CN103204958B - 一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺。该工艺以肝素钠为原料经裂解、还原、超滤、浓缩后得到那曲肝素钙的溶液，而后调节那曲肝素钙溶液的浓度、醇沉过程中无水乙醇的用量、打浆过程中无水乙醇的用量和真空干燥时的温度，最终得到那曲肝素钙成品。本发明公开的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺解决了那曲肝素钙生产过程中乙醇残留的问题，使那曲肝素钙中的乙醇残留≤0.5%，符合欧洲药典EP7.0的要求，避开了冷冻干燥设备的使用，具有设备价格低廉、运行能耗低、维护方便、占地面积小、易于生产放大、生产成本低和工艺稳定等优点。

Description

一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺

技术领域

本发明属于那曲肝素钙的生产领域，尤其涉及一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺。

背景技术

肝素是从哺乳动物组织（如小肠粘膜、肺、肝脏）中提取的一种硫酸化的糖胺聚糖类化合物。1916年，Mclean在研究凝血问题时在狗的肝脏中首先发现了这种物质，并命名为“heparin”。肝素是一种粘多糖硫酸酯的混合物，分子量从3kd～30kd不等，分子结构极其复杂，较长时间内无法人工合成。目前只有来源于猪小肠粘膜的肝素能用于临床治疗。

肝素系列药物主要用于急性冠状动脉综合征的预防与治疗、缺血性脑血栓的预防与治疗，也用于手术后抗凝、抗栓的预防及治疗，其他深部静脉血栓的预防与治疗和透析抗凝治疗等，还能广泛用于妇产科、儿科、呼吸科、肿瘤、烧伤科等等。

二十世纪八十年代中期，欧洲首先开发出低分子肝素（LMWH），其主要由普通肝素经过物理分离、化学裂解、生物酶裂解得到，平均分子量一般为3kd～6.5kd。目前最主要的生产方法是化学裂解法，包括亚硝酸裂解法、过氧化物裂解法、卞酯裂解法等。

低分子肝素（LMWH）比普通肝素具有更高的抗FXa/抗FⅡa效价比，因而能大大减少抗血栓过程中造成的出血倾向，目前临床上正在逐步取代普通肝素。2008年全球肝素类产品销量接近60亿美元，2012年，全球肝素类药物的销售额约为97亿美元，其中80%以上是低分子产品。

那曲肝素钙属于低分子肝素的一种，以钙盐形式存在，由葛兰素史克制药有限公司开发，2009年全球销售额达2.29亿英镑。其是由肝素钠经亚硝酸裂解法制得的，平均分子量3.6kd～5kd，分子量小于2kd的部分占不到总量的15%，分子量2kd～4kd的部分占总量的35%～55%，分子量2kd～8kd的部分占总量的75%～95%。

在那曲肝素钙的生产过程中，往往涉及到以醇沉的方式来得到那曲肝素钙的湿品，这样在最终得到的那曲肝素钙中往往会有乙醇的残留，普通真空干燥技术很难使乙醇残留含量≤0.5%。目前企业处理有机溶剂残留的方法一般是采用冷冻干燥设备，但这种设备价格昂贵、运行成本高、能耗大、占地面积大和维护不方便。

发明内容

针对那曲肝素钙生产过程中的乙醇残留问题，本发明的目的在于提供一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，以使那曲肝素钙中乙醇含量≤0.5%，从而使那曲肝素钙的质量符合欧洲药典EP7.0的要求。

为了达到上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，以肝素钠为原料，经裂解、还原、超滤、浓缩后得到那曲肝素钙的溶液，还包括如下5个步骤：

S1、通过加水或浓缩调节那曲肝素钙的溶液质量为肝素钠质量的3.5～8.2倍；

S2、向醇沉罐中加入无水乙醇，加入无水乙醇的体积与经S1步骤处理后的那曲肝素钙溶液的体积的比值范围为3～7，而后将那曲肝素钙溶液全部滴入醇沉罐，之后搅拌0.5～5小时，静置1～60小时，形成沉淀静置液；

S3、从沉淀静置液中吸出上清液，然后向剩余料液中加入无水乙醇并进行打浆，且加入的无水乙醇的体积是剩余料液体积的0.1～3倍，打浆时间为0.2～10小时；

S4、对经S3步骤处理后的料液进行离心处理，并以70～99%的乙醇淋洗，然后再离心甩干得到那曲肝素钙湿品，所用乙醇的体积占肝素钠质量的1～10L/Kg；

S5、将那曲肝素钙湿品置于真空干燥箱干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥1～15小时，再依次在30°C、45°C、60°C下各干燥0.5～10小时，最后在80°C下干燥1～20小时。

通过研究发现，醇沉前那曲肝素钙的浓度、醇沉时无水乙醇的用量、打浆时无水乙醇的用量和干燥时的温度四个因素必须综合考虑，缺一不可，而且每个参数并不是固定不变的，当一个因素出现较大变动时，另三个因素也可能要随之改变，否则很可能造成乙醇残留超标。相应原因推测有以下几点：

（1）、控制醇沉前那曲肝素钙的浓度，能使醇沉时产品颗粒形态更佳，若浓度过低，则颗粒过细，离心后产品较粘，湿重大，携带的乙醇和水分大大增多，不利于干燥。若浓度过高，则沉淀颗粒较大，干燥过程中不利于乙醇向外扩散。

（2）、控制醇沉时无水乙醇的用量，同样是使产品沉淀时具备较好的颗粒形态。

（3）、控制打浆时无水乙醇的用量，则是为了调节产品中携带的乙醇和水的比例。应用普通真空干燥设备，干燥到后期，产品的干燥失重在4～6%左右趋于恒定（可能这部分水和乙醇以氢键形式和那曲肝素钙分子结合，很难干燥）。打浆时调节合适的乙醇和水的比例，能使干燥后期剩余的4～6%主要是水分，乙醇则≤0.5%。若乙醇比例过高，则干燥后期恰恰相反，剩余的4～6%主要是乙醇，肯定超标；若乙醇比例过低，则干燥过程中容易出现大量结块甚至融化，产品中包埋乙醇，难以扩散，也会使乙醇残留超标。

（4）、控制干燥温度。初期常温干燥，可以尽量除去产品表面的乙醇，并使颗粒内部的乙醇向外扩散，此时乙醇的挥发速度远远大于水分；逐渐升温时，乙醇、水分的挥发速度同时加快，乙醇的挥发仍快于水分，但二者渐渐接近；后期80℃干燥时，随着乙醇含量的降低，水分挥发速度最后超过乙醇挥发速度，干燥箱后期会有较多冷凝水。干燥后期剩余的4～6%主要是水分，乙醇则≤0.5%。

即，通过控制醇沉前那曲肝素钙的浓度、醇沉时无水乙醇的用量、打浆时无水乙醇的用量和干燥时的温度四个因素，降低那曲肝素钙中的乙醇残留，使乙醇残留量符合欧洲药典EP7.0的要求。

优选地，经S1步骤处理后的那曲肝素钙溶液的质量百分含量为8.5～20%。

优选地，经S1步骤处理后的那曲肝素钙的溶液质量为肝素钠质量的3.9～7.0倍，该那曲肝素钙溶液的质量百分含量为10～18%。

优选地，S2步骤中加入无水乙醇的体积与经S1步骤处理后的那曲肝素钙溶液的体积的比值范围为3.5～6.5。

优选地，S2步骤中那曲肝素钙溶液滴入醇沉罐后，搅拌时间为1～3小时，静置时间为3～20小时。

优选地，S3步骤中加入的无水乙醇的体积是剩余料液体积的0.3～1倍，S3步骤中打浆时间为0.5～5小时。

优选地，S4步骤中所用乙醇的体积占肝素钠质量的2～5L/Kg。

优选地，S4步骤中所用的乙醇为80～95%乙醇。

优选地，S5步骤中先常温干燥2～10小时，再依次在30°C、45°C、60°C下各干燥1～6小时，最后在80°C下干燥5～15小时。

本发明公开了一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，该工艺通过控制醇沉前那曲肝素钙溶液的浓度、醇沉时无水乙醇的用量、打浆时无水乙醇的用量和干燥时的温度四个因素，通过简单的真空干燥解决了那曲肝素钙生产过程中乙醇残留的问题，使得乙醇残留≤0.5%，符合欧洲药典EP7.0的要求，避开了冷冻干燥设备的使用，具有设备价格低廉、运行能耗低、维护方便、占地面积小、易于生产放大、生产成本低和工艺稳定等优点。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步清楚、完整地说明。

实施例一

实施例一公开了一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，具体工艺如下：

称取1kg肝素钠用亚硝酸裂解后，还原、超滤浓缩，其中含有那曲肝素钙约0.7kg；

上述浓缩液质量约3kg，加入纯化水至溶液质量达4.2kg（肝素钠投料量的4.2倍），此时那曲肝素钙溶液的浓度约为16.6%，体积约为4L；

于醇沉罐加入14L无水乙醇（3.5倍体积于上述那曲肝素钙溶液），搅拌下滴加上述料液，加毕搅拌3小时，静置10小时；

吸出上清液9.5L，剩余料液体积约8.5L，搅拌下加入剩余料液0.8倍体积的无水乙醇6.8L，打浆0.5小时；

将打浆后的料液离心，用5L、95%乙醇淋洗，甩干，得那曲肝素钙湿品1.15kg；

真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥3小时，再依次30℃干燥1小时、45℃干燥2小时、60℃干燥3小时，最后80℃干燥10小时；

得到那曲肝素钙成品706g，经检测乙醇残留0.21%，符合欧洲药典EP7.0的要求。

实施例二

实施例二公开了一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，具体工艺如下：

称取1kg肝素钠用亚硝酸裂解后，还原、超滤浓缩，其中含有那曲肝素钙约0.7kg；

上述浓缩液质量约3kg，加入纯化水至溶液质量达6.6kg（肝素钠投料量的6.6倍），此时那曲肝素钙溶液的浓度约为10.6%，体积约为6.2L；

于醇沉罐加入24.8L无水乙醇（4倍体积于上述那曲肝素钙溶液），搅拌下滴加上述料液，加毕搅拌2小时，静置15小时；

吸出上清液12.7L，剩余料液体积约18.3L，搅拌下加入剩余料液0.4倍体积的无水乙醇7.3L，打浆1小时；

将打浆后的料液离心，用3L、85%乙醇淋洗、甩干，得到那曲肝素钙湿品1.68kg；

真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥5小时，再依次30℃干燥3小时、45℃干燥2小时、60℃干燥2小时，最后80℃干燥12小时；

得到那曲肝素钙成品692g，经检测乙醇残留0.38%，符合欧洲药典EP7.0的要求。

在其它实施例中，醇沉前调节那曲肝素钙溶液质量与肝素钠质量的比值范围为3.5～8.2，优选为3.9～7；醇沉过程中无水乙醇与那曲肝素钙溶液体积的比值范围为3～7，优选为3.5～6.5；醇沉过程中搅拌时间为0.5～5小时，优选为1～3小时，静置时间为1～60小时，优选为3～20小时；打浆过程中无水乙醇的体积为剩余料液体积的0.1～3倍，优选为0.3～1倍；打浆过程中打浆时间为0.2～10小时，优选为0.5～5小时；淋洗过程中所用乙醇为70～99%乙醇，优选为80～95%乙醇，所用乙醇体积占肝素钠质量的1～10L/Kg，优选为2～5L/Kg；真空干燥过程中，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥1～15小时，再依次30℃、45℃、60℃分别干燥0.5～10小时，最后80℃干燥1～20小时，优选为先常温干燥2～10小时，再依次30℃、45℃、60℃分别干燥1～6小时，最后80℃干燥5～15小时。

下面通过与实施例一的对比实验1、对比实验2来说明醇沉时无水乙醇的用量和打浆时无水乙醇的用量这两个因素在降低乙醇残留工艺中所发挥的重要作用，通过与实施例二的对比实验1、对比实验2来说明醇沉前那曲肝素钙溶液的浓度和真空干燥时的温度这两个因素在降低乙醇残留工艺中所发挥的重要作用。

实施例一的对比实验1：醇沉时无水乙醇的用量改变

称取1kg肝素钠用亚硝酸裂解后，还原、超滤浓缩，其中含有那曲肝素钙约0.7kg；

上述浓缩液质量约3kg，加入纯化水至溶液质量达4.2kg（肝素钠投料量的4.2倍），此时那曲肝素钙溶液的浓度约为16.6%，体积约为4L；

于醇沉罐加入30L无水乙醇（7.5倍体积于上述那曲肝素钙溶液），搅拌下滴加上述料液，加毕搅拌3小时，静置10小时；

吸出上清液19.8L，剩余料液体积约14.2L，搅拌下加入剩余料液0.8倍体积的无水乙醇11.4L，打浆0.5小时；

将打浆后的料液离心，用5L、95%乙醇淋洗，甩干，得那曲肝素钙湿品1.32kg；

真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥3小时，再依次30℃干燥1小时、45℃干燥2小时、60℃干燥3小时，最后80℃干燥10小时；

得到那曲肝素钙成品710g，经检测乙醇残留3.24%，不符合欧洲药典EP7.0的要求。

实施例一的对比实验2：打浆时无水乙醇的用量改变

称取1kg肝素钠用亚硝酸裂解后，还原、超滤浓缩，其中含有那曲肝素钙约0.7kg；

上述浓缩液质量约3kg，加入纯化水至溶液质量达4.2kg（肝素钠投料量的4.2倍），此时那曲肝素钙溶液的浓度约为16.6%，体积约为4L；

于醇沉罐加入14L无水乙醇（3.5倍体积于上述那曲肝素钙溶液），搅拌下滴加上述料液，加毕搅拌3小时，静置10小时；

吸出上清液9.6L，剩余料液体积约8.4L，搅拌下加入无水乙醇29.4L(3.5倍于剩余料液），打浆0.5小时；

将打浆后的料液离心，用5L、95%乙醇淋洗、甩干，得那曲肝素钙湿品1.29kg；

真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥3小时，再依次30℃干燥1小时、45℃干燥2小时、60℃干燥3小时，最后80℃干燥10小时；

得到那曲肝素钙成品701g，经检测乙醇残留4.20%，不符合欧洲药典EP7.0的要求。

实施例二的对比实验1：醇沉前那曲肝素钙溶液的浓度改变

称取1kg肝素钠用亚硝酸裂解后，还原、超滤浓缩，其中含有那曲肝素钙约0.7kg；

上述浓缩液质量约3kg，加入纯化水至溶液质量达8.5kg（肝素钠投料量的8.5倍），此时那曲肝素钙溶液的浓度约为8.23%，体积约为8.2L；

于醇沉罐加入32.8L无水乙醇（4倍体积于上述那曲肝素钙溶液），搅拌下滴加上述料液，加毕搅拌2小时，静置15小时；

吸出上清液19.1L，剩余料液体积约21.9L，搅拌下加入剩余料液0.4倍体积的无水乙醇8.8L，打浆1小时；

将打浆后的料液离心，用3L、85%乙醇淋洗，甩干，得那曲肝素钙湿品1.81kg；

真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥5小时，再依次30℃干燥3小时、45℃干燥2小时、60℃干燥2小时，最后80℃干燥12小时；

得到那曲肝素钙成品703g，经检测乙醇残留2.88%，不符合欧洲药典EP7.0的要求。

实施例二的对比实验2：真空干燥时温度控制改变

称取1kg肝素钠用亚硝酸裂解后，还原、超滤浓缩，其中含有那曲肝素钙约0.7kg；

上述浓缩液质量约3kg，加入纯化水至溶液质量达6.6kg（肝素钠投料量的6.6倍），此时那曲肝素钙溶液的浓度约为10.6%，体积约为6.2L；

于醇沉罐加入24.8L无水乙醇（4倍体积于上述那曲肝素钙溶液），搅拌下滴加上述料液，加毕搅拌2小时，静置15小时；

吸出上清液12.5L，剩余料液体积约18.5L，搅拌下加入剩余料液0.4倍体积的无水乙醇7.4L，打浆1小时；

将打浆后的料液离心，用3L、85%乙醇淋洗，甩干，得到那曲肝素钙湿品1.70kg；

真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，直接80℃，干燥中期产品结块十分严重，粉碎后继续干燥，总计干燥20小时，得到那曲肝素钙成品696g，经检测乙醇残留2.70%，不符合欧洲药典EP7.0的要求。

由上述实施例及对比实验可知，本发明公开了一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，通过控制醇沉前那曲肝素钙溶液的浓度、醇沉时无水乙醇的用量、打浆时无水乙醇的用量和干燥时的温度四个因素，通过简单的真空干燥解决了那曲肝素钙生产过程中乙醇残留的问题，通过对比实施例说明了这四个因素在降低乙醇残留工艺中发挥着重要作用；该工艺使得那曲肝素钙中的乙醇残留符合欧洲药典EP7.0的要求，避开了冷冻干燥设备的使用，具有设备价格低廉、运行能耗低、维护方便、占地面积小、易于生产放大、生产成本低和工艺稳定等优点。

值得注意的是，上述实施例仅是对本发明的技术方案的具体说明，并不用于限定本发明，凡是对本发明作同一构思的等同替换或变换，均属于本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，以肝素钠为原料，经裂解、还原、超滤、浓缩后得到那曲肝素钙的溶液，其特征在于，还包括如下5个步骤：

S1、通过加水或浓缩调节所述那曲肝素钙的溶液质量为所述肝素钠质量的3.5～8.2倍；经加水或浓缩调节后的那曲肝素钙溶液的质量百分含量为8.5～20％；

S2、向醇沉罐中加入无水乙醇，加入所述无水乙醇的体积与经所述S1步骤处理后的那曲肝素钙溶液的体积的比值范围为3～7，而后将那曲肝素钙溶液全部滴入醇沉罐，之后搅拌0.5～5小时，静置1～60小时，形成沉淀静置液；

S3、从沉淀静置液中吸出上清液，然后向剩余料液中加入无水乙醇并进行打浆，且加入的所述无水乙醇的体积是剩余料液体积的0.1～3倍，打浆时间为0.2～10小时；

S4、对经S3步骤处理后的料液进行离心处理，并以70～99％的乙醇淋洗，然后再离心甩干得到那曲肝素钙湿品，所用乙醇的体积占所述肝素钠质量的1～10L/Kg；

S5、将所述那曲肝素钙湿品置于真空干燥箱干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常温干燥1～15小时，再依次在30℃、45℃、60℃下各干燥0.5～10小时，最后在80℃下干燥1～20小时。

2.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：经所述S1步骤处理后的那曲肝素钙的溶液质量为所述肝素钠质量的3.9～7.0倍，该那曲肝素钙溶液的质量百分含量为10～18％。

3.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：所述S2步骤中加入无水乙醇的体积与经所述S1步骤处理后的那曲肝素钙溶液的体积的比值范围为3.5～6.5。

4.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：所述S2步骤中那曲肝素钙溶液滴入醇沉罐后，搅拌时间为1～3小时，静置时间为3～20小时。

5.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：所述S3步骤中加入的无水乙醇的体积是剩余料液体积的0.3～1倍，所述S3步骤中打浆时间为0.5～5小时。

6.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：所述S4步骤中所用乙醇的体积占所述肝素钠质量的2～5L/Kg。

7.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：所述S4步骤中所用乙醇为80～95％乙醇。

8.根据权利要求1所述的低乙醇残留的那曲肝素钙生产工艺，其特征在于：所述S5步骤中先常温干燥2～10小时，再依次在30℃、45℃、60℃下各干燥1～6小时，最后在80℃下干燥5～15小时。