CN102652790A

CN102652790A - 一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药及其制备方法

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Publication number: CN102652790A
Application number: CN2011100831177A
Authority: CN
Inventors: 高陆; 孙佳明
Original assignee: JILIN XIUZHENG PHARMACEUTICAL NEW MEDICINE DEVELOPMENT Co Ltd
Current assignee: JILIN XIUZHENG PHARMACEUTICAL NEW MEDICINE DEVELOPMENT Co Ltd
Priority date: 2011-04-02
Filing date: 2011-04-02
Publication date: 2012-09-05

Abstract

一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药及其制备方法。所提供的药物由5～95%的中草药虎眼万年青提取物和5～95%的药用辅料组成。可作为口服制剂、外用制剂和注射剂。本发明药物的制备方法是：取虎眼万年青加水或含乙醇水溶液进行提取，合并提取液，浓缩至稠膏，加入适当辅料后，将其制成口服制剂、外用制剂和注射剂。本发明的药物具有活血化瘀消肿止痛的作用，用于治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛效果明显，剂型多样化，便于医疗需要。

Description

一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药及其制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种具有活血化瘀消肿止痛作用的治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛的中药制剂及其制备方法。

背景技术

目前，抗炎镇痛药品种繁多，是临床应最多的一类药。而其中多数为化学药剂，虽然看炎镇痛作用明显，但可引起多种不良反应，具有较强的副作用。

发明内容

本发明目的是提供一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药。用于治疗肿痛，克服现有的抗炎镇痛药存在的易引起多种不良反应，具有较强的副作用的不足。

本发明的另一个目的是提供一种用于治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛药物的制备方法。

本发明的具有活血化瘀消肿止痛作用的中药由5～95%的中草药虎眼万年青提取物和5～95%药学上可接受的载体和/或辅料组成。

本发明的药物包括各种片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、粉剂和口服液的口服剂型；或硬膏剂、软膏剂、涂膜剂、凝胶剂或注射剂。

本发明的中药有效成分的提取方法是：

（1）将虎眼万年青粉碎后用体积浓度为10～95％乙醇水溶液或水提取，提取液于40～80℃减压浓缩，乙醇水溶液或水与药材的质量体积比为6～20 L/kg；

(2) 将步骤（1）所得浓缩液过滤或离心除去沉淀，经反相色谱柱吸附纯化，洗脱液在 40～80℃减压干燥，得虎眼万年青有效成分提取物；

（3）将步骤（2）所得的虎眼万年青提取物与药学上可接受的载体和/或辅料按虎眼万年青提取物5—95%、载体和/或辅料5—95%的比例混合，得治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛的中药制剂。

其中：

步骤（1）中的虎眼万年青的有效成分的提取的方法还包括浸泡、回流、超声、超临界萃取、渗漉提取方法中的一种。

步骤（2）中的反相色谱柱的填料为键合了十八烷基的硅胶，即ODS-C18。反相硅胶用量为药材重量10～100倍，2～3倍树脂柱床体积的纯水洗脱杂质，3～6倍柱床体积的20～80％体积浓度乙醇水溶液洗脱有效部位，洗脱液在 40～80℃减压干燥。

步骤（3）所制得的剂型包括口服剂中的片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、粉剂和口服液，涂擦剂中的或硬膏剂、软膏剂，涂膜剂，凝胶剂或注射剂。

本发明的中药适于治疗各种腰痛、背痛、肩痛和关节痛等各种疼痛，尤其适用于治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛。

本发明是基于：虎眼万年青(又名珍珠草、胡连万年青、海葱、葫芦兰) 内含虎眼万年青皂苷，生物碱、黄酮、多糖、香豆素、苯甲酸、单糖、多种氨基酸，大量微量元素及低聚糖高级烷烃混合物等各类化学成分。其中虎眼万年青皂苷、生物碱、黄酮既是抗肿瘤的药效成分，又有较强的抗炎作用；多糖组分能增强人体体液免疫和细胞免疫功能，与人参皂苷Rg₁相近。有极高的药用价值。将其入药，能清热解毒，消坚散结。用于治疗肝病、肝癌、胆囊炎及寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛的治疗具有显著效果。

具体实施方式：

实施例l：

将干燥虎眼万年青1.0kg粉碎成粗粉（20目），用70%乙醇（体积比）冷浸两次，每次15天，合并浸渍液，减压浓缩呈稠膏（相对密度1.2,70℃），加600-800毫升水搅拌，冷却沉淀。置离心机（1200-1600 rad/min）沉降离心15～30分钟，取上清液备用。

取ODS-C18，按与生药重量比1：20的比例装柱，将上述备用的上清液上样，先用2～4倍柱体积去离子水洗脱，再用4～6倍柱体积20～60%乙醇（体积比）进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，50～70℃减压浓缩，50～70℃干燥，粉碎，得虎眼万年青提取物，得率（重量比）为2.7%。

将制备得到的虎眼万年青提取物1.0Kg，加入淀粉0.2～0.4kg，维晶纤维素0.1～0.3Kg，加入0.6～1.0Kg 10%聚乙烯吡咯烷酮水溶被，混合均匀，过16目筛制成湿颗粒，50℃干燥，14目整粒，加硬脂酸镁0.04～0.08Kg，总混，压片，得成品口服片剂10000片。

治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛，每次口服2～3片，每日两次。

实施例2：

将干燥虎眼万年青1.0kg粉碎成粗粉（20目），用80%乙醇（体积比）加热回流提取2次，合并提取液，减压浓缩呈稠膏（相对密度1.2,70℃），加600～800毫升水搅拌，冷却沉淀。置离心机（1200-1600 rad/min）沉降离心15～30分钟，取上清液备用。

取ODS-C18，按与生药重量比1：100的比例装柱，将上述备用的上清液上样，先用2～4倍柱体积去离子水洗脱，再用4～6倍柱体积20～70%乙醇进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，50～70℃减压浓缩，50～70℃干燥，粉碎，得虎眼万年青提取物，得率（重量比）为3.0%。

将得到的虎眼万年青提取物1.0kg，加入淀粉0.1～0.3kg，维晶纤维素0.2～0.4kg，硬脂酸镁0.04～0.08kg，混合均匀，灌装胶囊，得口服胶囊剂10000粒。

用于治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛，每次口服2～3粒，每日两次，

实施例3；

将干燥虎眼万年青1.0kg粉碎成粗粉（20目），用60%乙醇（体积比）浸渍48小时后，渗漉提取，渗漉至流出液色浅，减压浓缩呈稠膏（相对密度1.2,70℃），加600～800毫升水搅拌，冷却沉淀。置离心机(1200-1600 rad/min)沉降离心15～30分钟，取上清液备用。

取ODS-C18，按与生药重量比1：60的比例装柱，将上述各用的上清液上样，先用2～4倍柱体积去离子水洗脱，再用4～6倍柱体积30～80%乙醇进行梯度洗脱．收集乙醇洗脱液。50～70℃减压浓缩，50～70℃干燥，粉碎，得虎眼万年青提取物，得率为3.2%。

将得到的虎眼万年青提取物10.0g，加入600.0mL蒸馏水，40～60℃下超声l～2小时，过滤，收集滤液；将100～200mL苯甲醇和5～20mL吐温-80加入滤液中，加热至50～70℃，搅拌4～6小时，使之允分混匀；向所得混合液中加入1.0～5.0g活性炭，搅拌均匀后放置30分钟，抽滤；加蒸馏水定容至1000mL，调pH值至7.5，过滤，分装，在105℃、0.5Mpa下高压灭菌30分钟，得成品滴注剂500支。

治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛每次滴注1～2支（250mL生理盐水稀释），每日一次，

实施例4：

将干燥虎眼万年青1.0kg粉碎成粗粉（20目），用水（体积比）超声提取两次，每次1小时，合并提取液，减压浓缩呈稠膏（相对密度1.2,70℃），加600～800毫升水搅拌，冷却沉淀。置离心机(1200-1600 rad/min)沉降离心15～30分钟，取上清液备用。

取ODS-C18，按与生药重量比1：80的比例装柱，将上述备用的上清液上样，先用2-4倍柱体积去离子水洗脱，再用4～6倍柱体积20～80%乙醇进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，50～70℃减压浓缩，50～70℃干燥，粉碎，得虎眼万年青提取物，得率为2.5%。

取得到的虎眼万年青提取物10.0g，加入100.0～200.0mL的无菌去离子水40～60℃下超声l～2小时，冷藏12～24小时，离心去沉淀，最终清液加入木糖醇30～50g，冷藏过滤，获得澄明滤液，向清液中，再加入无菌去离子水至3000.0～5000.0mL，灌装封口后进行杀菌处理，120℃下灭菌10～20min，制成口服液300～500支。

治疗寒湿关节肿痛、神经痛和闪跌疼痛，每次口服1～2支，每日两次。

药效实验

实验例1

虎眼万年青提取物对醋酸所致小鼠扭体的影响

ICR小鼠50只，雄性，体重20-22g，按体重随机均分为5组，即：模型组，灌胃给予同体积蒸馏水；阳性药（阿司匹林）组，灌胃给予阿司匹林0.2g/kg；实施例3虎眼万年青提取物5g/kg、10g/kg、20g/kg，灌胃给药。各组给药容积均为0.2ml/10g。每天给药1次，连续5天。末次给药后1h，各组小鼠腹腔注射0.6%冰醋酸0.1ml/10g，观察15min内小鼠的扭体次数，计算抑制率。

抑制率（%）=（对照组小鼠平均扭体次数-给药组小鼠平均扭体次数）/对照组小鼠平均扭体次数×100%

实验结果采用组间t检验，比较各组间的差异，计算均数及标准差（

±s）。

镇痛实验结果：虎眼万年青提取物20g/kg、10g/kg剂量组对醋酸所致的小鼠扭体反应有明显抑制作用，与模型组相比有显著性差异（p<0.001或p<0.05）。结果见表1。

表1：虎眼万年青提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

组别	扭体次数	抑制率
			模型组	40.2±10.5	/
阳性药（阿司匹林）组
			0.2g/kg	3.9±2.4***	90.3
实验例1虎眼万年青提取物组
			20g/kg	21.9±7.3***	45.5
10g/kg	31.4±7.8*	21.9
			5g/kg	37.9±4.4	5.7

与模型组相比*P<0.05，***P<0.001

实验例2

虎眼万年青提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

ICR小鼠60只，雄性，体重26-30g，按体重随机均分为6组，即：模型组，灌胃给予同体积蒸馏水；阳性药（阿司匹林）组，灌胃给予阿司匹林0.2g/kg；实施例3虎眼万年青提取物5g/kg、10g/kg、20g/kg、30g/kg组，灌胃给予实施例3虎眼万年青提取物不同剂量溶液。各组给药容积均为0.2ml/10g。每天给药1次，连续5天。末次给药后1h，各组小鼠左耳正反两面均匀涂抹二甲苯0.05ml致炎，右耳涂抹生理盐水作为对照。致炎后2h，小鼠脱臼处死，用直径6mm的打孔器在小鼠两耳相同部位打孔，称量两侧耳片重量。计算肿胀度和肿胀率。

肿胀度=左耳耳片重量-右耳耳片重量。

肿胀率=(左耳耳片重量-右耳耳片重量)/ 右耳耳片重量*100%。

±s）。

抗炎实验结果：虎眼万年青提取物10g/kg、20g/kg、30g/kg对二甲苯所致的小鼠耳肿胀均有抑制作用，与模型组相比有显著性差异（p<0.05或p<0.01），作用呈剂量依赖性，且实施例3虎眼万年青提取物30g/kg组效果与阳性药阿司匹林相当。结果见表2。

表2：虎眼万年青提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

组别	肿胀度（mg）	肿胀率（%）
			模型组	9.5±4.6	81.5±43.8
阳性药（阿司匹林）组
			0.2g/kg	3.6±2.4**	28.6±18.4**
实验例2虎眼万年青提取物组
			30g/kg	3.8±3.7**	31.9±30.0**
20g/kg	5.6±3.0*	45.1±23.5*
			10g/kg	5.9±3.1	47.1±24.8*
5g/kg	7.9±3.3	69.7±30.5

与模型组相比*P<0.05，**P<0.01

实验例3

虎眼万年青注射液对醋酸所致小鼠扭体的影响

ICR小鼠50只，雄性，体重20-22g，按体重随机均分为5组，即：模型组，腹腔注射给予同体积蒸馏水；阳性药（吡罗昔康）组，腹腔注射给予吡罗昔康3mg/kg；实8虎眼万年青注射液0.5 mg/kg 、1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg组，腹腔注射给药。各组给药容积均为每天20ml/kg。每天给药1次，连续5天。末次给药后1h，各组小鼠腹腔注射0.6%冰醋酸0.1ml/10g，观察15min内小鼠的扭体次数，计算抑制率。

±s）。

镇痛实验结果：虎眼万年青注射液2mg/kg、4mg/kg 剂量组对醋酸所致的小鼠扭体反应有明显抑制作用，与模型组相比有显著性差异（p<0.001或p<0.05）。结果见表3。

表3虎眼万年青提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

组别	扭体次数	抑制率
			模型组	38.1±9.6	/
阳性药（吡罗昔康）组
			3mg /kg	17.9±2.7***	56.4
8虎眼万年青注射液组
			0.5mg/kg	20.2±6.3	47.5
1mg/kg	21.7±5.6*	50.3
			2mg/kg	16.9±6.7*	57.1
4mg/kg	13.8±4.9***	65.3

与模型组相比*P<0.05，***P<0.001

实验例4:

虎眼万年青注射液对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

ICR小鼠60只，雄性，体重26-30g，按体重随机均分为6组，即：模型组，腹腔注射给予同体积蒸馏水；阳性药（氢可的松）组，腹腔注射给予氢可的松4mg/kg；实施例8虎眼万年青注射液1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg组，腹腔注射给予施例8虎眼万年青注射液不同剂量溶液。各组给药容积均为每天20ml/kg。每天给药1次，连续5天。末次给药后0.5h，各组小鼠左耳正反两面均匀涂抹二甲苯0.05ml致炎，右耳涂抹生理盐水作为对照。致炎后2h，小鼠脱臼处死，用直径6mm的打孔器在小鼠两耳相同部位打孔，称量两侧耳片重量。计算肿胀度和肿胀率。

肿胀度=左耳耳片重量-右耳耳片重量。

肿胀率=(左耳耳片重量-右耳耳片重量)/ 右耳耳片重量*100%。

±s）。

抗炎实验结果：虎眼万年青注射液1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg对二甲苯所致的小鼠耳肿胀均有抑制作用，与模型组相比有显著性差异（p<0.05或p<0.01），作用呈剂量依赖性。结果见表4。

表4虎眼万年青注射液对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

组别	肿胀度（mg）	肿胀率（%）
			模型组	9.1±2.4	79.3±38.3
阳性药（氢可的松）组
			4mg/kg	4.2±3.2**	36.5±19.4**
实验例4虎眼万年青注射液组
			1mg/kg	3.9±2.8*	34.2±34.5*
2mg/kg	3.8±2.9*	32.1±13.1*
			4mg/kg	3.5±2.8*	30.4±32.0**

与模型组相比*P<0.05，**P<0.01

Claims

1.一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药，其特征是：由5～95%的中草药虎眼万年青提取物和5～95%药学上可接受的载体和/或辅料组成。

2.一种权利要求1所述的具有活血化瘀消肿止痛作用的中药制剂制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(2) 将步骤（1）所得浓缩液过滤或离心除去沉淀，经反相色谱柱吸附纯化，洗脱液在 40～80℃减压干燥，得虎眼万年青提取物；

3.根据权利要求2所述一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药的制备方法，其特征是，步骤（1）中的提取的方法包括浸泡、回流、超声、超临界萃取、渗漉提取方法中的一种。

4.根据权利要求2所述一种具有活血化瘀消肿止痛作用的中药制剂的制备方法，其特征是，步骤（2）中的反相色谱柱的填料为键合了十八烷基的硅胶，即ODS-C18。