CN102887877A

CN102887877A - 一种纯化卡巴他赛的方法

Info

Publication number: CN102887877A
Application number: CN2012104354241A
Authority: CN
Inventors: 王永毅; 陈磊; 汤志伟; 赵洪涛; 罗金龙; 黄春; 王琼
Original assignee: JIANGSU HODO BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: JIANGSU HODO BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2012-11-05
Filing date: 2012-11-05
Publication date: 2013-01-23

Abstract

本发明公开了一种纯化卡巴他赛的方法，以纯度大于98%的卡巴他赛为起始原料，以环己烷、乙酸乙酯、乙醇为结晶溶剂，得到结晶的样品；结晶样品经过滤、洗涤、干燥后采用甲醇溶解，向卡巴他赛甲醇溶液中加入适量吸附剂，经吸附剂充分吸附后，样品再经过滤、蒸干溶剂，干燥后样品经高效液相色谱检测单个工艺杂质含量降低到0.1%以下。本发明采用结晶与吸附联用的分离纯化方法有效降低了卡巴他赛合成工艺中的单个杂质含量，满足了卡巴他赛单个工艺杂质含量小于0.1%的要求。

Description

一种纯化卡巴他赛的方法

技术领域

本发明属于化学合成领域，具体涉及一种纯化卡巴他赛的方法。

背景技术

卡巴他赛（cabazitaxel），商品名为Jevtana，化学名为4-乙酰氧基-2-α-苯甲酰氧基-2α-5β，20-环氧基-1-羟基-7β，10β-二甲氧基-9-氧代紫杉-11-烯-13α-基（2R，3S）-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸酯。分子式为C₄₅H₅₇NO₁₄，结构式如式（Ⅰ）所示。卡巴他赛是赛诺非-安万特公司研发的治疗***癌的二线药物，是一种半合成的紫杉烷类小分子化合物，其抗癌作用机制与多西他赛相似。2010年6月17日，美国食品药品监督管理局（FDA）批准了卡巴他赛与醋酸***龙联用治疗晚期***癌。

Figure 2012104354241100002DEST_PATH_IMAGE001

卡巴他赛结构式。

卡巴他赛化学结构复杂，在合成过程中会产生结构类似的工艺杂质，如何去除这些合成过程中产生的杂质是卡巴他赛工艺研发阶段的技术瓶颈。目前，尚无相关专利和文献对其工艺杂质的去除进行报道。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明旨在提供一种简单且便于工业化生产的单个工艺杂质含量小于0.1%的卡巴他赛制备方法。本发明采用结晶和硅胶吸附联用的方法可以将卡巴他赛工艺杂质含量降低到0.1%以下，对于提高卡巴他赛的安全性有重要的意义；并且本方法操作简单，容易实现工业化。

本发明所述的纯化卡巴他赛的方法包括如下步骤：

（1）将纯度大于98%的卡巴他赛溶于乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂，其中卡巴他赛与混合溶剂的重量体积比为1：1200～ 1：100，搅拌溶解；乙酸乙酯和乙醇的用量比为20：1～1：1；再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该搅拌过程中溶液温度维持在45℃～55℃；产生浑浊后缓慢降温至15℃～25℃，保温2～4小时，进行结晶；

（2）过滤，以纯化水洗涤结晶后的卡巴他赛，洗涤后的卡巴他赛在40℃～55 ℃减压条件下干燥2小时～4 小时；

（3）将干燥后的卡巴他赛溶于甲醇中，其中卡巴他赛与甲醇的重量体积比为1：1800～ 1：200；向卡巴他赛甲醇溶液中加入吸附剂，搅拌吸附；吸附剂与卡巴他赛溶液的重量体积比为1：200～ 1：50；吸附时间为0.5 小时～ 3 小时；

（4）滤除吸附剂，对滤液进行浓缩，将浓缩后的卡巴他赛在40℃～55 ℃减压条件下干燥3小时～5小时，得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛。

其中，所述步骤（1）溶解过程中搅拌速度为100 rpm～300 rpm。在该搅拌速度下，能够使卡巴他赛得到快速溶解。

进一步地，本发明优选所述的步骤（1）为：将纯度大于98%的卡巴他赛溶于乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂，其中卡巴他赛与混合溶剂的重量体积比为1：1000～ 1：300，搅拌溶解，搅拌速度为150 rpm～200 rpm；乙酸乙酯和乙醇的用量比为8：1～12：1；再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该搅拌过程中温度维持在45℃～50℃；产生浑浊后在3～4小时内缓慢降温至15℃～20℃，保温3小时，进行结晶。

步骤（1）为实现本发明对卡巴他赛进行纯化的核心步骤，发明人在大量实验研究的基础上，发现采用特定的溶剂充分溶解卡巴他赛后，通过加入特定的反溶剂形成沉淀，再控制溶液的降温速度和保温时间，能够得到高质量的卡巴他赛晶体，为实现本发明高纯度高收率的提纯奠定了基础。

此外，所述步骤（1）中，还可以二氯甲烷代替乙酸乙酯；以甲醇、正丁醇、丙酮、或乙腈代替乙醇；以正庚烷、石油醚、***或正己烷代替环己烷。

本发明所述的方法，所述的步骤（2）为：过滤，以纯化水洗涤结晶后的卡巴他赛，洗涤后的卡巴他赛在50℃～55 ℃减压条件下干燥2小时～3 小时；

本发明所述的纯化方法，所述的步骤（3）中搅拌吸附的搅拌速度为100 rpm～300 rpm。

本发明所述的方法，所述的步骤（3）为：将干燥后的卡巴他赛

溶于甲醇中，其中卡巴他赛与甲醇的重量体积比为1：1500～ 1：300；向卡巴他赛甲醇溶液中加入吸附剂，搅拌吸附；吸附剂与卡巴他赛溶液的重量体积比为1：150～ 1：80，搅拌速度为150 rpm～200 rpm，吸附时间为1小时～ 2小时。

本发明经由步骤（3）能够进一步提高卡巴他赛的纯度，控制吸附剂的用量以及搅拌的速度和吸附时间是确保卡巴他赛纯度的核心因素。

其中，所述步骤（3）中以乙醇、丙酮、乙腈、甲酸、乙酸或

其混合溶剂代替甲醇。

所述吸附剂为硅胶、活性炭、硅藻土或三氧化二铝中的一种或多种。

本发明所述的方法，所述步骤（4）为：滤除吸附剂，对滤液

进行浓缩，将浓缩后的卡巴他赛在50～55 ℃减压条件下干燥3小时～4小时，得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛。

作为本发明的一种最佳实施方式，最优选所述的方法包括以下步骤：

（1）将纯度为98%的卡巴他赛溶于乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂，其中卡巴他赛与混合溶剂的重量体积比为1：500；搅拌溶解，搅拌速度为150 rpm；乙酸乙酯和乙醇的用量比为10:1；再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该搅拌过程中温度维持在50℃，产生浑浊后在3小时内匀速缓慢降温至20℃，保温时间为3小时，进行结晶；

（2）过滤，以纯化水洗涤结晶后的卡巴他赛，洗涤后的卡巴他赛在50 ℃减压条件下干燥2小时；

（3）将干燥后的卡巴他赛溶于甲醇中，其中卡巴他赛与甲醇的重量体积比为1：1000；向卡巴他赛甲醇溶液中加入硅胶，卡巴他赛甲醇溶液体积与硅胶的质量比为100：1，以150 rpm的速度搅拌吸附2小时；

（4）滤除硅胶，浓缩滤液，将浓缩后的卡巴他赛在50℃减压条件下干燥3小时，得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛。

此外，本发明所述的重量体积比，除特别说明外，重量体积比的单位均为g/ml，下文中，本发明不再一一进行解释。

采用上述技术方案，本发明具有如下优点：

1. 本方法获得的卡巴他赛经高效液相色谱检测后单个工艺杂质含量小于0.1%，解决了卡巴他赛杂质难以去除的技术瓶颈。

2. 避免使用大型反相制备液相色谱分离卡巴他赛工艺杂质，提高了生产效率，降低了生产成本。

3. 结晶与吸附的方法均为制药工业常用的技术，关键在于结晶溶剂的选择和吸附剂的选择，本发明通过选择特定的溶剂和吸附剂，结合结晶过程中各种操作参数的综合控制，得到高纯度的卡巴他赛；本方法操作简单、使用方便，采用本发明可获得批次差别较小的单个工艺杂质含量小于0.1%的卡巴他赛。

附图说明

图1为现有技术中含量为99.5%卡巴他赛的液相色谱图；

图2为采用本方法处理后卡巴他赛工艺杂质含量小于0.1%的液相色谱图。

具体实施方式

以下将结合实例更详细的解释本发明，本发明的实施例仅用于说明本发明的技术方案。

实验所用的测试仪器：

液相色谱图：

仪器型号：岛津液相色谱仪 LC-20A ；

流动相: 乙腈:水；

柱温：30℃；

进样体积：10 μL；

检测波长：228 nm；

色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)。

实施例1:

将0.2g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于100 ml乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂中；搅拌溶解，搅拌速度为150 rpm；乙酸乙酯和乙醇的用量比为10:1；再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在50℃，产生浑浊后缓慢降温至20℃，降温时间为3小时，保温时间为3小时，进行结晶；过滤、以纯化水洗涤结晶后的样品，洗涤后的样品在50 ℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于200 ml 甲醇中，向卡巴他赛甲醇溶液中加入2.0 g硅胶，搅拌速度为150 rpm、吸附时间为1小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在50℃减压条件下干燥3小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.150g，收率为75%（液相色谱图见图2）。

实施例2:

将0.25g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于100 ml二氯甲烷和丙酮的混合溶剂中；搅拌溶解，搅拌速度为100rpm；二氯甲烷和丙酮的比例为15：1，再向卡巴他赛溶液中加入石油醚，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在55℃，产生浑浊后在3小时内缓慢降温至25℃，保温3小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品，洗涤后的样品在40 ℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于200 ml 乙醇中，向卡巴他赛乙醇溶液中加入1.0g硅胶，搅拌速度为100 rpm、吸附时间为2小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在50 ℃减压条件下干燥3小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.142g，收率为71%。

实施例3:

将0.3g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于90 ml三氯甲烷和正丁醇的混合溶剂中；搅拌溶解，搅拌速度为300rpm；三氯甲烷和正丁醇的比例为8：1，再向卡巴他赛溶液中加入正庚烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在45℃，搅拌，产生浑浊后在3小时内缓慢降温至15℃，保温4小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品，洗涤后的样品在45℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于200 ml 丙酮中，向卡巴他赛甲醇溶液中加入4.0 g硅藻土，搅拌速度为300 rpm、吸附时间为2小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在55℃减压条件下干燥3小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.124g，收率为62%。

实施例4:

将0.27g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于100 ml乙酸乙酯和甲醇的混合溶剂中搅拌溶解，搅拌速度为200rpm；乙酸乙酯与甲醇的比例为10：1，再向卡巴他赛溶液中加入***，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在45℃，产生浑浊后缓慢降温至15℃，降温时间为4小时，保温时间为3小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品。洗涤后的样品在50 ℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于486 ml 乙腈中，向卡巴他赛甲醇溶液中加入6.0 g三氧化二铝，搅拌速度为200 rpm、吸附时间为2小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在55 ℃减压条件下干燥5小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.126g，收率为63%。

实施例5:

将0.15g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于180 ml乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂中，搅拌溶解，搅拌速度为200rpm；乙酸乙酯与乙醇的比例为1：1再向卡巴他赛溶液中加入正己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在45℃，产生浑浊后缓慢降温至22℃，降温时间为3小时，保温时间为4小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品。洗涤后的样品在55 ℃减压条件下干燥4小时。将干燥后的样品溶于225 ml 丙酮中，向卡巴他赛丙酮溶液中加入2 g硅藻土，搅拌速度为150 rpm、吸附时间为0.5小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在50 ℃减压条件下干燥4.5小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.146g，收率为73%。

实施例6:

将0.15g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于150 ml二氯甲烷和乙腈的混合溶剂中；搅拌溶解，搅拌速度为150rpm；二氯甲烷和乙腈的比例为12：1，再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在50℃，产生浑浊后缓慢降温至20℃，降温时间为3小时，保温时间为3小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品。洗涤后的样品在48 ℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于50 ml 甲醇中，向卡巴他赛甲醇溶液中加入0.3 g活性炭，搅拌速度为150 rpm、吸附时间为2小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在40 ℃减压条件下干燥3小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.132g，收率为66%。

实施例7:

将1.0g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于100 ml乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂中；搅拌溶解，搅拌速度为300rpm；乙酸乙酯和乙醇的比例为15：1，再向卡巴他赛溶液中加入石油醚，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在53℃，产生浑浊后缓慢降温至20℃，降温时间为3小时，保温时间为2小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品。洗涤后的样品在45 ℃减压条件下干燥4小时。将干燥后的样品溶于200 ml甲醇中，向卡巴他赛甲醇溶液中加入4 g三氧化二铝，搅拌速度为200 rpm、吸附时间为3小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在45 ℃减压条件下干燥4小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.139g，收率为65%。

实施例8:

将0.2g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于100 ml二氯甲烷和乙醇的混合溶剂中，搅拌溶解，搅拌速度为180rpm；二氯甲烷和乙醇的比例为20：1，再向卡巴他赛溶液中加入***，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在45℃，产生浑浊后缓慢降温至15℃，降温时间为3小时，保温时间为3小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品。洗涤后的样品在50 ℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于300 ml 乙腈中，向卡巴他赛乙腈溶液中加入2.0 g活性炭，搅拌速度为100 rpm、吸附时间为1.5小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在53 ℃减压条件下干燥3.5小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.144g，收率为72%。

实施例9:

将0.3g纯度为99.5%的卡巴他赛溶于100 ml乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂中；搅拌溶解，搅拌速度为160rpm；乙酸乙酯和乙醇的比例为16：1，再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该过程温度维持在48℃，产生浑浊后缓慢降温至18℃，降温时间为3小时，保温时间为4小时，进行结晶。过滤、洗涤结晶后的样品。洗涤后的样品在55 ℃减压条件下干燥2小时。将干燥后的样品溶于90 ml 1%甲酸甲醇混合溶剂中，向卡巴他赛1%甲酸甲醇混合溶液中加入1.5 g硅藻土，搅拌速度为150 rpm、吸附时间为2.5小时，过滤，蒸干溶剂后的样品在40 ℃减压条件下干燥3小时，经高效液相色谱检测可得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛0.142g，收率为71%。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但由于所用溶剂、吸附剂有多种组合，均可以达到除去杂质达目的，只是收率略有不同，因此只要是本发明提到的溶剂、吸附剂及其所产生的各种组合均在保护范围；另在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种纯化卡巴他赛的方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）溶解过程中搅拌速度为100 rpm～300 rpm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）为：将纯度大于98%的卡巴他赛溶于乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂，其中卡巴他赛与混合溶剂的重量体积比为1：1000～ 1：300，搅拌溶解，搅拌速度为150 rpm～200 rpm；乙酸乙酯和乙醇的用量比为8：1～12：1；再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该搅拌过程中温度维持在45℃～50℃；产生浑浊后在3～4小时内缓慢降温至15℃～20℃，保温3小时，进行结晶。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，以二氯甲烷或三氯甲烷代替乙酸乙酯；以甲醇、正丁醇、丙酮、或乙腈代替乙醇；以正庚烷、石油醚、***或正己烷代替环己烷。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步骤（2）为：过滤，以纯化水洗涤结晶后的卡巴他赛，洗涤后的卡巴他赛在50～55 ℃减压条件下干燥2～3小时。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步骤（3）中搅拌吸附的搅拌速度为100 rpm～300 rpm。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步骤（3）为：将干燥后的卡巴他赛溶于甲醇中，其中卡巴他赛与甲醇的重量体积比为1：1500～ 1：300；向卡巴他赛甲醇溶液中加入吸附剂，搅拌吸附；吸附剂与卡巴他赛溶液的重量体积比为1：150～ 1：80，搅拌速度为150 rpm～200 rpm，吸附时间为1小时～ 2小时。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中以乙醇、丙酮、乙腈、甲酸、乙酸或其混合溶剂代替甲醇。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中吸附剂为硅胶、活性炭、硅藻土或三氧化二铝中的一种或多种。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（4）为：滤除吸附剂，对滤液进行浓缩，将浓缩后的卡巴他赛在50～55 ℃减压条件下干燥3小时～4小时，得单个杂质含量小于0.1% 的卡巴他赛。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）将纯度为99.5%的卡巴他赛溶于乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂，其中卡巴他赛与混合溶剂的重量体积比为1：500；搅拌溶解，搅拌速度为150 rpm；乙酸乙酯和乙醇的用量比为10:1；再向卡巴他赛溶液中加入环己烷，搅拌，直到产生浑浊为止，该搅拌过程中温度维持在50℃，产生浑浊后在3小时内匀速缓慢降温至20℃，保温时间为3小时，进行结晶；

（3）将干燥后的卡巴他赛溶于甲醇中，其中卡巴他赛与甲醇的重量体积比为1：1000；向卡巴他赛甲醇溶液中加入硅胶，卡巴他赛溶液体积与硅胶的质量比为100：1，以150 rpm的速度搅拌吸附2小时；