唾液乳杆菌发酵液在作为饲料防霉剂中的应用
CN115232761B (zh) * 2022-05-31 2024-01-30 吉林农业大学 一种具有改善afb1引起的肝损伤及肠菌失衡的植物乳杆菌

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101074426A (zh) * 2007-01-24 2007-11-21 合肥市科茂隆生物工程有限公司 一种植物乳杆菌发酵制备富含共轭亚油酸豆粕饲料的方法
CN101735964A (zh) * 2008-11-18 2010-06-16 中国农业大学 一种用于制备饲料的菌剂及其应用
CN102586155A (zh) * 2012-03-07 2012-07-18 江南大学 一种植物乳杆菌n13及其用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101074426A (zh) * 2007-01-24 2007-11-21 合肥市科茂隆生物工程有限公司 一种植物乳杆菌发酵制备富含共轭亚油酸豆粕饲料的方法
CN101735964A (zh) * 2008-11-18 2010-06-16 中国农业大学 一种用于制备饲料的菌剂及其应用
CN102586155A (zh) * 2012-03-07 2012-07-18 江南大学 一种植物乳杆菌n13及其用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
添加乳酸菌对青贮饲料品质的提升及奶牛健康的影响;代素贞等;《中国奶牛》;20111231;42-46 *
益生乳酸菌Lactobacillus casei Zhang 和Lactobacillus plantarum P8 对全价饲料pH 及微生物类群变化的研究;于洁等;《微生物学杂志》;20120331;1-8 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106635894A (zh) * 2016-11-29 2017-05-10 内蒙古和美科盛生物技术有限公司 一种用于生料固体发酵的保鲜菌粉及其制备工艺
CN106635894B (zh) * 2016-11-29 2019-06-07 内蒙古和美科盛生物技术有限公司 一种用于生料固体发酵的保鲜菌粉及其制备工艺

Also Published As

Publication number Publication date
CN103205374A (zh) 2013-07-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103205374B (zh) 一株降低发酵饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用
CN108570421B (zh) 一株植物乳杆菌菌株及其青贮饲料发酵剂
CN103205376B (zh) 一株适用于发酵饲料的植物乳杆菌及其应用
CN102643767B (zh) 一株植物乳杆菌及其在红薯茎叶发酵和青贮中的应用
CN104531578A (zh) 具有高效降解亚硝酸盐和强产酸功能的植物乳杆菌菌株及其用途
CN104320980B (zh) 含有乳酸片球菌j9的保健食品及其制备方法
CN103966147A (zh) 一株降解花生粕中黄曲霉毒素b1的解淀粉芽孢杆菌
CN102994423A (zh) 一株降低青贮饲料中黄曲霉毒素b1的乳酸菌及其应用
CN104593290A (zh) 一种具有抗氧化功能的泡菜复合发酵剂配方及其应用
CN103849585A (zh) 一种复合微生物发酵剂的制备方法及应用
CN110760471A (zh) 一株巴氏醋杆菌、微生物菌剂及应用和食醋制备方法
CN104560794A (zh) 一株植物乳杆菌及利用该菌株制备果蔬酱的方法
CN101560489A (zh) 一种榨菜直投式发酵剂及其制备方法
CN104894029B (zh) 肠膜明串珠菌及其在低温青贮中的应用
CN114591854A (zh) 一种具有降解植物性脂肪功能的植物乳杆菌lz026及其应用
KR20120121282A (ko) 매생이를 이용한 돈가스 소스의 제조 방법
CN107022509B (zh) 一种乳酸菌组合物的分离方法及其应用
CN109266553B (zh) 一种冻干保护剂、用其制备普洱茶用直投式冻干菌剂的方法与应用
CN106148210A (zh) 一株降解展青霉素的奥默柯达酵母及其应用
CN105558957A (zh) 生物法快速发酵泡菜的制备方法
CN102286411B (zh) 植物乳杆菌及其在发酵白菜外包叶中的应用
CN112195118A (zh) 一株具有广谱抑制真菌活性的植物乳杆菌pc28152及其应用
CN105647837A (zh) 一种泡菜发酵用复合菌剂及其应用
CN102640886B (zh) 一株植物乳杆菌在花菜外包叶青贮中的应用
CN105661393A (zh) 一种生物法快速发酵蔬菜的生产方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant