CN102766103B - 2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药化工领域，具体涉及一类2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物以及所述药学上可接受的盐的溶剂合物。本发明还涉及所述2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物的制备方法、其药物组合物以及所述衍生物的用途。所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物具有较高的酪氨酸激酶抑制作用且具有较低毒性，对肿瘤的临床治疗具有重要的意义。

Description

2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其制备方法和用途

技术领域

本发明属于医药化工领域，具体涉及一类2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物以及所述药学上可接受的盐的溶剂合物。本发明还涉及所述2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物的制备方法、其药物组合物以及所述衍生物的用途。

背景技术

肿瘤是严重威胁人类生命和健康的主要疾病之，据世界卫生组织统计，全世界每年死于肿瘤的患者约690万。由于生存环境和生活习性的改变，在不良环境和一些不利因素的作用下，肿瘤的发病率和死亡率近年呈逐步上升趋势。

以往对肿瘤的治疗是通过发现肿瘤并破坏来实现的，现在随着对细胞信号传导途径研究的不断深入，人们对肿瘤细胞内部的癌基因及抗癌基因的作用了解的越来越深入，针对肿瘤的特异性分子靶点设计新的抗肿瘤药物越来越受到关注，成为研究的热点领域，而靶向抗肿瘤药物作为一种新的治疗方法也已经应用于临床，并在短短几年内取得了显著的进展。现在已知，蛋白酪氨酸激酶（PTK）信号通路与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移和凋亡有密切关系(SunL.，et al.，Drug Discov Today，2000，5，344-353)，利用蛋白酪氨酸激酶抑制剂干扰或阻断酪氨酸激酶通路可以用于肿瘤治疗(Fabbro D.，et al.，Curr Opin Pharmacol，2002，2，374-381)。

蛋白酪氨酸激酶（PTK）是在正常和异常增殖过程中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成员，是一种能选择性地使不同底物的酪氨酸残基磷酸化的一种酶，它们催化ATP的γ-磷酸基转移到许多重要蛋白质的酪氨酸残基上，使酚羟基磷酸化。蛋白酪氨酸激酶分为受体酪氨酸激酶（RTK），非受体酪氨酸激酶以及IR和Janus激酶等(Robinson D.R.，et al.，Oncogene，2000，19，5548-5557)，其中多数为受体型酪氨酸激酶（RTK）。受体酪氨酸激酶（RTK）是一类具有内源性蛋白酪氨酸激酶，参与多种细胞活动的调控，在启动细胞复制的促有丝***信号的传导中具有极其重要的地位，调控着细胞的生长与分化。所有的RTK都属于I型膜蛋白，其分子具有相似的拓扑结构：一个大的糖基化的胞外配体结合区，一个疏水的单次跨膜区，以及一个细胞内酪氨酸激酶催化结构域及调控序列。配体的结合导致受体细胞内部分编码的受体激酶活性激活，使靶蛋白中的关键酪氨酸磷酸化，导致增生信号跨越细胞质膜转导。

大多数细胞生长因子受体含有酪氨酸激酶的肽链序列，许多肿瘤中可见不同酪氨酸激酶受体的过表达或激活。根据肽链序列的相似性及其结构上的特点，这些受体又被分成若干家族：1）表皮生长因子受体家族，包括EGFR、HER-2、HER-3、HER-4等，此类受体的高表达常见于上皮细胞肿瘤；2）胰岛素受体家族，包括胰岛素受体、***受体（IGF-R）和胰岛素相关受体（IRR）等，在血癌中常见此类受体的高表达；3）血小板衍生生长因子受体家族（PDGFR），包括PDGFR-α、PDGFR-β、CSF-1R、c-Kit等，此类受体在脑肿瘤、血癌中常见高表达；4）成纤维细胞生长因子受体（FGFR），包括FGFR-1、FGFR-2、FGFR-3、FGFR-4等，此类受体在血管生成方面起重要作用；5）血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR），包括VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3，是血管生成的重要正性调节因子。酪氨酸激酶受体在不同类型的肿瘤中过度表达，致使其细胞内信号异常激活，导致细胞转化、不断增殖，促进肿瘤的发生、发展，抑制细胞凋亡，因此，靶向酪氨酸激酶信号途径是很好的抗肿瘤策略。

血管内皮生长因子（VEGF）是主要作用于血管内皮细胞的生长因子，具有促进内皮细胞增殖、增加微血管通透性、诱导血管生成等多种功能（Hanks S.K.,et al.，FASEB，1995，9,576-596）。目前所知VEGF家族主要包括6个成员：VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和PDF。其中，VEGF-C是VEGF家族的一个新成员，是由Joukov等用Flt4亲和层析法从人***癌细胞系PC3中分离纯化得到的（Joukov V.,et al.,EMBO J,1996，15，290-298）。VEGF-C可特异性地激活***内皮上的Flt4，因此，VEGF-C又被称为淋巴细胞生长因子。VEGF-C具有刺激血管和***生成的双重作用，它的受体VEGFR-2主要分布在血管内皮细胞，通过与VEGFR-2结合促进血管内皮细胞增殖、迁移和血管生长。肿瘤的形成及发展大体可分为两个阶段，即肿瘤细胞的克隆性增殖阶段及继之而来的血管形成促进肿瘤持续生长的阶段。VEGF作用于自身已有的血管网内皮细胞，使其分化而形成新的血管。新血管不仅为肿瘤细胞的物质交换提供基础，亦可旁分泌一些细胞因子促进肿瘤细胞的增殖；同时由于新生血管的管壁结构缺乏完整性，内皮细胞之间连接松散，基底膜厚薄不一、断裂或缺如，瘤细胞易于进入血管腔而发生血行侵袭和转移。因而VEGF与肿瘤的生长和转移关系密切。VEGF可在健康人体的多数组织中检出，但表达量甚微，在许多肿瘤，尤其是实体肿瘤中则出现高表达，如：肝癌、脑肿瘤、乳腺癌、肺癌及肾癌组织中(Samoto K.,et al.CancerRes,1995,55,1189-1193；Ferrara N..Curr Opin Biotech,2000,11,617-624；Shiladitya S.,et al.Nature,2005,436:568-572)。由于实体瘤的生长和转移对新生血管的依赖性，因此VEGF是阻断实体瘤血管形成比较理想的靶部位。有两个观点促进了肿瘤抗血管生成的研究，第一：健康成人一般新生血管较少，因此通常认为抗血管生成副作用较小；第二：血管生成过程中所涉及的内皮细胞是正常细胞，不存在基因组不稳定性，这就意味抗血管生成治疗不太会产生耐药性。VEGFR是一种可扩散的血管内皮特异性有丝***素和血管生长因子受体，在生理性和病理性血管形成过程中起关键作用，能抑制内皮细胞凋亡。该家族共有3个成员，即VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3。目前普遍认为VEGF诱导血管生成是由VEGF与位于血管内皮细胞表面的VEGF受体2（VEGFR-2）结合所介导，VEGF与VEGFR-2结合后引起VEGFR-2形成二聚体诱使酪氨酸激酶介导的磷酸化，并进一步激活相关下游信号转导通路。

小分子酪氨酸激酶抑制剂作为新的靶向抗肿瘤药物，为肿瘤的治疗和预防打开了一扇新窗口，而且其副作用轻微，有良好的耐受性。虽然目前已有10多个小分子酪氨酸激酶抑制剂为临床肿瘤治疗作出了很大贡献，但仍然需要发现一些较之现有的酪氨酸激酶抑制剂具有更好的体内活性和/或改良的药理学特性的另外的化合物。因此开发新的改进的或更高效的酪氨酸激酶抑制剂，更深入地了解该类药物与已知靶蛋白之间的关系以及其发挥抗肿瘤作用的机理对肿瘤临床治疗具有重要的意义。

目前，靶向VEGF及其受体的血管生成抑制剂有：VEGF无活性突变体、VEGF反义基因、可溶性VEGF受体、VEGF单克隆抗体和VEGF受体酪氨酸激酶（RTK）抑制剂等。其中VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂属于小分子抑制剂，具有口服易吸收、剂量小、适合长期用药、合成简便等优点，是一类很有希望的血管生成抑制剂。近几年，多种靶向于VEGFR的药物如Sunitinib、Sorafenib、Pazopanib等被成功推向了市场用于各种肿瘤的治疗。尽管这些肿瘤血管生成抑制剂有着很大的优势,但是实际应用仍存在部分肿瘤对血管的新生依赖性不强、突变及肿瘤信号传导的代偿性导致的耐药、不良反应和毒性等问题。因此进一步开发选择性更强、活性更高且毒性更小的小分子RTK抑制剂仍然非常必要。

发明内容

本发明的目的是寻找具有高的酪氨酸激酶抑制作用且具有较低毒性的新化合物。

本发明人以VEGFR-2酪氨酸激酶的晶体结构为基础进行化合物筛选，挑选与受体蛋白有很好结合的化合物结构，并通过化学方法合成了这些化合物。在这些化合物的生物学试验及活性评价中，该类化合物表现出了很好的抑制血管新成和抗肿瘤作用。

本发明人惊奇的发现，具有通式I所示的2-硫代-4-氨基-1-萘酚衍生物具有出人意料高的酪氨酸激酶抑制作用。本发明基于此发现而得以完成。

本发明的一个方面涉及式I所示的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物，

式I

其中，

L为连接基团，选自选自–SO₂-、-CO-或–CONH-；

R₁选自芳基，杂芳基，环烷基、杂环烷基、芳基取代的C1-6烷基，杂芳基取代的C1-9烷基，芳基取代的C2-6烯基，芳基取代的C2-4炔基、杂芳基取代的C2-4炔基；所述的芳基，杂芳基，环烷基、杂环烷基可以任选被一个或多个如下基团取代：烷基，烷氧基，卤代C1-8烷基、卤代C1-8烷氧基、烯基，炔基，羟基，卤素，硝基，氰基，C1-6烷基羰基，C1-8烷氧基羰基，卤代C1-6烷氧基羰基、卤代C1-6烷氧基羰基；优选地，所述的芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基任选被一个或多个如下基团取代：C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-4烷氧基羰基、卤代C1-4烷氧基羰基；

R₂选自氢、羟基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基；

R₃选自氢、羟基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基；

R₂、R₃优选同为氢原子或者甲氧基基团；

R₄选自取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基；

并且，当L为-SO₂-时，R₄仅选自取代或未取代的7H-嘌呤-6-基。

式I所示的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物，其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物，其中，R₄优选1H-1,2,4-三氮唑-5-基、5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基、1,3,4-噻二唑-2-基、1-甲基-1H-四氮唑-5-基、7H-嘌呤-6-基；

并且，当L为-SO₂-时，R₄选自取代或未取代的7H-嘌呤-6-基；优选地，R₄选自7H-嘌呤-6-基或被一个或多个如下基团任意取代的7H-嘌呤-6-基：烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、卤素、硝基、烯基、炔基、羰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基。

本发明中使用的术语“烷基”是指饱和的直链或支链一价烃基，具有1-8个碳原子（即C1-8烷基），优选1-6个碳原子（即C1-6烷基），1-4碳原子（即C1-4烷基）或1-3个碳原子（即C1-3烷基）。“烷基”的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、新戊基、正己基、2-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基等。

本发明所用的术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘，优选的卤素基团为氟、氯或溴。

本发明所用的术语“卤代烷基”是指被本发明所定义的卤素单取代或多取代的本发明所定义的烷基。“卤代烷基”的实例包括但不限于-CF₃，-CHF₂，-CH₂CCl₃等。

本发明所用的术语“卤代烷氧基”是指被本发明所定义的卤素单取代或多取代的本发明所定义的烷氧基。“卤代烷基”的实例包括但不限于-OCF₃，-OCHF₂，-OCH₂CCl₃等。

本发明所用的术语“芳基”是指具有一个单环或多个稠合环的5-14个碳原子的芳族碳环基。所述芳基优选具有5-10，5-8或5-6或6个碳原子。“芳基”的实例包括但不限于苯基，萘基和蒽基等。

本发明所用的术语“杂芳基”是指具有5-14个成员的杂芳族环基团，包括单环杂芳族环和多环芳族环，其中单环芳族环与一个或多个其他芳族环稠合。杂芳基具有一个或多个选独立地自N、O和S的环杂原子。本发明所用的术语“杂芳基”范围内还包括的是其中芳族环与一个或多个非芳族环（碳环或杂环）稠合的基团，其中连接基团或点位于芳族环上。“杂芳基”实例包括但不限于吡啶基、嘧啶基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、呋喃基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹啉基等。

本发明中使用的术语“烯基”是指具有2－8个碳原子，优选2－6个碳原子的一价烯属不饱和烃基，它们可以为直链或支链的并且具有至少1个碳碳双键。具体的烯基包括但不限于乙烯基，正-丙烯基，异丙烯基，丁烯基等。

本发明中使用的术语“炔基”是指具有2－8个碳原子，优选2－6个碳原子的一价炔属不饱和烃基，它们可以为直链或支链的并且具有至少1个碳碳三键。具体的炔基包括但不限于乙炔基，炔丙基等。

本发明所述的的药学上可接受的盐选自：盐酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、富马酸盐、马来酸盐、苹果酸盐，或者这些盐的溶剂合物例如水合物。

本发明所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物优选自下列的化合物之一：

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）萘-2-甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-氯苯甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-2-硝基苯甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-甲氧苯甲酰胺；

（E）-N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘基-1-）-3-（3,4,-二甲氧基苯基）丙烯酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-3-硝基苯甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-3-甲氧基苯甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-3-甲基苯甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-3-（4-硝基苯基）丙烯酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-3-氯苯甲酰胺；

N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-溴-2-氟苯磺酰胺；

N-（3-（（7H-嘌呤-6-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-3,4-二甲氧基苯磺酰胺；

N-（3-（（7H-嘌呤-6-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-叔丁基苯磺酰胺；

N-（3-（（7H-嘌呤-6-）硫基）-4-羟基-6,7-二甲氧基萘-1-基）-3,4-二甲氧基苯磺酰胺；

N-（3-（（7H-嘌呤-6-）硫基）-4-羟基-6,7-二甲氧基萘-1-基）-2,6-二氯苯磺酰胺。

本发明的另一个方面涉及一种药物组合物，其包含上述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述药学上可接受的盐的溶剂合物，以及任选的一种或多种药学上可接受的载体和/或辅料。

本发明还有一个方面涉及上述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物的制备方法，包括如下步骤：

1）以R₂，R₃取代的1-硝基萘为原料，以DMSO和水为混合溶剂，在氢氧化钾存在下与过氧叔丁醇反应在硝基的对位引入羟基，再以钯碳作催化剂氢化还原得到中间体（II）；

2）将中间体（II）与R₁取代的酰氯或者磺酰氯或异氰酸酯在室温下反应8-12小时，得到关键中间体（III），再经高碘酸钠氧化得到醌式中间体（IV）；

3）由醌式中间体（IV）与R₄SH发生迈克尔加成反应获得最终目标产物：

其中，L、R₁、R₂、R₃、R₄如前所述；所述室温是指20-30℃。

发明的还涉及上述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物在制备酪氨酸激酶抑制剂中的用途。

本发明的还一个方面涉及上述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物在制备用于治疗和/或预防哺乳动物中与受体酪氨酸激酶相关疾病的药物中的用途。具体地，所述哺乳动物为人类。

本发明的还涉及上述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物在制备用于治疗或辅助治疗和/或预防哺乳动物由受体酪氨酸激酶介导的肿瘤或由受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞增殖和迁移的药物中的用途。具体地，所述哺乳动物为人类。

根据本发明，完全可以预期本发明化合物可用于治疗VEGFR或PDGFR等酪氨酸激酶敏感癌症，如VEGFR、PDGFR高表达及VEGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑/中枢神经***、***、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺（尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、***、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。本发明所述的衍生物能够调节蛋白激酶的活性，可以用于蛋白激酶相关性细胞功能障碍的预防和治疗，从而本发明的化合物还可以用于预防和治疗涉及异常蛋白激酶活性的功能障碍。

本发明的还一个方面涉及一种治疗和/或预防哺乳动物中与酪氨酸激酶相关的疾病的方法，所述方法包括施用有效量的本发明的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物，或者本发明的药物组合物。

本发明的还一个方面涉及一种治疗或辅助治疗和/或预防哺乳动物（包括人）中由酪氨酸激酶介导的肿瘤或由酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞增殖和迁移的方法，该方法包括施用有效量的本发明的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物，或者本发明的药物组合物。

本发明的还一个方面涉及一种治疗和/或预防哺乳动物（包括人）的肿瘤或癌症的方法，所述方法包括给有需要的哺乳动物施用有效量的本发明的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐、所述衍生物的溶剂合物、或者所述盐的溶剂合物，或者本发明的药物组合物。所述的肿瘤或癌症包括VEGFR或PDGFR酪氨酸激酶敏感癌症，如VEGFR、PDGFR高表达及VEGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑/中枢神经***、***、结直肠、子宫内膜、胃、头和颈、肝、肺（尤其是非小细胞肺癌）、神经元、食道、卵巢、胰腺、***、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本发明，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴和碘。

本发明中，当提及时，所采用的术语“烃基”包括烷基、烯基和炔基。

本发明中，当提及时，所采用的术语“烷基”、“烯基”和“炔基”具有本领域公知的一般含义，它们是直链或支链的烃基基团，例如但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、烯丙基、丙烯基、丙炔基等，并且所述的“烷基”、“烯基”和“炔基”可以统称为“烃基”或“链烃基”。

在本发明合成式I化合物的方法中，反应所用的各种原材料是本领域技术人员根据已有知识可以制备得到的，或者是可以通过文献公知的方法制得的，或者是可以通过商业购得的。以上反应方案中所用的中间体、原材料、试剂、反应条件等均可以根据本领域技术人员已有知识可以作适当改变的。或者，本领域技术人员也可以根据本发明第二方面方法合成本发明未具体列举的其它式I化合物。

本发明的式I化合物可以与其它活性成分组合使用，只要它不产生其他不利作用，例如过敏反应。

本发明式I所示的活性化合物可作为抗癌药物单独使用，或者可以与一种或多种其他抗肿瘤药物联合使用。联合治疗通过将各个治疗组分同时、顺序或隔开给药来实现。

本发明所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。

本发明的化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的药学上可接受的盐的形式使用。词语“药学上可接受的盐”指在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，且与合理的效果/风险比相称的盐。药学上可接受的盐是本领域公知的。例如，S.M.Berge,et al.,J.Pharmaceutical Sciences,1977,66:1中对药学上可接受的盐进行了详细描述。所述盐可通过使本发明化合物的游离碱官能度与合适的有机酸反应，在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者单独制备。代表性的酸加成盐包括但不限于乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硫酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐（异硫代硫酸盐，isothionate）、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、苹果酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。同样，碱性含氮基团可用以下物质季铵化：低级烷基卤化物如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯；长链卤化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物；芳基烷基卤化物如苄基溴和苯乙基溴及其他。

本发明式I化合物还包括其异构体、消旋体、对映体、非对映体、对映体富集物、溶剂合物、和酯，本发明式I化合物以及它的异构体、消旋体、对映体、非对映体、对映体富集物、溶剂合物、和酯还可以形成溶剂合物，例如水合物、醇合物等。上述化合物还可以是前药或可在体内代谢变化后释放出所述活性成分的形式。选择和制备适当的前药衍生物是本领域技术人员公知技术。一般来说，对于本发明的目的，与药学可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂合物形式与非溶剂合物形式相当。

可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

当用于上述治疗和/或预防或其他治疗和/或预防时，治疗和/或预防有效量的一种本发明化合物可以以纯形式应用，或者以药学可接受的酯或前药形式（在存在这些形式的情况下）应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药物可接受赋形剂的药物组合物给药。词语“治疗和/或预防有效量”的本发明化合物指以适用于任何医学治疗和/或预防的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和***率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。一般说来，本发明式I化合物用于哺乳动物特别是人的剂量可以介于0.001～1000mg/kg体重/天，例如介于0.01～100mg/kg体重/天，例如介于0.01～10mg/kg体重/天。

运用本领域技术人员熟悉的药物载体可以制备成含有效剂量的本发明化合物的药物组合物。因此本发明还提供包含与一种或多种无毒药物可接受载体配制在一起的本发明化合物的药物组合物。所述药物组合物可特别专门配制成以固体或液体形式供口服给药、供胃肠外注射或供直肠给药。

所述的药物组合物可配制成许多剂型，便于给药，例如，口服制剂（如片剂、胶囊剂、溶液或混悬液）；可注射的制剂（如可注射的溶液或混悬液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射水可立即使用）。所述的药物组合物中载体包括：口服制剂使用的粘合剂（如淀粉，通常是玉米、小麦或米淀粉、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮），稀释剂（如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素，和/或甘油），润滑剂（如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐，通常是硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇），以及如果需要，还含有崩解剂，如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐，通常是藻酸钠，和/或泡腾混合物，助溶剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂等，可注射的制剂使用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式（例如静脉内、皮下、腹膜内或局部）给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可以将其配制成肠衣片剂。

更具体地说，本发明的药物组合物可通过口服、直肠、胃肠外、池内、***内、腹膜内、局部（如通过散剂、软膏剂或滴剂）、口颊给予人类和其他哺乳动物，或者作为口腔喷雾剂或鼻腔喷雾剂给予。本发明所用术语“胃肠外”指包括静脉内、肌肉内、胸骨内、皮下和关节内注射和输液的给药方式。

适合于胃肠外注射的组合物可包括生理上可接受的无菌含水或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，及供重构成无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌散剂。合适的含水或非水载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇（丙二醇、聚乙二醇、甘油等）、植物油（如橄榄油）、可注射有机酯如油酸乙酯及它们的合适混合物。

这些组合物也可含有辅料，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如尼泊金酯类、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可确保防止微生物的作用。还期望包括等渗剂，例如糖类、氯化钠等。通过使用能延迟吸收的物质，例如单硬脂酸铝和明胶，可达到可注射药物形式的延长吸收。

混悬剂中除活性化合物外还可含有悬浮剂，例如乙氧基化异十八醇、聚氧乙烯山梨醇和聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶或者这些物质的混合物等。

在一些情况下，为延长药物的作用，期望减慢皮下或肌内注射药物的吸收。这可通过使用水溶性差的晶体或无定形物质的液体混悬剂来实现。这样，药物的吸收速度取决于其溶解速度，而溶解速度又可取决于晶体大小和晶型。或者，胃肠外给药的药物形式的延迟吸收通过将该药物溶解于或悬浮于油媒介物中来实现。

可注射贮库制剂形式可通过在生物可降解聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯（polylactide-polyglycolide）中形成药物的微胶囊基质来制备。可根据药物与聚合物之比和所采用的具体聚合物的性质，对药物释放速度加以控制。其他生物可降解聚合物的实例包括聚原酸酯类（poly（orthoesters））和聚酐类（poly（anhydrides））。可注射贮库制剂也可通过将药物包埋于能与身体组织相容的脂质体或微乳中来制备。

可注射制剂可例如通过用滤菌器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，所述固体组合物可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质。

本发明化合物或其组合物可用口服方法或非胃肠道给药方式。口服给药可以是片剂、胶囊剂、包衣剂，肠道外用药制剂有注射剂和栓剂等。这些制剂是按照本领域的技术人员所熟悉的方法制备的。为了制造片剂、胶囊剂、包衣剂所用的辅料是常规用的辅料，例如淀粉、明胶、***胶，硅石，聚乙二醇，液体剂型所用的溶剂如水、乙醇、丙二醇、植物油（如玉米油、花生油、橄榄油等）。含有本发明化合物的制剂中还有其它辅料，例如表面活性剂，润滑剂，崩解剂，防腐剂，矫味剂和色素等。在片剂、胶囊剂、包衣剂、注射剂和栓剂中含有本发明式I化合物的剂量是以单元剂型中存在的化合物量计算的。在单元剂型中本发明式I化合物一般含量为1-5000mg，优选的单元剂型含有10-500mg，更优选的单元剂型含有20-300mg。具体地说，本发明可以提供的供口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性的药物可接受赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下物质混合：a）填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b）粘合剂如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和***树胶；c）保湿剂如甘油；d）崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e）溶液阻滞剂如石蜡；f）吸收加速剂如季铵化合物；g）湿润剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；h）吸附剂如高岭土和膨润土以及i）润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型中也可包含缓冲剂。

相似类型的固体组合物使用赋形剂例如乳糖及高分子量聚乙二醇等，也可用作软胶囊和硬胶囊中的填充物。

片剂、糖衣丸剂（dragees）、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可与包衣和壳料如肠溶衣材和医药制剂领域公知的其他衣材一起制备。这些固体剂型可任选含有遮光剂，且其组成还可使其只是或优先地在肠道的某个部位任选以延迟方式释放活性成分。可以使用的包埋组合物的实例包括高分子物质和蜡类。如果适合，活性化合物也可与一种或多种上述赋形剂配成微囊形式。

供口服给药的液体剂型包括药学可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型除含有活性化合物外还可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类（特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油）、甘油、四氢糠醇（tetrahydrofurfuryl alcohol）、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及它们的混合物。口服组合物除包含惰性稀释剂外还可包含辅料，例如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香味剂。

供直肠或***给药的组合物优选是栓剂。栓剂可通过将本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，它们在室温下为固体，但在体温下则为液体，因此可在直肠腔或***腔内熔化而释放出活性化合物。

本发明的化合物及其组合物还考虑用于局部给药。供局部给予本发明化合物的剂量形式包括散剂、喷雾剂、软膏剂和吸入剂。在无菌条件下将活性化合物与药学可接受的载体和任何所需的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用制剂、眼软膏剂、散剂和溶液剂也被考虑在本发明范围内。

本发明化合物也可以脂质体形式给药。如本领域所公知，脂质体通常用磷脂或其他脂类物质制得。脂质体由分散于含水介质中的单层或多层水化液晶所形成。任何能够形成脂质体的无毒、生理上可接受和可代谢的脂质均可使用。脂质体形式的本发明组合物除含有本发明化合物外，还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂类是天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱（卵磷脂），它们可单独或者一起使用。形成脂质体的方法是本领域公知的（参见例如Prescott,Ed.,Methods in Cell Biology,Volume XIV,Academic Press,New York,N.Y.（1976）,P33）。

本发明人惊奇地发现，部分结构式I所示的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物在大鼠动脉环的试验和细胞毒性试验中证实具有较好的抑制血管新生和较低的细胞毒性。从裸鼠移植瘤试验中也发现这些化合物具有较好的体内活性，且部分化合物对肿瘤的抑制作用与阳性对照Sorfenib相当或好于阳性对照。此外，从动物的死亡率中分析，部分活性较好的化合物显示出比阳性对照Sorfenib更小的毒性。具体地说，本发明的化合物可用于预防或治疗VEGFR或PDGFR等酪氨酸激酶敏感癌症，如VEGFR、PDGFR高表达及VEGF驱动的肿瘤，包括实体肿瘤如胆管、骨、膀胱、脑/中枢神经***、***、食道、卵巢、胰腺、***、肾脏、皮肤、睾丸、甲状腺、子宫和外阴等的癌症，和非实体肿瘤如白血病、多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。

附图说明

图1为Sorafenib、空白及化合物3对大鼠主动脉环血管生成的影响；从图中可以看出，阴性对照组内皮细胞出芽生长良好；化合物3在1-20μM的浓度下浓度依赖性抑制大鼠动脉环微血管的新生；其中：

1Soraenib（1μM）度对大鼠主动脉环血管生成的影响；

2空白对照；

3化合物3（1μM）对大鼠主动脉环血管生成的影响；

4化合物3（10μM）对大鼠主动脉环血管生成的影响；

5化合物3（20μM）对大鼠主动脉环血管生成的影响。

具体实施方式

下面通过具体的制备实施例和生物学试验例进一步描述本发明，但是，应当理解为，这些实施例和试验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

在本发明中，除非另外说明，其中：（i）温度以摄氏度（℃）表示，操作在室温环境下进行；更具体地，所述室温是指20-30℃；（ii）有机溶剂用无水硫酸钠干燥，溶剂的蒸发用旋转蒸发仪减压蒸发，浴温不高于60℃；（iii）反应过程用薄层色谱（TLC）跟踪；（iv）终产物具有满意的质子核磁共振光谱（1H-NMR）和质谱（MS）数据。

实施例1  N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）萘-2-甲酰胺（化合物1）的合成：

化合物1

1）4-氨基-1-萘酚的合成：

将1-硝基萘（0.86g，5mmol）溶解在13ml DMSO中并降温至-5~5℃，加入KOH（1.2g，20mmol）的水溶液5ml，搅拌5min后，滴加过氧叔丁醇t-BuOOH（1.8g，10mmol）的DMSO溶液2ml。室温搅拌大约2h后反应完全，将溶液倒入50ml的1M盐酸溶液中，淡黄色固体析出，过滤，滤饼干燥后称重得1.38g的粗品。重结晶后得到纯品1.20g，淡黄色，熔点为166-168℃。将所得4-硝基-1-萘酚（1.89g 10mmol）溶解在20ml CH₃OH中，通入氢气在10个大气压下，搅拌反应12小时。TLC检测反应完全后，过滤钯碳，蒸除溶剂，得到黑色固体粉末粗品1.32g。重结晶后得到纯品熔点为：198℃。

2）N-（4-羟基萘-1-基）-2-萘甲酰胺的合成：

在-5~5℃下，4-氨基-1-萘酚（1.59g，10mmol）固体溶解在含有碳酸氢钠（2.52g，30mmol）的四氢呋喃/水（50ml/1ml）混合溶液中，加入2-萘甲酰氯（2.29g12mmol），反应搅拌5h后，TLC检测反应完全后。蒸干溶剂，加入适当量的乙酸乙酯后，用1mol/L的盐酸洗涤两遍（20ml×2），蒸馏水洗涤两遍（20ml×2），饱和NaCl洗涤两遍（20ml×2），无水硫酸钠干燥后，过滤，减压整除溶剂得浅棕色油状物。乙醇和水结晶，有白色固体析出，过滤得粗品。重结晶后得到纯品。

3）N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）萘-2-甲酰胺（化合物1）的合成：

N-（4-羟基萘-1-基）-2-萘甲酰胺（3.13g，10mmol）悬浮在200mL的CH₂Cl₂中，加入NaIO₄/SiO₂（22g，15mmol；0.68mmol ofNaIO₄/1g of SiO₂），搅拌反应2小时，TLC检测反应完全后，过滤，滤渣用CH₂Cl₂洗涤，滤液减压蒸除溶剂后得到红棕色固体。用乙酸乙酯重结晶得到黄色固体粉末（E）-N-（4-萘酮-1（4H）亚基）-2-萘甲酰胺（2.80g）。

3-巯基-1,2,4-三氮唑（2.53g，25mmol）溶于10ml的DMF中，（E）-N-（4-萘酮-1（4H）亚基）-2-萘甲酰胺（3.11g,10m mol）缓慢加入到DMF中，搅拌反应4h，TLC检测反应完全后，将溶液倒入100ml的蒸馏水中，有淡黄色固体析出，静置后过滤，得到的滤饼干燥后用甲醇重结晶，得到白色固体1.57g，总产率：38.17%，mp：229.1-230.3℃，ESI-MS m/z：413.6[M+H⁺]，¹H-NMR（DMSO-d6）δ7.43（s,1H）;7.50-7.68（m,5H）;7.89-8.12（m,6H）;8.29（q,J=3.2Hz,1H）;8.54（s,1H）;8.70（s,1H）;10.43（s,1H）。

与实施例1类似的方法，可以得到化合物2-10：

实施例2  N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-溴-2-氟苯磺酰胺（化合物11）的合成：

化合物11

1）4-氨基-1-萘酚的成

将1-硝基萘(0.86g，5mmol)溶解在13ml DMSO中并降温至-5~5℃，加入KOH(1.2g，20mmol)的5ml水溶液，搅拌5min后，滴加过氧叔丁醇t-BuOOH(1.8g，10mmol)的2ml DMSO溶液。室温搅拌约2h，反应完全后将溶液倒入50ml 1mol/L盐酸溶液中，析出淡黄色固体，过滤，滤饼干燥后称重得1.38g的粗品。重结晶后得到纯品1.20g，淡黄色，熔点为166-168℃。

将所得4-硝基-1-萘酚(189g，10mmol)溶解在20ml CH₃OH中，在10大气压氢气下搅拌反应10小时，TLC检测反应完全后滤除钯碳，滤液蒸除溶剂得到1.30g黑色固体粉末，重结晶后得到4-氨基-1-萘酚，熔点为：198℃。

2）N-（4-(4H)萘酮亚胺）-4-氟-2-溴-苯磺酰胺的合成

4-氨基-1-萘酚(1.59g，10mmol)固体溶解在20ml吡啶中，加入4-溴-2-氟苯磺酰氯(4.1g，15mmol)，反应搅拌5h后；TLC检测反应完全后，蒸干吡啶，加入40ml乙酸乙酯，用1mol/L的盐酸洗涤两遍(20ml×2)，蒸馏水洗涤两遍(20ml×2)，饱和NaCl洗涤两遍(20ml×2)，无水硫酸钠干燥有机相，过滤，减压蒸除溶剂得棕色油状物；加入60ml二氯甲烷溶剂，静置12h析出白色固体，过滤得粗品，二氯甲烷重结晶得到纯的N-(4-羟基-1-萘基)-4-溴-2-氟-苯磺酰胺。

将N-(4-羟基-1-萘基)-4-溴-2-氟-苯磺酰胺(3.96g,10mmol)悬浮在200mL的CH₂Cl₂中，加入NaIO₄/SiO₂(22g,15mmol;0.68mmol of NaIO₄/1g of SiO₂)，搅拌反应2小时，TLC检测反应完全，过滤，滤饼用CH₂Cl₂洗涤，滤液减压蒸除溶剂后得到红棕色固体，乙酸乙酯重结晶得到2.77g黄色固体粉末即为N-（4-(4H)萘酮亚胺）-4-氟-2-溴-苯磺酰胺。

3）N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-溴-2-氟苯磺酰胺（化合物11）的合成：

3-巯基-1,2,4-三氮唑(2.53g,25mmol)溶于10ml的DMF中，N-（4-(4H)萘酮亚胺）-4-氟-2-溴-苯磺酰胺(3.93g,10mmol)分少量多次加入到DMF中，搅拌反应4h，TLC检测反应完全后，将溶液倒入100ml的蒸馏水中，有淡黄色固体析出，静置后，过滤得到滤渣干燥后用甲醇重结晶，得到2.01g白色固体，即为N-（3-（（1H-1,2,4-三氮唑-5-）硫基）-4-羟基萘-1-基）-4-溴-2-氟苯磺酰胺（化合物11），收率：40.54%；熔点为232.6-234.5℃。ESI-MSm/z:495.35[M+H⁺];¹H-NMR(DMSO-d6)；6.98(s,1H);7.40-7.53(m,4H);7.75-7.79(m,1H);7.96-7.99(m,1H);8.16-8.19(m,1H);8.60(s,1H);10.20(s,1H);10.38(s,1H);14.23(s,1H).

与实施例1类似的方法，可以得到化合物11-15

试验例1：生物学试验

1.[材料]HUVEC，HCT116，A549，HepG2细胞株，四甲基偶氮唑蓝MTT，10%胎牛血清，96孔板

2.[方法]

细胞培养HUVEC，HCT116，A549，HepG2三种肿瘤细胞株都采用常规培养。试验时均用对数生长期细胞。

细胞生长检测（MTT法）HUVEC，HCT116，A549，HepG2细胞悬液均调整至1×105/ml，分别接种于96孔板(50μl/孔)，5000个细胞/孔。铺板4h后，每孔中加入50ul含不同浓度化合物的培养基，使孔中化合物终浓度分别为：1000ug/ml、200ug/ml、40ug/ml、8ug/ml、1.6ug/ml、0.32ug/ml，每个浓度设三个复孔，不加细胞的孔读数时作空白，加细胞不加化合物的孔作化合物空白孔，Sorafinib作化合物阳性对照。于37℃，5%二氧化碳中孵育48h，每孔加入10μl 0.5%的MTT染色液，继续孵育4h后，2500rpm，离心30min，然后抛弃板孔中培养基，加入二甲基亚砜200ul/孔。酶标仪上于570nm处测定每孔的吸光度OD值，细胞生长抑制率按下式计算：

抑制率（%）=（对照孔平均OD值-实验孔平均OD值）/对照孔平均OD值×100%

表1  细胞增殖实验结果

表中数值为三次试验的平均值，“±”后的数值表示标准偏差。

表I测试数据表明，大部分化合物在体外抗肿瘤细胞增殖的试验中显示出与阳性对照Sorafenib相当的活性，具有良好的开发前景。

试验例2目标化合物抗血管生成试验----大鼠胸主动脉环（In vitro）

此试验将大鼠主动脉剪成1mm长放入Matrigel胶中，主动脉中的血管内皮细胞会以出芽的方式长入Matrigel胶中，因此，此试验用于检测抗血管生成类抑制剂的抑制血管生成活性。

受试化合物（以化合物3为例）、Sorafenib，DMSO溶解至1mM做储存液

剂量：1、10、20μM

步骤：

取大鼠胸主动脉，剔除血管周围的脂肪组织，用PBS洗多遍，用1640培养基洗两遍，剪主动脉至1mm，放入96孔板中

向孔中加入1640培养基1：1稀释的Matrigel胶（BD，货号：356234），70μl/孔，放培养箱中

放培养箱30min后，加入70μl含有DMSO或化合物的1640培养基；试验分组：对照组、化合物Sorafinib组、化合物12组；化合物终浓度：1、10、20uM；每个剂量两个复孔；孔中DMSO占总体积的1/1000

培养3天后，换新培养基，并补加药物

培养6天后拍照，Sorafenib、空白、化合物3（1μM）、化合物3（10μM）及化合物3（20μM）对大鼠主动脉环血管生成的影响分别如图1中1、2、3、4、5所示。结果所示，阴性对照组内皮细胞出芽生长良好；化合物3在1-20μM的浓度下浓度依赖性抑制大鼠动脉环微血管的新生。

Claims (5)

1.2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物，其药学上可接受的盐，其特征在于：所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物选自下列化合物：

N-(3-((1H-1,2,4-三氮唑-5-)硫基)-4-羟基萘-1-基)-4-溴-2-氟苯磺酰胺；

N-(3-((7H-嘌呤-6-)硫基)-4-羟基萘-1-基)-3,4-二甲氧基苯磺酰胺；

N-(3-((7H-嘌呤-6-)硫基)-4-羟基-6,7-二甲氧基萘-1-基)-3,4-二甲氧基苯磺酰胺

N-(3-((7H-嘌呤-6-)硫基)-4-羟基-6,7-二甲氧基萘-1-基)-2,6-二氯苯磺酰胺。

2.制备权利要求1所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)以R₂，R₃取代的1-硝基萘为原料，以DMSO和水为混合溶剂，在氢氧化钾存在下与过氧叔丁醇反应在硝基的对位引入羟基，再以钯碳作催化剂氢化还原得到中间体(II)；

2)将中间体(II)与R₁取代的磺酰氯在室温下反应8-12小时，得到关键中间体(III)，再经高碘酸钠氧化得到醌式中间体(IV)；

3)由醌式中间体(IV)与R₄SH发生迈克尔加成反应获得最终目标产物：

其中，

L为连接基团，选自–SO₂-；

R₁选自苯基，所述的苯基可以任选被一个或多个如下基团取代：甲氧基或卤素；

R₂选自氢或甲氧基；

R₃选自氢或甲氧基；

R₄选自取代或未取代的7H-嘌呤-6-基。

3.一种药物组合物，其包含权利要求1所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。

4.权利要求1所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐在制备酪氨酸激酶抑制剂中的用途。

5.权利要求1所述的2-硫代-4-胺基-1-萘酚衍生物、其药学上可接受的盐在制备用于治疗和/或预防哺乳动物中与受体酪氨酸激酶驱动的肿瘤细胞增殖和迁移的药物中的用途。