CN102786481B - 厄洛替尼衍生物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及化合物和其盐酸盐。本发明尤其涉及厄洛替尼衍生化合物和其盐酸盐。本发明同时提供包含一种或多种本发明化合物和载体的组合物，以及所公开化合物和组合物治疗用表皮生长因子受体酪氨酸激酶（EGFR）抑制剂如厄洛替尼治疗是有利的疾病或症状的用途。

Description

厄洛替尼衍生物

技术领域

 本发明涉及厄洛替尼的衍生物，包含厄洛替尼衍生物的组合物以及使用该组合物的方法。

背景技术

厄洛替尼（Erlotinib），又称TarcevaN-（3-乙炔苯基）-6,7-二（2-甲氧乙氧基）喹唑啉-4-胺，是一种可逆的表皮生长因子受体酪氨酸激酶（EGFR）抑制剂。其主要治疗作用是用于癌症的治疗。在http://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/ 2010/021743s14s16lbl.pdf. 可以查看FDA关于Tarceva的说明书。厄洛替尼目前已被批准用于治疗非小细胞肺癌（NSCLC）和胰腺癌，临床试验正在评估厄洛替尼对其他癌症疾病的治疗作用。 尽管厄洛替尼具有这些有益活性，仍然需要新的化合物用于治疗癌症及其相关疾病，因此渴望发现这样的新化合物。在专利US 5,747,498 和 RE41065.中记载了厄洛替尼。

发明概述

本发明提供厄洛替尼衍生物及其盐酸盐。这些化合物或者化合物的混合物可用于治疗疾病和其它症状，特别是能用于用表皮生长因子受体酪氨酸激酶（EGFR）抑制剂如厄洛替尼来治疗的疾病或其它症状。

附图说明

 图1显示了本发明化合物与厄洛替尼结合EGFR蛋白亲和力的比较结果。

 图2显示了本发明化合物与厄洛替尼通过孵育人肝微粒的代谢稳定性比较结果。

发明详述

本发明提供厄洛替尼的衍生物和包含该衍生物的组合物。

 在一种实施方式中，本发明的厄洛替尼衍生物提供式I-III的新化合物或其药学可接受的盐。

式 I

式 II

式 III

        其中取代基R1–R22 和 X1-X4 独立地选自氢、氘、甲基、低级烷基、甲氧基、低级烷氧基、芳氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、硝基、氨基、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、巯基、低级烷基硫基、芳硫基、甲酰基、乙酰基、低级烷基羰基、芳基羰基、甲酸基、低级烷基羧脲基、芳基羧基、低级烷氧基羧基、芳氧基羧基、甲酰胺基、低级烷基酰胺基 、芳羰基氨基、低级烷基脲基、芳脲基、氨基羧基、低级烷氨基羧基、芳氨基羧基、三氟乙酰基、卤素、羟基羰基、低级烷氧基羰基、芳氧基羰基、亚磺酰基、低级烷基亚磺酰基、芳基亚磺酰基、磺酰基、低级烷基磺酰基、芳基磺酰基、磺酰胺基 、低级烷基磺酰胺基、芳基磺酰胺基和芳基；其中 式I中R1-R22 取代基至少一个不是氢。

另一实施方式中，本发明的厄洛替尼衍生物提供式I-III的新化合物或其药学上可接受的盐， 其取代基R1–R22和X1-X4独立选自卤素、氟、氯或羟基，至少其中一个取代基不为氢。

另一实施方式中，本发明的厄洛替尼衍生物提供了包含治疗有效量的式I-III化合物和药学上可接受的载体的新药用组合物。

另一实施方式中，该厄洛替尼衍生物提供了在需要的病人中使用治疗有效量式I-III化合物治疗癌症的方法。

另一实施方式中，该厄洛替尼衍生物可用于治疗（如癌症的治疗）。

另一实施方式中，该厄洛替尼衍生物可用于制备药物（如用于癌症治疗的）。

在不脱离本发明精神和本质属性的前提下本发明可以体现为其他一些具体形式。可以理解，本发明中所有实施方式都可以与本发明中另外描述的其它任何实施方式或优选实施方式结合，同样也可以理解，每个实施方式的单个元素都可以优选单独体现。另外，实施方式的各个元素都可以与其他实施方式描写的其它元素结合。

式I-III的化合物可以有不对称中心，且式I-III含有不对称取代原子的化合物可以以光学活性或消旋形式被分离。在本领域如何去制备光学活性物质是公知的，如消旋形式的分离，或从光学活性的起始原料合成。所有显示或描述的化合物的光学异构体被认为是本发明的一部分。用于制备式I-III化合物和其中的中间体化合物的所有过程都被认为是本发明的一部分，所有显示或描述的化合物的异构体，盐类，水合物，溶剂化形式也被认为是本发明的一部分。

定义。除非另有声明，本发明提供的实施例的定义都是非排除性的，它们包括但不限定于所述实施例。

对于上述声明，一个变量可为通用的（例如，“每个R”或“每个X”），或可为特定的（例如， R1, R2, R3, X1, X2, 等）。除非另有声明，当一个变量可为通用时，其也包括所有实施例的特定变量。

“卤素”指的是 -Cl, -F, -Br, or -I；

     “羧基”指的是-C(O)O-；

     “羰基”指的是=O；

    “烷氧基”指的是-O-烷基；

    “烷基氨基”指的是 -NH-烷基；

    “二烷基氨基”指的是 -N(烷基)-烷基，其中的两个烷基相同或不同；

    “烷基”指的是直链或支链碳原子，“低级烷基”指的是1-12个碳原子的直链或支链烷基，直链或支链烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基，叔丁基，戊基，己基，戊基和辛基，烷基基团的碳链上可以包括取代基团。

“芳基”指的是任选取代的碳环芳香烃，如苯和萘；芳基上的合适取代基包括但不限定于如烷基、卤素、氰基、羟基、羰基、羧基、氨基、烷氨基和二烷基氨基，芳基环上可以包含一个或多个杂原子，如氮，氧或硫。

本发明使用的“药学上可接受的”，是指在良好的医疗判断范围内，适用于与人类和其他哺乳动物的组织接触使用，没有不必要的毒性、刺激性、过敏性反应，并且有与其相称的一个合理的利益/风险比的成分。“治疗有效量”指的是包括的本发明化合物的用量当单独或者联合用于治疗所需的疾病或者障碍时是有效的。

“药学上可接受的盐”指的是用于接受者时能直接或间接提供本发明化合物的任意非毒性盐，药学上可接受的盐的实例包括但不限于基本残留的矿物盐或有机盐。药学上可接受的盐包括例如形成于无毒的无机或有机酸的母体化合物的常规季铵盐。例如，这种无毒的盐包括但不限定于衍生自选自于下列的无机或有机酸：1,2 乙烷二磺酸，2- 乙酰氧基苯甲酸，2-羟基乙烷磺酸，乙酸，抗坏血酸，苯磺酸，苯甲酸，重碳酸，碳酸，柠檬酸，依地酸，乙烷二磺酸，乙烷磺酸，富马酸，葡庚糖酸，葡萄糖，谷氨酸，乙醇酸，对羟乙酰氨基苯胂酸钠，己基间苯二酚醇胺，氢溴酸，盐酸，氢碘酸，羟马来酸，羟萘甲酸，羟乙基，乳酸，乳糖酸，十二烷基磺酸，马来酸，苹果酸，扁桃酸，甲磺酸，奈磺酸，硝酸，草酸，扑酸;，泛酸，苯乙酸，磷酸，聚半乳糖醛酸，丙酸，水杨酸，硬脂酸，亚乙酸，琥珀酸，氨基磺酸，氨基苯磺酸，硫酸，鞣酸，酒石酸，甲苯磺酸，萘磺酸，扁桃酸，和其他氨基酸。

本发明的化合物可以通过对厄洛替尼进行非选择性化学修饰得到衍生物产物的混合物，并进一步通过鉴别衍生物产物混合物的成分具有预料不到的改善性能而发现，这些新化合物可以用作癌症的治疗剂。

从化合物的效果出发以选择适当的方法来制备非选择性化学修饰产物的混合物，并通过筛选衍生物产物的混合物，以确定化合物是否具有改进性能。所选择的化合物从衍生产品的混合物中纯化得到并且可以使用化学结构分析方法如核磁共振（NMR）和质谱（MS）分析技术确定其化学结构。美国专利申请61/281，371和12 /946533描述了采用非选择性化学修饰得到衍生物的混合物（混合化合物库）的方法和从混合化合物库中发现具有性能改进的化合物的筛选技术，其包含的内容引入本申请作为参考。

该混合化合物库可以通过厄洛替尼与氟（以与高纯度氮的混合物形式）在有机溶液中低温反应得到，该混合物化合物库也可以与氟以及在与元素氟反应时可以提供一个功能基团的试剂存在下制备得到。一般来说，该反应在惰性有机溶剂如二氯甲烷和乙腈进行。

本发明的化合物可以通过色谱分离和用HPLC纯化设备从混合化合物库中得到，为提高所得到的化合物的纯度可以进行超过一次的分离操作。

在纯化和结构测定后，本发明化合物也可以由本领域技术人员根据其掌握的有机合成知识采用有机合成方法制备得到。

化合物结构的盐形式能够通过在含合适有机溶剂的自由碱基化合物溶液中加入相应的酸并逐渐减少溶剂的量得到。以这种方式，本领域熟悉结晶的人员能够从结晶母液中提取得到化合物的盐。

本发明涉及包含一种或多种以纯净的状态、或在稀释剂或涂层中存在的药学可接受盐的药物组合物，这些药物组合物能够通过口服或者其它服用方式应用。

作为口服使用的固体组合物，片剂、丸剂、粉末或者颗粒可被使用。在这些组合物中，本发明的组合物能与一种或多种惰性稀释剂如蔗糖、乳糖或淀粉混合。本发明组合物也可以包含稀释剂外的物质如：润滑剂或者调节释放的成分，活性剂的吸收剂或者稳定剂。

作为口服使用的液体组合物，包含惰性稀释剂如水或液体石蜡的溶液、混悬液、糖浆、酏和药学上可接受的乳剂可被使用。本发明组合物也可包含稀释剂之外的物质如：润湿剂，甜味剂或调味剂。

组合物也可以是一种所述化合物药学上可接受的盐和一种可接受载体，优选地，本发明的组合物用作药物用途（药物组合物），其载体为药学上可接受的载体。载体是“可接受”意味着其与制剂的其它成分相容，而当其为药学上可接受的载体时，意味着当其在药物中使用时不会对使用者产生危害。

用于本发明药物组合物的药学上可接受的载体、佐剂和赋形剂包括但不限于离子交换树脂、氧化铝、铝、硬脂酸、卵磷脂、血清蛋白如人血清白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、部分饱和植物油脂肪酸甘油酯的混合物、水、盐或电解质如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶体二氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，基于纤维素的物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸，蜡，聚乙烯，聚氧丙烯嵌段聚合物，聚乙烯乙二醇和羊毛脂。

本发明还提供了包括对需要的病人使用本发明的有效量化合物或组合物治疗疾病的方法，该病人用厄洛替尼治疗是有利的 。

另一方面，本发明提供了化合物以单独或者与一种或多种其它治疗活性成分一起合用的制剂形式治疗或预防病人的所述疾病、障碍或症状的用途，所述合用或者作为一个组合物或者以分离剂型方式。

为发现厄洛替尼衍生物化合物所具有的预料不到的改善性能，可以采用下列步骤。

厄洛替尼非选择性修饰产物（混合化合物库）的制备。300毫克厄洛替尼溶解于200mL用干冰／丙酮浴冷却至-78°C的二氯甲烷中，包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流速持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥后的反应产物溶解于20毫升乙腈并用LC-MS分析溶液（安捷伦1200，安捷伦ECLIPS柱150×4.6mm，以10％乙腈/90％含0.1％甲酸的双蒸水到90％乙腈/10％含0.1％甲酸的双蒸水进行梯度洗脱，流速为1毫升/分钟， Waters LCT TOFMS质谱, 正离子模式）。非选择性修饰产物可以基于HPLC 保留时间（RT）和成分的分子量区分。

 制备用于筛选的衍生化合物的混合物。非选择性修饰厄洛替尼的反应产物混合物以下列条件进行分离：安捷伦ZORBAX的C8  250×4.6mm柱，从30％甲醇/70％含0.1％甲酸的双蒸水到90％甲醇/10%含0.1％甲酸的双蒸水进行梯度洗脱，流速为1毫升/分钟。每个组分用LCT进行质谱分析。有些组分包含一些多数未反应的厄洛替尼，其他组分含有各种反应产物以及少量未反应的厄洛替尼，后面的这些组分混合形成修饰厄洛替尼化合物的混合物（混合化合物库）以用于后续筛选。

具有改进性能化合物的鉴定。使用已有发明（美国专利申请号61/281，371和12/946，533，上述内容引入本申请作为参考）中所描述的类似的程序可以对混合化合物库中性质改进的化合物进行鉴定。具体的混合化合物库的筛选可以采用多种模式，即考察其过滤后对蛋白表皮生长因子受体酪氨酸激酶（EGFR）的亲和力，考察其在人肝微粒体提取物的代谢稳定性，考察包括但不限定于膜通透性，血浆蛋白结合属性，血脑屏障（BBB）的渗透性等其它药学属性。通过上述筛选方法可以测定出厄洛替尼衍生物超过厄洛替尼本身的性能改进。混合化合物库的成分可以通过LC-MS分析的保留时间（RT）和m/z值被鉴定。因此，基于LC-MS分析的保留时间和m/z值能分开控制，任何成分能独一无二被鉴定并与其它成分分开。对于这样的“LC-MS法可分”的成分，使用LC-MS技术可以检测一个特定的成分是否有一个比母体药物厄洛替尼更好的性能或反之。在筛选实验中同样可用核磁共振或其他技术确定混合物成分相对于药物厄洛替尼本身的不同。这些混合模式的筛选试验和测量技术，如LC-MS和NMR，可检测和鉴定化合物拥有相对药物厄洛替尼本身的改进性能。

亲和力筛选。混合化合物库与包含10 uM 表皮生长因子受体激酶的pH7.4缓冲液（50mM Tris HCl）混合。混合物以12000rpm离心20分钟通过截留分子量（MWCO）为10 kDa的microcon超滤过滤器（Millipore公司）过滤。新缓冲液加到过滤器的顶部后溶液通过microcon过滤器再次过滤，这个过程反复多次，每个过滤顶层部分被转移并用有机溶剂乙腈或甲醇处理以变性酶，并以此提取与酶亲和的厄洛替尼筛选化合物库。顶层的化合物浓度用LC-MS分析仪检测 (安捷伦1200，。安捷伦ECLIPS柱150×4.6mm，以10％乙腈/90％含0.1％甲酸的双蒸水到90％乙腈/10％含0.1％甲酸的双蒸水进行梯度洗脱，流速为1毫升/分钟， Waters LCT TOFMS质谱, 正离子模式)，并基于每一轮超滤过滤器过滤后的浓度改变进行相对亲和力检测。包括不含EGFR酶的厄洛替尼筛选化合物库的样品与含EGFR酶作为蛋白阴性对照的样品进行同样的处理。过滤后含EGFR酶的样品中浓度下降较大的成分表明更低的亲和力，反之亦然。亲和筛选的结果，可以鉴定出相对于厄洛替尼本身具有对表皮生长因子受体蛋白相对提高的亲和力的非选择性修饰产物混合物的组分，图1描述了本发明化合物与厄洛替尼结合EGFR蛋白亲和力的比较结果。

肝微粒体稳定实验。混合化合物库与包含肝微粒体缓冲液（Invitrogen，Cat. No HMMC-PL，用缓冲液由20毫克/毫升稀释至1毫克/毫升）混合，1 mM  NADPH在50mM   KPO4、3 mM MgCl2以及 37 °C、 pH7.4 f条件下孵育2 小时，然后用用3倍体积的有机溶剂乙腈处理停止代谢反应并提取筛选库的化合物。控制组样品中混合物化合物库被纯厄洛替尼代替而阳性对照为1 uM的Terfenedine。化合物孵育前后的浓度用LC-MS分析仪检测 (安捷伦1200，安捷伦ECLIPS柱150×4.6mm，以10％乙腈/90％含0.1％甲酸的双蒸水到90％乙腈/10％含0.1％甲酸的双蒸水进行梯度洗脱，流速为1毫升/分钟， Waters  LCT  TOFMS 正离子模式)，并基于孵育后的浓度改变检测相对代谢稳定性。孵育后样品中浓度下降较大的成分表明更低的亲和力，反之亦然。代谢稳定性筛选的结果，可以鉴定出相对于厄洛替尼本身具有相对提高的代谢稳定性的非选择性修饰产品混合物的组分，图2显示本发明化合物与厄洛替尼通过孵育人肝微粒体的代谢稳定性比较结果。        

感兴趣的化合物的分离。药物化学和天然产物化学化合物分离的本领域技术人员可以用常规的化学分离和纯化方法，可以用高效液相色谱法从混合化学物库中分离相对于厄洛替尼具有性能改进的具体化合物。从非选择性厄洛替尼修饰的组分中分离出特定成分的常规方法举例如下：采用安捷伦ECLIPS柱子如150×4.6mm柱分离混合物，结合分析用LC-MS的筛选步骤（安捷伦1200，安捷伦ECLIPS150×4.6mm，梯度洗脱浓度为从10％乙腈/90％含0.1％甲酸的双蒸水到90％乙腈/10％含0.1％甲酸的双蒸水，流速为1毫升/分钟）。通过上述第一步分离的混合物，能得到包含一个特定化合物为主要成分和其他一些化合物作为次要成分的组分。这些组分包含感兴趣的化合物（比如这种化合物相对于厄洛替尼具有改进的性能），其主要成分可以依次采用第二种与安捷伦ECLIPS不同型号的HPLC 柱进一步纯化，如Supelco公司Discovery RP氨基C16柱（4.6×250mm，以30％-90％MeOH/0.1％甲酸的双蒸水梯度洗脱，流速为1毫升/分钟）。通常通过第二步分离后期望的化合物的纯度对于结构鉴定来说是比较好的。另外可以通过第三种不同于前面分离使用的HPLC柱子进一步分离所想得到的成分，如氟基柱（Thermo PFP Gold 4.6×250mm色谱柱，80％MeOH/0.1％甲酸/20％水等度分离，流速为1 mL/min）。通过上述分离过程，能够使得感兴趣的化合物的主要成分纯度大于90%。这样纯化的化合物然后被用作结构鉴定以及被作为单个化合物去验证它相对于厄洛替尼的改进性能，药物性能实验包括但不限于对于表皮生长因子受体酪氨酸激酶蛋白质的亲和力，通过人肝微粒体的代谢稳定性，用酶检测和细胞活性测定的生物活性。

对于熟悉结构测定的本领域技术人员来说从混合化合物库中纯化得到的化合物其结构测定可以用质谱和核磁共振方法，例如参考Holzgrabe, U. et al., NMR spectroscopy in drug development and analysis, Wiley-VCH, 1999; Weinheim. Wanner, K. et al., Mass Spectrometry in Medicinal Chemistry: Applications in Drug Discovery, Volume 36, Wiley Interscience 2007; Desiderio, D. M. and Nibbering, N. M. "Mass Spectrometry: Instrumentation, Interpretation, and Applications"，Wiley Interscience, 2008,  ISBN: 0471713953; McLafferty, F. W. and Tureek, F. "Interpretation of Mass Spectra" 4th edition, University Scinece Books, 1993。高分辨质谱测量可提供化合物结构组成的信息，串联质谱（MS/MS）的实验可提供有关原子和分子的官能团的排列和连接的信息，核磁共振谱分析也可以提供包括原子和分子的官能团的排列和连接的详细结构信息，化合物衍生自结构已知的厄洛替尼对于来自混合化合物库中的化合物的结构测定也能提供有用的信息。

体外生物测定。用体外生物测定法测定并确定从混合化合物库鉴定的化合物的生物活性。生物测定的种类和程序，可以在制备厄洛替尼或类似的药物用于治疗对抗EGFR蛋白的癌症相关文献中找到，例如参考Alexander J. Bridges, et al. J. Med. Chem. 1996, 39, 267-276; Denny, WA, et al. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 23(5), 424–427, 1996; Rewcastle GW, et al. J Med Chem. 1995; 38(18): 3482-7。

酶法测定。使用Cisbio公司HTRF  KinEASE-TK以HTRF荧光检测纯化后的化合物或混合化合物的EGFR激酶酶活性。表皮生长因子受体重组蛋白来自Invitrogen公司。 staurosporine和其他试剂和缓冲液购自Sigma公司。化合物与表皮生长因子受体酶在384孔板中用反应缓冲液预孵育（在室温下10分钟），加入TK-subatrate和ATP混合物开始反应，反应15分钟后，将SA-XL665和TK Ab-Cryptate添加入孔板中停止反应。密封384孔板（黑色，Corning）在室温孵育1小时。测定在620nm（Cryptate）和665nm（XL665）的荧光，每个浓度在重复孔板中进行测试。不含化合物的表皮生长因子受体酶被用来作为对照组，以相对EGFR活性（不含化合物）的百分比来计算抑制率，在620nm（Cryptate）和665nm（XL665）进行荧光测量， 计算每个孔板的 比率（665/620），结果表示如下：具体信号=样本比率 -阴性对照比率。

使用A431细胞株细胞增殖实验细胞测定基于细胞的表皮生长因子受体激酶的活性。 A431细胞株来自ATCC（洛克维尔，MD，美国）。使用CCK-8细胞增殖检测试剂盒（Dojindo分子技术，细胞计数试剂盒-8）进行检测。反应体系包括100 μL细胞株的溶液，使用测试化合物1μL的原液，细胞混悬液（100μL/孔）接种于96孔板，微孔板预先在饱和湿度孵育箱（37℃，5％CO2）培养，10μL的CCK-8溶液被添加到每个板中，在孵育箱中板孵育1-4小时，用酶标仪在450 nm处测量吸光度。

化合物抗肿瘤作用的体内评价。采用动物模型来评价本发明化合物的抗肿瘤作用，其过程可以在制备厄洛替尼或类似的药物用于治疗对抗EGFR蛋白的癌症相关文献中找到，例如：Lu, Y.-Y., et al. "Anti-tumor activity of erlotinib in the BxPC-3 pancreatic cancer cell line" World J Gastroenterol 2008, 14(35): 5403-5411. Ouchi KF, et al., "Antitumor activity of erlotinib in combination with capecitabine in human tumor xenograft models.” Cancer Chemother Pharmacol. 2006, 57(5): 693-702. Higgins B, et al., “Antitumor activity of erlotinib (OSI-774, Tarceva) alone or in combination in human non-small cell lung cancer tumor xenograft models.” Anticancer Drugs. 2004, (5):503-12. Friess, T. et al., “Combination Treatment with Erlotinib and Pertuzumab against Human Tumor Xenografts Is Superior to Monotherapy.” Clin Cancer Res, 2005 11; 5300。SCID的nu / nu小鼠（6-8周龄）皮下侧翼注射1×10⁶人A431和CALU-3细胞株，当肿瘤大小在50-100毫克之间时，既大约第10天给予小鼠腹腔注射、静脉注射或口服给药，剂量在30，50，100，200毫克/千克，动物给药为每天一次，连续14天，用卡尺每周两次监测肿瘤的大小。根据以上描述，本领域技术人员能确信实现本发明的必要特征。因此，在不背离本发明精神和范围的情况下，能采用本发明不同的变化或改进以适应不同的用法和条件。

MS或LC-MS测定示例 。为了测定混合化合库中成分的数量和鉴定这些成分，样本分析采用单纯质谱或液相色谱结合质谱法，或其他分析技术如核磁共振 。

质谱： 可采用如使用Z-喷（电）离子源的飞行时间质谱仪LCT（Waters公司，米尔福德，马萨诸塞州，美国），电喷电压一般保持在约3.5-4.0千伏的范围。离子光学设置进行优化以在分析中提供最高效率的离子探测器，其有效的质量范围一般是大约1秒扫描速率从m/ z 100-1000。

液相色谱：例如，样品可以在1毫升/分钟的流速梯度模式通过Agilent1200（美国加利福尼亚州圣克拉拉，安捷伦科技）色谱仪。安捷伦Eclips C18柱 (4.6 mm×150mm) 用于样品的分离，流动相是10分钟内从水/包含0.1%甲酸的乙腈90/10 (v/v) 到水/包含0.1%甲酸的乙腈10/90 (v/v) ，样品通过Agilent 1200的自动进行器进样，进样量一般为1-20 μL。

NMR：1H NMR和13C NMR谱用瓦里安INOVA的400 MHz核磁共振光谱仪记录。使用四甲基硅烷作为内标，其在溶剂DMSO-D6，CD3OD，CDCl3中得到光谱化学位移的数值（ppm）。

化合物合成：下列给出的具体化合物和过程并不是限定本发明。在本领域技术人员知识范围内化合物结构中合适的化学基团可用于合成另一种化合物，式I-III的化合物的其它合成方法和合成过程包括本领域的常规化学方法但在所示的路线中没有明确描述的。合成有用化合物的合成化学转换和保护基团的方法（保护和去除）是本领域公知的，包括例如记载在Larock R, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); Greene T W et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999); Fieser L et al., Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); and Paquette L, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995); Corey, E. J. and Cheng, X.-M., The Logic of Chemical Synthesis, Wiley, New York, 1989,及其后续版本中。

路线I表示一种对于有机合成领域技术人员来说制备式I-III化合物常规的路线，Ra 和 Rb 代表在所示合成步骤中稳定的取代基团。

路线1

代表本发明化合物实例的合成过程如下：

N-（5-乙炔-2-氟苯基）-6,7-二（2-甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 -胺的合成（路线2）。

 

路线 2

4-氯-6,7 -二（2-甲氧基乙氧基）喹唑啉（140毫克，0.447毫摩尔）和5-乙炔-2-氟苯胺（66毫克，0.489毫摩尔）在氮气存在下在异丙醇（3毫升）回流反应过夜，旋转蒸发除去溶剂，残留物溶解于CHCl3然后用NaHCO3溶液饱和，分离有机溶剂层并用盐水洗，过硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，粗产品使用40％丙酮/CH2Cl2硅胶层析得到116毫克纯的自由基形式的标题产品。这种油溶解于最小体积的氯仿，再用几倍体积的***稀释并在***滴定1M盐酸沉淀得到白色固体的的标题产品，该白色固体（99毫克；54％；LC-MS：m / z=412.1664， m / z（计算）=412.1667）。

实施例

下列实施例用以进行举例说明，但不是限定权利要求。在不背离权利要求的范围情况下本领域技术人员能认识到多种非关键因素可以进行改变。

实施例1：N-（3  - 乙炔-5-氟苯基）-6,7  - 二（2  - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

300mg厄洛替尼溶解于200mL  CH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流速持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水，流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氟化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 412.1665 (Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化单氟厄洛替尼的m/z值（412.1667）一致, 分子式: C22H23FN3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的3 乙炔苯环（碎片m / z  136.0555，C8H7FN+计算值：136.0557）。 1H-NMR谱数据表明氟取代的是在厄洛替尼的3 乙炔苯环的5位位置。 1H-NMR (400 , DMSO-d6) δ ppm 3.42 (s, 3H), 3.45 (s, 3H), 3.83 (m, 4H), 4.2-4.4 (m, 5H), 7.06 (dt, J=8.1, 1.7, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.74 (dt, J=8.0, 1.5, 1H), 8.01 (t, 1.6, 1H), 8.21 (s, 1H), 9.02 (s, 1H)。

        实施例2：N-（5  - 乙炔-2-氟苯基）-6,7 - 二（2  - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

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300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水，流速为1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氟化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 412.1664(Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化单氟厄洛替尼的m/z值（412.1667）一致, 分子式: C22H23FN3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的3乙炔苯环（碎片m / z  136.0556，C8H7FN+计算值：136.0557）。 1H-NMR谱数据表明氟取代的是在厄洛替尼的3 乙炔苯环的6位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.43 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.8 (m, 4H), 4.4 (m, 5H), 7.29 (s, 1H), 7.42 (dd, J=8.4, 1.9, 1H), 7.56 (dd, 8.4, 8.0, 1H), 8.36 (dd, J=4.8, 1.9, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.84 (s, 1H)。

实施例3 ：N-（5  - 乙炔-2 - 氯苯基）-6,7 - 二（2  - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

       300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氯化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 428.1371(Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化单氯厄洛替尼的m/z值（428.1372）一致, 分子式: C22H23ClN3O4+.，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氯取代厄洛替尼的3 乙炔苯环（碎片m / z  152.0262，C8H7ClN+计算值：152.0261）。 1H-NMR谱数据表明氯取代的是在厄洛替尼的3乙炔苯环的6位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.36 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.88 (m, 4H), 4.3-4.4 (m, 5H), 7.38 (s, 1H), 7.46 (dd, J=8.6, 2.7, 1H), 7.87 (d, J=8.6, 1H), 7.96 (d, J=2.7, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.87 (s, 1H)。

实施例4：N  - （3  - 乙炔-4-氯苯基）-6,7  - 二（2  - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氯化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 428.1374Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子单氯化厄洛替尼的m/z值（428.1372）一致, 分子式: C22H23ClN3O4+.，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氯取代厄洛替尼的3 乙炔苯环或乙炔基（碎片m / z  152.0259，C8H7ClN+计算值：152.0261）。 1H-NMR谱数据表明氯取代的是在厄洛替尼的3乙炔苯环的4位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.36 (s, 6H), 3.78 (m, 4H), 4.36 (m, 4H), 4.68 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.66 (d, J=8.8, 1H), 7.86 (dd, J=8.8, 2.4, 1H), 8.06 (d, J=2.4, 1H),  8.46, (s, 1H), 8.89 (s, 1H) 。

 实施例5：N-（3  - 乙炔苯基）-5,8 - 二氟-6,7-二（2  - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与二氟化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS和NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 430.1570（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化二氟化厄洛替尼的m/z值（430.1573）一致, 分子式C22H22F2N3O4+.，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  118.0649，C8H8N+计算值：118.0651，表明3-乙炔苯环未被取代）并且取代不是在喹唑啉环的侧链（排除了侧链的两个 C3H6O 基团）。 1H-NMR谱数据表明氯取代的是在厄洛替尼的喹唑啉环的5位和8位位置。. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.39 (s, 6H), 3.74 (m, 4H), 4.23 (s, 1H), 4.35 (m, 4H), 7.44 (m, 2H), 7.97 (dd, J=8.3, 1.9, 1H), 8.17 (dd, J=2.4, 1.9, 1H),  9.00 (s, 1H).。

实施例6：N-（3-乙炔苯基）-5,8-二氟-6,7-二（2-甲氧基乙氧基）-5,8二氢喹唑啉-4- 胺

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与厄洛替尼二氟加成物相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 432.1726（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化厄洛替尼二氟加成物的m/z值（432.1729）一致, 分子式C22H24F2N3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  118.0649，C8H8N+计算值：118.0651，表明3-乙炔苯环未被取代）并且取代不是在喹唑啉环的侧链（排除了侧链的两个 C3H6O 基团）。 1H-NMR谱数据表明氟加成是在厄洛替尼的喹唑啉环的5位8位位置。. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.30 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.82 (m, 4H), 4.22 (s, 1H), 4.34 (m, 4H), 5.57 (d, J=8.2, 1H), 5.83 (d, J=8.3, 1H), 7.40 (dt, J=8.0, 1.8, 1H), 7.64 (ddd, J=8.3, 8.0, 1.9, 1H), 7.92 (dt, J=8.3, 1.8, 1H), 8.06 (t, J=1.9, 1H),  8.68 (s, 1H)。

实施例7：N - （3 - 乙炔苯基）-5 - 氟-6,7 - 二（2 - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

      

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氟化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 412.1667（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化氟化厄洛替尼的m/z值（412.1667）一致, 分子式C22H23FN3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  118.0649，C8H8N+计算值：118.0651，表明3-乙炔苯环未被取代）并且取代不是在喹唑啉环的侧链（排除了侧链的两个 C3H6O 基团）。 1H-NMR谱数据表明氟取代的是在厄洛替尼的喹唑啉环的5位位置。. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.45 (s, 6H), 3.79 (m, 4H), 4.30 (m, 3H), 4.39 (t, J=7.2, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.41 (ddd, J=8.3, 2.4, 1.3, 1H), 7.80 (m, 2H), 7.92 (ddd, J=8.3, 1.8, 1.3, 1H), 9.09 (s, 1H)。

实施例8：N - （3 - 乙炔苯基）-5 - 氯-6,7 - 二（2 - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氯化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 428.1370（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化氯化厄洛替尼的m/z值（428.1372）一致, 分子式C22H23ClN3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氯取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  118.0649，C8H8N+计算值：118.0651，表明3-乙炔苯环未被取代）并且取代不是在喹唑啉环的侧链（排除了侧链的两个 C3H6O 基团）。 1H-NMR谱数据表明氯取代的是在厄洛替尼的喹唑啉环的5位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.42 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.83 (m, 4H), 4.27 (s, 1H), 4.36 (m, 4H), 7.39 (s, 1H), 7.49 (dd, J=8.5, 8.3, 1H), 7.66 (ddd, J=8.5, 2.5, 2.2, 1H), 7.87 (dd, J=2.5, 1.8, 1H), 7.91 (ddd, J=8.3, 2.2, 1.8), 8.93 (s, 1H)。

实施例9：N - （3 - 乙炔苯基） - 8 - 氟-6,7 - 二（2 - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4 - 胺

 

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与单氟化厄洛替尼相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 412.1668（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化氟化厄洛替尼的m/z值（412.1667）一致, 分子式C22H23FN3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  118.0649，C8H8N+计算值：118.0651，表明3-乙炔苯环未被取代）并且取代不是在喹唑啉环的侧链（排除了侧链的两个 C3H6O 基团）。 1H-NMR谱数据表明氟取代的是在厄洛替尼的喹唑啉环的8位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.45 (s, 6H), 3.76 (m, 4H), 4.30 (s, 1H), 4.38 (m, 4H), 7.61 (m, 2H), 8.0 5 (m, 2H), 8.41 (s, 1H), 8.89 (s, 1H)。

实施例10：N-3-乙炔苯基）-5,6,7,8-四氟-6,7-二（2-甲氧基）-5,6,7,8 - 四氢喹唑啉-4-胺

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与厄洛替尼二氟分子加合物相关的化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 466.1385（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化厄洛替尼二氟分子加合物的m/z值（466.1384）一致, 分子式C22H24O4N3F2+.，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  118.0649，C8H8N+计算值：118.0651，表明3-乙炔苯环未被取代）并且取代不是在喹唑啉环的侧链（排除了侧链的两个 C3H6O 基团）。 1H-NMR谱数据表明氟加成是在厄洛替尼的喹唑啉环的5,6,7,8位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.41 (s, 6H), 3.72 (t, J=5.2, 2H), 3.84 (t, J=5.2, 2H), 4.33 (m, 3H), 4.45 (t, J=4.6, 2H), 5.20 (d, J=8.2, 1H), 5.59 (d, J=8.3, 1H), 7.32 (ddd, J=8.3, 2.2, 1.4, 1H), 7.66 (dd, J=8.3, 8.0, 1H), 7.79 (ddd, J=8.0, 1.8, 1.4, 1H), 7.93 (dd, J=2.2, 1.8, 1H),  8.49 (s, 1H)。

实施例11： N-（3 - 乙炔-4-氟苯基）-5-氟-6,7-二（2 - 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4-胺

 

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值与二氟化厄洛替尼相关化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS和NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 430.1574（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化二氟化厄洛替尼的m/z值（430.1573）一致, 分子式C22H22F2N3O4+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明一个氟取代在3-乙炔苯环而另一氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  136.0558，C8H7FN+计算值：136.0557）。 1H-NMR谱数据表明氟取代的是在3-乙炔苯环的4位和厄洛替尼的喹唑啉环的5位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.33 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.82 (m, 4H), 4.31 (s, 1H), 4.41 (m, 4H), 7.29 (s, 1H), 7.38 (dd, J=8.6, 8.2, 1H), 7.67 (ddd, J=8.2, 5.1, 1.8, 1H), 8.12 (dd, J=5.3, 1.8, 1H),  8.74 (s, 1H)。

实施例12：N-（3 - 乙炔-4-氯苯基）-5-氟-6,7-二（2-甲氧基乙氧基）喹唑啉-4-胺

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物组分合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值为一个氟取代和一个氯取代的厄洛替尼化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 446.1273（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化具有一个氟取代和一个氯取代的厄洛替尼的m/z值（446.1277.）一致, 分子式C22H22ClFN3O4，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氯取代在3-乙炔苯基而氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  152.0259，C8H7ClN+计算值：152.0261）。 1H-NMR谱数据表明氯取代的是在3-乙炔苯基的4位而氟取代厄洛替尼的喹唑啉环的5位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.44 (s, 6H), 3.79 (m, 4H), 4.25 (s, 1H), 4.31 (t, J=4.2, 2H), 4.4.3 (t, J=4.2, 2H), 7.21(s, 1H), 7.61 (d, J=8.6, 1H), 7.86 (dd, J=8.6, 2.4, 1H), 7.97 (d, J=2.4, 1H),  9.05 (s, 1H)。

实施例13：N-（5 - 乙炔-2-氟苯基）-5-氟-6,7-二（2- 甲氧基乙氧基）喹唑啉-4- 胺 

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物组分合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值为二氟取代的厄洛替尼化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为430.1575（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化二氟取代厄洛替尼的m/z值（430.1573.）一致, 分子式C22H22O4N3F2+，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明一个氟取代在3-乙炔苯环而另 一氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  136.0554，C8H7FN+计算值：136.0557）。 1H-NMR谱数据表明氟取代的是在3-乙炔苯环的6位以及厄洛替尼的喹唑啉环的5位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.31 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.71 (m, 4H), 4.22 (s, 1H), 4.36 (m, 4H), 7.19 (s, 1H), 7.28 (ddd, J=8.0, 5.0, 1.9, 1H), 7.62 (dd, J=8.5, 8.0, 1H), 8.37 (dd, J=5.2, 1.8, 1H),  9.02 (s, 1H)。

实施例14：N-（5-乙炔-2-氟苯基）-5-氯-6,7-二（2-甲氧基乙氧基）喹唑啉-4-胺

 

300mg厄洛替尼溶解于200mLCH2Cl2，用干冰/丙酮冷却至-78°C 。包含20% F2/80% N2 的 F2 和N2 的混合物以 2 L/min.流毒持续通过反应容器，30分钟后停止反应并真空除去溶剂，干燥的反应产物溶解于3毫升乙腈并以安捷伦 Zorbax C8 250×4.6mm柱进行分离，梯度洗脱流动相为从 30%MeOH/70%含 0.1%甲酸的双蒸水到90%MeOH/10%含 0.1%甲酸的双蒸水,流速为：1 ml/min，每种流分用质谱分析，没有过量起始原料厄洛替尼的反应产物合并得到修饰厄洛替尼混合化合物库，这些化合物库用于筛选和鉴定相对与厄洛替尼具有改善性能的成分。 通过持续的HPLC分离和纯化得到一个 m/z值为一个氟取代和一个氯取代的厄洛替尼化合物。该纯化的化合物用LC-MS/MS 和 NMR 进行结构鉴定为标题化合物。其m/z值为 446.1277（Thermo Finnigan LTQ Orbitrap 质谱, 正离子模式), 与计算得到的质子化具有一个氟取代和一个氯取代的厄洛替尼的m/z值（446.1277.）一致, 分子式C22H22ClFN3O4，高分辨率LTQ Orbitrap质谱MSn（n= 2-4）表明氯取代在3-乙炔苯环而氟取代厄洛替尼的喹唑啉环（碎片m / z  152.02589，C8H7ClN+计算值：152.0261）。 1H-NMR谱数据表明氯取代的是在3-乙炔苯环的6位而氟取代厄洛替尼的喹唑啉环的5位位置。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.18 (s, 3H), 3.40 (s, 6H), 3.52 (s, 1H), 3.78 (t, J=4.2, 2H), 3.87 (t, J=4.2, 2H), 4.31 (m, 5H), 7.20 (dd, J=8.6, 1.9, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.66 (d, J=8.6, 1H), 7.87 (d, J=1.9, 1H),  8.92 (s, 1H)。

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Claims (3)

1.  一种选自下列的化合物及其药学可接受的盐，

（1）

（2）

。

2.一种药物组合物，其特征在于：包括一种权利要求1的化合物以及一种药学上可接受的载体。

3. 权利要求1所述的化合物及其药学可接受的盐在制备治疗有需要的病人的疾病或症状的药物中的用途，其特征在于：所述疾病或症状对于使用表皮生长因子受体酪氨酸激酶（EGFR）抑制剂治疗是有利的，给予病人有效量的一种权利要求1所述的化合物及药学上可接受的盐，使用时提供药学载体。