CN102885343A

CN102885343A - 一种抗癌保健芦笋饮料及其制备方法

Info

Publication number: CN102885343A
Application number: CN2011102014467A
Authority: CN
Inventors: 钟虹光; 唐兵; 卢建中; 吕毅斌; 廖群
Original assignee: JIANGXI SHIFANG SHIFANG CHINESE MEDICINE FOOD CO Ltd
Current assignee: Jiangxi Jiangzhong Pharmaceutical (Group) Co., Ltd.
Priority date: 2011-07-19
Filing date: 2011-07-19
Publication date: 2013-01-23

Abstract

本发明涉及一种抗癌保健芦笋饮料及其制备方法，它是将芦笋为原料，加乳酸菌发酵而制成。该法制备的芦笋饮料酸甜纯正、营养丰富，具有调节肠道菌群，提高机体免疫力，预防肿瘤的功效。

Description

一种抗癌保健芦笋饮料及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种抗癌保健芦笋饮料及其制备方法。

背景技术

市场上现有的芦笋饮料其生产工艺为清洗、打浆（榨汁）、调配、罐装、杀菌。配方中大多添加了香精及防腐剂，产品有芦笋的苦涩味，消费者不易接受。本发明采用乳酸菌发酵制备芦笋饮料，不添加任何香精及防腐剂，制备的芦笋饮料酸甜纯正、营养丰富，具有调节肠道菌群，提高机体免疫力，预防肿瘤的功效。

发明内容

本发明的目的是提供一种不添加香精及防腐剂，采用乳酸菌发酵的芦笋饮料及其制备方法。该法制备的芦笋饮料酸甜纯正、营养丰富，具有调节肠道菌群，抑制肿瘤细胞生长，提高机体免疫力的功效。

本发明是通过以下技术方案实现的。

一种抗癌保健芦笋饮料，其特征在于是由下述原料成份和比例制备而成：芦笋汁5%～30%，甜味剂0.01%～30%，酸味剂0.005%～0.5%，抗氧化剂0.01%～0.15%，纯化水39.35%～94.975%。本发明优选比例范围是：芦笋汁10%～25%，甜味剂0.02%～25%，酸味剂0.01%～0.1%，抗氧化剂0.03%～0.1%，纯化水49.8%～89.94%。本发明最优比例范围是：芦笋汁11%，甜味剂10%，酸味剂0.02%，抗氧化剂0.04%，纯化水78.94%。

一种芦笋饮料的制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料,榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为85～132℃，灭菌时间为2秒～10分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至20～45℃，将乳酸菌按照10³～10⁹cfu/ml的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，25℃～45℃发酵6～48小时，pH值3.0～5.0为发酵终点，将发酵后的芦笋汁进行温度90～132℃，时间2秒～10分钟的高温瞬时杀菌，无菌罐装；或先罐装封口，再进行温度85～121℃，时间5～40分钟杀菌，即得成品。

本发明所述的甜味剂是白砂糖、葡萄糖、淀粉糖浆、麦芽糖浆、葡萄糖浆、麦芽糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、低聚异麦芽糖、三氯蔗糖、阿斯巴甜、甜菊糖、安赛蜜或甜蜜素中的任何一种或一种以上。

本发明所述的酸味剂是柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸、磷酸、谷氨酸、C-天门冬酸中的任何一种或一种以上。

本发明所述的抗氧化剂是抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、异抗坏血酸、异抗坏血酸钠、维生素A、维生素E、类胡萝卜素中的任何一种或一种以上。

本发明所述的pH值发酵终点，可以根据不同口味的要求确定。

本发明所述的乳酸菌为干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌乳亚种、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌或唾液乳杆菌中的一种或一种以上。

本发明所述的乳酸菌以两种以上的乳酸菌搭配组合，协同发酵为优选方案。

本发明的特点在于：(1)可产生天然柔和酸味，有效去除芦笋中的苦涩味；(2)通过乳酸菌发酵可将芦笋汁中的氨基酸含量提高10%以上，风味物质提高30%以上，有效提高产品风味和口感；（3）充分保留芦笋原料中的维生素等营养成分；（4）延长食品保质期，防止腐败。

本发明制备的芦笋饮料具有改善人体肠道菌群和预防肿瘤的作用。药效学试验表明，本品对S180荷瘤小鼠CD4、CD8表达有促进作用，且对外周血清白细胞介素-10活性水平有抑制作用。临床研究表明，本品能改善受试人体肠道菌群，并能显著提升受试人群免疫力，具体研究结果如下。

（一）药效学试验

1 材料与方法

1.1 实验材料与动物

芦笋饮料：由江西食方食坊中药食品有限公司提供。

雄性昆明种小鼠：60只，体重18～22g，6～8周龄，购自南昌大学医学院。

计算机图像分析***：江苏捷达形态学分析软件，JEDA。

1.2 仪器及相关试液

细胞株：第四军医大学实验动物中心瘤细胞室。

CD4、CD8兔抗人多克隆抗体：北京博奥森生物技术有限公司。

SABC免疫组织化学试剂盒：北京博奥森生物技术有限公司。

IL-10试剂盒：上海森雄科技实业有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 造模方法

接种S180 癌细胞，使浓度控制为6.5×10⁶个/mL，每只小鼠0.2mL腹腔注射，复制S180荷瘤小鼠腹水模型。

1.3.2 分组及给药

将40只造模后昆明种小鼠随机分为模型对照组，芦笋饮低、中、高剂量组，每组10只。造模结束后第2天起，模型组给予0.9%氯化钠注射液0.2mL；芦笋饮低、中、高剂量组按体表面积折算表计算各组用药量为12.5、25、50g生药/kg，容积10mL/kg，每日灌胃1次，连续给药15天。

1.3.3 观察指标及方法

各组小鼠末次给药24小时后，摘眼球取血，4℃静置1小时后离心，吸取上层血清分装-20℃保存。各组小鼠颈椎脱臼处死，腹腔抽取腹水液备检。

1.3.3.1 S180癌细胞形态学观察

取新鲜腹水1滴滴于干净载玻片上，制成腹水液细胞涂片，瑞氏-姬姆萨染色液染色，中性树胶封片，光学显微镜下观察。

1.3.3.2 免疫组织化学法检测腹水中CD4、CD8水平

取新鲜腹水液，取1滴于干净载玻片上，制成腹水液细胞涂片，用10%甲醛固定，具体操作按试剂盒说明书进行。CD4、CD8染色阳性信号为棕黄色颗粒，用计算机图像分析***计算阳性表达率。

1.3.3.3 血清IL-10含量测定

采用双抗体夹心酶联免疫法测定血清IL-10含量，具体操作按试剂盒说明书进行。

1.4数据处理方法

数据以x±s表示，两组数据间的比较应用t检验(组内为配对t检验)，采用SPSS11．0统计软件分析处理数据，P<0.05为有显著性统计学差异。

2 结果

2.1 S180癌细胞形态学

模型对照组S180癌细胞圆形，胞膜完整，形态较好，偶见淋巴细胞；芦笋饮料高剂量组腹水细胞中有较多淋巴细胞，S180癌细胞部分变形严重，胞膜不完整，皱缩或出现空泡，胞膜上有大量突起，细胞核变形、偏移、固缩，可见大量细胞坏死后的残留物。

2.2 腹水中CD4、CD8水平

各组腹水CD4、CD8表达水平，随芦笋饮料剂量增加呈逐渐增加趋势，且高剂量组CD8表达与模型组比较呈现显著性差异，结果见表1。

表1 芦笋饮料对CD4、CD8表达水平的影响（x±s）

组别	剂量（g生药/kg）	CD4阳性率（%）	CD8阳性率（%）
				模型对照组	-	22.35±1.57	19.26±0.76
低剂量组	12.5	23.08±1.24	19.88±2.33
				中剂量组	25	23.92±1.88	20.55±2.04
高剂量组	50	24.88±2.55	22.44±2.98*

注：与模型组相比，*表示P<0.05

2.3 血清IL-10含量

各组IL-10水平随芦笋饮剂量增加呈逐渐下降趋势，且高剂量组IL-10水平与模型组比较呈现显著性差异，结果见表2。

表2 芦笋饮料对IL-10水平的影响（x±s）

组别	剂量（g/kg）	IL-10（mg/mL）
			模型组	-	0.598±0.023
低剂量组	12.5	0.585±0.036
			中剂量组	25	0.560±0.041
高剂量组	50	0.529±0.017*

（二）临床试验研究

1 材料与方法

1.1 受试品：芦笋饮料，江西食方食坊中药食品有限公司提供。

1.2 受试对象：从自愿报名参加试验的人员中选择年龄为20～50岁受试对象60例进行肠道菌群改善试食试验；选择30～60岁体质虚弱易感冒者60例，其中试验组、对照组各30例进行免疫力提升试食试验。

1.3 服用方法：试验组按推荐方法和推荐量服用受试品，每日3次，每次1瓶；对照组服用安慰剂，用法与用量同试验组，连续服用30天。观察芦笋饮料改善肠道菌群和提高免疫力的影响。

2 结果

表1 芦笋饮料对受试者肠道菌群的影响

菌群种类	试验前	服用30天后	改善比例/%
				双歧杆菌	8.57±0.33	9.32±0.60*	8.75
乳杆菌	8.38±0.75	9.11±0.38*	8.71
				肠杆菌	7.53±0.46	7.56±0.44	0.40
肠球菌	7.23±0.50	7.29±0.47	0.83

注：*服用前后比较P<0.05

以上研究表明，与服用前相比，试验组双歧杆菌、乳杆菌均有较大增长，与服用前相比，有显著性差异。

表2 芦笋饮料对受试者免疫力的影响

注：*服用前后比较，P<0.05，#芦笋饮料组与对照组比较，P<0.01

以上研究表明，服用后受试者白细胞吞噬率明显升高，与服用前相比，有显著性差异。

3 结论

以上研究表明，芦笋饮料对机体肠道菌群的改善和免疫力的提高均有明显效果。

具体实施方式

下面结合实例进一步描述本发明：

实施例1

按照下列配比称取原料：芦笋汁10%，甜菊糖0.04%，葡萄糖3%、柠檬酸0.02%，异抗坏血酸钠0.04%，纯化水86.9%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为90℃ 7分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至35℃，将复合乳酸菌（格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、罗伊氏乳杆菌）按照10⁵cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，35℃发酵14小时，pH值3.2为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行105℃ 30分钟杀菌，即得成品。

实施例2

按照下列配比称取原料：芦笋汁20%，安赛蜜0.04%，葡萄糖4%，乳酸0.04%，抗坏血酸 0.05%，纯化水75.87%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为132℃ 2秒；灭菌后将芦笋汁冷却至37℃，将复合乳酸菌（发酵乳杆菌、唾液乳杆菌、鼠李糖乳杆菌）按照10⁶cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，37℃发酵10小时，pH值3.9为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行95℃ 25分钟杀菌，即得成品。

实施例3

按照下列配比称取原料：芦笋汁30%，三氯蔗糖0.02%，葡萄糖6%，苹果酸0.04%，异抗坏血酸钠0.06%，纯化水63.88%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为100℃ 1分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至40℃，将复合乳酸菌（唾液乳杆菌、保加利亚乳杆菌）按照10⁷cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，40℃发酵18小时，pH值3.8为发酵终点，将发酵后的芦笋汁进行132℃3秒高温瞬时杀菌，无菌罐装，即得成品。

实施例4

按照下列配比称取原料：芦笋汁6%，阿斯巴甜0.02%，葡萄糖4%，柠檬酸0.05%，异抗坏血酸钠0.1%，纯化水89.83%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为85℃10分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至42℃，将复合乳酸菌（副干酪乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、瑞士乳杆菌）按照10⁸cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，42℃发酵8小时，pH值3.6为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行85℃40分钟杀菌，即得成品。

实施例5

按照下列配比称取原料：芦笋汁15%，三氯蔗糖0.02%，葡萄糖2%、苹果酸0.1%，异抗坏血酸钠0.1%，纯化水82.78%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为90℃ 7分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至45℃，将复合乳酸菌（发酵乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜热链球菌）按照10⁹cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中， 45℃发酵16小时，pH值4.2为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行121℃5分钟杀菌，即得成品。

实施例6

按照下列配比称取原料：芦笋汁11%，葡萄糖10%，酒石酸0.02%，异抗坏血酸钠0.04%，纯化水78.94%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为95℃ 4分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至35℃，将复合乳酸菌（干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、植物乳杆菌）按照10⁵cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，35℃发酵15小时，pH值4.0为发酵终点，将发酵后的芦笋汁进行132℃ 3秒高温瞬时杀菌，无菌罐装，即为成品。

实施例7

按照下列配比称取原料：芦笋汁20%，麦芽糖醇20%，甜菊糖0.05%，柠檬酸0.09%，抗坏血酸0.06%，纯化水59.8%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为132℃ 2秒；灭菌后将芦笋汁冷却至37℃，将发酵乳杆菌按照10⁶cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，37℃发酵16小时，pH值3.5为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行90℃ 30分钟杀菌，即得成品。

实施例8

按照下列配比称取原料：芦笋汁20%，木糖醇10%，三氯蔗糖 0.02%，苹果酸0.09%，抗坏血酸0.06%，纯化水69.83%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为100℃ 1分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至35℃，将鼠李糖乳杆菌按照10⁸cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，35℃发酵18小时，pH值4.5为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行95℃ 25分钟杀菌，即得成品。

实施例9

按照下列配比称取原料：芦笋汁20%，低聚异麦芽糖25%，柠檬酸0.09%，抗坏血酸0.1%，纯化水54.81%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为132℃ 2秒；灭菌后将芦笋汁冷却至37℃，将植物乳杆菌按照10⁷cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，37℃发酵15小时，pH值3.9为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行90℃ 30分钟杀菌，即得成品。

实施例10

按照下列配比称取原料：芦笋汁25%，麦芽糖浆18%，安赛蜜0.05%，酒石酸0.06%，抗坏血酸0.09%，纯化水56.8%。

制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为100℃ 1分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至35℃，将保加利亚乳杆菌按照10⁶cfu/mL的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，35℃发酵18小时，pH值4.0为发酵终点，将发酵后的芦笋汁罐装封口进行95℃ 25分钟杀菌，即得成品。

Claims

1.一种抗癌保健芦笋饮料，其特征在于由下述原料成份和比例制备而成：芦笋汁5%～30%，甜味剂0.01%～30%，酸味剂0.005%～0.5%，抗氧化剂0.01%～0.15%，纯化水39.35%～94.975%。

2.如权利要求1所述的芦笋饮料，其中各原料的配比是：芦笋汁10%～25%，甜味剂0.02%～25%，酸味剂0.01%～0.1%，抗氧化剂0.03%～0.1%，纯化水49.8%～89.94%。

3.如权利要求1或2所述的芦笋饮料，其中各原料的配比是：芦笋汁11%，甜味剂10%，酸味剂0.02%，抗氧化剂0.04%，纯化水78.94%。

4.如权利要求1～3所述的芦笋饮料，其特征在于所述的甜味剂是白砂糖、葡萄糖、淀粉糖浆、麦芽糖浆、葡萄糖浆、麦芽糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、低聚异麦芽糖、三氯蔗糖、阿斯巴甜、甜菊糖、安赛蜜或甜蜜素中的任何一种或一种以上。

5.如权利要求1～3所述的芦笋饮料，其特征在于所述的酸味剂是柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸、磷酸、谷氨酸、C-天门冬酸中的任何一种或一种以上。

6.如权利要求1～3所述的芦笋饮料，其特征在于所述的抗氧化剂是抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、异抗坏血酸、异抗坏血酸钠、维生素A、维生素E、类胡萝卜素中的任何一种或一种以上。

7.如权利要求1～3所述的芦笋饮料，其特征在于制备方法：选择无腐烂、新鲜的芦笋为原料，榨汁后按以上组分及比例搅拌均匀，灭菌，灭菌温度为85～132℃，灭菌时间为2秒～10分钟；灭菌后将芦笋汁冷却至20～45℃，将乳酸菌按照10³～10⁹cfu/ml的比例接种到灭菌冷却后的芦笋汁中，25～45℃ 发酵6～48小时，pH值3.0～5.0为发酵终点，将发酵后的芦笋汁进行温度90～132℃，时间2秒～10分钟的高温瞬时杀菌，无菌罐装；或先罐装封口，再进行温度85～121℃，时间5～40分钟杀菌，即得成品。

8.如权利要求7所述的芦笋饮料的制备方法，其特征在于乳酸菌为干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌、德氏乳杆菌乳亚种、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌或唾液乳杆菌中的一种或一种以上。

9.如权利要求7所述的芦笋饮料的制备方法，其特征在于乳酸菌以两种以上的乳酸菌搭配组合，协同发酵为优选方案。