CN102757904A - 利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法。其由如下步骤组成:A、按每300毫升水加入0.1~0.3毫升啤酒复合酶,调节pH值为5.6~6.0,然后加入20~60克啤酒废酵母,在38~46℃的温度下保温60~120分钟,得混合物A,其中啤酒废酵母的含水量为75%~80%;B、于混合物A中加入60~80克大米粉、0.24~0.36克氯化钙、0.24~0.36克氯化镁和0.2~0.5毫升液化酶,搅拌均匀并调节pH值为6.2~6.4,然后升温至92~95℃并保持不少于30分钟,得混合物B;C、将混合物B降温至60~65℃,加入2.0~4.0毫升糖化酶,调整pH为4.5~5.0,在此温度保持3~4小时,得混合物C;D、混合物C经碘检合格后,过滤除渣得清液。本发明的酵母培养基营养成份全面,可取代日常检测酵母菌的12°P麦汁培养基,降低了检测成本。
Description
技术领域
本发明属于生化提取领域,具体涉及一种利用啤酒废酵母溶解产生氨基酸并以此氨基酸作为氮源制备酵母培养基的的方法。
背景技术
啤酒废酵母是啤酒酿造过程产生的副产物,生产100吨吨啤酒可得到含水分75%~80%的啤酒废酵母约1.5吨。酵母含有丰富的蛋白质和各种分解酶系,通过酵母溶解可以获得丰富的氨基酸,是一种营养好、价格低的蛋白质源;此外啤酒酵母细胞内还含有各种维生素、麦角子甾醇及铬、硒等微量元素。然而,目前尚无相关技术对啤酒废酵母进行处理以废物利用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法,以进行废物利用,降低啤酒的生产成本,增加附加值。
为达到上述目的,本发明采用如下技术方案:
利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法,由如下步骤组成:
A、按每300毫升水加入0.1~0.3毫升啤酒复合酶,调节pH值为5.6~6.0,然后加入20~60克啤酒废酵母,在38~46℃的温度下保温60~120分钟,得混合物A,其中啤酒废酵母的含水量为75%~80%;
B、于混合物A中加入60~80克大米粉、0.24~0.36克氯化钙、0.24~0.36克氯化镁和0.2~0.5毫升液化酶,搅拌均匀并调节pH值为6.2~6.4,然后升温至92~95℃并保持不少于30分钟,得混合物B;
C、将混合物B降温至60~65℃,加入2.0~4.0毫升糖化酶,调整pH为4.5~5.0,在此温度保持3~4小时,得混合物C;
D、混合物C经碘检合格后,过滤除渣得清液。
作为优选,A步骤中,采用磷酸调节pH值,磷酸的用量为0.01~0.05毫升。
作为优选,A步骤中,啤酒复合酶内至少包含β-葡聚糖酶和蛋白酶。进一步优选,啤酒复合酶还包含木聚糖酶、纤维素酶和淀粉酶。该啤酒复合酶的适用温度为40℃~65℃,最适pH值为5.5~6.5。
作为优选,B步骤中,采用磷酸或碳酸钠调节pH值。
作为优选,C步骤中,采用磷酸调节pH值。
通过本发明获得的酵母培养基营养成份全面,可取代日常检测酵母菌的12°P麦汁培养基,降低了检测成本。
具体实施方式
本发明所使用的啤酒废酵母的含水量为75%~80%。本发明的啤酒复合酶采用广州裕立宝生物科技有限公司的啤酒复合酶;液化酶采用杰能科公司的耐高温淀粉酶;糖化酶采用广州裕立宝生物科技有限公司的糖化复合酶。
实施例1
酵母培养基的制备步骤为:
A、在烧杯中加入300ml水,添加啤酒复合酶0.1~0.3ml,用磷酸(用量0.01~0.05毫升)调整pH为5.6~6.0,啤酒废酵母的添加量为20克,于38~46℃的温度下保温120分钟;
B、加入70克大米粉,0.3克氯化钙,0.3克氯化镁和0.4毫升液化酶,用磷酸或碳酸钠调节pH值6.2~6.4,搅拌均匀,升温至92~95℃,在此温度保持30分钟;
C、降温至60-65℃,加入3.0毫升糖化酶,调整pH为4.5~5.0,在此温度保持3-4小时;
D、碘检合格后,过滤除渣得清液。
经检测上述清液的氨基氮含量为约11.6mg/100ml,收得率为0.67%。
实施例2
A、在烧杯中加入300ml水,添加啤酒复合酶0.1~0.3ml,用磷酸(用量0.01~0.05毫升)调整pH为5.6~6.0,啤酒废酵母的添加量为40克,于38~46℃的温度下保温120分钟;
B、加入70克大米粉,0.3克氯化钙,0.3克氯化镁和0.4毫升液化酶,用磷酸或碳酸钠调节pH值6.2~6.4,搅拌均匀,升温至92~95℃,在此温度保持30分钟;
C、降温至60-65℃,加入3.0毫升糖化酶,调整pH为4.5~5.0,在此温度保持3-4小时;
D、碘检合格后,过滤除渣得清液。
经检测上述清液的氨基氮含量为约15.1mg/100ml,收得率为0.55%。
实施例3
A、在烧杯中加入300ml水,添加啤酒复合酶0.1~0.3ml,用磷酸(用量0.01~0.05毫升)调整pH为5.6~6.0,啤酒废酵母的添加量为40克,于38~46℃的温度下保温120分钟;
B、加入70克大米粉,0.3克氯化钙,0.3克氯化镁和0.4毫升液化酶,用磷酸或碳酸钠调节pH值6.2~6.4,搅拌均匀,升温至92~95℃,在此温度保持30分钟;
C、降温至60-65℃,加入3.0毫升糖化酶,调整pH为4.5~5.0,在此温度保持3-4小时;
D、碘检合格后,过滤除渣得清液。
经检测上述清液的氨基氮含量为约17.9mg/100ml,收得率为0.48%。
将上述实施例1~3所述清液及12°P麦汁(氨基氮含量为约13.1mg/100ml)分别制成琼脂平板,对酵母菌进行25℃培养。结果见表1。
表1:不同培养基对酵母生长的影响
从表1可知,本发明的酵母培养基与12°P麦汁培养基的功效相当,可取代12°P麦汁培养基作为实验室常用的酵母培养基。
本发明利用啤酒废酵母在适当的温度条件下,借助啤酒复合酶的作用,溶解酵母产生氨基酸等营养物质,所得的含氮溶液与大米粉糊相混合,按照糊化、液化、糖化的温度曲线将大米粉糖化完全,制成营养成份全面的培养基,可取代日常检测酵母菌常用的12°P麦汁培养基,降低了检测成本。
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述,并非对本发明的构思和范围进行限定,在不脱离本发明涉及方案前提下,本领域技术人员对本发明的技术方案作出的各种变型和改进,均应落入本发明的保护范围。
Claims (6)
1.利用啤酒废酵母制备酵母培养基的方法,其特征在于,由如下步骤组成:
A、按每300毫升水加入0.1~0.3毫升啤酒复合酶,调节pH值为5.6~6.0,然后加入20~60克啤酒废酵母,在38~46℃的温度下保温60~120分钟,得混合物A,其中啤酒废酵母的含水量为75%~80%;
B、于混合物A中加入60~80克大米粉、0.24~0.36克氯化钙、0.24~0.36克氯化镁和0.2~0.5毫升液化酶,搅拌均匀并调节pH值为6.2~6.4,然后升温至92~95℃并保持不少于30分钟,得混合物B;
C、将混合物B降温至60~65℃,加入2.0~4.0毫升糖化酶,调整pH为4.5~5.0,在此温度保持3~4小时,得混合物C;
D、混合物C经碘检合格后,过滤除渣得清液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,A步骤中,采用磷酸调节pH值,磷酸的用量为0.01~0.05毫升。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,A步骤中,啤酒复合酶内至少包含β-葡聚糖酶和蛋白酶。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,A步骤中,啤酒复合酶还包含木聚糖酶、纤维素酶和淀粉酶。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,B步骤中,采用磷酸或碳酸钠调节pH值。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,C步骤中,采用磷酸调节pH值。
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