CN102987114B - 一种用于生猪养殖的饲料添加剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于生猪养殖的饲料添加剂，它是微生态制剂，由包含伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）、罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）、嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的菌群，按菌落形成单位数目比为（1-3）：（8-12）：（2-5）：（4-8）配制而成。本发明的饲料添加剂能改善生猪的肠道微生态结构，对生猪具有一定的促生长作用，且能促进生猪对营养物质的消化吸收。
Description
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域，具体而言，涉及一种用于生猪养殖的饲料添加剂。
背景技术
在过去的几十年中，抗生素作为饲料添加剂在饲料工业中大规模的应用，在预防畜禽疾病，促进动物生长，提高饲料报酬方面发挥了不可磨灭的作用；同时极大的提高了畜禽的数量及畜产品的产量，积极的推动了国内外畜牧业的发展，创造了较为可观的经济效益。但随着抗生素的长期使用，其带来的负面效应越来越受到人们的关注：细菌耐药性越来越强，导致动物胃肠道微生态失衡，消化***紊乱，畜禽机体免疫力下降，不仅降低了对畜禽的抗病促生长效果，还会引起畜禽内源性感染和二重感染；同时再加上药物残留问题不仅对环境造成了巨大的污染，还会影响畜禽产品质量对人类的健康造成严重的危害。因此，欧盟从1999年开始禁止在饲料中添加杆菌肽、螺旋霉素、维吉尼亚霉素、泰乐菌素4种抗生素；并在2006年开始全面禁止使用抗生素生长促进剂。开发“安全、高效、稳定、可控”的新型饲料添加剂成为国内外研究的热点。
微生态制剂(Probiotics)又被称为益生菌或微生态调节剂，是一种进入寄主机体后有益于寄主健康的活性微生物，具有无毒、无副作用、无残留的特点。微生态制剂是通过向动物肠道中导入有益的活菌及其代谢产物，维持肠道内正常的微生态平衡，达到预防和治疗疾病，增强动物机体的免疫力，提高生产性能等作用，并且不会产生耐药性，无抗生素残留，成为目前抗生素替代品研究和应用的热点和焦点。早在20世纪初，人类就认识到乳酸菌等多种微生物可对人体产生有利影响，我国农业部允许使用的饲料级微生物菌种包括乳酸菌、酵母菌、双歧杆菌和芽抱杆菌等16种。一般而言，这些微生物多从动物肠道内分离出来。微生态制剂主要通过调节肠道微生态平衡，而起到减少动物疾病发生、促进动物生长和提高料肉比等作用，其作用效果存在剂量依赖效应，研究认为，每日摄入并到达肠道后的活菌数为106-109CFU个时微生态制剂才能起到有效作用。
综上所述，通过研究开发一种以益生菌为活性成分，能改善生猪的肠道微生态结构，对生猪具有一定的促生长作用，且能促进生猪对营养物质的消化吸收的饲料添加剂，这显得尤为必要。
发明内容
本发明的目在于通过大量筛选试验进行组方和尝试，提供一种以益生菌为活性成分，具有用于生猪养殖的饲料添加剂。
本发明的目的是这样实现的：
一种用于生猪养殖的饲料添加剂，它是微生态制剂，由包含伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372的菌群，按菌落形成单位数目比为（1-3）：（8-12）：（2-5）：（4-8）配制而成。
优选地，所述菌群由伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372按菌落形成单位数目比为（1-3）：（8-12）：（2-5）：（4-8）组成。
进一步优选地，所述菌群由伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372按菌落形成单位数目比为2.2：10.5：3.6：6.0组成。
再进一步优选地，所述的用于生猪养殖的饲料添加剂，它为微生态固体制剂或微生态液体制剂；如粉剂、水剂。
本发明通过试验研究表明，在生猪日粮中添加微生态制剂作为饲料添加剂进行饲喂后，与空白组或抗生素组比较，试验组I组和试验组Ⅱ组平均日增重均显著高于空白组和抗生素组(P＜0.05或P＜0.01)。试验组I组和试验组Ⅱ组与空白组相比日采食量增加显著(P＜0.05)，与抗生素组相比日采食量有增加的趋势，但增加不显著(P＞0.05)。另外，与空白组或抗生素组比较，试验组I组和试验组Ⅱ组料重比均显著高于空白组和抗生素组(P＜0.05或P＜0.01)。另外，与空白组相比，试验组Ⅰ组的粗脂肪、粗灰分、粗蛋白、粗纤维、钙及能量的表观消化率获得了极显著性提高的效果(P＜0.01)，磷和无氮浸出物的表观消化率显著性提高(P＜0.05)。试验Ⅱ组的的粗脂肪、粗灰分、粗蛋白、粗纤维、钙、能量及无氮浸出物的表观消化率均显著性高于空白组(P＜0.05或P＜0.01)，磷的养分消化率有提高的趋势，但差异性不显著(P＞0.05)。试验组I与抗生素组相比，各营养物质的表观养分消化率均有提高的趋势，尤其是除无氮浸出物以外的各营养物质的表观养分消化率差均显著性高于抗生素组(P＜0.05或P＜0.01)。以上结果显示，本发明的饲料添加剂能改善生猪的肠道微生态结构，对生猪具有一定的促生长作用，且能促进生猪对营养物质的消化吸收，效果甚至优于抗生素。
具体实施方式
以下是本发明饲料添加剂的具体制备例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
实施例1 微生态粉剂的制备
用于生猪养殖的饲料添加剂由菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D组成。菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D按照如下方法制备：
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）的配制：称取去皮马铃薯200g，切块煮沸30min，然后用纱布过滤取汁，再加20.0g葡萄糖及20.0g琼脂，溶化后补足水到1000mL，分装到10个150mL的三角瓶，121℃灭菌30min，即可。
伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液，低温负压干燥后作为菌剂A。
罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液，低温负压干燥后作为菌剂B。
嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液，低温负压干燥后作为菌剂C。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液，低温负压干燥后作为菌剂D。
将上述方法制备的菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D按如下要求混合：菌剂A中伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、菌剂B中罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、菌剂C中嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和菌剂D中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372的菌落形成单位（CFU）数目比为2.2：10.5：3.6：6.0。混合后的复合菌剂为生猪养殖用的微生态制剂。每克微生态制剂产品中所含活菌数在3×108至8×108个之间。
实施例2微生态粉剂的制备
用于生猪养殖的饲料添加剂由菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D组成。菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D按照实施例1的方法制备而成。
将制备的菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D按如下要求混合：菌剂A中伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、菌剂B中罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、菌剂C中嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和菌剂D中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372的菌落形成单位（CFU）数目比为1.1：11.8：2.0：4.2。混合后的复合菌剂为生猪养殖用的微生态制剂。每克微生态制剂产品中所含活菌数在3×108至8×108个之间。
实施例3 微生态水剂的制备
用于生猪养殖的饲料添加剂由菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D组成。菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D按照如下方法制备：
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）的配制：称取去皮马铃薯200g，切块煮沸30min，然后用纱布过滤取汁，再加20.0g葡萄糖及20.0g琼脂，溶化后补足水到1000mL，分装到10个150mL的三角瓶，121℃灭菌30min，即可。
伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液作为菌剂A。
罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液菌剂B。
嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液作为菌剂C。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372，在上述PDA培养基中28℃，200r/min摇床振荡培养3d，收集所有的发酵液为菌剂D。
将上述方法制备的菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D按如下要求混合：菌剂A伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、菌剂B中罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、菌剂C中嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和菌剂D中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372的菌落形成单位（CFU）数目比为2.8：10.2：3.2：6.6。混合后的复合菌剂为用于生猪养殖的饲料添加剂。每毫升微生态制剂产品中所含活菌数在1×108至8×108个之间。
实施例4
选取28公斤左右胎次相同、体重相近、健康的杜×长×大生长猪96头。试验采用单因素完全随机试验设计(见表1)，分为4个处理:空白组日粮为基础日粮；抗生素组日粮组成为基础日粮+75mg/kg金霉素；试验I组日粮组成为基础日粮+0.2%微生态制剂（实施例1制备）；试验Ⅱ组的日粮组成为基础日粮+0.2%微生态制剂（实施例2制备）。每组有4个重复，一栏为一个重复，每栏6头猪。
表1试验分组与饲喂组成
| 处理组 | 样本量（头） | 饲粮组成 |
| 空白组 | 24 | 基础饲粮 |
| 抗生素组 | 24 | 基础饲粮+ 75mg/kg金霉素 |
| 试验Ⅰ组 | 24 | 基础饲粮+ 0.2%本发明实施例1饲料添加剂 |
| 试验Ⅱ组 | 24 | 基础饲粮+ 0.2%本发明实施例2饲料添加剂 |
试验选用玉米-豆粕型基础饲粮，参照NRC(1998)猪的营养需要，饲料配方为（按重量比）：玉米63.4%，豆粕25.0%，鱼粉3.0%，麦麸2.0%，脂肪粉3.0%，磷酸氢钙1.0%，食盐0.3%，石粉1.0%，复合维生素-微量元素预混料1.0%，赖氨酸0.3%。其中，预混料为每公斤日粮提供:维生素A 270kIU、维生素C 298mg、维生素D3 1700IU、维生素E 43.75mg、维生素K3 3.12mg、生物素0.4mg、叶酸0.65mg、泛酸钙15mg，烟酸25mg、维生素B2 6.25mg、维生素B1 1.87mg、维生素B6 5mg、维生素B12 0.023mg、氯化胆碱 600mg、Cu 12mg、Fe 130mg、Zn 120mg、Mn 50mg、Se 0.16mg、Co 0.1mg、I 0.35mg。
试验前驱虫，饮水器提供充足清洁饮水，每日分别于8:00和16:00饲喂。其他免疫、消毒、卫生等饲养管理按猪场常规进行。供试前观察生长猪的健康状况，试验期为28天。
在正式试验开始前和试验结束第二天8:00空腹12h称重，准确记录每天的饲料消耗量，计算平均日增重和料重比。
平均日增重=总增重/试验天数
料重比=饲料总消耗量/总增重
在试验第三周进行消化试验，采用内源指示剂法(酸不溶灰分4mol/mL HCl)，预饲三天，收粪四天。收粪时保证粪便不受污染，存于-20℃的冰柜中备用。试验结束后，粪样全部解冻，65℃烘箱中烘干，然后放置空气中回潮24h，粉碎后过40目筛，制成风干样品，保存，用于养分分析。
由表2的试验结果可以看出，与空白组或抗生素组比较，试验组I组和试验组Ⅱ组平均日增重均显著高于空白组和抗生素组(P＜0.05或P＜0.01)。试验组I组和试验组Ⅱ组与空白组相比日采食量增加显著(P＜0.05)，与抗生素组相比日采食量有增加的趋势，但增加不显著(P＞0.05)。另外，与空白组或抗生素组比较，试验组I组和试验组Ⅱ组料重比均显著低于空白组和抗生素组(P＜0.05或P＜0.01)。
表2不同处理对生长猪生产性能的影响
| 组别 | 空白组 | 抗生素组 | 试验Ⅰ组 | 试验Ⅱ组 |
| 初始体重（kg） | 29.12±3.42 | 28.93±2.58 | 28.60±3.02 | 29.12±3.15 |
| 末重（kg） | 48.13±3.60 | 48.96±3.81 | 51.29±2.64 | 50.65±4.10 |
| 平均日增重（kg/d） | 0.67±0.046 | 0.71±0.040 | 0.81±0.033**￥￥ | 0.77±0.038*￥ |
| 平均日采食量（kg） | 1.54±0.22 | 1.59±0.11 | 1.66±0.09* | 1.63±0.07* |
| 料重比 | 2.30±0.18 | 2.24±0.19 | 2.05±0.13**￥ | 2.12±0.12*￥ |
与空白组比较，* P＜0.05，** P＜0.01；
与抗生素组比较，￥ P＜0.05，￥￥ P＜0.01。
由表3的试验结果可以看出，与空白组相比，试验组Ⅰ组的粗脂肪、粗灰分、粗蛋白、粗纤维、钙及能量的表观消化率获得了极显著性提高的效果(P＜0.01)，磷和无氮浸出物的表观消化率显著性提高(P＜0.05)。试验Ⅱ组的的粗脂肪、粗灰分、粗蛋白、粗纤维、钙、能量及无氮浸出物的表观消化率均显著性高于空白组(P＜0.05或P＜0.01)，磷的养分消化率有提高的趋势，但差异性不显著(P＞0.05)。试验组I与抗生素组相比，各营养物质的表观养分消化率均有提高的趋势，尤其是除无氮浸出物以外的各营养物质的表观养分消化率差均显著性高于抗生素组(P＜0.05或P＜0.01)。
表3不同处理对生长猪日粮养分消化率（%）的影响
| 组别 | 空白组 | 抗生素组 | 试验Ⅰ组 | 试验Ⅱ组 |
| 粗脂肪 | 52.81±5.64 | 60.85±4.92* | 71.30±8.03**￥ | 64.00±6.52* |
| 粗灰分 | 44.92±6.12 | 49.55±4.04 | 56.93±3.90**￥￥ | 57.30±4.66**￥ |
| 粗蛋白 | 74.46±4.39 | 79.28±3.16* | 83.47±2.94**￥ | 82.41±4.01** |
| 粗纤维 | 33.01±5.40 | 38.51±4.60* | 43.81±2.24**￥￥ | 40.33±3.85* |
| 钙 | 66.43±0.43 | 68.19±0.30** | 70.16±0.44**￥￥ | 68.31±0.23** |
| 磷 | 73.04±0.36 | 73.81±0.41 | 74.62±0.83*￥ | 73.60±0.73 |
| 能量 | 80.34±2.64 | 83.15±0.69* | 86.51±1.05**￥ | 86.84±1.66**￥ |
| 无氮浸出物 | 91.20±2.11 | 94.62±1.28* | 94.80±0.94* | 94.10±0.61* |
与空白组比较，* P＜0.05，** P＜0.01；
与抗生素组比较，￥ P＜0.05，￥￥ P＜0.01。
Claims (6)
1.一种用于生猪养殖的饲料添加剂，它是微生态制剂，其特征在于：由伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372的菌群，按菌落形成单位数目比为（1-3）：（8-12）：（2-5）：（4-8）配制而成。
2.根据权利要求1所述的用于生猪养殖的饲料添加剂，其特征在于：所述菌群由伯顿毕赤酵母（Pichia burtonii）CICIM No.Y0320、罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri）CGMCC No.0841、嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCC No.0842和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CGMCC No.0372按菌落形成单位数目比为2.2：10.5：3.6：6.0组成。
3.根据权利要求1或2所述的用于生猪养殖的饲料添加剂，其特征在于：它为微生态固体制剂。
4.根据权利要求3所述的用于生猪养殖的饲料添加剂，其特征在于：它为粉剂。
5.根据权利要求1或2所述的用于生猪养殖的饲料添加剂，其特征在于：它为微生态液体制剂。
6.根据权利要求5所述的用于生猪养殖的饲料添加剂，其特征在于：它为水剂。
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