CN102645505A - 顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，包括对照品溶液的制备、含量测定项下供试品溶液的制备、含量均匀度测定项下供试品溶液的制备、用高效液相色谱测定四个步骤。本发明的优点是通过特殊制备的供试品溶液结合高效液相色谱法，对顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度进行测定，提供了一种稳定性、重复性好的顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度的测定方法，使顺气化痰颗粒的质量检测指标更加全面，以更好地控制产品质量。

Description

顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法

技术领域

本发明涉及一种药品成分含量的测定方法，特别是一种顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度的测定方法。

背景技术

顺气化痰颗粒的性状为浅棕色至棕色颗粒，味甜、微苦，功能主治：止咳平喘、顺气化痰。用于治疗上感、急慢性气管炎、咳嗽多痰、胸闷气急等症。药物成分为黄荆子、松塔、车前草、甘草四味中药及氨茶碱、马来酸氯苯那敏两味化学药。以上六味，黄荆子、松塔、车前草、甘草四味中药，加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，静置沉淀，滤过，取上清液浓缩至相对密度为1.24（80℃）的清膏；氨茶碱、马来酸氯苯那敏用配研法先与糊精混匀，再与上述清膏和糊精、蔗糖混合均匀，制成颗粒，干燥，即得顺气化痰颗粒。

上述顺气化痰颗粒的成分鉴别：（1）取本品2g，研细，加甲醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml，作为供试品溶液；另取茶碱及马来酸氯苯那敏对照品，加甲醇分别制成每1ml含2mg和0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以氯仿-甲醇-丙酮-浓氨试液（体积比9∶1.5∶1∶0.05）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品色谱中，在与茶碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。再喷以稀碘化铋钾试液，日光下检视，供试品色谱中，在与马来酸氯苯那敏对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。（2）取黄荆子对照药材1g，加水100ml，煎煮30分钟，放冷，滤过，滤液浓缩至稠膏状，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取前述（1）中的供试品溶液和上述对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲醇-水（体积比3∶1∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的一个荧光主斑点。

上述顺气化痰颗粒的成分含量测定：照高效液相色谱法测定。（1）色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水（体积比25∶75）为流动相，检测波长为275nm。理论板数按茶碱峰计算应不低于5000。（2）对照品溶液的制备：取茶碱对照品适量，精密称定，用流动相制成每1ml含10μg的溶液，即得。（3）供试品溶液的制备：取本品装量差异项下的内容物，研细，取1g，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声处理30分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每袋6g含氨茶碱以无水茶碱（C₇H₈N₄O₂）计，应为54.7mg～82.1mg。

由以上可见，目前顺气化痰颗粒的质量检测，在现有指标中已有了氨茶碱、马来酸氯苯那敏、黄荆子的鉴别，有了氨茶碱的含量测定，但没有含量较少的马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度的测定，这就不能知道马来酸氯苯那敏在顺气化痰颗粒中的含量是否准确、均匀，不能更好地控制产品质量。

发明内容

发明目的：针对上述问题，本发明的目的是提供一种顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度的测定方法，以更好地控制顺气化痰颗粒产品质量。

技术方案：一种顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：取马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml约含20μg的溶液，即得；

（2）含量测定项下供试品溶液的制备：取顺气化痰颗粒，研细，取粉末约1g，精密称定，置25ml容量瓶中，加1mol/l氢氧化钠溶液2.5ml湿润，再加入约18ml甲醇，超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

（3）含量均匀度测定项下供试品溶液的制备：取顺气化痰颗粒1袋，置乳钵中，加1mol/l氢氧化钠溶液10ml湿润后，研细，用甲醇约70ml，转移至100ml量瓶中，超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

（4）用高效液相色谱测定：

a.用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为70∶30的磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相，检测波长为264nm，理论板数按氯苯那敏峰计算不低于4000；

b.分别精密吸取对照品溶液、含量测定项下供试品溶液、含量均匀度测定项下供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得马来酸氯苯那敏含量；

c.按外标法以氯苯那敏峰面积计算出顺气化痰颗粒每袋以标示量3.0mg为100的相对含量，即得马来酸氯苯那敏含量均匀度。

经上述测定方法所得，所述顺气化痰颗粒6g装每袋中马来酸氯苯那敏含量为每袋含有2.4mg～3.6mg，所述顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量均匀度为A＋1.8S＜20.0。

步骤（4）中所述磷酸盐缓冲液的制备为磷酸二氢铵11.5g加水溶解后加磷酸1ml，再加水稀释至1000ml。

步骤（2）、步骤（3）中所述超声的功率为250W、频率为40kHz。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是通过特殊制备的供试品溶液结合高效液相色谱法，对顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度进行测定，提供了一种稳定性、重复性好的顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度的测定方法，使顺气化痰颗粒的质量检测指标更加全面，以更好地控制产品质量。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

一种顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：取马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml约含20μg马来酸氯苯那敏的溶液，即得。

（2）含量测定项下供试品溶液的制备：取顺气化痰颗粒，研细，取粉末约1g，精密称定，置25ml容量瓶中，加1mol/l氢氧化钠溶液2.5ml湿润，再加入约18ml甲醇，经功率为250W、频率为40kHz的超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

（3）含量均匀度测定项下供试品溶液的制备：取顺气化痰颗粒1袋，置乳钵中，加1mol/l氢氧化钠溶液10ml湿润后，研细，用甲醇约70ml，转移至100ml量瓶中，经功率为250W、频率为40kHz的超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

（4）用高效液相色谱测定：

a.用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为70∶30的磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相，检测波长为264nm，理论板数按氯苯那敏峰计算不低于4000；磷酸盐缓冲液的制备为磷酸二氢铵11.5g加水溶解后加磷酸1ml，再加水稀释至1000ml

b.分别精密吸取对照品溶液、含量测定项下供试品溶液、含量均匀度测定项下供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得马来酸氯苯那敏含量；测得顺气化痰颗粒6g装每袋中马来酸氯苯那敏含量为每袋含有2.4mg～3.6mg；

c.按外标法以氯苯那敏峰面积计算出顺气化痰颗粒每袋以标示量3.0mg为100的相对含量，即得马来酸氯苯那敏含量均匀度；测得顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量均匀度为A＋1.8S＜20.0。

以下为对上述本发明测定方法的对比试验报告。

1、仪器与试药

仪器：高效液相色谱仪。

试剂：甲醇为色谱纯试剂，水为纯化水，其他试剂为分析纯。

对照品：马来酸氯苯那敏（批号：100047-200606，供含量测定用），中国药品生物制品检定所提供。

供试品：顺气化痰颗粒（批号：100801），规格：每袋装6g，由本公司提供。

2、色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为70∶30的磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相，检测波长为264nm，理论板数按氯苯那敏峰计算不低于4000。

3、波长的选择

取20μg/ml马来酸氯苯那敏对照品溶液，以甲醇为空白，在250～350nm波长范围内进行扫描。显示马来酸氯苯那敏对照品在264nm处特征吸收最明显，本试验选择264nm为检测波长。

4、供试品的前处理

本供试品为中药复方制剂，经试验证明，未经处理的供试品所含成分较多，故需对其进行前处理。首先分析了马来酸氯苯那敏的各项理化性质及供试品中所含的主要成分，后经查阅大量的文献，确定了其基本的处理过程为碱处理、醇溶、定容。因马来酸氯苯那敏为氯苯那敏加酸成盐，易溶于水、乙醇或三氯甲烷，微溶于***，故参考文献，试验设计采用NaOH调节溶液为弱碱性，中和马来酸还原氯苯那敏为游离碱后，用甲醇超声提取。结果显示，碱化后超声法简单易行。

5、流动相的选择

马来酸氯苯那敏含量测定方法一般选择磷酸盐缓冲盐体系。在试验中，将乙腈换为甲醇，能排除供试品中其它成分的干扰，使马来酸氯苯那敏保留时间和峰型都合适，最后选择体积比为70∶30的磷酸盐缓冲液-甲醇，磷酸盐缓冲液的制备为磷酸二氢铵11.5g加水溶解后加磷酸1ml，再加水稀释至1000ml。

6、稳定性试验

取含量测定项下供试品溶液，分别于0、1、2、4、8小时进样，测定氯苯那敏峰面积，结果RSD为1.15%（n=5）。

7、精密度试验

取20μg/ml马来酸氯苯那敏对照品溶液，重复进样5次，测定氯苯那敏峰面积，结果RSD为0.78%（n=5）。

8、重复性试验

取供试品平行6份，按照含量测定项下方法测定每份供试品的含量，平均每袋含马来酸氯苯那敏为标示量的99.8%， RSD为0.94%（n=6）。

9、加样回收率试验

精密称取供试品适量，共9份，分别加入不同体积的马来酸氯苯那敏对照品溶液，按照含量测定项下方法处理，进行测定，计算回收率。平均回收率为99.23%，结果RSD为0.98%（n=9）。

10、供试品含量测定

分别精密吸取按本发明方法制备的对照品溶液和含量测定项下供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，按外标法以氯苯那敏峰面积计算，得本批含马来酸氯苯那敏为2.83mg/袋。

11、供试品含量均匀度测定

分别精密吸取按本发明方法制备的对照品溶液和含量均匀度测定项下供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，按外标法以氯苯那敏峰面积计算出每袋以标示量3.0mg为100的相对含量，得顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量均匀度为A＋1.8S＝16.2。

12、结论

综上所述，采用本发明测定方法，使得顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度测定的稳定性和重复性好，从而能更好地保证药品的质量。

Claims (4)

1.一种顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：取马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml约含20μg的溶液，即得；

（2）含量测定项下供试品溶液的制备：取顺气化痰颗粒，研细，取粉末约1g，精密称定，置25ml容量瓶中，加1mol/l氢氧化钠溶液2.5ml湿润，再加入约18ml甲醇，超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

（3）含量均匀度测定项下供试品溶液的制备：取顺气化痰颗粒1袋，置乳钵中，加1mol/l氢氧化钠溶液10ml湿润后，研细，用甲醇约70ml，转移至100ml量瓶中，超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

（4）用高效液相色谱测定：

a.用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为70∶30的磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相，检测波长为264nm，理论板数按氯苯那敏峰计算不低于4000；

b.分别精密吸取对照品溶液、含量测定项下供试品溶液、含量均匀度测定项下供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得马来酸氯苯那敏含量；

c.按外标法以氯苯那敏峰面积计算出顺气化痰颗粒每袋以标示量3.0mg为100的相对含量，即得马来酸氯苯那敏含量均匀度。

2.根据权利要求1所述的顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，其特征在于：所述顺气化痰颗粒6g装每袋中马来酸氯苯那敏含量为每袋含有2.4mg～3.6mg，所述顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量均匀度为A＋1.8S＜20.0。

3.根据权利要求1所述的顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，其特征在于：步骤（4）中所述磷酸盐缓冲液的制备为磷酸二氢铵11.5g加水溶解后加磷酸1ml，再加水稀释至1000ml。

4. 根据权利要求1所述的顺气化痰颗粒中马来酸氯苯那敏含量及其均匀度测定方法，其特征在于：步骤（2）、步骤（3）中所述超声的功率为250W、频率为40kHz。