CN102928375B - 采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法，包括以下步骤：（1）待测油样的预处理；（2）采用基质加标方法绘制标准曲线，分别将混合油品、标准正常油品按照步骤（1）待测油样的方式进行预处理后，按照紫外光谱比色分析法在200nm～320nm之间进行扫描，绘制两种样品的水溶液光谱吸收图作为两者的标准曲线即为地沟油检测的检测限；（3）将水包油分子（W/O）的微乳状液体按照紫外光谱比色分析法在200nm～320nm之间进行扫描，绘制待测油样的水溶液光谱吸收图；根据水溶液光谱吸收图的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度进行判断待测油样是否为地沟油。该方法经过多方测试和验证，基本可以达到70%～80%的成功率。

Description

采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法。

背景技术

地沟油，泛指在生活中存在的各类劣质油，如回收的食用油、反复使用的炸油等。地沟油最大来源为城市大型饭店下水道的隔油池。长期食用可能会引发癌症，对人体的危害极大。目前国内尚未有检测地沟油的统一标准。现行的国家强制性标准《食用植物油卫生标准》（2716—2005）中，关于食用油的理化指标检测包括酸价、过氧化值、浸出油溶剂残留、游离酚（棉籽油）、总砷、铅、黄曲霉毒素、苯并芘、农药残留共9项指标，分别对植物原油和植物食用油进行不同的标准检测。但是植物原油、植物食用油均不是地沟油。而标准里这9项基本的食用油检测指标，即使是地沟油炼出来的油也都可能合格，根本无法针对地沟油去进行辨别性检测。

目前进行地沟油往往通过四大波谱法手段去分析研究。它们包括核磁共振波谱法（NMR）、质谱分析法（MS）、红外光谱法（IR）、紫外光谱分析法（UV）。而前三种方法需要昂贵的专用设备、专业的操作/维护人员以及特定的使用环境，而且实际使用效果也不十分理想。而现有的技术手段检测结果特异性不强，不能作为“地沟油”判定手段。本发明因此而来。

发明内容

本发明目的在于提供一种采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法，解决了现有技术中地沟油检测检测结果特异性不高、检测方法昂贵无法进行实际应用等问题。

为了解决现有技术中的这些问题，本发明提供的技术方案是：

一种采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

（1）待测油样的预处理：采用烷类溶剂对待测油样进行稀释，然后将稀释后的待测油样进行水萃取，所述萃取液采用加入表面活性剂的水溶液，形成水包油分子（W/O）的微乳状液体；

（2）采用基质加标方法绘制标准曲线，所述混合油品为标准正常油品与标准生物柴油勾兑形成，所述标准正常油品采用选自正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油的一种或两种以上的任意混合；分别将混合油品、标准正常油品按照步骤（1）待测油样的方式进行预处理后，按照紫外光谱比色分析法在200nm~320nm之间进行扫描，绘制两种样品的水溶液光谱吸收图作为两者的标准曲线即为地沟油检测的检测限；

（3）将水包油分子（W/O）的微乳状液体按照紫外光谱比色分析法在200nm~320nm之间进行扫描，绘制待测油样的水溶液光谱吸收图；根据水溶液光谱吸收图的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度进行判断待测油样是否为地沟油。

优选的，所述方法步骤（1）烷类溶剂选自异辛烷或正己烷，所述待测油样进行稀释时烷类溶剂与待测油样的体积比为2：1。

优选的，所述方法步骤（1）中表面活性剂的亲水亲油平衡值（HLB）在0～20之间。

优选的，所述方法步骤（1）中表面活性剂选自非离子表面活性剂和两性离子表面活性剂。

优选的，所述方法步骤（1）中表面活性剂选自Tween20。Tween20，其中/英文名分别为Polyoxyethylene sorbitan monolaurate，聚氧乙烯（20EO）失水山梨醇单月桂酸酯。

优选的，所述方法步骤（1）中表面活性剂加入的量为水溶液总质量的0.25%。

优选的，所述方法步骤（2）中混合油品是特别配制用作地沟油检测参照标准，为正常标准油品与标准生物柴油按照体积比50：1或者20:1或者5:1进行勾兑。混合油品是分别取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油，加入标准生物柴油勾兑而成。而标准正常油品可以选自上述5种正常油品中的一种或两种以上的任意组合，优选是上述5种正常油品中紫外吸光值较高的一种。

本发明通过对油脂所含有机化合物的分析入手，剖析其有机化合物的分子结构，找出地沟油所具备的主要共性特征，从而实现地沟油的鉴别。运用紫外光谱分析法（UV）来找出地沟油所具备的主要共性特征，然后进行准确地定性分析，完成对地沟油的快速鉴别，可以达到事半功倍的效果。本发明方法简单、快速、经济，确认地沟油所具备的主要共同特征，运用定性分析的手段，实现地沟油的快速鉴别。

本发明方法的主要原理就是采用紫外光谱分析法（UV）对油品所含有机化合物进行定性分析。

本发明采用紫外光谱分析法（UV）的适用性和可行性

（1）检测特征性成分：极性组分（Polar Compound）作为检测的主要被检测内容

为了能体现快速、经济、简便、可靠的原则，首先必须确定地沟油和区别正常食用植物油的具体特征。地沟油经过精制以后，虽然表观上和优质油相同，但它在提炼处理过程中，不容易彻底清除掉极性物质（PolarCompound），它的组分中仍会残留一些微量浓度的极性物质，和非极性芳香族化合物。因此，油品中极性组分的检测成为地沟油鉴别的重要标志。地沟油中极性组分（有机物）应包括多环芳烃、胆固醇（胆甾醇）、丙烯酰胺、游离棉酚及杂酚、香料香精等，这些极性物质很少会在一般优质食用植物油（如豆油、菜油、花生油等）出现。这也构成优劣油脂明显的本质差异，从而成为地沟油检测的关键指标。

（2）极性组分（Polar Compound）对紫外光谱的吸收特性

极性有机组分往往在紫外区域（200—300nm），具有光吸收特点。极性分子吸收了光能，会使外层电子能级发生跃迁，从而出现不同的吸收特征。因此，采用紫外分光光度法，进行不同波段的光谱吸收扫描分析，可以观察到地沟油在紫外波段强烈的吸收状况。极性组分中6种有代表性的多环芳烃（苯并芘、萤蒽等）在紫外230nm左右区域均有吸收特征。动物油脂胆固醇也存在多苯环结构，在220nm有明显的吸收峰。游离棉酚及杂酚在240~260nm区域也有较强吸收。其它极性组分如醛基和羰基物质，老油中的丙烯酰胺等在紫外波段均有相应吸收特性。

本发明还采用一些关键技术手段来解决紫外光谱分析法（UV）遇到的问题。

（1）油样不溶于水

虽然地沟油中所包含的有害物质可以对紫外光谱有吸收特性，但没有办法直接将油样进行紫外光谱比色操作，绝大多数的比色操作都是在水相中进行的。而油样也不能直接进行水溶液萃取。为此，我们借助了加入表面活性剂的水萃取溶液。表面活性剂既有亲油的特性一面也有亲水的另一面，它的亲油/亲水特性是用HLB值来表示的。其取值范围在1~40之间。HLB值越小表示其亲油性越好，可以充分地吸附油分子；HLB值越大表示其亲水性越好，可以充分地与水分子结合。只要选取适当的HLB值，例如HLB=16.7的非离子表面活性剂TWEEN20。TWEEN20水溶液的质量百分比浓度为0.25%，作为油样水萃取溶液主体，使得油样和水在一定程度上溶合，形成水包油分子（W/O）的微乳状液体，一方面可以使极性组分能有效进入萃取液中；其次，可以通过这些水包油分子（W/O）对紫外光的吸收来增强极性组分在紫外光谱段吸收的特征。

为了保证油样在非离子表面活性剂水溶液中的微乳化效果基本接近，必须对油样进行稀释预处理。具体方法是用异辛烷或者正己烷按2：1的体积比例对油样稀释。

（2）紫外光谱分析法（UV）的图谱定性分析

所谓定性分析就是通过对待测油样的紫外光谱曲线图进行分析进而对待测油样种类定性。对曲线图进行分析分别从两个方面入手，一是其在紫外段（200nm~320nm）吸光值高度；二是分析其曲线图在紫外段（200nm~320nm）的特征图形；三是将待测油样在紫外段（200nm~320nm）的特征图形与标准油样曲线图形进行相似度对比。然后，综合三方面的结论，做出最终的判断。

相对于现有技术中的方案，本发明的优点是：

由于地沟油的检测是目前尚处于科学攻关，有待于解决的一个课题。现有的各种技术手段都有一定的局限性，大多检测的成功率都不是很高。目前，本发明通过紫外光谱地沟油检测方法经过多方测试和验证，基本可以达到70%~80%的成功率。

附图说明

下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：

图1为本发明实施例1新疆成品地沟油油样、混合油品和正常标准油品的紫外光谱曲线图；

图2为本发明实施例2正常玉米油油样、混合油品和正常标准油品的紫外光谱曲线图；

图3为本发明实施例将正常标准油品、混合油品和棕榈油按照实施例1的方法进行紫外吸收检测得到的紫外光谱曲线图；

图4为本发明实施例2不同比例勾兑的千门地沟油油样的紫外光谱曲线图；

图5为本发明实施例2不同比例勾兑的千门地沟油油样、混合油品和正常标准油品的紫外光谱曲线图；

图6为本发明实施例3不同比例勾兑的广州地沟2油样的紫外光谱曲线图；

图7为本发明实施例4不同浓度生物柴油的紫外光谱曲线图。

图8为本发明实施例5检测方法重复性试验结果。

具体实施方式

以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体厂家的条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。

实施例12-21#新疆成品地沟油4油样的检测

1、采用的仪器

本实施例采用紫外光谱分析仪器——紫外光谱分析仪（微型）。紫外光谱分析仪（微型）能对从185nm到800nm的光谱进行直观地数据/图示吸光值分析。紫外分析仪对于含共轭结构的烯烃及苯环类有机物的分析是有效的，可以进行科学的定性定量分析。因此，采用微型紫外光谱仪，进行紫外分光吸收光度分析，能科学地将地沟油中的极性组分紫外吸收状况分析出来。而对于优质食用植物油，其极性组分相对较少，紫外吸收也很弱。两者显示明显的差异。仪器电脑图示紫外光谱曲线走向是不同的，可以直观、简洁地用目视图解法来鉴别地沟油。

2、具体步骤

（1）样品处理

本实施例地沟油样品为采集自新疆的疑似地沟油，编号为2-21#新疆成品地沟油4。标准正常油品采用市面上可以购买到的花生油。混合油品为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各10份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成。

1）油样的稀释

因为油样的粘度一般都很大，甚至还有固态的油样，若不加稀释，无法做到精确取样。这里，是通过加入烷类溶剂与待测油样的体积比为2：1的烷类溶剂异辛烷或正己烷来加以稀释。

2）油样的水萃取过程

将稀释后的待测样品按要求剂量，加入事先准备好的、盛有水萃取溶液的玻璃试管中，然后采用专用搅拌器进行定时搅拌，以形成水包油分子（W/O）的微乳状液体。等待10分钟，使得微乳状液体能够充分地稳定。

（2）基质加标标准工作曲线的制备

为了提高鉴别的可靠性，本发明采用相对对比法。这样可以排除仪器可能存在的干扰因素。也就是说在若干未知油品鉴别过程中，加入已知的标准油品和正常油品，它们一同参与一轮的油品鉴别过程。然后，在整个过程结束后，将未知油品的光谱图分别与已知的标准正常油品和混合油品光谱图作对比，从而得出定性的判别。

标准正常油品和混合油品所起的作用是为操作者提供一个目视判断的目标门槛。这样，标准正常油品和混合油品的标准曲线组成了判断的上限和下限标准。

（3）测定

1）制作油样的微乳状液体

根据步骤（1）中所描述的方法，将待检测油品和标准正常油品及混合油品制作成油样的微乳状液体。

2）样品萃取水溶液的紫外比色过程

将待测样品或标准油品及正常油品的微乳状液体放入鉴别仪中，由仪器自动加入比色皿中。采用的萃取液为含非离子表面活性剂TWEEN20的水溶液，TWEEN20的质量百分比浓度为0.25%。

3）绘制样品水溶液光谱吸收图和后续数据处理过程

根据所加入的样品溶液，进行比色操作。然后绘制样品水溶液光谱吸收图和后续数据处理。

4）比色皿清洗

在完成一个样品测试后，自动将样品溶液从比色皿中抽出，然后分别加入清洗剂和纯水完成清洗和漂洗过程。

5）目视鉴别

对所有样品完成上述操作步骤后，采用目视方法，根据绘制样品的微乳状液体紫外光谱吸收图曲线，分别将待鉴别油样曲线与标准正常油品及混合油品曲线在紫外段（200nm~320nm）的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度的对比，直观鉴别油品种类。检测所需时间也仅有十几分钟。

（4）结果讨论

结果如图1所示。

1）吸光值高度对比

将被测油样在紫外段（200nm~320nm）吸光值高度与标准正常油品及混合油品进行对比，可以得出初步的结论。图1显示，其紫外段（200nm~320nm）吸光值高度远高于标准正常油品及混合油品，因此可以得出正确的初步判断。

为了更为明显的说明问题，图2为本发明将正常标准油品、混合油品和玉米油按照实施例1的方法进行紫外吸收检测得到的紫外光谱曲线图。其中标准正常油品采用市面上可以购买到的花生油。混合油品为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成。玉米油作为待测油样，记为05#玉米。图2显示，玉米油的紫外段（200nm~320nm）吸光值高度远低于标准正常油品及混合油品，因此可以得出正确的初步判断。

2）紫外光谱曲线特征图形分析

在已完成对被测油样在紫外段（200nm~320nm）吸光值高度与标准油品及正常油品的作对比，并得出初步的结论后，再对被测油样的紫外光谱曲线图紫外段（200nm~320nm）可能存在特征图形进行分析，可以做出最终判断。

特征图形是指在紫外段（260nm~300nm）是否存在吸光值变化率拐点，从而导致其图形是否有拐点特征。在图2可以看到，混合油品的油样存在这样的拐点特征。而正常标准油品和其他食用油油样没有这样的拐点特征。

为了更为明显的说明问题，图3为本发明将正常标准油品、混合油品和棕榈油按照实施例1的方法进行紫外吸收检测得到的紫外光谱曲线图。其中标准正常油品采用市面上可以购买到的花生油。混合油品为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成。棕榈油作为待测油样，记为03#棕榈。图3显示，03#棕榈的吸光度值要高于标准正常油品及混合油品。但从图3中显示，虽然其吸光度值要高于标准正常油品及混合油品，但不十分明显。而且没有大多数地沟油图形中所具备的拐点特征，因此综合判断03#棕榈非地沟油。

实施例2千门地沟3油样的检测

（1）样品处理

本实施例地沟油样品为采集自千门的疑似地沟油，编号为千门地沟3；分为3种待测油样，其中30#千门地沟3+菜籽油10%为1份（体积）千门地沟油3与9份（体积）菜籽油混合而成；15#千门地沟3+菜籽油20%为1份（体积）千门地沟油3与4份（体积）菜籽油混合而成；02#千门地沟3+菜籽油50%为1份（体积）千门地沟油3与1份（体积）菜籽油混合而成。标准正常油品采用市面上可以购买到的花生油。混合油品为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成。

加入异辛烷或正己烷进行稀释，异辛烷或正己烷与待测油样的体积比为2：1。将稀释后的待测样品按要求剂量，加入事先准备好的、盛有水萃取溶液的玻璃试管中，然后采用专用搅拌器进行定时搅拌，以形成水包油分子（W/O）的微乳状液体。等待10分钟。采用的萃取液为含非离子表面活性剂TWEEN20的水溶液，TWEEN20的质量百分比浓度为0.25%。

（2）基质加标标准工作曲线的制备

本发明采用相对对比法。在整个过程结束后，将未知油品的光谱图分别与已知的标准正常油品和混合油品光谱图作对比，从而得出定性的判别。

（3）测定

将待测样品或标准油品及正常油品的微乳状液体放入鉴别仪中，由仪器自动加入比色皿中。根据所加入的样品溶液，进行比色操作。然后绘制样品水溶液光谱吸收图和后续数据处理。在完成一个样品测试后，自动将样品溶液从比色皿中抽出，然后分别加入清洗剂和纯水完成清洗和漂洗过程。

对所有样品完成上述操作步骤后，采用目视方法，根据绘制样品的微乳状液体紫外光谱吸收图曲线，分别将待鉴别油样曲线与标准正常油品及混合油品曲线在紫外段（200nm~320nm）的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度的对比，直观鉴别油品种类。

（4）结果讨论

结果如图4和图5所示。图4、5中含有同一系列不同的地沟油，它们都是用千门地沟油3#和菜籽油勾兑而成，只是地沟油含量有所不同。其中30#千门地沟3+菜籽油10%为1份（体积）千门地沟油3与9份（体积）菜籽油混合而成；15#千门地沟3+菜籽油20%为1份（体积）千门地沟油3与4份（体积）菜籽油混合而成；02#千门地沟3+菜籽油50%为1份（体积）千门地沟油3与1份（体积）菜籽油混合而成。

图4和图5中可以看出02#千门地沟油3#+菜籽油50%位于标准正常油品及混合油品的吸光度值高度之间，而其它地沟油待测油品（15#千门地沟油3#+菜籽油20%；30#千门地沟油3#+菜籽油10%）均低于标准正常油品的吸光度值高度。然而，从图4和图5可以看出，同一系列3种不同的地沟油均具备拐点特征。其吸光值的高低反映了不同含量的梯度情况。

实施例3广州地沟2与混合油品混合油样的检测

（1）样品处理

本实施例待测样品为采集自广州的疑似地沟油，编号为广州地沟2；分为3种待测油样，其中02#广州地沟2+混油10%为1份（体积）广州地沟2与9份（体积）的混油勾兑而成；01#广州地沟2+混油20%为1份（体积）广州地沟2与4份（体积）的混油勾兑而成；07#广州地沟2+混油50%为1份（体积）广州地沟2与1份（体积）的混油勾兑而成。混油为各取调和油、大豆油、花生油各1份（体积）勾兑而成。

加入异辛烷或正己烷进行稀释，异辛烷或正己烷与待测油样的体积比为2：1。将稀释后的待测样品按要求剂量，加入事先准备好的、盛有水萃取溶液的玻璃试管中，然后采用专用搅拌器进行定时搅拌，以形成水包油分子（W/O）的微乳状液体。等待10分钟。采用的萃取液为含非离子表面活性剂TWEEN20的水溶液，TWEEN20的质量百分比浓度为0.25%。

（3）测定

将待测样品的微乳状液体放入鉴别仪中，由仪器自动加入比色皿中。根据所加入的样品溶液，进行比色操作。然后绘制样品水溶液光谱吸收图和后续数据处理。在完成一个样品测试后，自动将样品溶液从比色皿中抽出，然后分别加入清洗剂和纯水完成清洗和漂洗过程。

对所有样品完成上述操作步骤后，采用目视方法，根据绘制样品的微乳状液体紫外光谱吸收图曲线，分别将待鉴别油样曲线与之前获得的标准正常油品及混合油品曲线（其他实施例已提供）在紫外段（200nm~320nm）的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度的对比，直观鉴别油品种类。

（4）结果讨论

结果如图6所示。图6中02#广州地沟2+混油10%为1份（体积）广州地沟2与9份（体积）的混油勾兑而成；01#广州地沟2+混油20%为1份（体积）广州地沟2与4份（体积）的混油勾兑而成；07#广州地沟2+混油50%为1份（体积）广州地沟2与1份（体积）的混油勾兑而成。混油为各取调和油、大豆油、花生油各1份（体积）勾兑而成。

图6中可以看出三种待测油样均具有拐点特征，可以直接判断为地沟油。可以看出地沟油含量不同，具有不同的吸光值高度。

实施例4不同浓度生物柴油的检测

（1）样品处理

本实施例待测样品为不同浓度的混合油品，其中混合1.97%为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各10份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成；混合4.8%为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成；混合16.7%为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各1份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成。标准正常油品（标样2）采用市面上可以购买到的花生油。

加入异辛烷或正己烷进行稀释，异辛烷或正己烷与待测油样的体积比为2：1。将稀释后的待测样品按要求剂量，加入事先准备好的、盛有水萃取溶液的玻璃试管中，然后采用专用搅拌器进行定时搅拌，以形成水包油分子（W/O）的微乳状液体。等待10分钟。采用的萃取液为含非离子表面活性剂TWEEN20的水溶液，TWEEN20的质量百分比浓度为0.25%。

（3）测定

将待测样品和标准正常油品的微乳状液体分别放入鉴别仪中，由仪器自动加入比色皿中。根据所加入的样品溶液，进行比色操作。然后绘制样品水溶液光谱吸收图和后续数据处理。在完成一个样品测试后，自动将样品溶液从比色皿中抽出，然后分别加入清洗剂和纯水完成清洗和漂洗过程。

对所有样品完成上述操作步骤后，采用目视方法，根据绘制样品的微乳状液体紫外光谱吸收图曲线，分别将待测油样曲线与标准正常油品在紫外段（200nm~320nm）的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度的对比。

（4）结果讨论

结果如图7所示。图7中混合1.97%为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各10份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成；混合4.8%为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各4份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成；混合16.7%为各取正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油各1份（体积），加入1份标准生物柴油（体积）勾兑而成。

图7中可以看出三种待测油样均具有拐点特征，可以作为地沟油样品的参照。可以看出混合油品的含量不同，具有不同的吸光值高度。

实施例5检测方法重复性试验。

为了考验所述检测方法的重复性和可靠性，特选用上海食品***门提供的第二批地沟油样品盲样中的4种，分别是S2-1#、S2-2#、S2-4#和S2-6#。在提供本批盲样时，采用了复样设计。其中，S2-1#和S2-6#为同种油样；而S2-2#和S2-4#为另种油样。结果如图8所示，在结果紫外光谱吸收曲线图上可以清楚地看到明确的结果。S2-1#和S2-6#油样无论在吸光值高度或整紫外光谱吸收曲线图形上都几乎完全一致；而S2-2#和S2-4#的紫外光谱吸收曲线图也说明了同样的道理。

上述实例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人是能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种采用紫外光谱分析方法进行地沟油检测的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)待测油样的预处理：采用烷类溶剂对待测油样进行稀释，然后将稀释后的待测油样进行水萃取，所述萃取液采用加入表面活性剂的水溶液，形成水包油分子(W/O)的微乳状液体；

(2)采用基质加标方法绘制标准曲线，分别将混合油品、标准正常油品按照步骤(1)待测油样的方式进行预处理后，按照紫外光谱比色分析法在200nm～320nm之间进行扫描，绘制两种样品的水溶液光谱吸收图作为两者的标准曲线即为地沟油检测的检测限；所述混合油品为标准正常油品与标准生物柴油勾兑形成，所述标准正常油品采用选自正常大豆油、菜油、葵花油、花生油、和玉米油的一种或两种以上的任意混合；

(3)将水包油分子(W/O)的微乳状液体按照紫外光谱比色分析法在200nm～320nm之间进行扫描，绘制待测油样的水溶液光谱吸收图；根据水溶液光谱吸收图的吸光值高度、光谱特征曲线以及曲线图形相似度进行判断待测油样是否为地沟油。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步骤(1)烷类溶剂选自异辛烷或正己烷，所述待测油样进行稀释时烷类溶剂与待测油样的体积比为2：1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步骤(1)中表面活性剂的亲水亲油平衡值(HLB)在0～20之间。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步骤(1)中表面活性剂选自非离子表面活性剂。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步骤(1)中表面活性剂选自Tween20。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步骤(1)中表面活性剂加入的量为水溶液总质量的0.25％。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步骤(2)中混合油品为正常标准油品与标准生物柴油按照体积比50：1或者20:1或者5:1进行勾兑。