CN102994422A - 一种植物乳杆菌在改善酒精性肝损伤中的应用 - Google Patents
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Abstract
一种植物乳杆菌菌株在改善酒精性肝损伤中的应用。技术方案是：其特征在于：所述植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum P-8）分离自酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力；该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号CGMCC No.6312。所述植物乳杆菌在改善酒精性肝损伤中的应用。所述植物乳杆菌在发酵剂、发酵乳制品、健康食品、保健食品中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及一种分离自内蒙古传统乳制品--酸牛奶中的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum P-8）菌株在改善酒精性肝损伤中的应用。
技术背景
酒精中毒是当今世界范围内第一公害，其毒性作用可累及全身主要脏器，对肝脏的影响尤大，酒精中毒是80%肝硬变的原因，对病毒性肝炎、肝癌等的发生有着不可忽视的影响。
人体各种营养物质的转化合成都由肝脏完成，各种各样的毒素也要经过肝脏来分解。酒精的代谢也不例外，其代谢产物乙醛对肝细胞的毒性作用非常大。因此，积极防治酒精性肝病，具有重要的社会和经济意义。通过食用含有活性益生菌的制品保护肝脏是一种简单、有效、对身体无害的方法。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种植物乳杆菌菌株在改善酒精性肝损伤中的应用。
本发明的主要技术方案如下：一种植物乳杆菌，其特征在于：所述植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum P-8）分离自酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力；该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号CGMCCNo.6312。
所述植物乳杆菌在改善酒精性肝损伤中的应用。
所述植物乳杆菌在发酵剂、发酵乳制品、健康食品、保健食品中的应用。
本发明的有益效果是：本发明的植物乳杆菌，能有效改善因酒精摄入而导致的肝损伤。
附图说明
图1为实验设计图；
图2为大鼠血清ALP水平测定结果图；
图3为大鼠血清γ-GT水平测定结果图；
图4为大鼠GOT/GPT比值测定结果图；
图5为大鼠肝脏CYP3A1表达水平结果图；
图6为大鼠肝脏CYP3A2表达水平结果图；
图7为大鼠肝脏CYC表达水平结果图；
图8为大鼠肝脏组织切片病理学观察结果图。
具体实施方式
下面结合应用实施例对本发明作进一步说明，以下实施例仅具有说明性，本发明并不受此实施例的限制。
一种植物乳杆菌，所述植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum P-8）分离自酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力；该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号CGMCC No.6312。
所述植物乳杆菌在改善酒精性肝损伤中的应用。
所述植物乳杆菌在发酵剂、发酵乳制品、健康食品、保健食品中的应用。实验1：Lactobacillus plantarum P-8对大鼠酒精肝损伤的改善作用。
1实验方法
1.1实验菌株制剂
Lactobacillus plantarum P-8菌粉制剂，活菌含量2×1011cfu/g，由北京和美科健生物技术有限责任公司提供。
1.2实验动物
实验采用Wistar雄性大鼠，体重（200±20）g，由内蒙古大学实验动物中心提供。
1.3实验主要试剂盒
A059碱性磷酸酶（ALP）试剂盒，C017γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）试剂盒，C009GPT谷丙转氨酶试剂盒，C0010GOT谷草转氨酶试剂盒，均购自南京建成生物工程研究所。
PrimeScriptRT reagent RNA反转录试剂盒，SYBR green reagent荧光定量RT-PCR试剂盒，均购自大连宝生物工程有限公司。
1.4实验设计
如图1所示，实验分11组（每组10只大鼠），包括正常组（NC）、2个模型组（M2和M4）、4个预防组（PL/PM/PH/PS，大鼠摄入白酒的同时分别灌胃不同剂量植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-82个月）、3个治疗组（TL/TM/TH，大鼠先摄入白酒（65度）1个月后分别灌胃不同剂量植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-81个月）。植物乳杆菌Lactobacillus plantarumP-8按剂量不同分为高（1.5×109cfu/d）、中（2×108cfu/d）、低（1×108cfu/d）三个组。除正常组外，其它组酒精肝造模按每周所测得的大鼠体重给予每日清晨灌胃一次，每次酒精剂量7g/(kg·bw)，玉米油剂量2g/(kg·bw)。
2结果与分析
2.1血清生理生化指标
2.1.1碱性磷酸酶水平
碱性磷酸酶（ALP）的主要作用是将储存能量和复制DNA相关分子中的磷酸基团去除。在发生肝损伤后，损坏的肝脏细胞会释放产生大量的ALP以维持其存活。酒精摄入会使肝脏细胞产生大量的ALP。由图2所示，各不同剂量植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-8预防组和治疗组与模型组M2相比均能够显著降低ALP水平（P<0.01），图2中，（X±SEM，n=10）**。
2.1.2γ-谷氨酰基转移酶水平
γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）是酒精肝诊断中最重要的酶。在酒精肝损伤初期，血清中升高的γ-GT水平是肝脏损伤的唯一指标。长期饮酒虽没有肝损伤的人群，其γ-GT水平是不饮酒人群的2-3倍，而由饮酒诱发肝损伤的病人其γ-GT水平能升到不饮酒人群的10-20倍。由图3可知，3个植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-8治疗组的γ-GT水平显著低于模型组M2（P<0.01，P<0.05），（X±SEM，n=10）**。
2.1.3谷草转氨酶/谷丙转氨酶（GOT/GPT）比值
GPT主要存在于细胞质中，而GOT主要分布于线粒体内。GOT/GPT比值表明了酒精对肝脏的损伤程度。图4中，植物乳杆菌Lactobacillus plantarumP-8治疗组与模型组相比GOT/GPT比值无显著差异（P＞0.05）。
2.2肝脏相关基因的表达
使用RT-PCR测定CYP3A1/GAPDH、CYP3A2/GAPDH、CYC/GAPDH的基因表达。
在体内参与药物代谢的酶主要为肝细胞色素P450氧化酶（以下简称P450酶），是一组由许多同工酶组成的超家族，对许多内源性、外源性化合物在体内I相生物转化有重要作用，在药理学、毒理学研究中有重要意义。许多药物通过对P450酶的调控作用（诱导或抑制）来影响其活性，CYP3A酶是细胞色素P450酶系的重要亚族,其在肝脏中含量丰富，在药物代谢中起着重要作用，CYP3A是肝脏中含量最丰富的CYP形式，参与许多口服药物的首关效应。在成人肝脏中CYP3A4是CYP3A亚族最主要的亚型，而在大鼠肝脏中CYP3A亚族最主要的亚型为CYP3A1和CYP3A2。
图5、图6、图7中，不同剂量的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-8预防组和治疗组均能够不同程度显著降低酒精性肝损害大鼠肝脏组织中CYP3A1、CYP3A2或CYC的表达水平（P<0.01）。植物乳杆菌Lactobacillusplantarum P-8能够调节酒精肝大鼠肝脏中I相代谢酶之肝细胞色素酶P450家族成员CYP3A1的表达，并起到保护肝脏的作用。
2.3形态学变化
图8中，A为酒精组，B为益生菌治疗组。
取肝脏称重后以10%***液固定，石蜡包埋，HE染色后进行组织病理学观察。结果显示：酒精对照组大鼠肝脏基本无异常情况。酒精组大鼠肝脏出现弥漫性肝细胞样变，有大量的细胞溶解并有炎症出现，少数坏死灶。脂质内充满脂肪空泡，酷似泡沫细胞，有脂滴出现，细胞排列紊乱。治疗组大鼠肝脏细胞较酒精组大鼠肝脏有不同程度的修复，脂质内脂肪空泡减少，治疗组大鼠肝脏细胞情况较酒精组好、有细胞溶解并有炎症出现，少数坏死灶，脂肪空泡较少，细胞排列较酒精组好。
3结论
植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-8（CGMCC No.6312）活菌制剂灌服实验大鼠后，可显著降低ALP和γ-GT水平，且不同程度显著降低酒精性肝损害大鼠肝脏组织中CYP3A1、CYP3A2或CYC的表达水平，从而有效的改善酒精对肝脏的损伤。
Claims (3)
1.一种植物乳杆菌，其特征在于：所述植物乳杆菌（Lactobacillus plantarumP-8）菌株分离自酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力。该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No.6312。
2.一种如权利要求1所述的植物乳杆菌的应用，其特征在于：所述植物乳杆菌在改善酒精性肝损伤中的应用。
3.如权利要求2所述的植物乳杆菌的应用，其特征在于：所述植物乳杆菌在发酵剂、发酵乳制品、健康食品、保健食品中的应用。
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